Manual de Biosegurdiad en El Laboratorio

MANUAL DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO TERCERA EDICIN
Durante los ms de 20 aos transcurridos desde su primera publica-

cin en 1983, el Manual de bioseguridad en el laboratorio ha propor-
MANUAL DE
cionado orientacin prctica sobre las tcnicas de bioseguridad a los
laboratorios de todos los niveles. Las tcnicas microbiolgicas apro-
BIOSEGURIDAD EN
piadas y el uso correcto del equipo de bioseguridad por personal bien EL LABORATORIO
adiestrado siguen siendo los pilares fundamentales de la bioseguridad
en el laboratorio. Sin embargo, la globalizacin, los importantes avan- Tercera edicin
ces tecnolgicos, la aparicin de nuevas enfermedades y las graves
amenazas que suponen el uso indebido y la liberacin intencionados
de agentes microbiolgicos y toxinas han hecho necesario revisar los
procedimientos conocidos. En consecuencia, para esta nueva edicin
el manual ha sido profundamente revisado y ampliado.
El nuevo manual abarca la evaluacin de riesgos y el uso de la tecno-
loga del ADN recombinante en condiciones de seguridad y ofrece
directrices para la puesta en servicio y la certificacin de los laborato-
rios. Se presentan conceptos de proteccin biolgica y se reflejan las
normas ms recientes para el transporte de sustancias infecciosas.
Tambin se han incorporado materiales sobre la seguridad en los
laboratorios asistenciales que han sido publicados previamente por la
OMS en otros documentos.
Es de esperar que el manual siga sirviendo de estmulo para que los
pases implanten programas de seguridad biolgica y cdigos de
prcticas nacionales para la manipulacin sin riesgo de material
potencialmente infeccioso.
ISBN 92 4 354650 3
OMS
Organizacin Mundial de la Salud

MANUAL DE BIOSEGURIDAD
EN EL LABORATORIO
Tercera Edicin
ORGANIZACIN MUNDIAL DE LA SALUD

Ginebra
2005
Catalogacin por la Biblioteca de la OMS
Organizacin Mundial de la Salud.
Manual de bioseguridad en el laboratorio. 3a ed.
1.Contencin de riesgos biolgicos 2.Laboratorios normas
3.Infeccin de laboratorio prevencin y control 4.Manuales I.Ttulo.
ISBN 92 4 354650 3 (Clasificacin LC/NLM: QY 25)
Esta publicacin ha contado con el apoyo de la Donacin/Acuerdo de Cooperacin N

U50/CCU012445-08 de los Centros para el Control y la Prevencin de Enfermedades (CDC),
Atlanta, GA (EE.UU.). Su contenido es responsabilidad exclusiva de los autores y no representa
necesariamente la opinin oficial de los CDC.
Organizacin Mundial de la Salud, 2005

Se reservan todos los derechos. Las publicaciones de la Organizacin Mundial de la Salud
pueden solicitarse a Ediciones de la OMS, Organizacin Mundial de la Salud, 20 Avenue
Appia, 1211 Ginebra 27, Suiza (tel.: +41 22 791 2476; fax: +41 22 791 4857; correo electrnico:
bookorders@who.int). Las solicitudes de autorizacin para reproducir o traducir las publica-
ciones de la OMS ya sea para la venta o para la distribucin sin fines comerciales deben
dirigirse a Ediciones de la OMS, a la direccin precitada (fax: +41 22 791 4806; correo elec-
trnico: permissions@who.int).
Las denominaciones empleadas en esta publicacin y la forma en que aparecen presentados
los datos que contiene no implican, por parte de la Organizacin Mundial de la Salud, juicio
alguno sobre la condicin jurdica de pases, territorios, ciudades o zonas, o de sus autoridades,
ni respecto del trazado de sus fronteras o lmites. Las lneas discontinuas en los mapas repre-
sentan de manera aproximada fronteras respecto de las cuales puede que no haya pleno acuerdo.
La mencin de determinadas sociedades mercantiles o de nombres comerciales de ciertos
productos no implica que la Organizacin Mundial de la Salud los apruebe o recomiende con
preferencia a otros anlogos. Salvo error u omisin, las denominaciones de productos patenta-
dos llevan letra inicial mayscula.
La Organizacin Mundial de la Salud ha adoptado todas las precauciones razonables para
verificar la informacin que figura en la presente publicacin, no obstante lo cual, el material
publicado se distribuye sin garanta de ningn tipo, ni explcita ni implcita. El lector es respon-
sable de la interpretacin y el uso que haga de ese material, y en ningn caso la Organizacin
Mundial de la Salud podr ser considerada responsable de dao alguno causado por su
utilizacin.
Diseo: minimum graphics

Impreso en Malta
ndice
Prefacio viii
Agradecimientos x
1. Principios generales 1
Introduccin 1
PARTE I Directrices en materia de bioseguridad 5

2. Evaluacin del riesgo microbiolgico 7
Muestras para las que se dispone de informacin limitada 8
Evaluacin de riesgos y microorganismos genticamente modificados 8
3. Laboratorios bsicos niveles de bioseguridad 1 y 2 9
Cdigo de prcticas 9
Diseo e instalaciones del laboratorio 12
Material de laboratorio 15
Vigilancia mdica y sanitaria 16
Capacitacin 17
Manipulacin de desechos 18
Seguridad qumica, elctrica y radiolgica, proteccin contra incendios
y material de seguridad 20
4. El laboratorio de contencin nivel de bioseguridad 3 21
Cdigo de prcticas 21
Vigilancia mdica y sanitaria 24
5. El laboratorio de contencin mxima nivel de bioseguridad 4 26
Cdigo de prcticas 26
6. Animalarios 30
Animalarios nivel de bioseguridad 1 31
iii
MANUAL DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO

Invertebrados 34
7. Directrices para la puesta en servicio de laboratorios e instalaciones 36
8. Directrices para la certificacin de laboratorios e instalaciones 39
PARTE II Bioproteccin en el laboratorio 47

9. Conceptos de bioproteccin en el laboratorio 49
PARTE III Equipo de laboratorio 53

10. Cmaras de seguridad biolgica 55
Cmaras de seguridad biolgica de clase I 56
Cmaras de seguridad biolgica de clase II 57
Cmaras de seguridad biolgica de clase III 60
Conexiones de aire de las cmaras de seguridad biolgica 60
Eleccin de una cmara de seguridad biolgica 62
Uso de las cmaras de seguridad biolgica en el laboratorio 62
11. Equipo de seguridad 66
Cmaras aislantes de material flexible y presin negativa 66
Dispositivos de pipeteo 68
Homogeneizadores, agitadores, mezcladores y desintegradores
ultrasnicos 69
Asas desechables 69
Microincineradores 69
Ropas y equipo de proteccin personal 70
PARTE IV Tcnicas microbiolgicas apropiadas 73

12. Tcnicas de laboratorio 75
Manipulacin segura de muestras en el laboratorio 75
Uso de pipetas y dispositivos de pipeteo 76
Tcnicas para evitar la dispersin de material infeccioso 76
Uso de las cmaras de seguridad biolgica 77
Tcnicas para evitar la ingestin de material infeccioso y su contacto
con la piel y los ojos 77
Tcnicas para evitar la inyeccin de material infeccioso 78
Separacin de suero 78
Uso de las centrifugadoras 78
Uso de homogeneizadores, agitadores, mezcladores y desintegradores
ultrasnicos 79
iv
NDICE
Uso de trituradores de tejidos 80

Mantenimiento y uso de refrigeradores y congeladores 80
Tcnicas para abrir ampollas que contengan material infeccioso liofilizado 80
Almacenamiento de ampollas que contengan material infeccioso 81
Precauciones normalizadas en relacin con la sangre y otros lquidos
corporales, tejidos y excreciones 81
Precauciones con materiales que puedan contener priones 83
13. Planes de contingencia y procedimientos de emergencia 85
Plan de contingencia 85
Procedimientos de emergencia para laboratorios de microbiologa 86
14. Desinfeccin y esterilizacin 89
Definiciones 89
Limpieza del material de laboratorio 90
Germicidas qumicos 90
Descontaminacin de espacios y superficies 96
Descontaminacin de cmaras de seguridad biolgica 97
Lavado y descontaminacin de las manos 98
Desinfeccin y esterilizacin por calor 98
Incineracin 101
Eliminacin de desechos 101
15. Introduccin al transporte de sustancias infecciosas 102
Reglamentacin internacional en materia de transportes 102
El sistema bsico de embalaje/envasado triple 103
Procedimiento de limpieza de derrames 103
PARTE V Introduccin a la biotecnologa 107

16. Bioseguridad y tecnologa del ADN recombinante 109
Consideraciones de bioseguridad en relacin con los sistemas de
expresin biolgica 110
Consideraciones de bioseguridad en relacin con los vectores
de expresin 110
Vectores vricos para la transferencia de genes 110
Animales transgnicos y con genes inactivados (knock-out) 110
Plantas transgnicas 111
Evaluacin de riesgos en relacin con los organismos genticamente
modificados 111
Otras consideraciones 112
v
PARTE VI Seguridad qumica y elctrica y proteccin contra incendios 115

17. Sustancias qumicas peligrosas 117
Vas de exposicin 117
Almacenamiento de sustancias qumicas 117
Normas generales en relacin con las incompatibilidades qumicas 117
Efectos txicos de las sustancias qumicas 117
Sustancias qumicas explosivas 118
Derrame de sustancias qumicas 118
Gases comprimidos y licuados 120
18. Otros peligros en el laboratorio 121
Peligro de incendio 121
Peligros elctricos 122
Ruido 122
Radiaciones ionizantes 123
PARTE VII Organizacin y formacin en materia de seguridad 127

19. El funcionario de bioseguridad y el comit de bioseguridad 129
Funcionario de bioseguridad 129
Comit de bioseguridad 130
20. Reglas de seguridad para el personal de apoyo 132
Mecnicos y personal de mantenimiento del edificio 132
Personal de limpieza 132
21. Programas de capacitacin 133
PARTE VIII Lista de comprobacin de la seguridad 135

22 Lista de comprobacin de la seguridad 137
Locales del laboratorio 137
Locales de almacenamiento 138
Instalaciones de saneamiento y destinadas al personal 138
Calefaccin y ventilacin 138
Alumbrado 138
Servicios 139
Bioproteccin en el laboratorio 139
Prevencin de incendios 139
Almacenamiento de lquidos inflamables 140
Gases comprimidos y licuados 141
Peligros elctricos 141
vi
NDICE
Proteccin personal 141

Salud y seguridad del personal 142
Material infeccioso 143
Sustancias qumicas y radiactivas 143
PARTE IX Referencias, anexos e ndice alfabtico 145

Referencias 147
ANEXO 1 Primeros auxilios 151
ANEXO 2 Inmunizacin del personal 152
ANEXO 3 Centros Colaboradores de la OMS en materia de bioseguridad 153
ANEXO 4 Seguridad del material 154
ANEXO 5 Sustancias qumicas: peligros y precauciones 158
ndice alfabtico 202
vii
Prefacio
Hace tiempo que la Organizacin Mundial de la Salud (OMS) reconoce que la seguri-
dad y, en particular, la seguridad biolgica son importantes cuestiones de inters inter-
nacional. La OMS public la primera edicin del Manual de bioseguridad en el
laboratorio en 1983. En ella se alentaba a los pases a aceptar y aplicar conceptos bsicos
en materia de seguridad biolgica y a elaborar cdigos nacionales de prcticas para la
manipulacin sin riesgo de microorganismos patgenos en los laboratorios que se
encuentran dentro de sus fronteras nacionales. Desde 1983, muchos pases han
seguido la orientacin especializada que se ofrece en el manual para elaborar esos
cdigos de prcticas. En 1993 se public una segunda edicin del manual.
En esta tercera edicin del manual, la OMS sigue proporcionando liderazgo
internacional en materia de bioseguridad al abordar los aspectos de la seguridad y la
proteccin biolgica que se plantean en el nuevo milenio. A lo largo de toda la pu-
blicacin se subraya la importancia de la responsabilidad personal. Se han incluido
nuevos captulos que se ocupan de la evaluacin de riesgos, el uso de las tecnologas
del ADN recombinante en condiciones de seguridad y el transporte de material infec-
cioso. Los recientes acontecimientos mundiales han puesto de manifiesto la existen-
cia de nuevas amenazas para la salud pblica derivadas de la liberacin o el uso
indebido deliberados de agentes y toxinas microbianos. Por consiguiente, en la pre-
sente edicin del manual tambin se introduce el concepto de bioproteccin, es decir,
la proteccin del material microbiolgico contra el robo, la prdida o la desviacin
para evitar que esos agentes se puedan utilizar de forma indebida con el fin de
atentar contra la salud pblica. Esta edicin tambin contiene informacin sobre
seguridad tomada de Safety in health-care laboratories (1), que public la OMS
en 1997.
La tercera edicin del Manual de bioseguridad en el laboratorio de la OMS ser de
utilidad como referencia y orientacin para los pases que acepten el reto de elaborar
y establecer cdigos nacionales de prcticas con miras a proteger esos bienes micro-
viii
PREFACIO
biolgicos y al mismo tiempo garantizar su disponibilidad para fines clnicos, de inves-

tigacin y epidemiolgicos.
Dr. A. Asamoah-Baah
Subdirector General
Enfermedades Transmisibles
Organizacin Mundial de la Salud
Ginebra (Suiza)
ix
Agradecimientos
La preparacin de la presente edicin del Manual de bioseguridad en el laboratorio ha

sido posible gracias a las contribuciones de las siguientes personas, a las que se
reconoce con gratitud la aportacin de sus conocimientos especializados:
Dr. W. Emmett Barkley. Instituto Mdico Howard Hughes, Chevy Chase, MD

(EE.UU.).
Dr. Murray L. Cohen (jubilado). Centros para el Control y la Prevencin de
Enfermedades, Atlanta, GA (EE.UU.).
Dra. Ingegerd Kallings. Instituto Sueco de Lucha contra las Enfermedades Infecciosas,
Estocolmo (Suecia).
Sra. Mary Ellen Kennedy. Consultora especializada en bioseguridad, Ashton, Ontario
(Canad).
Sra. Margery Kennett (jubilada). Laboratorio de Referencia de Victoria para las
Enfermedades Infecciosas, North Melbourne (Australia).
Dr. Richard Knudsen. Oficina de Salud y Seguridad, Centros para el Control y la
Prevencin de Enfermedades, Atlanta, GA (EE.UU.).
Dra. Nicoletta Previsani. Programa de Bioseguridad, Organizacin Mundial de la
Salud, Ginebra (Suiza).
Dr. Jonathan Richmond (jubilado). Oficina de Salud y Seguridad, Centros para el
Control y la Prevencin de Enfermedades, Atlanta, GA (EE.UU.).
Dr. Syed A. Sattar. Facultad de Medicina, Universidad de Ottawa, Ottawa, Ontario
(Canad).
Dra. Deborah E. Wilson, Divisin de Salud y Seguridad Ocupacional, Institutos
Nacionales de la Salud, Washington D.C. (EE.UU.).
Dr. Riccardo Wittek, Instituto de Biologa Animal, Universidad de Lausana, Lausana
(Suiza).
La OMS expresa asimismo su gratitud a las siguientes personas por su asistencia:
Sra. Maureen Best, Oficina de Seguridad en el Laboratorio, Health Canada, Ottawa

(Canad).
Dr. Mike Catton, Laboratorio de Referencia de Victoria para las Enfermedades
Infecciosas, North Melbourne (Australia).
x
AGRADECIMIENTOS
Dra. Shanna Nesby, Oficina de Salud y Seguridad, Centros para el Control y la

Prevencin de Enfermedades, Atlanta, GA (EE.UU.).
Dr. Stefan Wagener, Centro de Ciencias de la Salud Humana y Animal del Canad,
Winnipeg (Canad).
Los redactores y revisores desean reconocer tambin las aportaciones originales de los
numerosos profesionales cuya labor qued recogida en las ediciones primera y
segunda del Manual de bioseguridad en el laboratorio y en Safety in health-care labo-
ratories (1), publicada por la OMS en 1997.
xi
1. Principios generales
Introduccin
A lo largo de todo este manual, se hace referencia a los peligros relativos que entraan
los microorganismos infecciosos, clasificados por grupos de riesgo (grupos de riesgo
1, 2, 3 y 4 (OMS)). Esta clasificacin por grupos de riesgo se utilizar exclusiva-
mente para el trabajo de laboratorio. En el cuadro 1 se describen esos grupos de
riesgo.
Cuadro 1. Clasificacin de los microorganismos infecciosos por grupos de riesgo

Grupo de riesgo 1 (riesgo individual y poblacional escaso o nulo)
Microorganismos que tienen pocas probabilidades de provocar enfermedades en el ser humano
o los animales.
Grupo de riesgo 2 (riesgo individual moderado, riesgo poblacional bajo)
Agentes patgenos que pueden provocar enfermedades humanas o animales pero que tienen
pocas probabilidades de entraar un riesgo grave para el personal de laboratorio, la poblacin,
el ganado o el medio ambiente. La exposicin en el laboratorio puede provocar una infeccin
grave, pero existen medidas preventivas y teraputicas eficaces y el riesgo de propagacin es
limitado.
Grupo de riesgo 3 (riesgo individual elevado, riesgo poblacional bajo)
Agentes patgenos que suelen provocar enfermedades humanas o animales graves, pero que
de ordinario no se propagan de un individuo a otro. Existen medidas preventivas y teraputicas
eficaces.
Grupo de riesgo 4 (riesgo individual y poblacional elevado)
Agentes patgenos que suelen provocar enfermedades graves en el ser humano o los animales
y que se transmiten fcilmente de un individuo a otro, directa o indirectamente. Normalmente
no existen medidas preventivas y teraputicas eficaces.
Los laboratorios se clasifican como sigue: laboratorio bsico nivel de bioseguri-

dad 1; laboratorio bsico nivel de bioseguridad 2; laboratorio de contencin nivel
de bioseguridad 3, y laboratorio de contencin mxima nivel de bioseguridad 4. Las
designaciones del nivel de bioseguridad se basan en una combinacin de las carac-
tersticas de diseo, construccin, medios de contencin, equipo, prcticas y proced-
imientos de operacin necesarios para trabajar con agentes patgenos de los distintos
grupos de riesgo. En el cuadro 2 se relacionan, no se equiparan, los grupos de riesgo
1
Cuadro 2. Relacin de los grupos de riesgo con los niveles de bioseguridad, las
prcticas y el equipo
GRUPO DE NIVEL DE TIPO DE PRCTICAS DE EQUIPO DE
RIESGO BIOSEGURIDAD LABORATORIO LABORATORIO SEGURIDAD
1 Bsico Enseanza bsica, TMA Ninguno; trabajo en

Nivel 1 investigacin mesa de laboratorio
al descubierto
2 Bsico Servicios de TMA y ropa Trabajo en mesa al

Nivel 2 atencin primaria; protectora; descubierto y CSB
diagnstico, seal de riesgo para posibles
investigacin biolgico aerosoles
3 Contencin Diagnstico Prcticas de nivel 2 CSB adems de otros

Nivel 3 especial, ms ropa especial, medios de contencin
investigacin acceso controlado primaria para todas
y flujo direccional las actividades
del aire
4 Contencin Unidades de Prcticas de nivel 3 CSB de clase III o trajes

mxima patgenos ms cmara de presurizados junto
Nivel 4 peligrosos entrada con cierre con CSB de clase II,
hermtico, salida con autoclave de doble
ducha y eliminacin puerta (a travs de la
especial de residuos pared), aire filtrado
TMA: tcnicas microbiolgicas apropiadas (Vase la parte IV del presente manual). CSB: cmara de seguri-
dad biolgica.
con el nivel de bioseguridad de los laboratorios destinados al trabajo con micro-

organismos de cada uno de esos grupos.
Los pases o regiones debern elaborar una clasificacin nacional o regional de los
microorganismos en grupos de riesgo, teniendo en cuenta los siguientes factores:
1. La patogenicidad del microorganismo;
2. El modo de transmisin y la gama de huspedes del microorganismo. Estos dos
factores pueden depender de los niveles de inmunidad existentes en la poblacin
local, la densidad y los movimientos de la poblacin de huspedes, la presencia de
vectores apropiados y el nivel de higiene ambiental.
3. La disponibilidad local de medidas preventivas eficaces, entre las que cabe citar
la profilaxis mediante la administracin de antisueros (inmunizacin pasiva) o
vacunas; las medidas de higiene (higiene de los alimentos y del agua, por ejemplo),
y la lucha contra los reservorios animales o los artrpodos vectores.
4. La disponibilidad local de tratamientos eficaces, que comprende la inmunizacin
pasiva, la vacunacin posexposicin y la administracin de antimicrobianos,
antivricos y quimioterapia, y debe tener en cuenta la posibilidad de que aparez-
can cepas farmacorresistentes.
2
1. PRINCIPIOS GENERALES
Cuadro 3. Resumen de los requisitos por nivel de bioseguridad

NIVEL DE BIOSEGURIDAD
1 2 3 4
Aislamientoa del laboratorio No No S S
Sala que pueda precintarse para ser descontaminada No No S S
Ventilacin:
Flujo de aire hacia el interior No Conveniente S S
Sistema de ventilacin controlada No Conveniente S S
Salida de aire con HEPA No No S/Nob S
Entrada de doble puerta No No S S
Cmara de cierre hermtico No No No S
Cmara de cierre hermtico con ducha No No No S
Antesala No No S
Antesala con ducha No No S/Noc No
Tratamiento de efluentes No No S/Noc S
Autoclave:
En el local No Conveniente S S
En la sala de trabajo No No Conveniente S
De doble puerta No No Conveniente S
CSB No Conveniente S S
Capacidad de vigilancia de la seguridad del personald No No Conveniente S
a
Aislamiento ambiental y funcional respecto del trfico general.
b
Segn la localizacin de la salida de aire (vase el captulo 4).
c
Segn cules sean los agentes empleados en el laboratorio.
d
Por ejemplo, ventana, sistema de televisin en circuito cerrado, comunicacin en dos sentidos.
HEPA: filtracin de partculas areas de gran eficiencia (del ingls High-Efficiency Particulate Air). CSB:
cmara de seguridad biolgica.
La asignacin de un agente a un nivel de bioseguridad para el trabajo de laboratorio

debe basarse en una evaluacin del riesgo. Esa evaluacin tendr en cuenta el grupo
de riesgo, adems de otros factores, con el fin de determinar el nivel de bioseguridad
ms apropiado. Por ejemplo, un agente patgeno asignado al grupo de riesgo 2 en
general requerir instalaciones, equipo, prcticas y procedimientos del nivel de biose-
guridad 2 para trabajar sin riesgo. No obstante, si ciertos experimentos entraan la
generacin de aerosoles con elevadas concentraciones, quiz sea ms apropiado el
nivel de bioseguridad 3 para proporcionar el grado necesario de seguridad, pues
garantiza una mayor contencin de los aerosoles en el entorno de trabajo del
laboratorio. Por consiguiente, el nivel de bioseguridad asignado a un trabajo concreto
depender del juicio profesional basado en la evaluacin del riesgo, y no en la asi-
gnacin automtica de un nivel de bioseguridad con arreglo al grupo de riesgo par-
ticular al que pertenezca el agente patgeno con el que se va a trabajar (vase el
captulo 2).
En el cuadro 3 se resumen los requisitos de las instalaciones en los cuatro niveles
de bioseguridad.
3
De este modo, la asignacin de un nivel de bioseguridad tiene en consideracin el

microorganismo (agente patgeno) utilizado, las instalaciones disponibles y el equipo,
las prcticas y los procedimientos necesarios para trabajar con seguridad en el
laboratorio.
4
PARTE I
Directrices en materia
de bioseguridad
2. Evaluacin del riesgo
microbiolgico
El pilar de la prctica de la bioseguridad es la evaluacin del riesgo. Aunque existen

muchas herramientas para ayudar a evaluar el riesgo que comporta un procedimiento
o un experimento determinado, el componente ms importante es el juicio profe-
sional. Las evaluaciones del riesgo deben ser efectuadas por las personas que mejor
conozcan las caractersticas peculiares de los organismos con los que se va a trabajar,
el equipo y los procedimientos que van a emplearse, los modelos animales que pueden
utilizarse y el equipo y los medios de contencin disponibles. El director o investi-
gador principal del laboratorio es el responsable de asegurar que se realicen de modo
oportuno las evaluaciones del riesgo ms apropiadas y de colaborar estrechamente
con el comit de seguridad y el personal de bioseguridad de la institucin con el fin
de velar por que se disponga del equipo y los medios apropiados para el trabajo que
est previsto llevar a cabo. Una vez terminadas, las evaluaciones del riesgo deben ser
consultadas peridicamente y revisadas cada vez que sea preciso, teniendo en cuenta
la obtencin de nuevos datos que tengan alguna influencia en el grado de riesgo y
toda nueva informacin pertinente que aparezca en las publicaciones cientficas.
Una de las herramientas ms tiles de que se dispone para llevar a cabo una eva-
luacin del riesgo microbiolgico es la asignacin de los agentes microbiolgicos a uno
de los grupos de riesgo (vase el captulo 1). Sin embargo, la mera consulta del grupo
de riesgo a que pertenece cierto agente no basta para realizar una evaluacin del riesgo.
Otros factores que hay que tener en cuenta, segn proceda, son los siguientes:
1. La patogenicidad del agente y la dosis infectiva.
2. El resultado potencial de la exposicin.
3. La va natural de infeccin.
4. Otras vas de infeccin, derivadas de manipulaciones en el laboratorio (parenteral,
area, por ingestin).
5. La estabilidad del agente en el ambiente.
6. La concentracin del agente y el volumen del material concentrado que va a
manipularse.
7. La presencia de un husped apropiado (personas o animales).
8. La informacin disponible procedente de estudios en animales y de notificaciones
de infecciones adquiridas en el laboratorio o de informes clnicos.
9. La actividad prevista en el laboratorio (tratamiento con ultrasonidos, produccin
de aerosoles, centrifugacin, entre otras).
7
10. Toda manipulacin gentica del microorganismo que pueda ampliar su gama de
huspedes o su sensibilidad a los regmenes teraputicos eficaces conocidos (vase
el captulo 16).
11. Disponibilidad local de intervenciones profilcticas o teraputicas eficaces.
Sobre la base de la informacin obtenida durante la evaluacin de riesgos, se podr
asignar un nivel de bioseguridad al trabajo previsto, seleccionar el equipo de protec-
cin apropiado para el personal, y elaborar procedimientos normalizados de trabajo
que incorporen otras intervenciones de seguridad con el fin de velar por la mxima
seguridad en la realizacin del trabajo.
Muestras para las que se dispone de informacin limitada

El procedimiento de evaluacin del riesgo descrito anteriormente funciona bien
cuando se dispone de informacin suficiente. Sin embargo, en algunas situaciones no
hay informacin suficiente para llevar a cabo una evaluacin apropiada de los riesgos,
como ocurre con las muestras clnicas o epidemiolgicas recogidas sobre el terreno.
En esos casos, conviene que la manipulacin de las muestras se realice con
prudencia.
1. Deben adoptarse precauciones normalizadas (2) y emplearse protecciones de
barrera (guantes, batas, proteccin ocular) cada vez que se obtengan muestras de
pacientes.
2. Las prcticas y los procedimientos bsicos de contencin del nivel de bioseguri-
dad 2 deben ser el requisito mnimo para la manipulacin de muestras.
3. El transporte de muestras debe respetar las normas y reglamentos nacionales o
internacionales.
Quiz se disponga de alguna informacin que ayude a determinar el riesgo que
entraa manipular esas muestras:
1. Datos mdicos sobre el paciente.
2. Datos epidemiolgicos (datos de morbilidad y mortalidad, presunta va de trans-
misin, otros datos de la investigacin de brotes).
3. Informacin sobre el origen geogrfico de la muestra.
Si se producen brotes de enfermedad de etiologa desconocida, las autoridades
nacionales competentes o la OMS pueden elaborar directrices particulares apropiadas
que publicarn en la Web (como se hizo en 2003 en el caso del sndrome respiratorio
agudo severo) para indicar cmo deben prepararse las muestras para el transporte y
en qu nivel de bioseguridad deben analizarse.
Evaluacin de riesgos y microorganismos genticamente modificados

En el captulo 16 se ofrece un examen detallado de la evaluacin de los riesgos de los
organismos genticamente modificados.
8
3. Laboratorios bsicos
niveles de bioseguridad
1y2
Las orientaciones y recomendaciones que se ofrecen en el presente manual a ttulo de

requisitos mnimos para los laboratorios de todos los niveles de bioseguridad ataen
a los microorganismos de los grupos de riesgo 1 a 4. Aunque algunas precauciones
pueden parecer innecesarias para algunos organismos del grupo de riesgo 1, son con-
venientes con fines de capacitacin, para fomentar el uso de tcnicas microbiolgicas
apropiadas (es decir, seguras).
Todos los laboratorios de diagnstico y de atencin de salud (de salud pblica,
clnicos o de hospital) deben estar diseados para cumplir, como mnimo, los requi-
sitos del nivel de bioseguridad 2. Dado que ningn laboratorio puede ejercer un
control absoluto sobre las muestras que recibe, el personal puede verse expuesto a
organismos de grupos de riesgo ms altos de lo previsto. Esa posibilidad debe tenerse
presente en la elaboracin de los planes y las polticas de seguridad. En algunos pases
se exige que los laboratorios clnicos estn acreditados. En general, siempre deben
adoptarse y aplicarse las precauciones normalizadas (2).
Las directrices para laboratorios bsicos niveles de bioseguridad 1 y 2 que aqu
se exponen son completas y detalladas, ya que son fundamentales para todo tipo de
laboratorios. Las directrices para los laboratorios de contencin nivel de bioseguri-
dad 3 y los laboratorios de contencin mxima nivel de bioseguridad 4 que se
ofrecen ms adelante (captulos 4 y 5) son modificaciones y adiciones a estas direc-
trices y estn concebidas para trabajar con los agentes patgenos ms peligrosos (de
mayor riesgo).
Cdigo de prcticas
Este cdigo es una enumeracin de las prcticas y los procedimientos de laboratorio
esenciales que constituyen la base de las tcnicas microbiolgicas apropiadas. En
muchos laboratorios y programas nacionales, este cdigo puede utilizarse para ela-
borar una gua escrita de prcticas y procedimientos para el trabajo de laboratorio en
condiciones de seguridad.
Cada laboratorio debe adoptar un manual de seguridad o de trabajo en el que
se identifiquen los riesgos conocidos y potenciales y se especifiquen las prcticas y
los procedimientos encaminados a eliminar o reducir al mnimo esos riesgos. Las
tcnicas microbiolgicas apropiadas son fundamentales para la seguridad en el
laboratorio y no pueden sustituirse por equipo de laboratorio especializado, que
9
no pasa de ser un complemento. A continuacin se exponen los conceptos ms

importantes.
Acceso
1. El smbolo y signo internacional de peligro biolgico (figura 1) deber colocarse
en las puertas de los locales donde se manipulen microorganismos del grupo de
riesgo 2 o superior.
2. Slo podr entrar en las zonas de trabajo del laboratorio el personal autorizado.
3. Las puertas del laboratorio se mantendrn cerradas.
4. No se autorizar ni permitir la entrada de nios en las zonas de trabajo del
laboratorio.
PELIGRO BIOLGICO
ACCESO RESTRINGIDO.
SLO PERSONAL AUTORIZADO
Nivel de bioseguridad: ___________________________
Investigador encargado: __________________________
En caso de emergencia, avsese a: __________________

Telfono diurno: _________________________________
Telfono particular: ______________________________

Las autorizaciones de entrada debern solicitarse al
investigador encargado mencionado ms arriba
Figura 1. Seal de advertencia de peligro biolgico para las puertas del laboratorio
10
3. LABORATORIOS BSICOS NIVELES DE BIOSEGURIDAD 1 Y 2
5. El acceso a los locales que alberguen animales habr de autorizarse especialmente.

6. No se permitir el acceso al laboratorio de animales que no sean objeto del trabajo
del laboratorio.
Proteccin personal
1. Se usarn en todo momento monos, batas o uniformes especiales para el trabajo
en el laboratorio.
2. Se usarn guantes protectores apropiados para todos los procedimientos que
puedan entraar contacto directo o accidental con sangre, lquidos corporales y
otros materiales potencialmente infecciosos o animales infectados. Una vez uti-
lizados, los guantes se retirarn de forma asptica y a continuacin se lavarn las
manos.
3. El personal deber lavarse las manos despus de manipular materiales y animales
infecciosos, as como antes de abandonar las zonas de trabajo del laboratorio.
4. Se usarn gafas de seguridad, viseras u otros dispositivos de proteccin cuando
sea necesario proteger los ojos y el rostro de salpicaduras, impactos y fuentes de
radiacin ultravioleta artificial.
5. Estar prohibido usar las prendas protectoras fuera del laboratorio, por ejemplo
en cantinas, cafeteras, oficinas, bibliotecas, salas para el personal y baos.
6. No se usar calzado sin puntera.
7. En las zonas de trabajo estar prohibido comer, beber, fumar, aplicar cosmticos
o manipular lentes de contacto.
8. Estar prohibido almacenar alimentos o bebidas para consumo humano en las
zonas de trabajo del laboratorio.
9. La ropa protectora de laboratorio no se guardar en los mismos armarios o ta-
quillas que la ropa de calle.
Procedimientos
1. Estar estrictamente prohibido pipetear con la boca.
2. No se colocar ningn material en la boca ni se pasar la lengua por las etiquetas.
3. Todos los procedimientos tcnicos se practicarn de manera que se reduzca al
mnimo la formacin de aerosoles y gotculas.
4. Se limitar el uso de jeringuillas y agujas hipodrmicas, que no se utilizarn en
lugar de dispositivos de pipeteo ni con ningn fin distinto de las inyecciones por
va parenteral o la aspiracin de lquidos de los animales de laboratorio.
5. Todos los derrames, accidentes y exposiciones reales o potenciales a materiales
infecciosos se comunicarn al supervisor del laboratorio. Se mantendr un re-
gistro escrito de esos accidentes e incidentes.
6. Se elaborar y seguir un procedimiento escrito para la limpieza de todos los
derrames.
7. Los lquidos contaminados debern descontaminarse (por medios qumicos o
fsicos) antes de eliminarlos por el colector de saneamiento. Puede ser necesario
11
un sistema de tratamiento de efluentes, segn lo que indique la evaluacin de

riesgos del agente con el que se est trabajando.
8. Los documentos escritos que hayan de salir del laboratorio se protegern de la
contaminacin mientras se encuentren en ste.
Zonas de trabajo del laboratorio

1. El laboratorio se mantendr ordenado, limpio y libre de materiales no relaciona-
dos con el trabajo.
2. Las superficies de trabajo se descontaminarn despus de todo derrame de mate-
rial potencialmente peligroso y al final de cada jornada de trabajo.
3. Todos los materiales, muestras y cultivos contaminados debern ser descontami-
nados antes de eliminarlos o de limpiarlos para volverlos a utilizar.
4. El embalaje y el transporte de material debern seguir la reglamentacin nacional
o internacional aplicable.
5. Las ventanas que puedan abrirse estarn equipadas con rejillas que impidan el
paso de artrpodos.
Gestin de la bioseguridad
1. Incumbir al director del laboratorio (la persona que tiene responsabilidad
inmediata respecto del laboratorio) garantizar la elaboracin y la adopcin de un
plan de gestin de la bioseguridad y de un manual de seguridad o de operacin.
2. El supervisor del laboratorio (que depender del director) velar por que se pro-
porcione capacitacin peridica en materia de seguridad en el laboratorio.
3. Se informar al personal de los riesgos especiales y se le exigir que lea el manual
de seguridad o de trabajo y siga las prcticas y los procedimientos normalizados.
El supervisor del laboratorio se asegurar de que todo el personal los comprenda
debidamente. En el laboratorio estar disponible una copia del manual de seguri-
dad o de trabajo.
4. Habr un programa de lucha contra los artrpodos y los roedores.
5. Se ofrecer a todo el personal en caso de necesidad un servicio apropiado de eva-
luacin, vigilancia y tratamiento mdico, y se mantendrn los debidos registros
mdicos.
Diseo e instalaciones del laboratorio

Al disear el laboratorio y asignarle determinados tipos de trabajo, se prestar espe-
cial atencin a aquellas condiciones que se sepa que plantean problemas de seguri-
dad. Entre ellas figuran:
1. La formacin de aerosoles.
2. El trabajo con grandes cantidades o altas concentraciones de microorganismos.
3. El exceso de personal o de material.
4. La infestacin por roedores y artrpodos.
12
Figura 2. Laboratorio tpico del nivel de bioseguridad 1.

(Ilustracin amablemente cedida por CUH2A, Princeton, NJ (EE.UU.))
5. La entrada de personas no autorizadas.

6. El circuito de trabajo: utilizacin de muestras y reactivos concretos.
En las figuras 2 y 3, respectivamente, aparecen ejemplos de diseos de laboratorios de
los niveles de bioseguridad 1 y 2.
Caractersticas de diseo
1. Se dispondr de espacio suficiente para realizar el trabajo de laboratorio en condi-
ciones de seguridad y para la limpieza y el mantenimiento.
2. Las paredes, los techos y los suelos sern lisos, fciles de limpiar, impermeables a
los lquidos y resistentes a los productos qumicos y desinfectantes normalmente
utilizados en el laboratorio. Los suelos sern antideslizantes.
3. Las superficies de trabajo sern impermeables y resistentes a desinfectantes, cidos,
lcalis, disolventes orgnicos y calor moderado.
4. La iluminacin ser adecuada para todas las actividades. Se evitarn los reflejos y
brillos molestos.
13
Figura 3. Laboratorio tpico del nivel de bioseguridad 2

(Ilustracin amablemente cedida por CUH2A, Princeton, NJ (EE.UU)). Los proce-
dimientos que pueden generar aerosoles se efectan dentro de una cmara de seguri-
dad biolgica. Las puertas se mantienen cerradas y llevan las debidas seales de
riesgo biolgico. Los residuos potencialmente contaminados se separan del circuito
general de residuos.
5. El mobiliario debe ser robusto y debe quedar espacio entre mesas, armarios y otros
muebles, as como debajo de los mismos, a fin de facilitar la limpieza.
6. Habr espacio suficiente para guardar los artculos de uso inmediato, evitando as
su acumulacin desordenada sobre las mesas de trabajo y en los pasillos. Tambin
debe preverse espacio para el almacenamiento a largo plazo, convenientemente
situado fuera de las zonas de trabajo.
7. Se prevern espacio e instalaciones para la manipulacin y el almacenamiento
seguros de disolventes, material radiactivo y gases comprimidos y licuados.
8. Los locales para guardar la ropa de calle y los objetos personales se encontrarn
fuera de las zonas de trabajo del laboratorio.
9. Los locales para comer y beber y para descansar se dispondrn fuera de las zonas
de trabajo del laboratorio.
10. En cada sala del laboratorio habr lavabos, a ser posible con agua corriente, insta-
lados de preferencia cerca de la salida.
14
11. Las puertas irn provistas de mirillas y estarn debidamente protegidas contra el
fuego; de preferencia se cerrarn automticamente.
12. En el nivel de bioseguridad 2 se dispondr de una autoclave u otro medio de
descontaminacin debidamente prximo al laboratorio.
13. Los sistemas de seguridad deben comprender medios de proteccin contra incen-
dios y emergencias elctricas, as como duchas para casos de urgencia y medios
para el lavado de los ojos.
14. Hay que prever locales o salas de primeros auxilios, convenientemente equipados
y fcilmente accesibles (vase el anexo 1).
15. Cuando se planifique una nueva instalacin, habr que prever un sistema
mecnico de ventilacin que introduzca aire del exterior sin recirculacin. Cuando
no se disponga de ventilacin mecnica, las ventanas debern poder abrirse y, a
ser posible, estarn provistas de mosquiteras.
16. Es indispensable contar con un suministro regular de agua de buena calidad. No
debe haber ninguna conexin entre las conducciones de agua destinada al labo-
ratorio y las del agua de bebida. El sistema de abastecimiento pblico de agua
estar protegido contra el reflujo por un dispositivo adecuado.
17. Debe disponerse de un suministro de electricidad seguro y de suficiente
capacidad, as como de un sistema de iluminacin de emergencia que permita
salir del laboratorio en condiciones de seguridad. Conviene contar con un grupo
electrgeno de reserva para alimentar el equipo esencial (estufas, CSB,
congeladores, entre otros), as como para la ventilacin de las jaulas de los
animales.
18. Es esencial un suministro fiable y adecuado de gas. La instalacin debe ser objeto
del debido mantenimiento.
19. Tanto los laboratorios como los locales destinados a los animales son a veces objeto
de actos de vandalismo. Hay que prever sistemas de proteccin fsica y contra
incendios. Cabe mejorar la seguridad reforzando las puertas, protegiendo las ven-
tanas y limitando el nmero de llaves en circulacin. Se podrn estudiar y aplicar
otras medidas, segn proceda, para incrementar la seguridad (vase el captulo 9).
Material de laboratorio
Junto con los procedimientos y prcticas correctos, el uso de material de seguridad
ayudar a reducir los riesgos cuando se trabaje con agentes biolgicos que entraen
peligro. En la presente seccin se exponen los principios fundamentales relacionados
con el material apropiado para los laboratorios de todos los niveles de bioseguridad.
Los requisitos en relacin con el material de laboratorio correspondiente a niveles de
bioseguridad ms altos se detallan en los captulos pertinentes.
Tras consultar con el funcionario de bioseguridad y el comit de seguridad (en caso
de que se haya designado), el director del laboratorio debe velar por que el material
sea apropiado y se utilice debidamente. Para elegir el material de laboratorio habr
que cerciorarse de que responda a los siguientes principios generales:
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1. Que su diseo permita limitar o evitar los contactos entre el trabajador y el mate-
rial infeccioso.
2. Que est construido con materiales impermeables a los lquidos, resistentes a la
corrosin y acordes con las normas de resistencia estructural.
3. Que carezca de rebabas, bordes cortantes y partes mviles sin proteger.
4. Que est diseado, construido e instalado con miras a simplificar su manejo y
conservacin, as como a facilitar la limpieza, la descontaminacin y las pruebas
de certificacin; siempre que se pueda, se evitar el material de vidrio y otro
material rompible.
Para cerciorarse de que el material posee las caractersticas de seguridad requeridas
quiz sea necesario consultar sus especificaciones detalladas de funcionamiento y
construccin (vanse tambin los captulos 10 y 11).
Material de bioseguridad indispensable

1. Dispositivos de pipeteo para evitar que se pipetee con la boca. Existen muchos
modelos diferentes.
2. CSB, que se utilizarn en los siguientes casos:
Siempre que se manipule material infeccioso; ese material puede ser centrifu-
gado en el laboratorio ordinario si se utilizan vasos de centrifugadora con tapas
hermticas de seguridad y si stos se cargan y descargan en una CSB;
Cuando haya un alto riesgo de infeccin transmitida por va area.
Cuando se utilicen procedimientos con grandes posibilidades de producir
aerosoles, como la centrifugacin, trituracin, homogeneizacin, agitaciones
o mezcla vigorosa, desintegracin ultrasnica, apertura de envases de mate-
riales infecciosos cuya presin interna pueda diferir de la presin ambiental,
inoculacin intranasal a animales y recoleccin de tejidos infecciosos de ani-
males y huevos.
3. Asas de siembra de plstico desechables. Tambin pueden utilizarse incineradores
elctricos de asas dentro de la CSB para reducir la formacin de aerosoles.
4. Frascos y tubos con tapn de rosca.
5. Autoclaves u otros medios apropiados para esterilizar el material contaminado.
6. Pipetas de Pasteur de plstico desechables, cuando estn disponibles, en sustitu-
cin del vidrio.
7. Los aparatos como las autoclaves y las CSB deben ser validados con mtodos
apropiados antes de usarlos. A intervalos peridicos deben ser nuevamente certi-
ficados, de acuerdo con las instrucciones del fabricante (vase el captulo 7).
Vigilancia mdica y sanitaria

La entidad que emplea al personal del laboratorio tiene la obligacin de cerciorarse,
por medio del director de ste, de que la salud de dicho personal est sometida a la
debida vigilancia. El objetivo de esa vigilancia es detectar posibles enfermedades
16
contradas durante el trabajo. Entre las actividades apropiadas para alcanzar ese obje-
tivo figuran las siguientes:
1. Proporcionar inmunizacin activa o pasiva cuando est indicada (vase el
anexo 2).
2. Facilitar la deteccin temprana de infecciones adquiridas en el laboratorio.
3. Excluir a las personas muy susceptibles (por ejemplo, embarazadas o personas
inmunodeficientes) de las tareas de laboratorio que entraen mucho riesgo.
4. Proporcionar material y procedimientos eficaces de proteccin personal.
Normas para la vigilancia de los trabajadores que manipulan microorganismos en el

nivel de bioseguridad 1
La experiencia indica que estos microorganismos tienen pocas probabilidades de
provocar enfermedades humanas o enfermedades animales de importancia veteri-
naria. No obstante, lo ideal es someter a todo el personal a un reconocimiento mdico
previo a la contratacin en el que se anoten los antecedentes mdicos de cada persona.
Conviene que se notifiquen rpidamente las enfermedades o accidentes de laborato-
rio y que todos los miembros del personal comprendan la importancia de aplicar tc-
nicas microbiolgicas apropiadas.
Normas para la vigilancia de los trabajadores que manipulan microorganismos en el

1. El reconocimiento mdico previo al empleo o a la asignacin de un puesto es
indispensable. Debe registrarse el historial mdico de la persona y realizar una
evaluacin de la salud ocupacional para los fines del laboratorio.
2. El director del laboratorio debe mantener un registro de enfermedades y bajas
laborales.
3. Las mujeres en edad fecunda debern ser informadas de los riesgos que supone
para el feto la exposicin profesional a ciertos microorganismos, como el virus de
la rubola. Las medidas concretas que se adopten para proteger al feto dependern
de los microorganismos a los que pueda estar expuesta la mujer.
Capacitacin
Los errores humanos y las tcnicas incorrectas pueden poner en peligro incluso las
mejores medidas destinadas a proteger al personal de laboratorio. Por esta razn, el
elemento clave para prevenir las infecciones adquiridas, los incidentes y los accidentes
en el laboratorio es un personal preocupado por la seguridad y bien informado sobre
la manera de reconocer y combatir los peligros que entraa su trabajo en ese entorno.
En consecuencia, la formacin continua en el servicio acerca de las medidas de seguri-
dad es primordial. El proceso empieza por el personal directivo, que debe velar por
que los procedimientos y prcticas de seguridad en el laboratorio formen parte de la
capacitacin bsica de los empleados. La formacin en medidas de seguridad siempre
17
debe estar integrada en la capacitacin inicial de los nuevos empleados. Deben ponerse
a disposicin del personal el cdigo de prcticas y las directrices locales, incluido el
manual de seguridad o de operaciones. Se adoptarn medidas para garantizar que los
empleados hayan ledo y comprendido las directrices, como pueden ser las pginas de
firmas. Los supervisores del laboratorio deben desempear el papel principal en la
formacin de sus subordinados inmediatos acerca de las tcnicas correctas de labora-
torio. El funcionario encargado de la bioseguridad puede colaborar en esa formacin
y contribuir a la elaboracin de materiales y documentos de capacitacin (vase
tambin el captulo 21).
La capacitacin del personal debe comprender siempre la enseanza de mtodos
seguros para utilizar procedimientos peligrosos que habitualmente afectan a todo el
personal de laboratorio y que entraan los siguientes riesgos:
1. Riesgo de inhalacin (es decir, formacin de aerosoles): uso de asas, siembra de
placas de agar, pipeteo, preparacin de frotis, apertura de recipientes de cultivo,
toma de muestras de sangre/suero, centrifugacin, entre otros.
2. Riesgo de ingestin al manipular muestras, frotis y cultivos.
3. Riesgo de inoculacin cutnea al emplear jeringuillas y agujas.
4. Riesgo de mordeduras y araazos en la manipulacin de animales.
5. Manipulacin de sangre y otros materiales patolgicos potencialmente peligrosos.
6. Descontaminacin y eliminacin de material infeccioso.
Manipulacin de desechos
Se considera desecho todo aquello que debe descartarse.
En los laboratorios, la descontaminacin y la eliminacin de desechos son opera-
ciones estrechamente relacionadas. En el trabajo cotidiano, son pocos los materiales
contaminados que es preciso retirar del laboratorio o destruir. La mayor parte de la
cristalera, los instrumentos y la ropa del laboratorio vuelve a utilizarse o se recicla.
El principio bsico es que todo el material infeccioso ha de ser descontaminado, este-
rilizado en autoclave o incinerado en el laboratorio.
Las principales preguntas que hay que hacerse antes de eliminar cualquier objeto
o material de un laboratorio que trabaja con microorganismos o tejidos animales
potencialmente infecciosos son las siguientes:
1. Se han descontaminado o desinfectado realmente los objetos o el material por un
procedimiento aprobado?
2. De lo contrario, se han embalado con un mtodo aprobado para ser incinerados
inmediatamente in situ o transferidos a otro laboratorio que tenga capacidad para
incinerar?
3. Entraa la eliminacin de los objetos o materiales descontaminados algn otro
peligro, biolgico o de otra clase, para quienes realizan las operaciones de elimi-
nacin inmediata o para quienes puedan entrar en contacto con los objetos o
materiales desechados fuera del recinto del laboratorio?
18
Descontaminacin
El tratamiento en autoclave de vapor constituye el mtodo de eleccin para todos los
procesos de descontaminacin. El material destinado a la descontaminacin y elimi-
nacin debe introducirse en recipientes (por ejemplo en bolsas de plstico resistentes
al tratamiento en autoclave) que tengan un cdigo de color para indicar si el con-
tenido ha de pasar a la autoclave o a la incineracin. Slo se recurrir a otros mtodos
si stos eliminan o destruyen los microorganismos (para ms detalles, vase el
captulo 14).
Procedimientos de manipulacin y eliminacin de material y desechos contaminados

