5

EVALUACIN DE UN FERMENTADOR CON LEVADURAS (S. cerevisiae)

INMOVILIZADAS EN PERLAS DE CERMICA

Edwin Balden CH.1; Vctor Meza C.2; Julio Giraldo H3

RESUMEN

En la preparacin del soporte para la inmovilizacin de Saccharomyces cerevisiae, se

mezcl arcilla con 10% de caoln y 50% de agua, formando una masa plstica que se llev a
600C por 8 h, obtenindose perlas de cermica de alta resistencia y bajo desprendimiento. En
el proceso de inmovilizacin los factores ptimos para la inmovilizacin fueron: 4,91 mm de
tamao de las perlas, 30 ml/h de flujo y 107 cl/ml de concentracin inicial de clulas, siendo
el porcentaje de inmovilizacin de 44,41% y clulas inmovilizadas de 1,47x107 cl/g perla.

En el proceso de fermentacin se emple un fermentador empacado con perlas de

cermica previamente inmovilizadas, alimentndose con una solucin de sacarosa a 23 Brix,
pH de 3,5 y peptona 1%. El proceso se realiz en cultivo en lote, logrndose obtener una eficien-
cia alcohlica de 67,59% (12,94 GL) durante 10 das de fermentacin, siendo las caractersticas
del fermentador: 0,05 m de dimetro, 0,76 m de longitud con una relacin D/L de 1/15.

SUMMARY
In the preparation of support for immobilization of Saccharomyces cerevisiae, clay was
combined with 10% of kaolin and 50% of water, forming a plastic mass that took to 600C by 8
h, obtaining high strength and low loosening ceramics pearls. in the immobilization process the
optimal factors for immobilization were: 4,91 mm of pearls size, 30 ml/h of flow and 107 cel/ml
of initial concentration of cells, being the immobilization percentage 44,41% and immobilized
cells of 1,47x107 cel/g pearl. In the fermentation process a packed fermentador with ceramics
pearls previously immobilized was used, feeding itself with a saccharose solution 23 Brix, pH
of 3,5 and peptone 1%. The process was made in culture in lot, obtaining alcoholic efficiency of
67,59% (12,94 GL) during 10 days of fermentation, being the characteristics of the fermentador
were: 0,05 m of diameter, 0,76 m of length with a 1/15 relation D/L.

1
Profesor del Departamento acadmico de Ingeniera de la Facultad de Industrias Alimentarias,
UNALM
2
Profesor del Departamento acadmico de Biologa de la Facultad de Ciencias, UNALM
3
Profesor del Departamento acadmico de Ciencia, Tecnologa e Ingeniera de la Facultad de
Industrias Alimentarias, UNAS.
6 Anales Cientficos UNALM

I. INTRODUCCIN

En la actualidad los pases desarrollados experimentan grandes avances en el campo

cientfico y particularmente en el campo de la biotecnologa. En el Per existen pocos trabajos
al respecto. No obstante, el inters de muchos investigadores en el estudio de inmovilizacin
celular como tcnica de aplicacin de la biotecnologa ha permitido desarrollar nuevos mto-
dos que han vuelto rentables a muchos procesos y productos industriales por su simpleza y
rendimiento.

Dada la utilidad y aplicacin de las clulas inmovilizadas en diversos procesos

agroindustriales y viendo la factibilidad de utilizar la arcilla para la elaboracin de perlas como
soporte de inmovilizacin de Saccharomyces cerevisiae en la obtencin de etanol, en el
presente trabajo de investigacin se plantearon los siguientes objetivos:

- Evaluar las caractersticas ptimas de inmovilizacin de S. cerevisiae empleando como

soporte perlas de cermica.
- Determinar las caractersticas ptimas del fermentador empacado durante el proceso
de fermentacin.

II. REVISIN DE LITERATURA

Bensoain (1985) define a la arcilla como un producto natural, originado a partir de la
meteorizacin de las rocas, siendo las partculas inferiores a 2 mm. Costales y Olson (1963)
sealan que la arcilla est compuesta de silicio, aluminio y agua, qumicamente combinados,
como silicato hidratado de almina. Valdez (1994) reporta que el Per cuenta con buenos
yacimientos de arcilla y caoln, distribuidos en quebradas y laderas de Huaraz, Cajamarca,
Puno, Cuzco y toda la sierra central.

