INTRUCCIONES Y CUIDADOS DE LOS

EQUIPOS DE LABORATORIO.
 1. DESCRIPCIÓN DE LOS EQUIPOS DEL LABORATORIO

1.1 AUTOCLAVE

El autoclave es el equipo que se utiliza para esterilizar (que es la destrucción o eliminación

de toda forma de vida –microbiana) incluyendo esporas presenté en objetos inanimados
mediante procedimientos físicos, químicos o gaseosos.

 PROPÓSITO DE LA AUTOCLAVE

Es un equipo diseñado con el fin de eliminar, de forma confiable, los microorganismos que de otra
manera estarían presentes en objetos que se utilizan en actividades de diagnóstico, tratamiento o
investigación en instituciones de salud – hospitales, laboratorios-; también es un equipo de amplio
uso en las industrias procesadoras de alimentos y en la industria farmacéutica.
En el laboratorio los materiales y elementos se esterilizan con los siguientes fines:

1. Preparar el equipo a ser usado en cultivos bacteriológicos (tubos de ensayo, pipetas, cajas Petri,
etc.), a fin de evitar que se encuentren contaminados.

2. Preparar elementos utilizados en la toma de muestras. (Todos deben estar en condiciones

estériles, agujas, tubos, recipientes, material de vidrio etc.).

3. Esterilizar material contaminado

Una buena esterilización por autoclave depende de la eliminación de todo el aire de la cámara y la
carga, los materiales que van a esterilizarse deben colocarse sin apretarse. Los artículos limpios
pueden ponerse en cestillos de alambre, pero el material contaminado debe estar en un recipiente
de fondo sólido en una altura no mayor a 8 cm. Deben dejarse grandes espacios de aire alrededor
de cada recipiente y ninguno debe estar cerrado.

Existen dos tipos de autoclave:

 El tipo olla de presión.

 El de desplazamiento por la gravedad.

Por razones prácticas sólo trataremos el tipo olla de presión ya que es el que tenemos en el
laboratorio. El tipo olla de presión es el más común, es un aparato para agua hirviendo a presión.
Tiene una cámara vertical de metal provista de una tapa metálica fuerte que se aprieta y cierra
herméticamente mediante un aro de goma. Se disponen en la tapa una espita para la salida del
aire y el vapor, un indicador de presión y una válvula de seguridad. El agua del fondo de la
autoclave se calienta mediante mecheros de gas exterior, un calentador eléctrico de inmersión o
un serpentín de vapor.

Debe haber agua suficiente dentro de la cámara. Se carga la autoclave y se aprieta la tapa
manteniendo la espita de descarga abierta.
Se ajusta seguidamente la válvula de seguridad a la temperatura requerida y se conecta a la fuente
de calor. Cuando el agua hierva, fluirá el vapor por la espita de descarga, arrastrando con él el aire
caliente existente en la cámara. Se deja que salgan libremente el aire y el vapor hasta que se haya
eliminado todo el aire. Cuando se haya alcanzado esta fase, se cierra la espita de descarga aire-
vapor. La presión del vapor se eleva en la cámara hasta que la presión deseada, generalmente se
alcanza y fluye el vapor por la válvula de seguridad.

Cuando la carga ha alcanzado la temperatura requerida se mantiene la presión de 15 a 20 minutos.

Al término del periodo de esterilización, se apaga el calentador y se deja que la autoclave se enfríe.
Se abre la espita de descarga muy lentamente una vez que el indicador ha llegado a cero, se deja
que el material se enfríe hasta que tenga una temperatura a la cual pueda tocarse con las manos.
Nunca se debe dejar enfriar la autoclave por mucho tiempo, ya que si no se abre se forma un vacío,
el cual puede romper el material estéril.

1.2 CAMPANA DE FLUJO LAMINADO

Las campanas de flujo laminar proporcionan un área delimitada por superficies fáciles de
limpiar y desinfectar con un flujo de aire filtrado a través de prefiltros, que retienen las
partículas más grandes que están presentes en el aire, y por filtros HEPA (High Efficiency
Particulate Air), que son filtros de alta eficiencia capaces de retener partículas ≥ 0,3 μm
con una eficiencia mínima del 99,97%.

 PROPOSITO DE LA CAMPANA DE FLUJO

Al trabajar en una campana de flujo laminar o en un gabinete de seguridad biológica se

debe:

• Hacer una lista de todos los materiales que se requerirán para realizar el trabajo. •
Desinfectar la superficie de trabajo utilizando un paño humedecido con alcohol al 70%
comenzando desde la parte posterior hacia afuera, repitiendo el proceso con movimientos
solapados.

