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Extracción y evaluación de taninos

condensados a partir de la corteza de


once especies maderables de Costa Rica
Extraction and evaluation of condensed tannins from
bark of eleven species of trees from Costa Rica

Jorge Aguilar López1


Jean Carlo Jaén Jiménez2
Ana Sofía Vargas Abarca3
Pablo Jiménez Bonilla4
Ilena Vega Guzmán5
Jacqueline Herrera Núñez6
Henry Borbón Alpízar7
Roy Mario Soto Fallas8

Fecha de recepción: 10 de febrero del 2012


Fecha de aprobación: 19 de abril del 2012

Aguilar, J; Jaén, J; Vargas, A; Jiménez, P; Vega, I; Herrera,


J, Borbón, H; Soto, R. Extracción y evaluación de
taninos condensados a partir de la corteza de
11 especies maderables de Costa Rica
Tecnología en Marcha. Vol. 25, Nº 4. Pág 15-22.

1 Químico. Universidad Nacional. Teléfono: 8323-6956


Correo electrónico: jorgealbertoaguilarlopez_89@hotmail.com
2 Químico. Universidad Nacional, Laboratorio de Manejo
del Recurso Hídrico (LAMRHI). Teléfono: 2277-3824
Correo electrónico: jcarlojj@hotmail.com
3 Química. Universidad Nacional, Laboratorio de
Productos Naturales y Ensayos Biológicos (LAPRONEB).
Teléfono: 8778-7388 Correo electrónico: sofiavarab@hotmail.com
4 Químico. Universidad Nacional, Laboratorio de
Productos Naturales y Ensayos Biológicos (LAPRONEB).
Teléfono: 8916-2122 Correo electrónico: pabloijb@hotmail.com
5 Química. Universidad Nacional. Teléfono: 8729-5556
Correo electrónico: ilenave@gmail.com
6 Química. Universidad Autónoma de Madrid.
Correo electrónico: herrerauna@gmail.com
7 Químico. Universidad Nacional. Teléfono: 8847-3529
Correo electrónico: hborbon.2000@gmail.com
8 Químico. Universidad Nacional. Teléfono: 8877-6843
Correo electrónico: roysoto@costarricense.cr
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16 Vol. 25, N° 4, Setiembre-Diciembre 2012

Palabras clave Key words


Taninos condensados, número de Stiasny, corteza, Condensed tannins, Stiasny number, bark, costarri-
árboles de Costa Rica. can trees.

Resumen Abstract
La naturaleza química de los taninos condensados los The chemical nature of condensed tannins offers
convierte en una fuente natural de compuestos orgáni- a natural source of such organic compounds, with
cos, con una aplicación potencialmente amplia para usos potential application to medicinal and industrial uses.
medicinales e industriales. The extraction and analysis of this type of metabo-
La extracción y análisis de este tipo de metabolitos a lites from plants of many regions of the world have
partir de la flora de diversas regiones del planeta ha sido been the objective of researching groups.
el objetivo del estudio de diversos grupos de trabajo, y
en este caso se ha querido hacer un aporte al estado del In this case, it is desired to contribute to present
conocimiento actual, realizando un estudio sobre la natu- knowledge, establishing the nature and amounts
raleza y la cantidad del tanino condensado que se puede of condensed tannins extracted from bark of
extraer de la corteza de 11 especies arbóreas presentes 11 tree species grown in Costa Rica: guanacas-
en Costa Rica: guanacaste (Enterolobium cyclocarpum), te (Enterolobium cyclocarpum), alcornoque (Licania
alcornoque (Licania arborea), jobo (Spondias mom- arborea), jobo (Spondias mombin), pochote (Pachira
bin), pochote (Pachira quinata), níspero (Manilkara quinata), níspero (Manilkara chicle), almendro (Andira
chicle), almendro (Andira inermis), roble (Tabebuia inermis), roble (Tabebuia rosea), cedro (Cedrela odo-
rosea), cedro (Cedrela odorata), cenízaro (Samanea rata), cenízaro (Samanea saman), pino (Pinus cari-
saman), pino (Pinus caribaea) y ciprés (Cupressus baea) and ciprés (Cupressus lusitanica).
lusitanica). Bark samples of all mentioned species were pre-
Las muestras de corteza fueron preparadas, secadas y pared, dried and extracted with ethanol. Ethanolic
extraídas con etanol. Se analizaron los extractos etanóli- extracts were analyzed to determine the condensed
cos para determinar el contenido de taninos condensa- tannins content by Stiasny number and characteri-
dos a través del número de Stiasny, y se caracterizaron zed by infrared spectroscopy (FT-IR).
mediante espectroscopía infrarroja (FT-IR).
The species with higher proportion of extracted
Las especies con mayor proporción de material extraído
material were guanacaste (9.5841% w/w), pochote
fueron guanacaste (9.5841% m/m), pochote (15.0066%
m/m), pino (19.3400% m/m) y ciprés (10.5300% m/m), (15.0066% w/w), pino (19.3400% w/w) and ciprés
mientras que los extractos con una mayor proporción (10.5300% w/w), meanwhile extracts with higher
de taninos condensados correspondieron a alcornoque proportions of condensed tannins were the obtai-
(61.9% m/m), jobo (66.1% m/m), pochote (72.8% m/m), ned from alcornoque (61.9%), jobo (66.1%), pocho-
níspero (50.5% m/m), cedro (72.7% m/m) y pino (70.7% te (72.8%), níspero (50.5%), cedro (72.7%) and pino
m/m). (70.7%).
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Introducción rados durante las operaciones de faenado y aserrío


