PRINCIPIO DE SEPARACIONES QUMICAS Y

CROMATOGRFICAS

Concepto:
Aislar o separar los diferentes componentes de una muestra a travs de
mtodos, que deben ser suficientemente selectivos, aprovechando sus
diferentes propiedades fsico qumicas de los componentes.

Pocos mtodos son suficientemente selectivos y el analito a separar o

aislar no siempre est presente en concentracin adecuada.

El mayor problema en el anlisis es el aislamiento o pre concentracin

de un constituyente a separar o minimizar cualquier posible interferencia
presente o proveer una cantidad adecuada de sustancia para ser
medida.

Representacin bsica de una separacin:

S = 0 (P. reversible voley termodinmica)

A, B, C, D, E, A+B+C+D+

(p. irreversible, segunda ley termodinmica)

S > O

H2O

Azul (sol. de conc. uniforme)

Todo proceso natural se verifica con un incremento entrpico y que la
direccin es la que conduce a tal aumento

OBJETIVOS GENERALES DE LAS SEPARACIONES QUMICAS Y

CARTOGRFICAS
a) Preparativo: No hay distincin de las partes de un todo destilacin,
cristalizacin, extraccin, difusin gaseosa, precipitacin
electrosttica.
b) Analtico: Separacin y distincin de las partes de un todo, examen
crtico, minucioso.
Sus propsitos son especficos, investigacin, industriales,
bioqumica, geologa, etc.
Cromatografa, electroforesis, sedimentacin, F, F, F, etc.

LIMITACIONES TERMODINMICAS:
Algunas de las mayores dificultades de las separaciones son:
a) El problema de separar sustancias que tienen propiedades qumicas

similares.
b) la dificultad de separar un gran nmero de componente en una simple
operacin.
c) La inevitable difusin de zona, la dilucin resultante y la prdida de
resolucin.
Concentracin

Este problema se origina por

Zona inicial la Segunda ley de

Termodinmica.

Tiempo
DIFUSIN MOLECULAR
Hay difusin molecular en la fase mvil cuando el soluto molecular migra
desde las zonas de alta concentracin hasta las zonas de menos
concentracin.
Este proceso de difusin resulta en una dispersin gaussiana que
disminuye la eficiencia de la columna.
La cantidad de difusin molecular es inversamente proporcional al
coeficiente de difusin del soluto en la fase gaseosa (D), la difusibilidad
del solito en el gas portador.

Una alta difusibilidad del soluto provoca el ensanchamiento de la banda.

d (x)
FORMAS DE SEPARACIN
Las tcnicas bsicas de separacin existen alrededor de 15 a 20, pero
muchas variaciones existen para cada una. Las tcnicas bsicas
incluyen:
Cromatografa, electroforesis, extraccin, absorcin, cristalizacin,
difusin, destilacin, sedimentacin, ultrafiltracin, difusin trmica,
mtodo Nozzle, ultrafiltracin, difusin trmica, mtodo Nozzle, Fusin,
por zona, mtodos biolgicos, Field Flow Fraccionation.
ROL DE LA FSICO QUMICA
a) Rol Lgico: Clasificacin de los mtodos y elucidacin de principios
generales de estos mtodos.
b) Rol Histrico: Desarrollo de mtodos especficos.

DESARROLLO DEL CONCEPTO GENERAL DE SEPARACIONES

Histricamente se intent encontrar una base comn bsica para la
explicacin de los diferentes mtodos de separacin, que fueron hechos
por:
a) Tiselius (1952)
b) Strain (1954)
c) Melnechuk (1963)
d) Pfan (1966)
STRAIN, Sato and Engelka, Anal Chem, 26, 90 (1954)

De los anteriores, solamente STRAIN desarrolla al detalle la idea de la

migracin o desplazamiento diferencial bajo influencia de un par de
fuerzas:

(-) Fuerza de Fuerza en movimiento (+)

(Fc)
Resistiva Componente
(Fr) actuar

Ambas fuerzas deben actuar selectivamente

F = Fi + (-Fr)
El concepto de par de fuerzas proporciona una manera de interpretar la
migracin o el desplazamiento diferencial, pero no adecuado como una
descripcin Fsico Qumica de las Separaciones.

Muchos trabajos sobre conceptos generales de las separaciones han

sido hechas por Rong (1970), King (1971), C. Gidding (1975).

DESPLAZAMIENTO
Las separaciones qumicas se basan en el desplazamiento diferencial de
los componentes.

Lo fundamental acerca de las separaciones es aquello en el cual

nosotros investigamos, la naturaleza bsica del desplazamiento de los
componentes qumicos a travs del espacio.

