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PRESENTACIÓN DE PROYECTOS DE 05-06-2017
INVESTIGACIÓN

1. TITULO:
Música como reductor del estrés y su influencia sobre la neurogenesis
en ratones adultos

2. AUTORES:
Ítem Nombres Cargo Identificación
Diego Mauricio Londoño Investigador 010100342009
1
Frankis
Manuel Raúl Saavedra Investigador 070100272013
2
Sánchez
Marío Alejandro Castellanos Investigador 070150232010
3
Parada
4
5
6
7
8
9
10

3. GRUPO DE INVESTIGACIÓN:

Grupo modelos experimentales para las ciencias zoohumanas (GME-CZH)

4. LÍNEA DE INVESTIGACIÓN:

Biotecnología animal

5. RESUMEN:

La neurogénesis adulta puede comprenderse como una serie de eventos de


desarrollo, secuenciales que son necesarios para la generación de nuevas
neuronas. El control terapéutico de la neurogénesis adulta ofrece un tremendo
potencial para permitir nuevos enfoques en medicina regenerativa. Sin embargo,
la búsqueda de nuevas estrategias para reparar el cerebro dañado sigue siendo
un desafío, debido a la constante ambigüedad con respecto a los mecanismos
fundamentales que regulan la inactividad, la activación, el compromiso y la
supervivencia celular. Se ha reportado que el estrés disminuye la proliferación de
células progenitoras en la circunvolución dentada del hipocampo. Diversos
estudios han demostrado los efectos del estrés sobre la proliferación celular en la
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circunvolución dentada dando como resultado una supresión de la producción de


nuevas neuronas. Así mismo se conoce que la exposición repetida al estrés y la
activación constante de receptores de glucocorticoides a través del eje
hipotálamo-hipófisis-adrenal (HPA) suprime la neurogénesis en el hipocampo. La
musicoterapia es un tratamiento sistemático con el objeto de lograr cambios en la
conducta, cualquier sonido, sea musical o no, está formado por vibraciones que se
propagan a través del aire e impactan en los objetos y cuerpos en su recorrido.
Todos los seres vivos reaccionan de una manera u otra a estas vibraciones. Se ha
considerado que la reducción del estrés es uno de los principales objetivos de la
musicoterapia. Es por eso que consideramos que evaluar la influencia de la
música para reducir el estrés y sus posibles efectos en la neurogénesis de ratones
adultos, utilizando marcaje de células en división con BrdU y NeuN aplicados por
punción intracerebro ventricular por medio de cirugía estereotáxica, en 16 ratones
de la cepa B6;FVB-Tg(Aldh1l1-cre)JD1884Htz/J JAX Stock # 023748, para
verificar el análisis de neurogénesis por inmunofluorescencia. Teniendo como
objetivo principal el análisis del hipocampo, debido a que este es una región del
cerebro densamente poblada con receptores para las hormonas del estrés como
los glucocorticoides, sugiriendo que la fisiología del estrés puede ser un carácter
general de los mamíferos, ya que estudios realizados en la circunvolución dentada
del hipocampo de animales adultos de al menos cuatro especies no humanas
diferentes lo sugieren.

6. COSTO:

U.T. Fondo Investigaciones Otros Total


22´929.490 22´929.490

7. DURACIÓN: 7 meses

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8. JUSTIFICACIÓN: (1 Página: Arial 12 espacio sencillo)

Durante gran parte del siglo 20, se consideró como un hecho irrefutable que la
neurogénesis de mamíferos solo se produce durante el desarrollo embrionario y
postnatal temprano, esto todavía es ampliamente creído por el público y sigue
siendo uno de los conceptos erróneos más generalizados sobre el cerebro (Yoo &
Blackshaw, 2018). La neurogénesis adulta puede comprenderse según
(Kempermann et al. 2015) como una serie de eventos de desarrollo secuenciales
que son necesarios para la generación de nuevas neuronas. Actualmente se sabe
poco sobre los cambios adaptativos que ocurren en el desarrollo de la
neurogénesis adulta, ha habido una enorme expansión en el conocimiento sobre
la neurogénesis adulta en animales de experimentación en las últimas dos
décadas. Una motivación en este campo de investigación ha sido la probabilidad
que procesos similares funcionen en humanos (Bergmann et al. 2015).