de especies que actualmente no se aprovechan en
Los compuestos polifenólicos están presentes en los
su totalidad.
tejidos vegetales de muchas plantas (flores, frutos,
semillas, hojas, raíces, madera y corteza), indistin- La determinación de aquellas especies que propor-
tamente de su ubicación geográfica (Rosales et al., cionen un mejor extracto de taninos, en términos
2002; Cano et al., 2002; Kim, 2009). La función de de cantidad y calidad, será fundamental para el
estos compuestos orgánicos dentro del metabolis- abordaje posterior de estudios relacionados con
mo de las plantas no está claramente establecida. su potencial aplicación como precursores para la
Sin embargo, su aprovechamiento abarca en la formulación de adhesivos derivados de la madera
actualidad diversos usos, como la curtiembre de (Barboza et al., 2010; Pizzi, 1993).
cuero, medicinales (antioxidantes), textiles (coloran-
tes), formulación de adhesivos y síntesis de nuevos
materiales, entre otros.
Materiales y métodos

Dada su diversidad química y estructural, estos Recolección de las muestras


compuestos suelen clasificarse como taninos hidro- Los especímenes de las especies estudiadas se selec-
lizables y taninos condensados. Los taninos hidro- cionaron aplicando un muestreo aleatorio.
lizables son moléculas polifenólicas de tamaño
discreto, de naturaleza no polimérica, capaces de Las muestras de corteza de las especies jobo
ser hidrolizados por ácidos o enzimas a un azú- (Spondias mombin), pochote (Pachira quinata), níspe-
car y a un ácido carboxílico fenólico (Garro et al., ro (Manilkara chicle), roble (Tabebuia rosea), cedro
1997); mientras que los taninos condensados son (Cedrela odorata) y cenízaro (Samanea saman) se
moléculas oligoméricas o poliméricas de unidades recolectaron en el sector de Los Ángeles de Tilarán
flavan-3-ol, unidas a través de enlaces C-4 a C-8, o (coordenadas 10º30´08.58´´ N 85º01´04.36´´ O),
menos frecuentemente, C-4 a C-6 de dos unidades mientras que las muestras de las especies guanacas-
te (Enterolobium cyclocarpum), alcornoque (Licania
consecutivas (García et al., 1997), de diverso tamaño
arborea) y almendro (Andira inermis) se obtuvieron
y constitución según su origen.
en el sector de Cañas (coordenadas 10º26´24.63´´
Una de las principales características de los taninos N 85º03´35.68´´ O) durante febrero del año 2011;
condensados es su capacidad de dar reacciones de ambas localidades se ubican en la provincia de
condensación con formaldehído en medio ácido o Guanacaste.
básico (Kusak et al., 1998), dando como resultado un
Por otra parte, las muestras de corteza de pino
producto sólido polimérico con propiedades adhe-
(Pinus caribaea) y ciprés (Cupressus lusitanica) se
sivas (Taiwo, 1997; Wang et al., 1995), lo que consti-
solicitaron durante el mismo periodo al aserradero
tuye un método cuantitativo apropiado (Método de
de la Escuela de Ingeniería Forestal del Instituto
Stiasny) para la determinación gravimétrica de este Tecnológico de Costa Rica (ITCR), situado en la
tipo de metabolitos en cualquier tipo de extracto provincia de Cartago. Las muestras de corteza obte-
líquido o liofilizado (Suomi, 1985; Palma, 1990). nidas de todas las especies estudiadas se extrajeron
Actualmente, muchos investigadores centran sus de la parte inferior de los respectivos troncos.
estudios en la detección, análisis y cuantificación
de metabolitos polifenólicos en diferentes tipos de Preparación y determinación del porcentaje
especies vegetales, debido al auge que está experi- de humedad de las muestras
mentando la incorporación de sustancias de origen Las muestras de corteza recolectadas se limpiaron
natural en la formulación de productos con aplica- para eliminar restos de madera y se secaron duran-
ciones clínicas e industriales (Soto et al., 2001; Soto, te siete días en un calentador de convección a 40
2001). Es por ello que se ha suscitado un creciente ºC. Las muestras secas se fragmentaron empleando
interés en el estudio sistemático de compuestos un triturador de cuchillas marca Chicago, modelo
polifenólicos presentes en la flora nacional, principal- 66910, y se molieron en un molino de cuchillas
mente en la corteza de ciertas especies maderables, marca Retsch, modelo SM100, utilizando una malla
con el fin de dar una utilidad a los residuos gene- con un tamaño de abertura de 1 mm. A todas las