Existen dos clases de desplazamiento:

a) Desplazamiento en grupo (o bloque): No es selectivo. Aqu el fluido
se mueve por:
- Desplazamiento Mecnico
- Flujo: el fluido que transporta el componente o componentes.
Este desplazamiento no es selectivo.

b) Desplazamiento relativo: Es selectivo

En este tipo de desplazamiento una fuerza es usada para mover el
componente a travs del medio.
 Las fuerzas pueden ser:
- Fuerzas externas (atracciones electrostticas)
- Fuerzas internas (qumicas)

DESPLAZAMIENTO MECNICO:
Las molculas responden a fuerzas y potenciales en un camino similar a
los cueros macroscpicos, sin embargo las molculas solo estn sujetas
a fuerzas de difusin, dispersin.

En la Teora del Movimiento Mecnico nosotros seguimos el

movimiento de una simple particula, donde la fuerza impulsora (o de
movimiento) tiene la forma de:

dp
Fuerza impulsora para el desplazamiento mecnico:
dx

P: energa potencial.

La ecuacin de movimiento de un cuerpo macroscpico es de la forma:

Ec. def. de 2do

orden
d 2x dp dx
Fi = m x a => Fi m 2
dt dx dt

2da Ley de Newton Ec. dif. de 2do

orden

Fuerza total Posicin Si el sistema

: tiempo es conservativo
fuerza cerrado
masa
 dp
donde la fuerza impulsora: Fi es llamada fuerza conservativa si
dx

P es solamente funcin de la coordenada

x

(sistemas conservativas o

cerrados).

a) E es cte
Sistemas conservativos o cerrados son equivalentes.
F i V V

Energa cintica y potencial son Ctes.

dx
La fuerza disipativas o friccional es proporcional a la velocidad,
dt

dx dx dx dx dx

dt dt dt dt dt

La constante es conocida como coeficiente friccional, depende de la

dimensin del cuerpo y de la viscosidad del medio a travs del cual se
mueve.

ROL DEL EQUILIBRIO

Esencialmente todo movimiento es el resultado de la tendencia frecuente
al equilibrio. En orden a crear o producir un movimiento favorable para la
separacin, nosotros debemos producir un equilibrio favorable.

a) Equilibrio Mecnico:
 Define la posicin de reposo de los cuerpos macroscpicos.
2da Ley de Newton.
d 2x
F m
dt 2

dp
es llamada fuerza conservativa, si P es solamente funcin de
dx

la coordenada X

Hay dos tipos de fuerzas:

dp
- F1 ( x) F1 ( x) : Fuerza impulsora.
dx

dx
- F2 : Fuerza de resistencia o friccional.
dt

dx dx

dt dt

Dimensiones del cuerpo

coeficiente friccional

Viscosidad del medio.

en el equilibrio:

d2x dp dx
m 2

dt dx dp

Fuerza total

es relativamente grande la aceleracin (a) es cero.

dx dp

dt dx
x x(t)

define

En la teora del movimiento mecnico, nosotros seguimos el camino de

un cuerpo o de una simple particular.

Equilibrio Molecular (Qumicos)

Define la distribucin espacial de la materia dispersada en solucin en el
equilibrio.

d 2x d dx
m 2
F (t )
dt dx dt

F. mov. F. resist.
o F. friccional

Para un gran nmero de molculas:

d 2x d dx
m F (t ) F (t ) 0 porque hay fuerzas en todas
dt dx dt

partes

Entonces; si es muy grande, la aceleracin es 0 y no es importante

d 2x
2 0
dt

d dx
0 0
dx dt

dx d

dt dx
 dx 1 d d / dx
V (Velocidad promedio)
dt dx

6
dx 1 d
V
dt

g dx n T , P.ctes

osmosis

d / dx
V

dx
dt

t
En todo proceso de separacin tiene lugar transferencias de materia

se debe considerar la densidad de flujo: J

La densidad de flujo de los componentes: J : # de moles transportados

a travs de una unidad de rea por unidad de tiempo es relacionado con

la velocidad promedio V.

(1) J = V x C
d / dx
Como V

Reemplazando V en (1) tenemos:

c d
(2) J
dx

De acuerdo al potencial qumico tenemos:

(3) = ext + + RT en C.

Sustituyendo (3) en (2) tenemos:

 c d ext d RT dc
(4) J
dx dx dx

V = Velocidad de desplazamiento causado por combinacin de los

efectos de un campo externo e interno (qumico).
1 d ext d
V
dx dx

La ecuacin (4) podemos escribirla en forma condensada de la siguiente

manera:
dc
(5) J V C D Desplazamiento relativo
dx

Donde:
RT
D

= 6 r No => Ley de Stockes

r
Para partculas esfricas de radio J
en un medio de viscosidad , tiene

un coeficiente de fraccin .

