CENTRO MEDICO QUIRURGICO

BOLIVIANO – BELGA
CODIGO
COCHABAMBA – BOLIVIA CMB –
001
VERSIO
N
001
SERVICIO DE TRANSFUSIÓN
MANUAL DE CONTROL DE CALIDAD

MANUAL DE
CONTROL DE CALIDAD
SERVICIO DE TRANSFUSIÓN

CENTRO MEDICO QUIRURGICO

BOLIVIANO BELGA
Elaboro: Dra. Rosio Baena T. Puesto: Responsable
Firma; Servicio Transfusional
Lic. Ruth Guzmán C. Puesto: Bioquímica
Servicio Transfusional
Aprobo: Puesto:
Firma;

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INDICE

Índice………………………………………………………………………... 2
1.- Objetivo…………………………………………………………………… 3
2.- Campo de Aplicación……………………………………………………. 3
3.- Referencias……………………………………………………………….. 3
4.- Aspectos Generales……………………………………………………..... 4
5.- Materiales y Equipos…………………………………………………….. 4
6.- Procedimiento……………………………………………………………. 5
7.- Registro…………………………………………………………………… 6
8.- Control en el Procedimiento de la Tipificacion A B O …………………. 7
9.- Control de la calidad en la determinación del Factor Rh………………. 7
10.- Cotrol de la Calidad de las Pruebas de Antiglobulina Humana………. 8
11.- Registro………………………………………………………………….. 9
12.- Acciones Correctivas…………………………………………………… 9
13.- Criterios de Aceptabilidad……………………………………………… 10
14.- Definiciones…………………………………………………………….. 11

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1.- OBJETIVO

El control de calidad de este procedimiento está orientado a realizar la determinación

del título de un reactivo, que nos permitirá realizar la evaluación numérica de la fuerza
del anticuerpo contenido en el suero.

2.-CAMPO DE APLICACIÓN

El presente procedimiento se aplica en el proceso de Control de Calidad en la

determinación de la potencia de reactivos anti.

Todos los reactivos serán evaluados para determinar su título, antes de ser adquiridos y
al iniciar un nuevo lote.

3.- REFERENCIAS
 PUBLICACION DOCUMENTO
 CRN/PNS 2007 Código de ética para los servicios de
Publicación 3 sangre de Bolivia.
 ETBS Edición 2004 Estándares de trabajo para servicios de
sangre.
 MQ-GGC-00v001 Manual de calidad BSRRCBA
 MANUAL TÉCNICO Asociación Argentina de hematología e
Inmunología 12º edición
 Bioseguridad y Seguridad Manual de Bioseguridad.
Qca en el Laboratorio 2005
 HEMOTERÁPIA E Juan Marleta ed. Científico técnicas
INMUNOHEMATOLOGÍA americanas.
 EL CONTROL DE CALIDAD Análisis Inmunohematológicos en la
INMUNOHEMATOLOGÍA región de América Latina Dra, Elena
Franco.

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4. ASPECTOS GENERALES
4.1 OPERACIONES PRELIMINARES

a) Verificar que se cuente con el material necesario para la realización del control
b) Debe ejecutarse este procedimiento en las mismas condiciones en que se procesa
las muestras de rutina.
c) Tener las concentraciones de glóbulos rojos al 3% y al 10% de las diferentes
células.
d) Tener los reactivos a temperatura ambiente
e) Tome la precaución de mezclar cuidadosamente los controles.
f) Registre e identifique los controles en el registro.

4.2. PRINCIPIOS DE LAS NORMAS DE CONTROL DEL TÍTULO

(POTENCIA)

a) El control de calidad se realizara, antes de iniciar un nuevo lote o marca,

mediante el empleo de una muestra con antígeno conocido ó Anticuerpo
conocido.
b) El responsable de aseguramiento de la calidad, ejecutará esta tarea cada que
llegue a la institución un nuevo lote de reactivos anti, para facilitar la selección
del adecuado según los estándares.
c) La potencia se determinará en diluciones por la técnica de tubo y por
centrifugación.
d) El diluyente utilizado será sol. Salina y suspensión de eritrocitos al 2%.