Deber adoptarse un sistema de identificacin y separacin del material infeccioso y
sus recipientes. Se seguirn las normas nacionales e internacionales y se tendrn en
cuenta las siguientes categoras:
1. Desechos no contaminados (no infecciosos) que puedan reutilizarse o reciclarse
o eliminarse como si fueran basura en general.
2. Objetos cortantes y punzantes contaminados (infecciosos): agujas hipodrmicas,
bisturs, cuchillas, vidrio roto; se recogern siempre en recipientes a prueba de per-
foracin dotados de tapaderas y sern tratados como material infeccioso.
3. Material contaminado destinado al tratamiento en autoclave que despus pueda
lavarse y volverse a utilizar o reciclarse.
4. Material contaminado destinado al tratamiento en autoclave y a la eliminacin.
5. Material contaminado destinado a la incineracin directa.
Objetos cortantes y punzantes

Las agujas hipodrmicas no se deben volver a tapar, cortar ni retirar de las jerin-
guillas desechables despus de utilizarlas. El conjunto completo debe colocarse en un
recipiente de eliminacin especfico. Las jeringuillas desechables, utilizadas con o sin
aguja, se introducirn en recipientes de eliminacin apropiados y se incinerarn, este-
rilizndolas previamente en autoclave si fuera necesario.
Los recipientes de eliminacin de objetos cortantes y punzantes sern resistentes a
la perforacin y no se llenarn por completo. Cuando estn llenos en sus tres cuartas
partes se colocarn en un recipiente de desechos infecciosos y se incinerarn, este-
rilizndolos primero en autoclave si la prctica del laboratorio lo exige. Los recipientes
de eliminacin de objetos cortantes y punzantes no se desecharn en vertederos.
Material contaminado (potencialmente infeccioso) para ser tratado en

autoclave y reutilizado
No se efectuar limpieza alguna de ningn material contaminado (potencialmente
infeccioso) que vaya a ser tratado en autoclave y reutilizado. Cualquier limpieza o
reparacin que se revele necesaria se realizar siempre despus del paso por la auto-
clave o la desinfeccin.
19
Material contaminado (potencialmente infeccioso) para ser eliminado

Aparte de los objetos cortantes y punzantes mencionados ms arriba, todo el mate-
rial contaminado (potencialmente infeccioso) debe ser introducido en recipientes
impermeables (por ejemplo en bolsas de plstico que resistan el tratamiento en auto-
clave marcadas con un cdigo de color) y tratado en autoclave antes de proceder a su
eliminacin. Despus de pasar por la autoclave, el material puede colocarse en reci-
pientes apropiados para ser transportado al incinerador. Si es posible, el material
procedente de actividades relacionadas con la atencin sanitaria no debe desecharse
en vertederos, ni siquiera despus de haber sido descontaminado. Si se dispone de un
incinerador en el laboratorio, no es necesario el tratamiento en autoclave: el material
contaminado se coloca en recipientes especialmente marcados (por ejemplo, bolsas
con un cdigo de color) y se transporta directamente al incinerador. Los recipientes
de transporte reutilizables deben ser impermeables y tener tapas que ajusten debida-
mente. Se desinfectarn y limpiarn antes de devolverlos al laboratorio para un uso
ulterior.
En cada puesto de trabajo deben colocarse recipientes, tarros o cubetas para dese-
chos, de preferencia irrompibles (por ejemplo, de plstico). Cuando se utilicen desin-
fectantes, los materiales de desecho deben permanecer en contacto ntimo con stos
(es decir, sin estar protegidos por burbujas de aire) durante el tiempo apropiado, segn
el desinfectante que se utilice (vase el captulo 14). Los recipientes para desechos
habrn de ser descontaminados y lavados antes de su reutilizacin.
La incineracin de desechos contaminados deber contar con la aprobacin de las
autoridades encargadas de la salud pblica y la contaminacin del aire, as como la
del funcionario de bioseguridad del laboratorio (vase la seccin relativa a la inci-
neracin en el captulo 14).
Seguridad qumica, elctrica y radiolgica, proteccin contra incendios y

material de seguridad
Los incendios o los accidentes de origen qumico, elctrico o radiolgico pueden tener
como consecuencia indirecta un fallo de las medidas de contencin de organismos
patgenos. As pues, en cualquier laboratorio de microbiologa es indispensable man-
tener un nivel elevado de seguridad en esos aspectos. La promulgacin de normas y
reglamentos sobre cada una de estas formas de proteccin incumbe normalmente a
las autoridades nacionales y locales competentes, cuya ayuda debe recabarse siempre
que sea necesario. Los riesgos qumicos, elctricos, radiolgicos y derivados de los
incendios se examinan en ms detalle en la Parte IV del presente manual (captulos
17 y 18).
En el captulo 11 se ofrece ms informacin acerca del material de seguridad.
20
4. El laboratorio de contencin
El laboratorio de contencin nivel de bioseguridad 3 est concebido e instalado para

trabajar con microorganismos del grupo de riesgo 3, as como con grandes volmenes
o concentraciones de microorganismos del grupo de riesgo 2, por entraar un mayor
riesgo de difusin de aerosoles. Este nivel de contencin exige fortalecer los progra-
mas de trabajo y de seguridad correspondientes a los laboratorios bsicos niveles de
bioseguridad 1 y 2 (vase el captulo 3).
Las directrices que se ofrecen en este captulo se presentan en forma de adiciones
a las enunciadas para los laboratorios bsicos niveles de bioseguridad 1 y 2, que por
ello debern aplicarse antes de las destinadas especficamente al laboratorio de con-
tencin nivel de bioseguridad 3. Las principales adiciones y modificaciones se
refieren a los siguientes aspectos:
1. Cdigo de prcticas.
2. Diseo e instalaciones del laboratorio.
3. Vigilancia mdica y sanitaria.
Los laboratorios de esta categora deben figurar en un registro o una lista que estable-
cern las autoridades sanitarias nacionales u otra autoridad competente.
Cdigo de prcticas
El cdigo de prcticas de los laboratorios bsicos niveles de bioseguridad 1 y 2
tambin se aplica en este caso, con las siguientes modificaciones:
1. El smbolo y signo internacional de advertencia de peligro biolgico (vase la
figura 1) expuesto en las puertas de acceso al laboratorio debe especificar el nivel
de bioseguridad y el nombre del supervisor del laboratorio que controla el acceso
a ste, as como indicar cualquier condicin especial de entrada en la zona, como
puede ser la inmunizacin.
2. En el laboratorio se debe llevar ropa protectora apropiada (batas sin abertura
delantera o envolventes, trajes de dos piezas de tipo pijama, monos, gorros y, si
corresponde, proteccin para el calzado o calzado especial). No son apropiadas las
batas de laboratorio abotonadas por delante, ni las mangas que no cubran por
completo los antebrazos. La ropa de laboratorio no debe usarse fuera de ste y
debe descontaminarse antes de enviarla a la lavandera. En ciertos casos, como
21
cuando se trabaja con agentes agrcolas o zoonticos, est justificado quitarse la

ropa de calle y utilizar ropa de laboratorio especial.
3. Toda manipulacin abierta de material potencialmente infeccioso debe realizarse
dentro de una CSB u otro dispositivo de contencin primaria (vase tambin el
captulo 10).
4. Puede ser necesario utilizar equipo de proteccin respiratoria para ciertos pro-
cedimientos de laboratorio o para el trabajo con animales que estn infectados
con ciertos agentes patgenos (vase el captulo 11).

Las directrices sobre diseo e instalaciones del laboratorio correspondientes a los
laboratorios bsicos niveles de bioseguridad 1 y 2 se aplican tambin en este caso,
con las siguientes modificaciones:
1. El laboratorio debe estar separado de las zonas del edificio por las que se puede
circular sin restricciones. Puede conseguirse una separacin suplementaria habi-
litando el laboratorio al fondo de un pasillo o instalando un tabique con puerta
o un sistema de acceso que delimite un pequeo vestbulo (por ejemplo, entrada
de doble puerta o laboratorio bsico nivel de bioseguridad 2) destinado a
mantener la diferencia de presiones entre el laboratorio y el espacio adyacente. El
vestbulo debe contar con una zona para separar la ropa limpia de la sucia, y
tambin puede ser necesaria una ducha.
2. Las dobles puertas de acceso al laboratorio deben ser de cierre automtico y
disponer de un mecanismo de interbloqueo, de modo que slo una de ellas est
abierta al mismo tiempo. Para uso en caso de emergencia es posible colocar una
mampara que se pueda romper.
3. Las superficies de las paredes, suelos y techos deben ser impermeables y fciles de
limpiar. Todas las aberturas existentes en esas superficies (por ejemplo, para
tuberas de servicio) deben estar obturadas para facilitar la descontaminacin de
los locales.
4. La sala del laboratorio debe poderse precintar para proceder a su descontami-
nacin. Los sistemas de conduccin de aire han de estar construidos de modo que
sea factible la descontaminacin con gases.
5. Las ventanas deben estar cerradas hermticamente y llevar cristales resistentes a
la rotura.
6. En las inmediaciones de todas las puertas de salida del laboratorio habr un lavabo
que no necesite ser accionado con la mano.
7. Debe haber un sistema de ventilacin que establezca un flujo direccional hacia el
laboratorio. Se instalar un dispositivo de vigilancia visual, con o sin alarma, para
que el personal pueda comprobar en todo momento que la corriente de aire circula
en el sentido deseado.
8. El sistema de ventilacin del edificio debe estar construido de modo que el aire
del laboratorio de contencin nivel de bioseguridad 3 no se dirija a otras zonas
22
4. EI LABORATORIO DE CONTENCIN NIVEL DE BIOSEGURIDAD 3
del edificio. El aire puede ser filtrado por un sistema HEPA, reacondicionado y
recirculado dentro del laboratorio. Cuando el aire del laboratorio (no de las CSB)
se expulsa directamente al exterior del edificio, debe dispersarse lejos de los edifi-
cios ocupados y de las tomas de aire. Segn los agentes con los que se est traba-
jando, ese aire puede evacuarse a travs de filtros HEPA. Puede instalarse un
sistema de control de la calefaccin, la ventilacin y el aire acondicionado para
impedir una presin positiva sostenida en el laboratorio. Cabe estudiar la posi-
bilidad de instalar alarmas audibles o claramente visibles para alertar al personal
de posibles fallos del sistema de calefaccin, ventilacin y aire acondicionado.
9. Todos los filtros HEPA debern estar instalados de modo que permitan la descon-
taminacin con gases y la realizacin de pruebas.
10. Las CSB deben estar alejadas de las zonas de paso y de los lugares de cruce de
corrientes procedentes de puertas y sistemas de ventilacin (vase el captulo 10).
11. El aire que sale de las CSB de las clases I o II (vase el captulo 10), y que habr
pasado por filtros HEPA, deber expulsarse de manera que no se perturbe el equi-
librio del aire en la cmara ni en el sistema de evacuacin del edificio.
12. Dentro del laboratorio de contencin debe haber una autoclave para desconta-
minar el material de desecho infectado. Si hay que sacar ese material de desecho
del laboratorio de contencin para su descontaminacin y eliminacin, habr que
transportarlo en recipientes hermticos, irrompibles e impermeables de acuerdo
con las normas nacionales o internacionales, segn proceda.
13. El sistema de abastecimiento de agua debe estar dotado de dispositivos contra el
reflujo. Los tubos de vaco deben estar protegidos con sifones con desinfectante
lquido y filtros HEPA o su equivalente. Las bombas de vaco alternativas tambin
deben estar debidamente protegidas con sifones y filtros.
14. El diseo de las instalaciones y los procedimientos de trabajo del laboratorio de
contencin nivel de bioseguridad 3 deben estar documentados.
En la figura 4 se presenta un ejemplo de diseo de un laboratorio de nivel de biose-
guridad 3.
Los principios aplicables a la seleccin del material, incluidas las CSB (vase el cap-
tulo 10) son los mismos que se enunciaron para el laboratorio bsico nivel de biose-
guridad 2, con la excepcin de que todas las actividades de manipulacin de todo el
material potencialmente infeccioso deben realizarse dentro de una CSB u otro dis-
positivo de contencin fsica primaria. Debe tenerse en cuenta que si se utilizan
aparatos como centrifugadoras, stas necesitarn accesorios de contencin suple-
mentarios como cubetas de seguridad o rotores de contencin. Algunas centrifu-
gadoras y otro material, como los separadores de clulas, destinados al trabajo con
clulas infectadas pueden necesitar sistemas suplementarios de ventilacin y
evacuacin local con filtros HEPA para una contencin eficiente.
23
Figura 4. Laboratorio tpico del nivel de bioseguridad 3

(Ilustracin amablemente cedida por CUH2A, Princeton, NJ (EE.UU.)). El laboratorio
est separado de la circulacin general y se accede a l por un vestbulo (entrada de
doble puerta o laboratorio bsico nivel de bioseguridad 2) o una cmara de cierre
hermtico. Dentro de la sala se dispone de una autoclave para la descontaminacin
de residuos antes de su eliminacin. Hay tambin un lavabo con grifo que puede
accionarse sin usar las manos. La corriente de aire circula hacia el interior y todo el
trabajo con material infeccioso se efecta en una cmara de seguridad biolgica.
Vigilancia mdica y sanitaria

Los objetivos de los programas de vigilancia mdica y sanitaria enunciados para los
laboratorios bsicos niveles de bioseguridad 1 y 2 se aplican tambin a los labora-
torios de contencin nivel de bioseguridad 3, con las siguientes modificaciones:
1. El reconocimiento mdico de todo el personal que trabaja en el laboratorio de
contencin nivel de bioseguridad 3 es obligatorio y debe comprender una his-
toria clnica detallada y un reconocimiento fsico orientado a la actividad laboral.
2. Una vez pasado el reconocimiento mdico con un informe favorable, se entregar
a la persona examinada una tarjeta de contacto mdico (vase el ejemplo de la
24
4. EI LABORATORIO DE CONTENCIN NIVEL DE BIOSEGURIDAD 3
A. Anverso
INFORMACIN PARA LA VIGILANCIA DE ENFERMEDADES
Fotografa
Nombre_______________________________________
del
______________________________________________ titular
titular
AL EMPLEADO
Conserve esta tarjeta en su poder. En caso de enfermedad febril inexplicada, mustrela a su
mdico y avise a uno de los siguientes mdicos en el orden indicado:
Dr._____________________________T el (Consultorio)_______________________________
_______________________________ Tel (Domicilio)_________________________________
Dr. ____________________________ Tel (Consultorio)_______________________________
_______________________________ Tel (Domicilio)_________________________________
B. Reverso
AL MDICO
El titular de esta tarjeta trabaja en ________________________________________________

donde existen virus, rickettsias, bacterias, protozoos o helmintos patgenos. En caso d
enfermedad febril inexplicada, srvase pedir al empleador informacin sobre los agentes a lo
que puede haber estado expuesto este empleado.
Nombre del laboratorio__________________________________________________________

Direccin____________________________________________________________________
__________
____________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________
Telfono_____________________________________________________________________
Figura 5. Formato sugerido para la ficha de contacto mdico
figura 5) en la que se declare que trabaja en un centro que tiene un laboratorio de

contencin nivel de bioseguridad 3. Esa ficha tendr el tamao de un billetero,
llevar la fotografa del titular y ste la llevar siempre consigo. Quienes figurarn
como contacto en la tarjeta es algo que tendr que acordarse en el plano local,
pero entre esas personas deben estar el director del laboratorio, el asesor mdico
o el funcionario responsable de la bioseguridad.
25
5. El laboratorio de contencin
mxima nivel de
bioseguridad 4
El laboratorio de contencin mxima nivel de bioseguridad 4 est concebido para

trabajar con microorganismos del grupo de riesgo 4. Antes de construir y poner en
funcionamiento un laboratorio de contencin mxima se requiere una labor inten-
siva de consulta con instituciones que tengan experiencia en la utilizacin de instala-
ciones de este tipo. Los laboratorios de contencin mxima nivel de bioseguridad 4
en funcionamiento deben estar sometidos al control de las autoridades sanitarias
nacionales, u otras apropiadas. La informacin que sigue tiene como propsito servir
solamente como material de presentacin. Las entidades que tengan intencin de
poner en funcionamiento un laboratorio de este nivel deben ponerse en contacto con
el programa de Bioseguridad de la OMS para obtener ms informacin.1
Cdigo de prcticas
El cdigo de prcticas correspondiente al nivel de bioseguridad 3 se aplica tambin a
este nivel con las siguientes modificaciones:
1. Hay que aplicar la regla del trabajo realizado por dos personas, en virtud de la cual
ninguna persona debe trabajar sola en el interior del laboratorio. Esto es particu-
larmente importante si el trabajo se realiza con ropa especial del nivel de biose-
guridad 4.
2. Al entrar y al salir del laboratorio es imprescindible un cambio completo de ropa
y calzado.
3. El personal debe recibir capacitacin en procedimientos de evacuacin de emer-
gencia en caso de que un miembro del personal sufra lesiones o caiga enfermo.
4. Debe establecerse un mtodo de comunicacin entre el personal que
trabaja dentro del laboratorio del nivel de bioseguridad 4 y el personal de apoyo
que se encuentra fuera del laboratorio para la comunicacin ordinaria y de
emergencia.
1
Programa de Bioseguridad, Departamento de Enfermedades Transmisibles (Vigilancia y Respuesta),
Organizacin Mundial de la Salud, 20 Avenue Appia, 1211 Ginebra 27, Suiza (http://www.who.int/csr/).
26
5. EL LABORATORIO DE CONTENCIN MXIMA NIVEL DE BIOSEGURIDAD 4

Los requisitos del laboratorio de contencin nivel de bioseguridad 3 se aplican
tambin a los laboratorios de contencin mxima nivel de bioseguridad 4, con la
adicin de los siguientes:
1. Contencin primaria. Debe existir un sistema eficiente de contencin primaria
que comprenda uno o ms de los siguientes elementos:
Laboratorio con CSB de clase III. Se exige el paso a travs de un mnimo de dos
puertas antes de acceder a la sala que contiene la CSB de clase III (sala de la
cmara). En este diseo de laboratorio la CSB de clase III proporciona la con-
tencin primaria. Es necesaria una ducha personal con vestuarios interior y
exterior. Los utensilios y materiales que no ingresan en la sala de la cmara a
travs de la zona de vestuario se introducen por una autoclave o una cmara
de fumigacin de doble puerta. Una vez debidamente cerrada la puerta exte-
rior, el personal que se encuentra dentro del laboratorio puede abrir la puerta
interior para recoger los materiales. Las puertas de la autoclave o la cmara de
fumigacin estn diseadas de tal modo que la puerta exterior no pueda
abrirse a menos que la autoclave haya completado un ciclo de esterilizacin o
la cmara de fumigacin haya sido descontaminada (vase el captulo 10).
Laboratorio diseado para trabajar con trajes especiales. El diseo y las instala-
ciones de un laboratorio destinado al trabajo con trajes protectores con respi-
rador autnomo difiere considerablemente de un laboratorio de nivel de
bioseguridad 4 con CSB de clase III. Las salas de este tipo de laboratorio estn
dispuestas de tal manera que se dirige al personal a travs de las zonas de ves-
tuario y descontaminacin antes de entrar en las zonas donde se manipula el
material infeccioso. Debe existir una ducha de descontaminacin de trajes, que
ser utilizada por el personal antes de abandonar la zona de contencin del
laboratorio. Habr otra ducha personal con vestuarios interior y exterior. El
traje especial ser de una pieza, dotado de presin positiva y con suministro
de aire filtrado por HEPA. El aire del traje ser suministrado por un sistema
que tenga una capacidad redundante del 100% con una fuente de aire inde-
pendiente, para utilizarla en caso de emergencia. La entrada en la zona del
laboratorio destinada al trabajo con trajes especiales se realizar por una
cmara dotada de puertas de cierre hermtico. Estos laboratorios dispondrn
de un sistema apropiado de alarma que el personal pueda utilizar en caso de
fallo del sistema mecnico o de aire (vase el captulo 10).
2. Acceso controlado. El laboratorio de contencin mxima nivel de bioseguridad
4 debe estar situado en un edificio independiente o en una zona claramente deli-
mitada en el interior de un edificio protegido. La entrada y la salida del personal
y de los suministros se harn a travs de cmaras de cierre hermtico o sistemas
de caja de paso. Al entrar, el personal se mudar por completo de ropa y al salir
se duchar antes de volver a ponerse la ropa de calle.
27
3. Sistema de ventilacin controlada. Debe mantenerse la presin negativa dentro

de las instalaciones. Tanto el aire de entrada como el de salida debe pasar por filtros
HEPA. Existen diferencias considerables entre los sistemas de ventilacin de los
laboratorios con CSB de clase III y los laboratorios donde hay que trabajar con
trajes especiales:
Laboratorio con cmara biolgica de clase III. El aire suministrado a las CSB de
clase III puede proceder del interior de la sala y atravesar un filtro HEPA
montado en la cmara o directamente del sistema de entrada de aire. El aire
evacuado de la CSB de clase III debe atravesar dos filtros HEPA antes de salir
al exterior del edificio. La cmara debe funcionar en todo momento a presin
negativa respecto del laboratorio circundante. Se requiere un sistema de ven-
tilacin exclusivo que no haga recircular el aire para el laboratorio.
Laboratorio diseado para trabajar con trajes especiales. Se requieren sistemas
exclusivos de suministro y evacuacin del aire de la sala. Los componentes de
suministro y evacuacin del sistema de ventilacin estarn equilibrados de tal
forma que el flujo de aire dentro de la zona de trabajo con traje protector vaya
desde las zonas de menos peligro a las de mayor peligro. Se necesitan venti-
ladores extractores redundantes para garantizar que las instalaciones se
mantienen en todo momento a presin negativa. Deben vigilarse las diferen-
cias de presin dentro del laboratorio y entre el laboratorio y las zonas adya-
centes, as como el flujo del aire en los componentes de suministro y
evacuacin del sistema de ventilacin, y debe utilizarse un sistema de control
apropiado para impedir la presurizacin del laboratorio. El aire suministrado
a la zona de trabajo con trajes especiales y a la ducha y a las cmaras de descon-
taminacin con cierre hermtico debe pasar por filtros HEPA. El aire evacuado
del laboratorio debe atravesar dos filtros HEPA antes de salir al exterior. Otra
posibilidad es que, tras una doble filtracin por HEPA, el aire se recircule, pero
slo dentro del laboratorio; en ninguna circunstancia el aire evacuado del
laboratorio de nivel de bioseguridad 4 diseado para trabajar con trajes
especiales se reciclar a otras zonas. Debe obrarse con la mxima precaucin
si se elige el sistema de recirculacin de aire dentro del laboratorio. Deben
tenerse en cuenta los tipos de investigacin que se realicen, el equipo, las
sustancias qumicas y otros materiales utilizados, as como las especies de
animales que puedan intervenir en la investigacin.
Todos los filtros HEPA sern probados y certificados una vez al ao. Los filtros
HEPA estarn instalados de tal modo que permitan su descontaminacin in situ
antes de retirarlos. Otra posibilidad es retirar el filtro y colocarlo en un recipiente
primario cerrado y hermtico para su ulterior descontaminacin y/o destruccin
por incineracin.
4. Descontaminacin de efluentes. Todos los efluentes de la zona de trabajo con
trajes especiales, la cmara y la ducha de descontaminacin o la CSB de clase III
28
5. EL LABORATORIO DE CONTENCIN MXIMA NIVEL DE BIOSEGURIDAD 4
sern descontaminados antes de su eliminacin definitiva. El mtodo de eleccin

es el tratamiento trmico. Ser necesario corregir el pH de algunos efluentes antes
de evacuarlos. El agua de la ducha personal y los retretes se puede verter directa-
mente al alcantarillado sin tratamiento previo.
5. Esterilizacin de los desechos y materiales. La zona del laboratorio debe contar
con una autoclave de doble puerta. Debe disponerse de otros mtodos de descon-
taminacin para aquellos elementos del equipo que no soporten la esterilizacin
por vapor.
6. Accesos con entrada de cierre hermtico para muestras, materiales y animales.
7. Deben existir lneas de suministro elctrico exclusivas y de emergencia.
8. Se instalarn sumideros de contencin.
Dada la gran complejidad de las caractersticas tcnicas, el diseo y la construccin
de las instalaciones del nivel de bioseguridad 4, tanto en la modalidad de CSB como
en la de trajes especiales, no se han incluido representaciones esquemticas de esas
instalaciones.
Del mismo modo, la gran complejidad del trabajo que se lleva a cabo en los labo-
ratorios del nivel de bioseguridad 4 hace necesario elaborar un manual de trabajo
detallado y aparte que se ensayar en los ejercicios de capacitacin. Adems, se ela-
borar un programa de emergencia (vase el captulo 13). En la preparacin de este
programa habr que contar con la colaboracin activa de las autoridades sanitarias
nacionales y locales, y la participacin de otros servicios de emergencia (por ejemplo
bomberos, polica y servicios hospitalarios).
29
6. Animalarios
El empleo de animales de laboratorio con fines experimentales y de diagnstico

impone al usuario la obligacin moral de adoptar todas las medidas necesarias para
evitar que aqullos padezcan dolores o sufrimientos innecesarios. Hay que propor-
cionar a los animales un alojamiento cmodo, higinico y de dimensiones suficientes,
as como agua y comida de buena calidad y en cantidad suficiente. Al final del expe-
rimento habr que sacrificarlos con el procedimiento menos cruel posible.
Por motivos de seguridad, los animales deben estar alojados en un local indepen-
diente, separado del laboratorio. Si se trata de un local contiguo, deber estar
construido de tal modo que sea posible aislarlo de las partes pblicas del laboratorio
en caso de necesidad, as como para las operaciones de descontaminacin y
desinfestacin.
Cuadro 4. Niveles de contencin de los animalarios: resumen de los procedi-

mientos y equipo de seguridad
GRUPO DE NIVEL DE PROCEDIMIENTOS DE LABORATORIO Y EQUIPO DE SEGURIDAD
RIESGO CONTENCIN
1 NBSA-1 Acceso restringido, ropa y guantes protectores
2 NBSA-2 Procedimientos del NBSA-1, ms seales de advertencia del riesgo.

CSB de clase I o II para las actividades que producen aerosoles.
Descontaminacin de desechos y jaulas antes del lavado.
3 NBSA-3 Procedimientos del NBSA-2, ms acceso controlado. CSB y ropa

protectora especial para todas las actividades.
4 NBSA-4 Procedimientos del NBSA-3, ms acceso estrictamente restringido.

Muda de ropa antes de entrar. CSB de clase III o trajes de presin
positiva. Ducha a la salida. Descontaminacin de todos los desechos
antes de su salida de las instalaciones.
NBSA: nivel de bioseguridad de las instalaciones para los animales; CSB: cmaras de seguridad biolgica.
Al igual que los laboratorios, los animalarios pueden clasificarse en cuatro niveles
de bioseguridad, con arreglo a una evaluacin del riesgo y al grupo de riesgo al que
pertenecen los microorganismos investigados.
30
6. ANIMALARIOS
En lo que respecta a los agentes patgenos que van a utilizarse en el laboratorio de

animales, hay que tener en cuenta los siguientes factores:
1. La va normal de transmisin.
2. Los volmenes y las concentraciones que van a manejarse.
3. La va de inoculacin.
4. En su caso, la va de excrecin de los agentes.
En cuanto a los animales que van a usarse en el laboratorio, los factores que hay que
tener en cuenta son los siguientes:
1. El carcter de los animales, es decir, su grado de agresividad y tendencia a morder
o araar.
2. Sus endoparsitos y ectoparsitos naturales.
3. Las zoonosis a las que son susceptibles.
4. La posible diseminacin de alrgenos.
Como en el caso de los laboratorios, los requisitos relativos a las caractersticas de
diseo, el equipo y las precauciones son cada vez ms estrictos a medida que aumenta
el nivel de seguridad. Esos requisitos se describen a continuacin y se resumen en el
cuadro 4. Las directrices son acumulativas; es decir, cada nivel incorpora los requisi-
tos de los niveles inferiores.
Animalarios nivel de bioseguridad 1

Este nivel es el apropiado para mantener a la mayora de los animales despus de la
cuarentena (salvo los primates no humanos, respecto de los cuales debe consultarse a
las autoridades nacionales) y para los animales que son inoculados deliberadamente
con agentes del grupo de riesgo 1. Se necesitan tcnicas microbiolgicas apropiadas.
El director del animalario debe determinar las polticas, procedimientos y protocolos
para todas las operaciones, as como para el acceso al animalario. Se instituir un pro-
grama apropiado de vigilancia mdica para el personal y se preparar y adoptar un
manual de seguridad de las operaciones.

Este nivel es apropiado para el trabajo con animales a los que se inoculan delibe-
radamente microorganismos del grupo de riesgo 2. Se aplicarn las siguientes
precauciones de seguridad:
1. Se cumplirn todos los requisitos de los animalarios del nivel 1.
2. Se colocarn seales de advertencia del peligro biolgico (vase la figura 1) en las
puertas y otros lugares apropiados.
3. El local estar diseado de modo que sea fcil de limpiar y mantener.
4. Las puertas deben abrirse hacia dentro y cerrarse solas.
5. La calefaccin, la ventilacin y la iluminacin deben ser apropiadas.
31
6. Si se instala ventilacin mecnica, el flujo de aire debe dirigirse hacia dentro. El

aire utilizado se evacuar al exterior y no se reciclar a ninguna otra parte del
edificio.
7. El acceso se limitar a las personas autorizadas.
8. No se admitir ningn animal distinto de los utilizados con fines experimentales.
9. Existir un programa de lucha contra artrpodos y roedores.
10. Si hay ventanas, estas sern seguras, irrompibles y, si se pueden abrir, llevarn
rejillas a prueba de artrpodos.
11. Las superficies de trabajo habrn de ser descontaminadas con desinfectantes efi-
caces despus del trabajo (vase el captulo 14).
12. Se dispondr de CSB (clases I o II) o jaulas aislantes con suministro especial de
aire y evacuacin de aire a travs de filtros HEPA para aquellas tareas que puedan
entraar la generacin de aerosoles.
13. Se dispondr de una autoclave in situ o cerca del animalario.
14. El material de los lechos de los animales se eliminar de modo que se reduzca al
mnimo la produccin de aerosoles y polvo.
15. Todos los materiales de desecho y de los lechos deben descontaminarse antes de
ser eliminados.
16. Se restringir en lo posible el uso de instrumentos punzantes o cortantes. stos se
recogern siempre en recipientes resistentes y a prueba de perforacin, provistos
de tapa, y sern tratados como material infeccioso.
17. El material destinado al tratamiento con autoclave o a la incineracin debe trans-
portarse sin riesgo en recipientes cerrados.
18. Las jaulas de los animales se descontaminarn despus de su uso.
19. Los cadveres de los animales sern incinerados.
20. En el local se utilizar ropa y equipo de proteccin, que se retirar a la salida.
21. Se instalarn lavabos y el personal se lavar las manos antes de salir del animalario.
22. Todas las lesiones, por leves que sean, debern ser tratadas de forma apropiada,
notificadas y registradas.
23. Estar prohibido comer, beber, fumar y aplicar cosmticos dentro del animalario.
24. Todo el personal deber recibir capacitacin apropiada.

Este nivel es apropiado para trabajar con animales que son inoculados deliberada-
mente con agentes incluidos en el grupo de riesgo 3, o cuando as lo indique la
evaluacin del riesgo. Todos los sistemas, prcticas y procedimientos habrn de ser
revisados y certificados nuevamente una vez al ao. Se aplicarn las siguientes pre-
cauciones de seguridad:
1. Deben cumplirse todos los requisitos correspondientes a los animalarios de los
niveles de bioseguridad 1 y 2.
2. El acceso debe estar estrictamente controlado.
32
6. ANIMALARIOS
3. El animalario estar separado de otros locales del laboratorio y destinados a ani-

males por dos puertas que formen un vestbulo o antesala.
4. En el vestbulo se instalarn lavabos.
5. En el vestbulo se instalarn duchas.
6. Habr que disponer de ventilacin mecnica que asegure un flujo continuo de aire
en todos los locales. El aire de salida pasar por filtros HEPA antes de ser
evacuado a la atmsfera sin ningn tipo de recirculacin. El sistema estar
diseado de tal modo que impida el flujo de retorno accidental y que haya una
presin positiva en todas partes del animalario.
7. Se dispondr de una autoclave situada en un lugar cmodo respecto del alo-
jamiento de los animales y donde el riesgo biolgico est contenido. Los residuos
infecciosos se tratarn en la autoclave antes de trasladarlos a otros lugares de la
instalacin.
8. Se dispondr de un incinerador de fcil acceso en la instalacin o se tomarn otras
disposiciones al mismo efecto con las autoridades competentes.
9. Los animales infectados con microorganismos del grupo de riesgo 3 estarn alo-
jados en jaulas aisladas o en locales con salidas de ventilacin situadas detrs de
las jaulas.
10. Los lechos de los animales tendrn el mnimo polvo que sea posible.
11. Toda la ropa protectora deber ser descontaminada antes de enviarla a la
lavandera.
12. Las ventanas estarn hermticamente cerradas y sern resistentes a la rotura.
13. Se ofrecer al personal la posibilidad de inmunizarse, si procede.

El trabajo que se realice en estas instalaciones normalmente guardar relacin con el
del laboratorio de contencin mxima nivel de bioseguridad 4, y habr que armo-
nizar las normas y los reglamentos nacionales y locales para aplicarlos a ambos tipos
de instalaciones. Para el trabajo en laboratorios que requieren trajes especiales se uti-
lizarn prcticas y procedimientos especiales, adems de los que se describen a con-
tinuacin (vase el captulo 5).
1. Se cumplirn todos los requisitos de los animalarios de los niveles de bioseguri-
dad 1, 2 y 3.
2. El acceso estar estrictamente controlado; slo tendr autorizacin para entrar el
personal designado por el director del establecimiento.
3. Ninguna persona deber trabajar sola: se aplicar la regla de las dos personas.
4. El personal habr recibido el mximo nivel posible de formacin en microbiologa
y estar familiarizado con los riesgos que entraa su trabajo y las precauciones
necesarias.
5. Las zonas en las que se alojen los animales infectados con agentes del grupo de
riesgo 4 mantendrn los criterios de contencin descritos y aplicados en los
laboratorios de contencin mxima nivel de bioseguridad 4.
33
6. Se entrar en la instalacin por un vestbulo de cierre hermtico cuya parte limpia

estar separada de la parte restringida por las instalaciones de cambio de ropa y
duchas.
7. El personal deber quitarse la ropa de calle al entrar y ponerse ropa protectora
especial. Despus del trabajo se quitar la ropa, la separar para ser tratada en
autoclave, y se duchar antes de salir.
8. La instalacin estar ventilada por un sistema de evacuacin de aire con filtros
HEPA que asegure una presin negativa (flujo de aire hacia el interior).
9. El sistema de ventilacin estar diseado de modo que impida el flujo de retorno
y la presurizacin positiva.
10. Para el intercambio de materiales se dispondr de una autoclave de doble puerta
con el extremo limpio situado en una sala exterior a las salas de contencin.
11. Para el intercambio de materiales que no puedan ser tratados en la autoclave se
dispondr de una caja de paso con cierre hermtico cuyo extremo limpio estar
situado fuera de salas de contencin.
12. Todas las manipulaciones de animales infectados con agentes del grupo de riesgo
4 se realizarn en condiciones de contencin mxima nivel de bioseguridad 4.
13. Todos los animales estarn alojados en aisladores.
14. Todos los desechos y el material de los lechos de los animales se tratarn en la
autoclave antes de sacarlos del animalario.
15. Se someter al personal a vigilancia mdica.
Invertebrados
Como en el caso de los vertebrados, el nivel de bioseguridad de las instalaciones para
estos animales vendr determinado normalmente por el grupo de riesgo del agente
estudiado o segn lo que indique la evaluacin del riesgo. No obstante, con ciertos
artrpodos, en particular los insectos voladores, se necesitan adems algunas precau-
ciones especiales:
1. Se dispondr de locales distintos para los invertebrados infectados y no
infectados.
2. Esos locales podrn sellarse para ser fumigados.
3. Se dispondr con facilidad de pulverizadores de insecticidas.
4. Se dispondr de instalaciones de enfriamiento para reducir, cuando sea preciso,
la actividad de los invertebrados.
5. El acceso se har a travs de un vestbulo provisto de mosquiteras en las puertas
y trampas para insectos.
6. Todos los conductos de salida de la ventilacin y las ventanas que puedan abrirse
estarn equipados con mosquiteras.
7. No se permitir que se sequen los sifones de los fregaderos y desages.
8. Todos los residuos se descontaminarn en la autoclave, ya que algunos inverte-
brados son resistentes a algunos insecticidas.
34
6. ANIMALARIOS
9. Se controlar el nmero de larvas y formas adultas de artrpodos voladores, rep-

tadores y saltadores.
10. Los recipientes para garrapatas y caros se depositarn en cubetas con aceite.
11. Los insectos voladores infectados o potencialmente infectados se albergarn en
jaulas de doble malla.
12. Los artrpodos infectados o potencialmente infectados se manipularn en CSB o
cmaras aislantes.
13. Los artrpodos infectados o potencialmente infectados podrn manipularse en
bandejas de enfriamiento.
Puede obtenerse ms informacin en las referencias 3 a 6.
35
7. Directrices para la puesta en
servicio de laboratorios e
instalaciones
La puesta en servicio de laboratorios e instalaciones afines puede definirse como el

proceso de comprobacin sistemtica y documentacin de que los componentes
estructurales y los sistemas y/o componentes de sistemas del laboratorio han sido
instalados, inspeccionados, sometidos a pruebas funcionales y verificados para deter-
minar si cumplen las normas nacionales o internacionales, segn proceda. Esos
requisitos son establecidos por los criterios de diseo del sistema y la funcin de cada
edificio. En otras palabras, los laboratorios de los niveles de bioseguridad 1 a 4 tendrn
distintos requisitos, cada vez ms complejos, en materia de puesta en servicio. Las
condiciones geogrficas y climticas, como las fallas tectnicas o el calor, fro y
humedad extremos, tambin pueden influir en el diseo del laboratorio y, por tanto,
en los requisitos de la puesta en servicio. Al final del proceso de puesta en servicio, los
componentes estructurales y los sistemas de apoyo pertinentes habrn sido someti-
dos a las diversas condiciones de funcionamiento que razonablemente cabe esperar,
as como a distintas modalidades de fallo, y habrn recibido la aprobacin necesaria.
El proceso de puesta en servicio y los criterios de aceptacin de las instalaciones
debern determinarse en una fase temprana, preferiblemente durante la progra-
macin del proyecto de construccin o renovacin. Al tener en cuenta el proceso de
puesta en servicio durante las primeras fases del proyecto, los arquitectos, los inge-
nieros, el personal de seguridad e higiene y, en ltima instancia, los ocupantes del
laboratorio comprendern los requisitos de funcionamiento del laboratorio de que se
trate y tendrn expectativas uniformes en cuanto al rendimiento de las instalaciones.
El proceso de puesta en servicio proporciona a la institucin y a la comunidad cir-
cundante un mayor grado de confianza al asegurar que los sistemas estructural, elc-
trico, mecnico y de conducciones, los sistemas de contencin y descontaminacin y
los sistemas de seguridad y alarma funcionarn conforme a lo previsto para garanti-
zar la contencin de todo microorganismo potencialmente peligroso con el que se est
trabajando en ese laboratorio o animalario.
Las actividades de puesta en servicio suelen comenzar durante la fase de progra-
macin del proyecto y avanzan a lo largo de la construccin y el ulterior perodo de
garanta del laboratorio o la instalacin. Los perodos de garanta normalmente deben
ser de un ao tras la ocupacin de las instalaciones. Se recomienda recurrir a un agente
de puesta en servicio que sea independiente de las empresas de arquitectos, ingenieros
y constructores que han intervenido en el diseo y la construccin del laboratorio. El
36
7. DIRECTRICES PARA LA PUESTA EN SERVICIO DE LABORATORIOS E INSTALACIONES
agente acta como defensor de la institucin que construye o renueva el laboratorio

y debe ser considerado miembro del equipo de diseo; su participacin en las
primeras fases de programacin del proyecto es indispensable. En algunos casos, la
propia institucin puede desempear ese papel. Cuando se trate de laboratorios ms
complejos (niveles de bioseguridad 3 4), quiz la institucin desee recurrir a un
agente externo que haya demostrado experiencia y buen hacer en la puesta en servi-
cio de otros laboratorios y animalarios complejos. Aunque se recurra a un agente
independiente, la institucin debe formar parte del equipo de puesta en servicio. Se
recomienda que, adems del agente de puesta en servicio, formen tambin parte del
equipo el funcionario de seguridad y el oficial de proyectos de la institucin, el direc-
tor del programa y un representante del personal de operaciones y mantenimiento.
A continuacin se enumeran, de forma no exhaustiva, los sistemas y componentes
del laboratorio que pueden incluirse en un plan de puesta en servicio para un ensayo
de funcionamiento, segn el nivel de contencin de las instalaciones que se estn
renovando o construyendo. Evidentemente, el plan de puesta en servicio efectiva refle-
jar la complejidad del laboratorio que se est planificando.
1. Sistemas automatizados del edificio, incluidos los enlaces con puntos de vigilan-
cia y control remotos
2. Sistemas electrnicos de vigilancia y deteccin
3. Cierres electrnicos de seguridad y dispositivos lectores de proximidad
4. Sistemas de calefaccin, ventilacin (suministro y extraccin) y aire
acondicionado
5. Sistemas de filtracin HEPA
6. Sistemas de descontaminacin por filtros HEPA
7. Controles de los sistemas de calefaccin, ventilacin, aire acondicionado,
evacuacin de aire, y cierre con dispositivo de interbloqueo
8. Compuertas aislantes de cierre hermtico
9. Sistema de refrigeracin del laboratorio
10. Calderas y sistema de vapor
11. Sistemas de deteccin, alarma y extincin de incendios
12. Sistemas de prevencin de reflujo del agua de uso domstico
13. Sistemas de agua tratada (es decir, smosis inversa, agua destilada)
14. Sistemas de tratamiento y neutralizacin de efluentes lquidos
15. Sistemas de fontanera y desages
16. Sistemas de descontaminacin qumica
17. Sistemas de gases para laboratorios mdicos
18. Sistemas de aire para respirar
19. Sistemas de aire para servicios e instrumentos
20. Verificacin de la cascada de presiones diferenciales en los laboratorios y zonas
auxiliares
21. Sistemas de red de rea local (LAN) y de datos informticos
37
22. Sistemas de energa ordinarios

23. Sistemas de energa de emergencia
24. Sistemas de energa ininterrumpibles
25. Sistemas de alumbrado de emergencia
26. Juntas aislantes de los elementos de alumbrado
27. Juntas aislantes de los dispositivos elctricos y mecnicos
28. Sistemas telefnicos
29. Controles de los dispositivos de interbloqueo de las puertas de cierre hermtico
30. Juntas de estanqueidad de las puertas de cierre hermtico
31. Juntas de estanqueidad de ventanas y mirillas
32. Cajas de paso a travs de barreras
33. Verificacin de la integridad estructural: suelos, paredes y techos de hormign
34. Verificacin de revestimientos de barrera: suelos, paredes y techos
35. Funciones de presurizacin y aislamiento en la zona de contencin del nivel de
bioseguridad 4
36. CSB
37. Autoclaves
38. Sistema de nitrgeno lquido y alarmas
39. Sistema de deteccin de agua (por ej., en caso de inundacin de la zona de
contencin)
40. Duchas de descontaminacin y sistema de aditivos qumicos
41. Sistemas de lavado y neutralizacin para jaulas
42. Gestin de desechos.
38
8. Directrices para la certificacin
de laboratorios e instalaciones
Los laboratorios son entornos complejos y dinmicos. Un laboratorio clnico o de

investigacin biomdica moderno debe ser capaz de adaptarse rpidamente a las
necesidades y presiones cada vez mayores en materia de salud pblica. Buen ejemplo
de ello es la necesidad de que los laboratorios ajusten sus prioridades para hacer frente
a los retos planteados por las enfermedades infecciosas emergentes o reemergentes.
Para velar por que esos entornos dinmicos que son los laboratorios se adapten y
estn mantenidos de modo apropiado y sin riesgos, todos los laboratorios clnicos y
de investigacin biolgica deben ser certificados peridicamente. Esa certificacin
permite garantizar que:
1. Se estn utilizando controles tcnicos apropiados que funcionan debidamente y
con arreglo al diseo
2. Existan los debidos controles administrativos respecto del lugar y de los
protocolos
3. El equipo de proteccin personal sea el indicado para las tareas que se realizan
4. La descontaminacin de desechos y materiales se haya estudiado y existan los
debidos procedimientos de gestin de desechos
5. Se observen las normas generales de seguridad en el laboratorio, entre ellas las
relativas a la seguridad fsica, elctrica y qumica.
La certificacin del laboratorio difiere de las actividades de puesta en servicio (cap-
tulo 7) en varios aspectos importantes. La certificacin del laboratorio es el examen
sistemtico de todas las caractersticas y procesos de seguridad dentro del laboratorio
(controles tcnicos, equipo de proteccin personal y controles administrativos).
Tambin se examinan las prcticas y los procedimientos en materia de bioseguridad.
La certificacin es una actividad sostenida de garanta de la calidad y la seguridad que
debe efectuarse con carcter peridico.
Las actividades de certificacin de laboratorios pueden ser realizadas por profe-
sionales de seguridad y salud o de bioseguridad debidamente adiestrados. Las insti-
tuciones pueden contratar a personal que cuente con los conocimientos necesarios
para llevar a cabo auditoras, encuestas o inspecciones (trminos que se emplean
indistintamente) asociadas al proceso de certificacin. Tambin puede darse el caso
de que las instituciones prefieran o se les exija recurrir a terceros para prestar esos
servicios.
39
Los laboratorios clnicos y de investigacin biomdica pueden poner a punto

instrumentos de auditora, encuesta o inspeccin para lograr cierta coherencia en el
proceso de certificacin. Esos instrumentos deben ser lo bastante flexibles como para
amoldarse a las diferencias fsicas y de procedimiento que existen entre unos labora-
torios y otros y que dependen del tipo de trabajo que realizan, y al mismo tiempo
aplicar un criterio uniforme dentro de la institucin. Debe procurarse que esos instru-
mentos slo sean utilizados por personal adecuadamente adiestrado, para que no se
tomen como un mero sustituto de una correcta evaluacin profesional de la biose-
guridad. En los cuadros 5 a 7 se ofrecen ejemplos de esos instrumentos.
Los resultados de la auditora, encuesta o inspeccin deben comentarse con el per-
sonal y la direccin del laboratorio. Dentro del laboratorio, habr que designar a una
persona responsable de velar por que se adopten las medidas necesarias para corregir
toda deficiencia que haya puesto de manifiesto la auditora. La certificacin del labo-
ratorio no estar completa, y el laboratorio no deber funcionar, hasta que las defi-
ciencias se hayan subsanado debidamente.
Por su complejidad, las operaciones de los laboratorios del nivel de bioseguridad 4
quedan fuera del alcance del presente manual. Si se desean ms detalles e informa-
cin, puede consultarse al Programa de Bioseguridad de la OMS1 (vase tambin el
anexo 3).
1
Programa de Bioseguridad, Departamento de Enfermedades Transmisibles (Vigilancia y Respuesta),
Organizacin Mundial de la Salud, 20 Avenue Appia, 1211 Ginebra 27, Suiza (http://www.who.int/csr/).
40
8. DIRECTRICES PARA LA CERTIFICACIN DE LABORATORIOS E INSTALACIONES
Cuadro 5. Laboratorio bsico nivel de bioseguridad 1: encuesta sobre la

seguridad en el laboratorio
LUGAR . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . FECHA . . . . . . . . . . . . . .
ENCARGADO DEL LABORATORIO . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
COMPROBADO (FECHA) S NO N/A OBSERVACIONES
Laboratorio
Sealizacin apropiada: radiacin ultravioleta, lser, Nivel de
material radiactivo, etc. .................................................... bioseguridad:
Directrices de bioseguridad apropiadas disponibles Adjuntar el
y cumplidas ...................................................................... formulario de
Equipo de laboratorio debidamente rotulado (peligro encuesta del nivel
biolgico, radiactivo, txico, etc.) .................................... de bioseguridad
que corresponda
Diseo del laboratorio
Facilidad de limpieza .............................................................
Alumbrado ultravioleta en la sala con interruptor de
interbloqueo .....................................................................
Todas las estanteras estn fijadas con firmeza ....................
Mostradores impermeables y resistentes a cidos,
lcalis, disolventes orgnicos y calor ...............................
Iluminacin suficiente ...........................................................
Suficiente espacio de almacenamiento, que se
aprovecha debidamente ...................................................
Bombonas de gas
Todas las bombonas bien aseguradas ..................................
Bombonas de reserva con sus tapas correspondientes .......
Gases asfixiantes y peligrosos slo en salas ventiladas .......
Cantidad excesiva de bombonas o bombonas vacas ...........
Sustancias qumicas
Sustancias inflamables almacenadas en armario
especial ............................................................................
Sustancias formadoras de perxidos con doble fecha
(recepcin y apertura) ......................................................
Sustancias qumicas debidamente separadas .......................
Sustancias qumicas peligrosas almacenadas por
encima del nivel de los ojos .............................................
Sustancias qumicas almacenadas en el suelo .....................
Recipientes abiertos ..............................................................
Todas las soluciones debidamente rotuladas ........................
Termmetros de mercurio en uso .........................................
Frigorficos/congeladores/cmaras de fro
Presencia de alimentos para consumo humano ...................
Sustancias inflamables en unidades a prueba de
explosin ..........................................................................
Rtulos exteriores si contienen sustancias
cancergenas, radiactivas o con peligro biolgico ...........
Cmaras de fro con apertura de emergencia .......................
41
Equipo elctrico
Cables alargadores ................................................................
Enchufes con toma de tierra y la debida polaridad ...............
Conexiones cerca de fregaderos, duchas, etc. ......................
Equipo sin cables desgastados o en mal estado ..................
Enchufes o tomas elctricas sobrecargados .........................
Tomas de corriente montadas fuera del suelo ......................
Fusibles apropiados ..............................................................
Las tomas elctricas cercanas a puntos de agua
cumplen las normas locales .............................................
Toma de tierra en cables elctricos .......................................
Calefactores porttiles ...........................................................
Equipo de proteccin personal
Material para lavado de ojos en el laboratorio ......................
Ducha de seguridad disponible .............................................
Equipo de proteccin personal disponible (guantes,
batas, gafas de proteccin, etc.) ......................................
Ocupantes debidamente vestidos ..........................................
Las batas, camisas, guantes y otras prendas de vestir
no se usan fuera del laboratorio ......................................
Equipo de proteccin personal para el
almacenamiento criognico ..............................................
Gestin de residuos
Signos de gestin indebida de residuos ...............................
Desechos debidamente separados en los recipientes
apropiados .......................................................................
Recipientes para residuos qumicos rotulados,
fechados y cerrados .........................................................
Recipientes para residuos qumicos debidamente
manipulados y almacenados ............................................
Recipientes para objetos cortantes y punzantes
debidamente utilizados y eliminados ...............................
Ausencia de basura en el suelo .............................................
Procedimientos de eliminacin de residuos expuestos
en el laboratorio ...............................................................
Programas de salud y seguridad en el trabajo
Comunicacin de riesgos ......................................................
Proteccin respiratoria ..........................................................
Conservacin de la audicin .................................................
Vigilancia del formaldehdo ...................................................
Vigilancia del xido de etileno ...............................................
Vigilancia de gases anestsicos ............................................
Controles tcnicos generales
La presin en el laboratorio es negativa respecto de
las zonas de ocupacin general, los pasillos y
las oficinas .......................................................................
42
Los sumideros de las pilas actan como respiraderos .........

