Compartimentos y Transporte

Intracelulares
BQ. PAMELA LUTTGES

Organelos rodeados por membrana en una célula animal

Funciones principales de los compartimentos de una célula eucarionte

Compartimento Función principal

Citosol (1) 54% Contiene muchas rutas metabólicas, Síntesis de
proteínas.
Núcleo (1) 6% Contiene genoma, Síntesis de DNA y RNA.
Retículo Endoplásmico (1) 12% Síntesis de la mayoría de los lípidos.
Participa de la síntesis de proteínas para su distribución a
muchos organelos y mb plasmática.
Aparato de Golgi (1) 3% Modificación, clasificación y empaquetamiento de
proteínas y lípidos para su secreción o transferencia a
otros organelos.
Lisosomas (300) 1% Degradación intracelular.
Endosomas (200) 1% Distribución del material endocitado.
Mitocondrias (1700) 22% Síntesis de ATP por fosforilación oxidativa.
Cloroplastos Síntesis de ATP y fijación de C por fotosíntesis.
Peroxisomas (400) 1% Oxidación de moléculas tóxicas.
Cantidades relativas de los distintos tipos de membrana son diferentes en
dos clases de células eucarióticas
Cada compartimento contiene una colección típica de proteínas las que
deben ser transferidas desde el citosol

¿Cómo llegan a su organelo de destino y dónde se sintetizan esas proteínas?

Las proteínas ingresan a los organelos por medio de tres mecanismos

1.- Transporte por compuertas (gated):

Las proteínas se mueven entre el citosol y el
núcleo a través de complejos de poro nuclear
en la envoltura nuclear que funcionan como
una puerta selectiva.
Las Proteínas se transportan plegadas

2.- Translocación transmembrana:

Proteínas translocadoras de membrana
transportan directamente proteínas a través
de la membrana desde el citosol a un
espacio distinto.
Las Proteínas se transportan desplegadas

3.- Transporte vesicular:

Puede mover proteínas solo entre
compartimentos equivalentes
Las Proteínas se transportan plegadas

Energía
Las secuencias señal conducen a las proteínas al organelo correspondiente

The Nobel Prize in Physiology or Medicine 1999 Günter Blobel, for the discovery that "proteins
have intrinsic signals that govern their transport and localization in the cell.”
Algunas secuencias señales típicas
En el citoplasma los ribosomas siguen dos caminos en la síntesis de
proteínas.
Ribosomas adheridos Ribosomas libres
a la membrana del RE.
Destino de proteínas sintetizadas: el nucleo.
Las proteínas entran al núcleo a través de los poros nucleares

La membrana nuclear externa se continua con el RE

El complejo de poro nuclear (NPCs) forma una puerta a través de la
cual las moléculas entran y salen del nucleo

-La envoltura nuclear

contiene 3000-4000 NPCs

- Cada NPC puede

transportar 500 molec/seg

RNAm inmaduros
no salen del
El complejo de poro nuclear permite: núcleo
• la difusión pasiva de iones y pequeñas moléculas hidrofílicas.
• el transporte activo selectivo de partículas mayores 9 nm como proteínas nucleares, RNAs y
ribonucleoproteínas secuencia señal
Transporte hacia y desde el núcleo: transporte pasivo y activo

• Histonas
• DNA y RNA polimerasas
• Proteínas reguladoras de genes
• Proteínas de procesamiento del RNA

• tRNA
• mRNA

El intercambio de material entre el núcleo y el citoplasma es esencial para el

funcionamiento básico de estas células y debe ser estrictamente controlado.

Transcripción de ARN y síntesis de proteínas están separados en el tiempo y el espacio en los eucariontes.
La energía aportada por la hidrólisis del GTP impulsa el transporte nuclear.
Receptores de importación nuclear
Receptores nucleares de importe
Receptor de importe nuclear GTP y proteínas reguladoras
Secuencia de señal de localización
nuclear (NLS)

Secuencia señal de
localización nuclear

GTP GDP

Transporte activo de proteínas plegadas

y ribosomas ensamblados. Receptores nucleares de exporte
GTP y proteínas reguladoras
Secuencia de señal de exporte (NES)
 Importación nuclear del receptor de glucocorticoides
Receptor de
glucocorticoides
es una
proteínas
reguladora de
genes cuando
está unido a la
hormona

En células sin hormona: el receptor está en el citosol unido a proteína chaperona (hsp 90)
Destino de proteínas sintetizadas: mitocondria y cloroplasto.

Las mitocondrias tienen su propio ADN y manufacturan

un pequeño número de sus propias proteínas.

