Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
Abril 2003
INTA, Argentina
RESUMEN
Se ha desarrollado un protocolo para la multiplicación de Santa Rita
(Bougainvillea sp) que combina técnicas in vitro y ex vitro. Los explantos, seg-
mentos nodales, fueron esterilizados por inmersión en solución de lavandina
comercial (5 %) y Tween 80 (0,1 %) por 20 minutos. Una vez enjuagados se mantu-
vieron en solución de Plant Preservative Mixture (2 %), en agitación suave, durante
7 horas. Con el objeto de evaluar la aptitud para la multiplicación se probaron dos
tipos de explantos: inducidos (por eliminación del ápice 15 días antes del inicio del
ensayo) y no inducidos. Los mejores resultados se obtuvieron con el medio
Murashige-Skoog, suplementado con 5,0 mg/l de 6-bencilaminopurina (BAP), 0,01
mg/l de ácido giberélico (AGIII), 20 g/l de sacarosa y mezcla de antibióticos y
1
Centro de Estudios Técnicos en Flori, Fruti y Horticultura, CETEFFHO, INTA
2
Instituto de Recursos Biológicos, CRN-INTA.
Título abreviado: Micropropagación de Santa Rita
*
Autor para correspondencia
Centro de Estudios Técnicos en Flori, Fruti y Horticultura, CETEFFHO, INTA, Nicolás Repetto y De
los Reseros s/n, B1712WAA Castelar, Buenos Aires, Argentina. Fax y teléfono :+54 11 4621-7495
Email: aescandon@cnia.inta.gov.ar
ABSTRACT
COMBINATION OF IN VITRO AND EX VITRO TECHNIQUES TO
MICROPROPAGATE BOUGAINVILLEA. A SHRUBBY PLANT WITH
ORNAMENTAL RELEVANCE
MATERIALES Y MÉTODOS
Material vegetal
Se emplearon plantas de Bougainvillea sp. Estas se mantienen
en el suelo, en los invernáculos del CETEFFHO. Los ensayos se realiza-
Condiciones de cultivo
Los explantos se cultivaron en el medio Murashige-Skoog (MS) (1962),
el que fue suplementado con 20 g/l de sacarosa, 7 g/l de agar y diferentes
combinaciones de 6-bencilaminopurina (BAP) y ácido giberélico (AGIII)
(Tabla 2). El pH se ajustó a 5,7 con KOH. Las condiciones de cultivo fueron
de 23±2 ºC con un fotoperíodo de 16 h y una intensidad lumínica de 3.000
lux. El número de explantos por tratamiento fue 30 y los subcultivos se
efectuaron una vez por mes.
Los callos formados con los tratamientos M0 a M5 se subcultivaron
en un medio libre de hormonas.
La concentración inicial de BAP usada en el tratamiento M6 (5,0
mg/l), se disminuyó gradualmente en subcultivos sucesivos (en mg/l: 5,0
2,0, 1,0, 0,5 y 0,0). La de AGIII, se mantuvo hasta que, luego de 4
subcultivos, los brotes se transfirieron a un medio libre de hormonas.
En la etapa de enraizamiento in vitro se probaron dos medios, el
MS 1X y el MS 0,25X, ambos se suplementaron con 0,0 ó 5,0 mg/l de
ácido α-naftalen acético (ANA) y 4 gr/l de agar (tratamientos R1 a R4), el
número de explantos de cada tratamiento fue 20. Para el tratamiento R5,
ex vitro, se utilizaron plugs, empleando Growing Mix 2® (Conrad Fafard,
Inc, USA) como soporte artificial. En este tratamiento los brotes se man-
RESULTADOS
La desinfección y el establecimiento in vitro de los segmentos nodales
de Santa Rita mostraron un inesperado grado de dificultad. Al efecto de
los contaminantes superficiales se sumó la presencia de contaminación
endógena y una marcada sensibilidad de los tejidos vegetales a los agen-
tes desinfectantes.
La Tabla 1 muestra los resultados obtenidos con los diferentes trata-
mientos de desinfección probados. El tratamiento 8 resultó ser el más
M0 0 0
M1 0 0,01
M2 0,1 0
M3 0,1 0,01
M4 1,0 0
M5 1,0 0,01
M6 5,0 0,01
AGRADECIMIENTOS
Este trabajo fue llevado a cabo en el marco del proyecto: «Desarro-
llo de la Floricultura en la Argentina», financiado por el acuerdo INTA-
JICA. Los autores agradecen a la Sra. Sara Ostertag y al Sr. Martín Saragoiti
por su colaboración técnica.
REFERENCIAS
JAVED, A.; HASSAN, S. & NAZIR, S. 1996. In vitro propagation of B. spectabilis
through shoot apex culture. Pakistan J.Bot.28 (2): 207-211.
MURASHIGE, T. 1974. Plant propagation through tissue culture.. Ann. Rev. Plant.
Physiol.. 25:135-166.
MURASHIGE, T. Y SKOOG, F. 1962. A revised medium for rapid growth and
bioassays with tobacco tissue cultures. Physiol. Pl. 15: 473-497.
NOTSUKA, K.; TSURU. T. Y SHIRAISHI, M. 2000. Induced polyploid grapes via in
vitro chromosome doubling J. Japan Soc. Hort. Sci.: 69 (5): 543-551.