Se dispone de lavabo para las manos ..................................
Piezas de maquinaria al aire (poleas, ruedas dentadas) .......
La lnea de vaco tiene filtros y sifones en las mesas
de trabajo .........................................................................
Riesgo de reflujo al suministro de agua ...............................
Sistemas de agua destilada en buen estado .........................
Programa activo y eficaz de control de artrpodos
y roedores ........................................................................
Prcticas y procedimientos generales
Los alimentos para consumo humano se guardan
fuera del laboratorio .........................................................
Los hornos de microondas estn claramente
rotulados: Prohibida la preparacin de
alimentos. Uso exclusivo del laboratorio .......................
En el laboratorio se come, se bebe, se fuma o se
aplican cosmticos ...........................................................
Recipientes de vidrio presurizados sellados con cinta
adhesiva o protegidos (purgadores de vaco) ..................
Prohibicin de pipetear con la boca ......................................
Dispositivos mecnicos de pipeteo disponibles y en
uso ...................................................................................
Ropa protectora de laboratorio almacenada en lugar
distinto de la ropa de calle ...............................................
Organizacin general del laboratorio
Recipientes de vidrio en el suelo ..........................................
Riesgos evidentes de tropezarse ...........................................
Paos absorbentes limpios en las superficies de
trabajo ..............................................................................
Objetos de vidrio roto manipulados por medios
mecnicos (escoba y recogedor, pinzas, etc.) .................
Proteccin contra incendios
Aspersores libres y despejados ............................................
Inserciones abiertas en paredes, techos, suelos, etc. ...........
Cables o conducciones a travs del hueco de la puerta .......
Paso de anchura mnima de 1 m en el laboratorio ................
Objetos almacenados sobre las tuberas o los
accesorios elctricos ........................................................
Exceso de combustibles almacenados en el laboratorio .......
Baos calientes a temperatura constante
Bao equipado con nivel de agua bajo y termostato
para posible sobrecalentamiento ......................................
Bao construido con materiales no combustibles ................
Firma del encargado de la encuesta de seguridad . . . . . . . . Fecha de la encuesta . . . . . . . . .
N/A = no aplicable.
43
Cuadro 6. Laboratorio bsico nivel de bioseguridad 2: encuesta sobre la

seguridad en el laboratorio. Este formulario debe emplearse junto con el
anterior (nivel de bioseguridad 1)
LUGAR . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . FECHA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Cmara de seguridad biolgica Fecha:

Certificada en los doce meses anteriores .................................... Localizacin:
Su superficie se limpia con un desinfectante apropiado al Marca:
principio y al final de cada procedimiento ............................. Tipo:
Rejilla frontal y filtro de salida sin obstrucciones ....................... N de serie:
Uso de llamas desnudas dentro de la cmara ............................
La lnea de vaco dispone de filtros y sifones con
desinfectante ..........................................................................
Posicin incorrecta en relacin con las corrientes de aire en
la sala .....................................................................................
Se utiliza cuando hay posibilidad de que se generen aerosoles ..
Laboratorio
Acceso limitado y restringido al personal autorizado ..................
Entrada limitada al personal informado de todos los riesgos .....
Signo de peligro biolgico en la puerta, si procede ....................
Informacin del signo exacta y actualizada ........................
Signo legible y no borrado ..................................................
Todas las puertas cerradas ..........................................................
Descontaminacin
Descontaminante especfico para el organismo que se est
usando ....................................................................................
Informe al supervisor del laboratorio de todo derrame
y accidente con material infeccioso .......................................
Utilizacin del descontaminante apropiado para limpiar los
derrames ................................................................................
Descontaminacin de las superficies de trabajo antes y despus
de cada operacin, todos los das y tras cualquier
derrame ..................................................................................
Manipulacin de desechos contaminados
Los recipientes de desechos infecciosos se utilizan
debidamente ............................................................................
Los recipientes estn excesivamente llenos ................................
Los recipientes estn debidamente rotulados y cerrados ...........
Los cultivos y otros desechos reglamentados se
descontaminan correctamente antes de eliminarlos ..............
Los materiales descontaminados fuera del laboratorio se
transportan en recipientes cerrados, duraderos y estancos,
conformes con las normas y reglamentaciones locales ........
Los desechos mixtos se descontaminan biolgicamente antes
de ser eliminados como residuos qumicos o radiolgicos ...
44
Proteccin personal
Se recuerdan al personal del laboratorio las inmunizaciones/
pruebas apropiadas para los agentes que se manejan ..........
Se recurre a los servicios mdicos apropiados para las
evaluaciones mdicas, la vigilancia y el tratamiento de la
exposicin ocupacional ..........................................................
Se utilizan guantes cuando se maneja material infeccioso o
equipo contaminado ...............................................................
Se usa proteccin facial cuando se trabaja con material
infeccioso fuera de la CSB .....................................................
Se lavan las manos despus de retirar los guantes o de trabajar
con agentes infecciosos y antes de salir del laboratorio .......
Agente antimicrobiano disponible para primeros auxilios
inmediatos ..............................................................................
Prcticas
Se utiliza la CSB cuando hay la posibilidad de que se generen
aerosoles infecciosos o salpicaduras .....................................
Se ha preparado y adoptado un manual de bioseguridad ...........
El personal lee, revisa y sigue las instrucciones sobre prcticas
y procedimientos (obligatorio una vez al ao para todo
el personal) ............................................................................
Se aplican procedimientos para reducir al mnimo los aerosoles
y salpicaduras ........................................................................
Se utilizan jeringuillas con vaina fija protectora de la aguja o
jeringuillas con aguja fija de un solo uso ...............................
Los cestillos y rotores de centrifugadora se abren solamente
dentro de la CSB ....................................................................
Las muestras infecciosas se transportan fuera de la CSB en
recipientes aprobados, siguiendo las normas de transporte
aprobadas ...............................................................................
Instalaciones
Lavabo para las manos disponible cerca de la salida del
laboratorio ..............................................................................
Firma del encargado de la encuesta de seguridad . . . . . . . . . . . . . . Fecha de la encuesta . . . .
N/A = no aplicable. CSB = cmara de seguridad biolgica.
45
Cuadro 7. Laboratorio de contencin nivel de bioseguridad 3: encuesta sobre la

seguridad en el laboratorio.
Este formulario debe emplearse junto con los dos anteriores (niveles de
bioseguridad 1 y 2)
LUGAR . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . FECHA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Instalaciones
El laboratorio est separado de la circulacin general del
edificio ....................................................................................
El acceso al laboratorio se hace por una antesala con puertas
de cierre automtico ...............................................................
Todas las aberturas del laboratorio estn selladas o pueden
cerrarse hermticamente para la descontaminacin ..............
El aire del laboratorio se evacua en un solo sentido y a distancia
de las zonas ocupadas ...........................................................
Se dispone de un sistema de ventilacin controlado para vigilar
la direccin de la corriente de aire .........................................
Proteccin personal
En el laboratorio se usan batas sin aberturas delanteras ............
La ropa de proteccin slo se usa en las zonas de laboratorio ...
Los grifos del lavabo se accionan con el pie, el codo o son
automticos ............................................................................
Proteccin de las manos
Se usan guantes dobles para manejar material infeccioso y
equipo o superficies de trabajo potencialmente
contaminados .........................................................................
Proteccin respiratoria
Todo el personal lleva proteccin respiratoria en el laboratorio
mientras los aerosoles no estn contenidos de forma segura
en la CSB ................................................................................
Prcticas
Se protegen las mucosas cuando se trabaja con material
infeccioso fuera de una CSB ..................................................
Se informa al personal sobre los riesgos especiales asociados
a los agentes con los que se trabaja ......................................
El personal est obligado a leer y aplicar todas las instrucciones
sobre prcticas y procedimientos ..........................................
El personal recibe actualizaciones anuales o formacin
complementaria para los cambios de procedimiento .............
Todos los residuos contaminados se tratan en la autoclave
antes de eliminarlos ...............................................................
Firma del encargado de la encuesta de seguridad . . . . . . . . . . . Fecha de la encuesta . . . . .
N/A = no aplicable. CSB = cmara de seguridad biolgica.
46
PARTE II
Bioproteccin en
el laboratorio
9. Conceptos de bioproteccin
en el laboratorio
En ediciones anteriores, el Manual de bioseguridad en el laboratorio se ha centrado en

las orientaciones tradicionales en materia de seguridad biolgica para los laborato-
rios. En ellas se haca hincapi en el uso de prcticas microbiolgicas correctas, el
equipo de contencin apropiado, el diseo, la operacin y el mantenimiento de las
instalaciones, y los aspectos administrativos para reducir al mnimo el riesgo de
lesiones o enfermedades entre el personal. Con la aplicacin de esas recomendaciones,
el riesgo para el medio ambiente y para la comunidad circundante tambin se reduce
al mnimo. Sin embargo, los acontecimientos mundiales recientes han puesto de
relieve la necesidad de proteger los laboratorios y los materiales que contienen de
acciones que puedan perjudicar a las personas, el ganado, la agricultura o el medio
ambiente. Antes de definir las necesidades de un laboratorio o un programa en materia
de bioproteccin, es preciso definir claramente la distincin entre seguridad biol-
gica y proteccin biolgica.
Seguridad biolgica (o bioseguridad) es el trmino utilizado para referirse a
los principios, tcnicas y prcticas aplicadas con el fin de evitar la exposicin no inten-
cional a patgenos y toxinas, o su liberacin accidental. En cambio, la proteccin
biolgica (o bioproteccin) se refiere a las medidas de proteccin de la institucin
y del personal destinadas a reducir el riesgo de prdida, robo, uso incorrecto, desvia-
ciones o liberacin intencional de patgenos o toxinas.
Un programa de bioproteccin debe apoyarse en un programa slido de seguridad
biolgica. Mediante las evaluaciones del riesgo realizadas como parte integral
del programa de bioseguridad de la institucin, se acopia informacin sobre el tipo
de organismos utilizados, su localizacin, el personal que necesita tener acceso a ellos
y las personas responsables de ellos. Esa informacin puede utilizarse para determi-
nar si la institucin posee materiales biolgicos de inters para quienes puedan
querer usarlos incorrectamente. Deben elaborarse normas nacionales que reconoz-
can y definan la responsabilidad que tienen los pases y las instituciones de pro-
teger las muestras, patgenos y toxinas para que no sean utilizados de forma
incorrecta.
Debe prepararse y aplicarse un programa de bioproteccin especfico para cada
centro, teniendo en cuenta los requisitos del centro, el tipo de trabajo de laboratorio
que se realiza y las condiciones locales. En consecuencia, las actividades de biopro-
teccin en el laboratorio deben ser representativas de las diferentes necesidades de la
49
institucin y tener en cuenta la informacin proporcionada por los directores cient-

ficos, los investigadores principales, los funcionarios de bioseguridad, el personal cien-
tfico del laboratorio, el personal de mantenimiento, los administradores, el personal
de tecnologa de la informacin y, cuando proceda, de los organismos responsables
del cumplimiento de la ley y del personal de seguridad.
Las medidas de proteccin biolgica del laboratorio deben basarse en un programa
integral de rendicin de cuentas sobre los patgenos y las toxinas que incluya un
inventario actualizado donde figure el lugar de almacenamiento, la identificacin del
personal que dispone de acceso, la descripcin del uso, la documentacin de las trans-
ferencias internas o externas, dentro de un mismo centro y entre diferentes centros, y
cualquier inactivacin y/o eliminacin de los materiales. Del mismo modo, debe
instaurarse un protocolo institucional de bioproteccin en el laboratorio, destinado a
identificar, notificar, investigar y corregir los incumplimientos de las normas de bio-
proteccin del laboratorio, incluidas las discrepancias en los resultados de los inven-
tarios. La participacin y los papeles y responsabilidades de las autoridades de salud
pblica y de seguridad en caso de infraccin de las normas de proteccin deben estar
claramente definidas.
Se proporcionar capacitacin especfica en materia de bioproteccin, adems de
la relativa a la seguridad biolgica, a todo el personal. Esa capacitacin ayudar al per-
sonal a comprender la necesidad de proteger esos materiales y los fundamentos de las
medidas concretas de bioproteccin, y deber incluir un examen de las normas
nacionales y de los procedimientos especficos de la institucin que sean pertinentes.
Durante la capacitacin tambin se deben presentar procedimientos que describan los
papeles y las responsabilidades del personal en lo relativo a la proteccin, en caso de
infraccin de las normas.
La idoneidad profesional y tica para trabajar con patgenos peligrosos por parte
de todo el personal que disponga de autorizacin de acceso regular a materiales sen-
sibles es otro componente fundamental de las actividades eficaces de bioproteccin
en el laboratorio.
En resumen, las precauciones relacionadas con la proteccin deben formar parte
de la rutina de trabajo en el laboratorio, exactamente igual que las tcnicas aspticas
y otras prcticas microbiolgicas seguras. Las medidas de bioproteccin no deben difi-
cultar el intercambio eficiente de materiales de referencia, de muestras clnicas y epi-
demiolgicas ni de la informacin conexa necesaria para las investigaciones clnicas
o de salud pblica. Una gestin competente de la proteccin no tiene por qu inter-
ferir indebidamente con las actividades cotidianas del personal cientfico ni ser un
impedimento para la actividad investigadora. Se debe proteger el acceso legtimo a
materiales clnicos y de investigacin importantes. La evaluacin de la idoneidad del
personal, la formacin especfica en temas de proteccin y el cumplimiento riguroso
de los procedimientos de proteccin de los patgenos constituyen formas razonables
de incrementar la bioproteccin en el laboratorio. Todas estas medidas deben ser
establecidas y mantenidas mediante evaluaciones peridicas de los riesgos y las ame-
50
9. CONCEPTOS DE BIOPROTECCIN EN EL LABORATORIO
nazas y mediante una revisin y actualizacin peridica de los procedimientos. Las

comprobaciones del cumplimiento de estos procedimientos, con instrucciones claras
sobre los papeles, las responsabilidades y las medidas correctoras, deben formar parte
integral de los programas de bioproteccin del laboratorio y de las normas nacionales
sobre la bioproteccin en el laboratorio.
51
PARTE III
Equipo de laboratorio
10. Cmaras de seguridad
biolgica
Las CSB estn diseadas para proteger al trabajador, la atmsfera del laboratorio y los
materiales de trabajo de la exposicin a las salpicaduras y los aerosoles infecciosos que
pueden generarse al manipular material que contiene agentes infecciosos, como
cultivos primarios, soluciones madre y muestras de diagnstico. Los aerosoles se
producen en cualquier actividad que transmita energa a un material lquido o
semilquido, por ejemplo, al agitarlo, verterlo a otro recipiente, removerlo o verterlo
sobre una superficie o sobre otro lquido. Las actividades como la siembra de placas
de agar, la inoculacin de frascos de cultivo celular con pipeta, el uso de pipetas
mltiples para dispensar suspensiones lquidas de agentes infecciosos en placas
de microcultivo, la homogeneizacin y la agitacin vorticial de material infeccioso, y
la centrifugacin de lquidos infecciosos o el trabajo con animales pueden generar
aerosoles infecciosos. Las partculas de aerosol de menos de 5 mm de dimetro y las
pequeas gotculas de 5 a 100 mm de dimetro no son visibles a simple vista. El tra-
bajador no suele darse cuenta de que se estn produciendo esas partculas, que pueden
ser inhaladas o provocar la contaminacin cruzada de los materiales que se encuen-
tran sobre las superficies de trabajo. Las CSB, cuando se utilizan debidamente, han
demostrado ser sumamente eficaces para reducir las infecciones adquiridas en el
laboratorio y la contaminacin cruzada de cultivos por exposicin a aerosoles. Las
CSB tambin protegen la atmsfera del laboratorio.
A lo largo de los aos, el diseo bsico de las CSB ha sufrido varias modificaciones.
Un cambio importante fue la adicin de un filtro HEPA. Los filtros HEPA retienen el
99,97% de las partculas de 0,3 mm de dimetro y el 99,99% de las partculas de tamao
mayor o menor; esto les permite retener eficazmente todos los agentes infecciosos
conocidos y garantizar que de la cmara slo sale aire exento de microorganismos.
Una segunda modificacin del diseo consisti en dirigir hacia la superficie de trabajo
aire que haya pasado por filtros HEPA, con el fin de proteger de la contaminacin los
materiales de esa superficie. Esta caracterstica a menudo se conoce como proteccin
del producto. Estos conceptos de diseo bsicos han llevado a la evolucin de tres
clases de CSB. En el cuadro 8 se explica el tipo de proteccin que ofrece cada una de
ellas.
Nota. Las cabinas de flujo de aire horizontal y vertical (bancos de trabajo de aire
limpio) no son CSB y no deben emplearse como tal.
55
Cuadro 8. Seleccin de una cmara de seguridad biolgica (CSB) segn el tipo de

proteccin necesaria
TIPO DE PROTECCIN SELECCIN DE LA CSB
Proteccin personal, microorganismos Clase I, clase II, clase III

de los grupos de riesgo 1 a 3
Proteccin personal, microorganismos del Clase III
grupo de riesgo 4, laboratorio para
trabajar con cmara de guantes
Proteccin personal, microorganismos Clase I, clase II
del grupo de riesgo 4, laboratorio para
trabajar con trajes especiales
Proteccin del producto Clase II, clase III slo si incluye flujo laminar
Proteccin contra cantidades mnimas Clase IIB1, clase IIA2 ventilada hacia el
de sustancias qumicas/ exterior
radionclidos voltiles
Proteccin contra sustancias qumicas/ Clase I, clase IIB2, clase III
radionclidos voltiles
Cmaras de seguridad biolgica de clase I

En la figura 6 aparece un esquema de una CSB de clase I. El aire de la sala entra por
la abertura delantera a una velocidad mnima de 0,38 m/s, pasa por encima de la
superficie de trabajo y sale de la cmara por el conducto de extraccin. La corriente
de aire arrastra las partculas de aerosol que puedan generarse en la superficie de
trabajo, alejndolas del trabajador y dirigindolas hacia el conducto de extraccin. La
abertura frontal permite que los brazos del trabajador lleguen a la superficie de trabajo
del interior de la cmara mientras observa la superficie a travs de una ventana de
cristal. Esta ventana tambin puede levantarse por completo para tener acceso a la
superficie de trabajo para limpiarla o con otros fines.
El aire procedente de la cmara se evacua a travs de un filtro HEPA: a) al labora-
torio y a continuacin al exterior del edificio a travs del sistema de evacuacin de
aire del edificio; b) al exterior a travs del sistema de evacuacin de aire del edificio,
o c) directamente al exterior. El filtro HEPA puede estar situado en la cmara de dis-
tribucin del extractor de la CSB o en la salida de aire del edificio. Algunas CSB de
clase I llevan integrado un ventilador de extraccin, mientras que otras funcionan con
el ventilador de evacuacin de aire del sistema general del edificio.
La CSB de clase I fue la primera CSB reconocida, y debido a la sencillez de su diseo
sigue teniendo un uso muy extendido en todo el mundo. Su ventaja es que propor-
ciona proteccin tanto personal como ambiental y tambin puede utilizarse para tra-
bajar con radionclidos y sustancias qumicas txicas voltiles. Como se hace pasar
56
10. CMARAS DE SEGURIDAD BIOLGICA
Figura 6. Esquema de una cmara de seguridad biolgica de clase I.

A: abertura frontal; B: ventana de cristal; C: filtro HEPA de salida; D: cmara de dis-
tribucin del extractor
aire de la sala, sin esterilizar, sobre la superficie de trabajo, se considera que no ofrece
una proteccin fiable del producto.
Cmaras de seguridad biolgica de clase II

A medida que fue aumentando el uso de cultivos celulares y tisulares para la propa-
gacin de virus y otros fines, dej de considerarse satisfactorio que el aire no este-
rilizado de la sala pasara por encima de la superficie de trabajo. Adems de propor-
cionar proteccin personal, las CSB de clase II protegen del aire contaminado del local
a los materiales de la superficie de trabajo. Las CSB de clase II, de las que hay cuatro
tipos (A1, A2, B1 y B2), difieren de las CSB de clase I en que slo permiten que entre
en contacto con la superficie de trabajo aire que ha pasado por un filtro HEPA (aire
estril). Las CSB de clase II pueden utilizarse para trabajar con agentes infecciosos de
los grupos de riesgo 2 y 3, y tambin con agentes infecciosos del grupo de riesgo 4,
siempre que se utilicen trajes presurizados.
Cmaras de seguridad biolgica de clase II tipo A1

Estas cmaras se representan en la figura 7. Un ventilador interno succiona aire de la
sala (aire de entrada) hacia la cmara a travs de la abertura frontal y lo dirige hacia
la rejilla frontal de entrada. La velocidad de esta corriente de aire debe ser de al menos
0,38 m/s a la altura de la abertura frontal. Ese aire pasa a continuacin por un filtro
HEPA antes de dirigirse, descendiendo verticalmente, hacia la superficie de trabajo.
57
C
D
vista frontal vista lateral

aire de la sala
aire potencialmente contaminado
aire filtrado por HEPA
Figura 7. Esquema de una cmara de seguridad biolgica de clase II tipo A1.
A: abertura frontal; B: ventana; C: filtro HEPA de salida; D: cmara de distribucin
trasera; E: filtro HEPA de suministro; F: ventilador
A medida que el aire desciende, se divide a unos 618 cm de la superficie de trabajo,

de modo que la mitad pasa a travs de la rejilla de extraccin delantera y la otra mitad
por la rejilla de extraccin trasera. Toda partcula de aerosol que se genere en la super-
ficie de trabajo es inmediatamente capturada por esta corriente de aire descendente y
pasa a travs de la rejilla de evacuacin delantera o trasera, con lo que se consigue el
mximo nivel de proteccin del producto. A continuacin el aire se evacua a travs
de la cmara de distribucin posterior hacia el espacio comprendido entre los filtros
de suministro y de evacuacin situados en la parte superior de la cmara. Debido al
tamao relativo de estos filtros, alrededor del 70% del aire vuelve a circular a travs
del filtro HEPA de suministro y regresa a la zona de trabajo; el 30% restante pasa a
travs del filtro de evacuacin hacia la sala o el exterior.
El aire de salida de este tipo de cmara puede reciclarse en la sala o evacuarse al
exterior del edificio a travs de un acoplador de tipo dedal conectado a un conducto
destinado exclusivamente a este fin o a travs del sistema de evacuacin de aire del
edificio.
El reciclaje del aire de salida hacia la sala tiene la ventaja de reducir los gastos de
combustible del edificio, ya que no se evacua aire caliente o fro a la atmsfera exte-
rior. La conexin a los conductos del sistema de evacuacin de aire tambin permite
58
Figura 8. Esquema de una cmara de seguridad biolgica de clase IIB1.

A: abertura frontal; B: ventana; C: filtro HEPA de salida; D: filtro HEPA de entrada; E:
cmara de distribucin de salida con presin negativa; F: ventilador; G: filtro HEPA
para el aire de entrada. La salida de aire de la cmara debe estar conectada al sistema
de evacuacin de aire del edificio.
utilizar algunas CSB para trabajar con radionclidos voltiles y sustancias qumicas
txicas voltiles (cuadro 8).
Cmaras de clase II de tipo A2 con salida al exterior, y de tipo B1 y B2

Las CSB de clase IIA2 con salida al exterior, IIB1 (Figura 8) y IIB2 son variaciones del
tipo IIA1. Sus caractersticas, junto con las de las CSB de las clases I y III, se indican
en el cuadro 9. Cada una de esas variaciones permite utilizar la CSB para fines espec-
ficos (vase el cuadro 8). Estas CSB se distinguen entre s en varios aspectos: la veloci-
dad de entrada del aire por la abertura frontal; la cantidad de aire que se vuelve a hacer
pasar por la superficie de trabajo y que sale de la cmara; el sistema de extraccin de
aire, que determina si el aire se evacua hacia la sala o al exterior por su propio sistema
de evacuacin o por el sistema de evacuacin de aire del edificio; y las presiones en el
interior de la cmara (en unas los conductos y las cmaras de distribucin cargados
de aire biolgicamente contaminado estn bajo presin negativa, o estn rodeados por
conductos y cmaras de distribucin bajo presin negativa).
59
Cuadro 9. Diferencias entre las cmaras de seguridad biolgica de las clases I, II y III
CSB VELOCIDAD EN LA FLUJO DE AIRE (%) SISTEMA DE
ABERTURA FRONTAL (m/s) EVACUACIN
RECIRCULADO EVACUADO
a
Clase I 0,36 0 100 Conducto rgido
Clase IIA1 0,380,51 70 30 Extraccin a la sala
o a un acoplador
de tipo dedal
Clase IIA2 con 0,51 70 30 Extraccin a la sala
salida al exteriora o a un acoplador
de tipo dedal
Clase IIB1a 0,51 30 70 Conducto rgido
a
Clase IIB2 0,51 0 100 Conducto rgido
a
Clase III NA 0 100 Conducto rgido
NA: No aplicable.
a
Todos los conductos biolgicamente contaminados se encuentran bajo presin negativa o estn rodeados
por conductos y cmaras de distribucin con presin negativa.
En las referencias 7 y 8 y en los prospectos informativos que proporcionan los fab-

ricantes pueden encontrarse las descripciones completas de las distintas cmaras de
clase IIA y IIB.
Cmaras de seguridad biolgica de clase III

Este tipo de cmaras (figura 9) es el que proporciona mayor nivel de proteccin per-
sonal y se utiliza para trabajar con agentes del grupo de Riesgo 4. Todos los orificios
estn sellados para impedir el paso de gases. El aire de entrada es filtrado por HEPA
y el aire de salida pasa por dos filtros HEPA. La corriente de aire se mantiene
mediante un sistema de extraccin propio en el exterior de la cmara, que mantiene
el interior de sta a una presin negativa (alrededor de 124,5 Pa). El acceso a la
superficie de trabajo se hace mediante guantes de goma gruesa, conectados a unos
orificios en la cmara. La cmara debe tener una caja de paso que pueda esterilizarse
y vaya equipada con una salida de aire provista de un filtro HEPA. Puede ir conectada
a una autoclave de doble puerta en la que se descontaminar todo el material que
entre o salga de la cmara. Pueden unirse varias cmaras de guantes para ampliar la
superficie de trabajo. Las CSB de clase III son idneas para los laboratorios de los
niveles de bioseguridad 3 y 4.
Conexiones de aire de las cmaras de seguridad biolgica

Las CSB de las clases IIA1 y IIA2 con salida al exterior estn pensadas para tener cone-
xiones mediante acopladores de tipo dedal o de tipo campana en dosel. El dedal
60
Figura 9. Esquema de una cmara de seguridad biolgica de clase III (cmara de guantes).
A: orificios para guantes del largo de un brazo; B: ventana; C: dobles filtros HEPA de
salida; D: filtro HEPA de entrada; E: autoclave de doble puerta o caja de paso; F: tanque
de inmersin qumica. La salida del aire de la cmara debe estar conectada a un
sistema independiente de extraccin de aire del edificio.
se ajusta a la salida de aire de la cmara dejando un espacio libre de unos 2,5 cm de

dimetro. Este pequeo espacio permite succionar aire de la sala tambin hacia el
sistema de evacuacin de aire del edificio. La capacidad del sistema de evacuacin del
edificio debe ser suficiente para captar aire procedente tanto de la sala como de la
cmara. El dedal debe ser extrable o estar diseado para permitir las pruebas de
funcionamiento de la cmara. En general, el rendimiento de una cmara conectada
mediante un dedal no se ve muy afectado por las fluctuaciones en la corriente de
aire del edificio.
Las CSB de las clases IIB1 y IIB2 estn conectadas por conductos rgidos, es decir
slidamente conectadas sin abertura de ninguna clase, al sistema de evacuacin del
edificio o, preferiblemente, a un sistema de conductos de extraccin propios. El
sistema de evacuacin del edificio debe adaptarse con precisin a los requisitos de
flujo de aire especificados por el fabricante tanto en relacin con el volumen como
con la presin esttica. La certificacin de las CSB conectadas por conductos rgidos
lleva mucho ms tiempo que la de las CSB que reciclan el aire hacia la sala o de las
que llevan acopladores de tipo dedal.
61
Eleccin de una cmara de seguridad biolgica

La eleccin de una CSB depende primordialmente del tipo de proteccin que se nece-
site: proteccin del producto, proteccin del personal frente a microorganismos de los
grupos de riesgo 1 a 4, proteccin del personal frente a la exposicin a radionclidos
y sustancias qumicas txicas voltiles, o una combinacin de todas ellas. En el cuadro
8 se muestra qu CSB se recomienda para cada tipo de proteccin.
No deben utilizarse sustancias qumicas txicas o voltiles en las CSB que reciclan
el aire de salida hacia la sala, es decir las de clase I no conectadas al sistema de eva-
cuacin de aire del edificio, o las de clase II A1 y A2. Las de clase IIB1 son aceptables
para trabajar con cantidades muy reducidas de sustancias qumicas voltiles y
radionclidos. Cuando est previsto utilizar cantidades importantes de radionclidos
y sustancias qumicas voltiles es necesario utilizar una CSB de clase IIB2, tambin
denominada cmara de extraccin total de aire.
Uso de las cmaras de seguridad biolgica en el laboratorio

Localizacin
La velocidad del aire que ingresa en la CSB por la abertura frontal es de unos 0,45
m/s. A esta velocidad, la integridad del flujo direccional del aire de entrada es frgil
y puede verse fcilmente perturbada por las corrientes de aire que generan el
movimiento de personas en las proximidades de la cmara, las ventanas abiertas, los
registros del suministro de aire y la apertura y cierre de puertas. Lo ms conveniente
es situar la CSB en un lugar alejado de la circulacin del personal y de corrientes de
aire que puedan provocar perturbaciones. Siempre que sea posible debe dejarse un
espacio de 30 cm por detrs y a ambos lados de la cmara con el fin de poder acceder
fcilmente a todas las partes de la cmara para las labores de mantenimiento. Por
encima de la CSB conviene dejar un espacio de 30 a 35 cm que permita medir debida-
mente la velocidad del aire a travs del filtro de salida y cambiar este filtro.
Trabajadores
Si las CSB no se usan correctamente, sus efectos protectores pueden verse gravemente
disminuidos. Los trabajadores deben tener cuidado de mantener la integridad del flujo
de entrada de aire por la abertura frontal al meter y sacar los brazos de la cmara. Los
brazos deben moverse con lentitud, perpendicularmente a la abertura frontal. Es
conveniente esperar aproximadamente un minuto despus de meter las manos y los
brazos en la cmara antes de comenzar a manipular el material, con el fin de permi-
tir que la cmara se ajuste y el aire barra las manos y los brazos. El nmero de
movimientos a travs de la abertura frontal tambin debe reducirse al mnimo colo-
cando todo el material necesario en el interior antes de comenzar las manipulaciones.
Colocacin del material

La rejilla frontal de entrada de las CSB de clase II no debe estar bloqueada con papeles,
instrumental ni otros objetos. La superficie de los materiales que haya que colocar en
el interior de la cmara debe descontaminarse con alcohol al 70%. El trabajo puede
62
realizarse sobre paos absorbentes empapados de desinfectante con el fin de que stos
recojan las salpicaduras y los derrames. Todos los materiales deben colocarse lo ms
dentro posible de la cmara, hacia el borde posterior de la superficie de trabajo, pero
sin bloquear la rejilla posterior. El equipo que pueda generar aerosoles (por ejemplo
mezcladoras, centrifugadoras) debe colocarse hacia la parte posterior de la cmara.
Los artculos voluminosos, como las bolsas especficas para material biolgico peli-
groso, las bandejas de pipetas desechadas y los frascos de succin deben colocarse a
un lado del interior de la cmara. El trabajo debe proceder desde las zonas limpias
hacia las contaminadas a lo largo de la superficie de trabajo.
Las bolsas de recogida de material biolgico peligroso para la autoclave y la bandeja
de recogida de pipetas no deben colocarse fuera de la cmara. Los frecuentes
movimientos de entrada y salida necesarios para utilizar estos recipientes perturban
la barrera de aire de la cmara y puede poner en peligro la proteccin tanto del per-
sonal como del producto.
Operacin y mantenimiento
La mayora de las CSB estn diseadas para funcionar 24 horas al da; los investi-
gadores han llegado a la conclusin de que el funcionamiento continuo ayuda a con-
trolar los niveles de polvo y de partculas en el laboratorio. Las CSB de clase IIA1 y
IIA2 que evacuan el aire a la sala o que estn conectadas por acopladores de tipo
dedal a conductos de extraccin propios pueden apagarse cuando no estn en uso.
Otros tipos, como las de la clase IIB1 y IIB2, que tienen instalaciones a base de con-
ductos rgidos, deben mantener una corriente de aire en su interior en todo momento
para contribuir a mantener el equilibrio del aire de la sala. Las cmaras deben encen-
derse al menos 5 minutos antes de comenzar el trabajo y despus de terminarlo para
permitir que se purguen, es decir, dejar tiempo para que el aire contaminado sea
eliminado del entorno de la cmara.
Todas las reparaciones que se hagan en una CSB debe realizarlas un tcnico califi-
cado. Cualquier fallo en el funcionamiento de la CSB debe comunicarse y repararse
antes de utilizarla de nuevo.
Luz ultravioleta
Las CSB no necesitan lmparas de luz ultravioleta. Si se utilizan, las lmparas deben
limpiarse una vez a la semana para quitar el polvo y la suciedad que puedan bloquear
la eficacia germicida de la luz. La intensidad de la luz ultravioleta debe comprobarse
cada vez que se vuelve a certificar la cmara para asegurarse de que la emisin de luz
es apropiada. Las luces ultravioletas deben apagarse cuando la sala est ocupada, para
proteger los ojos y la piel de exposiciones involuntarias.
Llamas desnudas
Deben evitarse las llamas desnudas en el entorno prcticamente libre de microorga-
nismos creado dentro de la cmara. Esas llamas alteran las corrientes de aire y pueden
ser peligrosas cuando se utilizan al mismo tiempo sustancias voltiles e inflamables.
63
Para esterilizar las asas microbiolgicas, es preferible utilizar microincineradores u

hornos elctricos.
Derrames
Se colocar en lugar visible una copia del protocolo del laboratorio para tratar los
derrames, que debern leer y comprender todos los usuarios. Cuando se produzca un
derrame de material de riesgo biolgico dentro de una CSB, debe procederse de
inmediato a su limpieza, mientras la cmara sigue en funcionamiento. Debe utilizarse
un desinfectante eficaz y aplicarse de modo que se reduzca al mnimo la formacin
de aerosoles. Todos los materiales que entren en contacto con el agente derramado
deben desinfectarse o tratarse en autoclave.
Certificacin
El funcionamiento y la integridad de cada CSB deben ser certificados en relacin con
las normas de funcionamiento nacionales o internacionales en el momento de la insta-
lacin, y despus de forma peridica, por tcnicos cualificados y de acuerdo con las
instrucciones del fabricante. La evaluacin de la eficacia de contencin de la cmara
debe incluir pruebas de la integridad de la cmara, fugas de los filtros HEPA, perfil de
velocidad del flujo de aire descendente, velocidad en la abertura frontal, tasa de presin
negativa/ventilacin, caractersticas del flujo de aire, y alarmas e interruptores de
interbloqueo. Tambin pueden realizarse pruebas facultativas en relacin con la insta-
lacin elctrica y la intensidad de la iluminacin, la luz ultravioleta, los ruidos y las
vibraciones. Para llevar a cabo estas pruebas se requieren capacitacin, conocimien-
tos y equipos especiales; es sumamente recomendable que las haga un profesional
cualificado.
Limpieza y desinfeccin
Todos los artculos que entren en una CSB, incluido el material de laboratorio, deben
tener su superficie descontaminada y sacarse de la cmara una vez terminado el
trabajo, ya que los medios de cultivo residuales pueden permitir la proliferacin de
microbios.
Las superficies internas de las CSB deben descontaminarse antes y despus de cada
uso. Las superficies de trabajo y las paredes internas deben limpiarse con un pao
empapado en un desinfectante que elimine los microorganismos que pudiera haber.
Al final del da de trabajo, la descontaminacin final de las superficies debe incluir la
limpieza de la superficie de trabajo, los laterales, la cara posterior y el interior de la
ventana de cristal. Para los organismos sensibles se utilizar una solucin de leja o
alcohol al 70%. Despus habr que pasar de nuevo un pao con agua estril cada vez
que se utilice un desinfectante corrosivo, como la leja.
Se recomienda dejar la cmara en funcionamiento. En caso contrario, antes de
apagarla habr que dejarla funcionando durante 5 minutos para purgar la atmsfera
interior.
64
Descontaminacin
Las CSB deben descontaminarse antes de los cambios de filtro y antes de cambiarlas
de sitio. El mtodo de descontaminacin ms comn es la fumigacin con formal-
dehdo gaseoso. La descontaminacin de las CSB debe ser realizada por un profesional
cualificado.
Equipo de proteccin personal

Siempre que use una CSB, el trabajador deber llevar prendas de proteccin personal.
Las batas de laboratorio son aceptables para trabajar en los niveles de bioseguridad 1
y 2. En los niveles de bioseguridad 3 y 4 (salvo en los laboratorios diseados para
trabajar con trajes especiales) deben usarse batas de frente cerrado, abrochadas por
detrs, que protegen mejor. Los guantes deben estirarse bien por encima de las mangas
de la bata, en lugar de meterlos por debajo. Pueden usarse mangas con elstico para
proteger las muecas del investigador. Para algunos procedimientos pueden hacer falta
mascarillas y gafas de seguridad.
Alarmas
Las CSB pueden ir equipadas con uno de los dos tipos siguientes de alarma. Las
alarmas de abertura, que slo se encuentran en las cmaras que llevan ventanas de
cristal correderas; indican que el trabajador ha colocado el cristal en posicin in-
correcta, y se detienen cuando el cristal est debidamente colocado. Las alarmas de
flujo de aire sealan perturbaciones de las caractersticas normales del flujo de aire en
la cmara que representan un peligro inmediato para el trabajador o el producto.
Cuando suene esta alarma, se interrumpir inmediatamente el trabajo y se avisar al
supervisor del laboratorio. Los manuales de instrucciones del fabricante deben dar
ms detalles. La capacitacin para el uso de CSB debe incluir este aspecto.
Informacin complementaria
La eleccin del tipo correcto de CSB, su instalacin y uso correctos y la certificacin
anual de su funcionamiento son procesos complejos. Se recomienda que todos ellos
se hagan bajo la supervisin de un profesional de la seguridad biolgica bien
adiestrado y con experiencia. Este profesional debe estar bien familiarizado con las
publicaciones pertinentes enumeradas en la seccin de Referencias y debe haber
recibido capacitacin en todos los aspectos de las CSB. Los trabajadores deben recibir
capacitacin formal sobre el funcionamiento y el manejo de las CSB.
Si se desea ms informacin, consltense las referencias 5 y 7 a 16, y el captulo 11.
65
11. Equipo de seguridad
Habida cuenta de que los aerosoles son importantes fuentes de infeccin, debe tenerse
cuidado de reducir su formacin y dispersin. Muchas operaciones de laboratorio
generan aerosoles peligrosos, como mezclar, triturar, agitar, remover, someter a ultra-
sonidos o centrifugar material infeccioso. Aunque se utilice equipo seguro, es preferi-
ble efectuar esas operaciones en una CSB siempre que sea posible. Las CSB, su uso y
las pruebas a que deben someterse, se examinan en el captulo 10. El uso de equipo
de seguridad no garantiza la proteccin, a menos que el trabajador est adiestrado en
su uso y aplique las tcnicas apropiadas. El equipo debe probarse con regularidad para
asegurarse de que sigue siendo seguro.
En el cuadro 10 aparece una lista de comprobacin del equipo de seguridad
diseado para eliminar o reducir ciertos peligros y se exponen brevemente las carac-
tersticas que determinan la seguridad. En las pginas que siguen se ofrecen ms
detalles sobre gran parte de ese material. En el captulo 12 puede encontrarse ms
informacin acerca del uso apropiado de ese equipo.
En el anexo 4 se ofrece informacin sobre el equipo y las operaciones que pueden
entraar un peligro.
Cmaras aislantes de material flexible y presin negativa

Las cmaras aislantes de material flexible y presin negativa son dispositivos auto-
portantes de contencin primaria que ofrecen mxima proteccin frente a materiales
biolgicos peligrosos. Pueden colocarse sobre un soporte mvil. El banco de trabajo
est totalmente encerrado en una envoltura de cloruro de polivinilo (PVC) trans-
parente, suspendida de un marco de acero. La cmara aislante se mantiene a una
presin interna inferior a la atmosfrica. El aire de entrada pasa a travs de un filtro
HEPA y el de salida a travs de dos filtros HEPA, lo que hace innecesario conducir el
aire evacuado hacia el exterior del edificio. El aislador puede equiparse con una
incubadora, un microscopio y otro material de laboratorio, como centrifugadoras,
jaulas de animales o bloques trmicos, entre otros. El material se introduce y se extrae
de la cmara aislante a travs de aberturas especiales, de modo que no se pone en
peligro la seguridad microbiolgica. Las manipulaciones se realizan utilizando mangas
largas con guantes desechables incorporados. La caja lleva un manmetro para vigilar
la presin de la envoltura.
66
11. EQUIPO DE SEGURIDAD
Cuadro 10. Equipo de bioseguridad

