EVALUACIN DE LA DC50 DEL AGROQUMICO 2,4-D SOBRE

LAS FUNCIONES HEPTICAS Y RENALES EN RATAS CEPA

BALB/C

Evaluation of CD50 of agrochemical 2,4-D on hepatic and kidney functions

on Balb/C strain rats

Elvis Caldern C.1, Erika Chvez L.2, Kaylen Yz J.3, Martn Rojas M.4,
Thays Hernndez M.5, Elena Geldres V.6

1-5
Estudiantes. Ingeniera Ambiental. Universidad Privada del Norte.
Trujillo, Per
6
Docente. Ingeniera Ambiental. Universidad Privada del Norte. Trujillo,
Per
____________________________________________________________
Resumen
Se evalu cul es la DC50 con mayor toxicidad del agroqumico 2,4D sobre las funciones
hepticas y renales de las ratas cepa Balb/C. En las pruebas de laboratorio se elabor tres
sistemas: control, concentracin al 2% (Sistema 1), concentracin al 7% (Sistema 2) y
concentracin al 12% (Sistema 3). Para cada sistema se utiliz una distinta cantidad:
0,8ml al sistema 1, 0,5ml al sistema 2 y 0,3ml al sistema 3 y se inocul a las ratas
previamente seleccionadas. Luego, se esper su muerte para ser diseccionados,
extrayendo su hgado y sus riones y comparndolos con el sistema control para poder
observar los efectos que tuvo el agroqumico 2,4.-D sobre las mismas. El sistema 3 tuvo
un mayor efecto txico sobre las funciones hepticas y renales de las ratas cepa Balb/C,
ocasionando un oscurecimiento del hgado, y el endurecimiento y un ligero
oscurecimiento en los riones.

Palabras clave: Ratas, Agroqumico, Heptico, Renal, DC50, 2,4-D

Abstract

We evaluated which CD50 of agrochemical 2,4-D have the most toxic effect on hepatic
and kidney functions on Balb/C strain rats. On laboratory proofs we made three siystems:
control, 2% concentration (system 1), 7% concentration (system 2) and 12%
concentration (system 3). For each system we used different quantity of dissolutions: ,8ml
for system 1, 0,5ml for system 2 and 0,3ml for system 3 and we inoculated the rats,
previously selected. Then, we wait for their dead to be dissectionated and their liver and
kidneys, extracted and comparated with control system to see the effects from the
agrochemical 2,4-D in it. The system 3 had the most toxic effect on hepatic and kidney
functions on Balb/C strain rats, and it happened a darkened of their livers, and their
kidneys were hardened and light darkned.

Key Words: Rats, Agrochemical, Hepatic, Kidney, CD50, 2,4-D

I. INTRODUCCIN

El herbicida 2.4-D (cido 2,4-diclorofenoxiactico) fue identificado por primera vez

en 1942 y mercadeado en 1944, es uno de los pesticidas sintticos ms antiguos. Sali
al mercado en los aos cuarenta y se dio a conocer gracias a que formaba parte del
compuesto qumico defoliante Agente Naranja en la guerra de Vietnam. 2,4-D es
hasta el da de hoy, utilizado ampliamente alrededor del mundo. Ya que, su principal
uso es para el control de malezas de hoja ancha en los cultivos de cereales.

Algunos estudios realizados por el experto independiente en pesticidas, Lars

Neumeister, han demostrado que la piel humana puede absorber hasta un 80% de 2,4-
D, pero las autoridades de evaluacin de riesgos han establecido un lmite mucho
menor. Una Absorcin drmica baja (4%) en trabajadores que no han estado
debidamente protegidos, ha causado una exposicin superior a la recomendada; siendo
los trabajadores que utilizan equipos de dispersin manual, los ms afectados
(Neumeister, L. 2014).