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muestras se les determinó por triplicado el por- mar mediante esta técnica la naturaleza química del
centaje de humedad, utilizando una balanza para producto aislado, a partir de la identificación de los
humedad marca Adam, modelo PMB202. grupos funcionales presentes en las estructuras de
los metabolitos obtenidos.
Extracción de taninos
Realizando extracciones por triplicado, a 25 g de
cada una de las muestras molidas se les adicionaron
Resultados y discusión
200 mL de etanol al 95%, dicha mezcla se puso a Los datos de la determinación de los porcentajes
reflujo a 70 ºC durante dos horas, con agitación de humedad para cada muestra se presentan en el
continua. Al finalizar este periodo, las muestras se cuadro 1.
filtraron en caliente, al vacío, utilizando un papel
Los resultados obtenidos muestran que los con-
Whatman #54 para filtración rápida (tamaño de
tenidos de humedad de las muestras de corteza
poro 22 mm).
secas se encuentran alrededor de un valor del 10%.
Los extractos filtrados se concentraron en un eva- Dicho valor coincide con el contenido de humedad
porador rotatorio y se liofilizaron en un equipo presente en muestras de esta naturaleza en condi-
Labconco Freezone 2.5, dentro de un matraz pre- ciones ambientales normales.
viamente tarado, para determinar por diferencia de
Además, se observa que aquellas cortezas que
masa la cantidad de material extraído de la muestra.
ofrecen un porcentaje de material extraíble cercano
o superior al 10% corresponden a las especies de
Determinación del número de Stiasny
guanacaste, pochote, pino y ciprés, constituyéndose
Para la determinación del número de Stiasny, se estas en las especies más promisorias del grupo
pesó exactamente y por triplicado 0.1 g de la mues- estudiado para futuras evaluaciones de extracción
tra liofilizada en un erlenmeyer de 125 mL y se y utilización de los taninos que de ellas se puedan
disolvió en 10 mL de metanol. A la mezcla resultante extraer.
se le adicionaron 1 mL de ácido clorhídrico concen-
trado y 2 mL de formaldehído al 37%, y se calentó Por otra parte, los resultados obtenidos en la deter-
a ebullición durante 30 minutos. minación del contenido de taninos condensados
reactivos con formaldehído en medio ácido (núme-
Transcurrido este tiempo, la mezcla fue filtrada al ro de Stiasny) sobre todos los extractos liofilizados
vacío en un embudo Büchner, empleando un papel se muestran en el cuadro 2.
filtro Whatman #54, previamente tarado hasta
masa constante, y una bomba de vacío marca KNF Según Rosales et al. (2002), un material con un
Laboport UN820.3FTP. El residuo sólido obtenido número de Stiasny superior a 65 es una buena
se secó a 105 ºC hasta alcanzar masa constante. fuente de taninos condensados para su posterior
aplicación como adhesivos en productos celulósicos
La masa de este sólido corresponde a la cantidad de o de madera. Sin embargo, cuando se trabaja con
tanino condensable presente en el extracto seco, y matrices complejas como la corteza de los árboles,
se expresa como un porcentaje respecto a la masa es necesario tomar en consideración no solo la
inicial del extracto liofilizado, de acuerdo con lo cantidad de taninos condensados presentes en los
establecido en la expresión del número de Stiasny. extractos liofilizados sino también la cantidad de
Número Stiasny = masa seca residuo sólido *100 material extraído de la corteza, ya que esta es la
masa seca inicial muestra fuente directa de estos metabolitos.
La combinación de ambos datos proporciona el
Análisis por espectroscopía infrarroja (FT-IR) valor real de la concentración de taninos presen-
Los extractos con un porcentaje de tanino superior te en las muestras y permite seleccionar aquellas
al 70% se caracterizaron por espectroscopía infra- matrices que presentan una mayor cantidad de
rroja, utilizando un espectrofotómetro infrarrojo taninos condensados y por tanto mejores cualidades
con transformada de Fourier (FT-IR), marca Fisher para ser utilizados como materiales de partida para
Scientific, modelo Nicolet I510, con el fin de confir- la síntesis de adhesivos.
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Cuadro 1. Porcentajes promedio de humedad y de material extraído de las muestras de corteza de las especies
seleccionadas