5. MATERIALES Y EQUIPOS
 10 tubos de hemólisis
 Pipetas de 0.1 – 1ml
 Gradillas

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 Antisuero en estudio
 Solución fisiológica
 Suspensión globular al 2% correspondiente al estudio.
 Centrifuga serológica

6.- PROCEDIMIENTO

Este procedimiento se estima haciendo diluciones al doble del suero en estudio, con
solución salina. Se expresa con el número recíproco a la dilución más alta en la
cual se observa aglutinación, no se toma en cuenta la dilución que sufre el suero al
agregar la suspensión globular que debe ser al 2% en solución salina.

a) Identificar los tubos con los números del 1 al 10

b) Depositar 0.1 ml (100ul) de solución salina en los tubos 2 – 10
c) Depositar 0.1 ml (100ul) del suero en estudio al tubo 1 y 2
d) Con una pipeta de 0.1 ml (100ul) transferir 0.1 ml (100ul) de la mezcla del tubo
2 al 3 al 4, etc. De la misma forma mezclando tres veces hasta el tubo 9.
e) Desechar la mezcla del tubo 9 ya que el tubo 10 está destinado al control, este
contendrá solo 0.1 ml (100ul) de solución salina, al tubo 9 le corresponde la
dilución 1/256 cuyo título es le mínimo exigible.
f) Agregar a todos los tubos del 1 al 10, 0.1ml (100ul) de suspensión globular
correspondiente al 2%
g) Mezclar por agitación, centrifugar entre 15 a 30 seg. A 2500 rpm (De acuerdo a
la calibración de la centrífuga) y leer directamente la aglutinación, comenzando
por el tubo 10 (control y siguiendo con el 9,8, etc).
h) Para la lectura los tubos se ubicarán en un ángulo de 70º- 80º con respecto a la
vertical y rotar suavemente entre dos dedos sin agitación, hasta re-suspender el
botón (método de tip and roll)

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7. REGISTRO

Los resultados deben ser debidamente registrados en la planilla de reporte de

control de calidad.

Tubo 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Dilución 1/1 ½ ¼ 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 control

Titulo 1 2 4 8 16 32 64 128 256

7.1 CONDICIONES DE AVIDEZ Y TÍTULOS DE LOS SUEROS ANTI

Suero Células Avidez en Titulo

segundos

Anti A A1 15 256
A 30 128
A1 B 30 128
A2 B 45 64

Anti Ba B 15 256

Los reactivos seleccionados deberán cumplir los requisitos de avidez señalados en la

tabla superior.

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8. CONTROL EN EL PROCEDIMIENTO DE LA TIPIFICACION A B O

a) La interpretación de la prueba directa deber ser independiente de la prueba

inversa.
b) Nunca aplique calor durante las pruebas , ni utilice el visualizador caliente para
la lectura de los resultados.
c) En la prueba inversa, el suero en estudio puede ser o no inactivo, solo tenga en
cuenta esa condición.
d) Si el suero no esta inactivado y es fresco (24 horas), la presencia de hemolisinas
puede confundir una reacción en este caso puede inactivarse el suero (30
minutos a 56ªC) o diluirlo en solución salina.
e) Asegurarse de las condiciones de los sueros antes de utilizar, en los intervalos
libres mantenga los sueros en la heladera.
f) Controle la limpieza de los tubos y de las placas de vidrio que utiliza.
g) Los glóbulos rojos testigos A se obtendrán de una mezcla de 5 sangres A o de
una sola A1. Los grupos B serán obtenidos de una sangre B.
h) La suspensión globular (2-4%) será preparada diariamente y con sangre fresca.

9. CONTROL DE LA CALIDAD EN LA DETERMINACION DEL FACTOR Rh

Es muy importante realizar un control apropiado de la prueba de determinación del

factor Rh en el laboratorio, por lo tanto el responsable de realizar estas pruebas deberá
considerar los siguientes controles para validar sus resultados.

a) Deberá procesar un control autologo (ver auto aglutinacion) en forma simultánea

en cada prueba, si se presenta aglutinación deberá rechazar los resultados de la
prueba.
b) Para realizar un control al reactivo anti Rh se debe realizar simultáneamente
control con suero albuminnoideo “RHESUS control” siendo este un control
negativo.
c) La reactividad de los reactivos de factor Rh debe ser confirmada cada día
mediante el empleo de células con antígeno D positivo y células con antígeno D
negativo.

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10. CONTROL DE LA CALIDAD DE LAS PRUEBAS DE ANTIGLOBULINA

HUMANA
Debido a su gran importancia, es necesario conocer los distintos factores que puedan
alterar los resultados de las pruebas de A G H ya que estos pueden determinar
conclusiones falsas, capaces de originar situaciones muy graves por lo tanto para
asegurar la validez de los resultados se deberán considerar todos estos factores.

