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INDICE
Introducción ………………………………..………………………….. 04
a la agricultura ………………………………………………………… 05
transgénicas …………………………………………………….. 09
Biobalística ………………………………………………………… 13
Expresión de proteínas de la
Conclusión ………………………………………………………………………. 42
Anexos ……………………………………………………………………………. 43
Bibliografía …………………………………………………………………… 47
4 Cristina Rivas Wagner
INTRODUCCIÓN | 1
Se requieren nuevos esfuerzos, por parte del sector público, para crear
cultivos transgénicos que beneficien a los agricultores de escasos recursos
de los países en vías de desarrollo y faciliten el acceso de éstos a los
alimentos mediante la producción, con mano de obra intensiva, de cultivos
básicos como maíz, arroz, trigo, yuca (mandioca), camote (ñame), sorgo,
plátano macho (cambur) y batata (boniato). Se necesita el esfuerzo
cooperativo de los sectores público y privado para desarrollar nuevos
cultivos transgénicos que beneficien a los consumidores, sobre todo a los
del mundo en vías de desarrollo.
La planta transgénica contiene uno o más genes que han sido insertados en
forma artificial en lugar de que la planta los adquiera mediante la
polinización. La secuencia génica insertada (llamada el transgen) puede
provenir de otra planta no emparentada o de una especie por completo
diferente: por ejemplo, el maíz Bt, que produce su propio insecticida,
contiene un gen de una bacteria. Las plantas que tienen transgenes a
menudo son llamadas genéticamente modificadas o cultivos GM, si bien en
realidad todos los cultivos han sido genéticamente modificados con respecto
a su estado silvestre original mediante la domesticación, la selección y el
mejoramiento controlado a través de períodos prolongados.
MÉTODOS DE TRANSFORMACIÓN | 5
Los biólogos pueden recurrir a tres métodos, para introducir los genes de
interés en la célula vegetal. Ellos son: electroporación de protoplastos,
biobalística e infección con Agrobacterium.
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- Electroporación de protoplastos:
nº de colonias transformadas
nº inicial de protoplastos
- Biobalística
Esta técnica fue propuesta por Sanford en 1987, para introducir material
genético en el genoma nuclear de plantas superiores. En los últimos años se
ha usado para transformar bacterias, protozoos, hongos, algas, insectos y
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casi todos los tipos de suelos, cultivados o no. La infección de una planta
con Agrobacterium, comienza con la penetración de la bacteria en el tejido
vegetal, a través de una lesión producida por insectos, tratamientos
culturales, heladas, etc. Las bacterias son atraídas por sustancias liberadas
por las células lesionadas, tales como aminoácidos, azúcares y fenoles. Una
vez en contacto con las células vegetales, las bacterias sintetizan
microfibrillas de celulosa, propiciando una mejor fijación.
Veamos ahora como podemos introducir los plásmidos que contienen los
genes de interés, en las células de Agrobacterium (transformación). Pese a
que los oncogenes son los responsables de la producción de tumores, las
únicas regiones del T- ADN esenciales para su transferencia son las
secuencias de aproximadamente 25 pb localizadas en sus extremidades. De
este modo, los genes presentes en el T - ADN pueden ser eliminados y
sustituidos, sin alterar el proceso de transferencia. Además de las
extremidades del T - ADN, la región vir también es esencial para la
transferencia. La preparación de un linaje de Agrobacterium para ser
utilizado como vector para la transformación de plantas transgénicas,
incluye dos etapas: En la primera etapa, se debe obtener un “linaje
desarmado”, en el cual el T-ADN original, con sus oncogenes fue eliminado
por un proceso de doble recombinación. Actualmente disponemos de linajes
desarmados, obtenidos a partir de linajes salvajes de diferentes orígenes.
La segunda etapa, implica la preparación de un vector conteniendo el T-
ADN con los genes de interés. Debido a su gran tamaño (aproximadamente
200 kb), el plásmido Ti no puede ser manipulado directamente, por lo que
se emplean plásmidos más pequeños (vectores), que resultan fáciles de
manipular. Estos vectores contienen las extremidades del T-ADN, entre las
cuales se clonan los genes de interés. Una vez obtenido el vector, este debe
ser transferido al Agrobacterium mediante un proceso que se conoce con el
nombre de transformación. Se han desarrollado tres métodos de
transformación: conjugación, electroporación y shock térmico:
T - ADN
a)
binari o
Vir
b)
T- ADN
T- ADN Vir
c)
T- ADN Vir
d)
T - ADN Vir
Desde 1995 se han aprobado varios genes Bt para el uso comercial en los
cultivos de algodón, maíz y papa. La papa tiene un gen que genera una
proteína específica contra el coleóptero “Colorado potato beatle”
(Leptinotarsa decemlineata). Para el cultivo de algodón la toxina específica
actúa sobre lepidópteros: “cotton bollworm” (Helicoverpa zea) y “pink
bollworm” (Pectinophora gosypiella). En cuanto al cultivo de maíz también
existe una proteína con acción específica contra lepidóptero “European y
southwestern corn borers” (Diatraea grandiosella) y “corn earworm”
(Helicoverpa zea).