Humedad promedio* Material extraído de la corteza*


Especie
(±0.01% m/m) (±0.0004 % m/m)
Guanacaste
11.68 9.5841
(Enterolobium cyclocarpum)
Alcornoque
9.77 4.6846
(Licania arborea)
Jobo
6.62 3.1843
(Spondias mombin)
Pochote
12.63 15.0066
(Pachira quinata)
Níspero
12.85 3.9629
(Manilkara chicle)
Almendro
11.18 5.5276
(Andira inermis)
Roble
10.03 4.5414
(Tabebuia rosea)
Cedro
12.85 5.0963
(Cedrela odorata)
Cenízaro
12.32 6.6891
(Samanea saman)
Pino
15.60 19.3400
(Pinus caribaea)
Ciprés
15.47 10.5300
(Cupressus lusitanica)

* Nivel de confianza del 95%

Cuadro 2. Determinación del porcentaje de taninos condensados reactivos con formaldehído en medio ácido en los
extractos liofilizados y la corteza de las especies estudiadas

Porcentaje de taninos condensados reactivos


Especie En el extracto liofilizado En la corteza
(±0.1% m/m) (±0.01% m/m)
Guanacaste
7.2 0.69
(Enterolobium cyclocarpum)
Alcornoque
61.9 2.90
(Licania arborea)
Jobo
66.1 2.10
(Spondias mombin)
Pochote
72.8 10.92
(Pachira quinata)
Níspero
50.5 2.00
(Manilkara chicle)
Almendro
6.2 0.34
(Andira inermis)
Roble
24.3 1.10
(Tabebuia rosea)
Cedro
72.7 3.64
(Cedrela odorata)
Cenízaro
6.1 0.41
(Samanea saman)
Pino
70.7 13.67
(Pinus caribaea)
Ciprés
0.3 0.03
(Cupressus lusitanica)
* Nivel de confianza del 95%
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Así, los resultados recopilados en el cuadro 2 mues- Conclusiones