El control terapéutico de la neurogénesis adulta ofrece un tremendo potencial para


permitir nuevos enfoques en medicina regenerativa. Sin embargo, la búsqueda de
nuevas estrategias para reparar el cerebro dañado sigue siendo un desafío,
debido a la constante ambigüedad con respecto a los mecanismos fundamentales
que regulan la inactividad, la activación, el compromiso y la supervivencia celular
(Fong y Slack, 2017). La neurogénesis hipocampal, la producción, diferenciación e
integración de nuevas neuronas en la zona subgranular de la circunvolución
dentada es integral para ciertas tareas conductuales que dependen de la memoria
espacial, la memoria contextual y la memoria de reconocimiento durante la edad
adulta (Hueston et al., 2017).

Se ha reportado que el estrés disminuye la proliferación de células progenitoras en


la circunvolución dentada del hipocampo (Mirescu, & Gould 2006), el estrés
suprime la proliferación celular en la circunvolución dentada de animales adultos
en especies diferentes como el ratón, rata y mono tití, lo que sugiere que puede
ser un carácter general de los mamíferos. Diversos estudios han demostrado los
efectos del estrés sobre la proliferación celular en la circunvolución dentada dando
como resultado una supresión de la producción de nuevas neuronas (Czéh et al.
2002; Pham et al. 2003; Westenbroek et al. 2004). Debido a que los
glucocorticoides son hormonas catabólicas y el hipocampo exhibe un alto grado de
plasticidad estructural, podemos interpretar que la concentración de receptores de
glucocorticoides en esta región cerebral la hace potencialmente vulnerable a la
inhibición de procesos que se llevan a cabo en esta región (Schoenfeld, & Gould
2011).

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9. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA: (1 Página: Arial 12 espacio sencillo)

El estrés agudo es un mecanismo importante y necesario para adaptarse a


cambios ambientales que ocurren durante la vida, promoviendo un afrontamiento
eficaz de situaciones, el estrés severo o crónico puede resultar en un factor de
riesgo que contribuye al desarrollo de varios trastornos psiquiátricos (Levone et al.
2015). Las respuestas desadaptativas al estrés y la hipersecreción de
glucocorticoides asociada pueden inducir estados hiperemocionales, disfunción
del estado de ánimo y deterioro cognitivo en pacientes deprimidos (Schoenfeld et
al. 2016). La exposición repetida al estrés, la activación constante de receptores
de glucocorticoides a través del eje hipotálamo-hipófisis-adrenal (HPA) suprime la
neurogénesis en el hipocampo (Mouri et al. 2018). Varios estudios han
demostrado en roedores y mamíferos que la exposición repetida al estrés causa
deterioro de la neurogénesis en el hipocampo adulto (Vignisse et al. 2017).

Diferentes áreas cerebrales se han visto afectadas con la exposición repetida al


estrés como variaciones en el volumen del hipocampo, existen cambios celulares
que podrían contribuir a la pérdida de volumen, incluida pérdida de longitud
dendrítica o de espinas dendríticas, neurogénesis más lenta, disminución del
tamaño o número de la glía y constricción del espacio extracelular, la
neurogénesis hipocampal también está implicada en la regulación emocional,
incluida la ansiedad y la respuesta al estrés (Levone et al. 2015; Lucassen et al.
2016; Schoenfeld et al. 2016; Hueston et al. 2017; Mouri et al. 2018). Durante la
última década, se ha acumulado evidencia de que se produce neurogénesis
posdesarrollo en bajos nivel en múltiples regiones cerebrales de mamíferos,
incluida la neocorteza, el cuerpo estriado y la médula espinal, otra región cerebral
que ha recibido bastante atención como posible sitio de neurogénesis adulta de
bajo nivel es el hipotálamo (Yoo & Blackshaw, 2018).