El 2,4-D est clasificado en la categora toxicolgica II. La exposicin ocupacional a

2,4-D ha producido serias irritaciones de ojos y de piel. Tambin, han estado ligados
con sarcomas de tejido blando y la Agencia Internacional de Investigacin sobre el
cncer (IARC) ha clasificado el 2,4-D como una carcingena clase 2B, posible
carcinognico a humanos (concluyendo que hubo evidencias limitadas en humanos y
evidencias inadecuadas en animales) (Nivia, E. 2009).
Algunos profesores de herbicidas en Amrica Latina indican en pblico que el 2,4-D
y el 2,4,5-T son hormonas naturales de las plantas, y que seran inocuos o seguros
desde el punto de vista toxicolgico, lo cual constituye un gran error. Uno de los
secretos industriales sobre los herbicidas fenoxiacticos es que durante su sntesis
forman impurezas qumicas de altsimo poder txico. Esto fue descubierto en Filipinas,
Malasia, Singapur, Rodesia Oriental (actual Zambia) y Rodesia Occidental (actual
Zimbawe), durante y poco despus de la Segunda Guerra Mundial entre los aos de
1939 y de 1945, cuando estos pases fueron escenario de guerras de liberacin
nacional.

Aunque estas impurezas an no tuviesen nombre, eran conocidas como sustancias X.

En prevencin de desastres industriales, en Europa se procur establecer controles
sobre ellas, atendiendo severamente a la temperatura y la presin de los procesos de
sntesis (Pinheiro, S. 2004).

En base a la realidad problemtica, el presente proyecto tiene como finalidad

determinar cul es la DC50 con mayor toxicidad del agroqumico 2,4D sobre las
funciones hepticas y renales en las ratas cepa Balb/C.

Su principal ventaja ambiental es que al 2,4-D se le incluye dentro de los herbicidas

hormonales pues acta de modo parecido a la hormona natural auxina, o cido indol-
3-actico (AIA). Las plantas de manera natural producen hormonas que actan de
manera precisa y en cantidades muy pequeas y su concentracin es regulada por la
propia planta; en el caso de la auxina es una hormona que regula el sano crecimiento
y desarrollo vegetal, pero en su forma sinttica y a una concentracin mucho mayor
provoca la muerte de la planta ya que no encuentra un mecanismo de control interno.
En forma de sal amina es muy bien absorbido por las races, se translocan y acumulan
en las zonas meristemticas (Sata. 2009).

Una ventaja social muy importante, es que evitan la proliferacin de plagas que
daaran millones de hectreas de alimentos ayudando a los agricultores a mantener
sus cosechas. Hay que tener en cuenta tambin que el agroqumico 2,4-D tambin se
emplea para combatir enfermedades como la malaria y el tifus que son trasmitidas a
las personas por insectos y parsitos (valos, C. 2013).
Econmicamente, los agroqumicos vienen con precios bajos cuando se comparan con
alternativas derivadas naturalmente y a la vez, aumenta los cultivos incrementando as
los ingresos del agricultor (Andrew, J. 2014).

El principal objetivo de este estudio es determinar la DC50 del agroqumico 2,4D que
afectara las funciones hepticas y renales de las ratas cepa Balb/C. Un segundo
objetivo es comparar histolgicamente el efecto txico del agroqumico 2,4-D sobre
las ratas cepa Balb/C.

II. MATERIALES Y MTODOS

Se utiliz un proceso experimental empleado de una muestra de 10 ratas de un bioterio

de la ciudad de Trujillo, La Libertad extrado de una poblacin de Todas las ratas cepa
Balb/C empleadas para el uso experimental en la ciudad de Trujillo, La Libertad.

Los instrumentos de recoleccin de datos que se emple fueron, Agroqumico 2,4-D

lquido, ratas cepa Balb/C, agua destilada, pipetas, jeringas, tubos de ensayo, rejillas,
algodn, alcohol, campana, cloroformo, cuatro recipientes, cartn, bandeja, equipo de
diseccin y balanza.

Se realiz diluciones al 2%, 7% y 12% en base a 100ml, aforando con agua destilada.
Se tom cuatro recipientes, uno para cada sistema y uno para el sistema control. Se
pes cada rata en la balanza y se enumer para poder identificarlas. Se orden los pesos
de las ratas de menor a mayor y se sac el promedio en base a sus pesos.

La clasificacin de las ratas para la formacin de los sistemas se dio de acuerdo a la

siguiente tabla:

Peso ordenado de menor a mayor Sistema

30,3 Sistema 1
31,8 Sistema 1
31,8 Sistema 2
33,1 Sistema 2
33,3 Sistema 3
33,3 Sistema 3
33,8 Rata Control
 35,8 Sistema 3
35,8 Sistema 2
36,8 Sistema 1
Promedio: 33,58
Tabla 1: Clasificacin de las ratas segn su peso

Se inocul por va intraperitonal a las ratas segn la dilucin correspondiente a cada

sistema. Se esper al fallecimiento de las ratas y se procedi a anotar las horas de
muerte. Se sacrific con cloroformo a la rata control en la campana. Se procedi a
diseccionar las ratas con cuidado de no mezclar los sistemas, comparando los sistemas
con la SC, observando los efectos txicos a nivel histolgico.

