ENZIMAS

En todo ser vivo se producen constantemente innumerables reacciones

químicas. Muchos de ellas tienden a transformar las sustancias introducidas con los
alimentos a fin de obtener energía y materia prima para la síntesis de nuevas
estructuras moleculares.

La velocidad y eficiencia con las que se realizan las transformaciones

bioquímicas son notables. Si se pretendiese repetirlas en el laboratorio, se
comprobaría que solo ocurre si se suministra calor, o pH extremos, o grandes
presiones, etc. recursos todos incompatibles con la subsistencia de la célula.

Las reacciones químicas se realizan en los seres vivientes a gran velocidad,

en condiciones muy moderadas de temperatura, pH, presión, etc., gracias a la
existencia de catalizadores.

CATALIZADORES

Un catalizador es un agente capaz de acelerar una reacción química, sin

formar parte de los productos finales ni desgastarse en el proceso. En los medios
biológicos se desempeñan como catalizadores macromoléculas denominadas
enzimas.

Como todo catalizador, las enzimas actúan disminuyendo la energía de

activación1 de una reacción.

Las sustancias sobre las cuales actúan las enzimas reciben el nombre de
sustratos.

La especificidad de una enzima le permite distinguir con gran selectividad

entre diferentes sustancias y aun entre isómeros ópticos. Por ejemplo, la
glucoquinasa, enzima que cataliza una reacción de fosforilación de D-glucosa, no
actúa frente a L-glucosa.

NOMENCLATURA Y CLASIFICACION

Las enzimas suelen designarse agregando el sufijo asa al nombre del sustrato
en el cual actúan. Por ejemplo, amilasa ureasa y tirosinasa. También se denominan
las enzimas según el tipo de reacción catalizada, por ejemplo deshidrogenasas y
descarboxilasas.

Por otra parte, ciertas enzimas conocidas desde hace mucho tiempo tienen
nombres arbitrarios. Entre ellas ptialina salival, pepsina del jugo gástrico, tripsina y
quimotripsina de jugo pancreático.

1: Energía que debe suministrarse a los reactivos para que alcance el estado de transición u estado
activado, a partir del cual la reacción trascurre espontáneamente.
Los 6 grandes grupos de la clasificación internacional son:

 OXIDORREDUCTASAS: Catalizan reacciones de oxidorreducción.

Están asociadas a coenzimas (deshidrogenasas, oxidasas, oxigenasas,
etc.) Como ejemplo de este grupo de enzimas citaremos el lactato
deshidrogenasa, que cataliza la oxidación de lactato a piruvato y
también la reacción inversa. La enzima utiliza NAD como coenzima.

 TRANSFERASAS: Catalizan la transferencia de un grupo de átomos

como amina, carboxilo, carbonilo, metilo, acilo, glicosilo, fosforilo,
desde un sustrato considerado donante, a otro compuesto aceptor. Por
ejemplo aminotransferasas o transaminasas, que catalizan la cesión
del grupo amina de un compuesto a otro.

 HIDROLASAS: Catalizan la ruptura de enlaces C-O, C-N, C-S, y O-P

por adición de H2O. el nombre recomendado se forma con el del
sustrato y el sufijo asa. Por ejemplo, la arginasa, que cataliza la
hidrólisis de arginina para formar urea.
 LIASAS: Catalizan la ruptura de uniones C-C, C-S, C-N (excluyendo
uniones peptídicas) de la molecula del sustrato por un proceso distinto
al de hidrólisis. Algunos eliminan grupos del sustrato y forman dobles
ligaduras o ciclos, o agregan grupos a enlaces dobles. Por ejemplo, la
aldolasa, que divide la fructosa 1,6 bisfosfato en 2 triosasfosfatos.

 ISOMERASAS: Interconvierten isómeros de cualquier tipo, ópticos,

geométricos o de posición. Algunas de ellas reciben nombres triviales,
como epimerasa, cis-trans isomerasas, cicloisomerasas. Por ejemplo,
triosafosfato isomerasa.

 LIGASAS: Catalizan la unión de 2 moléculas, acopladas con la

hidrolisis de un enlace de alta energía de nucleósidos trifosfatos. La
designación sintetasa, que suele asignarse a estas enzimas, debe
reservarse para las que responden estrictamente a la definición
precedente; no confundir con sintasas. Para evitar errores, se
recomienda llamar ligasas a las enzimas de este grupo. Por ejemplo,
glutamina sintetasa, actúa en la reacción entre ácido glutámico y
amoníaco para formar la glutamina. La energía necesaria para la
síntesis es provista por hidrolisis de ATP.
NATURALEZA QUIMICA

Hasta hace pocos años estaba firmemente arraigado un concepto: “todas las
enzimas son proteínas”. Sin embargo, se han aislados moléculas de ARN con
actividad catalítica, las llamadas ribozimas.

