ECOTOXICOLOGIA

DEFINICIONES:
Es la ciencia que estudia los efectos txicos de
sustancias qumicas y agentes fsicos sobre los
organismos vivos, especialmente sobre poblaciones
y comunidades dentro de ecosistemas definidos.
Incluye el estudio de los caminos de transferencia de
estos agentes y sus interacciones con el ambiente
(TRUHAUT, 1977; BUTLER, 1978)

Es la ciencia que investiga los efectos de sustancias

sobre los organismos. El peligro sobre las
poblaciones de animales y plantas puede ser
determinado mediante el uso de datos existentes,
tomados del ambiente (Ecotoxicologa retrospectiva)
o mediante el desarrollo de ensayos especficos
(Ecotoxicologa prospectiva) (RUDOLPH and BOJE,
1986)

Es la ciencia que se propone la la evaluacin, el

monitoreo y la prediccin del destino y efectos de
xenobiticos en el ambiente (MORIARTY, 1988)

Es la ciencia que intenta predecir los impactos de las

sustancias qumicas sobre los ecosistemas (LEVIN et
al., 1989)

Es el estudio de los efectos adversos o dainos

sobre los ecosistemas (WALKER et al., 1996)
 ECOTOXICOLOGIA

OBJETIVOS:

Se propone la evaluacin, monitoreo y prediccin del

destino y los efectos de xenobiticos en el ambiente
(MORIARTY, 1988)

Est motivada por el deseo de mantener las

estructura y funcin naturales de los ecosistemas
INTEGRIDAD DEL ECOSISTEMA (HARRIS et al., 1990)
[Los ecosistemas son dinmicos; luego, puede resultar no
natural mantener el status quo]

La investigacin ecotoxicolgica resulta ser tambin

la investigacin del ecosistema (MATHES et al.,
1991)

Se propone proveer una base cientfica que permitir

que las sustancias sean evaluadas con una cantidad
razonable de esfuerzo y costo. La informacin
obtenida provee la base para evaluaciones que
permitan determinar qu sustancias podrn ser
liberadas al ambiente, cules de ellas sern
ambientalmente tolerables y n qu cantidades
(RMBKE and MOLTMANN, 1997)
 ECOTOXICOLOGIA

Es el estudio de la relacin dosis o concentracin

/ efecto de txicos liberados al ambiente sobre los
sistemas biticos incluyendo los niveles de
organizacin inferiores y superiores al nivel de
organismos

DAO AL ECOSISTEMA

Involucra tanto la estructura como la funcin del

sistema
La funcin slo es posible si se considera la
estructura
La estructura y la funcin no pueden ser
consideradas aisladamente
Importancia de las relaciones trficas (transferencia
de energa y nutrientes)

TOXICOLOGIA Y
ECOTOXICOLOGIA
TOXICOLOGIA:

Introduccin directa del txico en el organismo

Focaliza su atencin sobre una nica especie,
el hombre
Dosis (DL, DE - tiempo)

ECOTOXICOLOGIA:

Introduccin del txico en el medio

Focaliza su atencin sobre toda la biota
(estructura y funcin del ecosistema)
Considera los procesos de:
Transformacin
Degradacin
Secuestracin
Redistribucin
Bioacumulacin
Concentracin (CL, CE - tiempo)

TOXICOLOGIA ECOTOXICOLOGIA
COMPUESTO A SER ENSAYADO

ADMINISTRACION

A travs del ALIMENTO, INYECCION Introduccin en el MEDIO

INHALACION (DOSIS) DE ENSAYO
(CONCENTRACION)

PARTICION
TRANSFORMACION
DEGRADACION en el medio

CAPTURA por organismos

TRANSPORTE - METABOLISMO
dentro de organismos

REACCION CON EL SITIO SENSIBLE O BLANCO

en organismos

EFECTOS

expresados por el ORGANISMO expresados por

ORGANISMOS

expresados por

POBLACION

expresados por
COMUNIDAD

expresados por
ECOSISTEMA

QUIMICA AMBIENTAL

La deteccin de una sustancia no es evidencia de sus

efectos potenciales. Su relevancia ecotoxicolgica es
sujeto de controversia.

Aporta evidencia cuantitativa de la presencia de la

sustancia potencialmente txica = ANALISIS DE
RESIDUOS
 Estudia los mecanismos y modelos de transporte, el
destino final y el impacto de los xenobiticos en el
ambiente abitico (KORTE, 1980, 1987)

Centra su atencin en la sustancia qumica, su

ingreso, presencia (concentracin), transporte, destino
y procesos de transformacin en el medio abitico
(BOURDEAU et al., 1989)

Se centra ms directamente en el destino de los

productos qumicos desde el momento de su
aplicacin hasta que alcanzan a su receptor biolgico
(STEINEMANN et al., 1990)

ECOTOXICOLOGIA (en sentido tcnico):

Estudia los efectos (a nivel infraindividual, individual,

supraindividual), mecanismos de accin y
transporte, metabolismo y mecanismos de
detoxificacin de los xenobiticos sobre el medio
bitico

DEFINICIONES

ECOTOXICOLOGIA ACUATICA:
 Es el estudio cuali y cuantitativo de los
efectos adversos de xenobiticos sobre los
ecosistemas acuticos

CONTAMINANTE:

Sustancia introducida en el ambiente como

resultado, por lo menos en forma parcial, de
la actividad humana y que produce efectos
adversos no deseados sobre los organismos
individuales y sobre el ecosistema

ECOTOXICOLOGIA

ECOTOXICOLOGIA PROSPECTIVA O PREDICTIVA:

Evaluacin de la toxicidad antes de la produccin y
comercializacin del producto

ECOTOXICOLOGIA RETROSPECTIVA:
 Evaluacin de la toxicidad ante la indicacin cierta o
sospecha de que el xenobitico produce efectos adversos
sobre el ecosistema

OBJETIVOS DEL ENSAYO DE TOXICIDAD:

Investigacin bsica
Criterio de calidad de agua
Evaluacin del impacto ecotoxicolgico o del riesgo
Monitoreo de un cuerpo de agua

IMPACTO ECOTOXICOLOGICO:
Interaccin entre el agente txico y el sistema bitico que
conduce a la interrupcin de la funcin armnica del
sistema
Cadena causal: agente - receptor - efecto
Se manifiesta cuando se exceden las variaciones normales
de las funciones del sistema

DEFINICIONES
TOXICIDAD:
Es la capacidad de una sustancia de causar algn
efecto nocivo sobre organismos vivos

Depende de:
 Cantidad administrada o absorbida
Va de ingreso al organismo
Distribucin a lo largo del tiempo despus de su
administracin
Naturaleza y severidad del dao producido
Tiempo necesario para producir el efecto

RIESGO:
Es la frecuencia esperable de efectos adversos
como consecuencia de la exposicin al xenobitico

SEGURIDAD:
Se establece sobre la base del riesgo socialmente
aceptable, considerando las frecuencias
esperadas de los efectos adversos y de su severidad
sobre el hombre y el ecosistema

Ecosistemas

Composicin de la comunidad

Cambios en la poblacin

Respuestas a nivel de organismo individual

 Cambios fisiolgicos

Cambios bioqumicos

Contaminante

Aumento del tiempo de respuesta

Aumento de la dificultad de vinculacin a productos qumicos

especficos

Aumento de la importancia ecolgica

Relaciones de vinculacin entre respuestas de diferentes niveles de

organizacin

NIVELES DE ORGANIZACIONBIOLOGICOS
Caractersticas Estructurales y Funcionales

NIVEL ESTRUCTURA FUNCION

Descripcin de formas en ciertos Evaluacin durante un

segmentos de tiempo prolongado perodo de tiempo
CELULAS / Molculas, membranas, tejidos, Crecimiento, metabolismo,
ORGANOS caminos metablicos, tipos de conversin energtica,
clulas, tipo de rganos detoxificacin

Especie, habitat, edad, estado, sexo Metabolismo, crecimiento y

ORGANISMO
desarrollo, reproduccin, salud,
mortalidad, concentracin en
tejidos, comportamiento

POBLACION Presencia, nmero de individuos, Fertilidad, reproduccin,

densidad, dispersin, pirmide de eficiencia / produccin
edades, relacin de sexos

COMUNIDAD Nmero y composicin de especies, Regulacin, funcin

relaciones de dominancia

ECOSISTEMA Ubicacin geogrfica, clima, tipo, Resiliencia, estabilidad.

sucesin, equilibrio Degradacin,, filtracin,
produccin primaria,
bioretencin

TOXICO

Es el agente que puede producir un efecto

adverso
Dao referido a la estructura y funcin del
sistema
La introduccin puede ser:
 deliberada (efluentes)
accidental (derrames)
El sitio de liberacin es:
no puntual
puntual
La cantidad liberada debe superar un nivel
umbral para que se manifieste el efecto
Se establece la relacin concentracin /
respuesta
Duracin de la exposicin
Ensayos de toxicidad

TIPOS DE TOXICOS

Segn su modo de accin:

No selectivos

Selectivos
Dificultad para establecer
interpolaciones entre especies
Mecanismos:
 Presencia o ausencia de sitios
receptores
Alteracin en los procesos de
distribucin del txico

Relaciones estructura / actividad (QSAR)

TIPOS DE CONTAMINANTES

IONES INORGANICOS
Metales pesados : no biodegradables
Aniones: nitratos
Fosfatos

COMPUESTOS ORGANICOS
Hidrocarburos
Alcanos, alquenos, alquinos

Aromticos

Bifenilos policlorados (PCBs)

Dibenzodioxinas policloradas (PCDDs)
Dibenzofuranos policlorados (PCDFs)
 Bifenilos polibrominados (PBBs)
Plaguicidas
Detergentes
Clorofenoles

COMPUESTOS ORGANOMETALICOS

ISOTOPOS RADIOACTIVOS

GASES
Ozono
Clorofluorocarbonos (CFCs)
Oxidos de carbono: CO2
Oxidos de nitrgeno: NO, NO2, NOX
Oxidos de azufre: SO2
CLASIFICACION DE PLAGUICIDAS

Segn organismo blanco

 PLAGUICIDA ORGANISMO BLANCO

Acaricidas Acaros y termitas

Algicidas Algas

Bactericidas Bacterias

Fungicidas Hongos

Herbicidas Plantas, usualmente malezas terrestres o

acuticas

Insecticidas Insectos

Molusquicidas Moluscos (caracoles y babosas)

Nematicidas Nematodes (parsitos externos)

Rodenticidas Roedores

Termiticidas Termitas

Segn tipo de formulacin

 PLAGUICIDA CARACTERISTICAS

Sprays Insecticidas, herbicidas o fungicidas como

concentrados emulsificables, lquidos miscibles en
agua, polvos solubles en agua (mojables), soluciones
oleosas