EQUIPO PELIGRO EVITADO CARACTERSTICAS DE SEGURIDAD
Cmaras de seguridad
biolgica
Clase I Aerosoles y salpicaduras Flujo mnimo de aire hacia el
interior (velocidad frontal) en la
abertura de trabajo. Filtracin
adecuada del aire expulsado
No protege el producto
Clase II Aerosoles y salpicaduras Flujo mnimo de aire hacia el
interior (velocidad frontal) en la
abertura de trabajo. Filtracin
adecuada del aire expulsado
Protege el producto
Clase III Aerosoles y salpicaduras Contencin mxima
Protege el producto si se incluye
flujo de aire laminar
Cmaras aislantes de Aerosoles y salpicaduras Contencin mxima

material flexible y
presin negativa
Pantalla contra Salpicadura de sustancias Establece una separacin entre

salpicaduras qumicas el trabajador y el trabajo
Dispositivos de pipeteo Riesgos propios del pipeteo Facilidad de empleo

por succin bucal, como la Evita la contaminacin del
ingestin de patgenos, la extremo bucal de la pipeta,
inhalacin de aerosoles con lo que protege el dispositivo,
producidos por la succin el usuario y el circuito de vaco
bucal, expulsin de lquido Posibilidad de esterilizacin
o goteo de la pipeta, Se evita el goteo del extremo
contaminacin del extremo inferior de la pipeta
bucal de la pipeta
Microincineradores Salpicaduras procedentes Proteccin mediante un tubo de

de asas, asas de las asas vidrio o cermica, abierto por un
desechables extremo y calentado por gas
o electricidad
Desechables, no necesitan
calentamiento
Recipientes hermticos Aerosoles, derrames y Diseo hermtico, con tapa

para recoger y transportar fugas Duraderos
material infeccioso Posibilidad de tratarlos en la
destinado a la esterilizacin autoclave
dentro del laboratorio
67
Recipientes para la Heridas punzantes Posibilidad de tratamiento en

eliminacin de objetos autoclave
cortantes y punzantes Robustos, a prueba de
perforaciones
Recipientes de transporte Liberacin de organismos Robustos

entre laboratorios Recipientes primario y
e instituciones secundario estancos para evitar
fugas
Material absorbente para enjugar
los escapes
Autoclaves, manuales o Material infeccioso Diseo aprobado

automticas (transformado en inocuo Esterilizacin trmica eficaz
para su eliminacin o
reutilizacin)
Frascos con tapn de rosca Aerosoles y derrames Contencin eficaz
Proteccin del circuito Contaminacin del sistema Un filtro de tipo cartucho

de vaco de vaco del laboratorio por impide el paso de aerosoles
aerosoles o rebosamiento (tamao de las partculas:
de lquidos 0,45 m)
El matraz de rebosamiento
contiene un desinfectante
apropiado. Puede usarse
una pera de goma para
cortar automticamente
el vaco cuando se
llena el matraz colector
Todo el sistema puede
esterilizarse en la autoclave
Las cmaras aislantes de material flexible se utilizan para manipular organismos de

alto riesgo (grupos de riesgo 3 4) en el trabajo de campo cuando no es posible o
apropiado instalar o mantener CSB convencionales.
Dispositivos de pipeteo
Para los procedimientos de pipeteo debe utilizarse siempre un dispositivo especial. El
pipeteo con la boca debe estar estrictamente prohibido.
No puede insistirse bastante en la importancia de utilizar dispositivos de pipeteo.
Los riesgos ms comunes que entraa el uso de pipetas son resultado de la succin
bucal. La aspiracin por la boca y la ingestin de material peligroso han dado lugar a
numerosas infecciones en los laboratorios.
Tambin pueden transferirse agentes patgenos a la boca si se coloca un dedo con-
taminado en el extremo de la pipeta por el que se hace la succin. Un riesgo menos
68
conocido del pipeteo con la boca es la inhalacin de aerosoles provocados por la

succin. Los tapones de algodn no constituyen un filtro microbiano eficiente sea la
presin negativa o positiva, pues permiten el paso de las partculas durante la succin.
Cuando el tapn est muy apretado, se necesita una succin muy enrgica, con el con-
siguiente riesgo de aspirar a la vez el algodn, el aerosol e incluso el lquido. El uso de
dispositivos de pipeteo permite evitar la ingestin de patgenos.
Tambin pueden generarse aerosoles cuando el lquido de una pipeta gotea sobre
una superficie de trabajo; cuando se mezclan cultivos alternando succin y soplado,
y cuando se sopla por la pipeta para que salga la ltima gota. La inhalacin de los
aerosoles que inevitablemente se generan durante las operaciones de pipeteo puede
evitarse trabajando en una CSB.
Los dispositivos de pipeteo deben seleccionarse con cuidado. Es importante que ni
su diseo ni su modo de empleo aumenten el riesgo de infeccin, y que sean fciles
de esterilizar y limpiar. Deben utilizarse puntas de pipeta obturadas (resistentes a los
aerosoles) cuando se manipulen microorganismos y cultivos celulares.
Las pipetas que tengan los extremos de succin agrietados o astillados deben
desecharse, ya que daan las juntas hermticas por las que se insertan en los dispo-
sitivos de pipeteo y crean un peligro.
Homogeneizadores, agitadores, mezcladores y desintegradores ultrasnicos

Los homogeneizadores domsticos (de cocina) no son hermticos y liberan aerosoles.
Slo deben utilizarse aparatos diseados especialmente para el trabajo de laboratorio,
que estn construidos de forma que se reduce al mnimo o se impide esa
liberacin de aerosoles. Los homogeneizadores de tipo Stomacher, disponibles ahora
para trabajar con volmenes grandes y pequeos, tambin pueden producir
aerosoles.
Los homogeneizadores utilizados para los microorganismos del grupo de riesgo 3
siempre deben cargarse y abrirse en una CSB.
Los desintegradores ultrasnicos pueden liberar aerosoles. Deben manipularse en
CSB o cubrirse con pantallas protectoras durante su uso. Los dispositivos protectores
y la parte exterior de los desintegradores ultrasnicos deben descontaminarse despus
de su utilizacin.
Asas desechables
Las asas desechables ofrecen la ventaja de que no necesitan ser esterilizadas, por lo que
pueden utilizarse en CSB, en las que los mecheros de Bunsen y los microincineradores
perturbaran la corriente de aire. Estas asas deben colocarse en un desinfectante
despus del uso y desecharse como material contaminado (vase el captulo 3).
Microincineradores
Los microincineradores calentados con gas o electricidad llevan protecciones de cristal
de borosilicato o de cermica que reducen al mnimo las salpicaduras y la dispersin
de material infectado cuando se esterilizan las asas. Sin embargo, pueden perturbar la
69
corriente de aire y por consiguiente deben colocarse hacia la parte trasera de la super-
ficie de trabajo de las CSB.
Ropas y equipo de proteccin personal

La vestimenta y el equipo de proteccin personal pueden actuar como barrera para
reducir al mnimo el riesgo de exposicin a aerosoles, salpicaduras e inoculacin acci-
dental. Las prendas de vestir y el equipo que se seleccionen dependen de la naturaleza
del trabajo que se realice. En el laboratorio los trabajadores llevarn ropa protectora.
Antes de abandonar el laboratorio, tendrn que quitarse las prendas protectoras y
lavarse las manos. En el cuadro 11 se exponen algunos elementos de proteccin per-
sonal utilizados en laboratorios y la proteccin que ofrecen.
Batas, monos y delantales de laboratorio

De preferencia, las batas de laboratorio irn abotonadas hasta arriba. Sin embargo, las
batas de manga larga y abertura trasera y los monos protegen mejor que las batas de
abertura frontal y son preferibles en los laboratorios de microbiologa y cuando se
trabaja en una CSB. Los delantales pueden llevarse por encima de las batas cuando se
necesite mayor proteccin contra el derrame de sustancias qumicas o material
biolgico como sangre o lquidos de cultivo. Los servicios de lavandera deben encon-
trarse en las instalaciones o cerca de ellas.
Las batas, monos y delantales no deben usarse fuera de las zonas del laboratorio.
Gafas de seguridad y viseras

La eleccin del material para proteger los ojos y el rostro de salpicaduras e impactos
de objetos depender de la actividad que se lleve a cabo. Pueden fabricarse gafas,
graduadas o no, con monturas especiales que permiten colocar los cristales desde
delante. Los cristales son de material irrompible y pueden ser curvos o llevar protec-
ciones laterales (cristales de seguridad). Las gafas de patilla no protegen debidamente
contra las salpicaduras ni siquiera cuando se utilizan con protecciones laterales. Las
gafas de mscara para proteger contra salpicaduras e impactos deben llevarse sobre
las gafas graduadas normales y las lentes de contacto (que no protegen contra los
riesgos biolgicos o qumicos). Las viseras estn hechas de plstico irrompible, se
ajustan al rostro y se sujetan a la cabeza mediante cintas o una capucha.
Ninguno de estos elementos de proteccin debe usarse fuera del laboratorio.
Mascarillas respiratorias
La proteccin respiratoria puede utilizarse cuando se realizan procedimientos de alto
riesgo, como limpiar un derrame de material infeccioso. El tipo de mascarilla
respiratoria elegida depender del tipo de peligro. Existen respiradores con filtros
cambiables para proteger contra gases, vapores, partculas y microorganismos. Es
indispensable que el filtro est colocado en el tipo de mascarilla adecuado. Para que
la proteccin sea mxima, las mascarillas respiratorias deben ajustarse al rostro de
70
Cuadro 11. Equipo de proteccin personal

Batas y monos de Contaminacin de la ropa Abertura trasera

laboratorio Cubren la ropa de calle
Delantales de plstico Contaminacin de la ropa Impermeables
Calzado Impactos y salpicaduras Puntera cerrada
Gafas de mscara Impactos y salpicaduras Lentes resistentes a los impactos (con

correccin ptica o bien deben usarse
sobre las lentes correctoras)
Proteccin lateral
Gafas de seguridad Impactos Lentes resistentes a los impactos (con

correccin ptica)
Proteccin lateral
Viseras Impactos y salpicaduras Protegen todo el rostro

Se retiran fcilmente en caso de
accidente
Mascarillas Inhalacin de aerosoles Varios diseos disponibles: desechables,

respiratorias de un solo uso; purificadoras de aire,
de cara entera o de media cara;
purificadoras de aire elctricas, de cara
entera o con capucha; con suministro
de aire
Guantes Contacto directo con De ltex, vinilo o nitrilo, aprobados para

microorganismos uso microbiolgico, desechables
Proteccin de las manos
Punciones o cortes De malla
cada trabajador y probarse previamente. Los respiradores autnomos con suministro

de aire integrado proporcionan proteccin completa. Para seleccionar el respirador
correcto habr que solicitar el consejo de una persona debidamente cualificada, como
un especialista en higiene laboral. Las mascarillas de tipo quirrgico estn diseadas
exclusivamente para proteger a los pacientes y no ofrecen proteccin respiratoria a
los trabajadores. Algunas mascarillas respiratorias desechables de un solo uso (ISO
13.340.30) estn diseadas para proteger de las exposiciones a agentes biolgicos.
Las mascarillas respiratorias no deben usarse fuera del laboratorio.
Guantes
Las manos pueden contaminarse cuando se trabaja en el laboratorio. Tambin son
vulnerables a las heridas producidas por objetos punzantes o cortantes. Los guantes
71
desechables de ltex, vinilo o nitrilo de tipo quirrgico aprobados para uso micro-
biolgico son los ms extendidos para el trabajo general de laboratorio y para mani-
pular agentes infecciosos, as como sangre y otros lquidos corporales. Tambin
pueden usarse guantes reutilizables, pero hay que lavarlos, retirarlos, limpiarlos y
desinfectarlos correctamente.
Despus de manipular material infeccioso o trabajar en una CSB y antes de aban-
donar el laboratorio es preciso retirar los guantes y lavarse las manos concienzuda-
mente. Los guantes desechables usados deben eliminarse junto con los residuos de
laboratorio infectados.
Se han notificado casos de reacciones alrgicas como dermatitis e hipersensibilidad
inmediata despus de usar guantes de ltex, particularmente los que llevan polvo.
Deber disponerse en el laboratorio de alternativas a ese tipo de guantes.
Los guantes de malla de acero inoxidable se llevarn cuando haya posibilidad de
exposicin a instrumentos cortantes o punzantes (por ejemplo, durante una autop-
sia). No obstante, esos guantes protegen contra los cortes pero no contra las
punciones.
Los guantes no deben usarse fuera de las zonas de laboratorio.
Si se desea ms informacin, vanse las referencias 12, 17 y 18.
72
PARTE IV
Tcnicas microbiolgicas
apropiadas
12. Tcnicas de laboratorio
Los errores humanos, las tcnicas de laboratorio incorrectas y el mal uso del equipo
son la causa de la mayora de los accidentes de laboratorio y las infecciones conexas.
En el presente captulo se compendian los mtodos tcnicos destinados a evitar o
reducir al mnimo los accidentes ms comunes provocados por esos factores.
Manipulacin segura de muestras en el laboratorio

La recogida, transporte y manipulacin de muestras en el laboratorio entraan un
riesgo de infeccin para el personal.
Recipientes para muestras

Los recipientes para muestras pueden ser de vidrio o, preferiblemente, de plstico.
Deben ser fuertes y no permitir fugas cuando la tapa o el tapn estn correctamente
colocados. En el exterior del recipiente no debe quedar ningn material. Los reci-
pientes han de estar correctamente rotulados para facilitar su identificacin. Los for-
mularios de peticin de examen de la muestra no se colocarn alrededor de los recip-
ientes, sino por separado, preferiblemente en sobres impermeables.
Transporte de muestras dentro de la instalacin

Para evitar fugas o derrames accidentales, deben utilizarse envases/embalajes secun-
darios (por ejemplo, cajas) equipados con gradillas, de modo que los recipientes que
contienen las muestras se mantengan en posicin vertical. Los envases/embalajes
secundarios pueden ser de metal o de plstico, pero deben poderse tratar en autoclave
o ser resistentes a la accin de los desinfectantes qumicos; de preferencia, el cierre
debe tener una junta que garantice la estanqueidad. Debern descontaminarse
peridicamente.
Recepcin de las muestras

Los laboratorios que reciban un elevado nmero de muestras deben destinar un local
o zona especial con este propsito.
Apertura de los envases/embalajes

El personal que recibe y desempaqueta las muestras debe conocer los riesgos para la
salud que entraa su actividad y debe estar capacitado para adoptar precauciones
75
normalizadas (2), particularmente cuando manipule recipientes rotos o con fugas. Los
recipientes primarios de las muestras deben abrirse en una CSB. Se dispondr de
desinfectantes.
Uso de pipetas y dispositivos de pipeteo

1. Debe utilizarse siempre un dispositivo de pipeteo. El pipeteo con la boca estar
prohibido.
2. Todas las pipetas tendrn tapones de algodn para reducir la contaminacin de
los dispositivos de pipeteo.
3. Nunca se insuflar aire en un lquido que contenga agentes infecciosos.
4. No debe mezclarse el material infeccioso aspirando y soplando alternativamente
a travs de una pipeta.
5. No se expulsarn a la fuerza los lquidos de una pipeta.
6. Son preferibles las pipetas aforadas con una muesca superior y otra inferior, ya
que no exigen la expulsin de la ltima gota.
7. Las pipetas contaminadas deben sumergirse completamente en un desinfectante
adecuado contenido en un recipiente irrompible y permanecer en l durante un
tiempo suficiente antes de tirarlas.
8. Debe colocarse un recipiente para las pipetas usadas dentro (no fuera) de la CSB.
9. No deben utilizarse para pipetear jeringuillas provistas de aguja hipodrmica.
10 En vez de agujas, existen dispositivos para abrir los frascos tapados con un
diafragma que permiten usar pipetas y evitar el uso de agujas y jeringuillas
hipodrmicas.
11. Para evitar la dispersin del material infeccioso que caiga accidentalmente de
una pipeta, se recubrir la superficie de trabajo con material absorbente, que se
desechar como residuo infeccioso una vez utilizado.
Tcnicas para evitar la dispersin de material infeccioso

1. A fin de evitar que su carga caiga prematuramente, las asas microbiolgicas deben
tener un dimetro de 23 mm y terminar en un anillo completamente cerrado.
Los mangos no deben tener ms de 6 cm de longitud para reducir la vibracin al
mnimo.
2. Para evitar el riesgo de que se produzcan salpicaduras de material infeccioso al
flamear las asas en el mechero de Bunsen, se utilizar un microincinerador elc-
trico cerrado para esterilizar las asas. Es preferible utilizar asas desechables que no
necesitan volver a ser esterilizadas.
3. Al secar muestras de esputo debe procederse con cuidado para evitar la creacin
de aerosoles.
4. Las muestras y los cultivos desechados destinados a la autoclave o a la eliminacin
se colocarn en recipientes impermeables, como las bolsas de desechos de labora-
torio. La parte superior se cerrar (por ejemplo con cinta de autoclave) antes de
tirarlas a los recipientes para desechos.
76
12. TCNICAS DE LABORATORIO
5. Las zonas de trabajo se descontaminarn con un desinfectante apropiado despus

de cada periodo de trabajo.
Para ms informacin, vase la referencia 12.
Uso de las cmaras de seguridad biolgica

1. Habr que explicar a todos los posibles usuarios el modo de empleo y las limita-
ciones de estas cmaras (vase el captulo 10), tomando como referencia las
normas nacionales y las publicaciones pertinentes. El personal recibir protoco-
los escritos o manuales de seguridad o de operacin. En particular, ha de quedar
claro que la cmara no protege al trabajador de derrames, roturas o tcnicas
incorrectas.
2. La cmara no debe utilizarse si no funciona correctamente.
3. La ventana de vidrio transparente no debe abrirse mientras se est utilizando la
cmara.
4. Los aparatos y materiales introducidos en la cmara deben reducirse al mnimo
y no deben bloquear la circulacin del aire en la cmara de distribucin
trasera.
5. No deben utilizarse mecheros de Bunsen en el interior de la cmara, ya que el calor
producido perturbar el flujo de aire y puede daar los filtros. Puede permitirse
el uso de un microincinerador, aunque es preferible utilizar asas estriles
desechables.
6. Todo el trabajo debe hacerse en la zona media o posterior de la superficie de
trabajo y ser visible a travs de la ventana.
7. El paso de personas por detrs del trabajador debe reducirse al mnimo.
8. El trabajador no debe alterar el flujo de aire al sacar y volver a introducir repeti-
das veces los brazos.
9. Las rejillas de aire no deben estar bloqueadas con papeles, pipetas u otros mate-
riales, pues con ello se perturba el flujo de aire y puede provocarse la contami-
nacin del material y la exposicin del trabajador.
10. La superficie de la CSB deber limpiarse con un pao empapado con un desin-
fectante apropiado una vez terminado el trabajo y al final del da.
11. El ventilador de la cmara se encender al menos 5 minutos antes de empezar
el trabajo y debe seguir funcionando al menos durante 5 minutos despus de
concluido el trabajo.
12. Nunca se introducirn papeles en las CSB.
Si se desea ms informacin acerca de las CSB, vase el captulo 10.
Tcnicas para evitar la ingestin de material infeccioso y su contacto con la

piel y los ojos
1. Las partculas y gotculas de mayor tamao (>5 mm) que se desprenden durante
las manipulaciones microbiolgicas se depositan rpidamente en la superficie de
77
las mesas y en las manos del trabajador. ste llevar guantes desechables. Los tra-
bajadores del laboratorio evitarn tocarse la boca, los ojos y el rostro.
2. En el laboratorio no se deben conservar ni consumir alimentos o bebidas.
3. En el laboratorio no se colocarn objetos en la boca (lpices, goma de mascar).
4. En el laboratorio no se aplicarn cosmticos.
5. La cara, los ojos y la boca deben estar protegidos con una pantalla o de algn otro
modo durante cualquier operacin que pueda provocar salpicaduras de material
potencialmente infeccioso.
Tcnicas para evitar la inyeccin de material infeccioso

1. La inoculacin accidental debida a heridas por objetos de vidrio rotos o astillados
puede evitarse mediante prcticas y procedimientos cuidadosos. El material de
vidrio debe ser reemplazado por material de plstico siempre que sea posible.
2. La inoculacin accidental puede producirse como consecuencia de heridas con
agujas hipodrmicas, pipetas de Pasteur de vidrio o vidrios rotos.
3. El nmero de accidentes causados por agujas hipodrmicas puede reducirse
restringiendo al mnimo el uso de jeringuillas y agujas (por ejemplo, existen dis-
positivos sencillos para abrir los frascos con tapn de diafragma de modo que
puedan usarse pipetas en lugar de jeringuillas y agujas), o utilizando dispositivos
especiales de seguridad para objetos cortantes y punzantes cuando se hace im-
prescindible utilizar jeringuillas y agujas.
4. Nunca deben volver a cubrirse las agujas. Los artculos desechables debern colo-
carse en recipientes resistentes a la perforacin que tengan tapa.
5. Las pipetas de Pasteur de vidrio deben sustituirse por otras de plstico.
Separacin de suero
1. Slo realizar este trabajo personal de laboratorio debidamente capacitado.
2. El personal llevar guantes y equipo protector de ojos y mucosas.
3. Slo una buena tcnica permite evitar o reducir al mnimo las salpicaduras y los
aerosoles. La sangre y el suero se deben pipetear con cuidado en lugar de verter-
los. El pipeteo con la boca estar prohibido.
4. Una vez usadas, las pipetas se sumergirn por completo en un desinfectante
apropiado y permanecern en l durante un tiempo suficiente, hasta que se
eliminen o se laven y esterilicen para volverlas a utilizar.
5. Los tubos de ensayo que se desea eliminar y que contienen cogulos de sangre u
otros materiales se colocarn, nuevamente con sus tapas, en recipientes imper-
meables apropiados que se tratarn y esterilizarn en la autoclave o se incinerarn.
6. Habr que disponer de desinfectantes apropiados para limpiar las salpicaduras y
los derrames de material (vase el captulo 14).
Uso de las centrifugadoras

1. El funcionamiento mecnico satisfactorio es un requisito de la seguridad micro-
biolgica del empleo de centrifugadoras en el laboratorio.
78
2. Las centrifugadoras se utilizarn segn las instrucciones del fabricante.

3. Las centrifugadoras deben colocarse a una altura tal que los trabajadores puedan
ver la cubeta para colocar correctamente los soportes y los cestillos.
4. Los tubos de la centrifugadora y los recipientes de muestras destinados al uso en
la centrifugadora deben estar fabricados de vidrio grueso o, preferiblemente, de
plstico, y deben inspeccionarse para detectar defectos antes de usarlos.
5. Los tubos y los recipientes para muestras deben estar siempre bien cerrados (con
tapn de rosca si es posible) para la centrifugacin.
6. Los cestillos deben cargarse, equilibrarse, cerrarse y abrirse en una CSB.
7. Los cestillos y los soportes se deben emparejar por el peso y equilibrar correcta-
mente con los tubos en su sitio.
8. El espacio que debe dejarse entre el nivel del lquido y el borde de cada tubo de
centrifugacin debe ser especificado en las instrucciones del fabricante.
9. Para equilibrar los cestillos vacos se emplear agua destilada o alcohol (propanol
al 70%). No se emplear suero salino ni solucin de hipoclorito porque ambos
productos corroen los metales.
10. Para los microorganismos de los grupos de riesgo 3 y 4 se utilizarn cestillos de
centrifugadora de cierre hermtico (cestillos de seguridad).
11. Cuando se utilicen rotores de cabeza angular, debe velarse por que el tubo no est
excesivamente cargado, ya que puede haber fugas del lquido.
12. El interior de la cubeta de la centrifugadora se inspeccionar a diario para obser-
var si existen manchas o suciedad en el rotor. Si stas son manifiestas, se deben
examinar de nuevo los protocolos de centrifugacin.
13. Los rotores y los cestillos de la centrifugadora deben observarse diariamente para
detectar signos de corrosin y grietas.
14. Los cestillos, los rotores y la cubeta de la centrifugadora deben descontaminarse
despus de cada uso.
15. Despus del uso, los cestillos se depositarn en posicin invertida a fin de vaciar
el lquido utilizado para equilibrar.
16. Al utilizar centrifugadoras pueden expulsarse partculas infecciosas transportadas
por el aire. Esas partculas salen despedidas a una velocidad demasiado alta para
que las retenga el flujo de aire de la cmara si la centrifugadora est funcionando
en una CSB tradicional con abertura frontal de las clases I y II. Si se colocan las
centrifugadoras en CSB de clase III se evita que los aerosoles emitidos se dispersen
ampliamente. No obstante, el empleo de una buena tcnica de centrifugacin y de
tubos tapados correctamente ofrece proteccin suficiente contra los aerosoles
infecciosos y la dispersin de partculas.
Uso de homogeneizadores, agitadores, mezcladores y desintegradores

ultrasnicos
1. No deben utilizarse homogeneizadores domsticos (de cocina) en los laboratorios,
pues pueden tener fugas o desprender aerosoles. Los mezcladores y homo-
geneizadores de laboratorio de tipo Stomacher son ms seguros.
79
2. Los tapones y los recipientes o frascos deben estar en buenas condiciones, sin
deformaciones ni fisuras. Los tapones deben ajustar bien y las juntas deben estar
en buen estado.
3. Durante el funcionamiento de los homogeneizadores, agitadores y desintegradores
ultrasnicos se produce un aumento de la presin dentro del recipiente, con lo
que pueden desprenderse entre la tapa y el recipiente aerosoles con materiales
infecciosos. Se recomiendan los recipientes de plstico, en particular de politetra-
fluoroetileno (PTFE), porque el vidrio puede romperse y liberar material infec-
cioso, e incluso herir al trabajador.
4. Durante su utilizacin, hay que recubrir los aparatos con una funda fuerte de pls-
tico transparente, que se desinfectar una vez usada. Siempre que sea posible, estos
aparatos, con su funda de plstico, se utilizarn dentro de una CSB.
5. Una vez terminada la operacin, el recipiente se abrir en una CSB.
6. Las personas que utilicen desintegradores ultrasnicos deben llevar proteccin
auditiva.
Uso de trituradores de tejidos

1. Los trituradores de vidrio deben sostenerse envueltos en una pieza de material
absorbente y con la mano enguantada. Son ms seguros los trituradores de pls-
tico (PTFE).
2. Los trituradores de tejidos deben utilizarse y abrirse en una CSB.
Mantenimiento y uso de refrigeradores y congeladores

1. Los refrigeradores, congeladores y recipientes de nieve carbnica deben descon-
gelarse y limpiarse peridicamente; se eliminarn todos los tubos, ampollas y otros
objetos que se hayan roto durante el almacenamiento. Durante la limpieza se debe
utilizar proteccin facial y guantes de goma gruesa. Despus de la limpieza se
desinfectarn las superficies interiores de la cmara.
2. Todos los recipientes almacenados en refrigeradores y congeladores deben llevar
etiquetas bien claras con el nombre cientfico del contenido, la fecha de almace-
namiento y el nombre de la persona que los ha almacenado. Los materiales sin
etiquetas y anticuados deben tratarse en la autoclave y desecharse.
3. Debe mantenerse un inventario del contenido de los refrigeradores y congeladores.
4. No deben guardarse nunca soluciones inflamables en refrigeradores, excepto si
estos son a prueba de explosin. En las puertas de los refrigeradores se colocarn
advertencias al respecto.
Tcnicas para abrir ampollas que contengan material infeccioso liofilizado

Conviene abrir con precaucin las ampollas de material liofilizado pues, al estar cer-
radas a presin reducida, la entrada brusca de aire puede dispersar el contenido en la
atmsfera. Las ampollas deben abrirse siempre dentro de una CSB. Para abrir las
ampollas se recomienda el siguiente procedimiento:
80
1. En primer lugar, descontaminar la superficie exterior de la ampolla.

2. Hacer con la lima una marca en el tubo, cerca de la mitad del tapn de algodn
o celulosa, si lo hay.
3. Sujetar la ampolla en un algodn empapado en alcohol para proteger las manos
antes de romperla por la marca.
4. Retirar con cuidado la parte superior y tratarla como si fuera material contami-
nado.
5. Si el tapn sigue estando por encima del contenido de la ampolla, retirarlo con
una pinza estril.
6. Reconstituir la suspensin aadiendo el lquido lentamente para evitar la forma-
cin de espuma.
Almacenamiento de ampollas que contengan material infeccioso

Las ampollas que contienen material infeccioso no se deben sumergir nunca en
nitrgeno lquido, ya que las que estn fisuradas o mal cerradas podran romperse o
explotar al sacarlas. Si se necesitan temperaturas muy bajas, las ampollas slo se deben
almacenar en la fase gaseosa que queda por encima del nitrgeno lquido. Tambin
pueden almacenarse los materiales infecciosos en congeladores mecnicos o nieve car-
bnica. Al retirar las ampollas del almacenamiento en fro, el personal deber llevar
protegidos los ojos y las manos.
Las ampollas conservadas por estos procedimientos se descontaminarn por fuera
siempre que se saquen del lugar de almacenamiento.
Precauciones normalizadas en relacin con la sangre y otros lquidos

corporales, tejidos y excreciones
Las precauciones normalizadas (que incluyen las precauciones universales (19))
estn concebidas para reducir el riesgo de transmisin de microorganismos de fuentes
de infeccin tanto reconocidas como no reconocidas (2).
Recogida, etiquetado y transporte de muestras

1. Se seguirn siempre las precauciones normalizadas (2); se usarn guantes en todos
los procedimientos.
2. La toma de sangre de personas y animales estar a cargo de personal capacitado.
3. En las flebotomas, los sistemas convencionales de aguja y jeringuilla se sustituirn
por dispositivos de seguridad al vaco de un solo uso que permitan recoger la
sangre directamente en tubos de transporte o de cultivo con tapn y que inutili-
cen la aguja despus del uso.
4. Los tubos se colocarn en recipientes apropiados para el transporte al laboratorio
(vase el captulo 15 para ms informacin sobre los requisitos de transporte) y
dentro del laboratorio (vase en el presente captulo la seccin sobre transporte
de muestras dentro del servicio). Los formularios de peticin de examen se colo-
carn en bolsas o sobres impermeables separados.
5. El personal de recepcin no debe abrir estas bolsas.
81
Apertura de tubos de muestras y muestreo del contenido

1. Los tubos de muestras deben abrirse en una CSB.
2. Deben usarse guantes. Tambin se recomienda proteger los ojos y las mucosas
(gafas de seguridad de tipo mscara o viseras).
3. Las prendas de proteccin se complementarn con un delantal de plstico.
4. Para sacar el tapn, ste se agarrar con un trozo de papel o de gasa con el fin de
evitar salpicaduras.
Vidrio y objetos punzantes y cortantes

1. Siempre que sea posible, se sustituir el material de vidrio por material de
plstico. Slo se utilizar vidrio duro especial para laboratorio (borosilicato); se
desechar todo artculo que est astillado o agrietado.
2. No se utilizarn agujas hipodrmicas para pipetear (vase tambin el apartado
Tcnicas para evitar la inoculacin de material infeccioso en el presente
captulo).
Extensiones y frotis para el examen microscpico

La fijacin y tincin de muestras de sangre, esputo y heces para el microscopio no
destruye necesariamente todos los organismos o los virus de las extensiones. stas
deben manipularse con pinzas, almacenarse cuidadosamente y descontaminarse o
tratarse en autoclave antes de eliminarlas.
Equipo automtico (desintegradores ultrasnicos, mezcladores vorticiales)

1. El equipo debe ser cerrado para evitar la dispersin de gotitas y aerosoles.
2. Los efluentes se recogern en recipientes cerrados y se tratarn en la autoclave o
se eliminarn.
3. El equipo se desinfectar al final de cada sesin de trabajo, siguiendo las instruc-
ciones del fabricante.
Tejidos
1. Se utilizarn fijadores a base de formol.
2. Se evitarn los cortes de material congelado. Cuando sea necesario, el criostato
estar protegido y el trabajador llevar visera de seguridad. Para la descon-
taminacin, la temperatura del instrumento se elevar a 20C, como
mnimo.
Descontaminacin
Para la descontaminacin se recomiendan hipocloritos y desinfectantes de alto nivel.
Las soluciones de hipoclorito recin preparadas contendrn cloro disponible a razn
de 1 g/l para uso general, y de 5 g/l para limpiar derrames de sangre. Para la desinfec-
cin de superficies puede utilizarse glutaraldehdo (vase el captulo 14).
82
Precauciones con materiales que puedan contener priones

Los priones, tambin conocidos como virus lentos, se asocian a las encefalopatas
espongiformes transmisibles, en particular la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob
(incluida la nueva variante), el sndrome de Gerstmann-Strussler-Scheinker, el
insomnio familiar letal y el kuru en el ser humano; la tembladera en el ganado ovino
y caprino; la encefalopata espongiforme bovina en el ganado bovino, y otras
encefalopatas transmisibles en el reno, el alce y el visn. Aunque la enfermedad de
Creutzfeldt-Jakob se ha transmitido a seres humanos, no parece que existan casos
demostrados de infecciones asociadas al laboratorio provocadas por ninguno de esos
agentes. Sin embargo, es prudente observar ciertas precauciones en la manipulacin
de material procedente de personas y animales infectados o posiblemente infectados.
La seleccin de un nivel de bioseguridad para trabajar con materiales asociados a
las encefalopatas espongiformes transmisibles depender de la naturaleza del agente
y de las muestras que vayan a estudiarse, y se realizar en consulta con las autoridades
nacionales. Las mayores concentraciones de priones se localizan en los tejidos del
sistema nervioso central. Los estudios en animales indican que tambin se encuen-
tran concentraciones elevadas en el bazo, el timo, los ganglios linfticos y el pulmn.
Estudios recientes indican que los priones presentes en los tejidos de la lengua y del
msculo esqueltico tambin pueden suponer un riesgo de infeccin (2023).
Dado que es difcil conseguir la inactivacin completa de los priones, es impor-
tante insistir en que se utilicen instrumentos desechables siempre que sea posible, as
como una cubierta protectora desechable para la superficie de trabajo de la CSB.
La principal precaucin que hay que adoptar es evitar la ingestin de material con-
taminado y la puncin de la piel del trabajador. Adems, se tomarn las siguientes
precauciones, ya que estos agentes no son inactivados por los procesos normales de
desinfeccin y esterilizacin del laboratorio:
1. Se recomienda encarecidamente utilizar equipo exclusivo, es decir, no compartido
con otros laboratorios.
2. Se llevar ropa protectora (batas y delantales) y guantes (de malla de acero entre
guantes de goma para los anatomopatlogos) desechables.
3. Se recomienda encarecidamente el uso de material de plstico desechable, que
puede tratarse y eliminarse como residuo seco.
4. No deben utilizarse procesadores de tejidos debido a los problemas de desinfec-
cin. Se utilizarn en su lugar frascos y vasos de boca ancha de plstico.
5. Todas las manipulaciones se realizarn en CSB.
6. Se tendr gran cuidado para evitar la produccin e ingestin de aerosoles, as como
los cortes y punciones de la piel.
7. Los tejidos fijados con formol seguirn considerndose infecciosos, aun despus
de una exposicin prolongada al formol.
8. Las muestras histolgicas que contengan priones quedan sustancialmente inacti-
vadas por la exposicin durante 1 h al cido frmico al 96% (24, 25).
83
9. Los residuos del lugar de trabajo, incluidos los guantes, las batas y los delantales
desechables, se tratarn en la autoclave utilizando un esterilizador de vapor para
sustancias porosas a 134137 C durante un ciclo de 18 minutos, o seis ciclos suce-
sivos de 3 minutos cada uno, seguidos de incineracin.
10. Los instrumentos no desechables, incluidos los guantes de malla de acero, deben
recogerse para ser descontaminados.
11. Los residuos de lquidos infecciosos contaminados con priones deben tratarse
durante 1 h con hipoclorito sdico con 20 g de cloro libre por litro (2%) (con-
centracin final).
12. Los procedimientos de vaporizacin con paraformaldehdo no disminuyen los
ttulos de priones. Los priones son resistentes a la radiacin ultravioleta. A pesar
de ello, deben seguir descontaminndose las cmaras por los mtodos habituales
(formaldehdo gaseoso) para inactivar otros agentes que puedan estar presentes.
13. Las CSB y otras superficies contaminadas por priones pueden descontaminarse
con hipoclorito sdico (20 g de cloro libre por litro: 2%) durante 1 h.
14. Los filtros HEPA deben incinerarse a una temperatura mnima de 1000 C despus
de retirarlos. Otros pasos recomendados antes de la incineracin son los
siguientes:
a. rociar la cara expuesta del filtro con laca para el cabello antes de retirarlo;
b. introducir los filtros en bolsas durante su extraccin, y
c. extraer el filtro HEPA desde la cmara de trabajo, de modo que la cmara de
distribucin inaccesible no se contamine.
15. Los instrumentos se sumergirn en hipoclorito sdico (20 g de cloro libre por litro:
2%) durante 1 h, y a continuacin se enjuagarn cuidadosamente en agua antes
de tratarlos en la autoclave.
16. Los instrumentos que no puedan tratarse en la autoclave pueden limpiarse mojn-
dolos repetidamente con hipoclorito sdico (20 g de cloro libre por litro: 2%)
durante 1 h. Se enjuagar cuidadosamente a fin de eliminar los residuos de
hipoclorito sdico.
En las referencias 12, 26 y 27 figura ms informacin sobre la manipulacin de agentes
no convencionales.
84
13. Planes de contingencia y
procedimientos de emergencia
Todo laboratorio que trabaje con microorganismos infecciosos deber establecer pre-
cauciones de seguridad acordes con el riesgo que entraen los microorganismos y los
animales utilizados.
En cualquier instalacin que almacene o trabaje con microorganismos de los
grupos de riesgo 3 4 (laboratorios de contencin nivel de bioseguridad 3 y labo-
ratorios de contencin mxima nivel de bioseguridad 4) es indispensable un plan
escrito de medidas de contingencia para hacer frente a los accidentes en el laborato-
rio y en los animalarios. Las autoridades sanitarias nacionales o locales debern par-
ticipar en la elaboracin del plan de preparacin para emergencias.
Plan de contingencia
El plan de contingencia debe prever procedimientos operativos para los siguientes
casos:
1. Precauciones contra catstrofes naturales, como incendios, inundaciones, terre-
motos y explosiones
2. Evaluacin del riesgo biolgico
3. Medidas aplicables en caso de exposicin accidental y descontaminacin
4. Evacuacin de emergencia de personas y animales de los locales
5. Tratamiento mdico de emergencia de las personas expuestas y heridas
6. Vigilancia mdica de las personas expuestas
7. Manejo clnico de las personas expuestas
8. Investigacin epidemiolgica
9. Continuacin del funcionamiento tras el incidente.
En la elaboracin del plan habr que prever la inclusin de los siguientes elementos:
1. Identificacin de microorganismos de alto riesgo
2. Localizacin de zonas de alto riesgo, como laboratorios, almacenes y animalarios
3. Identificacin del personal y de las poblaciones en riesgo
4. Identificacin del personal con responsabilidades y de sus obligaciones, como
el funcionario de bioseguridad, el personal de seguridad, las autoridades sani-
tarias locales, clnicos, microbilogos, veterinarios, epidemilogos, servicios de
bomberos y de polica
85
5. Lista de los servicios de tratamiento y aislamiento que pueden atender a las per-
sonas expuestas o infectadas
6. Transporte de las personas expuestas o infectadas
7. Lista de fuentes de inmunosueros, vacunas, medicamentos y materiales y sumi-
nistros especiales
8. Provisin de material de emergencia, como ropa protectora, desinfectantes,
estuches de material para derrames qumicos y biolgicos, material y suministros
para la descontaminacin.
Procedimientos de emergencia para laboratorios de microbiologa

Heridas punzantes, cortes y abrasiones
La persona afectada deber quitarse la ropa protectora, lavarse las manos y la parte
lesionada, aplicarse un desinfectante cutneo apropiado y buscar la atencin mdica
que sea precisa. Se notificar la causa de la herida y los microorganismos implicados;
se mantendrn registros mdicos apropiados y completos.
Ingestin de material potencialmente infeccioso

Se quitar la ropa protectora y se buscar atencin mdica. Se notificar la identidad
del material ingerido y las circunstancias del incidente, y se mantendrn registros
mdicos apropiados y completos.
Emisin de aerosoles potencialmente infecciosos (fuera de una cmara de

seguridad biolgica)
Todas las personas debern evacuar inmediatamente la zona afectada; las personas
expuestas sern enviadas de inmediato para recibir atencin mdica. Se informar
inmediatamente al director del laboratorio y al funcionario de bioseguridad. Nadie
podr entrar en el local durante un tiempo prudencial (por ejemplo, una hora), de
modo que los aerosoles puedan salir y se depositen las partculas ms pesadas. Si el
laboratorio no cuenta con un sistema central de evacuacin de aire, la entrada se
retrasar (por ejemplo durante 24 horas).
Se colocarn seales indicando que queda prohibida la entrada. Al cabo del tiempo
apropiado, se proceder a la descontaminacin bajo la supervisin del funcionario de
bioseguridad. Para ello habr que utilizar ropa protectora y proteccin respiratoria
apropiadas.
Rotura de recipientes y derrames de sustancias infecciosas

Los recipientes rotos contaminados con sustancias infecciosas y las sustancias infec-
ciosas derramadas se cubrirn con paos o papel absorbente. A continuacin se
verter sobre stos un desinfectante que se dejar actuar durante tiempo suficiente, y
despus podr retirarse el pao o el papel absorbente junto con el material roto; los
fragmentos de vidrio debern ser manipulados con pinzas. Despus se fregar la zona
contaminada con un desinfectante. Si se utilizan recogedores de polvo para retirar el
material roto, despus habr que tratarlos en la autoclave o sumergirlos en un
86
13. PLANES DE CONTINGENCIA Y PROCEDIMIENTOS DE EMERGENCIA
desinfectante eficaz. Los paos, el papel absorbente y las bayetas utilizados para la
limpieza se colocarn en un recipiente para residuos contaminados. Habr que
utilizar guantes en todas estas operaciones.
Si se contaminan los formularios del laboratorio u otros papeles manuscritos o
impresos, se copiar la informacin en otro formulario y se tirar el original en un
recipiente para residuos contaminados.
Rotura de tubos con material potencialmente infeccioso en centrifugadoras carentes

de cestillos de seguridad
Si se sabe o se sospecha que se ha roto un tubo mientras est funcionando el aparato,
habr que parar el motor y dejar el aparato cerrado (por ejemplo durante 30 minutos)
para que se pose el material. Si la rotura se descubre cuando la mquina se ha parado,
se volver a tapar inmediatamente y se dejar cerrada (por ejemplo durante 30
minutos). En ambos casos, habr que informar al funcionario de bioseguridad.
En todas las operaciones posteriores habr que utilizar guantes fuertes (por
ejemplo, de goma gruesa), cubiertos en caso necesario con guantes desechables
apropiados. Para recoger los trozos de vidrio se utilizarn pinzas o algodn manipu-
lado con pinzas.
Todos los tubos rotos, fragmentos de vidrio, cestillos, soportes y el rotor se sumer-
girn en un desinfectante no corrosivo de eficacia conocida contra los microorganis-
mos de que se trate (vase el captulo 14). Los tubos intactos, con sus correspondientes
tapones, pueden introducirse en desinfectante en un recipiente aparte para
recuperarlos.
La cubeta de la centrifugadora se limpiar con una bayeta empapada en el mismo
desinfectante a la dilucin apropiada; se repetir la operacin y despus se lavar con
agua y se secar. Todo el material de limpieza utilizado se tratar como si fuera mate-
rial de desecho infectado.
Rotura de tubos dentro de los cestillos de cierre hermtico (cestillos de seguridad)

Todos los cestillos de centrifugadora de cierre hermtico se cargarn y descargarn en
una CSB. Si se sospecha que se ha producido una rotura dentro del cestillo de seguri-
dad, la tapa de seguridad se soltar cuidadosamente y se tratar el cestillo en la auto-
clave. Tambin se podr desinfectar con agentes qumicos.
Incendios y catstrofes naturales

Los servicios de incendios y de otro tipo deben participar en la elaboracin de los
planes de preparacin para emergencias y estarn informados de antemano acerca de
las salas que contienen material potencialmente infeccioso. Es conveniente que estos
servicios visiten las instalaciones del laboratorio para familiarizarse con su distribu-
cin y su contenido.
Despus de una catstrofe natural, se informar a los servicios de emergencia
locales o nacionales de los riesgos existentes dentro del edificio del laboratorio y en
sus proximidades. El personal de esos servicios slo deber entrar acompaado por
87
un trabajador capacitado del laboratorio. El material infeccioso ser recogido en cajas

impermeables o bolsas desechables fuertes.
El personal de seguridad, basndose en la reglamentacin local, determinar el
material que podr recuperarse o eliminarse definitivamente.
Servicios de emergencia: a quin acudir?