III.RESULTADO

En esta investigacin se determin cul es la DC50 con mayor toxicidad del

agroqumico 2,4D sobre las funciones hepticas y renales en las ratas cepa Balb/C,
realizando una comparacin de la rata seleccionada para el control con las ratas que
fueron inoculadas con las distintas diluciones del agroqumico 2,4-D.

Imagen N1. Tiempo de muerte de ratas cepa Balb/C en el primer ensayo

Imagen N2. Tiempo de muerte de ratas cepa Balb/C en el segundo ensayo

Imagen N3. Tiempo promedio de muerte de ratas cepa Balb/C

IV. DISCUSIN

Segn el Centro Panamericano de Ecologa Humana y Salud: el herbicida 2,4 D es

utilizado contra malezas de hoja ancha en los cultivos de cereales, as como pasos y
prados en proporciones aproximadas de 0.2 2 kg. del ingrediente activo (Centro
Panamericano de Ecologa Humana y Salud. cido 2,4 Diclorofenoxiactico Gua
para la salud y seguridad).

Esto refleja la gran importancia que tuvo el 2,4 D en el siglo 20, pues fue el primer
herbicida selectivo lanzado al mercado. Al tener un bajo costo y ser muy eficiente, fue
utilizado constantemente en las mltiples actividades agrcolas. Pero, debido a que se
encontr que posea un alto grado de toxicidad tanto en personas como en el medio
ambiente, su uso fue altamente prohibido para cualquier uso agrcola.

Si bien el impacto ambiental que produce el herbicida 2,4 D es muy nocivo, este trabajo
experimental ha sido enfocado en su totalidad a la toxicidad que genera en los
organismos vivos, ms especficamente, en las ratas de cepa Balb/C ya que, aparte de
tener un sistema inmune muy parecido al nuestro, pueden ser manejadas con suma
facilidad gracias a que su tamao es propio para la crianza, son fcilmente
manipulables y no requieren muchos cuidados.

Los 3 sistemas elaborados para el experimento fueron los siguientes:

1er sistema: Solucin de 0,8 ml, elaborada con una concentracin al 2% del herbicida.

2do sistema: Solucin de 0,5 ml, elaborada con una concentracin al 7% del herbicida.

3er sistema: Solucin de 0,3 ml, elaborada con una concentracin al 12% del herbicida.

Minutos despus de haber inoculado a todos nuestros roedores, los primeros sntomas
se empezaron a hacer presentes.

La relacin que existe entre el tiempo de muerte y la concentracin de las ratas puede
apreciarse claramente en las tres imgenes (imagen 1, imagen 2, imagen 3), en las
cuales el tiempo de muerte es menor mientras es mayor la concentracin. Es decir, el
tiempo de muerte de las ratas cepa Balb/C y su porcentaje de concentracin es
inversamente proporcional. A una mayor concentracin, el tiempo de muerte es menor
mientras que a una menor concentracin, el tiempo de muerte es mayor.
Con respecto a la toxicidad que tiene el agroqumico 2,4-D sobre las funciones
hepticas y renales de las ratas cepa Balb/C y el tiempo de muerte de las mismas,
sucedi lo contrario. Mientras mayor concentracin se inoculaba, mayor era el efecto
txico sobre las ratas. En este caso, la toxicidad del agroqumico 2,4-D sobre las
funciones hepticas y renales de las ratas cepa Balb/C y su porcentaje de concentracin
nos brind una relacin directamente proporcional.

Waldemar F. Almeida en su Ctedra de Toxicologa de la Facultad de Medicina de lo

Universidad de Buenos Aires, nos dice lo siguiente: Durante la aplicacin agrcola
del 2,4-D los trabajadores pueden sufrir un grado de malestar leve. Las intoxicaciones
accidentales ms graves durante las pulverizaciones son raras, pero pueden producirse
vmitos, atrofia muscular con dificultad respiratoria, bradicardia, transpiracin
excesiva y oliguria, con las ratas de cepa Balb/C pas lo mismo. Segundos despus
de que se inocul a algunos roedores, estos presentaron un ritmo atpico de respiracin
al ser demasiado acelerado; atrofia muscular, pues no realizaban movimientos y si lo
hacan, eran muy torpes; vmitos, necrosis generalizada, y, por ltimo, la muerte.

