Ao de la consolidacin del Mar de Grau

15-04-16

ALUMNAS:
Bustinza Damiano, Roco
Gonzales Rosales, Brisayda
Huiza Acosta, Karen Briguit
Lzaro Mendoza, Carmen Janeth
Rocha Yupanqui, Ruth Milagros
DOCENTE:
Alexandra Muoz
MATERIA:
Microbiologa Ambiental
CICLO:
IV

LIMA, 2016
 I. OBJETIVOS

El objetivo principal del presente informe es aprender a identificar algas y conocer su

capacidad de bioabsorcion de metales especficamente del cobre (Cu). Los objetivos
especficos con los siguientes:

1. Aprender a elaborar un fotorreactor artesanal a partir de materiales caseros.

2. Aprender a elaborar un medio de cultivo para las algas.
3. Aprender a diferenciar un alga de un protozoario, bacteria y otros microorganismos
en el microscopio 2
4. Conocer la importancia de las algas en los diferentes mbitos industriales,
ambientales, etc.
5. Comprobar la capacidad de absorcin de metal por parte de las algas.
6. Aprender la tcnica de titulacin.

II. MATERIALES Y COSTO

PARA CONTRUCCCION DEL 8 15soles

FOTOREACTOR Total 19 soles
1. Una botella descartable de 500ml.
2. Un motor pequeo de 9 voltios.
3. Medio metro de manguera Materiales en el laboratorio
transparentes,1 cm de dimetro.
1. Audio y video
4. Una tapa de botella descartable. 2. Microscopios
5. Una tapa de tempera. 3. Pesetas con agua
6. Un cargador de batera. 4. Probetas 100 mL x mesa
7. 10 ml de muestra de algas. 5. Balanzas
8. Motor de agua pequeo de 12 voltios. 6. Esptulas
COSTO DE MATERIALES (fotoreactor) 7. Agua destilada 1L x mesa
1. Beaker 500 mL x mesa
1 0 2. 5 beakers 100 mL x mesa
2 2.00 soles 3. CuSO4
3 2.00soles 4. Erlermeyeer 250 mL x mesa
4 0 5. 1 Bureta y soporte x mesa
5 0 6. Solucin EDTA 1 N
7. Indicador NET
6 0
8. NaOH 1 N
7 0 9. 4 Pipetas 1 mL x mesa
 III. METODOLOGA

1. QUINTA PRCTICA DE LABORATORIO: ELABORACION DEL

FOTOBIORREACTOR

DEDD
FOTOBIORREACTOR
Elaboracin Medio de cultivo para algas
xc<

Tomamos la tapa de una 3

Trabajamos con algas de la laguna 2
botella de 500ml e hicimos un
de villa uno, para mantener el
agujero en el centro para
desarrollo de estas, preparamos su
colocar una simulacin de una
medio de cultivo con K2HPO4, sulfato
mini bomba de oxigeno que
de Mg, cloruro de Ca, nitrato de Na y
tena la forma de un ventilador.
un gramo de NaCl.

Luego tapamos la parte exterior de

la tapa con la mini bomba de oxigeno
dentro y le colocamos una manguera
para llevar oxgeno y dar
movimiento al medio de cultivo de
las algas. Este fotobiorreactor casero
funcionaba con el motor de nueve
voltios y con un cargador de celular.
Luego utilizamos Una vez colocadas las algas en el
20ml de algas, ya fotobiorreactor. Observamos que los
que el medio de nueve voltios del motor que usamos
cultivo preparado no tena el suficiente potencial de
solo alcanzaba para energa para bombear oxgeno a las
dicha cantidad. algas, entonces lo cambiamos por
una bomba de agua comercial.

El tiempo de elaboracin del La revisin y observacin de las algas

fotobiorreactor fue fue a diario a las ocho de la maana y
aproximadamente cinco horas por las noches dejamos las luces
ya que fue casero. prendidas como simulacin de la
radiacin solar.

