PROTOPLASTO:

El término "protoplasto" se refiere a la materia viva de la célula vegetal, que está encerrada por la
pared celular; es decir, la célula desnuda de la planta, que corresponde a la membrana celular y el
citoplasma con organelos.

Los protoplastos pueden aislarse a partir de células o tejidos vegetales mediante la utilizacion de
enzimas degradadoras de la pared celular.

Los protoplastos aislados son suspensiones de células carentes de pared celular y rodeadas solo
por la membrana plasmática. La ausencia de una pared celular rígida los hace muy apropiados
para la realizaci6n de estudios fisiológicos y bioquímicos y de diferentes manipulaciones genéticas.
Los protoplastos tienen la capacidad de regenerar la pared celular, de dividirse y formar colonias
celulares, cuando se cultivan adecuadamente. Igualmente, un gran número de especies de plantas
tienen la capacidad de regenerar plantas fértiles a partir de colonias celulares derivadas de
protoplastos. La alta frecuencia de regeneraci6n de las plantas constituye un requisito importante
cuando se trata de utilizar los protoplastos aislados para estudios genéticos.

Las nuevas técnicas de la biotecnología moderna pueden ser usadas como herramientas que
hagan más eficiente las metodologías tradicionales de mejoramiento genético en plantas.

CARACTERÍSTICAS DE LOS PROTOPLASTOS

Tienen la capacidad de producir un organismo altamente diferenciado a partir de una sola célula

• Forma esférica

• Tienen la capacidad de regenerar la pared celular.

 Pueden multiplicarse y desarrollar estructuras similares a embriones y desde

ellos, plantas adultas.

 Pueden incorporar nuevos genes mediante vectores adecuados (virus, plásmidos,

microinyecciones, fusiones de protoplastos…).

 Permite chequear células en vez de plantas enteras para seleccionar una característica
ventajosa (ej. Resistencia o tolerancia a un herbicida)

• Pueden incorporar macromoleculas, virus, partículas virales.

• Pueden fusionarse entre si, dando origen a híbridos intergenericos p.e en maíz y soya

• Herramienta ideal para inducción de mutaciones y en el cultivo de células vegetales

• De gran utilidad en estudios básicos en morfologia, fisiología, hibridación somática,
propagación, fitomejoramiento

• En los protoplastos puede inducirse la fusión para producir plantas híbridas, las cuales no
pueden ser logradas por métodos convencionales debido a la incompatibilidad

• Los protoplastos son capaces de ingerir material foráneo dentro del citoplasma, este material
incluye:
introducción de núcleo, cloroplastos, mitocondria, DNA, plasmidos, bacteria
y virus.

• Para estudios de síntesis de pared y deposición

• Los protoplastos pueden ser estudiados como sistemas celulares Independientes.

• Han sido aislados a partir de multiples especies y de casi todas las partes vegetales como raiz,
nodulos radiculares, tejido de frutos, pericarpio, petalos florales, tuberculos, endospermo, celulas
de mesofilo siendo la mejor fuente de estos las hojas en estado juvenil y con crecimiento activo o
las suspensiones celulares.
MANTENIMIENTO DE POTOPLASTOS:

Los protoplastos se obtienen del mesófilo de la hoja en plantas, y también a partir de

suspensiones celulares.
Son mantenidos en medio de cultivo celular que permitan nutrir adecuadamente la célula; esto
contempla el suministro de macronutrientes y micronutrientes, incluyendo moléculas orgánicas
que sean necesarias, como vitaminas.
Estas células, al carecer del refuerzo mecánico que otorga la pared celular, quedan más proclives a
destruirse por diferencias de presión osmótica con respecto al medio.
Es por esto que el medio de mantención debe estar ajustado de manera que no haya diferencias
osmóticas significativas con las células mismas.
Así mismo, se debe controlar las temperaturas en las cuales se mantienen los protoplastos, lo cual
dependerá del tipo que sean, en este caso vegetales, el cual adicionalmente requieren un control
de la luminosidad de cultivo.

CULTIVO DE POTOPLASTOS

El cultivo de protoplastos es un método en cultivo de tejidos donde se puede originar variación

somaclonal para el desarrollo de nuevos tipos de plantas. Se han desarrollado técnicas especiales
con la finalidad de liberar protoplastos desnudos desde los confines de sus paredes y permitir que
cada protoplasto individual pueda regenerar en cultivo de tejido hacia una planta.

Los protopastos son células cuya pared celular ha sido removida por métodos mecánicos y
enzimáticos (cloroplastos, mitocondrias, etc).

Estas células o protoplastos son viables y rápidamente sintetizan una nueva pared celular, crecen y
se pueden dividir llegando en algunas especies a regenerar una nueva planta. Cuando la célula
está en estado de protoplasto se puede manipular y ésta absorbe varios tipos de materiales
genéticos. Esta propiedad de los protoplastos se utiliza ampliamente en biotecnología.

Esta técnica ofrece la oportunidad de fusionar protoplastos derivados de especies que son
sexualmente incompatibles en la naturaleza. Siempre debe recordarse que todo el proceso de
fusión es enteramente físico y difícil de repetir, ya que se pueden obtener autofusiones,
heterofusiones, fusiones incompletas y, ésto dá origen a una gama muy diversa en cada
experimento.

En especies de Tabaco (Nicotiana tabaco L.), Papa (Solanum tuberosum), Tomate (Lycopersicum
spp), Colza y Arabidopsis (Arabidopsis talyana), se han obtenidos varios híbridos; sin embargo, el
uso está limitado debido a que no siempre es posible regenerar plantas a partir de sus
protoplastos.