Polvos Insecticidas y fungicidas como agentes no diludos,

aerosoles de polvos

Granulados Insecticidas, herbicidas y algicidas bajo la forma de un

carrier (transportador) inerte impregnado con el
plaguicida

Coatings Insecticidas y fungicidas para tratamiento de semillas

Aerosoles Insecticidas. Repelentes y desinfectantes bajo la forma

de spray, para aplicacin en interiores

Fumigantes Lquidos evaporables o gases para tratamiento de

suelos y control de plagas en almacenajes con efecto
nematicida e insecticida

Cebos Prcticamente, sin liberacin del i.a. en el ambiente; el

txico es ingerido por el organismo blanco (insectos,
moluscos y roedores) atrado por el seuelo

Formulaciones Insecticidas microencapsulados, lacas para pinturas y

de liberacin bandas de resina para uso en interiores
lenta

Segn estructura qumica

INSECTICIDAS HERBICIDAS FUNGICIDAS

Organoclorados Algunos criterios usados para Inorgnicos

 (hidrocarburos la clasificacin: (Sulfuro, cobre o
clorados) mercurio)
En relacin a la poca de
Organofosforados siembra del vegetal a ser Orgnicos
(steres de cido protegido (ditiocarbamatos)
fosfrico)
En relacin al mecanismo Sistmicos
Carbamatos de exposicin (va suelo u (bencimidazoles)
hojas)
Piretroides naturales Antibiticos
y sintticos En relacin al modo de
accin (herbicidas de (Existe gran
Dinitrofenoles contacto, sistmicos) heterogeneidad
qumica)
Organotinas En relacin a la estructura
qumica:
Microbianos
Acidos fenoxialifticos

Nitroanilinas

Ureas sustitudas

Carbamatos y
tiocarbamatos

Triazinas (heterocclicos
nitrogenados)

Derivados del fenol y

dinitrofenoles

BIODISPONIBILIDAD DE TOXICOS

En solucin
 Adsorbidos sobre:

Slidos en suspensin
Sedimentos
Biota

Incorporados a la biota

CONCENTRACION DE TOXICOS
EN EL AMBIENTE

Concentracin TOXICO
Propiedades fsicas
 Transporte Propiedades
qumicas
Fuentes
Tasa de ingreso

Transformacin ECOSISTEMAS
Propiedades fsicas
Destino Propiedades
qumicas

TRANSPORTE

Involucra, generalmente, mltiples medios:

aire, agua, suelo
Numerosos modelos, desde difusin simple
a ecuaciones multidimensionales complejas

AGUA:
 Varios modelos distintos: fsiscos,
matemticos, etc.
Caracterizados por:
Simulacin de movimientos del agua,
Concentracin o tasa de carga del
contaminante
Dimensionalidad:
una (mayora)
dos (algunos)
tres o ms (muy pocos)

MEDIOS Y COMPARTIMIENTOS AMBIENTALES

MEDIO COMPARTIMIENTOS

AIRE Atmsfera
Partculas en aire
Aerosoles
Nubes (vapor)
Biota
 AGUA Aguas superficiales
(MEDIO ACUATICO) Sedimentos
Slidos en suspensin
Agua subterrnea
Biota

Ambiente marino
Ambiente dulceacucola
Ambientes salobres

TIERRA Suelo
(MEDIO TERRESTRE) Agua retenida entre los poros del
suelo
Atmsfera del suelo
Vegetacin superficial
Biota del suelo

PRINCIPALES RUTAS DE INGRESO DE CONTAMINANTES

ORGANICOS EN LOS ORGANISMOS

TIPO DE RUTA DE INGRESO FUENTE DE CONTAMINANTES

ORGANISMO
Sistema digestivo Alimento y agua ingeridos
Vertebrados
Terrestres Piel Superficies contaminadas

Pulmones Aerosoles y partculas en aire

Vapor; gotas y partculas en aire
Invertebrados Tracto alimentario Alimento y agua
terrestres
Cutcula (insectos) Superficies contaminadas
Paredes del cuerpo (lombrices) Ambiente contaminado (suelo)

Trqueas (artrpodos), vas areas Gotas y partculas en aire

Peces Branquias Contaminantes disueltos o

suspendidos en agua y
sedimentos

Sistema digestivo Alimento

Mamferos Sistema digestivo Alimento
acuticos y Cantidades pequeas de agua
aves ambiental o agua ingerida (aves)

Anfibios Sistema digestivo Alimento

Cantidades pequeas de agua
ingerida

Piel Contaminantes disueltos o

suspendidos en agua y
sedimentos
Invertebrados Tracto alimentario Alimento
acuticos Agua ingerida

Superficies respiratorias Contaminantes disueltos o

suspendidos en agua y
sedimentos
Plantas Hojas Contaminantes en gotas o
partculas
Vapores

Races Contaminantes disueltos en agua

del suelo

CRITERIOS PARA EL ESTABLECIMIENTO

DE PRIORIDADES EN LA EVALUACION
DE TOXICOS

TIPOS DE XENOBIOTICOS:
Consumidos directamente por el hombre
Liberados directamente al ambiente
 Contaminantes de otros productos

CARACTERISTICAS:
Indicacin cierta o sospecha de alta
toxicidad
Alta persistencia en el ambiente
Capacidad para inhibir mecanismos de
detoxificacin de organismos vivos
Acumulacin potencial en la biota y en el
ambiente
Tipo y tamao de las poblaciones potencialmente

DEFINICIONES
DOSIS: Es la cantidad de sustancia administrada a un
organismos, expresada como unidad / peso corporal

CONCENTRACION: Es la cantidad de sustancia

aplicada en el medio, expresada como unidad de
peso o volumen / volumen del medio

EFECTO: Es el cambio biolgico producido tanto en

el nivel de organismo individual como en niveles de
 organizacin inferiores o superiores al individuo,
asociado a la exposicin al txico