El uso de música en la curación psicológica ha sido bien documentado a lo largo


de la historia, la musicoterapia es un enfoque no invasivo para el tratamiento de
los síntomas psicológicos. Este enfoque tiene efectos secundarios mínimos o
nulos, es económico, conveniente y completamente natural (Chang et al. 2015).
Los mecanismos implicados en los efectos benéficos de la musica siguen sin estar
del todo claros, la hipótesis es que reduce el estrés psicofisiológico, actuando
sobre sistemas neuroquímicos claves que median la respuesta al estrés (Chang et
al. 2015; Linnemann et al. 2017). La música se ha aplicado para reducir el estrés
en ambientes quirúrgicos y en el cuidado hospitalario (Chang et al. 2015).

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10. MARCO TEÒRICO Y ANTECEDENTES: (3 Páginas: Arial 12 espacio sencillo)

Neurogénesis

Un sustrato celular altamente plástico y dinámico es la neurogénesis adulta, la


cual hace referencia a las células madre neurales que continúan produciendo
nuevas neuronas en el cerebro adulto. (Lucassen et al. 2016). Se ha establecido
que nuevas neuronas continúan generándose en el cerebro adulto de mamíferos,
interesantes resultados indican que estas nuevas neuronas se integran a redes
neuronales y participan en diferentes procesos en el cerebro adulto (Arias et al.
2007). La neurogénesis no es un evento estático sino dinámico y, por tanto, está
modulado y regulado por diversos factores para responder a las demandas del
cerebro. Entre los factores involucrados en la modulación y regulación de la
neurogénesis se encuentran el hábitat, los factores internos y externos que
pueden ser neurotransmisores, factores de crecimiento, factores neurotróficos,
hormonas, actividad física y aprendizaje (Ramírez et al. 2007). Entre los factores
que modulan la neurogénesis se encuentran las influencias ambientales y
sociales; una de ellas es la actividad física que se ha descrito promueve la
sobrevivencia de neuronas nuevas en el giro dentado hipocampal, relacionándose
con la adquisición de memoria espacial (Van Praag et al. 1999). Otro regulador
positivo de este proceso es el ambiente enriquecido; la influencia favorable de este
factor fue demostrada al mantener unos roedores en una caja con juguetes y
túneles (Kempermann et al. 1997). Además, cuando los animales son forzados a
aprender una prueba en particular, se han encontrado neuronas nuevas en el giro
dentado, por el contrario, el estrés y la falta de sueño reducen la proliferación
celular neuronal (Mirescu & Gould, 2006; Mirescu et al. 2007).

Estrés

El estrés ocurre cuando un estímulo endógeno o exógeno se percibe como


desagradable, aversivo o amenazante para la homeostasis o la supervivencia de
un individuo, en el cual se desencadenan respuestas fisiológicas y conductuales
que intentan restablecer el equilibrio, generando que el individuo suprima procesos
en curso para reenfocar la atención en el factor estresante (Levone et al. 2015;
Lucassen et al. 2016). Desafíos biológicos como la pérdida de sangre, la
deshidratación o la inflamación, provocan respuestas de estrés. El estrés puede
ser agudo como por ejemplo cuando se enfrenta a un depredador o crónico como
entorno o condiciones de vida (Lucassen et al. 2016). La respuesta al estrés
agudo es un mecanismo importante y necesario para adaptarse a los cambios
ambientales que ocurren durante la vida, promoviendo un afrontamiento eficaz;
pero el estrés severo o crónico puede resultar en un factor de riesgo contribuyente

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para el desarrollo de varios trastornos psiquiátricos, como depresión y trastorno de


estrés postraumático (Levone et al. 2015). El trastorno depresivo mayor (TDM) es
uno de los principales contribuyentes de la carga mundial de morbilidad. Según la
Organización Mundial de la Salud, ya se ha convertido en la segunda causa más
frecuente de discapacidad inducida por enfermedades (Culig et al. 2017). En la
literatura, se han reportado variaciones en el volumen del hipocampo en la
depresión, que pueden relacionarse con diferencias en la duración de la
enfermedad, ubicación anatómica, condiciones de vida temprana y genotipo
(Lucassen et al. 2016).