• Colocar todos los materiales en el orden en que serán utilizados.

• Encender la campana por lo menos 30 minutos antes de comenzar a trabajar.

• Antes de ingresar al área donde se encuentra la campana, lavar las manos y antebrazos
con un jabón que posea actividad antimicrobiana. Secarlas con paños que liberen un bajo
número de partículas.

• Retirar todos los materiales del equipo al terminar el trabajo, desinfectar con alcohol al
70% de la manera indicada.

• Dejar encendida la campana por lo menos 15 minutos para que puedan eliminarse de la
zona de trabajo los posibles contaminantes.

PASOS QUE SE REALIZA ANTES Y DESPUES PARA UTILIZAR LA CAMPANA

1. Tomar 10 gramos o 25 gramos (dependiendo de qué microorganismo sea)

de las muestras y pesarlas en la báscula.
2. Poner la muestra en una bolsa o frasco (marcar la materia prima, lote y
quien lo realizo).
3. Incluirle a la bolsa o frasco 90 ml de agua destilada (con la probeta )
4. Se agita toda la mescla.
5. Introducir todo material a utilizar dentro de la campana ya lista.
6. Empezamos a realizar nuestro análisis.
7. Tomamos un buffer (tubo de ensayo ya preparado).
8. Al tubo de ensayo (buffer) le agregamos 1 ml de la sustancia ya preparada
de la bolsa de plástico o recipiente de vidrio (tapar el recipiente de vidrio
con un gorrito de papel traza).
9. Se agita el tubo de ensayo (buffer).
 10. Utilizar placas (aplicar en las placas 1 ml del buffer ya preparado).
11. Meter las placas en la incubadora.

1.2 INCUBADORA

Para un correcto funcionamiento del equipo se necesita cumplir con algunos aspectos
básicos como:

 Contar con el espacio adecuado donde se instalara la incubadora teniendo

en cuenta el tamaño y peso de la misma. Este espacio de ser libre hacia
todos los lados del equipo para una buena circulación de aire. La
resistencia del soporte o mesón de incubadora debe aguantar el peso de la
misma.

 El lugar donde se ubique la incubadora no debe sufrir cambios bruscos de

temperatura que puedan afectar el correcto funcionamiento.

A continuación se describen algunas recomendaciones básicas que se deben tener en

cuenta al momento de operar la incubadora.

 No hacer uso de la incubadora cerca a fuentes de calor, agua o sustancias

inflamables que puedan provocar choques eléctricos o explosiones.

 Evitar el derrame de sustancias ácidas que puedan afectar la incubadora,

en especial su en su interior. Este tipo de accidentes pueden llegar a las
partes eléctricas y provocar daños irreparables.
  Evitar incubar sustancias que produzcan vapores tóxicos perjudiciales para
salud y medio ambiente.

 Usar la indumentaria necesaria de protección.

 Controlar la temperatura de operación de la incubadora por medio de un

termómetro externo certificado.

 Las rutinas de limpieza siempre se deben realizar con el equipo apagado.

Debe desconectado de la red eléctrica y su cámara interna
debe encontrarse a temperatura ambiente.

 Utilizar productos de limpieza no abrasivos. Únicamente se deben utilizar

para áreas de fácil acceso tanto de su interior como del exterior de la
incubadora.

 Evitar el contacto o derrame de estos productos con las partes eléctricas.

 Hacer uso de los productos aptos de limpieza y desinfección. Sobre todo

en casos donde haya presencia de agentes contaminantes que pongan en
riesgo la salud y el medio ambiente.

1.3 BÁSCULA ELECTRONICA

La báscula utilizada en el laboratorio fue para pesar pequeñas cantidades de muestras

Para efectuar lo que se pesa hay que tener en cuenta:

 - No pesar las sustancias directamente sobre la superficie de la
balanza.

- Utilizar un recipiente limpio y seco

- El recipiente y la carga que se han de pesar tienen que estar a la

misma temperatura que el entorno.

- Colocar el material que se quiere pesar en el centro del plato de la

balanza.

- Al acabar el proceso de medida, retirar la carga del plato de la

balanza.

- No mover la superficie de la balanza para no distorsionar la balanza

Procedimiento

Se pesa el recipiente sin la muestra (esto se llama tarar). Después de pesar se coloca a
cero la balanza, luego se añade la sustancia que se quiere pesar con una espátula, si es
un sólido, o se adiciona con una pipeta, si es un líquido.