RESPUESTA: Proporcin de la poblacin expuesta al

txico que manifiesta el efecto definido

EFECTO CUANTAL: No medible mediante una escala

de intensidad o severidad graduada; se expresa
como presente o no presente

EFECTO NO CUANTAL: Medible mediante una escala de

intensidad graduable

EFECTOS
AGUDO:
Corto tiempo de exposicin (horas, das)
Severidad (mortalidad)
Determinacin de la concentracin que causa la mortalidad del 50%
de la poblacin expuesta (CL50)

CRONICO, SUBCRONICO:
Exposicin simple o exposiciones repetidas de largo tiempo de
duracin
Tiempo de aparicin de los efectos
Efectos seleccionados:
Letal o subletal
Cambios en el comportamiento
Cambios fisiolgicos
 Cambios bioqumicos
Cambios histolgicos
Reversible - irreversible (ensayos de recuperacin)

INTERACCION por exposicin a mezclas de txicos

EFECTO LETAL:
Causa la muerte por accin directa como consecuencia de la
exposicin a una determinada concentracin del agente txico

EFECTO SUBLETAL:
Se produce por debajo del nivel que causa la muerte directamente,
como resultado de la exposicin a una determinada concentracin
del agente txico

EFECTOS
CURVA CONCENTRACION-EFECTO:
Expresa la relacin entre concentracin y magnitud de un efecto
determinado, tanto a nivel individual como poblacional

CURVA CONCENTRACION-RESPUESTA:
Expresa la relacin entre concentracin y proporcin de individuos
que responden a un efecto determinado

MEZCLA DE AGENTES TOXICOS

La accin conjunta puede ser:
ADITIVA:
Magnitud del efecto o respuesta numricamente igual a la
suma de los efectos o respuestas de txicos individuales
COMBINADA:
Los txicos producen efectos diferentes o tienen distintos
modos de accin
MAYOR QUE LA ADITIVA - SINERGISMO:
La toxicidad de la mezcla es mayor que la esperada por la
simple suma de la toxicidad de los txicos individuales
MENOR QUE LA ADITIVA - ANTAGONISMO:
La toxicidad de la mezcla es menor que la esperada por la
simple suma de la toxicidad de los txicos individuales

CRITERIO PARA LA SELECCION DE

EFECTOS

Inequvoco
Relevante
Rpidamente observable
De fcil descripcin
Mensurable
Biolgicamente significativo
 Reproducible
Screening tests: mortalidad
Subletalidad:
Crecimiento
Reproduccin
Cualitativo
Cuantitativo
Se establecen como ndices de toxicidad:
CL50,CE50 - tiempo
TEMPORAL SCALE

100000 years CAMBIO

CLIMATIC
O
10000 years

1000 years ROUTINE ACID

EFFLUENT DEPOSITION
S
100 years

10 years

1 year PESTICIDE
USE
1 month SPILLS

1 day PESTICIDE APPLICATION

1 second 1 m 1 mm 1m 1 km 1000 km 10000 km

SPATIAL SCALE

ARRANGEMENT OF A VARIETY OF ANTHROPOGENIC HAZARDS ON SPATIAL AND TEMPORAL SCALES (Suter, 1994)
TEMPORAL SCALE

100000 years REGIONAL

DYNAMICS
10000 years ECOSYSTEM
DYNAMICS

1000 years MICRO-

ORGANISM
POPULATION
100 years

10 years

1 year POPULATION
DYNAMICS

1 month MACRO-
ORGANISM
PHYSIOLOGY
1 day MICRO-
ORGANISM
PHYSIOLOGY
1 second 1 m 1 mm 1m 1 km 1000 km 10000 km

SPATIAL SCALE

ARRANGEMENT OF LEVELS OF BIOLOGICAL ORGANIZATION ON SPATIAL AND TEMPORAL SCALES (Suter, 1994)
 DEFINICIONES

BIOENSAYO: Mtodo para evaluar la potencia relativa

de un agente sobre organismos vivos, mediante la
comparacin del efecto del agente con el de una
solucin patrn o standard

ENSAYO DE TOXICIDAD: Permite la deteccin y

evaluacin de la capacidad de un agente de producir
efectos txicos adversos sobre organismos vivos
 ENSAYOS DE ECOTOXICIDAD

CARACTERISTICAS COMUNES:

Exposicin de grupos de organismos

misma poblacin
en buenas condiciones de salud
con aclimatacin previa
Mantenimiento de condiciones ambientales
constantes y estandarizadas
Exposicin a concentraciones graduadas del
agente
Grupos control adecuados
Observacin de signos del efecto presentes
Medicin y registro detallado de efectos
biolgicos en grupos control y tratados
Observacin patolgica de grupos control y
tratados
Anlisis estadstico de resultados

TIPOS DE ENSAYOS
 DE LABORATORIO: Reproduccin parcial de
las condiciones reales del ambiente

DE CAMPO: Organismos mantenidos en

contenedores adecuados (limnocorrales)
sometidos a las condiciones del medio

Segn sea la renovacin del medio:

ESTATICO: Se establece la concentracin del

txico al principio del ensayo; el medio no se
renueva

SEMIESTATICO: Renovacin peridica del medio

de ensayo y del txico

FLUJO CONTINUO: Renovacin contnua del

medio de ensayo y txico

TIPOS DE ENSAYOS

Segn el tiempo de exposicin:

 AGUDO: Perodo de exposicin corto en
relacin al tiempo de generacin del organismo
de prueba

SUBCRONICO: El perodo de exposicin cubre,

al menos, el 10% del tiempo de generacin del
organismo de prueba

CRONICO: El perodo de exposicin cubre, al

menos, una generacin del organismo de
prueba

DE REPRODUCCION: El perodo de exposicin

cubre, al menos, tres generaciones del
organismo de prueba

DE RECUPERACION: El perodo de exposicin

es seguido por la transferencia y observacin en
un medio no txico

METODOS DE ENSAYO (1)