Segn Buckman (1985) la arcilla est dispuesta en placas o escamas, y cuando se

humedece con una cantidad adecuada de agua se dilata, volvindose pegajosa e incrementando
su plasticidad. Asimismo, Baver (1991) menciona que la forma de las partculas ms pequeas
no es esfrica y la densidad relativa para la mayor parte de los suelos corrientes est entre 2,6
a 3,75.
Costales y Olson (1964) sealan que existen tres cualidades para la produccin de
cermica. La primera es la plasticidad, dada por el desplazamiento de las partculas planas
unas sobre otras cuando estn hmedas. Segundo es la porosidad, debe ser suficientemente
poroso para poder sacar una cermica uniforme y sin grietas. Y el tercero, es la vitrificacin.
Esta propiedad predomina cuando la arcilla llega a tener la consistencia similar al vidrio.

Crdova (1991), manifiesta que el desarrollo de cuerpos cermicos de porosidad contro-

lada permite visualizar distintos campos de aplicacin de estos materiales, sobre todo en la
inmovilizacin celular o enzimtica. El parmetro ms importante en la seleccin de un sopor-
te inorgnico, es la compatibilidad con el biocatalizador, que se determina explorando el efecto
de iones solubles en la inhibicin, desnaturalizacin o inactivacin de las enzimas o clulas
inmovilizadas en el soporte. El segundo parmetro importante del soporte cermico es la
morfologa del poro, en trminos de dimetro, volumen y tortuosidad.
 EVALUACIN DE UN FERMENTADOR CON LEVADURAS (S. cerevisiae) 7
INMOVILIZADAS EN PERLAS DE CERMICA

Wiseman (1989), menciona que el soporte debe tener un gran coeficiente de vida til
como para permitir el uso repetido en procesos en lote o el uso prolongado en procesos
continuos, por lo que ser necesario que tenga una buena resistencia mecnica y elstica.
Adems, debe ser estable a elevadas temperaturas, presin y cambios de pH.

III. MATERIALES Y MTODOS

El presente trabajo se realiz en el Laboratorio de Biologa y Microbiologa de la Univer-

sidad Nacional Agraria de la Selva, en los meses de Octubre del 1995 y Noviembre de 1996.

Materiales
Se emple arcilla de color amarillo recolectada en laderas y quebradas de la ciudad de
Tingo Mara en el Departamento de Huanuco.
Se emple levaduras de panificacin (S. cerevisiae) adquirida en el mercado local,
presentada comercialmente como levadura fresca (100% pura), de la marca FLEISCHMANN.
Los microorganismos fueron almacenados y propagados en Caldo Sabouraud (Merck) que
contena: glucosa 4%, peptona 1.0%, agar-agar 1.6% y agua.
Para la construccin se utilizaron: tubos de PVC de 2 pulgadas de dimetro, reductores
de PVC de 2 pulgadas a de dimetro, regulador de flujo, pegamento, envases de plstico y
soporte universal.

Elaboracin de las perlas de cermica

Las perlas de cermica se elaboraron con una mezcla de arcilla amarilla (40%), caoln
(10%) y agua (50%). Todo se mezclaba manualmente hasta obtener una masa de consistencia
plstica. Posteriormente, se moldearon esferas con un dimetro promedio de 4,9, 7,0 y 8,3
mm, se secaron a 80C durante 10 min y se quemaron en un horno a 600C durante 8 h.
Finalmente, se lavaban las perlas de cermica para eliminar impurezas adheridas en la super-
ficie, se secaban y almacenaban hasta su uso.
Mtodos de caractersticas del soporte

Determinacin del porcentaje de espacio poroso (e)

Se aplic el mtodo descrito por Buckman (1985) bajo la siguiente frmula:

% Espacio slido = 100 (Densidad aparente /Densidad de las partculas)