En las instalaciones se expondrn en lugar bien visible las direcciones y los nmeros
de telfono siguientes:
1. Del propio establecimiento o laboratorio (sus seas y su situacin quiz no sean
conocidos por la persona que llama ni por los servicios a los que se acude)
2. Del director del establecimiento o laboratorio
3. Del supervisor del laboratorio
4. Del funcionario de bioseguridad
5. Del servicio de bomberos
6. Del hospital/servicio de ambulancias/personal mdico (nombre de los distintos
servicios, departamentos o personal mdico, si es posible)
7. De la polica
8. Del funcionario mdico
9. Del tcnico responsable
10. De los servicios de agua, gas y electricidad.
Equipo de emergencia
Se dispondr del siguiente equipo de emergencia:
1. Botiqun de primeros auxilios, que contendr antdotos universales y especiales
2. Extintores de incendios, mantas para apagar fuegos.
A continuacin se indican otros materiales que pueden ser necesarios en ciertas cir-
cunstancias locales:
1. Vestimenta protectora completa (monos de una pieza, guantes y capuchas, para
incidentes con microorganismos de los grupos de riesgo 3 y 4)
2. Mascarillas respiratorias que cubran toda la cara, provistas de filtros para partcu-
las y sustancias qumicas
3. Material para la desinfeccin de locales, como rociadores y vaporizadores de
formaldehdo
4. Camillas
5. Herramientas, como martillos, hachas, llaves de tuercas, destornilladores, escaleras
de mano, cuerdas
6. Material para demarcar y sealar zonas peligrosas.
Si se desea ms informacin, consltense las referencias 12 y 28.
88
14. Desinfeccin y esterilizacin
Para la bioseguridad en el laboratorio es fundamental disponer de conocimientos

bsicos sobre la desinfeccin y la esterilizacin. Habida cuenta de que los objetos muy
sucios no pueden desinfectarse o esterilizarse rpidamente, es igualmente importante
comprender los conceptos bsicos de la limpieza previa. A este respecto, los siguientes
principios generales se aplican a todas las clases conocidas de microbios patgenos.
Los requisitos particulares de la descontaminacin dependern del tipo de trabajo
experimental y de la naturaleza de los agentes infecciosos que se estn manipulando.
La informacin genrica que aqu se ofrece puede utilizarse para elaborar proce-
dimientos tanto normalizados como ms especficos para hacer frente a los peligros
biolgicos que existan en un laboratorio concreto.
Los tiempos de contacto con los desinfectantes son distintos para cada material y
cada fabricante. As pues, todas las recomendaciones para el uso de desinfectantes
deben seguir las especificaciones del fabricante.
Definiciones
En la esfera de la desinfeccin y la esterilizacin se utilizan muchos trminos
diferentes. Los siguientes se encuentran entre los ms comunes en el campo de la
bioseguridad:
Antimicrobiano Agente que mata los microorganismos o suprime su crecimiento
y proliferacin.
Antisptico Sustancia que inhibe el crecimiento y el desarrollo de microorganismos
pero no necesariamente los mata. Los antispticos suelen aplicarse a las superficies
corporales.
Biocida Trmino general para cualquier agente que mate organismos.
Descontaminacin Cualquier proceso utilizado para eliminar o matar microor-
ganismos. Tambin se utiliza para referirse a la eliminacin o neutralizacin de sus-
tancias qumicas peligrosas y materiales radioactivos.
Desinfeccin Medio fsico o qumico de matar microorganismos, pero no nece-
sariamente esporas.
Desinfectante Sustancia o mezcla de sustancias qumicas utilizada para matar
microorganismos, pero no necesariamente esporas. Los desinfectantes suelen apli-
carse a superficies u objetos inanimados.
89
Esporicida Sustancia o mezcla de sustancias qumicas utilizadas para matar

microorganismos y esporas.
Esterilizacin Proceso que mata o elimina todas las clases de microorganismos y
esporas.
Germicida qumico Sustancia o mezcla de sustancias qumicas utilizada para matar
microorganismos.
Microbicida Sustancia o mezcla de sustancias qumicas que mata microorganismos.
Este trmino se utiliza a menudo en lugar de biocida, germicida qumico o
antimicrobiano.
Limpieza del material de laboratorio

La limpieza consiste en la eliminacin de suciedad, materia orgnica y manchas.
Incluye el cepillado, la aspiracin, el desempolvado en seco, el lavado o el fregado con
un pao y agua con jabn o detergente. La suciedad, la tierra y la materia orgnica
pueden albergar microorganismos e interferir con la accin de los descontaminantes
(antispticos, germicidas qumicos y desinfectantes).
La limpieza previa es fundamental para conseguir una correcta desinfeccin o
esterilizacin. Muchos productos germicidas slo son activos sobre material previa-
mente limpio. La limpieza previa debe llevarse a cabo con cuidado para evitar la
exposicin a agentes infecciosos.
Deben utilizarse materiales que sean qumicamente compatibles con los germici-
das que vayan a utilizarse despus. Es muy frecuente utilizar el mismo germicida
qumico para la limpieza previa y la desinfeccin.
Germicidas qumicos
Pueden utilizarse como desinfectantes o antispticos muchos tipos de sustancias
qumicas. Dado que el nmero y la variedad de productos comerciales es cada vez
mayor, deben elegirse cuidadosamente las formulaciones que sean ms indicadas para
las necesidades concretas.
La actividad germicida de muchas sustancias qumicas es ms rpida y eficaz a
temperaturas ms altas, pero las temperaturas elevadas tambin pueden acelerar su
evaporacin y degradarlas. Es preciso tener particular cuidado en el uso y el almace-
namiento de esas sustancias en las regiones tropicales, donde su tiempo de conser-
vacin puede verse reducido a causa de las altas temperaturas del ambiente.
Muchos germicidas pueden ser perjudiciales para el ser humano o el medio
ambiente. Se deben seleccionar, almacenar, manipular, utilizar y eliminar con precau-
cin, siguiendo las instrucciones del fabricante. En relacin con la seguridad personal,
se recomienda utilizar guantes, delantales y proteccin ocular cuando se preparen
diluciones de germicidas qumicos.
Normalmente no se necesita recurrir a germicidas qumicos para la limpieza ordi-
naria de suelos, paredes, equipo y mobiliario, pero su uso puede ser apropiado en
ciertos casos para controlar brotes.
90
14. DESINFECCIN Y ESTERILIZACIN
Cuadro 12. Diluciones recomendadas de compuestos que liberan cloro

SITUACIONES LIMPIASa SITUACIONES SUCIASb
Cloro libre requerido 0,1% (1 g/l) 0,5% (5 g/l)

Solucin de hipoclorito sdico 20 ml/l 100 ml/l
(5% de cloro libre)
Hipoclorito clcico (70% de cloro libre) 1,4 g/l 7,0 g/l
Dicloroisocianurato sdico en polvo 1,7 g/l 8,5 g/l
(60% de cloro libre)
Dicloroisocianurato sdico en comprimidos Un comprimido por Cuatro comprimidos
(1,5 g de cloro libre por comprimido) litro por litro
Cloramina (25% de cloro libre)c 20 g/l 20 g/l
a
Despus de retirar el material grueso.
b
Para enjuagar, por ejemplo sobre la sangre o antes de retirar el material grueso.
c
Vase el texto.
El uso correcto de los germicidas qumicos contribuir a la seguridad en el lugar

de trabajo y al mismo tiempo reducir el riesgo que suponen los agentes infecciosos.
En la medida de lo posible, el nmero de sustancias qumicas germicidas que se
utilicen deber ser limitado por razones econmicas y de control del inventario, as
como para reducir la contaminacin ambiental.
A continuacin se describen las clases ms utilizadas de germicidas qumicos, con
informacin genrica sobre sus aplicaciones y sus caractersticas de seguridad. A
menos que se indique otra cosa, sus concentraciones se expresan en peso/volumen.
En el cuadro 12 se resumen las diluciones recomendadas de los compuestos que
liberan cloro.
Cloro (hipoclorito sdico)

El cloro, oxidante de accin rpida, es un germicida qumico de uso muy extendido
y de amplio espectro. Normalmente se vende en forma de leja, una solucin acuosa
de hipoclorito sdico (NaOCl) que puede diluirse en agua para conseguir distintas
concentraciones de cloro libre.
El cloro, especialmente en forma de leja, es sumamente alcalino y puede ser cor-
rosivo para los metales. Su actividad se ve considerablemente reducida por la materia
orgnica (protenas). Las soluciones madre o de trabajo de leja almacenadas en reci-
pientes abiertos, particularmente a temperaturas elevadas, liberan cloro gaseoso con
lo que se debilita su potencial germicida. La frecuencia con la que deben prepararse
nuevas soluciones de trabajo de leja depende de su potencia inicial, del tamao y el
tipo de los recipientes (por ejemplo, con o sin tapa), de la frecuencia y el tipo de uso,
y de las condiciones ambientales. A ttulo de orientacin general, las soluciones que
reciban materiales con gran cantidad de materia orgnica varias veces al da deben
91
cambiarse al menos diariamente, mientras que aquellas que se usan con menos fre-
cuencia pueden durar hasta una semana.
Como solucin desinfectante general para toda clase de trabajos de laboratorio se
utilizar una concentracin de 1 g/l de cloro libre. En caso de derrame que conlleve
un peligro biolgico y en presencia de grandes cantidades de materia orgnica, se
recomienda utilizar una solucin ms concentrada, que contenga 5 g/l de cloro libre.
Las soluciones de hipoclorito sdico, como la leja de uso domstico, contienen 50 g/l
de cloro libre y por tanto deben diluirse a razn de 1 : 50 o 1 : 10 para obtener con-
centraciones finales de 1 g/l y 5 g/l, respectivamente. Las soluciones industriales de leja
tienen una concentracin de hipoclorito sdico cercana a los 120 g/l y deben diluirse
en consecuencia para obtener los niveles indicados ms arriba.
Los grnulos o comprimidos de hipoclorito clcico (Ca(ClO)2) suelen contener
alrededor de un 70% de cloro libre. Las soluciones preparadas con grnulos o com-
primidos, que contienen 1,4 g/l y 7,0 g/l, contendrn entonces 1,0 g/l y 5 g/l de cloro
libre, respectivamente.
La leja no se recomienda como antisptico, pero puede utilizarse como desinfec-
tante de uso general y para sumergir materiales no metlicos contaminados. En caso
de emergencia, tambin puede utilizarse la leja para desinfectar agua para beber con
una concentracin final de 12 mg/l de cloro libre.
El cloro gaseoso es sumamente txico. Por esa razn, la leja debe almacenarse y
utilizarse solamente en zonas bien ventiladas. Adems, la leja no debe mezclarse con
cidos para evitar la liberacin rpida de cloro gaseoso. Muchos subproductos del
cloro pueden ser nocivos para el ser humano y el medio ambiente, de modo que debe
evitarse el uso indiscriminado de desinfectantes a base de cloro, y en particular de la
leja.
Dicloroisocianurato sdico
El dicloroisocianurato sdico (NaDCC) en polvo contiene un 60% de cloro libre. Las
soluciones preparadas con NaDCC en polvo a razn de 1,7 g/l y 8,5 g/l contendrn
1 g/l y 5 g/l de cloro libre, respectivamente. Los comprimidos de NaDCC suelen con-
tener el equivalente a 1,5 g de cloro libre por comprimido. Uno o cuatro comprimi-
dos disueltos en un litro de agua darn aproximadamente las concentraciones
requeridas de 1 g/l o 5 g/l, respectivamente. El NaDCC se puede almacenar de forma
fcil y segura tanto en polvo como en comprimidos. El NaDCC slido puede aplicarse
sobre las salpicaduras de sangre u otros lquidos que entraen un riesgo biolgico,
dejndolo actuar durante 10 minutos antes de retirarlo. Despus puede procederse a
la limpieza minuciosa de la zona afectada.
Cloraminas
Las cloraminas existen en forma de polvo que contiene aproximadamente un 25% de
cloro libre. Al liberar el cloro a menos velocidad que los hipocloritos, se requieren
concentraciones iniciales ms altas para obtener una eficacia equivalente a la de
92
aqullos. Por otro lado, las soluciones de cloramina no son inactivadas por la materia
orgnica con la misma intensidad que los hipocloritos y se recomienda una concen-
tracin de 20 g/l para situaciones tanto limpias como sucias.
Las soluciones de cloramina son prcticamente inodoras. No obstante, los objetos
sumergidos en ellas deben enjuagarse concienzudamente para eliminar todo residuo
de los agentes inertes que se aaden a los polvos de cloramina T (tosilcloramida
sdica).
Dixido de cloro
El dixido de cloro (ClO2) es un germicida, desinfectante y oxidante potente y de
accin rpida que a menudo tiene actividad a concentraciones inferiores a las
necesarias en el caso del cloro procedente de la leja. La forma gaseosa es inestable y
se descompone en cloro gaseoso (Cl2) y oxgeno gaseoso (O2), produciendo calor.
Sin embargo, el dixido de cloro es soluble en agua y estable en solucin acuosa.
Puede obtenerse de dos formas: 1) por generacin in situ, mezclando dos compo-
nentes distintos, el cido clorhdrico (HCl) y el clorito sdico (NaClO2), o 2)
encargando la forma estabilizada, que despus se activa en el laboratorio cuando se
necesita.
El dixido de cloro es el ms selectivo de los biocidas oxidantes. El ozono y el cloro
son mucho ms reactivos que el dixido de cloro y son consumidos por la mayora
de los compuestos orgnicos. En cambio, el dixido de cloro slo reacciona con los
compuestos de azufre reducido, las aminas secundarias y terciarias, y otros com-
puestos orgnicos muy reducidos y reactivos. Por consiguiente, con el dixido de cloro
puede conseguirse un residuo ms estable a dosis mucho menores que cuando se uti-
lizan cloro u ozono. Si se genera debidamente, el dixido de cloro, gracias a su selec-
tividad, puede usarse con ms eficacia que el ozono o el cloro en los casos de mayor
carga de materia orgnica.
Formaldehdo
El formaldehdo (HCHO) es un gas que mata todos los microorganismos y esporas
a temperaturas superiores a los 20C. Sin embargo, no tiene actividad contra los
priones.
Su accin es relativamente lenta y requiere una humedad relativa de alrededor del
70%. Se comercializa en forma de polmero slido (paraformaldehdo), en copos o
comprimidos, o como formol, solucin del gas en agua con aproximadamente 370 g/l
(37%) y con metanol (100 ml/l) como estabilizante. Ambas formulaciones se calien-
tan para liberar el gas, que se utiliza en la descontaminacin y la desinfeccin de espa-
cios cerrados como CSB y locales (vase ms adelante el apartado sobre
descontaminacin ambiental de locales). El formaldehdo (un 5% de formol en agua)
puede utilizarse como desinfectante lquido.
El formaldehdo es un agente presuntamente cancergeno. Se trata de un gas
peligroso de olor acre que puede irritar los ojos y las mucosas. As pues, debe
93
almacenarse y utilizarse con una campana extractora de vapores o en zonas bien ven-
tiladas. Deben observarse las normas nacionales de seguridad de las sustancias
qumicas.
Glutaraldehdo
Al igual que el formaldehdo, el glutaraldehdo (OHC(CH2)3CHO) tiene actividad
contra formas vegetativas de bacterias, esporas, hongos y virus con y sin envoltura
lipdica. No es corrosivo y su accin es ms rpida que la del formaldehdo. No
obstante, tarda varias horas en matar las esporas bacterianas.
El glutaraldehdo suele suministrarse en forma de solucin con una concentracin
de unos 20 g/l (2%); algunos productos antes de ser utilizados necesitan ser activa-
dos (alcalinizados) mediante la adicin de un compuesto de bicarbonato que se
suministra con el producto. La solucin activada puede volver a utilizarse durante 1
a 4 semanas, segn la formulacin y el tipo y la frecuencia de uso. Las tiras reactivas
indicadoras que se suministran con algunos productos slo dan una indicacin
aproximada de los niveles de glutaraldehdo activo disponible en las soluciones en uso.
Las soluciones de glutaraldehdo deben desecharse si estn turbias.
El glutaraldehdo es txico e irritante para la piel y las mucosas; debe evitarse el
contacto con l. Debe utilizarse con una campana extractora de vapores o en locales
bien ventilados. No se recomienda en forma de pulverizacin ni de solucin para
descontaminar superficies. Deben observarse las normas nacionales de seguridad de
las sustancias qumicas.
Compuestos fenlicos
Los compuestos fenlicos, un grupo amplio de productos, figuran entre los germici-
das ms antiguos. Sin embargo, los resultados de estudios de inocuidad ms recientes
recomiendan restringir su uso. Tienen actividad contra las formas vegetativas de las
bacterias y contra los virus con envoltura lipdica y, cuando estn debidamente for-
mulados, tambin son activos contra las micobacterias. No tienen actividad contra las
esporas y su actividad contra los virus sin envoltura lipdica es variable. Muchos pro-
ductos fenlicos se utilizan para descontaminar superficies ambientales, y algunos
(por ejemplo, el triclosn y el cloroxilenol) se encuentran entre los antispticos ms
usados.
El triclosn es comn en los productos para el lavado de manos. Tiene actividad
principalmente contra las formas vegetativas de las bacterias y es inocuo para la piel
y las mucosas. Sin embargo, en estudios de laboratorio se ha observado que las bac-
terias con resistencia inducida a bajas concentraciones de triclosn tambin muestran
resistencia a ciertos tipos de antibiticos. Se desconoce el alcance de esta observacin
sobre el terreno.
Algunos compuestos fenlicos son sensibles a la dureza del agua y pueden quedar
inactivados con aguas duras; por esa razn, deben diluirse con agua destilada o
desionizada.
94
No se recomiendan los compuestos fenlicos para las superficies que entren en

contacto con alimentos ni en zonas en las que haya nios pequeos. Pueden ser
absorbidos por el caucho y tambin pueden penetrar en la piel. Deben observarse las
normas nacionales en materia de seguridad de las sustancias qumicas.
Compuestos de amonio cuaternario

Muchos tipos de compuestos de amonio cuaternario se utilizan como mezclas y a
menudo en combinacin con otros germicidas, como los alcoholes. Tienen buena
actividad contra algunas bacterias en fase vegetativa y virus con envoltura lipdica.
Algunos tipos (por ejemplo, el cloruro de benzalconio) se utilizan como antispticos.
La actividad germicida de ciertos tipos de compuestos de amonio cuaternario se
reduce considerablemente con la materia orgnica, las aguas duras y los detergentes
aninicos. As pues, es necesario tener cuidado en la seleccin de los agentes emplea-
dos en la limpieza previa cuando se vayan a utilizar compuestos de amonio cuater-
nario para la desinfeccin. En las soluciones de estos compuestos pueden proliferar
bacterias potencialmente nocivas. Debido a su baja biodegradabilidad, estos com-
puestos tambin pueden acumularse en el medio ambiente.
Alcoholes
El etanol (alcohol etlico, C2H5OH) y el 2-propanol (alcohol isoproplico,
(CH3)2CHOH) tienen propiedades desinfectantes similares. Son activos contra las
formas vegetativas de las bacterias, los hongos y los virus con envoltura lipdica, pero
no contra las esporas. Su accin sobre los virus sin envoltura lipdica es variable. Para
conseguir la mxima eficacia deben utilizarse en concentraciones acuosas de aproxi-
madamente un 70% (v/v): las concentraciones ms altas o ms bajas pueden no tener
tanto poder germicida. Una de las grandes ventajas de las soluciones acuosas de
alcoholes es que no dejan residuo alguno en los objetos tratados.
Las mezclas con otros agentes son ms eficaces que el alcohol por s solo;
por ejemplo, el alcohol al 70% (v/v) con 100 g/l de formaldehdo, o el alcohol con
2 g/l de cloro libre. Las soluciones acuosas de etanol al 70% (v/v) pueden utilizarse en
la piel, las superficies de trabajo de las mesas de laboratorio y las CSB, as como
para sumergir pequeas piezas de instrumental quirrgico. Dado que el etanol puede
secar la piel, a menudo se mezcla con emolientes. Las friegas de alcohol se recomien-
dan para descontaminar manos ligeramente sucias en situaciones en las que no es
posible o prctico lavarlas. Sin embargo, hay que recordar que el etanol no tiene
actividad contra las esporas y quiz no mate todos los tipos de virus sin envoltura
lipdica.
Los alcoholes son voltiles e inflamables y no deben utilizarse en las proximidades
de llamas desnudas. Las soluciones de trabajo deben almacenarse en recipientes
apropiados para evitar la evaporacin. Los alcoholes pueden endurecer el caucho y
disolver ciertos tipos de cola. El inventario y el almacenamiento apropiados del etanol
en el laboratorio son sumamente importantes con el fin de evitar que se use para
95
aplicaciones distintas de la desinfeccin. Los frascos que contengan soluciones con

alcohol deben rotularse con claridad para evitar que sean tratados en la autoclave.
Yodo y yodforos
La accin de estos desinfectantes es anloga a la del cloro, aunque pueden ser ligera-
mente menos susceptibles a la inhibicin por la materia orgnica. El yodo puede
manchar los tejidos y las superficies del entorno, y en general no es adecuado como
desinfectante. Por otro lado, los yodforos y las tinturas de yodo son buenos antisp-
ticos. La povidona yodada es un agente de lavado quirrgico fiable e inocuo, y sirve
como antisptico cutneo preoperatorio. Los antispticos a base de yodo no suelen
ser adecuados para utilizarlos en material mdico/dental. El yodo no debe usarse en
objetos de aluminio o cobre.
El yodo puede ser txico. Los productos orgnicos a base de yodo deben almace-
narse a 410 C para evitar la proliferacin de bacterias potencialmente peligrosas en
ellos.
Perxido de hidrgeno y percidos

Como el cloro, el perxido de hidrgeno (H2O2) y los percidos son oxidantes enr-
gicos y pueden servir como potentes germicidas de amplio espectro. Son tambin ms
inocuos que el cloro para el ser humano y para el medio ambiente.
El perxido de hidrgeno se suministra en forma de solucin al 3% lista para usar
o como solucin acuosa al 30% que debe ser diluida hasta 510 veces su volumen en
agua esterilizada. Sin embargo, esas soluciones al 36% por s solas son relativamente
lentas y limitadas como germicidas. Los productos disponibles hoy en da tienen otros
ingredientes para estabilizar el contenido de perxido de hidrgeno, acelerar su accin
germicida y hacerlo menos corrosivo.
El perxido de hidrgeno puede utilizarse para descontaminar las superficies de
trabajo del laboratorio y de las CSB, y las soluciones ms potentes pueden servir
para desinfectar el material mdico/dental sensible al calor. El uso de perxido de
hidrgeno vaporizado o cido peractico (CH3COOOH) para la descontaminacin
de material mdico/quirrgico sensible al calor requiere equipo especializado.
El perxido de hidrgeno y los percidos pueden ser corrosivos para metales como
el aluminio, el cobre, el latn y el zinc, y tambin pueden descolorar tejidos, cabellos,
piel y mucosas. Los objetos tratados con ellos deben enjuagarse concienzudamente
antes del contacto con ojos y mucosas. Siempre se almacenarn alejados del calor y
protegidos de la luz.
Descontaminacin de espacios y superficies

La descontaminacin del espacio, el mobiliario y el equipo de laboratorio requiere
una combinacin de desinfectantes lquidos y gaseosos. Las superficies pueden
descontaminarse con una solucin de hipoclorito sdico (NaOCl); una solucin que
contenga 1 g/l de cloro libre puede ser apropiada para la limpieza general, pero se
96
recomiendan soluciones ms potentes (5 g/l) cuando se trate de situaciones de alto

riesgo. Para la descontaminacin de espacios y superficies, las soluciones de leja
pueden sustituirse por frmulas que contengan un 3% de perxido de hidrgeno
(H2O2).
Las salas y el equipo pueden descontaminarse por fumigacin con formaldehdo
gaseoso, que se obtiene calentando paraformaldehdo o hirviendo formol. Este pro-
cedimiento es sumamente peligroso y debe ser realizado por personal especialmente
adiestrado. Todas las aberturas del local (ventanas, puertas, entre otros) deben
cerrarse con cinta adhesiva o un material anlogo antes de que se desprenda el gas.
La fumigacin debe efectuarse a una temperatura ambiente de al menos 21 C y una
humedad relativa del 70% (vase tambin el apartado sobre descontaminacin de CSB
en este captulo).
Tras la fumigacin, la zona debe ventilarse completamente antes de permitir la
entrada de personal. Toda persona que entre en la sala antes de la ventilacin habr
de llevar mascarillas respiratorias apropiadas. Para neutralizar el formaldehdo puede
utilizarse bicarbonato amnico gaseoso.
La fumigacin de espacios reducidos con vapores de perxido de hidrgeno
tambin es eficaz, pero requiere equipo especializado para generar el vapor.
Descontaminacin de cmaras de seguridad biolgica

Para descontaminar las CSB de las clases I y II se dispone de aparatos autnomos que
generan, ponen en circulacin y neutralizan formaldehdo gaseoso de forma inde-
pendiente. Si no se dispone de ese equipo, debe colocarse la cantidad apropiada de
paraformaldehdo (concentracin final de 0,8% de paraformaldehdo en el aire) en
una sartn sobre una placa elctrica caliente. En una segunda placa caliente, tambin
dentro de la cmara, se coloca otra sartn con bicarbonato amnico en una cantidad
un 10% mayor que el paraformaldehdo de la primera sartn. Ambas placas deben
estar enchufadas fuera de la cmara para que se pueda controlar su funcionamiento
desde el exterior. Si la humedad relativa es inferior al 70%, tambin debe colocarse
una sartn con agua caliente en el interior de la cmara antes de sellar los bordes de
la ventana frontal con cinta adhesiva fuerte (cinta aislante, por ejemplo). Sobre la aber-
tura frontal y el orificio de evacuacin se fija con cinta adhesiva una lmina de pls-
tico grueso, con el fin de asegurar que el gas no pueda filtrarse a la sala. Los orificios
de penetracin de los cables elctricos que pasan por la abertura frontal tambin
deben cerrarse con cinta aislante.
Se enciende la placa con la sartn de paraformaldehdo y se apaga cuando se haya
evaporado totalmente. La cmara se deja en reposo durante al menos 6 horas.
Entonces se enciende la segunda placa y se permite que el bicarbonato amnico se
evapore. En ese momento se apaga la placa y se enciende el ventilador de la CSB
durante dos intervalos de unos dos segundos para permitir que el gas de bicarbonato
amnico circule por el interior. La cmara se dejar en reposo durante 30 min antes
de retirar el plstico de la abertura frontal y del orificio de salida de aire. Antes de
97
volver a utilizar la cmara se limpiarn sus superficies con un pao para eliminar los
residuos.
Lavado y descontaminacin de las manos

Siempre que sea posible, se llevarn guantes apropiados cuando se manipulen mate-
riales biolgicos peligrosos. A pesar de ello, los guantes no obvian la necesidad de que
el personal se lave las manos de forma regular y correcta. Las manos se lavarn despus
de manipular materiales biolgicos peligrosos y animales, y antes de abandonar el
laboratorio.
En la mayora de las situaciones, un lavado concienzudo de las manos con jabn
normal y agua basta para descontaminarlas, pero en las situaciones de alto riesgo se
recomienda utilizar jabones germicidas. Se formar espuma abundante con el jabn
y se frotarn bien las manos, durante un mnimo de 10 segundos; a continuacin se
aclararn en agua limpia y se secarn con una toalla de papel o un pao limpio
(tambin se pueden utilizar secadores de manos de aire caliente).
Se recomiendan los grifos accionados con el pie o el codo. Cuando no existan, debe
utilizarse una toalla de papel o pao para cerrar los mandos de los grifos con el fin
de evitar volver a contaminarse las manos ya lavadas.
Como ya se ha dicho, pueden realizarse friegas con alcohol en las manos para
descontaminarlas cuando estn ligeramente sucias y no se pueda lavarlas con agua y
jabn.
Desinfeccin y esterilizacin por calor

El calor es el agente fsico ms utilizado para la descontaminacin de patgenos. El
calor seco, que no es en absoluto corrosivo, se utiliza para tratar muchos objetos de
laboratorio que pueden soportar temperaturas de 160 C o ms durante dos a cuatro
horas. La combustin o incineracin (vase ms adelante) es tambin una forma de
calor seco. El calor hmedo es especialmente eficaz cuando se utiliza en autoclave.
La coccin no necesariamente mata todos los microorganismos o patgenos, pero
puede utilizarse como tratamiento mnimo de desinfeccin cuando no puedan apli-
carse o no estn disponibles otros mtodos, como la desinfeccin o descontaminacin
qumica, o el tratamiento en autoclave.
Los artculos esterilizados deben manipularse y guardarse de forma que se man-
tengan descontaminados hasta que se vuelvan a utilizar.
Tratamiento en autoclave
La aplicacin de vapor de agua saturado a presin (tratamiento en autoclave) es el
medio ms eficaz y fiable de esterilizar material del laboratorio. Para la mayora de los
propsitos, los ciclos siguientes garantizarn la esterilizacin del contenido de la auto-
clave siempre que se haya cargado correctamente:
1. 3 minutos a 134 C
98
4. 25 minutos a 115 C.
Hay distintos tipos de autoclaves, entre los que cabe citar los siguientes:
Autoclaves de desplazamiento por gravedad. En la figura 10 se muestra la construccin
general de una autoclave de desplazamiento por gravedad. El vapor entra en la cmara
a presin y desplaza el aire ms pesado hacia abajo, a travs de la vlvula del orificio
de salida, equipada con un filtro HEPA.
Autoclaves de prevaco. Estos aparatos permiten eliminar el aire de la cmara antes de
dar paso al vapor. El aire extrado se evacua a travs de una vlvula equipada con un
filtro HEPA. Al final del ciclo, el vapor se evacua automticamente. Estas autoclaves
pueden funcionar a 134 C, por lo que el ciclo de esterilizacin puede reducirse a tres
minutos. Son ideales para cargas de material poroso, pero no pueden utilizarse para
tratar lquidos debido al vaco.
Autoclaves de olla a presin calentadas por combustible. Este tipo de autoclaves
slo deben utilizarse si no se dispone de una autoclave de desplazamiento por
Figure 10. Autoclave de desplazamiento por gravedad
99
gravedad. Se cargan desde arriba y se calientan con gas, electricidad u otro com-
bustible. El vapor se produce por el calentamiento del agua en la base del recipiente;
el aire se desplaza en sentido ascendente por una abertura de descarga. Cuando se ha
sacado todo el aire, la vlvula de la abertura de descarga se cierra y se reduce el calor.
La presin y la temperatura aumentan hasta que la vlvula de seguridad funciona en
el nivel preestablecido. Este es el comienzo del tiempo de retencin. Al final del ciclo
se cierra la fuente de calor y se deja que la temperatura descienda a 80 C o menos
antes de abrir la tapa.
Carga de las autoclaves

El material y los objetos que se vayan a esterilizar deben agruparse sin apretarlos en
la cmara, de modo que el vapor pueda circular sin dificultad y el aire pueda salir
fcilmente. Las bolsas deben permitir que el vapor penetre en su contenido.
Precauciones en el uso de las autoclaves

Las reglas siguientes pueden reducir al mnimo los riesgos derivados del manejo de
cualquier recipiente a presin.
1. El manejo y el mantenimiento ordinario deben ser responsabilidad de personas
adiestradas.
2. Se realizar a intervalos regulares un programa de mantenimiento preventivo que
comprender la inspeccin de la cmara, el sellado de las puertas y todos los
calibradores y controles por parte de personal calificado.
3. El vapor de agua estar saturado y exento de sustancias qumicas (por ejemplo,
inhibidores de la corrosin) que podran contaminar los objetos que se estn
esterilizando.
4. Todo el material debe colocarse en recipientes que permitan una fcil evacuacin
del aire y una buena penetracin del calor; la cmara no estar sobrecargada, de
modo que el vapor alcance por igual a toda la carga.
5. En las autoclaves que no dispongan de un dispositivo de seguridad que impida
que la puerta se abra cuando la cmara est sometida a presin, es indispensable
que la vlvula central del vapor est cerrada y que se deje descender la tempe-
ratura por debajo de 80 C antes de abrir la puerta.
6. Cuando se introduzcan lquidos en la autoclave, la evacuacin debe ser lenta, pues
al sacarlos pueden hervir debido al sobrecalentamiento.
7. Los trabajadores deben llevar guantes y viseras de proteccin apropiadas al abrir
la autoclave, incluso cuando la temperatura haya bajado por debajo de los 80 C.
8. En la vigilancia regular del funcionamiento de la autoclave, se colocarn indi-
cadores biolgicos o termopares en el centro de cada carga. La vigilancia regular
mediante termopares y dispositivos de registro colocados en una carga ms des-
favorable es sumamente conveniente para determinar los ciclos de fun-
cionamiento ms adecuados.
100
9. El filtro de la rejilla de drenaje de la cmara (si existe) debe retirarse y limpiarse

todos los das.
10. Debe procurarse que las vlvulas de descarga de las autoclaves de olla a presin
no queden bloqueadas por papel u otro material presente en la carga.
Incineracin
La incineracin es un mtodo til para eliminar del laboratorio los cadveres de ani-
males y los desechos anatmicos y de otro tipo, con o sin descontaminacin previa
(vase el captulo 3). La incineracin de material infeccioso slo sustituye al
tratamiento en autoclave si el incinerador est sometido a control del laboratorio.
Una incineracin correcta exige disponer de un medio eficiente de control de la
temperatura y de una cmara de combustin secundaria. Muchos incineradores, espe-
cialmente los que tienen una sola cmara de combustin, no resultan satisfactorios
para tratar material infeccioso, cadveres de animales y plsticos. Esos materiales quiz
no se destruyan por completo y el efluente de la chimenea puede contaminar la atms-
fera con microorganismos, sustancias qumicas txicas y humo. No obstante, hay
muchas configuraciones satisfactorias de las cmaras de combustin; lo ideal es que
la temperatura en la cmara primaria sea de al menos 800 C y en la cmara secun-
daria de al menos 1000 C.
Los materiales destinados a la incineracin, incluso si se han descontaminado pre-
viamente, deben transportarse al incinerador en bolsas, preferiblemente de plstico.
Los encargados del incinerador deben recibir instrucciones apropiadas acerca de la
carga y el control de la temperatura. Tambin cabe sealar que el funcionamiento efi-
ciente de un incinerador depende en gran medida de que la combinacin de materi-
ales en los residuos que se estn tratando sea la adecuada.
Las posibles repercusiones ambientales negativas de los incineradores existentes o
en proyecto siguen siendo motivo de preocupacin, y prosiguen los esfuerzos enca-
minados a que los incineradores sean ms compatibles con el entorno y ms eficientes
en el uso de energa.
Eliminacin de desechos
La eliminacin de los desechos mdicos y de laboratorio est sometida a varias
reglamentaciones regionales, nacionales e internacionales. Deben consultarse las
ltimas versiones de los documentos pertinentes antes de disear y poner en prctica
un programa de manipulacin, transporte y eliminacin final de desechos biolgicos
peligrosos. En general, las cenizas procedentes de los incineradores pueden tratarse
igual que las basuras domsticas corrientes y ser evacuadas por los servicios locales.
Los desechos de la autoclave pueden ser eliminados en vertederos autorizados o por
incineracin fuera del laboratorio (vase el captulo 3).
Para ms informacin, vanse las referencias 13 y 29 a 39.
101
15. Introduccin al transporte de
sustancias infecciosas
El transporte de material infeccioso y potencialmente infeccioso est sometido a

reglamentaciones nacionales e internacionales estrictas. Esas reglamentaciones
describen el uso apropiado de materiales de embalaje/envasado, adems de otros
requisitos.
El personal de laboratorio debe enviar las sustancias infecciosas de acuerdo con las
normas de transporte aplicables, cuyo cumplimiento permitir:
1. reducir la probabilidad de que los embalajes/envases se estropeen y derramen su
contenido, y con ello
2. reducir el nmero de exposiciones que den lugar a posibles infecciones, y
3. mejorar la eficiencia de la entrega de los envos.
Reglamentacin internacional en materia de transportes

La reglamentacin relacionada con el transporte de material infeccioso por cualquier
medio de transporte se basa en las Recomendaciones relativas al transporte de mer-
cancas peligrosas (40). Esas recomendaciones de las Naciones Unidas han sido
elaboradas por el Comit de Expertos de las Naciones Unidas en Transporte de
Mercancas Peligrosas. Para que sea jurdicamente vinculante, la Reglamentacin
Modelo ha de ser introducida en las normas nacionales y las reglamentaciones modelo
internacionales por las autoridades competentes (por ejemplo, las Instrucciones
Tcnicas para el transporte sin riesgos de mercancas peligrosas por va area (41) de la
Organizacin de Aviacin Civil Internacional (OACI) en relacin con el transporte
areo, y el Acuerdo Europeo sobre el Transporte Internacional de Mercaderas Peligrosas
por Carretera (ADR) (42)).
La Asociacin de Transporte Areo Internacional (IATA) publica todos los aos
una gua sobre el transporte de sustancias infecciosas (Infectious Substances Shipping
Guidelines) (43). La gua de la IATA debe seguir como mnimo las Instrucciones
Tcnicas de la OACI, pero puede imponer restricciones adicionales. Cuando un envo
es transportado por un miembro de la Asociacin deben seguirse las directrices de
la IATA.
Puesto que la Reglamentacin Modelo para el Transporte de Mercancas Peligrosas es
un conjunto dinmico de recomendaciones sometido a modificaciones cada dos aos,
se remite al lector a las ltimas ediciones de las normas nacionales e internacionales
para consultar los textos reglamentarios aplicables.
102
15. INTRODUCCIN AL TRANSPORTE DE SUSTANCIAS INFECCIOSAS
La OMS acta en calidad de asesora ante el Comit de Expertos de las Naciones

Unidas en el Transporte de Mercancas Peligrosas. En la 13a edicin (2003) de la
Reglamentacin Modelo de las Naciones Unidas se introdujeron importantes cambios,
especialmente en lo que atae a las sustancias infecciosas (40). Puede solicitarse a la
OMS orientacin sobre los antecedentes de las enmiendas adoptadas (44).
La reglamentacin internacional no pretende reemplazar las normas locales o
nacionales. Sin embargo, en las situaciones en que no existan normas nacionales, debe
seguirse la reglamentacin internacional.
Es importante sealar que el transporte internacional de las sustancias infecciosas
tambin depende de la normativa nacional en materia de importacin y exportacin.
El sistema bsico de embalaje/envasado triple

El sistema de embalaje/envasado triple, que es el preferible para el transporte de sus-
tancias infecciosas y potencialmente infecciosas, se muestra a modo de ejemplo en la
figura 11. Este sistema de embalaje/envasado consta de tres componentes: el reci-
piente primario, el embalaje/envase secundario y el embalaje/envase externo.
El recipiente primario que contiene la muestra debe ser estanco, a prueba de fugas
y estar debidamente etiquetado en relacin con el contenido. Debe ir envuelto en
material absorbente suficiente para absorber todo el lquido en caso de rotura o fuga.
El recipiente primario se introduce en un segundo embalaje/envase protector
estanco y a prueba de fugas. Pueden colocarse varios recipientes primarios en un solo
embalaje/envase secundario. En algunos textos reglamentarios se incluyen lmites en
relacin con el volumen o el peso de las sustancias infecciosas envasadas.
El embalaje/envase externo protege el embalaje/envase secundario de los daos
fsicos durante el transporte. Los formularios de datos relativos a la muestra, las cartas
y dems material informativo que permitan identificarla o describirla, as como iden-
tificar al remitente y al destinatario, junto con toda la dems documentacin exigida,
tambin se incluirn de acuerdo con la reglamentacin vigente.
La Reglamentacin Modelo de las Naciones Unidas prescribe el uso de dos sistemas
diferentes de envasado triple. El sistema bsico es el indicado para el transporte de
diversas sustancias infecciosas, pero los organismos de alto riesgo deben enviarse
siguiendo normas ms estrictas. Para ms detalles sobre el uso de los distintos envases
segn los materiales que se vayan a enviar, se aconseja al lector que consulte la
reglamentacin nacional o internacional para conocer los textos normativos
aplicables.
Procedimiento de limpieza de derrames

En caso de que se produzca un derrame de material infeccioso o potencialmente infec-
cioso, se aplicar el siguiente procedimiento de limpieza:
1. Utilizar guantes y ropa protectora, e incluso proteccin facial y ocular si estuviera
indicada.
103
Embalaje/envasado y etiquetado de sustancias infecciosas de la categora A
Embalaje/envasado y etiquetado de sustancias infecciosas de la categora B
Figura 11. Ejemplos de sistemas de embalaje/envasado triple

(Ilustraciones amablemente cedidas por la IATA, Montreal (Canad))
104
15. INTRODUCCIN AL TRANSPORTE DE SUSTANCIAS INFECCIOSAS
2. Cubrir el derrame con paos o papel absorbente para contenerlo.

3. Verter un desinfectante apropiado sobre el papel absorbente y la zona inmediata-
mente circundante (en general, son apropiadas las soluciones de leja al 5%; sin
embargo, para los derrames en aeronaves deben utilizarse desinfectantes a base de
amonio cuaternario).
4. Aplicar el desinfectante en crculos concntricos, comenzando por el exterior de
la superficie del derrame y procediendo hacia el centro.
5. Despus del tiempo necesario (por ejemplo, 30 minutos), retirar todos los mate-
riales. Si hay vidrios rotos u objetos punzantes, juntarlos con una pala o un trozo
de cartn rgido y depositarlos en un recipiente a prueba de perforaciones para
su eliminacin.
6. Limpiar y desinfectar la zona afectada por el derrame (en caso necesario, repetir
los pasos 2 a 5).
7. Colocar el material contaminado en un recipiente para desechos a prueba de fugas
y de perforaciones.
8. Tras una desinfeccin satisfactoria, informar a las autoridades competentes de que
el lugar ha quedado descontaminado.
105
PARTE V
Introduccin a
la biotecnologa
16. Bioseguridad y tecnologa del
ADN recombinante
La tecnologa del ADN recombinante entraa la combinacin de informacin gentica

procedente de distintas fuentes para crear organismos genticamente modificados
(OGM) que pueden no haber existido antes en la naturaleza. En un principio, los espe-
cialistas en biologa molecular expresaron cierta preocupacin por la posibilidad de
que esos organismos tuvieran propiedades impredecibles y perjudiciales y pudieran
representar un riesgo biolgico en caso de que salieran de los laboratorios. Esa pre-
ocupacin fue el objeto de una conferencia cientfica celebrada en Asilomar (Califor-
nia, EE.UU.) en 1975 (45), en la que se debatieron cuestiones de seguridad y se
propusieron las primeras directrices en materia de tecnologa del ADN recombinante.
La experiencia obtenida a lo largo de los ms de 25 aos de investigacin que
siguieron ha demostrado que la ingeniera gentica puede desarrollarse en condiciones
de seguridad cuando se realizan las debidas evaluaciones de riesgos y se adoptan las
medidas de seguridad apropiadas.
La tecnologa del ADN recombinante, tambin conocida como ingeniera gentica,
se utiliz por primera vez para clonar fragmentos de ADN en huspedes bacterianos
a fin de sobreexpresar productos gnicos concretos destinados al estudio. Las molcu-
las de ADN recombinante tambin se han utilizado para crear organismos gentica-
mente modificados, como animales transgnicos o con genes inactivados (knock-out),
as como plantas transgnicas.
Esta tecnologa ya ha tenido un enorme impacto en la biologa y la medicina, y
probablemente tenga una influencia an mayor en el futuro, ahora que se ha deter-
minado la secuencia completa de nucletidos del genoma humano. Gracias a la inge-
niera gentica podrn estudiarse decenas de miles de genes cuya funcin an se
desconoce. La terapia gnica puede llegar a convertirse en el tratamiento habitual de
ciertas enfermedades, y probablemente se obtengan nuevos vectores para la trans-
ferencia de genes mediante tcnicas de ingeniera gentica. Adems, las plantas trans-
gnicas producidas mediante esta tecnologa pueden desempear un papel cada vez
ms importante en la agricultura moderna.
Los experimentos que supongan la creacin o el uso de OGM deben realizarse
despus de efectuar una evaluacin del riesgo biolgico. Las propiedades patgenas y
cualquier peligro potencial asociado a esos organismos pueden ser nuevos y no estar
bien caracterizados. Hay que evaluar las propiedades del organismo donante, la
naturaleza de las secuencias de ADN que van a transferirse, las propiedades del
109
organismo receptor y las propiedades del entorno. Esos factores ayudarn a determi-
nar el nivel de bioseguridad que se necesita para manipular sin riesgo el OGM resul-
tante y a identificar los sistemas de contencin biolgica y fsica que habr que emplear.
Consideraciones de bioseguridad en relacin con los sistemas

de expresin biolgica
Los sistemas de expresin biolgica constan de vectores y clulas husped. Para que
sean eficaces y puedan utilizarse sin riesgo, es preciso satisfacer varios criterios. Un
ejemplo de sistema de expresin biolgica es el plsmido pUC18, que se utiliza a
menudo como vector de clonacin en combinacin con clulas de Escherichia coli K12
y ha sido completamente secuenciado. De su plsmido precursor pBR322 se han
eliminado todos los genes necesarios para la expresin en otras bacterias. E. coli K12
es una cepa no patgena que no puede colonizar permanentemente el intestino del
ser humano ni de los animales sanos. Pueden llevarse a cabo sin riesgo experimentos
ordinarios de ingeniera gentica en E. coli K12/pUC18 en el nivel de bioseguridad 1,
siempre que los productos de la expresin de ADN extrao insertado no exijan
mayores niveles de bioseguridad.
Consideraciones de bioseguridad en relacin con los vectores de expresin

Puede ser necesario trabajar en niveles de bioseguridad ms altos en los siguientes
casos:
1. Cuando la expresin de secuencias de ADN derivadas de organismos patgenos
pueda aumentar la virulencia del OGM
2. Cuando las secuencias de ADN insertadas no estn bien caracterizadas, por
ejemplo durante la preparacin de genotecas de ADN genmico de micro-
organismos patognicos
3. Cuando los productos gnicos puedan tener actividad farmacolgica
4. Cuando los productos gnicos sean toxinas.
Vectores vricos para la transferencia de genes

Los vectores vricos, por ejemplo los de adenovirus, se utilizan para transferir genes a
otras clulas. Esos vectores carecen de ciertos genes necesarios para la replicacin
vrica y son propagados en lneas celulares que complementan el defecto.
Las poblaciones de esos vectores pueden contaminarse con virus que tienen intacta
la capacidad de replicacin, generados por sucesos poco frecuentes de recombinacin
espontnea en las lneas celulares de propagacin, o procedentes de una purificacin
insuficiente. Esos vectores deben manipularse al mismo nivel de bioseguridad que el
adenovirus del que proceden.
Animales transgnicos y con genes inactivados (knock-out)

Los animales que llevan informacin gentica extraa (animales transgnicos) deben
manipularse en niveles de contencin apropiados para las caractersticas de los pro-
110
16. BIOSEGURIDAD Y TECNOLOGA DEL ADN RECOMBINANTE
ductos de los genes extraos. Los animales en los que se han suprimido de forma selec-
tiva ciertos genes (knock-out) no suelen entraar riesgos biolgicos particulares.
Cabe citar como ejemplos de animales transgnicos los animales que expresan
receptores de virus normalmente incapaces de infectar a esa especie. Si esos animales
salieran del laboratorio y transmitieran el transgn a la poblacin animal salvaje, en
teora podra generarse un reservorio animal de esos virus en particular.
Esta posibilidad se ha examinado en el caso de los poliovirus y es particularmente
pertinente en el contexto de la erradicacin de la poliomielitis. Los ratones trans-
gnicos, generados en distintos laboratorios, que expresaban el receptor de poliovirus
humanos eran susceptibles a la infeccin por poliovirus por varias vas de inoculacin,
y la enfermedad resultante era anloga a la poliomielitis humana desde los puntos de
vista histopatolgico y clnico. Sin embargo, el modelo murino difiere del ser humano
en que la replicacin de los poliovirus administrados por va oral en el tubo digestivo
es poco eficiente o no se produce. Por consiguiente, es muy poco probable que, de
escaparse esos ratones transgnicos de un laboratorio, se generase un nuevo reservo-
rio animal de poliovirus. A pesar de todo, este ejemplo indica que en cada nueva lnea
de animales transgnicos es preciso efectuar estudios detallados para determinar las
vas por las que pueden infectarse los animales, el tamao del inculo necesario para
que se produzca una infeccin y el grado de excrecin de virus por parte de los ani-
males infectados. Adems, deben adoptarse todas las medidas posibles para garanti-
zar una contencin estricta de los ratones transgnicos receptores.
Plantas transgnicas
Las plantas transgnicas que expresan genes que confieren tolerancia a los herbicidas
o resistencia a los insectos son actualmente objeto de una controversia considerable
en muchos lugares del mundo. El debate gira en torno a la seguridad de esas plantas
cuando se utilizan como alimentos, as como a las consecuencias ecolgicas a largo
plazo de su cultivo.
Las plantas transgnicas que expresan genes de origen animal o humano se utilizan
para elaborar productos medicinales y nutricionales. Una evaluacin del riesgo deter-
minar el nivel de bioseguridad ms apropiado para la produccin de esas plantas.
Evaluacin de riesgos en relacin con los organismos

genticamente modificados
Las evaluaciones de riesgos para trabajar con organismos genticamente modificados
(OGM) deben tener en cuenta las caractersticas de los organismos donantes y los
organismos receptores/huspedes.
Entre los ejemplos de caractersticas que hay que tener presentes cabe citar:
Riesgos derivados directamente del gen insertado (organismo donante)

Es preciso realizar una evaluacin en aquellas situaciones en las que el producto del
gen insertado tenga una actividad biolgica o farmacolgica que pueda resultar
daina, como:
111
1. Toxinas
2. Citoquinas
3. Hormonas
4. Reguladores de la expresin gnica
5. Factores de virulencia o potenciadores de la virulencia
6. Secuencias oncognicas
7. Resistencia a antibiticos
8. Alrgenos.
El examen de esos casos debe incluir una estimacin del nivel de expresin necesario
para conseguir actividad biolgica o farmacolgica.
Riesgos asociados al receptor/husped

1. Susceptibilidad del husped
2. Patogenicidad de la cepa husped, incluida la virulencia, la infectividad y la pro-
duccin de toxinas
3. Modificacin de la gama de huspedes
4. Estado inmunitario del receptor
5. Consecuencias de la exposicin.
Riesgos derivados de la alteracin de rasgos patognicos existentes