Otro efecto negativo podría ser que las mismas no pudieran completar su
ciclo debido a la muerte del organismo huésped. Existen posiciones
encontradas con respecto a este punto, ya que se ha afirmado que el
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Algo similar sucedería con los predatores en los que se han obtenido
resultados contradictorios. Los mecanismos no están claros.
· Maíz
· Algodón
· Tomate
· Papa
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Larva del gusano de la raíz del maíz alimentándose de una raíz joven.
Escala del daño que causan las larvas al alimentarse de la raíz, desde un
daño severo (izquierda) a ningún daño (derecha)
problema de los residuos remanentes del ciclo anterior y reduce los efectos
ambientales. Las variedades tolerantes a los herbicidas son populares entre
los agricultores porque permiten un control de la maleza menos complicado
y más flexible. Estas variedades comúnmente se comercializan como
variedades Roundup Ready® o Liberty Link®.
Los virus pueden ser eliminados de las plantas por cultivo de meristemos.
Sin embargo, es mucho más rentable prevenir la infección. No se debe
olvidar que una planta curada puede volver a ser infectada por el mismo
virus. Por lo general los agricultores siembran un mismo tipo de plantas en
una misma zona, por lo tanto la enfermedad podría que dar residente en el
suelo durante largo tiempo. Además, es inviable curar de virus a las plantas
para cada siembra.
Plásmidos
derivados del Ti.
Muestran sus
regiones comunes
Proteína de la
cubierta del TMV
28 Cristina Rivas Wagner
Virus X de la patata.
Plantas y cultivos transgénicos 31
Aunque las plantas se han utilizado por miles de años con fines medicinales,
ha sido recientemente que por medio de la ingeniería genética se han
utilizado como biofábricas o biorreactores para producir diversos
compuestos de interés farmacéutico. Dado que la demanda por estos
compuestos va en aumento en todo el mundo,el uso de esta tecnología
también está cada vez más extendido. Actualmente, el alto costo de
muchos compuestos farmacéuticos limita su disponibilidad y aplicación. Los
producidos en plantas transgénicas son, por el contrario, baratos para
producir y almacenar, de fácil escalamiento para producción en masa y más
seguros que los derivados de otros sistemas. En este artículo seanaliza el
avance en este campo.
El uso de reactores o biorreactores para la producción a nivel industrial de
determinadas sustancias no es nuevo.
Gran cantidad de compuestos de diversos tipos (incluyendo farmacéuticos)
se ha estado produciendo por muchos años en diversos sistemas. Esto fue
posible debido a que la mayoría de los genes de cualquier origen se puede
expresar en sistemas heterólogos. El sistema de expresión ideal sería el que
produce el material en mayor cantidad, más seguro y biológicamente más
activo con el costo más bajo. El uso de células de mamíferos modificadas
con técnicas de DNA recombinante tiene la ventaja de producir compuestos
idénticos a los naturales; sin embargo, cultivar estas células es muy costoso
y se puede realizar solamente en escala limitada.
El uso de microorganismos, tales como bacterias, permite la producción a
escala mucho mayor, pero tiene la desventaja de originar productos que no
son exactamente iguales a los de origen natural. Por ejemplo, las proteínas
que generalmente son glucosiladas (diversos azúcares unidos a la molécula)
en seres humanos no son glucosiladas por bacterias. Además, las proteínas
humanas que se expresan en altos niveles en Escherichia coli adquieren con
frecuencia una conformación artificial y son más propensas a precipitar en
forma intracelular debido principalmente a la carencia de puentes disulfuro
y a un plegamiento inadecuado.
La producción de proteínas recombinantes en plantas tiene muchas ventajas
potenciales para generar compuestos farmacéuticos de importancia en
medicina clínica.