Algo importante que mencionar, es que algunos roedores vieron alterado su

comportamiento pues luego de ser inoculados, se volvieron ms agresivos e incluso
llegaron a daar a los otros roedores que se encontraban cerca de ellos. Gracias a esto,
no se tuvo otra opcin ms que separarlos y observar por separado los efectos que el
herbicida ejerca en agresivos roedores.

El tiempo de muerte en los roedores sigui un patrn bastante sencillo. Primero, a una
hora de la inoculacin fallecieron los roedores del tercer sistema (12% del Herbicida);
luego, a dos horas de la inoculacin, fallecieron los roedores del segundo sistema (7%
del Herbicida) y, por ltimo, los roedores del primer sistema (2% del herbicida)
demoraron das en fallecer.

Finalmente, los cadveres de los roedores inoculados fueron diseccionados y

comparados con el de un roedor control, el cual no tena presencia de 2,4 D.
Se pudo observar una clara diferencia en la tonalidad del hgado de los roedores, siendo
ms oscuro mientras ms concentracin de 2,4 D se le haya inoculado. Se pudo
observar tambin que los riones de los roedores que fueron inoculados con una
concentracin mayor de herbicida tenan un color ms oscuro y eran ms duros al tacto.
Algunos otros rganos tambin fueron afectados en algunos roedores como por
ejemplo el estmago, que en un par de roedores se lleg a hinchar.

V. CONCLUSIONES

1. Se logr determinar que la concentracin de 12%, es decir la mayor, fue la

DC50 que tuve un mayor efecto txico sobre las funciones hepticas y renales
de las ratas cepa Balb/C; estableciendo una relacin directa con el resto de las
concentraciones y su efecto txico sobre las funciones hepticas y renales de
las ratas cepa Balb/C.

2. Se logr comparar histolgicamente el efecto txico del agroqumico 2,4-D

sobre las ratas cepa Balb/C, el cual se puede definir en el oscurecimiento del
hgado, y el enduramiento y un ligero oscurecimiento en los riones.

VI. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

Andrew, J. (2014). Ventajas y Desventajas de usar agroqumicos. Recuperado

el 08 de junio del 2016 de http://www.ehowenespanol.com/ventajas-
desventajas-agroquimicos-info_586587/
valos, C. (2013). El polmico uso de agroqumicos. Recuperado el 07 de
junio del 2016 de http://www.generaccion.com/magazine/876/polmico-uso-
agroqumicos
Centro Panamericano de Ecologa Humana y Salud. (2014). cido 2,4
Diclorofenoxiactico Gua para la salud y seguridad. Recuperado el 25 de
junio del 2016 de http://www.produccion-
animal.com.ar/sanidad_intoxicaciones_metabolicos/intoxicaciones/34-
toxicologia_herbicidas.pdf
Neumeister, L. (2014). Riesgos del Herbicida 2,4-D. Recuperado el 06 de abril
del 2016 de http://www.rapaluruguay.org/agrotoxicos/Prensa/Riesgos-del-
herbicida%202,4D.pdf
Nivia, E. (2009). Efectos del Herbicida 2,4-D. Recuperado el 06 de abril del
2016 de http://www.oocities.org/rap_al/Efectos24D.htm
 Pinheiro, S. (2004). El Infierno del 2,4-D. Recuperado el 05 de junio del 2016
de http://www6.rel-uita.org/agricultura/agrotoxicos/2-4d.htm
Sata. (2009. 2,4-D. Recuperado el 4 de junio del 2016 de
http://www.laguiasata.com/joomla/index.php?option=com_content&view=ar
ticle&id=294:24-d-&catid=45:principios-activos&Itemid=57
Waldemar, F. (2009). Ctedra de Toxicologa de la Facultad de Medicina de
lo Universidad de Buenos Aires. Recuperado el 25 de junio de 2016 de
http://www.rapaluruguay.org/agrotoxicos/Prensa/Riesgos-del-
herbicida%202,4D.pdf