Muchas modificaciones no utilizan genes cuyos productos sean intrnsecamente
nocivos, pero pueden producirse efectos adversos de resultas de la alteracin de
caractersticas patognicas o no patognicas existentes. La modificacin de genes nor-
males puede alterar la patogenicidad. Para intentar determinar esos riesgos, pueden
tenerse en cuenta los siguientes aspectos (la lista no es exhaustiva):
1. Hay un aumento de la infectividad o la patogenicidad?
2. Podra superarse cualquier mutacin incapacitante en el receptor de resultas de
la insercin del gen extrao?
3. Codifica el gen extrao un determinante de patogenicidad de otro organismo?
4. Si el ADN extrao incluye un determinante de patogenicidad, cabe prever que
ese gen pudiera contribuir a la patogenicidad del OGM?
5. Se dispone de tratamiento?
6. Se ver afectada la susceptibilidad del OGM a los antibiticos u otra forma de
tratamiento a consecuencia de la modificacin gentica?
7. Podra conseguirse la erradicacin del OGM?
Otras consideraciones
El uso de animales o plantas enteras con fines experimentales tambin merece una
consideracin cuidadosa. Los investigadores deben cumplir las normas, restricciones
y requisitos para trabajar con OGM vigentes en los pases y las instituciones en los
que se desarrolla su labor.
112
16. BIOSEGURIDAD Y TECNOLOGA DEL ADN RECOMBINANTE
Los pases pueden contar con autoridades nacionales encargadas de elaborar direc-
trices para trabajar con OGM que pueden ayudar a los cientficos a clasificar su labor
en el nivel de bioseguridad apropiado. En algunos casos la clasificacin puede variar
de un pas a otro; quiz un pas decida asignar el trabajo a un nivel ms alto o ms
bajo cuando aparece nueva informacin sobre un nuevo sistema de vector/husped.
La evaluacin del riesgo es un proceso dinmico que tiene en cuenta los nuevos
acontecimientos y los avances cientficos. La realizacin de las debidas evaluaciones
del riesgo garantizar que los beneficios de la tecnologa del ADN recombinante sigan
estando al alcance de la humanidad en los aos venideros.
Para ms informacin, consltense las referencias 17 y 46 a 48.
113
PARTE VI
Seguridad qumica y elctrica
y proteccin contra incendios
17. Sustancias qumicas peligrosas
El personal que trabaja en los laboratorios de microbiologa est expuesto no slo a

microorganismos patognicos, sino tambin a los peligros que entraan las sustan-
cias qumicas. Es importante que el personal tenga los debidos conocimientos acerca
de los efectos txicos de esas sustancias qumicas, las vas de exposicin y los peligros
que pueden estar asociados a su manipulacin y almacenamiento (vase el anexo 5).
Los fabricantes y/o proveedores de sustancias qumicas facilitan hojas informativas
con datos sobre la seguridad de los materiales y otras informaciones sobre los peli-
gros qumicos. Esas hojas deben estar disponibles en los laboratorios donde se uti-
lizan esas sustancias, por ejemplo como parte de un manual de seguridad o de
operaciones.
Vas de exposicin
La exposicin a sustancias qumicas peligrosas puede darse por las siguientes vas:
1. Inhalacin
2. Contacto
3. Ingestin
4. Jeringuillas
5. Heridas en la piel.
Almacenamiento de sustancias qumicas

En el laboratorio slo deben conservarse las cantidades de sustancias qumicas que
sean necesarias para el uso diario. Las cantidades importantes deben guardarse en
locales o edificios destinados especialmente a este fin.
Las sustancias qumicas nunca deben almacenarse por orden alfabtico.
Normas generales en relacin con las incompatibilidades qumicas

Para evitar los incendios y/o las explosiones, las sustancias que aparecen en la columna
izquierda del cuadro 13 deben almacenarse y manipularse de modo que no puedan
entrar en contacto con las sustancias correspondientes de la columna derecha del
mismo cuadro.
Efectos txicos de las sustancias qumicas

Algunas sustancias qumicas son perjudiciales para la salud de quienes las manipulan
o inhalan sus vapores. Aparte de los venenos manifiestos, hay sustancias que tienen
117
Cuadro 13. Normas generales en relacin con las incompatibilidades qumicas

CATEGORA DE SUSTANCIAS SUSTANCIAS INCOMPATIBLES
Metales alcalinos, como el sodio, potasio, Dixido de carbono, hidrocarburos clorados, agua
cesio y litio
Halgenos Amoniaco, acetileno, hidrocarburos
cidos actico, sulfhdrico y sulfrico, Agentes oxidantes, como los cidos crmico y
anilina, hidrocarburos ntrico, los perxidos o los permanganatos
diversos efectos txicos. Las vas respiratorias, la sangre, los pulmones, el hgado, los
riones y el aparato digestivo, as como otros rganos y tejidos, pueden sufrir efectos
adversos o padecer lesiones graves. Se sabe que ciertas sustancias qumicas son can-
cergenas o teratgenas.
La inhalacin de los vapores de ciertos disolventes puede tener efectos txicos.
Adems de los efectos ms graves antes sealados, la exposicin puede provocar
trastornos que, aunque no tengan efectos inmediatamente apreciables en la salud, en
ocasiones producen sntomas como falta de coordinacin, embotamiento y otros
anlogos, que pueden aumentar la propensin a los accidentes.
La exposicin prolongada o repetida a la fase lquida de muchos disolventes orgni-
cos puede provocar lesiones cutneas. Ello puede deberse al efecto lipoltico de los
disolventes, pero tambin pueden presentarse efectos corrosivos y alrgicos.
Para ms informacin acerca de los efectos txicos de las sustancias qumicas, vase
el anexo 5.
Sustancias qumicas explosivas

Las azidas, que a menudo se utilizan en soluciones antibacterianas, no deben entrar
en contacto con el cobre ni el plomo (por ejemplo, en tuberas de desage y alcan-
tarillado), ya que pueden explotar violentamente cuando se someten a un impacto,
aunque sea ligero.
Los teres que se conservan desde hace tiempo y que han cristalizado son suma-
mente inestables y potencialmente explosivos.
El cido perclrico, si se deja que se seque en la madera, ladrillos o tejidos, explotar
y provocar un incendio con el impacto.
El cido pcrico y los picratos detonan por la accin del calor y los impactos.
Derrame de sustancias qumicas

La mayora de los fabricantes de sustancias qumicas para laboratorios distribuyen
grficos que describen los mtodos para tratar los derrames. Tambin se encuentran
en el comercio grficos y estuches de material para casos de derrame. Los grficos
118
17. SUSTANCIAS QUMICAS PELIGROSAS
pertinentes debern exponerse en el laboratorio en lugar destacado. Tambin deber

disponerse del siguiente equipo:
1. Estuches especiales de material para derrames qumicos
2. Ropa protectora: guantes de goma fuertes, chanclos o botas de agua, mascarillas
respiratorias
3. Escobas y palas para el polvo
4. Pinzas para recoger los trozos de vidrio
5. Bayetas, trapos y toallas de papel
6. Cubos
7. Carbonato sdico (Na2CO3) o bicarbonato sdico (NaHCO3) para neutralizar
cidos y sustancias qumicas corrosivas
8. Arena (para cubrir los derrames de sustancias alcalinas)
9. Detergente no inflamable.
En caso de que se produzca un derrame qumico importante, debe procederse como
sigue:
1. Notificar el incidente al funcionario de seguridad que corresponda.
2. Evacuar del local al personal no indispensable.
3. Atender a las personas que puedan haberse contaminado.
4. Si el material derramado es inflamable, extinguir todas las llamas desnudas, cortar
el gas del local afectado y de los locales adyacentes, abrir las ventanas (si es posible),
y cortar la electricidad de los aparatos que puedan producir chispas.
5. Evitar la respiracin de vapores del material derramado.
6. Establecer una ventilacin de salida si es posible hacerlo con seguridad.
7. Obtener el material necesario (vase ms arriba) para limpiar el material derra-
mado.
Gases comprimidos y licuados

En el cuadro 14 se ofrece informacin sobre el almacenamiento de gases comprimi-
dos y licuados.
119
Cuadro 14. Almacenamiento de gases comprimidos y licuados

RECIPIENTE INFORMACIN SOBRE EL ALMACENAMIENTO
Bombonas de gas comprimido Se fijarn de forma segura (por ejemplo, con una cadena)
y recipientes de gas licuadoa,b a la pared o a una mesa slida, para que no puedan
soltarse inadvertidamente.
Se transportarn debidamente tapadas y en carretillas.
Las bombonas de reserva se guardarn en otro edificio
a alguna distancia del laboratorio; el local estar bien
cerrado y debidamente identificado.
No se situarn cerca de radiadores, llamas desnudas u
otras fuentes de calor, aparatos elctricos que produzcan
chispas o bajo la luz solar directa.
Bombonas pequeas de gas de No deben incinerarse.

un solo usoa,b
a
La vlvula principal de alta presin debe cerrarse cuando el equipo no est en uso y cuando el local est
vaco.
b
Los locales donde se utilicen bombonas de gas inflamable deben identificarse mediante signos de adver-
tencia en las puertas.
Si se desea ms informacin, vanse las referencias 1 y 49 a 51, y el anexo 5.
120
18. Otros peligros en el laboratorio
El personal que trabaja en el laboratorio puede enfrentarse a peligros debidos a formas

de energa como el fuego, la electricidad, las radiaciones o el ruido. En este captulo
se ofrece informacin acerca de cada una de ellas.
Peligro de incendio
Es indispensable que haya una estrecha cooperacin entre los funcionarios de seguri-
dad y los servicios locales de prevencin de incendios. Aparte de los riesgos debidos
a las sustancias qumicas, deben examinarse los efectos del incendio en la posible
diseminacin de material infeccioso. Esto puede ser determinante a la hora de decidir
si es preferible extinguir o contener el incendio.
Conviene contar con la ayuda de los servicios locales de prevencin de incendios
para la capacitacin del personal del laboratorio en lo que se refiere a la prevencin
de incendios, las medidas inmediatas en caso de incendio y el uso del equipo de lucha
contra incendios.
En cada sala y en los pasillos y vestbulos deben figurar de forma destacada adver-
tencias sobre incendios, instrucciones e indicaciones de las vas de salida.
Las causas ms comunes de incendios en los laboratorios son las siguientes:
1. Sobrecarga de los circuitos elctricos
2. Mal mantenimiento de la instalacin elctrica, como cables mal aislados o con el
aislante en mal estado
3. Tuberas de gas y cables elctricos demasiado largos
4. Equipo que se deja conectado sin necesidad
5. Equipo que no est diseado para el laboratorio
6. Llamas desnudas
7. Tuberas de gas en mal estado
8. Manipulacin y almacenamiento indebidos de material inflamable o explosivo
9. Separacin indebida de sustancias qumicas incompatibles
10. Aparatos que producen chispas en las proximidades de sustancias y vapores
inflamables
11. Ventilacin indebida o insuficiente.
El equipo de lucha contra incendios debe colocarse cerca de las puertas de las salas
y en puntos estratgicos de los pasillos y vestbulos. Ese equipo debe comprender
121
Cuadro 15. Tipos y usos de extintores de incendios

TIPO USO NO USAR PARA:
Agua Papel, madera, tejidos Incendios elctricos,

lquidos inflamables,
metales incendiados
Gases extintores de CO2 Lquidos y gases inflamables, Metales alcalinos, papel

incendios elctricos
Polvo seco Lquidos y gases inflamables, metales Equipo e instrumentos

alcalinos, incendios elctricos reutilizables, pues los
residuos son muy
difciles de eliminar
Espuma Lquidos inflamables Incendios elctricos
mangueras, cubos (de agua o arena) y un extintor. Los extintores deben ser inspec-
cionados y mantenidos peridicamente y debe respetarse su vida til. En el cuadro 15
se indican los tipos y usos particulares de los extintores de incendios.
Para ms informacin consltese la referencia 49.
Peligros elctricos
Es indispensable que todas las instalaciones y el equipo elctricos sean inspecciona-
dos y probados con regularidad, incluida la toma de tierra.
Los circuitos elctricos del laboratorio que lo requieran deben disponer de
interruptores de circuito e interruptores por fallo de la toma de tierra. Los
interruptores de circuito no protegen a las personas: estn concebidos para proteger
los cables de las sobrecargas elctricas y con ello evitar los incendios. Los interrup-
tores por fallo de la toma de tierra tienen por objeto proteger a las personas contra
los choques elctricos.
Todo el equipo elctrico del laboratorio debe tener toma de tierra, preferiblemente
mediante enchufes de tres espigas.
Todo el equipo elctrico del laboratorio debe ajustarse a las normas y los cdigos
nacionales de seguridad elctrica.
Ruido
El exceso de ruido es perjudicial con el tiempo. Algunos tipos de equipo de laborato-
rio, como ciertos sistemas de lser, as como las instalaciones que albergan animales,
pueden exponer a los trabajadores a un ruido considerable. Pueden realizarse
mediciones del ruido para determinar el riesgo correspondiente. Cuando as lo justi-
fiquen los datos, cabe estudiar la posibilidad de instalar controles tcnicos como
cubiertas o barreras en torno al equipo ruidoso o entre las zonas ruidosas y otras zonas
122
18. OTROS PELIGROS EN EL LABORATORIO
de trabajo. En los lugares donde no pueda reducirse en nivel de ruido y el personal

del laboratorio sufra habitualmente una exposicin excesiva, debe ponerse en marcha
un programa de conservacin de la audicin que incluya el uso de proteccin audi-
tiva cuando se trabaja en condiciones de ruido excesivo y un programa de vigilancia
mdica para determinar los efectos del ruido en los trabajadores.
Radiaciones ionizantes
La proteccin radiolgica trata de proteger a los seres humanos contra los efectos per-
judiciales de las radiaciones ionizantes, entre los que se incluyen los siguientes:
1. Efectos somticos, por ejemplo sntomas clnicos observables en las personas
expuestas. Entre ellos figuran los tumores inducidos por radiaciones, como la
leucemia y los cnceres de hueso, pulmn y piel, cuya aparicin puede producirse
muchos aos despus de la irradiacin. Entre otros efectos somticos menos
graves figuran lesiones cutneas leves, alopecia, trastornos hematolgicos, lesiones
gastrointestinales y formacin de cataratas.
2. Efectos hereditarios, es decir sntomas observados en los descendientes de los indi-
viduos expuestos. Los efectos hereditarios de la exposicin de las gnadas incluyen
las lesiones cromosmicas y las mutaciones gnicas. La irradiacin de las clulas
germinales de las gnadas en dosis elevadas tambin puede provocar la muerte
celular, que produce trastornos de la fecundidad en ambos sexos o cambios
menstruales en las mujeres. La exposicin del feto, particularmente entre las
semanas 8a a 15a del embarazo, puede aumentar el riesgo de malformaciones
congnitas, deficiencias mentales o cnceres inducidos por la radiacin ms
adelante en la vida.
Principios de la proteccin contra las radiaciones ionizantes

Para limitar los efectos nocivos de las radiaciones ionizantes, el uso de radioistopos
debe ser controlado y cumplir las normas nacionales aplicables. La proteccin contra
las radiaciones debe seguir cuatro principios:
1. Reducir al mnimo el tiempo de exposicin a la radiacin.
2. Aumentar al mximo la distancia de la fuente de radiacin.
3. Proteger la fuente de radiacin.
4. Sustituir el uso de radionclidos por tcnicas no radiomtricas.
1. Tiempo. El tiempo de exposicin durante las manipulaciones de material radio-
activo puede reducirse de las siguientes formas:
Practicando tcnicas nuevas y an poco conocidas sin utilizar el radionclido
hasta que se dominen esas tcnicas
Trabajando con los radionclidos de forma concienzuda y oportuna, sin prisas
Velando por que todas las fuentes radioactivas se devuelvan a su lugar de alma-
cenamiento inmediatamente despus de usarlas
Retirando los residuos radioactivos del laboratorio a intervalos frecuentes
123
Pasando el menor tiempo posible en la zona de radiaciones del laboratorio

Gestionando y planificando con eficiencia el tiempo de manipulacin de mate-
rial radiactivo en el laboratorio.
Cuanto menos tiempo se pase en un campo de irradiacin, menor ser la dosis
personal recibida, de acuerdo con la ecuacin siguiente:
2. Distancia. La intensidad de la dosis de la mayor parte de las radiaciones g y X es

inversamente proporcional al cuadrado de la distancia a la fuente:
Si se duplica la distancia a la fuente de radiacin, la exposicin queda reducida a

la cuarta parte en el mismo periodo de tiempo. Se utilizan diversos dispositivos y
aparatos auxiliares para aumentar la distancia entre el trabajador y la fuente de
radiacin, como pinzas largas, abrazaderas y pipeteadores a distancia. Obsrvese
que un pequeo aumento de la distancia puede dar lugar a una disminucin con-
siderable de la intensidad de la dosis.
3. Blindaje. Los blindajes que absorben o atenan la radiacin, situados entre la
fuente y el trabajador u otros ocupantes del laboratorio, ayudarn a limitar su
exposicin. El tipo y el grosor de cualquier material de blindaje dependen de la
capacidad de penetracin (tipo y energa) de la radiacin. Una barrera de 1,31,5
cm de material acrlico, madera o metal ligero protege contra partculas b de alta
energa, mientras que para proteger contra las radiaciones g y X de alta energa se
necesita plomo de alta densidad.
4. Sustitucin. Los materiales basados en radionclidos no deben utilizarse si hay
otras tcnicas disponibles. Si no es posible la sustitucin, se utilizar el radion-
clido que tenga el menor poder de penetracin o la menor energa.
Sistemas seguros de trabajo con radionclidos

Las normas relativas al trabajo con sustancias radiactivas deben tener en cuenta cuatro
zonas:
1. Zona de radiaciones
2. Zona de mesas de trabajo
3. Zona de desechos radiactivos
4. Registros y respuesta a las emergencias.
Entre las normas ms importantes para trabajar con radionclidos figuran las
siguientes:
1. Zona de radiaciones
Slo se deben utilizar sustancias radiactivas en zonas exclusivamente desti-
nadas a ello.
124
18. OTROS PELIGROS EN EL LABORATORIO
Figura 12. Smbolo interna-

cional de peligro
de irradiacin
Slo se permitir la presencia del personal indispensable.

Se utilizar equipo de proteccin personal: batas de laboratorio, gafas de
seguridad y guantes desechables.
Se vigilarn las exposiciones del personal a las radiaciones.
Los laboratorios en los que se utilizan radionclidos deben disearse de modo que
se simplifiquen las operaciones de contencin, limpieza y descontaminacin. La
zona de trabajo con radionclidos debe situarse en una pequea sala adyacente al
laboratorio principal o en una zona exclusiva dentro del laboratorio, separada de
otras actividades. La entrada a la zona de radiaciones se demarcar con el smbolo
internacional de radiacin (figura 12):
2. Zona de mesas de trabajo
Utilizar bandejas para derrames cubiertas con material absorbente desechable.
Limitar las cantidades de radionclidos.
Blindar las fuentes de radiacin en las zonas de radiaciones, de mesas de
trabajo y de desechos radiactivos.
Marcar los recipientes de materiales radiactivos con el smbolo apropiado,
anotando tambin la identidad del radionclido, su actividad y la fecha del
anlisis.
Utilizar medidores de la radiacin para vigilar las zonas de trabajo, la ropa
protectora y las manos una vez terminado el trabajo.
Utilizar para el transporte recipientes debidamente blindados.
3. Zona de desechos radiactivos
Retirar con frecuencia los desechos radiactivos de la zona de trabajo.
4. Registros y respuesta de emergencia
Mantener registros apropiados del uso y la eliminacin de material radiactivo.
Repasar los registros dosimtricos para ver si hay materiales que superan los
lmites de dosis.
125
Elaborar y poner en prctica peridicamente planes de respuesta de

emergencia.
En caso de emergencia, prestar ayuda en primer lugar a las personas heridas.
Limpiar concienzudamente las zonas contaminadas.
Pedir asistencia a la oficina de seguridad, si existe.
Redactar y mantener informes sobre los incidentes.
126
PARTE VII
Organizacin y formacin en
materia de seguridad
19. El funcionario de bioseguridad
y el comit de bioseguridad
Es fundamental que cada servicio de laboratorio cuente con una poltica integral de
seguridad, un manual de seguridad y programas de apoyo para su aplicacin. La
responsabilidad de todo ello incumbe normalmente al director o jefe del instituto o
laboratorio de que se trate, quien puede delegar ciertas funciones en un funcionario
de bioseguridad o en otros especialistas apropiados.
La seguridad de laboratorio incumbe asimismo a todos los supervisores y emplea-
dos del laboratorio; cada empleado deber ser responsable de su propia seguridad y
de la de sus colegas. Se espera de los empleados que lleven a cabo su trabajo en condi-
ciones de seguridad y comuniquen a sus supervisores cualesquiera actos, condiciones
o incidentes que atenten contra la seguridad. Conviene que personal interno o externo
realice evaluaciones peridicas de la seguridad.
Funcionario de bioseguridad
Siempre que sea posible se designar un funcionario de bioseguridad cuya misin con-
sistir en cerciorarse de que en todo el laboratorio se apliquen los planes y programas
de bioseguridad. Ese funcionario desempear esas funciones en nombre del director
del instituto o laboratorio. En las instituciones pequeas, el funcionario de biose-
guridad puede ser un microbilogo o un tcnico, miembro del personal, que se
encargue a tiempo parcial de las funciones de seguridad. Sea cual sea el grado de
participacin en las labores de bioseguridad, la persona designada deber poseer la
competencia profesional necesaria para sugerir, revisar y aprobar actividades concre-
tas que sigan los procedimientos apropiados de contencin biolgica y bioseguridad.
El funcionario de bioseguridad aplicar las normas, los reglamentos y las directrices
nacionales e internacionales pertinentes, adems de ayudar al laboratorio a elaborar
procedimientos normalizados de operacin. La persona designada deber tener for-
macin tcnica en microbiologa y bioqumica, as como en ciencias fsicas y biol-
gicas bsicas. Tambin es muy conveniente que tenga conocimiento de las prcticas
clnicas y de laboratorio y de la seguridad en esos entornos, incluido el equipo de con-
tencin, as como de los principios de construccin tcnica relacionados con el diseo,
el funcionamiento y el mantenimiento de las instalaciones. Tambin debe tener
capacidad para comunicarse de manera eficaz con el personal administrativo, tcnico
y de apoyo.
129
Entre las actividades del funcionario de bioseguridad deben figurar las siguientes:
1. Atender consultas sobre proteccin biolgica, bioseguridad y cumplimiento de las
condiciones tcnicas.
2. Realizar auditoras internas peridicas en materia de bioseguridad, en particular
de los mtodos, procedimientos y protocolos tcnicos, los agentes biolgicos, el
material y el equipo.
3. Examinar las infracciones de los protocolos o los procedimientos de bioseguridad
con las personas apropiadas.
4. Verificar que todo el personal ha recibido la capacitacin apropiada en materia de
bioseguridad.
5. Impartir formacin continua en materia de bioseguridad.
6. Investigar incidentes que entraen la posible fuga de material potencialmente
infeccioso o txico, y comunicar los resultados y las recomendaciones al director
del laboratorio y al comit de bioseguridad.
7. Coordinar con el personal mdico la atencin a posibles infecciones adquiridas en
el laboratorio.
8. Asegurar una descontaminacin apropiada tras los derrames u otros incidentes
con materiales infecciosos.
9. Garantizar la correcta manipulacin y eliminacin de los desechos.
10. Velar por una descontaminacin apropiada de cualquier aparato antes de su
reparacin o revisin.
11. Conocer las actitudes de la comunidad en relacin con consideraciones sanitarias
y ambientales.
12. Establecer procedimientos apropiados para la importacin y exportacin de mate-
rial patgeno por el laboratorio, de acuerdo con la reglamentacin nacional.
13. Revisar los aspectos de bioseguridad de todos los planes, protocolos y proce-
dimientos de operacin para el trabajo de investigacin con agentes infecciosos
antes de la puesta en prctica de esas actividades.
14. Instituir un sistema para hacer frente a las emergencias.
Comit de bioseguridad
Debe constituirse un comit de bioseguridad encargado de formular las polticas y
elaborar los cdigos de prcticas de la institucin en materia de bioseguridad. Ese
comit tambin examinar los protocolos de investigacin para el trabajo con agentes
infecciosos, animales, ADN recombinante y material genticamente modificado. Otras
funciones del comit pueden ser la evaluacin de riesgos, la formulacin de nuevas
polticas de seguridad y la solucin de controversias sobre cuestiones relativas a la
seguridad.
La composicin del comit de bioseguridad debe reflejar las distintas esferas
ocupacionales de la organizacin, as como su experiencia cientfica. La composicin
de un comit de bioseguridad bsico puede incluir a los siguientes especialistas:
130
19. EI FUNCIONARIO DE BIOSEGURIDAD Y EL COMIT DE BIOSEGURIDAD
1. Funcionario(s) de bioseguridad
2. Personal cientfico
3. Personal mdico
4. Veterinarios (si se trabaja con animales)
5. Representantes del personal tcnico
6. Representantes de la direccin del laboratorio.
El comit de bioseguridad debe recurrir al asesoramiento de distintos especialistas en
seguridad y funcionarios de otros departamentos (proteccin radiolgica, seguridad
industrial, prevencin de incendios, etc.). A veces puede ser necesario solicitar aseso-
ramiento a expertos independientes en distintos campos afines, as como a las autori-
dades locales y a los organismos nacionales de reglamentacin. Los miembros de la
comunidad tambin pueden ser de ayuda si se trata de protocolos particularmente
polmicos o delicados.
131
20. Reglas de seguridad para el
personal de apoyo
El buen funcionamiento y la seguridad de un laboratorio dependen en gran medida

del personal auxiliar, por lo que es indispensable que ese personal est correctamente
capacitado en materia de seguridad.
Mecnicos y personal de mantenimiento del edificio

Este personal, dedicado al mantenimiento y reparacin de la estructura, las instala-
ciones y el equipo, debe tener algunos conocimientos sobre el tipo de trabajo que se
realiza en el laboratorio, as como de las normas y los procedimientos en materia de
seguridad. Las pruebas a las que hay que someter el equipo despus de las revisiones,
como la verificacin de la eficiencia de las CSB tras la instalacin de nuevos filtros,
debe ser realizada por el funcionario de bioseguridad o efectuarse bajo la supervisin
de ste.
Los laboratorios o instituciones que no cuenten con servicios tcnicos de mante-
nimiento internos deben entablar buenas relaciones con los proveedores locales de ser-
vicios para que se familiaricen con el equipo y el trabajo que se hace en el laboratorio.
Los mecnicos del personal de mantenimiento solamente deben acceder a los
laboratorios de los niveles de bioseguridad 3 y 4 con la aprobacin y la supervisin
del funcionario de bioseguridad o del supervisor del laboratorio.
Personal de limpieza
Los laboratorios de los niveles de bioseguridad 3 y 4 deben ser limpiados por el per-
sonal del laboratorio. El personal de limpieza slo debe entrar en los laboratorios de
esos niveles de bioseguridad con la aprobacin y bajo la supervisin del funcionario
de bioseguridad o del supervisor del laboratorio.
132
21. Programas de capacitacin
Para que el personal, tanto tcnico como auxiliar, tenga siempre presentes las normas
en materia de seguridad es imprescindible organizar un programa de formacin
continua en el trabajo. Los supervisores del laboratorio, asistidos por el funcionario
de bioseguridad y otro personal conexo, desempean la funcin clave en esta labor de
formacin. La eficacia de la capacitacin en materia de bioseguridad, y desde luego
todo tipo de capacitacin sobre seguridad y salud, depende del compromiso del per-
sonal directivo, la motivacin, la capacitacin profesional inicial, la buena comuni-
cacin y, por ltimo, las metas y los objetivos de la organizacin. A continuacin se
enumeran algunos de los elementos fundamentales de un programa eficaz de capa-
citacin en bioseguridad:
1. Evaluacin de las necesidades. Este proceso incluye la definicin de las tareas, el
orden de importancia (frecuencia, carcter crtico, complejidad) y los pormenores
de los pasos necesarios para realizarlas.
2. Establecimiento de los objetivos de la capacitacin. Se trata de los compor-
tamientos observables que el personal capacitado debe demostrar durante el
trabajo, despus de la capacitacin. Los objetivos pueden reconocer las condi-
ciones en las que se realizan algunas actividades o comportamientos y el nivel
necesario de competencia.
3. Especificacin del contenido y los medios para la capacitacin. El contenido son
los conocimientos o las tcnicas que debe dominar el alumno para poder cumplir
los objetivos de comportamiento. Los encargados de definir el contenido del
programa de capacitacin en bioseguridad suelen ser quienes mejor conocen el
trabajo y sus exigencias. Tambin pueden usarse otros mtodos, como los basados
en los resultados de ejercicios de solucin de problemas o en el diseo de medidas
de aprendizaje para corregir errores cometidos al aplicar una nueva capacidad. No
est claro que un mtodo de enseanza (charlas, instruccin televisada, instruc-
cin por ordenador, vdeos interactivos, entre otros) sea superior a otros; en gran
medida depende de factores como las necesidades de capacitacin concretas o la
composicin del grupo de alumnos, entre otros.
4. Consideracin de las diferencias individuales de aprendizaje. Una capacitacin
eficaz debe tener en cuenta las caractersticas o los atributos de los distintos
alumnos. Las personas y los grupos pueden diferir en sus aptitudes, su grado de
instruccin y cultura, su manejo de la expresin verbal y su nivel de conocimien-
tos antes de la capacitacin. El criterio que se aplique puede depender de la forma
133
en que los alumnos ven el programa de capacitacin en lo que atae a la mejora

de su rendimiento en el trabajo o su seguridad personal. Algunos alumnos tienen
ms capacidad para el aprendizaje visual o de carcter prctico; otros aprenden
mejor a partir de material impreso. Tambin hay que tener en cuenta las posibles
necesidades especiales de algunos alumnos, por ejemplo por si fuera necesario
adaptar los cursos para los que tienen problemas de audicin. Adems de tener
presentes todos esos elementos, se recomienda que los encargados de elaborar un
programa de capacitacin en seguridad se familiaricen con los principios de la
enseanza de adultos.
5. Condiciones particulares del aprendizaje. El hecho docente (curso de capa-
citacin, cinta de vdeo, material impreso, entre otros) no debe entrar en conflicto,
inhibir o no guardar relacin alguna con el dominio de la capacidad o el tema que
se est enseando. Por ejemplo, si el propsito de la instruccin es desarrollar la
capacidad para resolver problemas, el mtodo de enseanza debe hacer hincapi en
los criterios de pensamiento/razonamiento ms que en la memorizacin mecnica.
La instruccin proporcionada debe exigir un comportamiento productivo o una
respuesta apropiada (positiva/precisa/creble). Adems, cuando la capacitacin da
oportunidades de prctica en condiciones anlogas a las del trabajo, se favorece la
transferencia de la capacidad adquirida a las condiciones de trabajo reales.
6. Evaluacin de la capacitacin. Proporciona informacin que ayuda a determinar
si la instruccin ha tenido el efecto deseado. En general adopta cuatro formas:
Medicin de la reaccin de los alumnos a la instruccin ofrecida
Medicin de lo memorizado por los alumnos o de los resultados de los
alumnos
Evaluacin del cambio de comportamiento en el trabajo
Medicin de resultados tangibles en relacin con los objetivos o las metas de
la organizacin.
La evaluacin ms completa de una actividad de capacitacin es la que mide cada
una de las cuatro esferas. El mtodo menos eficiente de evaluacin es el que se
limita a examinar las reacciones de los alumnos a la capacitacin, pues ello puede
guardar poca relacin con lo realmente aprendido, y no debe utilizarse como nica
medida de la eficacia de la capacitacin.
7. Revisin de la capacitacin. Las evaluaciones de la capacitacin raras veces indican
que un programa de capacitacin sea un xito o un fracaso completo, ya que se uti-
lizan mltiples criterios para medir los resultados. En general, los datos revelan una
mejor comprensin, retencin o aplicacin de algunas partes del material del curso
en comparacin con otras. Las variaciones o las deficiencias en los conocimientos
o las competencias que se pretendan impartir con la capacitacin pueden reflejar
la necesidad de dedicar ms tiempo a la capacitacin, de utilizar otras tcnicas de
instruccin o de recurrir a instructores mejor preparados.
La OMS dispone de varios mdulos de capacitacin en seguridad microbiolgica.
134
PARTE VIII
Lista de comprobacin
de la seguridad
22. Lista de comprobacin
de la seguridad
La presente lista de comprobacin tiene por objeto facilitar las evaluaciones de la

seguridad microbiolgica y el estado de seguridad de los laboratorios biomdicos.
Locales del laboratorio

1. Se han tenido en cuenta las directrices de puesta en servicio y certificacin en la
construccin de los locales o las evaluaciones posteriores a la construccin?
2. Cumplen las instalaciones los requisitos nacionales y locales en materia de
construccin, incluidos si es necesario los relativos a precauciones en caso de
desastres naturales?
3. Estn en general las instalaciones ordenadas, libres de material innecesario, y sin
obstculos?
4. Estn limpias las instalaciones?
5. Hay algn defecto estructural en los suelos?
6. Son los suelos y las escaleras uniformes y antideslizantes?
7. Es el espacio de trabajo suficiente para realizar con seguridad todas las
operaciones?
8. Son suficientes los espacios de paso y los pasillos para el movimiento de personas
y de equipo voluminoso?
9. Estn en buen estado las mesas, el mobiliario y los accesorios?
10. Son resistentes las superficies de las mesas a los disolventes y a las sustancias
qumicas corrosivas?
11. Hay un lavabo en cada sala del laboratorio?
12. Estn construidos y mantenidos los locales de modo que se impida la entrada y
la presencia de roedores y artrpodos?
13. Estn recubiertas de material aislante o protegidas todas las tuberas no empo-
tradas de vapor o agua caliente para proteger al personal?
14. Hay algn medio independiente de suministro de energa en caso de fallo del
suministro elctrico?
15. Puede restringirse el acceso a las zonas de laboratorio al personal autorizado?
16. Se ha efectuado una evaluacin del riesgo para asegurar que se dispone del equipo
y las instalaciones apropiadas para el trabajo que se va a realizar?
137
Locales de almacenamiento
1. Se encuentran los locales de almacenamiento, estanteras, etc. dispuestos de modo
que el material no pueda resbalar, aplastarse o caer?
2. Se encuentran los locales de almacenamiento libres de material y objetos acu-
mulados y no deseados que puedan provocar cadas, incendiarse y albergar
roedores e insectos?
3. Pueden cerrarse con llave los frigorficos y las zonas de almacenamiento?
Instalaciones de saneamiento y destinadas al personal

1. Se mantiene limpio, ordenado y en buen estado de higiene el conjunto de los locales?
2. Se dispone de agua potable?
3. Se dispone de retretes (WC) limpios y apropiados y de lavabos para empleados
y empleadas?
4. Se dispone de agua caliente y fra, jabn y toallas?
5. Existen vestuarios separados para empleados y empleadas?
6. Hay sitio (por ejemplo, taquillas) para la ropa de calle de los miembros del personal?
7. Hay una sala donde el personal pueda comer o descansar?
8. Es tolerable el nivel de ruido?
9. Est bien organizada la recogida y eliminacin de basuras domsticas generales?
Calefaccin y ventilacin
1. Hay una temperatura de trabajo agradable?
2. Estn provistas de persianas las ventanas expuestas de lleno a la luz solar?
3. Es suficiente la ventilacin, por ejemplo un mnimo de seis cambios de
aire por hora, especialmente en las salas que tienen ventilacin mecnica?
4. Est equipado el sistema de ventilacin con filtros HEPA?
5. Dificulta la ventilacin mecnica el flujo de aire dentro y alrededor de las CSB y
en los extractores de humos?
Alumbrado
1. Es suficiente la iluminacin general (por ejemplo, 300400 lux)?
2. Estn equipadas las mesas de trabajo con iluminacin (local) adecuada para las
tareas realizadas?
3. Estn todas las zonas bien iluminadas, sin rincones oscuros o mal iluminados en
los locales y pasillos?
4. Hay lmparas fluorescentes paralelas a las mesas de trabajo?
5. Est equilibrado el color en las lmparas fluorescentes?
Servicios
1. Est cada sala del laboratorio provista de suficientes sumideros y tomas de agua,
electricidad y gas para trabajar con seguridad?
138
22. LISTA DE COMPROBACIN DE LA SEGURIDAD
2. Existe un programa apropiado de inspeccin y mantenimiento de fusibles,

bombillas, cables, tuberas y otros elementos?
3. Se corrigen las deficiencias en un tiempo razonable?
4. Se dispone de servicios internos de reparacin y mantenimiento, con mecnicos
y trabajadores capacitados que tambin tengan algn conocimiento acerca del tipo
de trabajo que se realiza en el laboratorio?
5. Se controla y documenta el acceso del personal tcnico y de mantenimiento a las
diversas zonas del laboratorio?
6. Si no se dispone de servicios internos de reparacin y mantenimiento, se ha
establecido contacto con mecnicos y constructores locales y se los ha familia-
rizado con el equipo y el trabajo que se realiza en el laboratorio?
7. Se dispone de servicios de limpieza?
8. Se controla y documenta el acceso del personal de limpieza a las diversas zonas
del laboratorio?
9. Se dispone de servicios de tecnologa de la informacin seguros?
Bioproteccin en el laboratorio
1. Se ha llevado a cabo una evaluacin cualitativa del riesgo para definir los riesgos
contra los que debe proteger un sistema de bioproteccin?
2. Se han definido los parmetros relativos al riesgo aceptable y la planificacin de
la respuesta ante incidencias?
3. Se cierra de forma segura todo el edificio cuando no est ocupado?
4. Son las puertas y ventanas a prueba de rotura?
5. Estn cerrados con llave los locales que contienen materiales peligrosos y equipo
costoso cuando no estn ocupados?
6. Se controla y documenta debidamente el acceso a esos locales, equipo y
materiales?
Prevencin de incendios
1. Existe un sistema de alarma para casos de incendio?
2. Funcionan debidamente las puertas cortafuegos?
3. Funciona bien el sistema de deteccin de incendios y se prueba con regularidad?
4. Estn accesibles los puntos de alarma de incendios?
5. Estn todas las salidas iluminadas y convenientemente sealizadas?
6. Est sealizado el acceso a las salidas en todos los casos en que stas no son
inmediatamente visibles?
7. Se encuentran todas las salidas expeditas, libres de decoraciones, muebles o mate-
rial de trabajo, y sin cerrar cuando el edificio est ocupado?
8. Se han dispuesto los accesos a la salida de manera que no sea necesario atravesar
ninguna zona peligrosa para escapar?
9. Conducen todas las salidas a un espacio abierto?
139
10. Se encuentran los corredores, pasillos y zonas de circulacin expeditos y libres de

cualquier obstculo que pueda dificultar el desplazamiento del personal o de
material de extincin de incendios?
11. Se encuentran todos los dispositivos y material de lucha contra incendios iden-
tificados fcilmente por un color especial?
12. Estn completamente cargados y en estado de funcionamiento los extintores de
incendios porttiles y se encuentran siempre colocados en los lugares designados?
13. Estn equipados con extintores o mantas contra incendios todos los locales del
laboratorio expuestos a incendios para un caso de emergencia?
14. Si se utilizan en cualquier local lquidos y gases inflamables, es suficiente la
ventilacin mecnica para expulsar los vapores sin dejar que alcancen una con-
centracin peligrosa?
15. Est adiestrado el personal para responder en caso de emergencia por un
incendio?
Almacenamiento de lquidos inflamables

1. Est el local para almacenar lquidos inflamables a granel separado del edificio
principal?
2. Est claramente indicado como zona de riesgo de incendios?
3. Cuenta ese local con un sistema de ventilacin por gravedad o un sistema
mecnico de evacuacin del aire que sea distinto del sistema del edificio
principal?
4. Se encuentran los interruptores para el alumbrado cerrados hermticamente o
colocados fuera del edificio?
5. Estn cerrados hermticamente los dispositivos de alumbrado colocados en el
interior a fin de evitar la inflamacin de los vapores provocada por chispas?
6. Se almacenan los lquidos inflamables en recipientes adecuados y ventilados,
construidos con materiales no combustibles?
7. Est correctamente descrito el contenido de todos los recipientes en las
etiquetas?
8. Se dispone de extintores apropiados o mantas contra incendios colocados fuera
del almacn de lquidos inflamables, pero en sus proximidades?
9. Hay carteles de prohibido fumar colocados de modo destacado dentro y fuera
del almacn de lquidos inflamables?
10. Existen slo cantidades mnimas de sustancias inflamables almacenadas en los
locales del laboratorio?
11. Se utilizan armarios bien construidos para guardar los productos inflamables?
12. Estn esos armarios debidamente rotulados con la mencin Lquidos inflam-
ables riesgo de incendio?
13. Est adiestrado el personal para utilizar y transportar correctamente los lquidos
inflamables?
140
Gases comprimidos y licuados

1. Est el contenido de cada recipiente porttil de gas marcado de forma legible y
con el debido cdigo de color?
2. Se comprueban regularmente las vlvulas de presin alta y reduccin de las bom-
bonas de gas comprimido?
3. Se revisan regularmente las vlvulas de reduccin?
4. Se conectan con un dispositivo de despresurizacin las bombonas de gas durante
su uso?
5. Estn todas las bombonas tapadas cuando no se usan o cuando se transportan?
6. Estn sujetas todas las bombonas de gas comprimido de manera que no se
puedan caer, en particular en caso de catstrofe natural?
7. Estn las bombonas y los depsitos de gas de petrleo licuados (GLP) separados
de las fuentes de calor?
8. Est debidamente adiestrado el personal para utilizar y transportar gases com-
primidos y licuados?
Peligros elctricos
1. Se aplican las normas nacionales del cdigo de seguridad elctrica en todas las
instalaciones elctricas nuevas y en todas las reparaciones, modificaciones o susti-
tuciones, as como en las operaciones de mantenimiento?
2. Se utilizan cables de tres hilos, es decir con toma de tierra, en toda la instalacin
elctrica interior?
3. Estn todos los circuitos del laboratorio equipados con disyuntores e interrup-
tores por fallo de la toma de tierra?
4. Estn aprobados todos los aparatos elctricos por el laboratorio de ensayos?
5. Son los cables flexibles de conexin de todo el equipo lo ms cortos posible y se
hallan en buen estado, sin desgastes, daos ni empalmes?
6. Se utilizan siempre tomas de corriente de un solo enchufe en vez de tomas mlti-
ples (no hay que emplear adaptadores)?
Proteccin personal
1. Se facilita ropa protectora apropiada a todo el personal en las tareas habituales
(por ejemplo, batas, monos, delantales, guantes)?
2. Se facilita proteccin adicional para trabajar con sustancias qumicas peligrosas
y sustancias radiactivas y carcingenas (por ejemplo, delantales y guantes de goma
para las sustancias qumicas y para recoger los derrames, o guantes resistentes al
calor para descargar autoclaves y estufas)?
3. Se facilitan gafas y viseras de seguridad?
4. Existen medios para el lavado de los ojos?
5. Hay duchas de emergencia?
6. Se ajusta la proteccin contra las radiaciones a las normas nacionales e interna-
cionales, incluido el suministro de dosmetros?
141
7. Se dispone de mscaras respiratorias limpias, desinfectadas y comprobadas

regularmente, y almacenadas en buen estado de limpieza e higiene?
8. Se suministran filtros apropiados para los tipos correctos de mscaras respirato-
rias, por ejemplo filtros HEPA para microorganismos, y filtros apropiados para
gases o partculas?
9. Se comprueba el ajuste individual de cada mscara respiratoria?
Salud y seguridad del personal

1. Existe un servicio de salud ocupacional?
2. Existen botiquines de primeros auxilios colocados en lugares estratgicos?
3. Se dispone de socorristas capacitados para prestar primeros auxilios?
4. Estn esos socorristas capacitados para ocuparse de emergencias tpicas del
laboratorio, como el contacto con sustancias qumicas corrosivas, o la ingestin
accidental de venenos y material infeccioso?
5. Est instruido el personal que no trabaja en el laboratorio, por ejemplo el per-
sonal de limpieza o el personal administrativo, respecto de los riesgos posibles del
laboratorio y del material que en l se manipula?
6. Se han colocado de forma destacada avisos que den informacin sucinta sobre la
localizacin de los primeros auxilios, los nmeros de telfono de los servicios de
emergencia, etc.?
7. Se ha advertido a las mujeres en edad fecunda de las consecuencias de trabajar
con ciertos microorganismos, agentes carcingenos, mutgenos y teratgenos?
8. Se ha indicado a las mujeres en edad fecunda que, si estn embarazadas o tienen
sospechas de estarlo, deben informar al miembro correspondiente del personal
mdico/cientfico de modo que se establezcan otras disposiciones de trabajo para
ellas en caso necesario?
9. Existe un programa de inmunizacin apropiado para el trabajo que se hace en el
laboratorio?
10. Existen pruebas cutneas y/o instalaciones radiolgicas para el personal que
trabaja con material tuberculoso u otro material que exija esos medios?
11. Se mantienen convenientemente los registros de enfermedades y accidentes?
12. Se utilizan carteles de advertencia y prevencin de accidentes para reducir al
mnimo los riesgos laborales?
13. Se adiestra al personal para que siga las prcticas apropiadas en materia de
bioseguridad?
14. Se alienta al personal del laboratorio para que notifique las posibles exposiciones?
1. Posee todo el material un certificado de que es seguro para el uso?
2. Se dispone de procedimientos para descontaminar el material antes de las opera-
ciones de mantenimiento?
3. Se comprueban y revisan regularmente las CSB y los extractores de humos?
142
4. Se inspeccionan con regularidad las autoclaves y otros recipientes presurizados?

5. Se inspeccionan con regularidad los cestillos y rotores de centrifugadora?
6. Se cambian peridicamente los filtros HEPA?
7. Se utilizan pipetas en lugar de agujas hipodrmicas?
8. Se desecha sistemticamente, sin volverla a utilizar, la cristalera agrietada o
astillada?
9. Existen recipientes seguros para la cristalera rota?
10. Se utiliza plstico en lugar de vidrio siempre que es posible?
11. Estn disponibles y en uso recipientes de eliminacin de objetos punzantes y
cortantes?
Material infeccioso
1. Se reciben todas las muestras en condiciones de seguridad?
2. Se mantienen registros de los materiales recibidos?
3. Se desembalan las muestras dentro de la CSB, con cuidado y prestando atencin
a posibles roturas y escapes?
4. Se utilizan guantes y otras prendas de proteccin para desempaquetar las
muestras?
5. Se adiestra al personal para enviar las sustancias infecciosas de acuerdo con las
normas nacionales o internacionales vigentes?
6. Se mantienen limpias y en orden las mesas de trabajo?
7. Se retira diariamente, o con ms frecuencia, y en condiciones de seguridad, el
material infeccioso desechado?
8. Conocen todos los miembros del personal los procedimientos para tratar roturas
y derrames de cultivos y material infeccioso?
9. Se comprueba el rendimiento de los esterilizadores mediante indicadores qumi-
cos, fsicos y biolgicos apropiados?
10. Existe algn procedimiento para descontaminar peridicamente las
centrifugadoras?
11. Se dispone de cestillos de cierre hermtico para las centrifugadoras?
12. Se utilizan correctamente los desinfectantes apropiados?
13. Se da capacitacin especial al personal que trabaja en los laboratorios de con-
tencin nivel de bioseguridad 3 y los laboratorios de contencin mxima nivel
de bioseguridad 4?
Sustancias qumicas y radiactivas

1. Estn efectivamente separadas las sustancias qumicas incompatibles cuando se
almacenan o se manipulan?
2. Estn correctamente etiquetadas con nombres y advertencias todas las sustancias
qumicas?
3. Se encuentran convenientemente destacados carteles de advertencia sobre el
riesgo qumico?
143
4. Se dispone de estuches especiales para la eliminacin de derrames?