% Espacio poroso (e) = 100 - % Espacio slido

Determinacin de la densidad de las partculas de arcilla

Se emple el mtodo del picnmetro, descrito por Cavazos y Rodrguez (1992). En

este mtodo se llena un picnmetro de 50 ml con agua destilada y se pone a hervir durante 10
min para eliminar el aire contenido. Se deja enfriar, se agrega agua hasta aforar el picnmetro
y se pesa (P1). Luego, se retira la mitad del contenido de agua del picnmetro, se agrega 10 g
8 Anales Cientficos UNALM

de arcilla en polvo seco, se homogeniza y se deja hervir durante 3 min. Posteriormente, se enfra
y se agrega agua hervida hasta completar la marca de aforo del picnmetro y se pesa (P2).
Finalmente, se agita el picnmetro y el contenido se vierte en una cpsula de porcelana previa-
mente pesada, se deja secar durante 24 h a 105C y se determina el peso (P3). Con los datos
obtenidos se realizan los clculos para determinar la densidad real de las partculas de arcilla.
Volumen de agua desplazada = (P3 P2) (P1)

Densidad real = Peso de arcilla/ volumen de agua desplazada

Determinacin de la densidad aparente

Es la relacin entre el volumen y la masa de una perla de arcilla.

Determinacin del dimetro y peso

Se utiliz la metodologa descrita por Castillo (1993).

Superficie especfica (S)

Se aplic el mtodo descrito por Baver (1991), en donde se determina el rea en mm2
y se divide entre el volumen de la perla de arcilla, representando la superficie especfica en mm2
por gramo de perla.

Superficie especfica del lecho (Sb)

Se determin en base al porcentaje de espacio poroso y la superficie especfica apli-

cando la siguiente frmula:
Sb = (1-e) x S.

Inmovilizacin del microorganismo

Determinacin de la curva de crecimiento de S. cerevisiae

Para determinar la curva de crecimiento, en condiciones estriles se tomaba una al-

cuota de 5 ml de cultivo de S. cerevisiae y se inoculaba en 200 ml de caldo Sabouraud,
contenido en un matraz Erlenmeyer de 1 l. El sistema se homogenizaba y se incubaba a 30C
durante 24 h. El crecimiento del microorganismo se monitoreaba tomando muestras de 3 ml
con intervalos de una hora. El nmero de microorganismos se determinaba empleando la
cmara de Neubauer y se expresaba como nmero de cl/ml. Para el recuento de levaduras se
tomaba un volumen de suspensin con la pipeta Pasteur, se cargaba la cmara de Neubauer y
se dejaba reposar hasta conseguir una distribucin uniforme de levaduras. A continuacin, con
ayuda de un microscopio, se contaban las levaduras de los cuadros grandes de las cuatro
esquinas y de uno cualquiera del centro. Se realizaban las diluciones oportunas para conse-
guir un inculo con una concentracin deseada de levaduras.

La concentracin de levaduras en el inculo se calculaba a travs de la frmula si-

guiente:

N clulas/ml-1 = (N clulas contadas) x 400 x 80-1 x 104

 EVALUACIN DE UN FERMENTADOR CON LEVADURAS (S. cerevisiae) 9
INMOVILIZADAS EN PERLAS DE CERMICA

Inmovilizacin de S. cerevisiae

Se utilizaba como medio de cultivo 1 l de caldo Sabouraud y en condiciones estriles

se inoculaba 25 ml de una suspensin de levaduras. Luego, se incubaba a 30C durante 21 h,
tiempo en el que se alcanzaba el mximo crecimiento microbiano.
Cumplido el tiempo de activacin celular se proceda a cosechar la biomasa por
centrifugacin a 2500 rpm durante 15 min. Para el lavado se resuspendan las levaduras en 10
ml de solucin salina al 0,9 %, se homogenizaban y se volvan a centrifugar. Al finalizar se
obtena la biomasa concentrada libre de residuos orgnicos.

Para facilitar la inmovilizacin se resuspendieron las clulas en solucin salina al 0.9

% hasta conseguir concentraciones adecuadas para el estudio.

Se emple el mtodo de inmovilizacin por adsorcin descrito por Wiseman (1989) y

Quinteros (1987). Para el estudio de los parmetros de inmovilizacin se utilizaban la siguien-
te frmula:

Clulas inmovilizadas = N clulas retenidas / peso del soporte

N clulas retenidas = N clulas iniciales N clulas finales

% Inmovilizacin = (N clulas retenidas / N clulas iniciales) x 100

Determinacin de parmetros para la inmovilizacin de S. cerevisiae

Tamao de las perlas de cermica

Se evaluaron tres dimetros diferentes de perlas D1(4,91 mm), D2(7,01 mm) y D3(8,33
mm), manteniendo constante la concentracin inicial de clulas (106 cl/ml) y el flujo de inmo-
vilizacin (120 ml/h). Posteriormente, se determinaba el porcentaje de inmovilizacin, selec-
cionando el tamao que permita obtener un mayor nmero de clulas inmovilizadas.