Estrés y neurogénesis

Tanto el estrés agudo como el crónico pueden suprimir la proliferación neuronal,


factores estresantes como restricción física, derrota social, golpes en
extremidades, privación del sueño e inflamación, pueden disminuir el número de
neuronas nuevas en el giro dentado del hipocampo (wu et al. 2014; Lucassen et
al. 2016). Si el factor estresante es impredecible y severo, múltiples etapas del
proceso neurogénico se ven afectadas, entre ellas la proliferación de células
madre neurales, la amplificación de células progenitoras, la fase de diferenciación
neuronal y la expansión dendrítica. Puede cambiar la proliferación y la
neurogénesis en muchas especies diferentes, también puede desplazar las células
madre neurales de la diferenciación neuronal y en su lugar redirigirlas a la
generación de oligodendrocitos (Chetty et al. 2014) Aunque no se ha estudiado
con gran detalle, los cambios en el tiempo inducidos por estrés pueden tener
importantes consecuencias funcionales para la mielinización de axones y/o fibras
musgosas y por tanto, para las redes de conexión (Lucassen et al. 2016).

Los diferentes tipos de estrés desencadenan diferentes respuestas conductuales y


funcionales, los glucocorticoides se consideran importantes en la mediación de los
efectos del estrés al igual que en la producción de nuevas neuronas. La
administración crónica exógena de glucocorticoides a animales afecta la
proliferación y supervivencia celular, la diferenciación neuronal, al igual que la
producción de oligodendrocitos e interviene en la respuesta y comportamiento de
la microglía (Hu et al. 2012; Chetty et al. 2014). Los receptores NMDA, los
receptores de glucocorticoides y mineralocorticoides están presentes en nuevas
células, aunque a diferentes proporciones de tiempo, probablemente actúen en
conjunto para mediar los efectos del estrés sobre la neurogénesis (Wong y
Herbert, 2005). La disminución de receptores de glucocorticoides encontrados
selectivamente en células del nicho neurogénico del hipocampo, aceleran la
diferenciación y migración neuronal, inducen posicionamientos ectópicos, alteran
la complejidad neuronal aumentando espinas dendríticas y la excitabilidad basal,
pero se deterioran en condiciones de miedo (Fitzsimons et al. 2013).
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Música y estrés

La musicoterapia es un tratamiento sistemático con el objeto de lograr cambios en


la conducta (Hanser, 1987), cualquier sonido, sea musical o no, está formado por
vibraciones que se propagan a través del aire e impactan en los objetos y cuerpos
en su recorrido. Todos los seres vivos reaccionan de una manera u otra a estas
vibraciones (Trallero. 2008). La música también se ha clasificado como sedante y
estimulante en términos de nivel de excitación. La música estimulante se
caracteriza comúnmente por ritmos rápidos, volumen alto y patrones rítmicos,
mientras que la música sedativa es lenta, suave y con poca actividad rítmica ( Jun
Jiang et al. 2013). Actualmente es un procedimiento aceptado por muchos centros
de salud en países desarrollados, la musicoterapia aplicada durante la sesión
clínica, es efectiva para disminuir el nivel de estrés en individuos. El estrés
causado por los deberes y quehaceres del trabajo clínico, es mitigado por medio
de este tipo de terapias (Bancalari y Oliva, 2012).

Se ha considerado que la reducción del estrés es uno de los principales objetivos


de la musicoterapia, existe un consenso virtual de que la música, como el
lenguaje, tienen la capacidad no solo de transmitir o expresar emociones, sino de
influir en las emociones. Se ha demostrado que escuchar música puede ser un
medio eficaz para aliviar la tensión y la ansiedad (Jun Jiang et al. 2013).
Resultados de investigación en entornos experimentales y en contextos clínicos
sugieren que escuchar música tiene el potencial de reducir la tensión, subjetiva y
fisiológica, en contraste con estudios experimentales en los cuales el contexto de
escucha de música es muy artificial, los esfuerzos recientes de investigación dan
validez a estudios desde el punto de vista ecológico, estudiar la música en el
hábitat natural de las especies (Linnemann et al. 2015). Algunos estudios
comparan los efectos de diferentes géneros musicales sobre la reducción del
estrés y sugieren que la música clásica tiene mayores efectos sobre la reducción
del estrés en comparación con la música no clásica, como la música de hard rock
y la música heavy metal (Jun Jiang et al. 2013). Sin embargo, la evidencia
empírica sobre el efecto reductor del estrés de la música está lejos de ser
consistente, y los mecanismos subyacentes psicobiológicos de este potencial
efecto siguen siendo desconocidos (Linnemann et al. 2015).