tran que las especies de pochote (Pachira quinata)
Se evaluó el contenido de taninos condensa-
y de pino (Pinus caribaea) ofrecen las concentracio- dos extraíbles de la corteza seca de 11 especies
nes más altas de taninos condensados en corteza, de árboles maderables de las regiones Norte y
correspondientes a 10.92% m/m y 13.67% m/m res- Central de Costa Rica, específicamente guanacas-
pectivamente. Dichos datos superan el valor límite te (Enterolobium cyclocarpum), alcornoque (Licania
de 8% establecido por algunos investigadores como arborea), jobo (Spondias mombin), pochote (Pachira
parámetro para definir si la utilización de una made- quinata), níspero (Manilkara chicle), almendro (Andira
ra o corteza es rentable para el aprovechamiento y inermis), roble (Tabebuia rosea), cedro (Cedrela
extracción de los taninos condensados (Rosales et odorata), cenízaro (Samanea saman), pino (Pinus
al., 2002). caribaea) y ciprés (Cupressus lusitanica).
Los espectros IR de los extractos secos obtenidos a Las cortezas que presentaron mayor cantidad de
partir de la corteza de pochote y de pino se mues- material extraíble fueron las de las especies de
tran en las figuras 1 y 2. guanacaste, pochote, pino y ciprés. Sin embargo, en
términos del contenido de taninos condensados en
El análisis de los espectros infrarrojo (FT-IR) de los cada uno de los extractos obtenidos, las especies
extractos liofilizados derivados de la corteza de las con mayores resultados fueron alcornoque, jobo,
especies Pachira quinata y Pinus caribaea muestran pochote, níspero, cedro y pino. Finalmente, las espe-
bandas intensas entre 3406 y 3224 cm-1, fuertes cies cuyas cortezas brindaron la mayor cantidad de
y anchas, características de los grupos hidroxilo extracto con los mayores contenidos de taninos
(–OH) presentes comúnmente en compuestos condensados fueron el pochote y el pino.
fenólicos. Otras señales a 1614 cm-1 y 1615 cm-1 Este resultado es muy importante, porque permitirá
son producto del alargamiento de los dobles enla- concentrar el interés de futuras investigaciones en
ces carbono-carbono de las estructuras aromáticas el reconocimiento y evaluación de los taninos con-
presentes en este tipo de metabolitos (Pavia et al., densados presentes en estas especies, con el fin de
2009). encontrar posibles aplicaciones industriales, entre las

Figura 1. Espectro de absorción infrarroja de extracto etanólico seco obtenido a partir de la corteza de pochote
(Pachira quinata)
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Figura 2. Espectro de absorción infrarroja de extracto etanólico seco obtenido a partir de la corteza de pino (Pinus
caribaea)

cuales se vislumbra su aplicación en la formulación Cano, E.; Cano, T.; Quezada, O.; Quiñonez, B. &
de adhesivos para madera, en sustitución de algunas Saravia, J. (2002). Extracción y caracterización de tani-
sustancias químicas contaminantes que se utilizan en nos en corteza de tres especies forestales cultivadas
la actualidad para estos fines. en Guatemala, Pino ocote (Pinus ooccarpa Schiede),
Encino negro (Quercus brachystachys Benth) y Aliso
La naturaleza polifenólica de estos metabolitos común (Alnus jorulensis HBK). Una alternativa de
queda confirmada a partir de los resultados obser- desarrollo agroindustrial para el uso de taninos natura-
vados por espectroscopía infrarroja (FT-IR). les. Guatemala: Carolina Academia Coactemalensis
inter Caeteras Orbis Conspicua, pp. 5-6.

Agradecimientos García, M.C.; Cadahía, E. & Conde, E. (1997). Fifth


Brazilian Symposium on the Chemistry of Lignins
Al Ing. Jorge Aguilar y a Isaías Jarquín, por su asisten- and Other Wood Components, Curitiba, Brasil.
cia en el muestreo realizado en la Región Norte;
Garro, J.M.; Riedl, B. & Conner, A.H. (1997). Analytical
al Dr. Róger Moya Roque y al Ing. Diego Camacho
studies on Tara tannins. Holzforschung 51: 235-243.
del Centro de Investigación en Integración Bosque
Industria (CIIBI) de la Escuela de Ingeniería Forestal Kim, S. (2009). Environment-friendly adhesives for sur-
del Instituto Tecnológico de Costa Rica (TEC), por face bonding of wood-based flooring using natural tan-
proporcionar las muestras de corteza de pino y nin to reduce formaldehyde and TVOC emission. Seoul:
ciprés utilizadas en este estudio. Department of Architecture, College of Engineering,
Soongsil University (eds.), 745.
Kusak, S.; Hiltz, J. & Waitkus, P. (1998). Impact perfor-
Bibliografía mance of phenolic composities following thermal
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22 Vol. 25, N° 4, Setiembre-Diciembre 2012

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