Flujo de inmovilizacin

Se evaluaron tres flujos diferentes: F1(120 ml/h), F2(75 ml/h) y F3(30 ml/h), mante-
niendo constante la concentracin inicial de clulas (106 cl/ml) y el dimetro ptimo.
Posteriormente, se determin el porcentaje de inmovilizacin y se seleccion el flujo que
permita obtener un mayor nmero de clulas inmovilizadas. Los flujos fueron impulsados
por gravedad.

Concentracin inicial de S. cerevisiae

Se preparaban con solucin salina estril (NaCl 0,9%) 3 suspensiones de levaduras

activas con diferentes concentraciones de clulas: C1(105 cl/ml), C2(106 cl/ml) y C3(107 cl/
ml). En la evaluacin del efecto de la concentracin de microorganismos se mantenan cons-
tante el flujo y el tamao de las perlas. Posteriormente, se determinaba el porcentaje de
10 Anales Cientficos UNALM

inmovilizacin y se seleccionaba la concentracin inicial de microorganismos que permitan

obtener un mayor nmero de clulas inmovilizadas.
Estudio de la fermentacin

Proceso de fermentacin

En el proceso de fermentacin se emple sacarosa invertida como sustrato de fer-

mentacin a 23 Brix, pH de 3.5 y peptona 1%. La solucin se pasteuriz a 82C por 3 min,
luego se enfri a 28C y se aliment al fermentador empacado con perlas de cermica
previamente inmovilizadas. Transcurrido el tiempo de fermentacin se agreg bisulfito de
sodio (250 mg/ml) a la solucin fermentada para prolongar su conservacin

Optimizacin de la relacin dimetro /longitud del fermentador

En la optimizacin se estudiaron los siguientes niveles: D/L1 (1/10), D/L2 (1/15) y D/

L3 (1/20); manteniendo constante el dimetro de 0,05 m. Mediante la determinacin de los
grados alcohlicos y la eficiencia alcohlica se optimiz la relacin D/L.

Grado alcohlico (GL)

En la determinacin del grado alcohlico se emple la equivalencia de 18 g/l (azcar

consumido) equivale a 1 GL (Cesare, 1985).
Eficiencia alcohlica

La eficiencia alcohlica se calcul mediante la metodologa mencionado por Cesare

(1985) en funcin a la siguiente relacin:

C6H1206 2C2H5OH + 2C02 +Energa

180 g 92 g 88 g

Anlisis estadsticos

En los estudios planteados en la presente investigacin, con factores de inmoviliza-

cin y cintica de fermentacin, se emple el Diseo Completo al Azar con 3 repeticiones y la
prueba de comparacin Tuckey (p<0.05).

IV. RESULTADO Y DISCUSIN

Caracterizacin fsica del soporte de inmovilizacin

En el Cuadro 1 se muestra las caractersticas fsicas de las perlas de cermica.
 EVALUACIN DE UN FERMENTADOR CON LEVADURAS (S. cerevisiae) 11
INMOVILIZADAS EN PERLAS DE CERMICA

Cuadro 1: Caractersticas fsicas de las perlas de cermica como soporte

de inmobilizacin

DIAMETRO (mm)
PROPIEDADES
4,91 7,01 8,33

Peso (g/perla) 0,1335 0,3867 0,6188

Densidad aparente (g/mL) 2,154 2,144 2,045

Densidad de la partcula (g/mL) 2,849 2,849 2,849

Superficie especfica (mm2/g perla) 567,34 399,21 352,29

Espacio poroso(%) 24,39 24,75 28,22

Superficie especfica del lecho (mm2/mm3) 0,924 0,644 0,517

Las perlas de cermica presentaron diferentes caractersticas fsicas en relacin con

su tamao. As, La perla de arcilla de 4,91 mm mostraba la mayor superficie especfica de
567,34 mm2/g perla (1,222 mm2/mm3). Sin embargo, la perla de arcilla de 8,33 mm tuvo el
mayor porcentaje de espacio poroso (28,22%). Tambin, observamos en el Cuadro 1 que exis-
ta una relacin inversa entre el tamao de las perlas y la superficie especfica y una relacin
directa con el porcentaje de espacio poroso, que favorecan al proceso de inmovilizacin.

