CRISPR/CAS9

Ing. Isaac Armendáriz

2017
 Edición de genomas
• Varios intentos durante los años de manipular y modificar las
funciones de los genes.
• Varias técnicas han sido estandarizadas pero hasta ahora
ninguna demuestra alta efectividad, estabilidad o facilidad
de protocolo.
• Hace pocos años se diseñó una nueva estrategia utilizando la
nucleasa Cas9, asociada a una región del ADN bacteriano
conocida como CRISPR, está fue aislada de Streptococcus
pyogenes y su aplicación en la edición genómica es de alto
interés.
 BIOLOGÍA DE Cas9
• Esta endonucleasa es encontrada en una sección del genoma
bacteriano conocida como CRISPR (Repeticiones Palindrómicas
Cortas Agrupadas y Regularmente Interespaciadas).
• Las bacterias usan esta región del genoma como mecanismo de
defensa ante bacteriófagos.
• El ADN de virus invasores es cortado en fragmentos pequeños e
incorporado en el locus CRISPR. Cuando el loci se transcribe se
generan pequeños fragmentos de ARNcr (ARN-CRISPR) que son
usadas para guiar a Cas9 hacia el ADN invasor en el futuro.
 BIOLOGÍA DE Cas9
• Cas9 combinada con el locus CRISPR han demostrado participar en el
proceso de síntesis de los ARNcr.
• Solo una Cas9 es necesaria para el silenciamiento de un gen y la
destrucción del ADN foráneo.
• Cas9 participa para su transporte con dos tipos de ARNcr (ARNtracr y
ARNtr).
 Qué es la tecnología CRISPR-Cas9?
• Es una tecnología que permite a los científicos editar partes
de un genoma, removiendo o alterando una sección del
ADN.
• Es actualmente la manera mas simple, versátil y precisa de
manipulación genética y esta revolucionando el mundo de la
ciencia.
 COMO FUNCIONA?

• Consta de 2 moléculas para producir

los cambios o mutaciones:
1. Enzima Cas9, tijeras moleculares
que cortan la cadena doble de ADN
en una región específica.
2. Un ARN guía, que es una molécula
de 20 pb de ADN dentro de una
molécula molde de ARN mas
grande, que funciona como guía
para Cas9 a la región de interés.
 APLICACIONES Y CONSECUENCIAS

• Puede solucionar enfermedades genéticas (cáncer).

• Edición de genomas somático y células de la línea germinal.
• Tiene implicaciones bioéticas
• La edición genética de las células de la línea germinal es
ilegal aun en la mayoría de países del mundo.
• Ya se han usado en células somáticas en la investigación de
enfermedades genéticas
 FUTURO DE CRISPR-Cas9
• Deben pasar algunos años para que se
apruebe el uso genético en seres humanos.
• Actualmente todas las investigaciones se
realizan con modelos animales.
• Se están corrigiendo errores de especificidad
en la enzima.
• Terapia génica
• Modelos celulares de mamíferos para
enfermedades
• Plantas transgénicas resistentes a casi todo