Concentracin de efecto no observado (NOEC)
Mnima concentracin de observacin de efecto
(LOEC)
ENSAYOS DE TOXICIDAD AGUDA

Peces: mortalidad
Invertebrados: inmovilidad
Microalgas: crecimiento
Indices: CL50 - CE50 - tiempo
Ensayo independiente del tiempo (TI) (CL50 - CE50
incipiente)

ENSAYOS DE TOXICIDAD CRONICA

Ciclo de vida completo

Ciclo de vida parcial
Concentracin mxima aceptable de txico (MATC)
Valor crnico (VC)
NOEC < VC < LOEC

METODOS DE ENSAYO (2)

ENSAYOS CON ESTADIOS TEMPRANOS DE VIDA

 Huevo - embrin - larva - alevino
Duracin: 1 2 meses

ENSAYOS DE BIOACUMULACION

Compuestos polares (hidroflicos)

Compuestos no polares (hidrofbicos)
Factor de bioacumulacin (BCF)
Coeficiente de particin n-octanol - agua
Bioconcentracin - biacumulacin -
biomagnificacin
 INCERTEZAS EN DISTINTOS NIVELES DE INVESTIGACION
TIPO DE ENSAYO / INCERTEZAS POSIBLES EN EXTRAPOLACION
FUENTE DE DATOS
ENSAYOS Influencia de condiciones ambientales sobre la funcin concentracin - respuesta y el rgimen de exposicin
MONOESPECIFICOSDE Un cierto estado del ciclo de vida como representativo del ciclo completo
LABORATORIO Pocas especies seleccionadas por su facilidad de mantenimiento como representativas de la comunidad natural
No se considera la relacin con otras especies
Los efectos a nivel individual son aplicados a nivel poblacional sin mecanismos de compensacin o ajustes por
comportamiento
MICROCOSMOS Relaciones artificiales entre especies
Se excluyen importantes relaciones trficas
Los efectos de borde pueden causar alteraciones en resultados
No se considera la heterogeneidad espacial de los ecosistemas naturales en los que se toman las muestras
El enfoque y la metodologa se modifican sobre la base de su aplicabilidad y replicabilidad ms que en relacin
con su acercamiento a los efectos reales
Se excluyen factores climticos naturales
MESOCOSMOS O Se considera un ecosistema especfico como representativo de un tipo general de ecosistema
MANIPULACION DE El "stress" generado por la aplicacin de una sustancia qumica determinada se supone representativo del
ECOSISTEMAS "stress" generado por sustancias no ensayadas
NATURALES No se consideran los efectos de condiciones fsicas ambientales y climticas ni de eventos histricos sobre el
comportamiento del ecosistema
Replicabilidad insuficiente
Dificultad en recopilar datos relevantes para la determinacin de la relacin concentracin - respuesta en el
ecosistema
Prolongada duracin del experimento, relacionado con el tiempo requerido por el ecosistema para manifestar una
reaccin adecuada, medible y recuperable
MODELOS Formulaciones matemticas imprecisas o incorrectas
Efectos basados en una poco uniforme distribucin de los organismos en el campo (agregacin)
Insuficientes bases de datos para la verificacin del modelo
El modelo es aplicado a un nivel que excede el alcance de su capacidad a fin de obtener una evaluacin relevante
Sensibilidad de los resultados frente a la variacin de los parmetros seleccionados o del diseo del modelo.
 DISEO DE ENSAYOS

Acercamiento por fases (TIER)

Ensayos simples de corto tiempo de

exposicin
Ensayos ms complejos

Controles concurrentes

Control de agua no tratada

Ensayo de control de solventes
Ensayo de referencia (producto qumico de
referencia)
 CRITERIOS PARA LA SELECCION DE
PROTOCOLOS DE ENSAYO

Aceptacin de la comunidad cientfica

Capacidad de prediccin de los efectos de un
amplio rango de txicos sobre diferentes
organismos
Base estadstica - reproducibilidad
Rango de concentracin - duracin de la
exposicin
Datos obtenidos utilizables para la evaluacin
de riesgo
Costo - eficiencia
Sensibilidad - realismo
Ensayos uniespecficos
Ensayos multiespecficos
Experimentos de laboratorio en condiciones
controladas
Experimentos de campo con un alto nmero de
variables
Validacin
 ESCALAS DE OBSERVACION EN
ENSAYOS DE TOXICIDAD

Espacial Temporal Organizacional

Estructural Funcional

Ensayo de Horas - das Organismo Crecimiento

laboratorio Reproduccin
uniespecfico
(cc - m2)

Microcosmos Das - meses Organismo Produccin

(cc-m) Poblacin Ciclo de vida
Comunidad Cadena trfica

Ensayos de Das - aos Idem Idem

campo

Monitoreo Aos dem dem

ambiental

MEDIO TERRESTRE - ENSAYOS

EXPOSI- ORGANISMO DE EFECTOS OBSERVADOS
CION PRUEBA
Lombriz de tierra Mortalidad (CL50)
AGUDA
Ave (dosis oral nica) Mortalidad (CL50)

Ave (dietaria) Mortalidad, peso corporal,

comportamiento, tasa de
alimentacin

Abejas (por contacto) Mortalidad (CL50)

Abejas (oral) Mortalidad (CL50)