Algunas enzimas están constituidas solo por AA. Existen enzimas formadas
por asociación de varias cadenas polipeptidicas, es decir, son oligómeros.
Frecuentemente las relaciones mutuas entre las subunidades constituyentes tienen
importancia funcional.

Coenzima: Muchas solo pueden realizar su función catalítica en asociación

con otra molecula no proteica, denominada coenzima. Estas pueden estar
firmemente unidas a la enzima por uniones covalentes u otro tipo de enlaces
fuertes, formando complejos difíciles de separar. El sistema completo se llama
holoenzima y está constituido por la proteína, designada apoenzima y la
coenzima.

Oxidorreductasas, transferasas, isomerasa y ligasas requieren

coenzimas.

Las coenzimas intervienen activamente en la reacción experimentando

cambios que compensan las transformaciones sufridas por el sustrato.

Si bien siempre participan en un determinado tipo de reacción, una

coenzima puede unirse a distintas apoenzimas y actuar frente a diferentes
sustratos.

La especificidad de la holoenzima depende de la porción proteica.

METALOENZIMAS

En algunas enzimas, la presencia de iones metálicos (Fe, Cu, Zn, Mg, Mn, Se,
Ca) es indispensable para la acción catalítica. Estos contribuyen a la reacción por su
capacidad para atraer o donar electrones, también contribuyen al mantenimiento de
las estructuras terciarias y cuaternarias de la molécula de enzima. La actividad de
algunas enzimas depende de la presencia de determinados iones en el medio. Por
ejemplo, cationes Na+ y K+, o aniones Ca-.
CATALISIS ENZIMATICA

Las enzimas aumentan la velocidad de reacción disminuyendo la energía de

activación. De esta manera, mayor número de moléculas alcanzan el estado
intermediario o de transición y la transformación química se acelera.

Durante el curso de la reacción la enzima se une efectivamente al o los

sustrato/s, formando un complejo transitorio.

Si una enzima E cataliza la transformación del sustrato S en productos P,

primero se unen enzima y sustrato para formar el complejo ES, el cual luego se
disocia en enzima y producto. El proceso puede representarse con la reacción:

SITIO ACTIVO

Para formar el complejo ES, el sustrato se une a un lugar específico de la

enzima. Esta región recibe el nombre de sitio activo, sitio catalítico, centro activo o
lugar de sustrato y es donde se cumple la acción catalítica.

El sitio activo es una agrupación de un número no muy grande de AA,

distribuidos espacialmente de manera precisa.

La unión del sustrato a la enzima comprende la formación de enlaces no

covalentes (puente de hidrogeno, enlaces iónicos e interacciones hidrofobicas y de
van der Waals)

A fines del siglo XIX, Fisher emitió una hipótesis en la cual homologaba la
unión del sustrato a la enzima con el encaje reciproco de la llave cerradura. Existiría
complementariedad estructural para el ensamble preciso. Actualmente tiene más
aceptación la hipótesis de Koshland de adaptación o ajuste inducido, que considera
a la enzima con una estructura dotada de plasticidad y flexibilidad.
ZIMOGENOS

Algunas enzimas se sintetizan en las células en estado de precursores

inactivos llamados zimógenos.

Algunos ejemplos de estos son los componentes de los jugos digestivos,

secretados como zimógenos por las glándulas originarias y activados al llegar a la
luz del tracto gastrointestinal.

SISTEMAS MULTIENZIMATICOS

Las enzimas pueden encontrase libres en el citosol, incluidas en organelas o

integradas en estructuras de membranas. En algunos casos, se forman complejos
organizados, constituidos por varias enzimas diferentes cuyas acciones se
complementan.

También existen enzimas multifuncionales, así llamadas por presentar varios

sitios catalíticos distintos en una misma cadena polipeptidica; ejemplo, ácido graso
sintasa.

DETERMINACION DE LA ACTIVIDAD

La actividad de una enzima puede determinarse midiendo la cantidad de

producto formado, o de sustrato consumido, en un tiempo dado, en una mezcla de
todos los factores requeridos para la reacción.