En primer lugar, los sistemas vegetales son más económicos que la
infraestructura industrial utilizada en sistemas de fermentación o en
biorreactores. En segundo
lugar, ya está disponible la tecnología para cosechar y procesar plantas y
sus productos a escala industrial. En tercer lugar, el requisito de la
purificación del compuesto
puede ser eliminado cuando el tejido de la planta que contiene la proteína
recombinante se utiliza como alimento (como en el caso de las vacunas
comestibles, veáse más adelante). En cuarto lugar, se puede dirigir a las
proteínas recombinantes a determinados compartimientos intracelulares, o
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Desde hace más de diez años, las plantas han demostrado ser sistemas
versátiles de producción para muchas formas de anticuerpos como IgG e
IgA, IgG/IgA quiméricos y otros. Las plantas tienen un gran potencial como
fuente virtualmente ilimitada de anticuerpos monoclonales baratos
(llamados ¨planticuerpos¨) para terapia humana y animal.
Para dar otro ejemplo, un anticuerpo contra el virus del herpes (HSV) fue
producido en soya y fue muy eficaz en la prevención de la infección vaginal
por HSV en ratón.
Vacunas comestibles
Por esta razón se considera que las vacunas preparadas en plantas tienen
un gran potencial. La bioencapsulación de la subunidad B de la toxina lábil
de Escherichia coli en maíz transgénico indujo una fuerte respuesta inmune
Plantas y cultivos transgénicos 35
La cantidad de tejido vegetal que constituya una dosis de vacuna debe ser
pequeña. Por ello, es muy importante alcanzar altos niveles de expresión
del antígeno en el tejido vegetal. Se han utilizado diferentes estrategias
para aumentar los niveles de expresión de los transgenes; por ejemplo,
utilizando diversas señales de regulación de la expresión genética, así como
optimizando el uso del codones.
El tomate
Los suelos salinos son un problema creciente en muchas partes del mundo.
Muchas plantas de cultivo, incluidos los tomates, mueren a causa del
contenido elevado de sales en el suelo y en el agua de riego. El desarrollo
de un tomate tolerante a la sal ofrece la posibilidad de cultivar esas
hortalizas en tierras anteriormente no aptas para la agricultura. Científicos
de la Universidad de California y la Universidad de Toronto han desarrollado
una planta de tomate que puede tolerar concentraciones elevadas de sal y
que retiene la sal en sus hojas, de tal modo que el fruto no tiene un sabor
salado. Se estima que pasarán tres años antes de que estén disponibles en
el mercado los tomates tolerantes a la sal.
El arroz dorado
La canola
Existe una serie de problemas ambientales asociados con el uso actual del
césped, que incluyen:
El girasol
Campo de girasoles.
El café y el té
Uvas en maduración.
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El tabaco
Tabaco
Los árboles
CONCLUSIÓN | 11
Si durante la última década del siglo pasado las grandes fortunas se crearon
en la informática, las telecomunicaciones y en internet, durante las
primeras décadas del presente siglo, el conocimiento y los medios para el
control del código genético será un factor decisivo de la economía mundial y
una fuente de conocimientos para la conservación o la destrucción de la
vida en nuestro planeta. En general, habrá cambios importantes en la
agricultura de los países desarrollados, un progreso relativo en aquellos en
vías de desarrollo, que sean capaces de asimilar racionalmente las nuevas
tecnologías y un desarrollo paulatino de la conciencia social, producto de un
proceso muy contradictorio a lo largo del cual los científicos ocuparán un
lugar decisivo en la función social de su trabajo. Al constituir el
conocimiento biológico un centro de la economía y ser centro de la vida, se
modificará la frontera actual en la responsabilidad técnica y la
responsabilidad social del trabajo de los científicos. En correspondencia con
estas necesidades, el derecho internacional tendrá que evolucionar en
materia de propiedad intelectual y de conservación ambiental. Sólo así los
conocimientos y las nuevas tecnologías que surjan en este campo podrán
constituir un factor de progreso para la Humanidad.
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ANEXOS | 12
BIBLIOGRAFÍA | 13
http://www.xtec.es/~jcarrasc/transgenicas.htm
http://www.agrobio.org/index.php
http://cls.casa.colostate.edu/CultivosTransgenicos/index.html
http://www.ipn.uni-kiel.de/eibe/UNIT09ES.PDF
http://www.asebio.com/
http://www.amc.unam.mx/Noticias/contenido_doctrans.html
48 Cristina Rivas Wagner
Alberts, Bruce; Bray, Dennis; Lewis, Julian; Raff, Martin; roberts, Keith &
Watson, James D. (1992). Bilogía molecular de la célula. 2™ edición.
Editorial Omega.