Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas

Departamento de Orgánica
Métodos de instrumentación y separación analítica

PRÁCTICA 2:
ANÁLISIS CUANTITATIVO POR CROMATOGRAFÍA EN
PLACA FINA

EQUIPO 1

 De los Santos Martínez Estelly Cristel

 Mercado Uriostegui Alan Joel

GRUPO: 6FM1
07 de marzo de 2018
 OBJETIVOS:
 Analizar por cromatografía en capa fina la concentración de
benzofenona en una muestra problema, contaminada con
dibenzalacetona
RESULTADOS:
SOLUCIÓN ÁREA mm2 Concentración mg/mL
Original 6.0318 24.017
8 5.5292 19.21
4 4.2411 9.6068
2 3.6049 4.8034
1 2.9452 2.017
Problema 3.7384 6.6322
TABLA 1: Concentración y áreas de las muestras usadas para la construcción de la curva tipo.

El área se calculó mediante la fórmula; 𝐴 = 𝜋 × 𝑎 × 𝑏

CURVA TIPO
7

6 R² = 0.991
Área mm2

4
Linear ()

2
0 5 10 15 20 25

Concentración mg/mL

Grafica 1: Curva tipo que se uso para interpolar el dato de la muestra problema. La curva
presenta una R2=0.991
 Figura 1: Cromatofolio de diferentes Figura 2: Benzofenona contaminada con
concentraciones de benzofenona dibenzalacetona por duplicado,
para construcción de la curva tipo. comparada con referencia(Benzofenona).

DISCUSIÓN:
Para la realización de esta práctica se realizó una curva de calibración, con
diversas cantidades de solución que contenía benzofenona (analito), a
concentración conocida, esto es posible dado a que uno de los factores que va
a afectar a la mancha que se forma en el cromatofolio es la concentración del
analito que dejemos desarrollar en este, es decir si agregamos una mayor
cantidad de muestra el tamaño de la mancha que se formará al realizar la
cromatografía será mayor(1) esto nos dice que son directamente
proporcionales, sabiendo esto, se puede hacer uso de esta característica para
usar la cromatografía en placa fina como un método cuantitativo.
Una vez realizada la curva que era con diluciones del mismo analito en
concentraciones crecientes, se realizó otra placa donde se dejo correr nuestro
analito con impurezas, la cual era una sustancia colorida (dibenzalacetona) y a
concentración desconocida, esto para que nosotros pudiéramos determinar la
concentración. En esta placa nuestra muestra de concentración conocida nos
dio una mancha a la cual le determinamos el área con la fórmula previamente
descrita y posteriormente se interpoló en nuestra curva tipo, obteniéndose
una concentración de 6.63 mg/mL.
Es importante tomar en cuenta que, para la interpolación de un dato en una
curva tipo, la variable que estamos midiendo debe estar dentro del rango en
el que esta curva tipo esta construida, porque aunque no se encuentre dentro
de este se puede obtener un valor, sin embargo esté será inexacto porque
desconocemos el comportamiento de la curva a valores más altos o bajos a los
cuales está construida. A su vez es muy importante la forma de trabajo del
analista, pues la sensibilidad de la técnica nos provocaría cometer errores ante
el más mínimo fallo del analista, como agregar demás o menos.

CONCLUSIONES:
 La cromatografía en placa fina puede usarse como una técnica
cuantitativa.
 A mayor concentración de muestra mayor área de la mancha formada
en el cromatofolio.
CUESTIONARIO:
a) Define brevemente polaridad: Es una propiedad de las moléculas
que representa la separación de las cargas eléctricas en la misma
molécula, esta propiedad se relaciona directamente con la
solubilidad, el punto de ebullición de fusión y las fuerzas
intermoleculares.

b) ¿Qué adsorbente es más polar, la alúmina o el gel de sílice?

Investigue su composición química. La alúmina, es más activa
que el gel de sílice, por eso se usa para separar compuestos
relativamente apolares. Composición, gel de sílice; (SiO2),
alúmina; Al2O3

c) Indique que disolvente es más polar:

a. ¿Benceno o cloroformo? Cloroformo
b. ¿Alcohol etílico (Etanol) o éter dietílico? Éter dietílico.

d) Si en una cromatografía en capa fina un compuesto desconocido

con Rf= 0.80 ¿De que modo se distribuye esta sustancia entre las
fases móvil y estacionaria? La sustancia es más soluble en la fase
móvil que en la estacionaria. ¿Cuál es su razón de distribución k?
 Si K = CS/CM siendo CS Y CM fase estacionaria y móvil
respectivamente, entonces K < 1

e) De acuerdo con sus resultados cromatográficos, que es más

polar la dibenzalacetona o la benzofenona: La dibenzalacetona
debido a que se retuvo más en la fase estacionaria, (Gel de sílice)
la cual es polar.
BIBLIOGRAFÍAS:
1. Dominguez, Xorge Alejandro. 1975. Cromatografía en Papel y en Capa
Delgada. Serie de Química. Organización de los Estados Americanos. Nº
16. U.S.A. pp 65-78 2. Bauer, Karin ; Gros, Leo and Sauer, W
2. UAM Dpto de docencia manual de prácticas 2015 consultado en:
https://www.uam.es/docencia/jppid/documentos/practicas/actuales/
guion-p6.pdf
3. Tabla de polaridad de disolventes. Manual de practicas Dpto orgánica
consultado en: http://organica1.org/1311/1311tablas.pdf
4. Principios generales de cromatografía, pág: 2.2 consultado en:
https://rua.ua.es/dspace/bitstream/10045/8246/7/T2cromagraf.pdf