Determinacin de la curva de crecimiento S. cerevisiae

En la Figura 1 se aprecia la curva de crecimiento de S. cerevisiae a 30 C representada

por el nmero de clulas y tiempo de crecimiento.

Figura 1: Curva de crecimiento de Saccharomyces cerevisiae.

1000
Nmero de clulas x 10 (cel/ml)

100
6

10

1
0 5 10 15 20 25
T ie m p o (h )
12 Anales Cientficos UNALM

En la Figura 1, se observa que en el inicio del experimento la concentracin de

microorganismos es de 3,18x106 cl/ml. Durante las primeras 6 horas, las clulas se encon-
traron en un perodo de crecimiento lento alcanzando 9,4 x 106 cl/ml, es decir, las levaduras
en primera instancia se adaptan a las condiciones del medio (pH, concentracin de nutrientes
y temperatura). Despus de la fase de adaptacin su crecimiento es pronunciado llegando a
las 21 h, punto mximo de la fase logartmica e inicio de la fase estacionara, con 1,63 x 106
cl/ml. La velocidad de crecimiento especfico (m) fue de 0,19 h-1 y el tiempo de duplicacin
de 3,7 h. A partir de las 21 h el crecimiento de las levaduras se mantena y despus dismi-
nua, por efecto de la disminucin del sustrato y la generacin de metabolitos inhibidores en
el medio de cultivo.

Determinacin del dimetro ptimo del soporte

En el Cuadro 2 se presenta los resultados del porcentaje de inmovilizacin, nmeros

de clulas retenidas y clulas inmovilizadas, en funcin al tamao de las perlas de cermica.

Cuadro 2: Determinacin del dimetro ptimo de las perlas de cermica.

DIAMETRO

ESTUDIO 4,91 mm 7,01 mm 8,33 mm

X 1 D S X 1 D S X 1 D S

Inmovilizacin (%) 40,8 0,44 36,41 0,58 27,29 0,79

Nmero de clulas retenidas (clx109) 2,24 0,44 1,958 0,09 1,374 0,06

Clulas inmovilizadas (clx106/g perla) 1,23 0,24 1,06 0,05 0,77 0,04

1: Promedio de tres repeticiones DS (desviacin estndar)

Se observa que el mayor porcentaje de inmovilizacin (40,8%) se obtuvo con perlas de

4,91mm de dimetro, seguido de 7,01 y 8,33 mm. De acuerdo, al anlisis estadstico (ANVA)
se observ que existen diferencias altamente significativas entre los tratamientos y la prueba
de comparacin de Tuckey (p<0,05) demostr que existen diferencias por efecto del tamao
de las perlas. Al respecto, Navarro et al. (1979) citado por Silva (1991) estudiaron una serie de
soportes porosos y encontraron que la presencia de poros grandes incrementaba la biomasa
retenida en virtud del incremento de la superficie especfica. Asimismo, Silva (1991) determin
durante la inmovilizacin de Gluconobacter oxydans que la forma cbica del soporte brindaba
mejores condiciones que la viruta de madera. En la presente investigacin la perla de cermica
de 4,91 mm de dimetro present las mejores condiciones de inmovilizacin basada en su
mayor superficie especfica (1,222 mm2/mm3).

Determinacin del flujo de inmovilizacin

En el Cuadro 3 se presenta los resultados del porcentaje de inmovilizacin, nmeros de

clulas retenidas y clulas inmovilizadas, en funcin a la variacin del flujo de inmovilizacin.
 EVALUACIN DE UN FERMENTADOR CON LEVADURAS (S. cerevisiae) 13
INMOVILIZADAS EN PERLAS DE CERMICA

Cuadro 3: Determinacin del flujo ptimo de inmovilizacin.