Comparando las ecuaciones siguientes:

C d ext d RT dc
(4) J
dx dx dx

dc
(5) J = VC D
dx

Coef. de Difusin
Igualando (4) y (5):
 c d ext d RT dc c d ext d dc


D
dx dx dt dx dx dx

c d ext d

RT dc dx dx dc
D
dx c d ext
d dx

dx dx

RT
D

RT
D Relacin Plank Einstein

RT
Ecuacin Stokes Einstein D
6nrNo

D = Coeficiente de difusin para partculas pequeos asimtricos.

6No Ley de Stockes (para partculas en medio continuo)

Desplazamiento con flujo:

La ecuacin anterior, describe el desplazamiento relativo a travs del
medio, recordemos que el desplazamiento en bloque (dulk)
principalmente el flujo puede tambin ocurrir. Esto genera un flujo de
densidad de:
J=VxC

Esta densidad de flujo J es adicionado al causado por el

desplazamiento relativo, descrito por la ecuacin:
 dc
J = VC D
dx

el flujo total Jt es:

dc
Jt V C D VC
dx

dc
J (V V )C D
dx

Para si preciso todo trmino deber ser escrito como un vector de

cantidad, pero ser suficiente, en vez de ello guardar en la mente que
cada trmino tiene una caracterstica unidireccional.
Sistema aislado: No hay transferencia de energa ni de materia entre el
sistema y el medio ambiente.

E = E E1

Sistema cerrado: Hay transferencia de energa entre el Sistema y el

medio ambiente, pero no de materia.

Equilibrio en Sistemas Cerrados:

1er Ley de la Termodinmica:
dE = dq dw

si nosotros sustituimos: dw pdV y Tds q

 dE TdS PdV (A)

Por definicin la energa libre de Gebres es:

(B) G = H TS Proceso a temperatura constante.
(C) H = E + PV Proceso a presin constante.

Reemplazando (C) en (B) tenemos:

(D) G = E + PV TS
(E) dG = dE + PdV - TdS
(F) dG = dE + PdV + VdP TdS SdT

Sustituyendo la ecuacin (A) para dE en (F) tenemos:

dG = TdS PdV + PdV + VdP TdS SdT

considera la energa libre como funcin de la

T y P}
(G) dG = VdP SdT

dG = - SdT + VdP

Como todo proceso natural ocurre a T y P cte: d G 0

Para cualquier cambio en el equilibrio: dG = 0

G G
dG dT dP
T P P T
S V

G G
S V
T P P T

Equilibrio en Sistemas abiertos

Materia puede fluir hacia adentro o

hacia afuera.
 Nosotros debemos modificar la expresin de equilibrio.

dG = -SdT + VdP

A medida que se realiza el proceso qumico cambia la composicin del

sistema, cambiando por lo tanto las propiedades termodinmicas, en
consecuencia debemos introducir en las ecuaciones termodinmicas la
dependencia de la composicin.

Si vara el # de moles: n1, n2, de las sustancias presentes

entonces:
G = G (P, T, n1, n2,)
Y la diferencial total es:

dG dG 6 d 6
dG dT Tni TPng dn1 .. TPnj ...
T P ,ni P T ,ni P n n2

Ni = # de moles constantes (excepto dn1, dn2)

Nj = # de moles constantes del resto de componentes
Si el problema no sufre ningn cambio en su composicin, entonces:
dn1 = 0 dn2 = 0

la ecuacin se reduce a:

6 6
6 Pni dT Tni dP
T P


dG SdT VdP
Para simplificar definimos:
6 dni
i T
ni Pnj

En razn de las ecuaciones anteriores, la diferencial total de G en la

ecuacin se transforma en:

dG = -SdT + VdP + i dni

Incluye todos los componentes de la mezcla

2 fases inmiscibles (Eter H2O), los cuales pueden intercambiar materia

entre ellos, estos sistemas son nombrados por y .

ETER

H2O
 + juntos constituyen un Sistema Cerrado, para lo cual en el equilibrio
es definido: dG = 0 a T y P cte.

Por la transferencia de una pequea cantidad de componente i desde

la tenemos:

dG = dG + dG = uidni uidni (A)

cambio total de
energa libre del
sistema

dG = 0 , dni 0 , i = i (B)

equilibrio
entre regiones interconectado
a T y P constante

En el caso de soluciones ideales, una condicin aproximada para

soluciones diluidas en sistemas de separaciones, tenemos.

i = i + RT en Ci

Potencial qumico Potencial qumico

del componente en del componente puro
la mezcla
Si la ecuacin (B): i = i = colocamos los potenciales qumicos
estndar nosotros tenemos lo siguiente:

i + RT en Ci = i + RT en Ci

RT en Ci - RT en Ci

RT en Ci - RT en Ci = -(i i)

Ci
Rt en

Ci

Ci
Kd =
e / RT
Ci

i (T, P) es el potencial qumico de la especie en el mismo estado de

agregacin que tiene la mezcla, esto es en una mezcla lquida.

i (T, P) es el potencial qumico energa libre molar del componente

puro i.

