MUESTREO DE

COSMTICOS
PARA EL ANLISIS MICROBIOLGICO

JESSICA ACOSTA FIGUEROA

GRADO EN QUMICA | 2014/2015
CONTENIDOS

2 ALCANCE Y APLICACIN

2 MTODO: RESUMEN

2
PRESERVACIN, CONTENEDORES,
MANEJO Y ALMACENAMIENTO

3
INTERFERENCIAS Y PROBLEMAS
POTENCIALES

3 EQUIPO

4 REACTIVOS

4 PROCEDIMIENTO

CONTROL DE CALIDAD
6
ASEGURAMIENTO / CALIDAD

REFERENCIAS
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1. ALCANCE Y APLICACIN
El propsito de este procedimiento operativo estndar (SOP) es ver como varia la
recogida de muestra para el anlisis microbiolgico de productos cosmticos.
Estos son procedimientos estndar de operacin (es decir, tpicamente aplicable)
que pueden variarse o cambiarse como necesario, depende de las condiciones del
lugar, las limitaciones del equipo o las limitaciones impuestas por el procedimiento.
En todos los casos, los procedimientos reales usados deben ser documentados y
descritos de forma adecuada en el informe.
2. MTODO: RESUMEN
Las muestras de productos cosmticos pueden ser recogidas utilizando una variedad
de mtodos y equipos en funcin del tipo de cosmtico, el tipo de muestra requerido,
la sustancia microbiolgica que se quiere analizar. Para llevar a cabo la recogida de
muestra, en primer lugar es importante asegurarse que cumple con el control de
calidad requerido por la legislacin europea EU Regulation 1223/2009 que ha estado
en vigor desde el 11 de julio de 2013. Se fortalece la seguridad de los productos
cosmticos y agiliza el marco para todos los operadores del sector.
3. PRESERVACIN, CONTENEDORES, MANEJO Y ALMACENAMIENTO
El Manual de Bacteriologa Analtica (Bacteriological Analytical Manual (BAM)) indica
una serie de recomendaciones para la manipulacin de las muestras de productos
cosmticos que van a ser sometidos a un anlisis microbiolgico.
Una vez que se recibe una muestra de un producto cosmtico, sta se debe
analizar lo ms pronto posible, sin embargo, cuando es necesario almacenarla
se debe hacer en un lugar limpio que se encuentre a temperatura ambiente.
Las muestras nunca se deben incubar, refrigerar o congelar antes o despus de
su anlisis microbiolgico.
Es importante inspeccionar cuidadosamente el aspecto que presenta la
muestra en el momento que se recibe y se debe anotar cualquier irregularidad
que se observe en el envase. Los envases pueden presentar poros, roturas,
agujeros por los cuales el producto de su interior es expuesto al exterior y
puede sufrir una contaminacin microbiolgica que nada tiene que ver con las
condiciones de fabricacin.
Antes de abrir el envase para tomar la muestra del producto y realizar el
anlisis microbiolgico se debe desinfectar su superficie con soluciones
desinfectantes. Por ejemplo:
Etanol al 70%(v/v)
Iodo al 4%(p/v)en etanol 70%

Si es necesario despus de desinfectarlas se debe secar el envase con una gasa

estril para no exponer el producto a la solucin desinfectante.

Para hacer el anlisis microbiolgico es importante utilizar una porcin

representativa del contenido de la muestra. Cuando se trata de productos que
contienen menos de 1 g o menos de 1 mL, se debe analizar el contenido
completo del envase.
Cuando se dispone de una sola muestra a la que se deben realizar otros
ensayos (qumico, toxicolgico, etc.), se debe tomar primero la parte de
muestra que va a ser utilizada en el anlisis microbiolgico. En este caso la
cantidad de muestra a tomar, depender del contenido total del producto. Si

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 la muestra es demasiado pequea (1-2 ml) se analizar todo el contenido del
envase.
Todas las manipulaciones de la muestra se deben realizar aspticamente.
Cuando se preparan muestras cosmticas para la realizacin de un anlisis
microbiolgico, es importante garantizar que los microorganismos, que
pudiesen estar como contaminantes, van a ser detectados y que el analista,
durante la realizacin del ensayo, no aporta ningn tipo de contaminante.
Para ello es importante incorporar completamente la muestra obtenida en el
medio de cultivo empleando tcnicas aspticas.