FLUJO
DIAMETRO

ESTUDIO 120 ml/h 75 ml/h 30 ml/h

X 1 D S X 1 D S X 1 D S

Inmovilizacin (%) 40,27 3,17 56,70 0,61 74,51 1,61

Nmero de clulas retenidas (cl x109) 2,14 0,26 2,94 0,08 3,85 0,15

Clulas inmovilizadas (cl x 106/g perla) 1,18 0,14 1,62 0,05 2,13 0,08

1: Promedio de tres repeticiones DS (desviacin estndar)

Se obtuvo un porcentaje de inmovilizacin de 74,51% con el flujo de 30 ml/h, y un

menor nmero de clulas retenidas con 75 y 120 ml/h. De acuerdo, al anlisis estadstico
(ANVA) se determin que existen diferencias altamente significativas entre los tratamientos
y la prueba de comparacin de Tuckey (p<0.05) demostr que haban diferencias por efecto
de los flujos de inmovilizacin. Al respecto, Quito (1988) citado por Silva (1991) emple
diferentes flujos en la inmovilizacin de S. cerevisiae en soporte de esponja de polmero
sinttico, observando que un flujo de 200 ml/h no favoreca una rpida adhesin. En la pre-
sente investigacin con flujo de 30 ml/h se lograba un mayor porcentaje de inmovilizacin.

Determinacin de la concentracin celular inicial ptima para la inmovilizacin

En el Cuadro 4, se presentan los resultados del porcentaje de inmovilizacin, nmeros

de clulas retenidas y clulas inmovilizadas, en funcin a la variacin de la concentracin
celular inicial de inmovilizacin.

Cuadro 4: Determinacin de la concentracin celular ptima.

CONCENTRACION

ESTUDIO 105 cl/ml 106 cl/ml 107 cl/ml

X 1 D S X 1 D S X 1 D S

Inmovilizacin (%) 76,96 .1,50 72,67 1,19 44,41 4,67

Nmero de clulas retenidas (cl) 3,90x108 0,15 3,62x109 0,10 2,66x1010 0,35

Clulas inmovilizadas (cl/g perla) 2,15x105 0,09 2,00x106 0,05 1,47x107 0,19

1: Promedio de tres repeticiones DS (desviacin estndar)

14 Anales Cientficos UNALM

Se observa que con una concentracin inicial de 107 cl/ml se obtena un menor
porcentaje de inmovilizacin (44,41%). No obstante, se lograba un mayor nmero de clulas
retenidas (2,66x1010 cl) en comparacin a las otras concentraciones. De acuerdo al anlisis
estadstico (ANVA) se observ que existen diferencias altamente significativas entre los tra-
tamientos y la prueba de comparacin de Tuckey (p<0,05) demostr que haban diferencias
por efecto de la concentracin de clulas. Al respecto, Silva (1991) seala que las concen-
traciones celulares de 108 y 109 cl/ml permitan obtener mayor porcentaje de clulas
inmovilizadas durante la inmovilizacin de G. oxydans en soportes de madera. Adems,
manifiesta que el soporte al entrar en contacto con una cantidad de clulas, muy por debajo
de su capacidad de saturacin retendr la mayor cantidad de clulas, dejando en circulacin
slo a las clulas que tienen menor tamao, esto explicara porque se obtuvo el menor
porcentaje de inmovilizacin con la concentracin 107 cl/ml. En el presente trabajo el mayor
nmero de clulas retenidas corresponda a la concentracin de 107 cl/ml.

Determinacin de las dimensiones ptimas del fermentador

En el Cuadro 5 se presentan los resultados de los grados alcohlicos obtenidos duran-

te la fermentacin, en funcin a la relacin D/L del fermentador con 0,05 m de dimetro. El
tiempo de fermentacin fue de 10 das a pH de 3,5 y 23 Brix.

Cuadro 5: Grados alcohlicos en funcin a las dimensiones (D/L) del fermentador.

Grado Alcohlico (GL)

RELACION (D/l)
X1 D S

1/10 11,87 0,49

1/15 12,94 0,36

1/20 11,54 0,19

1: Promedio de tres repeticiones DS (desviacin estndar)