FACTORES QUE MODIFICAN LA ACT. ENZIMATICA

INHIBIDORES ENZIMATICOS

Existen agentes químicos que inhiben la acción catalítica de enzimas.

Algunos de ellos ejercen su acción uniéndose a sitios o grupos funcionales
esenciales de la molécula de enzima.

La inhibición puede ser reversible o irreversible.

INHIBIDORES IRREVERSIBLES: Producen cambios permanentes en la

molécula de enzima, con deterioro definitivo de su capacidad catalítica.

Como ejemplo de este tipo de inhibidores, citaremos los venenos

organofosforados, utilizados como insecticidas. Producen inhibición irreversible de
acetilcolinesterasa, enzima muy importante en el sistema nervioso.

Dentro de este tipo de sustancias se incluyen a los llamados “inhibidores

suicidas”. Son sustancias que, por su semejanza estructural con el sustrato, pueden
ocupar el sitio activo y ser transformados por la enzima en productos. Estos forman
uniones covalentes con la enzima y bloquean irreversiblemente al sitio activo; es
como si la enzima se hubiese suicidado.

INHIBIDORES REVERSIBLES: Existen 3 tipos de inhibición reversible:

competitiva, no competitiva y anticompetitiva.

a) Inhibidores competitivos: Aumentan el valor de la constante de

Michaelis (Km), pero no modifican la velocidad máxima (Vmax) de la
enzima. Estos efectos se alcanzan por diferentes mecanismos.
1. En algunos casos, el inhibidor presenta similitud
estructural con el sustrato y ambos compiten por el sitio
activo de la enzima.
2. Algunas moléculas actúan como inhibidores competitivos
uniéndose al sitio activo de la enzima a pesar de no
poseer similitud estructural con el sustrato.
3. En otros casos, inhibidor y sustrato se fijan a diferentes
sitios de la enzima, pero la unión de uno de ellos impide la
del otro, probablemente por que produce cambios
conformacionales.

La inhibición de tipo competitivo puede ser revertida aumentando la

concentración de sustrato. Si este predomina en la mezcla, tiende a
desplazar al inhibidor de su unión con la enzima.

b) Inhibidores no competitivos: Se unen a la enzima en un lugar de la

molécula diferente del sitio activo y disminuyen la V max sin modificar el
Km.
Este tipo de inhibición no es revertida por aumento de la
concentración de sustrato.
 La unión del sustrato con la enzima no está afectada; el inhibidor
se une ya sea a la enzima libre o al complejo ES.
c) Inhibidores anticompetitivos: Existe otro tipo de inhibidores reversibles,
denominados anticompetitivos o acompetitivos.
El inhibidor se une al complejo ES y forma el complejo inactivo
ESI.
Este tipo de inhibición se da en casos en los cuales participan
varios sustratos en la reacción. No es revertida por aumento de S.
REGULACION DE ACT. ENZIMATICA

La actividad de enzimas en las células es ajustada a los requerimientos

fisiológicos, cambiantes de momento a momento. Existen varios mecanismos de
regulación.

De acuerdo con el tipo de señal a la cual responden, las enzimas reguladoras

pueden distinguirse en alostericas y reguladas por modificación covalente.

 Alostericas: en algunas vías metabólicas, la enzima que cataliza la

primera etapa de la serie es inhibida por el producto de la última.
Cuando la cantidad de ese producto final excede las necesidades, se
frena el funcionamiento de la via reduciendo la actividad de la enzima
reguladora.

Se habla de inhibición por retroalimentación (feedback).

En enzimas alostericas, además del sitio catalítico, existen otros

sitios reguladores a los cuales se unen específicamente las moléculas
que actúan sobre su actividad catalítica. Estos agentes reciben el
nombre de moduladores, modificadores o efectores alostericos. Serán
positivos si estimulan y negativos si deprimen la actividad de la enzima.

 Modificación covalente: Hay también enzimas reguladas por adición o

sustracción de grupos unidos covalentemente.

La regulación covalente se realiza en varias enzimas por un

proceso de unión o eliminación de fosfatos. Existen también enzimas
cuya actividad es modulada por la inserción covalentes de otros
grupos.

ISOZIMAS

En un organismo, y aun en una célula, pueden existir proteínas diferentes

dotadas de la misma actividad enzimática. Esas distintas formas moleculares de una
enzima se denominan isoenzimas o isozimas.