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11. OBJETIVOS: (1/2 Página: Arial 12 espacio sencillo)

11.1 OBJETIVO GENERAL

Evaluar la influencia de la música para reducir el estrés y sus posibles efectos en


la neurogénesis de ratones adultos.

11.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS

 Evaluar si la musicoterapia anterior al periodo estresante influye en la


neurogénesis del ratón adulto.
 Determinar si la musicoterapia posterior al periodo estresante influye en la
neurogénesis del ratón adulto.
 Valorar la influencia del estrés en ratones adultos sometidos a estrés sin
exposición a música.
 Realizar una comparación estadística con los datos obtenidos con
musicoterapia frente a los individuos control.

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12. DISEÑO METODOLÓGICO: (3 Páginas: Arial 12 espacio sencillo)

Lugar de estudio y modelo animal

El estudio se realizará en el bioterio de experimentación animal (BEA), vinculado


al grupo modelos experimentales para las ciencias zoohumanas (GME-CZH) y
laboratorio de biotecnología animal de la universidad del Tolima. Para este
experimento se utilizarán 16 ratones de la cepa B6; FVB-Tg(Aldh1l1-cre)
JD1884Htz/J JAX Stock # 023748, con un peso de 25 ± 10 gramos, con edad
promedio de 16 semanas provenientes de Jackson laboratory, sede Sacramento-
California, Estados Unidos. Los animales serán alojados en la zona mantenimiento
en cajas T2 estándar de policarbonato (28 x 20 x 20 cm, 4 animales por caja), las
cajas contendrán una capa de aserrín en el fondo que será cambiada cada tercer
día. Durante el experimento, los animales permanecerán en un cuarto con
temperatura controlada (20-22 °C), ciclo de luz /oscuridad de 12 horas y libre
acceso a agua y comida.

Anterior a los procedimientos experimentales se permitirá la aclimatación de los


animales a las condiciones del bioterio durante un período cinco días. Los
procedimientos serán realizados entre las 7:00 a.m. y las 10 a.m. con el objeto de
eludir el pico de corticosterona endógena de los animales que se presenta
después de las 3:00 p.m. Los sujetos serán divididos en 4 diferentes grupos: 1.
Grupo control, 2. Grupo sometido a estrés, 3. Grupo sometido a estrés pre-
musicoterapia, 4. Grupo sometido a estrés post-musicoterapia, cada grupo tendrá
un total de 4 individuos. Los individuos serán manipulados de acuerdo a los
aspectos éticos y reglamentarios según la Ley 84 de 1989, artículos 23 a 28, y
según el comité de Bioética de la Universidad del Tolima.

Inducción de estrés

Para inducir el estrés agudo se utilizará el modelo propuesto por (kim et al. 2017)
complementado con el modelo de estrés leve de (Jayatissa et al 2006), los grupos
2, 3, y 4 deben ser expuestos al protocolo de estrés durante tres semanas, Los
estresores a aplicar serán restricción de movimiento durante 2 horas cajas
(dimensiones 2 x 2 x 10cm), Iluminación intermitente encendido y apagado cada 5
minutos, Inclinación 45º de la caja, luz estroboscópica (2 Hz), jaula mojada,
introducir individuos nuevos al grupo. Todos los estresores serán aplicados
durante 2 horas diarias de 8 – 10 am, la aplicación de los diferentes métodos se
hará de forma aleatorio. El estrés se puede evidenciar con signos como una
disminución del consumo de alimento o anorexia, alteraciones del ritmo cardíaco y
respiratorio, consumo de heces, sensaciones generalizadas de miedo,
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nerviosismo, intranquilidad y agresividad ( Thorne, 1995; Gutierrez, 2005; Domínguez


& Olivera 2006; Rodríguez, 2007).