Sin embargo la mayoría de las proteínas mitocondriales

son codificadas por los genes nucleares.
Las proteínas se despliegan e ingresan a la mitocondria y cloroplasto
Proteínas translocadoras en las membranas de la mitocondria

Complejo TOM: transfiere proteínas a través de la membrana externa

Complejos TIM: transfieren proteínas a través de la membrana interna
 Importación de proteínas a las mitocondrias

Una secuencia señal N-terminal dirige a

las proteínas a la matriz mitocondrial.

Proteínas chaperonas para

mantener la proteína
desplegada. Dependiente de
ATP

El complejo TOM inserta la

proteína en la membrana

La importación requiere
de receptores de la
membrana externa y
translocones en ambas
membranas.

peptidasa
Con una secuencia de clasificación para
su localización específica dentro del
organelo
Vías para mover proteínas desde el citosol hacia la membrana interna de la
mitocondria o el espacio intermembrana
Destino de proteínas sintetizadas: peroxisomas
Teoría de la formación de los peroxisomas y transporte de proteínas hacia él

 Ninguna de las secuencias de localización es fragmentada después de la

importación.
 La importación requiere de un receptor de importe
 La translocación depende de la hidrólisis de ATP.
 Importa proteínas plegadas

Todas las proteínas peroxisomales son sintetizadas en ribosomas citosólicos e incorporadas en el

organelo postraduccionalmente.
 Destino de proteínas sintetizadas: RE

Punto de entrada para proteínas

del propio RE y para :
Aparato de Golgi
Endosomas
Lisosomas
Membrana plasmática
Secreción
El RE es la red membranosa mas extensa de las células eucariontes

Retículo endoplásmico
Las proteínas ingresan al Retículo Endoplásmico mientras se sintetizan

Vesículas de transporte
El complejo mRNA, ribosoma, péptido señal y SRP no continua la síntesis
de proteína hasta que el SRP se une a su receptor en la membrana del RE

Todo este proceso requiere energía (hidrólisis de GTP)

Partícula de
Reconocimiento
de Señal

Receptor SRP

Secuencia señal abre el

canal
de translocación
 Las proteínas solubles se liberan dentro del lumen del RE

• En el RE se pueden sintetizar
proteínas de membrana o proteínas
solubles en el lumen (secretorias).

• Una “peptidasa de señal”

fragmenta la secuencia señal de la
proteína recién sintetizada.

• Esta proteína es rápidamente

acompañada por chaperonas que
asisten el correcto plegamiento. Peptidasa

• Este proceso requiere ATP.

Proteína Soluble

Chaperonas
 Cómo se integran las proteínas de membrana?
Las señales de comienzo y término de transferencia determinan la disposición de una proteína
transmembrana en la bicapa lipídica

Secuencia de término de la transferencia

Proteína de paso único

Proteína
transmembrana

Secuencia señal de RE
Cómo se integran las proteínas de membrana de multipaso?
Las proteínas integrales de membrana poseen secuencias hidrofóbicas (señal interna)
características que detienen la translocación.
 Glicosilación de proteínas en el RE
En el RE las proteínas son glicosiladas (N-glicosilación en residuo de asparagina) a partir de la
transferencia de un oligosacárido desde un lípido (dolicol) de membrana por una enzima asociada
al traslocador (oligosacaril transferasa)

trascolador
enzima
 Plegamiento de Proteínas en el RE

La glicosilación es utilizada como un control de calidad del plegamiento

de la proteína.

Chaperona

Chaperona
enlaces disulfuro
El ciclo se repite hasta plegar la proteína correctamente o sino ….

Control del plegamiento

El ciclo se repite hasta plegar la

proteína correctamente

Chaperona
 Exportación y degradación de proteínas mal plegadas

Proteínas mal plegadas son sacadas del RE y degradadas por el proteosoma.

 Tráfico Vesicular
Las vesículas brotan de una membrana y se fusionan con otra; transportando los
componentes de la membrana y las proteínas solubles entre los compartimentos celulares

El RE es el punto de entrada
para proteínas del propio RE
y para proteínas :

Aparato de Golgi
Endosomas
Lisosomas
Membrana plasmática
Proteínas de Secreción
Transferencia de proteínas solubles y transmembrana entre
compartimentos: transporte vesicular

COMPARTIMENTO
DADOR

FUSIÓN

COMPARTIMENTO
DIANA
GEMACION
 La formación de vesículas depende del ensamblado de una
cubierta proteíca

Depresión recubierta por Clatrina

Vesícula desnuda
Receptor de carga

GTP

Vesículas recubiertas con Clatrina

Las moléculas de Clatrina ayudan a dar a las membranas la forma
de vesículas
 Las vesículas de transporte deben saber QUÉ llevar y DÓNDE.

