Activación de un microorganismo y cultivo

de cepas

J.Arana, E. Arrese y C.Cajavilca

Resumen

El laboratorio a tratar consistió en la activación de la levadura Sacchraomyces

cerevisiae, que es comúnmente llamado levadura de panadero. Durante el laboratorio
se explicó que la levadura se encuentra “dormida” debido a un proceso de lioxifilación
el cual el material biológico es desecado en frío, que sirve para conservar sin daño los
mas diversos materiales biológicos. El producto al ser enfriado, conserva sus
propiedades al rehidratarse. Se conservó en forma de pellet, que son aglomerados de
material orgánico, a 4ºC en una refrigeradora. Se detalló que para que la levadura
Sacchraomyces cerevisiae se active, se requiere que ésta este en un medio el cual
contenga azúcar casero, miel o jugo de caña, para que la levadura se despierte y se
alimente del azúcar, además de que debe estar en un medio líquido y en relación de
3% con respecto al sustrato. Para que esta reacción se lleve a cabo, la levadura
necesita de oxígeno por ser aeróbico, por lo que se deja un espacio en la botella y no
se llenó completamente. Se hizo la activación del microorganismo en una botella
Gatorade de 350ml, disolviéndose glucosa 2gr/100ml y almidón de papa 2gr/100ml en
100ml de agua, pesando correctamente y evitando que se ensucie la balanza. Luego
de esto se colocó en la autoclave a 15 psi. y 120ºC por 15 min. para evitar que se
formen otros microorganismos en la botella. Para agregar la levadura se usó el asa de
siembra, el cual previamente se calentó al rojo vivo con el mechero de alcohol y luego
enfrió para esterilizar la punta a usar. Luego se agregó la levadura del pan a la
solución, que era de una tonalidad marrón de consistencia pastosa, se cerró y
finalmente se guardó en la caja.

Previamente a este laboratorio, se procedió con observar las muestras de agar agar
en la caja petri, del laboratorio de la semana pasada, para ver si el medio de cultivo
estuvo correctamente estéril. Lamentablemente se comprobó que el medio de cultivo
sufrió una ligera contaminación, en el cual se formo un hongo conocido como
penicillium chrysogenum, el cual es muy frecuente en el medio ambiente y es conocido
por atacar las frutas una vez que se fermentan. Se observó que el hongo tenia un color
plomizo con bordes blancos en los extremos (ver Fig. 1 y Fig. 2).
Materiales

Para la activación de un microorganismo se necesitó:

A.- Material de Vidrio.

 Botella Gatorade 350ml.

 Probeta de 50ml.

B.- Reactivos

 2gr. Glucosa
 2gr. Almidón de papa.
 100ml. de agua.

C.- Material de siembra

 Asa de siembra con punta de tungsteno.

 Mechero de alcohol.

D.- Preparación de la muestra

 Balanza de precisión de 2 dígitos para laboratorio.

 Autoclave de laboratorio.
Método

Procedimiento realizado para la activación de un microorganismo:

1. Preparar en una botella de vidrio de 350ml., 100 ml. de agua des ionizada.
2. Pesar 2gr de glucosa.
3. Pesar 2 gr. de almidón de papa.
4. Agregar a la botella de vidrio de 350ml. y colocar en la autoclave a 15psi y
120ºC.
5. Limpiar el asa de siembra con el mechero de alcohol hasta que este al rojo vivo
y luego dejar enfriar.
6. Añadir la levadura de pan Sacchraomyces cerevisiae con el asa de siembra y
luego cerrar.
7. Esperar algún resultado.

Resultado

Se puede apreciar un color marrón en la botella, el cual se debe dejar unas 2 horas
para poder ver el resultado de la cepa. No se observó un cambio significativo al
agregar la levadura, lo cual parece extraño.

Existe la posibilidad que la levadura se halla secado, debido a que se informó que esa
levadura fue dejada por alumnos de tesis el ciclo pasado, y la levadura de ese tipo
solo se puede conservar fresca si esta en estado de pastillas (pellet), y al tener esa
consistencia arenosa y el frasco al estar cerrado desde hace tiempo quiere decir que
esa levadura ya se degradó hace tiempo.

Respecto a la preparación del cultivo de agar agar, puede haberse formado el hongo
debido a un error en la esterilización de la caja petri al no añadirle alcohol, además es
posible que en el momento de abrir la placa, el aire haya dejado pasar algún
microorganismo común del ambiente.

Bibliografía y Enlaces externos

Consultado el 30/9/2009 a las 9:00 am

 http://www.invap.net/indus/liofilizacion/index.html
 http://es.wikipedia.org/wiki/Pellet
 http://www.uoguelph.ca/~gbarron/MISCELLANEOUS/penicill.htm
Anexo

Fig 1.- Primera muestra del cultivo de agar agar con penicillium chrysogenum.

Fig 2 .- Segunda muestra del cultivo de agar agar con penicillium chrysogenum.