4. INTERFERENCIAS Y PROBLEMAS POTENCIALES

Dado que los productos cosmticos no son productos estriles, pueden sufrir
contaminacin microbiana por el ambiente, materia prima, componentes, etc. Las
formulaciones que pueden soportar microorganismos y son susceptibles de
contaminacin microbiana deben contener conservantes para retardar el crecimiento
microbiano. Los cosmticos deben presentar lo que se denomina una esterilidad de
tipo industrial, que no es una esterilidad absoluta. Esta esterilidad industrial permite la
existencia de cierta cantidad de microorganismos siempre y cuando estos no sean de
carcter patgeno. Para determinar si el cosmtico cumple con estos criterios se
realizan los test de todo o nada que comprenden dos fases. La primera consiste en
realizar el bloqueo de los conservantes del producto cosmtico para poder realizar el
enriquecimiento de los microorganismos y la segunda consiste en el anlisis de los
microorganismos enriquecidos para determinar que no existen microorganismos
patgenos.

5. EQUIPO
El material y equipo utilizado en la recogida de la muestra depender del tipo de
cosmtico que se quiere analizar, as como su estado fsico (lquido o solido). Por lo
general el material utilizado en la toma de muestra es:
1. Pipeta
2. Frasco
3. Esptula
4. Placa de Petri
5. Tubo con tapa de rosca
6. Gasa (para desinfectar con algn disolvente)
7. Bscula (para el pesado de la muestra)

Es de gran importancia que todo el material utilizado sea estril para evitar la

contaminacin de la muestra.

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6. REACTIVOS
Los reactivos utilizados para la toma de muestras en cosmticos son desinfectantes
tales como alcohol para desinfectar el envase del cosmtico y en el caso de cosmticos
con base liposoluble (waterproof) es necesario mezclar el cosmtico con Tween-80
para lograr que el cosmtico se pueda dispersar/emulsionar en el medio de cultivo.

7. PROCEDIMIENTO
La toma de muestra depender bsicamente del tipo de cosmtico que se vaya a
muestrear, a continuacin se exponen el proceso de toma de muestra de algunos
cosmticos:
7.1 PREPARACIN

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 i. Determinar los mtodos de muestreo que se utilizar, y los tipos y
cantidades de equipos y suministros necesarios.
ii. Obtener el equipo de muestreo y seguimiento necesario.
iii. Descontaminar o equipo pre-limpia, y asegrese de que est en buenas
condiciones.
iv. Preparar los horarios y coordinar con el personal, clientes y organismos
reguladores, en su caso.
v. Preparar las muestras

7.2 TOMA DE LA MUESTRA

TIPO DE COSMETICO TOMA DE LA MUESTRA

1. Cosmticos en soluciones acuosas Medir directamente el volumen de muestra
(champs, acondicionadores, tnicos, deseado utilizando una pipeta estril y luego
lociones) colocarla en el frasco que contiene el medio
de cultivo.

2. Cosmticos slidos y polvos ((jabones, 1. Raspar aspticamente la muestra con una

desodorantes en barra, polvos faciales
compactos)
esptula estril sobre un recipiente estril
(placa de Petri).
2. De all tomar y pesar aspticamente la
muestra con una esptula y colocarla en el
frasco que contiene el medio de cultivo
hasta alcanzar el peso deseado.