QUÉ LLEVAR? DÓNDE LLEVAR?

receptores de carga receptores específicos de transporte

 El acoplamiento vesicular depende de las proteínas SNARE
SNARE marcadores moleculares que identifican a las vesículas de acuerdo con su carga y su origen

Cada v-SNARE en una membrana

vesicular une específicamente a un
complejo de proteínas t-SNARE en la
membrana blanco, induciendo la fusión
de las dos membranas.

Después que la fusión esta completa, el

complejo SNARE es desensamblado en
una reacción dependiente de ATP y
mediada por otras proteínas citosólicas.

Proteínas Rab (GTPasas) también

participan en el reconocimiento
vesicular

Las proteínas Rab y las SNARE ayudan a dirigir las vesículas de transporte a su compartimento diana
 Fusión de las vesículas de transporte

• Acercar a 1,5 nm
• Desplazar el H2O
• Energía (ATP)

Compartimento aceptor
Las vesículas se distinguen por las proteínas que forman la cubierta y las rutas de
transporte que ellas hacen

Transporte anterógrado: mediado por vesículas recubiertas por COP II

Distancia corta : ER Golgi Difusión simple

Distancia larga : Golgi final neuronal Proteínas motoras
(Kinesinas/Dineínas, Miosina I)
Las vesículas se distinguen por las proteínas que forman la cubierta y las rutas de
transporte que ellas hacen

Transporte retrógrado: mediado por vesículas recubiertas por COP I

 ¿Cómo se recuperan las proteínas residentes del RE?
Gracias a una secuencia (Secuencia KDEL) en la porción C-terminal de las proteínas
residentes (Lys-Asp-Glu-Leu) del RE
que es reconocido por un receptor específico (Receptor de KDEL)
Las proteínas se modifican y se distribuyen aún mas en el complejo
de Golgi

Es una vía muy ordenada

Eliminación de azucares

Oligosacáridos complejos

Modificaciones químicas de lípidos y proteínas

 El Complejo de Golgi está formado por una pila de sacos aplanados
delimitados por membrana
Nucleo

Red cis
Golgi

Cisternas

Red
trans
Golgi

Membrana plasmática
 Funciones Bioquímicas del Golgi
 Glucosilación  Ensamblaje de lipoproteínas
 Procesamiento de proteínas  Iniciación y elongación de glúcidos ricos en
 Empaquetamiento & concentración de xilosa, propios de heparinas, condroitín
proteínas sulfato, dermatan sulfato.
 Clasificación de proteínas

• Las proteínas son modificadas

Red Cis en su paso por el Golgi.

• Una de las principales

modificaciones es sobre
proteínas glicosiladas, a las
que se le agregan más
azúcares.

• Estos procesos están

confinados a distintas partes
del organelo y son
secuenciales y ordenados

Red Trans
 Las proteínas secretorias se liberan de la célula por exocitosis
En las células secretoras las vias reguladas y constitutivas de la exocitosis divergen en la red
del trans Golgi

• Prot. periféricas
• Matriz extracelular
• Fluido extracelular

¿Ejemplo?
Las vesículas secretoras empaquetan y descargan cúmulos
concentrados de proteína
 Vías endocíticas
Fagocitosis: endocitosis de grandes partículas en fagosomas (células, bacterias)
Pinocitosis: endocitosis de fluido y biomoléculas en pequeñas vesículas
Endocitosis mediada por receptor: mecanismo selectivo de endocitosis de moléculas

Los líquidos y las macromoléculas

son captados por pinocitosis
 Las células fagocíticas especializadas ingieren partículas grandes

Fagocitosis: endocitosis de grandes partículas en fagosomas (células, bacterias)

 La endocitosis mediada por receptor proporciona una vía específica
hacia el interior de las células animales
Endocitosis de LDL

Depresión
recubierta
por Clatrina

HIPERCOLESTEROLEMIA
FAMILIAR
Receptor de LDL defectuoso
 El destino de las proteínas receptoras implicadas en la endocitosis
depende del tipo de receptor

Inmunoglobulinas
maternas
Receptor de Ig
 Los lisosomas son los sitios principales de la digestión intracelular
Un lisosoma contiene enzimas hidrolíticas y una bomba de H+

Materiales extracelulares
Organelos inservibles

nucleótidos Amino ácidos

Enzimas marcadas con una manosa-6-P

azúcares

pH ácido
(Bomba de protones)
Los materiales destinados a la degradación siguen vías diferentes
hacia los lisosomas

De dónde proviene la carga de los lisosomas?