Organismos benficos Mortalidad, tasa de alimentacin

Ave (reproduccin) Mortalidad, tamao al alcanzar el

CRONICA acoplamiento, cambios
morfolgicos de huevos, efectos
sobre cras

Microflora Actividad deshidrogenasa,

respiracin a corto plazo, ciclo
del nitrgeno

Lombriz de tierra Reproduccin (NOEC)

Organismos benficos Reproduccin (NOEC)

 MEDIO ACUATICO - ENSAYOS

EXPOSI- ORGANISMO DE PRUEBA EFECTOS OBSERVADOS

CION

Dos especies diferentes de peces Mortalidad (CL50 96 hs)

dulceacucolas,
Cnesterodon decemmaculatus,
Poecilia reticulata

AGUDA Microcrustceo del zooplancton Inmovilidad (CE50 48 hs)

(Daphnia sp.), Daphnia magna,
Daphnia spinulata

Alga dulceacucola, Scenedesmus Inhibicin del crecimiento (CI50 96 hs)

acutus, S. quadricauda,
Selenastrum capricornutum

Crustceo bentnico, Hyalella Mortalidad o inmovilidad (CL50 10, 14 das,

curvispina, Hyalella azteca CE50)
 Pez dulceacucola Mortalidad de alevinos y juveniles, peso corporal, longitud
(estados tempranos del cuerpo, tasa de crecimiento
del ciclo de vida)

Pez dulceacucola Mortalidad de adultos, mortalidad de alevinos, tiempo de

(reproduccin) puesta, xito en la eclosin, peso y longitud del cuerpo de
adultos y alevinos, tasa de crecimiento, comportamiento
CRONICA

Microcrustceo del Inmovilidad de adultos, nmero de huevos / hembra,

zooplancton (ciclo de nmero de efipios / hembra, xito en la eclosin, tiempo de
vida completo) eclosin, inmovilidad de nuevos ejemplares, tasa de
reproduccin, tasa de crecimiento, comportamiento

Crustceo bentnico Inmovilidad de adultos, nmero de huevos / hembra, xito

(ciclo de vida en la eclosin, tiempo de eclosin, inmovilidad de nuevos
completo) ejemplares, tasa de reproduccin, tasa de crecimiento,
comportamiento
 CALCULATION METHODS

GRAPHICAL METHOD
LC50
Can be performed with 0 or 1 partial kill(s)
Subjective

BINOMIAL METHOD
LC50 (= 95% confidence intervals)
Can be performed with 0 or 1 partial kill(s)

MOVING AVERAGE ANGLE METHOD

LC50 + 95% confidence intervals
Can be performed with 0 or 1 partial kill(s)
Can be performed manually, but labor intensive

MODIFIED SPEARMAN-KARBER METHOD

LC50 + 95% confidence intervals
Can be performed with 0 or 1 partial kill(s)
The concentrations tested must cover the range 0% - 100% response

LICHFIELD AND WILCOXON METHOD

LC50 + 95% confidence intervals
At least 2 partial kills required
Can easily be performed manually
Subjective to a certain extend

PROBIT ANALYSIS
LC50 + 95% confidence intervals
At least 2 partial kills required
Is difficult to be performed manually
 METODOS ESTADISTICOS RECOMENDADOS
PARA ENSAYOS DE TOXICIDAD CRONICA

DATOS OBSERVADOS

ESTIMACION DE CE50 NORMALIDAD DE DATOS

Anlisis Probit Test de Shapiro-Wilks

DISTRIBUCION NORMAL DISTRIBUCION NO NORMAL

HOMOGEINEIDAD DE VARIANZAS
Test de Bartlett

HOMOGENEIDAD HETEROGENEIDAD

IGUAL NUMERO DE IGUAL NUMERO DE

REPLICAS REPLICAS

NO SI SI NO

Test de t con Test de Dunnett Test de Steel Test de Wil--

ajuste de con ajuste (ranks) coxon (ranks)
Bonferroni de Bonferroni
 FACTORES A CONSIDERAR EN EL
DISEO DE ENSAYOS DE
TOXICIDAD

Propiedades fsico-qumicas del producto

Pureza qumica
Presencia de impurezas
Seleccin del organismo de prueba
Variables ambientales

PROPIEDADES FISICO-QUIMICAS DEL

PRODUCTO

Estructura qumica: grupos funcionales

Estabilidad frente a distintos valores de pH
Propiedades fotoqumicas
Coeficiente de particin n-octanol/agua
Naturaleza lipoflica
Potencial de ionizacin
Tamao y forma de las partculas
Densidad

EL ORGANISMO DE PRUEBA
 Diferencias en la sensibilidad entre las distintas
especies
Accesibilidad al txico
Tasa y modelo de metabolismo y excrecin
Mayor sensibilidad de los individuos juveniles
Influencia del estado salud / stress sobre la
sensibilidad

CRITERIOS PARA LA SELECCION DEL

ORGANISMO DE PRUEBA
 Amplio rango de sensibilidad (batera de ensayos con distintos organismos)
Sensibilidad constante de la poblacin utilizada
Alta disponibilidad y abundancia (amplia distribucin geogrfica)
Estabilidad gentica y uniformidad de las poblaciones usadas en los
ensayos
Organismos autctonos o representativos del ecosistema que se evala
Conocimiento de su biologa, fisiologa y hbitos nutricionales
Preferencia por especies de importancia recreacional, comercial o
ecolgica
Disponibilidad de ejemplares a lo largo de todo el ao
Sencillo mantenimiento y cultivo en condiciones de laboratorio
Preferencia por especies de tamao reducido para facilitar la obtencin de
gran nmero de datos
Existe un limitado nmero de especies standard:
algas fitoplanctnicas
crustceos: Daphnia, camarones, Artemia
peces
rotferos
anfpodos
En ensayos de campo pueden utilizarse especies no estandarizadas
 PROCEDIMIENTOS Y CONDICIONES PARA
UNA BUENA PRACTICA DE LABORATORIO