5. Est capacitado el personal para tratar los derrames?
6. Estn almacenadas de modo correcto y seguro todas las sustancias inflamables en
cantidad mnima en armarios aprobados?
7. Se dispone de carretillas para el transporte de bombonas?
8. Se dispone de un funcionario de proteccin radiolgica o de un manual de
referencia apropiado que se puedan consultar?
9. Est debidamente adiestrado el personal para trabajar de forma segura con
material radiactivo?
10. Se mantienen registros correctos de las existencias y el uso de sustancias
radiactivas?
11. Existen pantallas contra la radiactividad?
12. Se vigilan las exposiciones personales a la radiacin?
144
PARTE IX
Referencias, anexos
e ndice alfabtico
Referencias
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150
ANEXO 1
Primeros auxilios
Los primeros auxilios consisten en la aplicacin experta de principios aceptados de
tratamiento mdico en el momento y el lugar en que se produce un accidente. Es el
mtodo aprobado para tratar a la vctima de un accidente hasta que se la pueda poner
en manos de un mdico para el tratamiento definitivo de la lesin.
El equipo mnimo de primeros auxilios consta de un botiqun, ropa protectora y
equipo de seguridad para la persona que presta los primeros auxilios, y equipo para
la irrigacin ocular.
El botiqun de primeros auxilios

El maletn propiamente dicho debe estar hecho de un material que mantenga el con-
tenido sin polvo ni humedad. Debe guardarse en un lugar bien visible y ser fcilmente
reconocible. Por convenio internacional, el botiqun de primeros auxilios se identifica
mediante una cruz blanca sobre fondo verde.
El botiqun de primeros auxilios debe contener lo siguiente:
1. Hoja de instrucciones con orientaciones generales
2. Apsitos estriles adhesivos, empaquetados individualmente y de distintos
tamaos
3. Parches oculares estriles con cintas
4. Vendas triangulares
5. Compresas estriles para heridas
6. Imperdibles
7. Una seleccin de apsitos estriles no medicados
8. Un manual de primeros auxilios, por ejemplo publicado por la Cruz Roja
Internacional.
El equipo de proteccin de la persona que presta los primeros auxilios incluye lo
siguiente:
1. Una gasa para la boca para realizar la respiracin boca a boca.
2. Guantes y otras protecciones de barrera contra la exposicin a la sangre.1
3. Un estuche de limpieza para los derrames de sangre (vase el captulo 14 del
manual).
Tambin debe disponerse de material para la irrigacin ocular; el personal estar
debidamente adiestrado en su utilizacin.
1
Garner JS, Hospital Infection Control Practices Advisory Committee. Guideline for isolation precautions
in hospitals. American Journal of Infection Control, 1996, 24:2452, (http://www.cdc.gov/ncidod/hip/
isolat/isolat.htm).
151
ANEXO 2
Inmunizacin del personal
Los riesgos que entraa trabajar con ciertos agentes deben explicarse de forma
completa a cada investigador. Antes de comenzar a utilizar posibles vacunas o agentes
teraputicos (por ejemplo, antibiticos) en caso de exposicin, deber evaluarse su
disponibilidad local, si estn aprobados y su utilidad. Algunos trabajadores pueden
haber adquirido inmunidad en una vacunacin o infeccin anteriores.
Si una vacuna o un toxoide particular estn aprobados y disponibles localmente,
deben ofrecerse despus de evaluar el riesgo de una posible exposicin y de proceder
a una evaluacin clnica de la persona afectada.
Tambin deben existir instalaciones para la gestin de casos clnicos particulares
despus de una infeccin accidental.
152
ANEXO 3
Centros colaboradores de la OMS en

materia de bioseguridad
Puede obtenerse informacin sobre la disponibilidad de cursos de formacin y

material didctico y auxiliar escribiendo a cualquiera de los siguientes centros:
Programa de Bioseguridad. Departamento de Enfermedades Transmisibles
(Vigilancia y Respuesta), Organizacin Mundial de la Salud. 20 Avenue Appia, 1211
Ginebra 27 (Suiza) (http://www.who.int/csr/).
Centro Colaborador de la OMS sobre Seguridad Biolgica. Instituto Sueco de
Lucha contra las Enfermedades Infecciosas, Nobels Vg 18, S-171 82 Solna (Suecia).
(http://www.smittskyddsinstitutet.se/English/english.htm).
Centro Colaborador de la OMS sobre Tecnologa de Bioseguridad y Servicios
Consultivos, Oficina de Seguridad en el Laboratorio. Health Canada.
100 Colonnade Road, Loc.: 6201A, Ottawa, Ontario K1A 0K9 (Canad)
(http://www.hc-sc.gc.ca/pphb-dgspsp/ols-bsl).
Centro Colaborador de la OMS sobre Capacitacin y Programas de Bioseguridad
Aplicada. Oficina de Salud y Seguridad, Centros para el Control y la Prevencin de
Enfermedades. 1600 Clifton Road, Mailstop F05, Atlanta, GA 30333 (Estados
Unidos de Amrica) (http://www.cdc.gov/).
Centro Colaborador de la OMS sobre Programas de Bioseguridad Aplicada. Depar-
tamento de Seguridad y Salud Ocupacional, Oficina de Servicios de Investigacin,
Institutos Nacionales de la Salud. 13/3K04 13 South Drive MSC 5760, Bethesda,
MD 20892-5760 (Estados Unidos de Amrica) (http://www.nih.gov/).
Centro Colaborador de la OMS sobre Bioseguridad. Laboratorio de Referencia de
Victoria para las Enfermedades Infecciosas. 10 Wreckyn St., Nth Melbourne,
Victoria 3051 (Australia). Direccin postal: Locked Bag 815, PO Carlton Sth,
Victoria 3053 (Australia) (http://www.vidrl.org.au/).
153
ANEXO 4
Seguridad del material
Ciertos elementos del material de laboratorio pueden entraar riesgos microbiolgi-

cos durante su utilizacin. Otros elementos estn especficamente diseados para
evitar o reducir los riesgos biolgicos (vase el captulo 11 del manual).
Material que puede ser peligroso

En el cuadro A4-1 se enumeran el material y las operaciones que pueden crear riesgos
y se sugieren formas de eliminar o reducir esos riesgos.
Adems de los riesgos microbiolgicos, tambin es necesario prever y prevenir los
riesgos de seguridad asociados al equipo propiamente dicho. En el cuadro A4-2 se
enumeran algunas causas de accidentes.
Cuadro A4-1. Material y operaciones que pueden entraar riesgos
ELEMENTO DEL RIESGO CMO ELIMINAR O REDUCIR EL RIESGO
EQUIPO
Agujas Inoculacin No tapar de nuevo ni sujetar las agujas.

hipodrmicas accidental, Utilizar agujas con ajuste de bayoneta para evitar que
aerosol o la aguja se separe de la jeringuilla o utilizar un tipo
derrame de jeringuilla desechable en la que la aguja forme
parte integrante de la unidad de la jeringuilla.
Utilizar tcnicas correctas de laboratorio; por
ejemplo:
llenar con cuidado la jeringuilla para reducir al
mnimo la formacin de burbujas y espuma en el
material que se vaya a inyectar
evitar el uso de jeringuillas para mezclar lquidos
infecciosos; si se utilizan, asegurarse de que slo
entra la punta de la aguja en el lquido y de no
emplear excesiva fuerza
en los recipientes con tapn de caucho, envolver
aguja y tapn con un algodn empapado en un
desinfectante apropiado antes de retirar la aguja
expulsar el exceso de lquido y las burbujas de
aire de la jeringuilla sujetndola en vertical
en una torunda de algodn empapada en
desinfectante o en un frasquito lleno de
algodn.
154
ANEXO 4. SEGURIDAD DEL MATERIAL

EQUIPO
Utilizar una CSB para todas las operaciones con

material infeccioso.
Sujetar a los animales mientras se los inocula.
Utilizar agujas romas o cnulas para inoculaciones
intranasales u orales. Utilizar una CSB.
Esterilizar el material en la autoclave despus de
usarlo y eliminarlo correctamente. Si se usan
jeringuillas desechables con aguja incorporada, no
separar las agujas antes del tratamiento en autoclave.
Centrifugadoras Aerosoles, Utilizar cestillos de cierre hermtico (de seguridad)

salpicaduras o rotores hermticos. Abrir los cestillos o rotores
y rotura una vez que se hayan depositado los aerosoles
de tubos (30 minutos) o en una CSB.
Ultracentrifu- Aerosoles, Instalar un filtro HEPA entre la

gadoras salpicaduras centrifugadora y la bomba de vaco.
y rotura de Llevar un registro de las horas de funcionamiento de
tubos cada rotor y aplicar un programa de mantenimiento
preventivo para reducir el riesgo de fallo mecnico.
Cargar y descargar los cestillos o rotores en una
CSB.
Frascos Explosin, Asegurar la integridad de la cpsula de alambre en

anaerbicos de material torno al catalizador.
dispersin
infeccioso
Desecadores Implosin, Colocar en una jaula de alambre fuerte.

dispersin de
fragmentos de
vidrio y material
infeccioso
Homogenei- Aerosoles, Utilizar y abrir el material en una cmara

zadores, fugas y de seguridad biolgica.
trituradores rotura de Utilizar modelos especiales que evitan las fugas de
de tejidos recipientes los cojinetes del rotor y las juntas tricas, o utilizar el
tipo Stomacher.
Antes de abrir la cazoleta del mezclador,
esperar 30 minutos a que se deposite la
nube de aerosol. Refrigerar para condensar
los aerosoles.
Si se utilizan trituradores manuales, sujetar
el tubo con un trozo de material absorbente.
155

EQUIPO
Desintegradores Aerosoles, Trabajar y abrir el material en una CSB o

ultrasnicos, lesiones unidad cerrada.
limpiadores auditivas, Asegurar el aislamiento para proteger contra
ultrasnicos dermatitis los sonidos subarmnicos.
Usar guantes para proteger la piel de los
efectos qumicos de los detergentes.
Dispositivos Aerosoles, Trabajar en una CSB o en un recipiente de

para remover salpicaduras contencin primaria diseado especialmente.
y agitar cultivos y derrames Utilizar frascos de cultivo resistentes con
tapn de rosca, orificios de salida protegidos
con filtros, en caso necesario, y bien sujetos.
Liofilizadores Aerosoles y Utilizar juntas tricas para sellar

contaminacin perfectamente el aparato.
por contacto Utilizar filtros de aire para proteger el
directo circuito de vaco.
Utilizar un mtodo satisfactorio de
descontaminacin; por ejemplo, con
sustancias qumicas.
Disponer un colector de humedad totalmente
metlico y un condensador de vapor.
Inspeccionar cuidadosamente todos los
recipientes de vaco de vidrio para ver si
estn rayados. Utilizar slo cristalera
concebida especialmente para trabajar en
condiciones de vaco.
Baos de agua Proliferacin de Garantizar una limpieza y una desinfeccin

microorganismos. peridicas.
La azida No utilizar azida sdica para prevenir la
sdica forma proliferacin de organismos.
compuestos
explosivos con
algunos metales.
HEPA: filtracin de partculas areas de gran eficiencia (del ingls High-Efciency Particulate Air). CSB:
cmara de seguridad biolgica.
156
ANEXO 4. SEGURIDAD DEL MATERIAL
Cuadro A4-2. Causas comunes de accidentes relacionados con el material

ACCIDENTE CAUSA DEL ACCIDENTE FORMAS DE REDUCIR O ELIMINAR
EL RIESGO
Fallos de diseo o de construccin

Incendios elctricos Ausencia de termostato para el Cumplir las normas
en incubadoras sobrecalentamiento nacionales.
Choque elctrico Ausencia de toma de tierra apropiada
Uso indebido
Accidente de Fallos en el equilibrado de los cestillos Capacitar y supervisar al
centrifugadora en los rotores personal.
Explosin de la Uso de un gas inapropiado Capacitar y supervisar al

incubadora personal.
anaerbica
Adaptacin incorrecta
Explosin en frasco Transporte de nitrgeno lquido en Usar equipo especialmente
de vaco domstico condiciones incorrectas diseado.
Explosin en Sustancia peligrosa no almacenada en Almacenar disolventes y

refrigerador de recipiente a prueba de chispas o extractos con punto de
tipo domstico explosiones; por ejemplo, dietilter inflamacin bajo slo en
con tapn de rosca no hermtico refrigeradores o armarios
a prueba de chispas/
explosiones.
Falta de mantenimiento apropiado

Fuego en fotmetro Ensamblaje incorrecto de piezas Capacitar y supervisar al
de llama durante el mantenimiento personal.
157
ANEXO 5
Sustancias qumicas:
peligros y precauciones
En el presente anexo se exponen informacin y datos bsicos sobre seguridad y

precauciones apropiadas para ciertas sustancias qumicas que normalmente se
encuentran en los laboratorios de atencin sanitaria y de investigacin. La lista no es
exhaustiva y la ausencia de determinada sustancia no significa que no sea peligrosa.
Todas las sustancias qumicas del laboratorio deben tratarse con precaucin y de
modo que la exposicin se reduzca al mnimo.
158
Cuadro A5-1. Sustancias qumicas: peligros y precauciones
SUSTANCIA QUMICA PROPIEDADES PELIGROS PARA LA PELIGRO DE INCENDIO PRECAUCIONES DE SUSTANCIAS QUMICAS OTROS PELIGROS
FSICAS SALUD SEGURIDAD INCOMPATIBLES
Acetaldehdo Lquido Irritacin leve de los Muy inflamable; Prohibidos: llamas Puede formar
CH3CHO incoloro o gas ojos y las vas las mezclas de desnudas, chispas, perxidos
de olor acre, respiratorias. Efectos vapor/aire son fumar, contacto con explosivos en
afrutado Punto en el sistema nervioso explosivas. superficies calientes. contacto con el
de fusin: central, las vas Temperatura de Almacenar en aire. Puede
-121 C. Punto respiratorias y los inflamacin: recipientes cerrados polimerizarse bajo
de ebullicin: riones. Posible -39 C. Intervalo hermticamente y la influencia de
21 C. carcingeno. de inflamabilidad: alejados de oxidantes cidos y
457%. Almacenar slo si materiales
est estabilizado. alcalinos en
Trabajar en campana presencia de
extractora de vapores oligoelementos
159
o lugar bien metlicos. Agente
ventilado. Usar muy reductor,
guantes de goma, reacciona
gafas de mscara y violentamente con
proteccin oxidantes,
respiratoria. diversas
sustancias
orgnicas,
halgenos, cido
ANEXO 5. SUSTANCIAS QUMICAS: PELIGROS Y PRECAUCIONES
sulfrico y
aminas.
Actico, cido Lquido Custico; provoca Inflamable. No respirar los Reaccin violenta
CH3CO2H incoloro de olor quemaduras graves; Temperatura de vapores.En caso de o explosin con
acre. Punto de vapores irritantes. Los inflamacin: contacto con los oxidantes.
fusin: 17 C. efectos pueden ser 40 C. Intervalo ojos, aclarar de
Punto de retardados. de inflamabilidad: inmediato con agua y
ebullicin: 5,416%. acudir al mdico.
118 C. Usar guantes de
Miscible con el nitrilo y proteccin
agua. ocular.
Actico, anhdrido Lquido Fuerte irritacin de Inflamable. Prohibidos: llamas Reacciona

(CH3CO)2O incoloro de los ojos y las vas Desprende gases desnudas, chispas, violentamente con
fuerte olor acre, respiratorias o vapores fumar. Evitar agua hirviendo,
parecido al superiores; accin irritantes o txicos contacto con la piel y vapor de agua,
160
vinagre. Punto custica. Los efectos en incendios. los ojos. oxidantes fuertes,
de fusin: pueden ser retardados. Temperatura de alcoholes,
-73 C. Punto inflamacin: aminas,bases
de ebullicin: 49 C. Intervalo fuertes y muchos
139 C. explosivo: otros compuestos.
2,710,3%. Ataca a muchos
metales en
presencia de agua.
Acetileno Gas incoloro Asfixiante simple. Muy inflamable. Para proteger la piel, Fuerte agente
HCCH con ligero olor Asfixiante simple. Intervalo de usar guantes reductor.
a ter o ajo. Se contacto. inflamabilidad: aislantes contra el Reacciona
transporta bajo 2,5100%. fro y gafas de violentamente con
presin, mscara o visera. oxidantes y con el
disuelto en Prohibidos: llamas flor o el cloro
acetona. Punto desnudas, chispas, bajo la influencia
de fusin: fumar. Trabajar con de la luz.
-81 C. ventilacin local por Reacciona con el
Sublima a extraccin y equipo cobre, la plata y el
-84 C. elctrico y de mercurio o sus
alumbrado a prueba sales, formando
de explosiones. compuestos
sensibles al
impacto.
161
Acetona Lquido voltil Ligera irritacin ocular, Muy inflamable. Mantener el Reacciona Dotar de
CH3COCH3 incoloro de olor nasal y farngea. La Temperatura de recipiente en zona violentamente con tomade tierra
dulzn. Punto inhalacin puede inflamacin: bien ventilada y oxidantes (como los grandes
de fusin: provocar mareos, -18 C. Intervalo alejado de fuentes de los cidos recipientes y
-95 C. Punto narcosis y coma. explosivo: ignicin. No respirar crmico y ntrico) cubas
de ebullicin: 2,212,8%. los vapores. Utilizar y cloroformo en paraprevenir
56 C. Miscible proteccin presencia de la electricidad
con el agua. respiratoria y ocular. bases. esttica.
Incompatible con
mezclas
concentradas de
cidos sulfrico y
ntrico.
Acetonitrilo Lquido Irritacin ocular, Muy inflamable. Prohibidos: llamas Reacciona con
CH3CN incoloro de olor cutnea y respiratoria. Temperatura de desnudas, chispas, bases y cidos
fuerte. Punto La exposicin puede inflamacin: fumar, contacto con acuosos,
de fusin: provocar convulsiones, 12,8 C. Intervalo oxidantes. Utilizar produciendo
-46 C. Punto prdida de explosivo: slo en zonas sin vapores txicos.
de ebullicin: conocimiento y 3,016%. fuentes de ignicin. Reacciona con
82 C. envenenamiento por Almacenar en oxidantes fuertes.
cianuro. recipientes cerrados Ataca algunas
hermticamente en formas de
zonas separadas de plstico, goma y
los oxidantes. revestimientos. Se
Trabajar con descompone al
ventilacin por arder, produciendo
extraccin de aire. cido cianhdrico
por extraccin de y xidos de
162
aire. ojos y mucosas. nitrgeno.
Usar proteccin
respiratoria y guantes
de goma.
Acrolena Lquido Lagrimeo. Irritacin Muy inflamable. Evitar el contacto con Oxidantes, cidos,
CH2=CHCHO incoloro o respiratoria grave; Temperatura de la piel y los ojos. lcalis, amoniaco,
amarillo de olor edema pulmonar con inflamacin: Trabajar bajo aminas. Polimeriza
penetrante y altos niveles de -26 C. Intervalo campana extractora rpidamente, a
desagradable. exposicin. Los explosivo: de vapores o con menos que se
Punto de efectos pueden ser 2,831%. buena ventilacin. inhiba, en general
fusin: -87 C. retardados. con hidroquinona.
Punto de Con el tiempo
ebullicin: puede formar
53 C. perxidos
sensibles al
impacto.
Agua oxigenada Lquido Custico a altas Agente oxidante; En caso de contacto Reacciona Puede
H2O2 incoloro. Punto concentraciones (60%) en contacto con con la piel, lavar vigorosamente descomponerse
Perxido de de fusin: y a baja concentracin material inmediatamente con con diversos produciendo
hidrgeno -39 C (70%). (6%) si el contacto combustible agua abundante. reactivos oxgeno, con lo
Punto de con la piel es puede producir Usar guantes de qumicos, entre que aumenta la
ebullicin: prolongado. Las fuego. nitrilo y proteccin ellos los oxidantes presin del
125 C (70%). soluciones diluidas son ocular si la y las bases. Ataca recipiente.
(70%). agua. irritantes para los ojos, proteccin ocular si a la mayora de Almacenar en
Se suministra piel. la 20%. los metales o sus lugar oscuro y
en solucin sales, lquidos fresco. No
acuosa a inflamables y utilizar
distintas otros materiales recipientes o
concentra- combustibles instrumentos
ciones. (papel, tejidos), metlicos
anilina y (latn cobre,
nitrometano. hierro).
163
Amoniaco, soluciones Lquido Custico para los ojos, Como gas, Mantener los Reacciona
de incoloro de olor las vas respiratorias y intervalo de recipientes cerrados violentamente con
acre. Para el la piel por ingestin. inflamabilidad: hermticamente. En metales pesados
gas: Punto de Edema pulmonar con 1528%. caso de contacto con como el mercurio
fusin: -78 C. altos niveles de los ojos, enjuagar de y sus sales para
Punto de exposicin a los gases inmediato y acudir al formar productos
ebullicin: o vapores. mdico. Trabajar bajo explosivos.
-33 C. Para la campana extractora
solucin al de vapores. Usar
25%: Punto de guantes de goma o
fusin: -58 C. de plstico y gafas
Punto de de mscara
ebullicin: especiales para
38 C. Miscible sustancias qumicas.
164
con el agua.
Anilina Lquido oleoso, Cianosis por Combustible. Almacenar en Oxidantes fuertes

C6H5NH2 incoloro a metahemoglobinemia. Temperatura de recipientes cerrados y cidos fuertes.
marrn, con Irritante para los ojos y inflamacin: hermticamente en
fuerte olor a la piel. Puede ser 70 C. Intervalo zonas separadas de
aminas. Punto absorbida por la piel. explosivo: los oxidantes. Evitar
de fusin: La exposicin repetida 1,211%. el contacto con la

-6 C. Punto o prolongada puede piel y los ojos.
de ebullicin: provocar Trabajar con
185 C. sensibilizacin. ventilacin local por
extraccin o
proteccin
respiratoria, guantes,
ropa protectora y
visera.
Auramina Escamas o Nocivo por ingestin, Evitar el contacto con Agentes oxidantes
4,4-carbonoimidoilbis polvo de color inhalacin y contacto la piel y la inhalacin fuertes.
(N,N- amarillo. Punto con la piel. Puede del polvo. Usar
dimetilbencenamina) de fusin: provocar irritacin guantes de goma o
136 C. ocular o cutnea. plstico y gafas de
Insoluble en Posible carcingeno. mscara resistentes a
agua. sustancias qumicas.
Trabajar en
campana extractora
de vapores o llevar
respirador contra
polvo.
Benceno Lquido voltil La inhalacin de Muy inflamable. Mantener el Puede reaccionar

C6H6 incoloro de vapores tiene efectos Temperatura de recipiente en zona violentamente con
fuerte olor en el sistema nervioso inflamacin: bien ventilada y oxidantes como el
165
caracterstico. central: vrtigos y -11 C. Intervalo alejada de fuentes de cido crmico, el
Punto de cefaleas; a altas de inflamabilidad: ignicin. Trabajar permanganato
fusin: 6 C. concentraciones, 1,38%. bajo campana potsico y el
Punto de prdida de extractora de vapores oxgeno lquido.
ebullicin: conocimiento y o campana con
80 C. muerte. Riesgo de ventilacin suficiente.
anemia aplsica, Usar proteccin
leucemia y lesiones ocular y guantes de
hepticas en caso de nitrilo o PVC.

exposicin crnica. Prevenir la formacin
Puede absorberse por de cargas elctricas
la piel. mediante toma de
tierra.
Bencidina Polvo de color Puede ser absorbido Combustible, Evitar toda Uso prohibido o
1,1-bifenil-4,4-diamina amarillo claro. por la piel. Puede desprende exposicin. Usar controlado
Punto de provocar cncer de vapores txicos proteccin ocular y legalmente en
fusin: 128 C. vejiga. Evitar toda (gases) en cutnea. Trabajar con muchos pases.
Punto de exposicin. incendios. campana extractora
ebullicin: de vapores.
400 C.
Ligeramente
soluble en
agua, pero muy
soluble en
cidos y
disolventes
166
orgnicos.
Bromo Lquido Custico. Los vapores No es combustible Utilizar en sistema Fuerte oxidante, Ataca algunas
Br2 humeante de son custicos para los pero favorece la cerrado y con reacciona de formas de
color marrn ojos y las vas combustin de ventilacin. Usar modo violento con plstico,
rojizo oscuro y respiratorias. La otras sustancias. guantes y ropa materiales goma y
olor acre. inhalacin puede Muchas protectora, gafas de combustibles y revestimientos.
Punto de provocar edema reacciones pueden mscara, visera o reductores, y

fusin: -7,2 C. pulmonar y efectos en provocar fuego o proteccin ocular tambin con
Punto de el sistema nervioso explosiones. El combinada con amoniaco acuoso,
ebullicin: central. El contacto calentamiento proteccin oxidantes,
58,8 C. con los ojos puede causa un aumento respiratoria. metales,
causar visin borrosa, de la presin, con compuestos
enrojecimiento ocular, riesgo de orgnicos y
dolor y quemaduras quemaduras. fsforo.
graves.
Carbono, dixido de Slido blanco Riesgo de asfixia en Usar guantes Metales alcalinos,
(slido; hielo seco) translcido a zonas cerradas o mal aislantes protectores. bases fuertes.
CO2 -79 C; ventiladas. El contacto Almacenar en
sublima a con hielo seco recipiente abierto
temperatura slido produce slo en zonas o
ambiente. lesiones por locales ventilados.
congelacin.
Carbono, tetracloruro Lquido Puede ser absorbido No es Evitar todo contacto. Al entrar en
de incoloro de olor por la piel y provocar combustible. Trabajar con contacto con
CCl4 caracterstico a dermatitis tras la Desprende ventilacin, superficies
ter. Punto de exposicin prolongada. vapores o gases extraccin local de calientes o llamas
fusin: -23 C. Irrita los ojos. Puede irritantes o txicos aire o proteccin se descompone
Punto de causar lesiones en incendios. respiratoria. Usar formando humos
ebullicin: hepticas y trastornos guantes de nitrilo y y gases txicos y
76,5 C. del sistema nervioso prendas protectoras, custicos (cido
167
central, produciendo visera o proteccin clorhdrico, cloro,
cefaleas, nuseas, ocular con proteccin fosgeno).
ligera ictericia, prdida respiratoria. Reacciona con
de apetito y narcosis. algunos metales:
Carcingeno animal. aluminio,
magnesio, zinc.
Ciangeno, bromuro Cristales Efectos oculares, No es combustible Trabajar en sistema Se descompone al

de incoloros o cutneos y pero forma un gas cerrado con calentarlo y al entrar
BrCN blancos, de respiratorios graves. inflamable al ventilacin. Usar en contacto con
olor acre. La inhalacin de calentarlo. En los guantes y ropa de cidos, produciendo
Punto de vapores puede incendios proteccin, gafas de cianuro de
fusin: 52 C. provocar edema desprende mscara, visera o hidrgeno,
Punto de pulmonar, vapores o gases proteccin ocular sumamente txico e
ebullicin: convulsiones, prdida irritantes o combinada con inflamable, y
61 C. de conocimiento, txicos. proteccin bromuro de
insuficiencia respiratoria. hidrgeno, de
respiratoria y muerte. accin custica.
Reacciona con
oxidantes fuertes.
Reacciona
168
lentamente con el
agua y la humedad
para producir
bromuro para de
hidrgeno y cianuro
de hidrgeno.
Ataca a muchos
metales en presen-
cia de agua.
Citocalasina (AJ) Polvo blanco. Txico por ingestin, Evitar contacto con Agentes oxidantes
Punto de inhalacin o absorcin los ojos, la piel y la fuertes.
fusin: variable. cutnea. Puede ropa. Usar gafas de
producir mscara resistentes a
malformaciones las sustancias
congnitas. qumicas y guantes
de goma o de
plstico.
Clorhdrico, cido Lquido Custico para los ojos, No respirar los Reacciona Libera
(1037%) incoloro las vas respiratorias y vapores; utilizar violentamente con vapores muy
HCl humeante de la piel. La inhalacin proteccin las bases (slidos txicos en los
Cloruro de hidrgeno olor acre. repetida de vapores respiratoria. En caso y soluciones incendios.
Punto de puede causar de contacto con los concentradas), y
ebullicin: bronquitis crnica. ojos, aclarar de de forma
-121 C. inmediato con agua y explosiva con el
169
Miscible con el acudir al mdico. En permanganato
agua. caso de contacto con potsico slido.
la piel, lavar de Produce gases
inmediato con agua txicos o
abundante. Trabajar explosivos en
bajo campana contacto con
extractora de muchos metales.
vapores. Usar
guantes de goma o
plstico y proteccin
ocular (gafas de
patilla o de mscara).
Cloro Gas amarillo Corrosivo para los No es combustible Trabajar en sistema La solucin Ataca a
Cl2 verdoso de olor ojos, la piel y las vas pero favorece la cerrado y con acuosa es un muchos
acre. Punto de respiratorias. La combustin de ventilacin. Usar cido fuerte que metales en
fusin: inhalacin del gas otras sustancias. guantes aislantes reacciona presencia de
-101 C. Punto puede causar contra el fro, ropa violentamente con agua. Ataca al
de ebullicin: neumonitis y edema protectora, gafas de bases y muchos plstico, la
-34 C. pulmonar, produciendo mscara o proteccin compuestos goma y los
sndrome de ocular combinada orgnicos, revestimientos.
disfuncin reactiva de con proteccin acetileno,
las vas respiratorias. respiratoria. butadieno,
La evaporacin rpida benceno y otras
del lquido puede fracciones del
provocar congelacin. petrleo,
170
Las exposiciones amonaco,
elevadas pueden ser hidrgeno,
mortales. Los efectos carburo sdico,
pueden ser retardados. trementina y
Est indicada metales muy
observacin mdica. desmenuzados,
provocando
llamas y riesgo de
explosin.
Cloro, dixido de Gas de color Irritacin grave ocular, No es combustible Trabajar en sistema Fuerte oxidante
ClO2 amarillo a rojo cutnea y respiratoria pero favorece la cerrado con que reacciona
o lquido grave. La inhalacin combustin de ventilacin. Utilizar violentamente con
marrn rojizo. del gas puede causar otras sustancias. guantes y ropa materiales
Punto de edema pulmonar. Los Puede explotar al protectora, gafas de combustibles y
fusin: -59 C. efectos pueden ser calentarlo, al mscara o proteccin reductores.
Punto de retardados. Est exponerlo a la luz ocular combinada Reacciona
ebullicin: indicada observacin solar, al recibir con proteccin violentamente con
10 C. mdica. impactos o respiratoria. el fsforo, el
chispas. hidrxido
potsico, el
azufre, el
amonaco, el
metano, la fosfina
y el cido
sulfhdrico.
171
Cloroformo Lquido voltil Nocivo por inhalacin, Usar ropa protectora, Bases fuertes; Cuando se
CHCl3 incoloro de olor ingestin y contacto guantes de nitrilo y algunos metales calienta hasta
caracterstico. con la piel. Irritante proteccin ocular. como el aluminio, la
Punto de para la piel. Puede Trabajar bajo el magnesio y el descomposicin
fusin: -63 C. afectar al hgado, al campana extractora polvo de zinc. produce gas
Punto de rin y al sistema de vapores. Oxidantes fuertes. de fosgeno.
ebullicin: nervioso central, Ataca al
61 C. produciendo cefaleas, plstico y la
Ligeramente nuseas, ligera goma.
soluble en ictericia, prdida de
agua. apetito y narcosis. La
exposicin prolongada
o crnica produce
cncer en animales.
Presunto carcingeno
172
para el ser humano.
Cobre Slido rojizo, La inhalacin de Combustible. Trabajar con Se forman

Cu brillante, vapores de cobre extraccin local de compuestos
maleable, puede producir fiebre. aire o proteccin sensibles al
inodoro. Polvo respiratoria, guantes impacto con
rojo que se y gafas protectoras compuestos

vuelve verde si de mscara. acetilnicos, xidos
se expone a de etileno, azidas y
aire hmedo. agua oxigenada.
Punto de Reacciona con
fusin: oxidantes fuertes
1083 C. Punto como cloratos,
de ebullicin: bromatos y
2567 C. yodatos, con
peligro de
explosin.
Crmico, cido Escamas o Irrita los ojos, la piel y Se descompone Impedir el contacto En solucin
CrO3 polvo de color el aparato respiratorio. por encima de los con la piel y los ojos. acuosa es un
xido de cromo VI rojo oscuro, El contacto repetido o 250 C en xido Evitar la inhalacin cido fuerte que
inodoro. Se prolongado con la piel crmico y de polvo fino y reacciona con
utiliza a puede producir oxgeno, vapores. Trabajar con bases y tiene
menudo en dermatitis, lceras por aumentando el ventilacin, accin custica.
soluciones cromo y sensibilizacin peligro de extraccin local de Fuerte oxidante,
acuosas. Punto cutnea. La inhalacin incendio. Muchas aire o proteccin reacciona con
de fusin: puede provocar reacciones son respiratoria. materiales
197 C. reacciones de tipo peligrosas. combustibles,
asmtico. Puede orgnicos u otros
provocar perforacin fcilmente
del tabique nasal. oxidables (papel,
Carcingeno para el madera, azufre,
ser humano. aluminio, plsticos
. . .). Corrosivo
173
para los metales.
Dietil ter Lquido Irritacin ocular y Muy inflamable. Mantener el La exposicin al

C2H5OC2H5 incoloro, muy respiratoria. Puede Temperatura de recipiente en zona aire y a la luz
voltil de olor afectar al sistema inflamacin: bien ventilada, puede provocar la
dulce nervioso central, -45 C. Intervalo alejado de fuentes de formacin de
caracterstico. provocando mareos y de inflamabilidad: ignicin. Recipientes perxidos. Puede
Punto de prdida de 1,748%. con toma de tierra reaccionar
fusin: conocimiento. La para prevenir las violentamente con
-116 C. Punto inhalacin repetida descargas de oxidantes y
de ebullicin: puede provocar electricidad esttica halgenos.
34 C. adiccin. Trabajar bajo
Ligeramente campana extractora
soluble en de vapores y usar
agua. guantes de nitrilo
para impedir la
prdida de grasa de
174
la piel.
Dimetilamina Gas licuado Irritacin ocular y Muy inflamable. Mantener alejada de Puede reaccionar
(CH3)2NH incoloro, voltil, respiratoria grave.La Temperatura de las fuentes de con oxidantes y
de olor acre. inhalacin puede inflamacin: ignicin. En caso de mercurio.
Punto de provocar edema -26 C. Intervalo contacto con los
fusin: -93 C. pulmonar. La de inflamabilidad: ojos, aclarar

Punto de evaporacin rpida 2,814% Solucin inmediatamente y
ebullicin: 7 C. puede provocar muy inflamable. acudir al mdico.
Miscible con el lesiones por Temperatura de Trabajar bajo
agua. congelacin. La inflamacin: campana extractora
solucin es custica -18 C. de vapores. Usar
para los ojos y la piel. guantes de nitrilo y
gafas de mscara
resistentes a
sustancias qumicas.
2,4-dinitrofenilhidracina Polvo cristalino Irritante para la piel y Mantener hmeda Puede reaccionar
C6H3(NO2)2-NHNH2 de color rojo los ojos. Nocivo por para reducir el riesgo fuertemente con
1-hidracino-2,4- anaranjado. ingestin, inhalacin y de explosin. Usar oxidantes y
dinitrobenceno Punto de contacto con la piel. respirador contra el reductores.
fusin: 200 C. polvo, guantes de
Ligeramente goma o plstico y
soluble en gafas de mscara
agua. contra agentes
qumicos.
Dioxano Lquido Irritante ocular y Muy inflamable; Trabajar con Puede formar
C4H8O2 incoloro de olor respiratorio. Puede puede incendiarse ventilacin o perxidos
Dixido de dietileno caracterstico. afectar al sistema a distancia. El extraccin local de explosivos.
Punto de nervioso central, flujo, la agitacin, aire.Prohibidos: Reacciona
fusin: 12 C. provocando cefaleas, etc. pueden llamas desnudas, enrgicamente
Punto de nuseas, tos, dolor de generar cargas chispas, fumar, con oxidantes
175
ebullicin: garganta, dolor electrostticas. contacto con fuertes y cidos
101 C. abdominal, mareos, oxidantes fuertes o fuertes
somnolencia, vmitos superficies calientes, concentrados.
y prdida de aire comprimido para Reacciona de
conocimiento. Puede rellenar, descargar o forma explosiva
ser absorbido por la manipular y con algunos
piel. Lesiones herramientas que catalizadores.
hepticas y renales. produzcan chispas. Ataca a muchos
Probablemente Usar guantes y ropa plsticos.

carcingeno para el ser de proteccin, visera
humano. o proteccin ocular
junto con proteccin
respiratoria.
Etanol Lquido voltil Nocivo en caso de Muy inflamable. Mantener el Reacciona

CH3CH2OH incoloro con un ingestin. Irritante Temperatura de recipiente bien violentamente con
ligero olor ocular. Puede afectar al inflamacin: 12 C cerrado y alejado de oxidantes fuertes.
caracterstico. sistema nervioso Intervalo de las fuentes de
Punto de central. inflamabilidad: ignicin.
fusin: 319%.
-117 C. Punto
de ebullicin:
79 C. Miscible
con el agua.
Etanolamina Lquido Custico para los ojos, Temperatura de Usar guantes de Reacciona con
H2NCH2CH2OH viscoso, no el aparato respiratorio inflamacin: goma o plstico y oxidantes fuertes.
2-aminoetanol voltil e y la piel. Puede 85 C. proteccin ocular.
176
incoloro con provocar
olor a sensibilizacin cutnea.
amonaco.
Punto de
fusin: 10 C.
Punto de
ebullicin:
171 C Miscible
con el agua.
Fenol Cristales La sustancia y sus Temperatura de No respirar los Reacciona con
C6H5OH incoloros o de vapores son custicos inflamacin: vapores; utilizar oxidantes, con
color rosa para los ojos, la piel y 80 C. Intervalo proteccin peligro de
plido de olor las vas respiratorias y de inflamabilidad: respiratoria. Evitar el incendio y
caracterstico. provocan quemaduras 1,76%. contacto con los ojos explosin.
Punto de graves. Es absorbido y la piel. Trabajar
fusin: 41 C. por la piel. Trastornos bajo campana
Punto de del sistema nervioso extractora de
ebullicin: central y coma. vapores. Usar
182 C. Soluble Lesiones hepticas y guantes de nitrilo y
en agua. renales. Sntomas: proteccin ocular. En
dolor abdominal, caso de contacto con
vmitos, diarrea, los ojos, lavar de
irritacin de la piel, inmediato con agua y
dolor ocular. El acudir al mdico. En
contacto prolongado caso de contacto con
177
con soluciones diluidas la piel, quitar la ropa
puede causar contaminada y
dermatitis. extender sobre la
zona afectada
glicerol,
polietilenglicol 300 o
una mezcla de
polietilenglicol (70%)
y alcohol
desnaturalizado
(30%), y despus
enjuagar con agua.
Formaldehdo, Lquido Grave irritacin de los Temperatura de Usar prendas Puede reaccionar Las
solucin de incoloro de olor ojos y la piel, irritacin inflamacin: protectoras, como vigorosamente soluciones
(3741% de acre. Punto de de las vas 50 C. delantal de plstico, con oxidantes. concentradas
formaldehdo con ebullicin: respiratorias. La guantes de goma o Con el se enturbian
1114% de metanol) 96 C. Miscible exposicin prolongada plstico y gafas de nitrometano si se
HCHO con el agua. a los vapores puede mscara resistentes a genera productos almacenan a
provocar sntomas de las sustancias explosivos y con menos de
tipo asmtico, qumicas. Trabajar el cido 21 C; deben
conjuntivitis, laringitis, bajo campana clorhdrico mantenerse a
bronquitis o extractora de vapores produce el potente 2125 C.
bronconeumona. o en zona bien carcingeno Las
Puede causar ventilada. bis(clorometil) soluciones
sensibilizacin por ter. diluidas
178
contacto con la piel. (15%) y de
Riesgo de efectos concentracin
irreversibles en la intermedia
salud. Posiblemente (5 25%)
carcinognico. presentan
muchos de
los peligros
de la forma
concentrada.
Fosfrico, cido Lquido viscoso Custico; provoca Ataca a muchos En caso de contacto
H3PO4 incoloro o quemaduras en la piel metales con los ojos, aclarar
cristales y los ojos. produciendo con agua y buscar
blancos hidrgeno. atencin mdica.
higroscpicos. Desprende Usar guantes de
Punto de vapores txicos nitrilo y proteccin
fusin: 42 C. en los incendios. ocular.
Se descompone
por debajo del
punto de
ebullicin a
213 C. Soluble
en agua.
Fsforo, pentxido de Cristales o Custico para los ojos, No es combustible Trabajar con La solucin
P2O5 polvo blancos, la piel y las vas pero favorece la extraccin local de acuosa es un cido
higroscpicos. respiratorias. Produce combustin de aire. Usar guantes y fuerte, corrosivo,
179
Punto de dolor de garganta, tos, otras sustancias. ropa de proteccin, que reacciona
fusin: 340 C. sensacin de ardor, Muchas visera o proteccin violentamente con
Punto de dificultad respiratoria; reacciones pueden ocular junto con las bases.
sublimacin: quemaduras, dolor y provocar proteccin Reacciona
360 C. ampollas en la piel y incendios o respiratoria. violentamente con
quemaduras en los explosiones. el cido perclrico,
ojos. La inhalacin Desprende con peligro de
puede provocar edema vapores o gases incendio y
pulmonar. La ingestin irritantes o txicos explosin.
puede causar clicos, durante los Reacciona

sensacin de ardor, incendios. violentamente con
diarrea, dolor de el agua formando
garganta y vmitos. cido fosfrico.
Ataca a muchos
metales en
presencia de agua.
Glutaraldehdo Solucin Produce irritacin Trabajar bajo Puede reaccionar A menudo se

OHC(CH2)3CHO incolora o grave de los ojos y las campana extractora fuertemente con suministra en
amarillo claro vas respiratorias altas. de vapores o en zona los oxidantes. solucin
de olor acre. La exposicin bien ventilada. Usar acuosa en
Punto de prolongada por guantes de goma o distintas
fusin: -14 C. inhalacin o contacto plstico y proteccin concentra-
Punto de con la piel puede ocular. ciones con
ebullicin: provocar estabilizante
189 C. sensibilizacin. aadido para
Miscible con el aumentar la
agua. estabilidad.
180
Mercurio Lquido pesado, Puede ser absorbido No es Mantener el Acetileno, cido Almacenar
Hg plateado. Punto por la piel. La combustible. recipiente bien fulmnico. losrecipientes
de fusin: exposicin repetida Desprende cerrado. Trabajar bajo Reacciona con el y utilizar
-39 C. Punto puede afectar a los vapores irritantes campana extractora amonaco, las sobre
de ebullicin: riones y al sistema o txicos en de vapores o en zona azidas y el xido bandejas para
357 C. nervioso central, y incendios. bien ventilada. Evitar de etileno para contener los
Insoluble en causar vmitos, los derrames. formar productos posibles
agua. diarrea, cefaleas, Prcticas higinicas explosivos. derrames.
nuseas, gingivitis y estrictas. Usar Reacciona Aspirar las
dientes sueltos. guantes de nitrilo. violentamente con gotitas
el bromo. Forma derramadas
amalgamas con en un
muchos metales. pequeo
frasco de
respirador
con un tubo
181
capilar
conectado a
una
bomba.Tratar
las zonas del
derrame con
polvo de zinc
para formar
una
amalgama.
Metanol Lquido voltil Los efectos en el siste- Muy inflamable. Mantener el Puede reaccionar
CH3OH incoloro de olor ma nervioso central Temperatura de recipiente bien violentamente con
caracterstico. producen prdida de inflamacin: cerrado y lejos de oxidantes. Las
Punto de conocimiento. -16 C. Intervalo fuentes de ignicin. reacciones con el
fusin: -98 C. Irritacin de las de inflamabilidad: Evitar respirar los magnesio o el
Punto de mucosas. La exposi- 737%. vapores y el contacto bromo pueden ser
ebullicin: cin crnica puede con la piel. Trabajar violentas; con los
65 C. Miscible daar la retina y el bajo campana oxidantes fuertes
con el agua. nervio ptico. El con- extractora de vapores o el cloroformo
tacto prolongado con la o zona bien ventilada. con sodio pueden
piel puede provocar Usar guantes de ser explosivas.
dermatitis. Puede ser goma o plstico y
absorbido por la piel. proteccin ocular.
182
Naftilamina (alfa y Cristales Ambas formas son Combustible. Evitar toda Uso prohibido
beta) blancos a muy txicas por exposicin. Llevar o legalmente
C10H9N rosados de olor inhalacin, ingestin y ropa protectora controlado en
N-fenil-a-naftilamina caracterstico. contacto con la piel. adecuada. Trabajar muchos
y Alfa punto de Carcingeno en el ser bajo campana pases.
N-fenil-b-naftilamina fusin: 50 C. humano (cncer de extractora de vapores
Punto de ebulli- vejiga). Mutgeno y o con ventilacin por
cin: 301 C. teratgeno extraccin de aire.