Si las fases y no estn en equilibrio y una pequea cantidad dni de la

especie i es transferida de la fase a la fase , al tratar de alcanzar el

equilibrio a temperatura y presin constante, tenemos:

dG + dG < 0

- i2 dni + uidn < 0

Si dni es positive, entonces: i > i

Equilibrio en campos externos
Sistemas de separaciones son los sistemas ms amplios en que los
campos externos son aplicados. Los campos ms usados son:
- Elctrica: electroforesis, isoelectring focusing,
- Sedimentacin: centrifugacin
- Gradiente de concentracin.
- Gradiente de temperatura.
- Gradiente de pH.
Fraccionamiento por campo y flujo
:elctrico,gravitacional,trmico,magnetico
Todos estos campos son capaces de producir cambios en la distribucin
de los componente qumicos en el equilibrio.

Elctrico
centrifugacin
dt
dC
dx
dx

molcula

Todo campo imparte a una molcula un potencial de energa que

durante su ruta vara con la posicin.

1 2 2

Elctrico 1
 X1------------------------------ X2

Este potencial de energa se adiciona a G, despus de todo G es nada

ms que una forma de energa.

Esta energa extra puede ser designada como un (ext) potencial qumico
externo para un componente i.

iext lo distinguimos del int donde se refiere simplemente al ambiente

qumico propio de la molcula.

Con esta adicin la ecuacin es:

dG = -SdT + VdP + (iext + iint) dni

a T y P constante, esto se convierte en:

dG = (iint + ext) dni

Clasificacin de los mtodos de separacin en relacin a los
perfiles del Potencial Qumico y Flujo:
En las ecuaciones de transporte que nosotros hemos desarrollado,
describimos la respuesta de los picos de soluto a los perfiles del
potencial qumico y flujo. Varias categoras bsicas pueden ser
distinguidos. Primero el perfil del potencial qumico representa la suma
de los efectos del potencial del campo externo y el potencial qumico
interno (interacciones moleculares internas).

s = ex +

Potencial qumico

1) Este potencial qumico (s) puede ser continuo o discontinuo

C = continuo s perfil
d = discontinuo s perfil

s continuo: Es generado por un campo externo o un gradiente

continuo en una fase.

s discontinuo: Asume una funcin por etapas a la discontinuidad

entre dos fases inmiscibles

2) El sistema puede o no emplear flujo:

S = Sistema esttico.
F = Sistema o flujo.
Donde le flujo es usado en sentido relativo y denota el movimiento de
una fase con respecto a la otra o con respecto al campo impuesto.

En la clasificacin por categoras por sistemas, la direccin de flujo

(algunas veces considerado en regiones microscpicas) puede ser
idntica a la direccin del gradiente de campo o ellos pueden ser
perpendiculares:

Ejemplo:
Flujo Flujo

dT
dx

Campo elctrico
dT
Centrifugacin
dx

Campo elctrico
Centrifugacin

F (=) : Flujo y gradiente de campo paralelo.

F () : Flujo y gradiente de campo perpendicular.

Esencialmente todos los mtodos de separacin encajan dentro de una

de estas categoras. Algunas son empleadas muy ampliamente,
especialmente Sc y F(+)d.
La combinacin de estas categoras dan 6 combinaciones bsicas.
Sc Sd
F(=) C F(=) d
F(+) C F(+) d

C =

D +

Categora Mtodo de Separacin

Sc Electroforesis, isoelectring focusing, sedimentacin,
centrifugacin por gradiente de densidad, dielectroforesis.
F(=)c Electromigracin en contracorriente, elutriacin.
F(+)c Fraccionamiento por campo y flujo., Electroforesis continua,
columna termogravitacional.
Sd Extraccin simple, cristalizacin, sublimacin, adsorcin y
dialisis.
F(=)d Filtracin, ultrafiltracin, refinacin por zona.
F(+)d Cromatografa, destilacin, extraccin en contracorriente,
fraccionation por espuma.

Separacin por campos externos:

Campo o gradiente Mtodo

1.- Elctrico Electroforesio, electrlisis
2.- Centrifugacin o Sedimentacin, Fraccionamiento por campo y
gravitacional flujo :electrico
3.- Termal Columna termogravitacional, Fraccionamiento por
campo y flujo : trmico
4.- Electromagntico Espectrofotometra de masas
5.- Dielctrico Dielectroforesis
6.- Presin Mtodo nozzle
7.- Concentracin Isoelectring focusing, gradiente de densidad.