Musicoterapia

Para la aplicación de musicoterapia usaremos pistas de música clásica como


Mozart - Sinfonia concertante in E-flat major, K.364/320d" by The Fulda Symphonic
Orchesta sus acordes y tonos suaves producen sensación de relajación. Los
sujetos del grupo 3 serán mantenidos con musicoterapia por un periodo de 2 horas
anterior al evento estresante, al grupo 4 se le realizará el mismo procedimiento,
pero posterior al evento estresante.

Evaluación de la Neurogénesis

Para realizar la medición de la neurogénesis usaremos marcaje de células en


división con BrdU aplicado por punción intracerebro ventricular por medio de
cirugía estereotáxica, para verificar el análisis de neurogénesis por
inmunofluorescencia, el BrdU pasara un proceso de dilución en líquido
cefalorraquídeo artificial, y posteriormente se inyectará de forma bilateral 2µl de
BrdU a una concentración de 20mg/ml. Se realizará la administración de BrdU un
mes antes de realizar el sacrificio de los especímenes ya que se estima que el
70% de las células positivas a BrdU expresan marcadores de neuronas maduras,
al pasar este tiempo prudencial. Los animales seran anestesiados con sobredosis
de Pentobarbirtal sódico y se hará perfusión por el método de gravedad utilizando
250ml de solución salina 0.9% y 20ml de paraformaldehído al 4% por cada animal;
los cerebros serán extraídos y post fijados en paraformaldehído al 4% por un
intervalo de 24 a 48 horas a 4°C, posteriormente criopreservados, sometiendose a
un gradiente ascendente de sacarosa (7%, 25% y 30%) a 4°C y finalmente
almacenados a -20°C hasta la realización de los cortes histológicos. El
procedimiento de perfusión a usar será basado en lo reportado por (Mayorga,
2013). El marcaje con BrdU, permite observar las células que proliferaban en el
hipocampo y la corteza cerebral, mediante la visualización de núcleos que
conserven el análogo de timidina en su ADN. El marcaje se realizó con NeuN (un
marcador específico del tipo celular neuronal) sirviendo como determinante de la
proliferación neural. Los anticuerpos primarios se utilizarán en un protocolo de
doble marcaje a diluciones de 1:100 para BrdU (Sigma-Aldrich Co. ®) y 1:2 para
Anti-Neuron-Specific Nuclear Protein Antibody (Chemical ®), con anticuerpos
secundarios Alexa Fluor 488 y 594 (Life technologies ®) diluidos a 1:500 (Kee,
et.al., 2007 y Kee, et. al. 2002). Los resultados del procedimiento deben ser
evaluados en un microscopio de fluorescencia en el que preferiblemente se
puedan observar los dos colores al tiempo (Confocal) para verificar la falla o éxito
del marcaje, el conteo de núcleos de células marcadas se realizará con image J.
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Análisis estadístico

Los datos recolectados serán analizados con el software GraphPad prism 6


(GraphPad Software, inc.). Se realizará estadística descriptiva, la distribución de
normalidad se realizará con Shapiro-Wilk para establecer el método estadístico
que correspondiera a la distribución de los datos. Las variables estadísticamente
evaluadas fueron el número de células marcadas con BrdU y NeuN en los cortes
histológicos. Las diferencias estadísticas existentes en los métodos de medición
fueron analizadas con la prueba ANOVA, un p <0.05 fue establecido para definir
las diferencias estadísticamente significativas entre grupos.

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Fitzsimons CP, van Hooijdonk LW, Schouten M, Zalachoras I, Brinks V, Zheng


T, Schouten TG, Saaltink DJ, Dijkmans T, Steindler DA, Verhaagen J, Verbeek
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14. CRONOGRAMA*:
Tiempo (meses)
Actividad
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24
Revisión literaria x x x
Elaboración del proyecto x x
Recolección de datos x x x
Análisis estadístico de los datos x x
Interpretación de resultados x
Informe final y producto x
científico

*Si requiere más tiempo, anexe hoja adicional del cronograma.