10.1 Temperatura de incubación.-

La temperatura óptima de reacción de la gran mayoría de los anticuerpos Ig G es

de 37ºC, por lo tanto se deberá realizar el control de calidad de los baños e
incubadoras secos, para asegurar que los 37ºc lleguen a la parte del tubo donde
tiene lugar la reacción.

10.2 Tiempo de incubación.-

En general un tiempo mínimo de 15 minutos y un máximo de 30 minutos

son suficientes par la difusión de los anticuerpos más importantes y
rutinariamente buscados.

10.3 Medio de suspensión de eritrocito.-

Puede ser:
Solución salina, albuminosa, (albúmina bovina al 22 o 33%) o suero
humano.

El agregado de albumina mejora la sensibilidad de la prueba y permite fijar

el tiempo de incubación en 10 minutos.

Medio de baja fuerza iónico LISS después de los lavados en solución salina
acorta el tiempo de incubación prolongada (más de 90 minutos)

10.4 Relación glóbulo-suero.-

La relación debe ser 1 gota de suspensión globular al 3% en 2 gotas de

suero. La mayor cantidad de anticuerpo ofrecido al glóbulo aumenta la
sensibilidad de la prueba.

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10.5 Lavado globular

Es el paso más importante de la prueba A G H. considerando que una gota
de suero diluido 1/4000, es capaz de neutralizar una gota de suero de
coombs.

La cantidad de lavados a realizar deben estar en relación con el volumen de

solución salina empleado en cada uno de ellos (con los tubos empleados de
forma rutinaria) de 10 ml son suficientes 3 lavadas. Si los tubos son de
menor tamaño se realizaran 4 lavadas.

Otras variables que se deben considerar son:

Eliminación de sobrenadante deber ser completa antes de agregar el suero

AGH
Centrifugación rápida y corta
Re suspensión completa de los glóbulos después de cada lavado

10.6 Centrifugación.- Se fijara la velocidad y tiempo de acuerdo a la

calibración del equipo.

11. REGISTRO.- todos los datos de las observaciones realizadas y las medidas
correctivas serán documentadas con fecha y hora y firma del que realiza la
inspección.

12. ACCIONES CORRECTIVAS.-

Cuando el resultado de los controles no son aceptables:

a) Repetir la prueba con los mismos reactivos. (Primero eliminar potencial

error humano en la realización de la prueba.) Registrar e identificar
resultados de la prueba repetida, si es aceptable la prueba esta completada.
b) Si la prueba repetida no es aceptable, Repita la prueba empleando un nuevo
vial de reactivos del mismo lote. Identificar y registrar resultado. Si el
resultado no es aceptable, repetir la prueba con un vial diferente de un nuevo
lote.
c) Si la causa de resultado inaceptable no es identificada, contactarse con la
empresa proveedora del reactivo.
d) Todo detalle de la acción correctiva, debe ser documentada en informe de
acción correctiva.

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13. Criterio de aceptabilidad

Si el valor obtenido excede de +- 2% del valor determinado del control, notifique a la

unidad de control de calidad y tome las precauciones necesarias con los resultados
obtenidos de donantes. Registre la hora y fecha de control en la planilla de control de la
calidad.

14. DEFINICIONES

ABREVIACION  DESCRIPCION
ABO Antígenos de los grupos sanguíneos
presente en los eritrocitos.
Rh Factor sanguíneo, presencia del antígeno
D en algunos eritrocitos y ausente en
otros.
Du Expresión débil del antígeno Rhº(D),
también conocido como D débil.
Rouleaux Falsa reacción de aglutinación, donde los
eritrocitos se agrupan en “pilas de
moneda”
Prozona Define la ausencia o la presencia de
aglutinaciones débiles en exceso de
anticuerpos.
Postzona Define la ausencia o la presencia de
aglutinaciones débiles en escases de
anticuerpos.
Salina Solución isotónica que contiene 8.5 a 9
g/L de cloruro de sodio y tiene un pH 7.0
+/-0.2
Rehesus Suero control albuminoideo Rh-hr suero
preparado al igual a la de los reactivos
anti-Rh, pero sin la actividad de
anticuerpos usado como control negativo
Anti Productos utilizados en la determinación
de los antígenos de los grupos
sanguíneos eritrocitarios.

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