PERSONAL INSTALACIONES
-Calificacin -Mantenimiento y manipu-
-Responsabilidades lacin de organismos de
-Direccin prueba
-Funciones para garantizar -Manipulacin y almacena-
la calidad miento de reactivos
-Espacio para el desarrollo
de los ensayos

EQUIPAMIENTO OPERACIONES TOXICO

DE LABORATORIO
-Localizacin -Procedimientos operacio- -Manipulacin
-Mantenimiento nales para ensayos, man- y almacena-
-Calibracin tenimiento de organismos miento
y preparacin de solucio- -Caracteriza-
nes cin

REGISTRO DE DATOS

INFORME DE RESULTADOS
-Localizacin
-Recuperacin
 GOOD LABORATORY PRACTICE

OECD : Organisation for Economic Cooperation and Development,

ISBN 92-64-12367-9, Paris 1982.

U.S.A.: United States Environmental Protection Agency, Title

40 Code of Federal Regulations Part 160 (FIFRA)
Federal Register, 29 November 1983, and
Subsequent Amendment Federal
Register 17 August 1989.

United States Environmental Protection Agency, U.S. EPA

2185, Good Automated Laboratory Practices, 8 October 1995

Japan: Japan Ministry of Agriculture, Forestry and Fisheries, 59

NohSan, Notification N 3850, Agricultural Production
Bureau, 10 August 1984.

U.K.: Good Laboratory Practice, the United Kingdom

Compliance Program, Department of Health and
Social Security 1986 and Subsequent Revision,
Department of Health 1989.

INTERRELACIONES ENTRE LOS FACTORES QUE

DETERMINAN LA SELECCION DE UN PROTOCOLO
DE ENSAYO
Mnimo
VALOR ECONOMICO

Costo

Duracin

Equipamiento Entrenamiento del

personal
Costo, representa-
tividad, sensibili- Captura y mante-
dad nimiento de orga-
nismos.

PROTOCOLO DE ENSAYO

Eleccin del organismo Eleccin del criterio

Representatividad Sensibilidad
ecolgica

Mximo VALOR BIOLOGICO

 SECTION 12

REPORT PREPARATION
(Adapted from USEPA, 1989c)

The following general format and content are recommended for the report:

12.1 INTRODUCTION
1. Permit number
2. Toxicity testing requirements of permit
3. Plant location
4. Name of receiving water body
5. Contractor (if contracted)
a. Name of firm
b. Phone number
c. Adress

12.2 PLANT OPERATIONS

1. Product(s)
2. Raw materials
3. Operating schedule
4. Description of waste treatment
5. Schematic of waste treatment
6. Retention time (if applicable)
7. Volume of discharge (MGD, CFS, GPM)
8. Design flow of treatment facility at time of sampling

12.3 SOURCE OF EFFLUENT, RECEIVING WATER AND DILUTION

WATER
1. Effluent samples
a. Sampling point
b. Sample collection method
c. Collection dates and times
d. Mean daily discharge on sample collection date
e. Lapsed time from sample collection to delivery
f. Sample temperature when received at the laboratory
g. Physical and chemical data

2. Receiving Water Samples

a. Sampling point
b. Sample collection method
c. Collection dates and times
d. Streamflow at time of sampling and 7Q10
 e. Lapsed time from sample collection to delivery
f. Sample temperature when received at the laboratory
g. Physical and chemical data

3. Dilution Water Samples

a. Source
b. Collection date(s) and time(s) (when applicable)
c. Pretreatment
d. Physical and chemical characteristics (pH, hardness,
salinity, etc.)

12.4 TEST CONDITIONS

1. Toxicity test method used (title, number, source)
2. Endpoint(s) of test
3. Deviations from reference method, if any, and reason(s)
4. Date and time test started
5. Date and time test terminated
6. Type and volume of test chambers
7. Volume of solution used per chamber
8. Number of organisms per test chamber
9. Number of replicate test chambers per treatment
10. Feeding frequency, and amount and type of food
11. Acclimation temperature of test organisms (mean and range)
12. Test temperature (mean and range)

12. 5 TEST ORGANISMS

1. Scientific name
2. Age
3. Life stage
4. Mean lenght and weight (where applicable)
5. Source
6. Diseases and treatment (where applicable)

12.6 QUALITY ASSURANCE

1. Reference toxicant used routinely, source
2. Date and time of most recent reference toxicant test; test results and
current cusum chart
3. Dilution water used in reference toxicant test
4. Physical and chemical methods used

12.7 RESULTS
 1. Provide raw toxicity data in tabular form, including daily records of
affected organisms in each concentration ( including controls)
2. Provide table of endpoints: LC50, NOEC, LOEC, etc.
3. Indicate statistical methods used to calculate endpoints
4. Provide summary table of physical and chemical data
5. Tabulate QA data

12.8 CONCLUSIONS AND RECOMMENDATIONS

1. Relationship between test endpoints and permit limits
2. Action to be taken

BIOMARCADOR

Son las respuestas biolgicas a los txicos ambientales los

que dan una medida de la exposicin y, a veces, del efecto
txico (WALKER et al., 1997)
 Pueden ser respuestas a nivel molecular, celular o del
organismo entero.

Representan una medida del efecto relacionado con la

presencia de niveles particulares de un contaminante.
Proveen un medio de interpretar niveles ambientales de
contaminantes en trminos biolgicos.