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15. PRESUPUESTO*:
____________________________________________________________________________________________
Cuadro 1.- Descripción de costos de personal
Tiempo Costos
Nombre de Función en el
Formación Dedicación Duración U.T. Adm. Fondo de Otros Total
Investigadores proyecto1
(H/Semana) Central $ Invest. U.T. $ $ $
Diego Mauricio Medico Investigador 22 5meses 4´296.800 4´296.800
Londoño Frankis veterinario y
zootecnista
Manuel Raul Estudiantes Investigador 22 5meses 4´296.800 4´296.800
Saavedra de biología
Sanchez
Mario Alejandro Estudiantes Investigador 22 5meses 4´296.800 4´296.800
Castellanos de biología
Parada

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Total Costo de Personal


1 Debe identificar el nivel de investigador Principal, coinvestigador, auxiliar, consultor.

* En los cuadros de presupuesto se pueden adicionar filas si son necesarias.

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Cuadro 2.- Descripción de los equipos requeridos:


Costos
No. No.
Justificación uso en proyecto Adquisición Arriendo U.T. Adm. Fondo de Otros Total
Equipo Unidad
Central $ Invest. U.T. $ $ $
No aplica, laboratorio cuente
con equipos requeridos

Totales

Cuadro 3. Descripción de viajes (Sólo se incluyen viajes relacionados con la metodología del proyecto) :
Costos
Estadía U.T. Adm. Fondo de Otros $ Total
No. Lugar Valor Pasaje Justificación1
(días) Central $ Invest. U.T. $
$
No aplica

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Totales
1 Debe incluir el nombre o nombres de los usuarios de los viajes.
Cuadro 4. Descripción de Insumos y Materiales:
Costos
Nombre Uso Cantidad U.T. Adm. Fondo de Otros Total
Central $ Invest. U.T. $ $ $
Ratones Modelo animal 16 6´400.000 6´400.000
Penthal 20ml Anestésico 1 9.000 9.000
Cajas pequeñas Inductor de estrés 8 64.000 64.000
Luz estroboscópica (2 Hz) Inductor de estrés 1 30.000 30.000
BrdU (Sigma – Aldrich ®) Medidor de neurogenesis 1 150.000 150.000
Anti-Neuron-Specific Nuclear Medidor de neurogenesis 1 494.000 494.000
Protein Antibody (Chemical ®)
Alexa Fluor 488 y 594 (Life Medidor de neurogenesis 1 1´000.000 1´000.000
technologies ®)

Totales
Puede considerarse como insumos: muestras vegetales, de fauna, flora, reactivos, bibliografía, software.

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Cuadro 5.- Descripción Servicios Técnicos:


Costos
Nombre Justificación Cantidad U.T. Adm. Fondo de Invest. Otros Total
Central $ U.T. $ $ $
No aplica

Totales

Cuadro 6. Descripción de Construcciones:


Costos
Nombre Uso Cantidad U.T. Adm. Fondo de Invest. Otros Total
Central $ U.T. $ $ $
No aplica

Totales

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Cuadro 7. Publicación y social de resultados:


Costos
Item Justificación U.T. Adm. Fondo de Invest. Otros Total $
Central $ U.T. $ $
Publicación articulo científico en revista científica 50.000 50.000
de alto impacto
Exposición en congreso científico 500.000 1´000.000

Totales

Cuadro 8.- Costo total del proyecto:


Los rubros parciales deben trasladarse al formato del Costo Total:
Nombre U.T. Adm. Central $ U.T. Fondo de Invest. $ Otros $ Total $
Personal 12´890.490 12´890.490
Equipo
Insumos y Materiales 9´038.000 9´038.000
Viajes
Servicios Técnicos
Construcciones
Mantenimiento
Publicaciones y socialización 550.000 550.000
Administración *(% valor del proyecto)
Totales 22´929.490 22´929.490
* Hasta un 10% del valor del Proyecto.

