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Identificación morfológica de los hongos

Bruno Lozano María Cornelia

León Genes Manuel José

Martínez González Miguel Antonio

Pérez Ramos Bayron Alexis

Grupo MIMAB

Presentado a:

Ing. M. Sc. Yenis Ibeth Pastrana Puche

11-06-2013

17-06-2013

Universidad de Córdoba

Facultad de Ingenierías

Programa de Ingeniería de Alimentos


Resultados

Resultados morfología de hongos

Figura #1A: Se observan en el microscopio macroconidias

Figura #1B: Se observan en el microscopio conidiosporas


Figura #1C: Se observan en el microscopio conidiosporas

Figura #1D: Se observan en el microscopio macroconidias

Figura #2: Se identifica con la morfología del Aspergillus terreus

Figura #3: Se identifica con la morfología del Paecilomyces

Figura #4: Se identifica con la morfología del Microsporum canis


Figura #5: La tinción de Gram realizada a la levadura arrojo que esta es Gram-
Análisis de resultados

Montaje en fresco con azul de lactofenol


Macroconidias: luego de mezclar el micelio (Paecilomyces) en azul de lactofenol y posteriormente
colocarlo en el microscopio se observan macronidias con un color azul claro, también a raíz de la
implementación de ese colorante en el procedimiento. Observamos entonces macroconidias con
dos o más células de pared fina y lisa, con forma cilíndrica, de clava o de cigarro.

No fue posible determinar en su totalidad estas características de las macroconidias en la imagen


tomada en el laboratorio, pero gracias a los conocimientos y las respectivas investigaciones se
llega a decir que si son macroconidias lo que se observó.

Conidiosporas: luego de mezclar el micelio (Aspergillus terreus) en el azul de lactofenol y


posteriormente colocarlo en el microscopio se logró evidenciar la presencia de conidiosporas con
un delicado color azul claro, este color es característico de este colorante el cual es considerado
altamente ácido y se usa para la tinción directa del micelio como se realizó en la práctica.

En la observación el microscopio se determinó la presencia de hifas líderes libres, sin ningún


receptáculo, en forma de cadena, las cuales son las características morfológicas de una
conidiospora.

Identificación macroscópica
 Aspergillus terreus: Aspergillus terreus es un hongo que en Colonias en
CYA y CY20S crece con un color marrón canela o marrón amarillento;
posee un crecimiento medio- alto, alcanza un diámetro de 40 mm en un
tiempo de una semana; se alcanza a observar en el medio un micelio
blanco, reverso amarillo, dorado o marrón; a veces se alcanza a apreciar un
pigmento difusible amarillento. colonia aterciopelada, lanosa o a veces
flocosa en la zona central, plana o con surcos radiales.
De forma experimental se pudo observar en la caja de Petri que las
colonias mohos tenían las características mencionadas anteriormente, por
lo que podemos inferir que Aspergillus terreus es la morfología del hongo

 Paecilomyces: El género Paecilomyces se pueden distinguir desde el género


estrechamente relacionado con Penicillium por tener largos fiálides divergentes delgados
y colonias que nunca son típicamente verde. Las colonias son de rápido crecimiento, en
polvo o gamuza, oro, verde, oro, amarillo-marrón, lila o marrón, pero nunca verde o
Las especies de Paecilomyces se han aislado a partir
azul-verde como en Penicillium.
de suelo, restos vegetales, y frutas. Usualmente es considerado como
contaminante, pero se ha aislado como agente de Hialohifomicosis. Este genero
contiene varias especies, siendo las más comunes P. lilacinus y P. variotti. Este tiene
una textura densamente algodonosa y tiene un color en el reverso oscuro. De forma
experimental se pudo observar en la caja de Petri que las colonias de
mohos tenía una textura algonodonosa y un color café al reverso, por lo que
podemos inferir que Paecilomyces es la morfología del hongo

De forma experimental se pudo observar en la caja de Petri que las colonias de


levadura tenía una textura de color cremosa brillante, por lo que podemos inferir
que Microsporum canis es la morfología del hongo

Frotis teñido

“Las levaduras forman sobre los medios de cultivo colonias pastosas, constituídas en su mayor
parte por células aisladas que suelen ser esféricas, ovoideas, elipsoideas o alargadas. Unas pocas
presentan hifas. Las dimensiones pueden oscilar de 1 a 9 µm de ancho y 2 a más de 20 µm de
longitud según la especie, nutrición, edad y otros factores. En general, las células de las levaduras
son conidios formados según diferentes tipos de conidiogénesis”.

