ANALIZADOR DE pH

El analizador de pH se utiliza para determinar la concentración de iones del gas

hidrógeno [H+] en una disolución. Este equipo permite realizar mediciones de la
acidez de una solución acuosa, siempre que el mismo sea utilizado de forma
cuidadosa y se ajuste a procedimientos plenamente comprobados. A los
analizadores de pH se les denomina, además, pHmetros, monitores de pH o
potenciómetros.

Procedimiento general de calibración

Los analizadores de pH normalmente deben ser calibrados antes de ser utilizados,

a fin de garantizar la calidad y exactitud de las lecturas.

Los procedimientos que se realizan son los siguientes:

1. Calibración de un punto. Se realiza en condiciones de funcionamiento y uso

normal. Utiliza una solución de referencia de pH conocido.

2. Calibración de dos puntos. Se realiza si se requiere efectuar mediciones muy

precisas. Utiliza dos soluciones de referencia de pH conocido. Igualmente, si el
instrumento se utiliza de forma esporádica y si el mantenimiento que recibe es
eventual.

BALANZAS

La balanza es un instrumento que mide la masa de un cuerpo o sustancia,

utilizando como medio de comparación la fuerza de la gravedad que actúa sobre
el cuerpo. La palabra proviene de los términos latinos bis que significa dos y linx,
plato. Se debe tener en cuenta que el peso es la fuerza que el campo gravitacional
ejerce sobre la masa de un cuerpo, siendo tal fuerza el producto de la masa por la
aceleración local de la gravedad. [F = m x g]. El término local se incluye para
destacar que la aceleración depende de factores como la latitud geográfica, la
altura sobre el nivel del mar y la densidad de la tierra, en el lugar donde se efectúa
la medición. Dicha fuerza se mide en Newton. La balanza tiene otros nombres,
entre los que destacan báscula y pesa.

Calibración de las balanzas

El proceso de calibración de balanzas debe ser realizado por personal capacitado

específicamente en esta actividad. Como aspecto fundamental se destaca que la
calibración se debe realizar con base en los lineamientos de la OIML o de otra
entidad equivalente como puede ser la Sociedad Americana para Ensayo de
Materiales (ASTM), instituciones que han desarrollado metodologías para clasificar
las pesas o masas patrón, utilizadas en los procesos mencionados. A
continuación, se incluye la tabla de clasificación de pesas de referencia que utiliza
la OIML.

Rutinas de mantenimiento

La balanza se caracteriza por ser un instrumento de alta precisión. Por tal motivo
las rutinas de mantenimiento a cargo del operador son mínimas y se encuentran
limitadas a las siguientes:

Actividades diarias 1. Limpiar el platillo de pesaje, para que este se encuentre libre
de polvo o suciedad. La limpieza se efectúa con una pieza de tela limpia que
puede estar humedecida con agua destilada. Si es necesario retirar alguna
mancha, se puede aplicar un detergente suave. También se puede usar un pincel
de pelo suave para remover las partículas o el polvo que se hubiesen depositado
sobre el platillo de pesaje.

2. Limpiar externa e internamente la cámara de pesaje. Verificar que los vidrios

estén libres de polvo.

3. Verificar que los mecanismos de ajuste de la puerta frontal de la cámara

ANALIZADOR DE ELISA

El analizador de ELISA es un espectrofotómetro especializado, diseñado para

efectuar la lectura de los resultados de una técnica que se utiliza para determinar
la presencia de anticuerpos o antígenos específicos presentes en una muestra. La
técnica se basa en la detección de un antígeno inmovilizado sobre una fase sólida,
mediante anticuerpos que, directa o indirectamente, producen una reacción cuyo
producto puede ser leído por el espectrofotómetro. Se le conoce también con el
nombre de Lector de ELISA. La palabra ELISA es el acrónimo de las palabras en
lengua inglesa Enzyme-Linked Immunosorbent Assay.

Calibración del analizador de ELISA

La calibración de un analizador de ELISA es un proceso especializado que debe

realizar un técnico o ingeniero debidamente entrenado, siguiendo las instrucciones
que para el efecto brinda cada fabricante. Para efectuar la calibración se requiere
disponer de un juego de filtros grises, los cuales se encuentran montados en una
placa de igual geometría a las utilizadas para efectuar los análisis. Los fabricantes
suministran dichos filtros y pueden ser utilizados para realizar calibraciones a
cualquier longitud de onda de las que utiliza el equipo. Los filtros de calibración
disponen de al menos tres valores de densidad óptica, preestablecidos dentro de
los rangos de medición; uno bajo, uno medio y el último, un valor alto. Para
efectuar la calibración se realiza el siguiente proceso:

1. Colocar el filtro de calibración en el equipo.

2. Efectuar una lectura completa con el filtro de calibración. Verificar si se

presentan diferencias en las lecturas obtenidas de canal a canal. Si es así, invertir
el filtro (180°) y repetir nuevamente la lectura para descartar que las diferencias
puedan ser atribuibles al filtro en sí. Por lo general, se acepta que el instrumento
no requiere calibración, si se encuentra ajustado en dos longitudes de onda.

3. Verificar si el lector está descalibrado. Si es así, proceder a la calibración,

siguiendo la rutina definida por el fabricante, verificando especialmente que la
linealidad de las lecturas se mantenga lo más rigurosamente posible.

4. Si no se dispone de filtro de calibración, verificar la misma colocando una

solución de color en los pozos de una placa y efectuando en seguida una lectura
completa. Luego invertir la placa 180° y efectuar una nueva lectura. Si ambas
lecturas presentan valores promedio idénticos en cada fila, el analizador se
encuentra calibrado.

5. Verificar si el desplazamiento de la placa se encuentra calibrado, columna por

columna. Colocar una placa vacía y efectuar las lecturas. Si no se observan
diferencias medias entre las lecturas de columna a columna de la primera a la
última, podría asumirse que el avance se encuentra calibrado.

Rutinas de mantenimiento

Las rutinas que se describen a continuación están enfocadas exclusivamente al

analizador de ELISA. El mantenimiento del lavador de ELISA está tratado en el
capítulo correspondiente.

PIPETAS

Las pipetas son dispositivos que se utilizan para medir o transvasar pequeños
volúmenes de líquido de un recipiente a otro, con gran exactitud; se caracterizan
por carecer de un depósito. Las pipetas tienen gran diversidad de modelos.
Inicialmente, se fabricaron en vidrio; en la actualidad, existe una amplia gama de
opciones. Se destacan las pipetas de volumen fijo y las de volumen variable, las
cuales en general disponen de controles mecánicos. También se han introducido
recientemente en el mercado pipetas que disponen de controles de tipo
electrónico. En el presente capítulo se tratan los aspectos referentes al
mantenimiento y calibración1 de las pipetas mecánicas, las cuales se conocen
como pipetas tipo Gilson
Conceptos de calibración de pipetas

La calibración de las pipetas se realiza utilizando procedimientos completamente

estandarizados y cuya elección depende principalmente del volumen de las
muestras obtenidas para efectuar la calibración. Mientras más pequeño sea el
volumen, más exigente y costoso el proceso de calibración. En este capítulo se
realiza una breve descripción del proceso gravimétrico, el cual se utiliza con
pipetas que dispensan volúmenes comprendidos entre los 20 µl (microlitros) y 1 ml
(mililitro).