Beta punto de experimental.
fusin: 113 C. Absorbido por la piel.
Punto de ebulli-
cin: 306 C.
Poco soluble en
agua pero el
clorhidrato es
soluble en agua.
Ninhidrina Slido amarillo Nociva por ingestin e Inflamable, slido Evitar la inhalacin El contacto
C9H6O4 plido. Se inhalacin. Irritante combustible. del aerosol o vapor y con la piel
descompone para los ojos, las vas Temperatura de el contacto con los produce una
antes de respiratorias y la piel. inflamacin: 39 C ojos. Usar guantes mancha
fundirse a La exposicin repetida de goma o plstico y violeta
241 C. Se puede causar gafas de mscara persistente.
suministra en sensibilizacin cutnea. resistentes a las
botes de sustancias qumicas.
aerosol, en
solucin al
0,5% en
butanol. Soluble
en agua.
Ntrico, cido Lquido Custico; provoca Oxidante; en No respirar los cidos actico, El cido
(5070%) humeante quemaduras graves en contacto con vapores; utilizar pro- crmico, ntrico
HNO3 incoloro o los ojos y la piel. La material teccin respiratoria. cianhdrico y concentrado
183
amarillo claro. inhalacin de los combustible En caso de contacto sulfhdrico, interviene en
Punto de vapores puede causar puede provocar con los ojos, enjuagar anilina, carbono, ms
fusin: -42 C. edema pulmonar. fuego. Desprende de inmediato y acudir bases, metales y reacciones
Punto de vapores txicos al mdico. En caso de muchas otras peligrosas
ebullicin: en los incendios. contacto con la piel, sustancias. que ningn
83121 C. aclarar inmediata- otro reactivo
Miscible con el mente; retirar la ropa qumico.
agua. contaminada. Usar
guantes de PVC,
delantal de plstico y
gafas de mscara
resistentes a las sus-
tancias qumicas. Uti-
lizar bajo campana
extractora de vapores.
Nitrobenceno Lquido oleoso Metahemoglobinemia Combustible. Trabajar con Su combustin

C6H5NO2 de color con cianosis y lesiones Temperatura de ventilacin, genera vapores
amarillo plido hepticas. Sntomas: inflamacin: extraccin local de custicos, entre
y olor labios o uas azulados, 88 C. Riesgo de aire o proteccin ellos xidos de
caracterstico. piel azulada, mareos, fuego y explosin. respiratoria. Usar nitrgeno. Reac-
Punto de nuseas, debilidad, guantes protectores, ciona violenta-
fusin: 6 C. prdida de ropa protectora, mente con
Punto de conocimiento. gafas de mscara. oxidantes fuertes y
ebullicin: Absorbido por la piel. agentes reduc-
211 C. tores, con peligro
de incendio y
explosin. Ataca a
muchos plsticos.
184
Forma sustancias
o mezclas explosi-
vas (trmicamente
inestables) con
muchos com-
puestos orgnicos
e inorgnicos.
Osmio, tetrxido de Cristales de Muy txico por Poderoso Mantener el recipiente
OsO4 color amarillo inhalacin, ingestin y oxidante. No es bien cerrado y en
claro de olor contacto con la piel. combustible pero lugar bien ventilado.
acre. Punto de Provoca quemaduras favorece la Utilizar el slido y las
fusin: 40 C. graves e irritacin. Las combustin de soluciones bajo
Punto de soluciones, los otras sustancias. campana extractora
ebullicin: vapores y el slido son de vapores. Usar
130 C. custicos para la piel y gafas de mscara
Sublima por las vas respiratorias. resistentes a las sus-
debajo del La inhalacin puede tancias qumicas y
punto de provocar edema guantes de protec-
ebullicin y es pulmonar. cin. Preparar las
soluble en disoluciones
agua. aadiendo la ampolla
sin abrir al volumen
necesario de agua;
185
cerrar y agitar para
romper la ampolla.
Oxlico, cido Cristales Nocivo en contacto Combustible. Evitar el contacto con Agentes
HO2CCO2H incoloros; con la piel o por Desprende humos la piel y los ojos. oxidantes.
soluble en ingestin. El polvo o gases irritantes Usar proteccin Tambin la plata,
agua. Punto de irrita las vas o txicos en los ocular y guantes. el mercurio y sus
fusin: 190 C. respiratorias y los incendios. compuestos.
Se ojos. Las soluciones

descompone. irritan los ojos y puede
provocar quemaduras
en la piel.
Oxgeno Gas A concentraciones muy No es combustible Prohibidos: llamas Potente oxidante

O2 comprimido altas irrita las vas pero favorece la desnudas, chispas, que reacciona con
incoloro. Punto respiratorias. combustin de fumar, contacto con materiales
de fusin: otras sustancias. sustancias combustibles y
-218,4 C. El calentamiento inflamables. reductores, con
Punto de hace aumentar la peligro de incendio
ebullicin: presin, con y explosin.
-183 C. riesgo de Reacciona con
explosin. aceites, grasas,
hidrgeno y
lquidos, slidos y
gases inflamables.
Perclrico, cido Lquido Custico; provoca Potente oxidante. Evitar respirar los Materiales Poderoso
HClO4 incoloro. quemaduras graves en No es combustible vapores y otros tipos combustibles y agente oxi-
186
Miscible con el los ojos y en la piel, pero favorece la de exposicin. Usar agentes dante. Puede
agua. as como en caso de combustin de ropa protectora, reductores: formar
ingestin. Los vapores otras sustancias. incluidos guantes de anhdrido actico, productos
son corrosivos para nitrilo, proteccin bismuto y sus explosivos en
los ojos, la piel y las ocular y facial. aleaciones, contacto con
vas respiratorias. La Utilizar las soluciones alcohol, metales, muchos
inhalacin de vapores calientes bajo papel, madera y materiales

puede provocar edema campana extractora otros materiales orgnicos e
pulmonar. de vapores. orgnicos. inorgnicos:
suelos de
madera
contaminados,
mesas de
madera, etc.
Puede explotar
por percusin.
Pcrico, cido Cristales Txico por ingestin, Explosivo en Mantener Forma sales con Manchas
C6H2(NO2)3OH amarillos inhalacin o contacto estado seco. humedecido con muchos metales amarillas en
2,4,6trinitrofenol humedecidos con la piel. La agua en todo que son ms explo- la piel.
con agua o ingestin puede momento o utilizar sivas que el cido
disueltos en producir cefaleas y slo en solucin por s solo. En con-
alcohol. Punto nuseas. Irritante alcohlica. tacto con el
de fusin: ocular. hormign puede
122 C. formar picrato
Ligeramente clcico, un explo-
soluble en sivo sensible a la
agua. friccin. Puede
reaccionar
vigorosamente con
agentes reductores.
Piridina Lquido Afecta al sistema Muy inflamable. Trabajar con Reacciona
187
C5H5N incoloro de olor nervioso central, cau- Temperatura de ventilacin, violentamente con
caracterstico. sando mareos, cefaleas, inflamacin: extraccin local de oxidantes fuertes
Punto de nuseas, dificultad para 20 C. Intervalo aire o proteccin y cidos fuertes.
fusin: 42 C. respirar y prdida de explosivo: 1,8 respiratoria. Usar
Punto de conocimiento. Puede 12,4%. Desprende guantes y ropa
ebullicin: ser absorbida por la piel vapores o gases protectora.
115 C. provocando rubor y irritantes o txicos
sensacin de ardor. La en los
ingestin produce dolor incendios.Los

abdominal, diarrea, vapores y las
vmitos y debilidad. La mezclas son
exposicin repetida explosivos.
tiene efectos hepticos
y renales.
Plata Metal blanco La inhalacin de No es Trabajar con Incompatible con

Ag que se grandes cantidades de combustible, salvo extraccin local de acetileno,
oscurece con la vapores de plata en forma de aire. Usar guantes y compuestos de
exposicin al metlica puede provo- polvo. gafas de seguridad o amonio, cido
ozono, al cido car lesiones pul- proteccin ocular oxlico y cido
sulfhdrico o al monares y edema combinada con tartrico.
azufre. Punto pulmonar. La exposi- proteccin
de fusin: cin prolongada o respiratoria en
962C. Punto repetida (argirismo) presencia de polvo o
de ebullicin: puede provocar vapores.
2212 C. coloracin gris azulada
en los ojos, nariz,
garganta y piel.
Plata, nitrato de Cristales Puede provocar No es combustible Evitar la dispersin Las soluciones
188
AgNO3 blancos. Punto irritacin grave y pero favorece la del polvo. Estrictas amoniacales
de fusin: quemaduras en los combustin de medidas de higiene. pueden precipitar
212 C. Punto ojos y la piel. Custico otras sustancias. Usar guantes de nitrito de plata en
de ebullicin: por ingestin. La goma o plstico y presencia de una
444 C. Soluble exposicin prolongada visera o proteccin base o de glucosa.
en agua. o repetida (argirismo) ocular combinada Puede formar pro-
puede provocar con proteccin ductos explosivos

cambios de color en la respiratoria. En caso con etanol y puede
piel (rojo azulado). de contacto con los provocar poli-
ojos, aclarar con merizacin
agua y acudir al explosiva con
mdico. acrilonitrilo. Puede
provocar ignicin
o explosin si se
mezcla con
carbn, magnesio,
fsforo o azufre.
Potasio, hidrxido de Escamas, Custico para las vas En caso de contacto Reacciona Ataca a
KOH polvo, grnulos respiratorias, los ojos con los ojos, aclarar violentamente con algunos
o barritas de y la piel. La inhalacin de inmediato con cidos y con metales
color blanco. de polvo produce agua y acudir al nitrobenceno y (aluminio,
Punto de edema pulmonar. mdico. En caso de muchos otros zinc, estao)
fusin: 360 C. contacto con la piel, detergentes en presencia
Punto de lavar de inmediato y Produce mucho de humedad.
ebullicin: quitar la ropa calor al mezclarlo
1320 C. Muy contaminada. Usar con agua.
soluble en guantes de goma o Almacenar en
agua. plstico y proteccin recipiente cerrado
ocular, incluso para hermticamente.
las soluciones
diluidas.
Potasio, Cristales Custico por ingestin Potente oxidante; Usar prendas Reacciona de
189
permanganato de morados. o inhalacin de polvo. puede inflamar protectoras, forma violenta o
KMnO4 Punto de Sumamente irritante materiales proteccin ocular y explosiva si se
fusin: 240 C para los ojos y las vas combustibles. respirador contra mezcla con una
(se respiratorias. La partculas si se amplia variedad
descompone). inhalacin de polvo produce polvo. de compuestos
Fcilmente puede provocar edema inorgnicos y
soluble en pulmonar. orgnicos o
agua. metales en polvo.
Potasio, telurito de Cristales Txico por ingestin e Usar ropa protectora.

K2TeO3 delicuescentes inhalacin de polvo
de color Irritante cutneo y
blanco. Muy ocular.
soluble en
agua.
Propan-2-ol Lquido Irritante para los ojos y Muy inflamable. Mantener el En caso de El propan-2-
(CH3)2CHOH incoloro de olor las vas respiratorias. Temperatura de recipiente bien exposicin ol al 7085%
Isopropanol alcohlico. Puede tener efectos en inflamacin: cerrado y alejado de prolongada al aire en agua, uti-
Punto de el sistema nervioso 112 C. Intervalo fuentes de ignicin. y a la luz puede lizado como
fusin: -89 C. central, provocando de inflamabilidad: Trabajar bajo reaccionar desinfectante
Punto de cefaleas, mareos, 2,312,7%. campana extractora vigorosamente en pulveriza-
ebullicin: nuseas, vmitos y de vapores. Usar con oxidantes ciones, sigue
190
82 C. Miscible coma. guantes de nitrilo y para formar entraando
con el agua. proteccin ocular. perxidos peligro de
inestables. incendio y no
debe uti-
lizarse cerca
de fuentes de
ignicin.
Selenio Slido inodoro Irritacin cutnea y Combustible. Evitar la dispersin Reacciona violenta-
Se en diversas ocular. La inhalacin Desprende del polvo. Medidas mente con oxidantes
formas: slido de polvo puede vapores o gases estrictas de higiene. y cidos fuertes.
amorfo de color provocar edema irritantes o txicos Trabajar con Reacciona con el
marrn rojizo pulmonar. La en los incendios. extraccin local de agua a 50 C, for-
oscuro a negro exposicin repetida aire. Usar guantes mando hidrgeno
azulado; puede provocar protectores, ropa inflamable y cidos
cristales rojos prdida de las uas y protectora y gafas de de selenio. Al calen-
transparentes o efectos seguridad. tarlo suavemente
cristales gris gastrointestinales. reacciona con incan-
metlico a descencia con el
negro. Punto de fsforo y metales
fusin: como el nquel, zinc,
170217 C. sodio, potasio y
Punto de ebulli- platino.
cin: 685 C.
191
Sodio, azida de Slido Muy txica por Se descompone En caso de contacto Reacciones explosi-
N3Na cristalino ingestin, inhalacin y de forma con la piel, lavar de vas con bromo,
incoloro. Punto contacto con la piel; explosiva cuando inmediato. No inhalar disulfuro de carbono
de fusin: puede provocar se calienta por el polvo. Usar o cloruro de cromo.
300 C. Soluble quemaduras. El polvo encima de su guantes de goma o El slido reacciona
en agua. y las soluciones irritan punto de fusin. plstico y proteccin con metales pesados
los ojos y la piel. Desprende ocular. como cobre, plomo y
Puede ser absorbida vapores txicos al mercurio para

por la piel. calentarse; no formar sales metli-
usar agua para cas, que son explosi-
extinguir vas. En contacto con
incendios. cidos produce
gases muy txicos y
explosivos.
Sodio, biselenito de Polvo cristalino Txico por ingestin e Usar ropa protectora. Oxidantes.
NaHSeO3 blanco o inhalacin de polvo,
incoloro. con posible efecto
Soluble en acumulativo.
agua. Teratgeno
experimental. El
contacto prolongado
con la piel puede
provocar dermatitis.
Sodio, cianuro de Polvo cristalino Sumamente txico por Puede desprender No inhalar el polvo, Libera cianuro de Tratar los
NaCN blanco con olor ingestin, inhalacin y gases txicos en utilizar proteccin hidrgeno (CNH) derrames de
a almendras. contacto con la piel. incendios. respiratoria. Evitar el gaseoso, muy soluciones con
Punto de Muy irritante para los contacto con los ojos txico, en leja en polvo
fusin: 563 C. ojos. Puede ser y la piel; en caso de contacto con (hipoclorito
192
Punto de absorbido por la piel. contacto con la piel, cidos o con agua sdico) y dejar
ebullicin: La exposicin repetida lavar inmediatamente que lleve dixido actuar 24 h;
1496 C. Muy puede afectar al con agua y quitar la de carbono barrer los
soluble en tiroides. ropa contaminada. disuelto. Puede residuos
agua. Usar gafas de formar mezclas slidos con
mscara a prueba de explosivas con cuidado y
sustancias qumicas nitritos. verter en agua

y guantes de goma o con leja en
plstico. Guardar en polvo; dejar 24
lugar cerrado con h antes de
llave y ventilado. eliminar.
Disponer de
antdoto
contra el
cianuro en el
laboratorio.
Sodio, hidrxido de Escamas, Sustancia slida y No es En caso de contacto Produce mucho Guardar en
NaOH polvo, grnulos soluciones combustible. El con los ojos, aclarar calor cuando se recipiente
o barritas concentradas. La contacto con de inmediato y acudir mezcla con agua. cerrado
incoloras. inhalacin del polvo humedad o agua al mdico. En caso Reacciona hermticamen
Punto de produce lesiones en puede generar de contacto con la vigorosamente te en lugar
fusin: 318 C. las vas respiratorias y calor suficiente piel, lavar con mezclas de seco.
Punto de edema pulmonar. Es para inflamar inmediatamente con cloroformo
ebullicin: custico por ingestin. sustancias agua y quitar la ropa metanol y con
1390 C. Las soluciones diluidas combustibles. contaminada. Usar cidos fuertes.
Soluble en son irritantes para los guantes de plstico o
agua. ojos o pueden goma y proteccin
provocar lesiones ocular, incluso con
graves si el contacto las soluciones
es prolongado. diluidas.
193
Sodio, hipoclorito de Solucin Custica para los ojos, Fuerte oxidante. En caso de contacto Libera gases muy Pierde cloro
(solucin con un incolora o de la piel y las vas Puede desprender con los ojos, aclarar txicos en con- gradualmente
1014% de cloro color amarillo respiratorias, as como vapores txicos de inmediato con tacto con cidos. durante el
libre) plido con olor por ingestin. La en incendios. agua y acudir al Puede reaccionar almacena-
NaOCl a cloro. inhalacin puede mdico. En caso de vigorosamente miento. Las
Miscible con el provocar edema contacto con la piel, con compuestos soluciones
agua. pulmonar. La lavar de inmediato. combustibles y diluidas
exposicin repetida No inhalar los reductores. Puede utilizadas
puede causar vapores; usar reaccionar con como
sensibilizacin cutnea. proteccin compuestos de desinfectante
respiratoria. Trabajar nitrgeno para se deterioran
en zona bien formar com- rpidamente.
ventilada. Usar puestos N- Almacenar
194
guantes de goma o clorados, que son alejada de
plstico y proteccin explosivos. Puede cidos en una
ocular apropiada para reaccionar violen- zona oscura,
sustancias qumicas. tamente con el fresca y bien
metanol. ventilada.
Sulfhdrico, cido Gas incoloro Puede tener efectos en Muy inflamable. Trabajar con Oxidantes fuertes El sentido del
H2S con fuerte olor el sistema nervioso Intervalo de ventilacin o y cido ntrico olfato se
Sulfuro de hidrgeno a huevos central y producir explosin: extraccin local de fuerte. Ataca a satura
podridos. cefaleas, mareos, tos, 4,346%. aire. Usar gafas de muchos metales y rpidamente y
Punto de dolor de garganta, mscara o proteccin plsticos. no es fiable
fusin: -85 C. nuseas, dificultad para ocular junto con para advertir
Punto de respirar, prdida de proteccin la presencia
ebullicin: conocimiento y muerte. respiratoria. continua del
-60 C. La inhalacin puede gas.
provocar edema pul-
monar. En los ojos
puede producir enroje-
cimiento, dolor y que-
maduras profundas
graves.
Sulfrico, cido Lquido viscoso La solucin Puede desprender En caso de contacto Potente desecante Puede
H2SO4 incoloro e concentrada (15%) es vapores txicos con los ojos, aclarar oxidante; reac- producirse
195
inodoro. Punto custica y provoca en incendios. No inmediatamente y ciona violenta- ebullicin
de fusin: quemaduras graves. es combustible. acudir al mdico. En mente con muchas localizada
10 C. Punto Los aerosoles y Muchas caso de contacto con sustancias, como si se
de ebullicin: vapores son muy reacciones pueden la piel, lavar de compuestos aade
340 C (se custicos por provocar fuego o inmediato y quitar la orgnicos nitroge- cido
descompone). inhalacin. Las explosiones. La ropa contaminada. nados, perman- concen-
soluciones diluidas son dilucin con agua Usar guantes de ganato potsico, trado al
irritantes para los ojos genera calor, y nitrilo y proteccin metales alcalinos y agua.
y la piel; produce pueden producirse ocular y facial. percloratos,

quemaduras y salpicaduras o Prohibido el materiales
dermatitis. ebullicin. Nunca contacto con combustibles,
aadir agua al sustancias oxidantes, aminas,
cido, sino cido inamables. bases, agua, calor
al agua. excesivo y la
mayora de los
metales.
Talio, acetato de Cristales Sumamente txico por Mantener el recipiente

TlC2H3O2 blancos ingestin, con posibles bien cerrado. Traba-
delicuescentes. efectos acumulativos. jar con campana
Punto de Afecta a los sistemas extractora de vapores
fusin: 110 C. nervioso y o ventilacin por
Muy soluble en cardiovascular. Nocivo extraccin de aire.
agua. por contacto con los Usar prendas protec-
ojos y la piel. toras, respirador
contra el polvo, gafas
de mscara
resistentes a las sus-
tancias qumicas,
guantes de goma o
plstico y proteccin
ocular.
Tetrahidrofurano Lquido Depresor del sistema Muy inflamable. Trabajar con Reacciona
196
C4H8O incoloro de olor nervioso central: efecto Puede formar ventilacin, violentamente con
xido de dietileno caracterstico narctico. Irritacin perxidos explo- extraccin local de oxidantes fuertes,
xido de tetrametileno Punto de ocular, cutnea y sivos; temperatura aire o proteccin bases fuertes y
fusin: respiratoria. de inflamacin: respiratoria, guantes algunos haluros
-108,5 C. -14 C. El agua no protectores y gafas metlicos, con
Punto de sirve para com- de seguridad. peligro de incendio
ebullicin: batir incendios con y explosin. Ataca a

66 C. tetrahidrofurano, algunas formas de
pero puede usarse plsticos, gomas y
para refrescar revestimientos.
recipientes Puede polimerizar
expuestos al en presencia de
fuego. iniciadores
catinicos. El
reflujo con
hidrxido de calcio
puede provocar
explosiones.
o-Tolidina Cristales Nocivo por contacto Combustible. Evitar el contacto; Agentes
(C6H3-(3CH3)-(4NH2))2 incoloros. con la piel o por Desprende usar proteccin oxidantes.
3,3-dimetil- Punto de ingestin. El polvo vapores o gases ocular y guantes.
(1,1-bifenil)- fusin: 131 C. irrita las vas irritantes o txicos
4,4-diamina Punto de respiratorias y los en incendios.
ebullicin: ojos. Probable
200 C. Poco carcingeno para el ser
soluble en humano.
agua.
Tolueno Lquido Depresor del sistema Muy inflamable; Mantener el Puede reaccionar
C7H8 incoloro de olor nervioso central. Irrita los vapores recipiente bien con cidos, lcalis
Metilbenceno caracterstico. los ojos, las mucosas pueden provocar cerrado y alejado de y oxidantes
Punto de y la piel. La exposicin incendio instant- fuentes de ignicin fuertes.
fusin: -95 C. repetida puede ser neo. Temperatura Recipientes con toma
Punto de txica para la de inflamacin: de tierra para
197
ebullicin: reproduccin o el 4 C. Intervalo de prevenir descargas
111 C. desarrollo del ser inflamabilidad: de electricidad
Inmiscible con humano. 1,47%. Medios esttica. No inhalar
el agua. de extincin para los vapores y usar
un incendio proteccin
pequeo: usar respiratoria. Trabajar
sustancias qumi- bajo campana
cas secas, dixido extractora de vapores
de carbono, o en zona bien

espuma, niebla de ventilada. Usar
agua o gas inerte guantes de nitrilo.
(nitrgeno).
Tricloroactico, cido Cristales Custico; provoca que- No es Evitar el contacto con Reaccin violenta Almacenar en
CCl3COOH higroscpicos maduras graves en los combustible. los ojos y la piel. con mezclas de lugar seco.
blancos de olor ojos, la piel y las vas Puede desprender Usar guantes de cobre/dimetil Las soluciones
acre. Punto de respiratorias. vapores txicos goma o plstico y sulfxido y en acuosas
fusin: 58 C. en incendios. gafas de mscara o contacto con concentradas
Punto de ebulli- visera a prueba de bases, agentes pueden
cin: 197,5 C. sustancias qumicas oxidantes fuertes descompo-
Soluble en en combinacin con y metales como el nerse
agua, etanol y proteccin hierro, el zinc o el violentamente.
dietil ter. respiratoria. En caso aluminio.
de contacto con los
ojos, aclarar de
inmediato y acudir al
198
mdico.
Tricloroetileno Lquido Irrita los ojos y la piel; Combustible en Trabajar con En contacto con
CHClCCl2 incoloro de olor la exposicin ciertas ventilacin o superficies
caracterstico. prolongada puede condiciones. extraccin local de calientes o llamas
Punto de provocar dermatitis y aire. Usar guantes, se descompone
fusin: -73 C. efectos en el sistema gafas de seguridad u formando gases
Punto de nervioso central: otra proteccin txicos y corro-
ebullicin: prdida de memoria. ocular combinada sivos (fosgeno,
87 C. Puede afectar al con proteccin cido clorhdrico).
hgado y al rin. respiratoria. Se descompone
Probable carcingeno por contacto con
para el ser humano. lcalis fuertes,
dando
dicloroacetileno.
Reacciona violen-
tamente con
polvos metlicos
199
como los de alu-
minio, bario, mag-
nesio y titanio. Se
descompone
lentamente con la
luz en presencia de
humedad, for-
mando cido
clorhdrico.
Xileno (mezcla de Lquido Puede afectar al Lquido Evitar el contacto con Puede contener
ismeros) incoloro de olor sistema nervioso inflamable. los ojos. Usar etilbenceno como
C6H4(CH3)2 fuerte. Punto central, produciendo Temperatura de guantes de nitrilo y impureza. El
Dimetilbenceno de fusin: -95 cefaleas, mareos, inflamacin: proteccin ocular. etilbenceno es un
a -13 C. fatiga y nuseas. El 2732 C. Mantener el envase posible
Punto de lquido y los vapores bien cerrado y carcingeno para
ebullicin: 136 irritan los ojos, piel, alejado de fuentes de el ser humano.
145 C. mucosas y vas ignicin.
Insoluble en respiratorias. Nocivo
agua. en caso de ingestin.
El contacto prolongado
puede producir liplisis
cutnea. Trastornos
200
neurolgicos
inespecficos. La
exposicin puede
agravar las lesiones
auditivas provocadas
por la exposicin al
ruido. Las pruebas en
animales indican que

es txico para la
reproduccin o el
desarrollo humanos.
Yodo Escamas Irritante ocular, No es combustible No respirar los Reacciona
I2 cristalinas cutneo y respiratorio. pero favorece la vapores y evitar el violentamente con
negriazules La exposicin repetida combustin de contacto con los los metales como
de olor puede provocar otras sustancias. ojos. Usar guantes el aluminio, el
caracterstico. sensibilizacin cutnea. Muchas de nitrilo. potasio y el sodio,
Punto de Puede tener efectos en reacciones pueden as como con las
fusin: 114 C. el tiroides. producir fuego o mezclas de etanol
Punto de explosiones. y fsforo, el
ebullicin: Desprende acetileno y el
184 C. vapores o gases amonaco.
Prcticamente irritantes o txicos
insoluble en en incendios.
agua.
201
ndice alfabtico
abrasiones 86 almacenamiento
abrigos, laboratorio 70 de ampollas que contengan material
caros 35 infeccioso 81
acceso sustancias qumicas 118
animalarios 31, 32, 33 gases comprimidos y licuados 120, 141
laboratorio 1011, 2223, 27 locales de 138
accidentes 11 lquidos inflamables 140141
relacionados con el material 157 espacio del laboratorio 1214
vase tambin primeros auxilios; amonaco, soluciones de 164
lesiones; derrames amnico, bicarbonato 97
acetaldehdo 159 ampollas que contengan materiales
actico, cido 160 infecciosas
actico, anhdrido 160 apertura 80
acetileno 161 almacenamiento 81
acetona 161 anaerbica, frascos-incubadora 155, 157
acetonitrilo 162 anilina 164
acrolena 162 animalario nivel de bioseguridad (ABSL) 30
ADN recombinante, tecnologa 109113 animalarios 3035
aerosoles nivel de bioseguridad 1 31
actividades que generan 55 nivel de bioseguridad 2 3132
cmaras de seguridad biolgica 16, 56 nivel de bioseguridad 3 3233
riesgos de pipeteo 4869 nivel de bioseguridad 4 3334
emisiones potencialmente infecciosas 86 niveles de contencin 30
equipo de seguridad 66 invertebrados 34
agente de puesta en servicio 3637 animales
agitadores 69, 79 eliminacin de cadveres 32
agua, abastecimiento 15, 23 no experimentales 11, 31
agua, baos de 156 transgnicos y con genes inactivados
agujas hipodrmicas 11, 82, 154155 110111
eliminacin 19 antesala, vestbulo 22, 3233
agujas hipodrmicas, accidentes causados antimicrobiano 89
por 78 antispticos 89
aire evacuado 28 artrpodos 12
alarmas 2265 asas
alcoholes 9596 desechables 16, 68, 69
alergia, ltex 72 microincineradores 68, 69, 70
alimentos 11 seguridad en la utiilizacin 76, 77
202
NDICE ALFABTICO
Asociacin de Aviacin Civil Internacional desinfeccin y esterilizacin 99101

(OACI) 102 seco 98
Asociacin de Transporte Areo hmedo 98
Internacional (IATA) 102 calzado 11, 21, 26, 70
auramina 165 cmara de extraccin total de aire 62
autoclave 19, 9899 cmaras aislantes de material flexible y
autoclaves 68, 9899 presin negativa 66, 67
animalarios 32, 33 cmaras de seguridad biolgica 5565, 68
autoclaves de olla a presin calentadas conexiones de aire 6061
por combustible 99 animalarios 32
desplazamiento por gravedad 99 certificacin 64
cargar 99 clase I 5657, 60
prevaco 99 clase II 5660
precauciones en el uso 100 tipo A1 5859
validacin 16 tipos A2 b1 y b2 59, 60
azidas 118, 191 clase III 60
laboratorio 2629
1,1-bifenil-4,4-diamina 166 descontaminacin 65, 97
bancos de trabajo de aire limpio 55 aire de evacuacin 33
batas 7071 localizacin 23, 62
beber 11, 14, 32 operacin y mantenimiento 63
bencidina 166 contaminacin con prion 84
benzeno 165 uso necesario 16, 22, 23
bicarbonato de sodio 109 uso seguro 6265
biocida 89 seleccin 56, 62
bioproteccin 4951 capacitacin 133134
bioseguridad trabajadores de animalarios 3234
gestin 12 cmaras de seguridad biolgica,
bioproteccin en el laboratorio uso de 65
49 bioproteccin 49
botiqun de primeros auxilios 151 trabajadores de laboratorio 1718
bromo 166 carbonato sdico (bicarbonato sdico) 119
brotes de enfermedad de etiologa carbono tetracloruro 167
desconocida 8 carbono, dixido de (slido, hielo seco) 167
catstrofes naturales 85, 87
4,4-carbonoimidoilbis catstrofes naturales 8588
(N,N-dimetilbencenamina) 165 centrfugas 7879
cabinas de flujo de aire horizontal y rotura de tubos 87
vertical 55 accesorios de contencin 24
1-hidracino-2,4-dinitrobenceno 175 uso indebido 157
calcio hipoclorito 91 centros colaboradores de la OMS en
calefaccin, ventilacin y aire materia de bioseguridad 153
acondicionado certificacin 64
sistema de 23 cmaras de seguridad biolgica 64
lista de comprobacin de la laboratorios/instalaciones 3940
seguridad 138 ciangeno, bromuro de 168
calor cierres hermticos 29
203
circuito de vaco 23, 68 2,4 dinitrofenilhidracina 175

circuitos elctricos 122 3,3-dimetil-(1,1-bifenil) 4,4diamina 197
clase III, laboratorio con CSB 27 delantales 7071
sistema de vetilacin controlada 28 derrames
citocalasina 168 en cmaras de seguridad biolgica 64
cloraminas 9293 sangre 82
clorhdrico, cido 169 sustancias qumicas 118119
cloro 9192, 170 materiales infecciosos 11, 86, 103105
compuestos que liberan 91 descontaminacin
dixido de 93, 170 cmaras de seguridad biolgica 64, 97
cloroformo 172 sangre, lquidos corporales 83
cloruro de hidrgeno 169 definiciones 89
cobre 172 efluentes 11, 28
coccin 98 mano 98
cdigo de prcticas espacios y superficies 96
nivel de bioseguridad 1 y 2 912 materiales contaminados por priones 84
nivel de bioseguridad 3 2123 materiales de desecho 19, 23
nivel de bioseguridad 4 26 vase tambin limpieza; desinfeccin
comer 11, 14, 32, 7778 desecadores 155
comit de bioseguridad 131 desechos 1820
nivel de bioseguridad 1 1, 2, 920 animalarios 3234
animalarios 31 nivel de bioseguridad 4 29
diseo del laboratoio 1215 descontaminacin 19, 23
formulario de encuestra sobre la eliminacin 1920, 23, 101
seguridad en el laboratorio instalaciones para invertebrados 34
4143 contaminacin por priones 84
vigilancia mdica y sanitaria 16 radioactivos 125
vase tambin laboratorio bsico desechos radiactivos 125
Comit de Expertos de las Naciones desinfeccin 89161
Unidas en Transporte de cmaras de seguridad biolgica 64
Mercancas Peligrosas qumicas 9096
102 limpieza previa 8990
compuestos de amonio cuartenario 95 definiciones 8990
compuestos fenlicos 9495 calor 98101
congeladores 80 derrames 104105
contencin primaria 27 manipulacin de desechos 18
contencin primaria en el nivel de vase tambin descontaminacin,
seguridad 4 27 esterilizacin
contencin, niveles de, animalarios 30 desinfectantes 89, 9097
contencin, sumideros 29 desintegrantes ultrasnicos 69, 79, 75
contingencia, planes de 85 dietil ter 174
cortes 86 dietileno, dixido de 175
cosmticos 11 dietileno, xido de 196
Creutzfeldt-Jakob, enfermedad 83 dimetilamina 174
crmico, cido 173 dimetilbenceno 200
cromo VI, xido de 173 2,4 dinitrofenilhidracina 175
CSB-cmaras de seguridad biolgica 9 dioxano 175
204
NDICE ALFABTICO
diseo, laboratorio animalarios 33

nivel de bioseguridad 1 y 2 1215, 16 cmaras de seguridad biolgica 55,
nivel de bioseguridad 3 2123, 24 5660
nivel de bioseguridad 4 2629 nivel de bioseguridad 3 2325
requisitos para puesta en servicio y nivel de bioseguridad 4 2729
3638 contaminacin por priones 8384
dispersin de material infeccioso, evitar la flujo de aire vase aire evacuado
7677 animalarios 3222
dispositivos para remover y agitar cultivos cmaras de seguridad biolgica
156 55565960
duchas 27, 33 laboratorio de contencin 2122
laboratorio de contencin mxima
efluentes, contaminados 11, 2829 2627
emergencias 8588 flujo direccional 22
nivel de bioseguridad 4 2629 alarmas 22, 65
planes de contingencia 85 animalarios 31, 32, 33, 34
procedimientos de laboratorio 8788 cmaras de seguridad biolgica 57,
encefalopata espongiforme transmisible 62
83 nivel de bioseguridad 3 2223
encuesta, seguridad en el laboratorio 39, nivel de bioseguridad 4 27, 29
40 formol 93, 97
formularios 4146 formaldehdo 93, 97, 178
envases con tapn de rosca 16, 68 fosfrico, cido 179
Escherichia coli k12 110 fsforo, pentxido de 179
esporicida 90 fotmetro de llamas 157
esterilizacin 29, 89101 frascos con tapn de rosca 16, 68
limpieza previa 8990 frascos de vaco domstico 157
definicin 89 friegas de alcohol para las manos 9596
calor 98101 fumar 11, 32
materiales contaminados con priones fumigacin 97
84 funcionario de bioseguridad 18, 129130
vase tambin descontaminacin,
desinfeccin gafas de mscara 7071
etanol (2-amino-etanol) 176 gafas de seguridad 70
etanol (alcohol etlico) 9596, 176 garrapatas 35
etanolamina 176 gas(es)
teres 118 comprimidos y licuados 120, 141
excreciones, precauciones normalizadas suministros para laboratorio 15
8182 gases, transferencia 109, 110
extensiones y frotis para el examen germicidas qumicos 82, 83, 9096
microscpico 82 germicidas qumicos 9096
extensiones y frotis para el examen glutaraldehdo 94, 180
microscpico 82 grupos de riesgos microbiolgicos
extintores de incendio 122 laboratorios bsicos 9
niveles de bioseguridad 24
fenol 177 clasificacin 12
filtros guantes 11, 65, 70, 7172
205
1-hidracino-2,4-dinitrobenceno 175 servicios, lista de comprobacin de la

homogeneizadores 69, 7980, 155 seguridad 139
tcnicas 7584
iluminacin, alumbrado 133, 138 zonas de trabajo 12
inactivados, animales 110111 director del laboratorio 12, 129
incendios 20, 122 supervisor del laboratorio 12, 129
causas 122, 157 papel de capacitacin 18, 133
prevencin y proteccin 139 vase tambin laboratorio bsico,
incineracin 20, 101 laboratorio de contencin,
incineradores 33, 92 laboratorio de contencin
ingeniera gentica 109 mxima
ingestin de material infeccioso 86 laboratorio bsico
inmunizacin del personal 152 niveles de bioseguridad 1 y 2 1, 920
inoculacin, accidental 7879 seguridad qumica, elctrica, radiolgica
insectos voladores 34 y material de seguridad 20
inspeccin, laboratorio 3940 cdigo de prcticas 9
instalaciones de comunicacin 26 diseo e instalaciones 12
instalaciones de enfriamiento, mosquiteras material 1516
34 vigilancia mdica y sanitaria 16
instalaciones de saneamiento 138 formularios de seguridad en el
instalaciones para auditora 40 laboratorio 41,45
instalaciones, laboratorio capacitacin 1718
nivel de bioseguridad 1 y 2 1215 manipulacin de desechos 1820
nivel de bioseguridad 3 23 laboratorio de contencin
nivel de bioseguridad 4 2629 (nivel de bioseguridad 3) 1, 3, 2124
designaciones de bioseguridad 1 cdigo de prcticas 2122
interruptores por fallo de la toma de tierra diseo e instalaciones 2223, 24
122 material de 23
invertebrados 34 vigilancia mdica y sanitaria 2425
isopropanol (alcohol isoproplico) 95190 formulario para encuesta de
seguridad 46
jaulas laboratorio de contencin mxima
animal 32, 33 (nivel de bioseguridad 4) 1, 2629
insectos voladores 35 diseo e instalaciones 2629
jaulas aisladas 33 lechos de los animales 32, 33
jeringuillas 11, 19 leja (hipoclorito sdico) 9192, 194
lentes de contacto 11
laboratorio lesiones
bioseguridad 4950 animalarios, personal de 32
certificacin 3940 procedimientos de emergencia 85
puesta en servicio 3638 prevencin 7879
instalaciones vase instalaciones de limpiadores ultrasnicos 156
laboratorio limpieza
locales, lista de la comprobacin de la cmaras de seguridad biolgica 64
seguridad 137 domstica 132
formularios para muestras sobre la materiales de laboratorio 90
seguridad 4146 refrigeradores y congeladores 80
206
NDICE ALFABTICO
limpieza previa 89 microscopio, extensiones y frotis para el

liofilizado, ampollas que contengan material examen 82
infeccioso para abrirlas 80 mobiliario de laboratorio 14
liofilizadores 156 mosquiteras a prueba de insectos 34
lquidos contaminantes efluentes 11, 28 muestras 75
lquidos corporales, precauciones recogida de 81
normalizadas 8183 recipientes de 75, 81, 104
lquidos inflamables, almacenamiento de etiquetado 81
140 con informacin limitada 8
lista, comprobacin de la seguridad apertura de los envases 75
137144 apertura de tubos de muestras y
luces ultravioleta 63 muestreo del contenido 82
lugares para descansar 14 recepcin 75
llamas desnudas 63 precauciones normalizadas 81
transporte 75, 81
manos 7071 sistema de envasado triple 103
manos, descontaminacin de las 98 muestras etiquetadas 81
manos, friegas de alcohol para las 95, 98 mujeres en edad fecunda 17, 142
manos, lavado de 11, 72, 90
animalarios, personal 32 naftilamina 182
instalaciones14, 22, 3233 N-fenil-a-naftilamina 182
materiales N-fenil-b-naftilamina 182
laboratorio bsico 1516 ninhidrina 183
laboratorios de contencin 24 nios 10
emergencia 88 ntrico, cido 183
riesgos 154157 nitrobenceno 184
lista 142144 nivel de bioseguridad 2 1, 2, 920
materiales contaminantes animalarios 3132
vase materiales infecciosos diseo del laboratorio 1215
materiales infecciosos formulario de encuesta
autoclave y reutilizacin 19 sobre la seguridad en el laboratorio
evitar la dispersin 76 4344
contacto con la piel y los ojos 77 vigilancia mdica y sanitaria 1617
eliminacin 20, 23 vase tambin laboratorio bsico
ingestin 86 nivel de bioseguridad 3 1, 3, 2124
lista de la comprobacin de la seguridad animalarios 3 3233
143 diseo del laboratorio 2223
derrames 11, 86, 103105 formulario de encuesta sobre la
mecheros de Bunsen 7677 seguridad en el laboratorio 46
mercurio 181 vase tambin laboratorio de contencin
metanol 182 nivel de bioseguridad 4 1, 3, 2629
metilbenceno (tolueno) 197 animalarios 3335
mezcladores 6970 diseo del laboratorio 2629
microbicida 90 vase tambin laboratorio de contencin
microincineradoras 68, 6970 mxima
microorganismos infecciosos, vase grupo niveles de bioseguridad 1
de riesgos microbiolgicos animalarios (NBSA) 30
207
requisitos de las instalaciones 4 piel,

grupos de riesgo microbiolgico y 13 contacto con la 77
heridas punzantes, cortes y abrasiones 86
objetos cortantes y punzantes 19 vase tambin lesiones
animalarios 3233 pipetas 16, 76
evitar heridas 7172, 7778, 82 pipeteo 76
eliminacin de recipientes 19, 48 dispositivo de 16, 68, 76
OGM vase organismos genticamente boca 11, 68
modificados piridina 187
organismos genticamente modificados plasmido pUC 18, 110
otras consideraciones 112 plata 188
evaluacin de riesgos 112113 plata, nitrato de 188
tipos 110112 poliovirus, ratones susceptibles a 111
Organizacin Mundial de la Salud (OMS) potasio, hidrxido de 189
Centros colaboradores de la OMS en potasio, permanganato de 189
materia de bioseguridad 153 potasio, telurito de 190
Programa de bioseguridad 26 precauciones de seguridad 15, 139140
osmio, tetrximo de 185 precauciones normalizadas 8182
oxlico, cido 185 precauciones universales 8182
oxgeno 186 prevencin de reflujo 15, 23
primates, no humanos 31
pantallas contra salpicaduras 67 primeros auxilios 15, 151
paraformaldehdo 93, 97 priones 8384
paredes 13, 22 procedimiento de limpieza, derrames
peligros elctricos 20, 122, 157 103105
lista de seguridad 142 propan-2- ol (propanol) 95, 190
percidos 96 proteccin auditiva 122123
perclrico, cido 118, 186 proteccin de la cara (viseras) 11,
perodos de garanta, 7071
laboratorios/instalaciones 36 proteccin de los ojos 11, 7071, 77
perxido de hidrgeno (agua oxigenada) proteccin del producto 56
96, 97, 163 puerta en servicio de
personal laboratorio/instalaciones
gestin de la bioseguridad 12 3638
temas de bioseguridad 4951 puertas
instalaciones, animalarios 30
lista de la comprobacin de la seguridad laboratorio 15, 22, 27
138
inmunizacin 152 radiacin, smbolo de peligro de 125
objetos personales/ropa 14 radiaciones ionizantes 123126
responsabilidad por la propia seguridad efectos perjudiciales 123
129 principios de proteccin 123124
apoyo 132 lista de comprobacin de la seguridad
personal de apoyo 132 142, 143
personal de mantenimiento 132 zona de mesas de trabajo 124
personal de mantenimiento del edificio 132 radiaciones, zona de 124
pcrico, cido/picratos 118, 187 radionclidos
208
NDICE ALFABTICO
cmaras de seguridad biolgica 6162 sodio, biselenito de 192

sistemas seguros de trabajo 124125 sodio, cianuro de 192
sustitucin 124 sodio, dicloroisocianurato de 91, 92
recipientes sodio, hidrxido de 193
rotura de 89 sodio, hipoclorito de (cloro) 84, 9193,
desechos contaminados 1920 194
hermticos 67 suero, separacin de 78
eliminacin de objetos cortantes y sulfrico, cido 195
punzantes 19, 68 sulfuro de hidrgeno 195
muestras 75, 82, 103 suministro de electricidad 15, 29
refrigeradores 80, 81, 157 superficies de trabajo
regla de las dos personas 26, 33 animalarios 32
reglamento de transporte internacional laboratorio 12, 13
102103 sustancias qumicas (peligrosas) 20,
respiradores (equipo de proteccin 117120
respiratoria) 22, 7071 cmaras de seguridad biolgica 62
riesgo microbiolgico, evaluacin de 2, 78 explosivas 118, 157
animalarios 3032 incompatible, reglas generales 118,
organismos genticamente modificados 119
111113 vas de exposicin 117
roedores, programa de control de 12, 32 lista de comprobacin de la seguridad
ropa y equipo de proteccin personal 137138
7072 especficos 158201
animalario 32, 33 derrames 118120
laboratorio bsico 1112 almacenamiento 117
cmara de seguridad biolgica 65 efectos txicos 117118
lista 141 sustancias qumicas explosivas 118, 157
laboratorio de contencin 2122
laboratorio de contencin mxima 26, 0-tolidina 197
27 2,4,6-trinitrofenol (cido pcrico) 118,
priones 84 187
ropas y equipo de proteccin personal 7072 talio, acetato de 196
ruido 122 tarjeta de contacto mdico 2425
tcnicas microbiolgicas apropiadas 912,
sangre, precauciones normalizadas 8183 7584
selenio 191 techos 13, 22
servicios de emergencia 88 tejidos
servicios de mecnicos y personal 132 que contienen priones 8384
signo de peligro biolgico 10, 11, 31 precauciones normalizadas 81
sistema de envasado triple 103, 104 tetrahidrofurano 196
sistemas de embalaje 103 tetrametileno, xido 196
sistemas de expresin biolgica 110 tolueno 197
sistemas de ventilacin traje protector 27
cmaras de seguridad biolgica 55, 56 sistema de ventilacin controlada 28
57, 58, 59 transgnicas, plantas 109, 111
trajes protectores 27 transgnicos, animales 110111
sodio, azida de 191 transporte 12, 102105
209
desechos contaminados 1920, 23 laboratorio bsico 15

reglamentacin internacional 9497 lista 138
muestras 75, 8082 laboratorio de contencin 22
sistema de envasado triple 103, 104 laboratorio de contencin mxima 26,
trituradores de tejidos 80, 155 27, 28
tricloroactico, cido 198 vectores vricos 110
triclorocetileno 199 vidrios 82
triclosan 94 quebrados, manipulacin
tubos 86
rotura en las centrifugadoras 8788 precauciones 78, 82
frascos y tubos con tapn de rosca 16 vigilancia mdica y sanitaria
laboratorio bsico 1617
ultracentrifugadoras 155 lista 129
laboratorio de contencin
validacin de equipo 16 2425
vectores 110
vectores de expresin 110 xileno 200
ventanas
animalarios 29, 33 yodo 96, 201
instalaciones para invertebrados 34 yodforos 96
laboratorio 12, 15, 22
ventilacin, sistemas de zonas de trabajo de laboratorio
animalarios 30, 31, 32 12
210

Manual de Biosegurdiad en El Laboratorio

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MANUAL DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO TERCERA EDICIN

Durante los ms de 20 aos transcurridos desde su primera publica-

Organizacin Mundial de la Salud

ORGANIZACIN MUNDIAL DE LA SALUD

Esta publicacin ha contado con el apoyo de la Donacin/Acuerdo de Cooperacin N

Organizacin Mundial de la Salud, 2005

Diseo: minimum graphics

PARTE I Directrices en materia de bioseguridad 5

Animalarios nivel de bioseguridad 3 32

PARTE II Bioproteccin en el laboratorio 47

PARTE III Equipo de laboratorio 53

PARTE IV Tcnicas microbiolgicas apropiadas 73

Uso de trituradores de tejidos 80

PARTE V Introduccin a la biotecnologa 107

PARTE VI Seguridad qumica y elctrica y proteccin contra incendios 115

PARTE VII Organizacin y formacin en materia de seguridad 127

PARTE VIII Lista de comprobacin de la seguridad 135

Proteccin personal 141

PARTE IX Referencias, anexos e ndice alfabtico 145

ndice alfabtico 202

biolgicos y al mismo tiempo garantizar su disponibilidad para fines clnicos, de inves-

La preparacin de la presente edicin del Manual de bioseguridad en el laboratorio ha

Dr. W. Emmett Barkley. Instituto Mdico Howard Hughes, Chevy Chase, MD

La OMS expresa asimismo su gratitud a las siguientes personas por su asistencia:

Sra. Maureen Best, Oficina de Seguridad en el Laboratorio, Health Canada, Ottawa

Dra. Shanna Nesby, Oficina de Salud y Seguridad, Centros para el Control y la

Cuadro 1. Clasificacin de los microorganismos infecciosos por grupos de riesgo

Los laboratorios se clasifican como sigue: laboratorio bsico nivel de bioseguri-

1 Bsico Enseanza bsica, TMA Ninguno; trabajo en

2 Bsico Servicios de TMA y ropa Trabajo en mesa al

3 Contencin Diagnstico Prcticas de nivel 2 CSB adems de otros

4 Contencin Unidades de Prcticas de nivel 3 CSB de clase III o trajes

con el nivel de bioseguridad de los laboratorios destinados al trabajo con micro-

Cuadro 3. Resumen de los requisitos por nivel de bioseguridad

La asignacin de un agente a un nivel de bioseguridad para el trabajo de laboratorio

De este modo, la asignacin de un nivel de bioseguridad tiene en consideracin el

El pilar de la prctica de la bioseguridad es la evaluacin del riesgo. Aunque existen

Muestras para las que se dispone de informacin limitada

Evaluacin de riesgos y microorganismos genticamente modificados

Las orientaciones y recomendaciones que se ofrecen en el presente manual a ttulo de

no pasa de ser un complemento. A continuacin se exponen los conceptos ms

Investigador encargado: __________________________

En caso de emergencia, avsese a: __________________

Telfono particular: ______________________________

5. El acceso a los locales que alberguen animales habr de autorizarse especialmente.

un sistema de tratamiento de efluentes, segn lo que indique la evaluacin de

Zonas de trabajo del laboratorio

Diseo e instalaciones del laboratorio

Figura 2. Laboratorio tpico del nivel de bioseguridad 1.

5. La entrada de personas no autorizadas.

Figura 3. Laboratorio tpico del nivel de bioseguridad 2

Material de bioseguridad indispensable

Vigilancia mdica y sanitaria

Normas para la vigilancia de los trabajadores que manipulan microorganismos en el

Normas para la vigilancia de los trabajadores que manipulan microorganismos en el

Procedimientos de manipulacin y eliminacin de material y desechos contaminados

Objetos cortantes y punzantes

Material contaminado (potencialmente infeccioso) para ser tratado en

Material contaminado (potencialmente infeccioso) para ser eliminado

Seguridad qumica, elctrica y radiolgica, proteccin contra incendios y

El laboratorio de contencin nivel de bioseguridad 3 est concebido e instalado para

cuando se trabaja con agentes agrcolas o zoonticos, est justificado quitarse la

Diseo e instalaciones del laboratorio

Figura 4. Laboratorio tpico del nivel de bioseguridad 3