Durante esta experiencia se hace el frotis partir del medio donde están las colonias de levadura; y
seguidamente se hizo la tinción de Gram. y al llevar la muestra al microoscopio se aprecian hifas.

Las levaduras suelen comportarse como Gram positivas debido a la estructura físico-quimica de la
pared que le confiere la Gram positividad. En este caso los macroconidios.
En la experiencia dio como resultado que las levaduras eran de tipos Gram negativas. Pero durante
la toma de evidencias, la muestra tomada de la caja, muestra estructuras gram negativas,
resultado que difiere a lo descrito de manera general sobre el comportamiento en este tipo de
coloración con respectoa las levaduras, es decir se presentaron errores que distorsionaron las
resultados.

Investigación

1. Explique el fundamento de las técnicas utilizadas para los montajes.


 Rta: Montaje en Fresco con Azul de Lactofenol

AZUL DE LACTOFENOL: Usado para la observación de hongos :

El fenol destruye la flora acompañante, el acido láctico conserva las estructuras fúngicas al
provocar un cambio de gradiente osmótico con relación al interior del fúngico generando
una película-Azul de algodón posee la capacidad de adherirse a la quitina presente en las
hifas y conidios y delos hongos microscópicos.

Luego de la tinción de micelio se torna de color azul claro.

 Frotis Teñido
Este tipo de montajes se hace con el fin de poner en manifiesto la morfología de los
organismos, y eliminar su movilidad para mayor visibilidad en el microoscopio,
utilizando como recursos colorantes.

Tinción de Gram. La tinción de Gram ayuda a determinar rápidamente las características


morfológicas. La diferente coloración que adquieren las bacterias Gram positivas se basa
en el menor contenido lípidos de la pared celular y en la reducida permeabilidad a los
solventes de estos microorganismos, en comparación con los Gram negativos. Las
bacterias Gram positivas se tiñen violeta por la retención del complejo cristal violeta
genciana/yodo, mientras que las Gram negativas no retienen el complejo y se tiñen rojas
al usar la contra tinción de safranina. Mayormente las levaduras se tiñen como Gram +
por las características de su pared celular.

Rta: Mohos

 Son hongos multicelulares, El elemento tubular que emerge se denomina "hifa";


éste sigue creciendo y ramificándose, formando un conjunto entrelazado al que se
denomina "micelio".
 Los mohos filamentosos (mohos), tienen colonias de 2-3 cm de diámetro, de color
olivo, verde claro, grises, blancas, rojas, amarillas, etc. con aspecto polvoso,
rugoso, terroso, aterciopelado, algodonoso, generalmente mates, opacas de
bordes irregulares.2

Levaduras

 Son hongos unicelulares, esféricas, ovoides, alimonada, piliforme, cilíndrica,


triangular o incluso alargada en forma de micelio verdadero o falso.que se
reproducen por gemación o fisión binaria.
 Las levaduras presentan colonias de color banco; crema, e incluso rosadas,
regulares, opacas y convexas o puntiagudas (umbilicadas).3

Se encuentran dentro de la subdivisiónAscomycotina (ascomicetos)

 Se caracterizan por la producción de esporas (perfectas) sexuales

Conclusión

Mediante el uso de colorantes tales como el azul de lactofenol es posible identificar diferentes
estructuras, para esta experiencia mohos y levaduras, las cuales se coloran para permitir su
observación en el microscopio. Mientras que al usar métodos de tinción diferencial como el de
gram, se tiene q solo las levaduras se tiñen, y son además gram positivas, pero en este
experimento por agentes externos, o errores en la ejecución del procedimiento, se observan gram
negativas

Además es posible notar diferencias macroscópicas en las colonias de mohos y levaduras,


permitiendo asi su clasificación e identificación, comparándolas con las estructuras ya estipuladas.

bibliografía

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Editorial medica panamericana. 2007. Pág. 685

- FORBES; SAHM; WEISSFELD. Diagnóstico microbiológico. 12ª edición.


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- TANGARIFE, Verónica. Escuela de microbiología. 2011. [En línea]


http://aprendeenlinea.udea.edu.co/lms/moodle/mod/resource/view.php?inpopup=true&
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WOODS. Diagnóstico microbiológico. 6ta edición. Editorial medica
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universidad estatal a distancia. 1998. Pág. 30
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