Siempre se debe retirar el recipiente de la superficie de la balanza para adicionar el

producto, para evitar que se nos caiga un poco sobre la superficie y deteriore a la
balanza. Limpiar cada vez que se utilicé diferente muestras.

Errores de pesada

Al intentar pesar nos podemos encontrar que la lectura del peso sea inestable. Las
causas más frecuentes de este hecho y sus posibles soluciones son:

Lectura de peso inestable Soluciones

Manipulación incorrecta de la carga Colocar la carga en el centro de la superficie

Absorción de humedad Poner un agente desecante en la cámara de

pesada

Oscilación del valor Evitar las corrientes de aire

 1.4 MATERIALES DE LABORATORIO

Es de gran importancia reconocer e identificar los diferentes instrumentos

o herramientas de laboratorio básicos, ya que de esta manera seremos capaces de
utilizarlos adecuadamente y también de llamarlos por su nombre y conocer su utilidad.

1.4.1 Utensilios de sostén

Son utensilios que permiten sujetar algunas otras piezas de laboratorio.

 Gradilla
Una gradilla es un utensilio utilizado para dar soporte a los tubos de ensayos o tubos de
muestras.

1.4.2 Utensilios de uso específico. (UDUE)

Son utensilios que permiten realizar algunas operaciones específicas y sólo puede
utilizarse para ello.

 Embudo
  Termómetro

Es un utensilio que permite observar la temperatura que van alcanzando algunas

sustancias que se están calentando. Si la temperatura es un factor que afecte a la
reacción permite controlar el incremento o decremento de la temperatura.

 Vasos de precipitados de plástico

 
Su objetivo principal es contener líquidos o sustancias químicas diversas de
distinto tipo.

 Como su nombre lo dice permite obtener precipitados a partir de la reacción de

otras sustancias.

 Normalmente es utilizado para trasportar líquidos a otros recipientes.

 También se puede utilizar para calentar, disolver, o preparar reacciones químicas.

1.4.3 Utensilios volumétricos. (UV)

Los utensilios son específicos para medir, contener y transferir determinados

volúmenes.

 Probeta graduada
La probeta es un instrumento volumétrico, que permite medir volúmenes superiores y más
rápidamente que las pipetas, aunque con menor precisión.

 La Probeta debe limpiarse antes de trabajar con ella.

 Se introduce el líquido a medir hasta la graduación que queramos.

 Si se pasó vuelque el líquido y repita nuevamente el paso anterior.

 Se vierte el líquido completamente al recipiente destino.

 Matraz Erlenmeyer
Se utiliza para el armado de aparatos de destilación o para hacer reaccionar sustancias
que necesitan un largo calentamiento. También sirve para contener líquidos que deben
ser conservados durante mucho tiempo o que no se ven afectados directamente por la luz
del sol.

 Para calentar líquidos contenidos en el matraz, debe colocarse sobre una rejilla de
asbesto bajo un trípode, también se puede utilizar un aro de metal en conjunto con
soporte universal, o utilizar pinzas para buretas o agarraderas que funcionen como
sostén del matraz.

 Botellas de almacenamiento media

Las botellas para Medios se fabrica del vidrio borosilicato para resistencia química y
termal y se puede usar para almacenar tan como mezclar y muestrear.

 Vaso medidor de plástico.

Es un recipiente utilizado para la medida del volumen de ingredientes líquidos o sólidos
pulverizados o molidos. Se recomienda siempre lavarlo si está en constante uso y
siempre tenerlo sanitizado.

 Pipetas

La Pipeta volumétrica está hecha para entregar un volumen bien determinado, el que está
dado por una o dos marcas en la pipeta. Si la marca es una sola, el líquido se debe dejar
escurrir sin soplar, que baje por capilaridad solamente esperando 15 segundos luego que
cayó la última gota.

Manejo de la pipeta
  El líquido se aspira mediante un ligero vacío usando bulbo de succión o propipeta,
nunca la boca.

 Asegurarse que no haya burbujas ni espuma en el líquido.

 Limpiar la punta de la pipeta antes de trasladar líquido

 Llenar la pipeta sobre la marca de graduación y trasladar el volumen deseado. El

borde del menisco debe quedar sobre la marca de graduación.

 Bolsas estériles de polietileno

Las bolsas estériles para microbiología se usan para la homogeneización y el análisis de

cualquier muestra sólida especialmente adaptadas para las muestras alimentarias.