Se observa un mayor grado alcohlico (12.94 GL) con la relacin (D/L) de 1/15. El
anlisis estadstico (ANVA) de los resultados demostr que existen diferencias altamente
significativas entre los tratamientos y la prueba de comparacin de Tuckey (p<0.05) demos-
tr que haba diferencias entre la relacin (D/L) 1/15 y los otros dos tratamientos. Sin embar-
go, entre la relacin (D/L) 1/10 y 1/20 no existan diferencias. Quinteros (1987) indica que la
relacin D/L ptima para disear un fermentador air-lift estn entre 1/10 a 1/15. Al respecto,
no hay informacin que indique el cambio de la fermentacin con la relacin D/L para
fermentadores empacados con perlas de cermica. Posiblemente, el cambio ocurre debido a
la interaccin de las perlas de cermica con el medio de fermentacin, por consiguiente
observara cambios en el pH, interacciones electrostticas, inhibicin de las levaduras y
otros. De acuerdo, a los resultados la relacin D/L apropiada para el fermentador de perlas
de cermica es 1/15. En la Figura 2, se observa las dimensiones del fermentador de acuerdo
a los resultados obtenidos.
 EVALUACIN DE UN FERMENTADOR CON LEVADURAS (S. cerevisiae) 15
INMOVILIZADAS EN PERLAS DE CERMICA

Figura 2: Partes del fermentador con S. cerevisiae inmovilizadas en cermica

PERLAS DE CERMICA
4.91 mm

REGULADOR DE FLUJO DE
L= 76 cm 4 ENTRADA
CONDUCTO DE SALIDA DE
C02
REDUCCION PVC DE 2 pulg
a pulg
TUBO PVC 2
REGULADOR DE FLUJO DE
SALIDA

5
16 Anales Cientficos UNALM

V. CONCLUSIONES

- Las perlas de cermica son un buen soporte de inmovilizacin para levaduras y permi-
te obtener alcohol en niveles aceptables a partir de soluciones azucaradas.

- Las condiciones ptimas para la inmovilizacin de S. cerevisiae en perlas de cermica

fueron las siguientes: dimetro de las perlas de 4,91 mm, flujo de inmovilizacin de 30
ml/h, concentracin inicial de clulas de 107 cl/ml; logrndose mayor clulas
inmovilizadas de 1,47x107 cl/g perla.

- Las dimensiones ptimas del fermentador de lecho empacado con perlas de cermica
fueron las siguientes: Dimetro de 0,05 m, longitud de 0,75 m con una relacin D/L de
1/15.

VI. BIBLIOGRAFIA

BAVER, L. 1991. Fsica de suelos. Ed. Limusa S.A. de C.V. Mxico.

BUCKMAN, R. 1985. Naturaleza y propiedades de los suelos. Ed. Hispano Americana S.A. de
C.V. Mxico.
BENSOAIN, E. 1985. Mineraloga de arcilla de suelo. IICA. San Jos. Costa Rica.
CASTILLO, A. 1993. Clculo de los coeficientes de difusin para xilosa, glucosa y etanol en
partculas esfricas de k-carragenato. Universidad Catlica de Valparaiso. Chile.
CAVAZOS, T., y RODRGUEZ, C. 1992. Manual de prcticas de fsica de suelos. Ed. Trillas.
Mxico.
CESARE, V. 1985. Obtencin de una bebida espirituosa a partir del exudado de cacao
(Theobroma cacao L.). UNAS. Tingo Mara. Per.
COSTALES, F., y Olson, D. 1963. Cermica. Compaa Editorial Continental S.A. Mxico.
CRDOVA, M. 1991. Produccin Biotecnolgico por enzimas inmovilizadas. Alimentos 16 (5):
CRUEGER, W. 1993. Biotecnologa Manual de Microbiologa Industrial. Ed. Acribia S.A. Zara-
goza. Espaa.
PREZ, A. 1987. Clulas inmovilizadas y su utilizacin en la produccin etlica por fermenta-
cin y otros insumos. UNMSM. Lima. Per.
QUINTEROS, R. 1987. Ingeniera Bioqumica. Ed. Alhambra Mexicana S.A. de C.V. Mxico.
SILVA, J. 1991. Evaluacin de las maderas (Ochroma pyramidale), Lupuna Blanca (Ceiba
pentandran L.)y Lupuna colorada (Cavanillesia hylogeiton L.) como soportes para la
inmovilizacin de Gluconobacter oxydans . Tesis.
VALDEZ, T. 1994. Cermicas y Refractarios. CONCYTEC. Lima. Per.

WISEMAN, A. 1989. Principios de la Biotecnologa. Ed. Acribia S.A. Zaragoza. Espaa.