BIOMARCADORES A DIFERENTES
NIVELES DE ORGANIZACIN

NIVEL DE ORGANIZACIN EJEMPLO DE BIOMARCADOR

 Molcula unida a un TCDD unido a un receptor
receptor acetilcolina
Nonilfenoles unidos a un
receptor de estrgeno

Respuesta bioqumica Induccin de monooxigenasas

Inhibicin de
acetilcolinesterasas

Alteraciones fisiolgicas Grosor de la cscara de huevo

(aves)
Feminizacin de embriones

Efectos a nivel del individuo Cambios de comportamiento

Crecimiento

EVALUACION DEL RIESGO

Proceso de estimacin de la probabilidad de que ciertas actividades

produzcan determinados efectos adversos

SEGURIDAD Y SALUD HUMANAS ECOSISTEMAS

EVALUACION DEL RIESGO EVALUACION DEL RIESGO
HUMANO ECOLOGICO

EVALUACION DEL RIESGO GLOBAL

INVOLUCRA

EVALUACION DE LA EVALUACION DE LOS

EXPOSICION EFECTOS
Define el movimiento del agente Define el impacto asociado a
desde la fuente hasta su destino distintos niveles de stress.
final ltimo.
Origen o fuente
Transporte
Destino final

EVALUACION DEL RIESGO RELATIVO

OBJETIVO: Desarrollo de indicadores del riesgo total, los que pueden

ser utilizados en el proceso de toma de decisiones.

Es el paso ms difcil en el proceso de Evaluacin del riesgo

Existe carencia de una metodologa de evaluacin slida, ampliamente

aceptada
 Integracin de los factores de riesgo con el costo econmico y social
de la toma de decisin

El apropiado balance entre estas dos clases de factores conduce a

acuerdos entre la comunidad cientfica y los organismos polticos
encargados de la toma de decisiones

EVALUACION DE EFECTOS ECOLOGICOS

Sobre la base de:

1. CLASIFICACION AMBIENTAL
Ambiente urbano
Ambiente productivo
Ambiente natural
Ambiente de uso mltiple

2. DESARROLLO DE FACTORES DE PESO

3. EVALUACION DE RECEPTOR/ES REPRESENTA-TIVOS

 Seleccin de especies representativas a nivel poblacional, de
comunidad y de procesos ecolgicos

Seleccin de indicadores apropiados de los efectos que se

manifiestan sobre los receptores representativos

4. EVALUACION DE LA FUNCION CONCENTRACION-

RESPUESTA
Recoleccin de datos, teniendo en cuenta:
Tipo de efecto medido
Condiciones de exposicin
Forma de experimentacin

Determinacin de la potencial recuperacin de poblaciones y

procesos expuestos

EL PROBLEMA DE LA EVALUACION DE LA RELACION

CONCENTRACION - RESPUESTA

1. ENFOQUE DIRECTO

Completa batera de ensayos

Implementacin simultnea
Resultados altamente confiables
Alto consumo de tiempo y elevado costo

2. ENFOQUE EN FASES O ETAPAS

Secuencia de actividades de ensayo

Utilizacin de los resultados de las etapas precedentes para el
diseo de cada fase subsiguiente

FASE 1
Exposicin aguda
Ensayos monoespecficos
Evaluacin rpida y grosera del riesgo relativo
 FASE 2 Y SUBSIGUIENTES
Exposiciones de mayor duracin
Ensayos multiespecficos
Mejor utilizacin de los recursos disponibles
Rpido acercamiento a los problemas prioritarios
Optima relacin costo - efectividad
Potencialmente, resulta posible omitir aspectos importantes
del riesgo ecolgico durante la FASE 1

3. ENFOQUE INTERMEDIO

Acercamiento en FASES, incluyendo ensayos de mayor tiempo

de exposicin durante la FASE 1
Puede existir redundancia de informacin en la FASE 1

LEGISLACION NACIONAL Y PROVINCIAL

NACIONAL:

Resolucin No. 440/98 y modificacin

2000 Secretara de Agricultura,
Ganadera,PescayAlimentacin

Ley 24051/92 Decreto

Reglamentario No. 831/93 Residuos
Peligrosos

Ley 17319/67 Decretos y

Disposiciones modificatorias
Disposicin 52/97 Hidrocarburos,
Exploracin, extraccin, refineras,
construccin, operacin y abandono de
 oleoductos y poliductos Proteccin
ambiental.

PROVINCIADEBUENOSAIRES:

Ley11720yDecretoReglamentarioNo.
806/97ResiduosEspeciales

Resolucin No. 601/98 Secretara de

PolticaAmbientalResiduostxicoscon
prohibicin de ingreso al territorio de la
ProvinciadeBuenosAires.
CLASEDE No.DECODIGO CARACTERISTICAS
NACIONES (LEY11720)
UNIDAS

6.1
H6.1 Txicos (venenos) agudos: Sustancias o desechos que pueden
causarlamuerteolesionesgravesodaosalasaludhumana,
siseingierenoinhalanoentranencontactoconlapiel.

9
H10 Liberacindegasestxicosencontactoconelaireoelagua:
Sustanciaodesechosque,porreaccinconelaireoelagua,
puedenemitirgasestxicosencantidadespeligrosas.

9
H11 Sustancias txicas (con efectos retardados o crnicos):
Sustancias o desechos que, de ser aspirados o ingeridos o de
penetrar en la piel pueden entraar efectos retardados o
crnicos,inclusolacarcinogenia.

9
H12 Ecotxicos:Sustanciasodesechosque,siseliberan,tieneno
pueden tener efectos adversos inmediatos o retardados en el
ambiente debido a la bioacumulacin o los efectos txicos en
lossistemasbiticos.