Con este tipo de productos se hace difcil la

3.Delineadores y mscaras para pestaas a
prueba de agua
extraccin de la muestra del envase que la
contiene, por lo que para realizar el ensayo:
1.Se limpia con una esptula estril la
muestra que queda adherida al aplicador
2. Una vez que ste ha entrado en contacto
con el producto dentro del envase (cepillo o
pincel) se va colocando en un tubo con tapa
de rosca estril.
3. Este procedimiento se repite hasta
obtener una cantidad representativa de la
muestra.
*Si no es posible obtener toda la muestra
requerida para el ensayo, se pesa

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 exactamente lo que pueda ser extrado del
envase y se completa con el medio de
cultivo hasta obtener la proporcin muestra-
medio de cultivo deseado.

4. Productos en aerosol (desodorantes, 1. Descontaminar la vlvula, con una gasa

lacas, talcos, bronceadores, etc.)
humedecida con una solucin de alcohol de
70.
2. Expeler directamente el contenido del
aerosol al frasco que contiene el medio de
cultivo hasta alcanzar el peso/volumen
deseado.
Al seguir este procedimiento hay que
trabajar con mucha precaucin, ya que la
tcnica indica que hay que trabajar cerca del
mechero y generalmente estos productos
contienen gases inflamables que pueden
incendiarse con facilidad. Para evitar este
problema se pueden seguir otros
procedimientos como expeler el producto a
un recipiente estril bajo una campana de
flujo laminar y desde ese recipiente tomar la
muestra como si se tratara de un producto
cosmtico lquido, en polvo, etc.

Para todos aquellos productos resistentes al agua siempre es necesario hacer un

tratamiento previo mezclando el producto cosmtico con Tween-80 para lograr que el
cosmtico se pueda dispersar/emulsionar en el medio de cultivo, que siempre
presenta naturaleza acuosa.
8. CONTROL DE CALIDAD ASEGURAMIENTO / CALIDAD
Se aplican los siguientes lmites que regulan la industria cosmtica a nivel mundial:
Limites microbianos CTFA (The Cosmetics, Toiletry, and Fragance Association)

-Lmites cuantitativos. En productos para bebs, menos de 100 ufc/g o ufc/mL.

En productos para el rea de los ojos menos de 100 ufc/g o ufc/mL. Resto de
productos menos de 1000 ufc/g o ufc/mL.

-Lmites cualitativos. Ausencia de los patgenos: Staphylococcus aureus,

Escherichia coli y Pseudomonas aeruginosa.

Limites microbianos en la Comunidad Europea

En este caso se definen dos categoras de cosmticos:

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 Categora 1: Productos dirigidos a nios Categora 2: Otros productos.
menores de 3 aos, rea de los ojos y
membranas mucosas.

-Lmites cuantitativos.
Categora 1: Recuento total de microorganismos viables aerbicos
mesfilos: menos de 100 ufc/g o mL en 0.5 g o mL de producto.
Categora 2: Recuento total de microorganismos viables aerbicos
mesfilos: menos de 1000 ufc/g o mL en 0.1 g o mL de producto

-Limites cualitativos. Ps. aeruginosa, S. aureus y Candida albicans son

considerados los principales patgenos potenciales en productos cosmticos. En las
pruebas especficas estos patgenos no deben ser detectados en 0.5 g o mL en
aquellos productos cosmticos de la categora 1 y en 0.1 g o mL en cosmticos de
categora 2.

9. REFERENCIAS

Toma y tratamiento de muestras,Carmen Cmara (Editora) P. Fernndez, A. Martn-Esteban, C.

Prez-Conde, M. Vidal, Ed. Sntesis, 2001

http://www.unavarra.es/genmic/curso%20microbiologia%20general/11-
metodos%20analiticos%20generales.htm

http://es.slideshare.net/pgomezlobo/iso-22716-obligaciones-legales-empresas-sector-
cosmtico?related=1

http://www.aemps.gob.es/cosmeticosHigiene/cosmeticos/home.htm#legislacion