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16. RESULTADOS ESPERADOS (3 páginas: Arial 12 espacio sencillo)

El estrés es considerado uno de los inhibidores del proceso de neurogénesis


adulta debido a la producción de glucocorticoides, (Jiang et al. 2013) consideraron
que la reducción del estrés es uno de los principales objetivos de la musicoterapia,
la música como el lenguaje tienen la capacidad no solo de transmitir o expresar
emociones, sino de influir directamente en ellas. Impulsados por el interés
creciente por estudios en terapias alternativas para el estrés, (García et al. 2016)
plantean que algunas de estas alternativas pueden ser la música y el ejercicio,
esto apoyado por (Novotney, 2015) quien concluye que la música funciona para
eliminar el estrés y producir relajación, ya que disminuye los niveles de cortisol
responsable en gran medida del estrés.

En cuanto al modelo de estrés, en primera instancia esperamos que en los grupos


donde se esté aplicando el tratamiento inductor de estrés presenten síntomas que
concuerden con los resultados reportados por (Thorne en 1995) como disminución
de la ingesta de alimento o anorexia, así mismo (Rodríguez, 2007) propuso que el
estrés altera el ritmo cardíaco y el patrón respiratorio, se observan
comportamientos anormales como el consumo de heces (Gutiérrez, 2005)
sensaciones generalizadas como miedo, nerviosismo, intranquilidad y agresividad
(Domínguez & Olivera, 2006). Estos son signos etológicos, que brindaran un punto
de partida para analizar y comparar posibles respuestas relacionadas con el efecto
de la música sobre el estrés de los individuos de laboratorio mantenidos en el
bioterio, y expuestos a las condiciones experimentales propuestas. Esperando
demostrar que la exposición a la música puede ser un medio eficaz para aliviar la
tensión y la ansiedad, por tanto, esperamos que haya menores valores en las
medidas de neurogénesis del grupo sometido a estrés en comparación a los que
fueron tratados con musicoterapia.

Con respecto al análisis inmunohistoquímico se espera que por medio del marcaje
de contraste con NeuN se pueda observar actividad neurogénica en las diferentes
muestras, debido a que la cepa B6;FVB-Tg(Aldh1l1-cre)JD1884Htz/J JAX Stock #
023748 es específica para la expresión de esta proteína, considerada como
objetivo para localizar las nuevas neuronas que expresan dicha proteína, según lo
propuesto por (Tien et al. 2012). Así mismo el Laboratorio Jackson garantiza
rigurosos programas de control de calidad genética para confirmar los
antecedentes de las cepas JAX®, por tanto, se espera alta fiabilidad en las
lecturas que se realicen en los grupos experimentales propuestos.

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La probabilidad de que los procesos de neurogénesis sean fisiológicamente


similares en animales de laboratorio que en humanos, y que estas alteraciones en
la neurogénesis adulta podrían ser la base de enfermedades neurológicas o
psiquiátricas (Bergmann, et al. 2015). Respaldado por el hecho que el hipocampo
es una región del cerebro densamente poblada con receptores para las hormonas
del estrés como los glucocorticoides, sugiriendo que la fisiología del estrés puede
ser un carácter general de los mamíferos, ya que estudios realizados en la
circunvolución dentada del hipocampo de animales adultos de al menos cuatro
especies no humanas diferentes lo sugieren (Mirescu, & Gould, 2006), por tanto se
espera que sea en esta región donde se observen lecturas concluyentes.

Debido a que se espera obtener resultados positivos con la musicoterapia en


individuos mantenidos en el bioterio bajo condiciones de estrés, se propone
plantearla como una estrategia anti-estrés y que sea punto de partida para
tratamientos en aquellos animales de laboratorio que en algún momento presenten
signología relacionada con el estrés, bien sea por las condiciones de alojamiento o
por alguna técnica aplicada.

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17. TRAYECTORIA DE LOS INVESTIGADORES

Diego Mauricio Londoño Frankis, Medico Veterinario y Zootecnista, tesis de


pregrado.
Manuel Raul Saavedra Sanchez, Estudiante de biología en formación.
Mario Alejandro Castellanos Parada, Estudiante de biología en formación.

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18. SUGERENCIA DE PARES (Proyectos de Docentes). Ingrese los datos de


cuatro (4) Pares Evaluadores de COLCIENCIAS que puedan evaluar su
proyecto.

Nombres E-mail Teléfono


Marcos Fidel Avila
Astrid Milena Perdomo

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