Preparacin de Material de vidrio y medios de

cultivo
I. Material de Vidrio.

El material de vidrio constituye una de las principales herramientas de esta

disciplina.
- Tubos de Prueba. Resistente a cambios de temperatura, que sean de
paredes gruesas y bien equilibrados
- Tubos de centrfuga. Siempre de paredes gruesa
- Cpsulas o placas de Petri.
- Pipetas.
- Matraces y Balones. Recipientes de gran utilidad para la preparacin y
almacenamiento de soluciones, etc.
- Esptulas Drigalsky. Facilita la siembra y aislamiento de bacterias por
diseminacin.
- Beaker o Vasos de precipitacin. Necesariamente resistentes al calor.

II. Material de otra naturaleza.

- Mangos de Kohle. Vstagos de metal o vidrio resistentes al calor.

- Mecheros de Bunsen. Son de metal, con una tuerca movediza para
controlar la intensidad de la llama.
- Gradillas
- Goteros
- Algodn
- Papel Filtro
- Papel Kraft

III. Preparacin para su esterilizacin/ Limpieza

El material de vidrio nuevo o usado debe limpiarse en forma tal que elimine
toda huella de suciedad original. El material de vidrio nuevo debe sumergirse
en HCl durante una noche, para neutralizar el lcali contenido en el vidrio.
IV. Procedimiento:

1. Confeccin de Tapones de Algodn:

Tomar un trozo rectangular, de tamao adecuado para el dimetro de la boca

del recipiente. Hacer un doblez en tres a lo largo y enrollarlo.
 2. Preparacin de tubos de prueba.
Hacer manojos de tubos taponeados (10 a 12) sujetos con pabilo y cubrir por
sus bordes con el papel envolvente, asegurando el paquete con pabilo o papel
engomado. Los paquetes deben corresponder a tubos de iguales medidas.

3. Preparacin de pipetas serolgicas y volumtricas.

a. Colocar tapones de algodn a manera de filtros moderadamente ajustados
en las boquillas de las pipetas.
b. Colocar oblicuamente la pipeta serolgica a una tira de papel y hacer un
doblez de este en un extremo. Luego cubrir el extremo proximal (punta de la
pipeta)
4. Preparacin de Placas Petri

Se pueden envolver aisladamente o en nmero de 2 o 3, con trozos

rectangulares de papel Kraft.
a. Colocar las placas sobre el papel en posicin invertida y doblar los mrgenes
uno sobre otro, a manera de cubrirla.
b. Completar el doblez de los extremos del papel sobrante. Los bordes de la
placa deben quedar ntimamente adheridos al papel que los cubre.
v. Cuestionario:

1. Por qu es necesario preparar el material de vidrio antes de hacer los

cultivos?
Porque es importante esterilizar los implementos que se usarn para preparar
los cultivos, y que no estn contaminados con otros microorganismos.

2. Por qu no se pueden usar tubos con tapones de jebe?

Porque al momento de calentar los medios lquidos, puede ser que se cree un
vaci debido a la evaporacin, y que sea imposible poder retirar el jebe de la
boquilla del tubo.

3. Qu efecto tendra el algodn quemado sobre el crecimiento de los

microorganismos?
Podra afectar su desarrollo debido al calor que genera y/o matarlos

4. Por qu no se puede utilizar material de vidrio roto con rayaduras?

Porque sera peligroso debido a que se puede romper, o en todo caso afectara
la medicin de las cantidades exactas.
 Preparacin de medios de cultivos (comunes y
especiales)
I. Introduccin:

Son sustancias nutritivas lquidas o slidas, que se utilizan en el laboratorio

para el crecimiento de microorganismos, pudiendo ser similares a sustratos
naturales, en los cuales estos crecen normalmente.

Clasificacin.
Segn su composicin y objetivos, se clasifican de la siguiente manera:

Medios Comunes:
Aquellos que contienen los mnimos componentes nutricionales para
organismos no exigentes. Estos pueden ser Lquidos, Slidos o semislidos-

- Medios Lquidos: Caldo nutricio, caldo peptonado, caldo tripsona

y otros.
- Medios Slidos: Nutrientes compuestos de un medio lquido
base, con sustancias como el agar o gelatina (para darle
consistencia)
- Medios Semislidos. Compuesto por cualquiera de los medios
lquidos, al que se le adiciona una cantidad de agar para obtener
un gel blando.
 Medios Enriquecidos o Suplementados.

Preparados para cubrir los requerimientos nutricionales de bacterias

exigentes. Se componen de un medio basal ordinario suplementado con
factores de crecimiento. Estos medios pueden ser lquidos o slidos.

- Medios Lquidos. Caldo Tripticasa Soya, caldo cerebro corazn,

caldo extracto de levadura, caldo suero.
- Medios Slidos. Agar cerebro corazn, agar extracto de
levadura, suero coagulado de Loeffler, etc.
 Medios Sintticos Definidos o qumicamente definidos.
Preparados exclusivamente de sustancias qumicas.
- Medios sintticos simples. Contienen carbono como fuente de
energa (glucosa o lactato), una fuente inorgnica de nitrgeno,
fosfato o sulfato y varias otras sales minerales; sustancia tampn
y agentes quelantes como el citrato.
- Medios Sintticos Complejos. Incorporan aminocidos, bases
nitrogenadas y otros factores de crecimiento.
 Medios Especiales.

Son aquellos que adems de contener los requerimientos nutricionales

bsicos, llevan en su composicin sustancias inhibidoras con carcter
selectivo y compuestos especficos e indicadores para manifestar la
presencia de caracteres bioqumicos especficos.
- Medios de enriquecimiento. Favorecen el crecimiento de uno o
un grupo de microorganismos en particular
- Selectivos. Favorecen el aislamiento de un determinado grupo
de microorganismos.
- Diferenciales. Empleados para detectar reacciones bioqumicas,
con carcter diferencial de grupos
 Materiales:
Medios de cultivos deshidratados
Matraz Erlenmeyes
Probeta graduada
Agua destilada
Botellas de vidrio de 250 mL
Solucin de HCl
Papel indicador de pH

Procedimiento:
1. Pesar los ingredientes segn la cantidad requerida por los medios a
preparar.
2. Colocar la cantidad pesada en el Erlenmeyer y despus en las botellas,
para luego adicionar agua destilada (a excepcin del agar granulado)
3. Calentar la muestra hasta lograr la total disolucin de los nutrientes.
4. Dejar enfriar.

(ingredientes deshidratados)
Cuestionario:
1. Cul es la razn de calentar el medio slido en preparacin, antes de
esterilizarlo?
Debido a que las sutancias quelantes necesitan antes un medio caliente para
solidificarse.

2. Puede usted medir y ajustar el pH a un medio caliente? Por qu?

S, se puede medir gracias a pHmetros y se puede ajustar modificacndo la
concentracin de hidrogeniones en el medio.