2. QUINTA PRACTICA DE LABORATORIO: MICROSCOPIA DE ALGAS

MICROSCOPIA DE ALGAS

Observamos las algas Se encontr ms

en el microscopio protozoarios que
aplicando una gota de algas.
azul de lactofenol en el
portaobjetos seguido
de una gota del medio
de cultivo de algas.
 3. QUINTA PRACTICA: BIOABSORCION DE METALES

BIORREMEDIACION DEL COBRE (Cu)

Para preparar la Para la titulacin

solucin de Cu a 300ml filtramos 3ml de la
usamos 5mM de Cu, solucin Cu ms algas y
Finalmente a la muestra (9ml de agua
luego solo usamos solo usamos 1ml del
destilada ms 1ml de algas) se le agrego
4
100ml de la solucin filtrado para despus
una pizca de NET ms 3 gotas de NaOH.
para mezclar con 20ml aadirle 9ml de agua
de algas. destilada.

Para la determinacin del metal en la

columna se coloc 25ml de EDTA que poco
a poco cay sobre la muestra hasta que
este cambio de color, de esa manera
determinamos la concentracin del Cu a
travs del volumen del EDTA usado.

IV. RESULTADOS:
MORFOLOGA DE LAS MICROALGAS CULTIVADAS QUE FUERON EXTRADAS DE
LA LAGUNA 2 DE VILLA 1

Fig.1: Semejante a Fig.2: Semejante a

Volvox aureus. Alga muerta.

Esta imagen nos indica que la En esta imagen se puede ver

microalga presenta un color verde
claro en forma de colonia con
clulas redondas unidas mediante
filamentos lo cual nos indicara de
un posible Volvox aureus que
pertenecera Clorofceas.
como el microalga toma un color
verduzco oscuro es por ello que
hay una posibilidad que este haya
entrado en la fase de muerte; ya
que estuvieron quizs expuestas
poco tiempo a la luz.

Fig.4:Semejante a Euglena
(Eugln) y Trofozoito
(Giarda lambilla)
Esta imagen nos muestra
microalga de color verde azulada
oscuro y con forma filamentosa lo cual
nos indicara que posiblemente se
tratara de un Hormogonio
pertenecera a las cianophitas. En la
foto tambin se encuentra una gran
cantidad de microorganismos que por
su movimiento indicara que son
protozoos del tipo Euglena (Eugln) y
Trofozoito (Giarda lambilla).
Fig. 6: Semejante a Diploneis
ehrenberg cleve ex
En esta imagen se puede ver
como la microalga toma un
color verde claro y tiene una
forma redonda con la
posibilidad de ser un Diploneis
ehrenberg cleve ex.
5
Fig. 5:Semejante a Nostoc sp. y
Oscillatoria tenuis
Esta imagen nos indica dos tipos de
una microalgas que presenta un color
verde y una se encuentra en forma de
colonia con clulas redondas unidas
mediante filamentos lo cual nos
indicara de un posible Nostoc sp. que
que pertenecera a las cianofceas. Por
otro lado, se estara observando un
Oscillatoria tenuis, ya que presenta un
tallo de color verdeazulado, adems sus
filamentos son rectos, con extremos no
apuntados.
Fig. 7: Eudorina elegans.
Esta imagen nos indica que las
microalgas visualizadas presentan
un color verde claro aunque la
imagen no ayude y se encuentren en
una colonia en formas circulares con
flagelos pequeos, por tanto
estaramos frente a la posibilidad de
ser un Eudorina elegans.
EVALUACION DE ABSORCIN DE COBRE CON MICROALGAS POR EL MTODO
DE TITULACIN:

TIEMPO VOLUMEN

0 minutos 25mL

30 minutos 24.5mL

60 minutos 17.5mL

90 minutos 10.5mL 6

CLCULOS DE CONCENTRACIN DE COBRE ABSORBIDA POR LA MICROALGAS

DE LA LAGUNA 2 DE VILLA 1:

[Cu] = Volumen del EDTA*[ ] EDTA*10^3

Volumen de la muestra

Para el tiempo 0 minutos cambia de color a azul en 25mL:

[Cu] = 25mL*0.1*10^3= 250.0
10mL
Para el tiempo 30 minutos cambia de color a azul en 24.5mL:
[Cu] = 24.5mL*0.1*10^3= 245
10mL
Para el tiempo 60 minutos cambia de color a azul en 17.5mL:
[Cu] = 17.5mL*0.1*10^3= 175
10mL
Para el tiempo 90 minutos cambia de color a azul en 10.5mL:
[Cu] = 10.5mL*0.1*10^3= 105
10mL
 Tabla1. Grfica de absorcin de Cu con respecto a los tiempos con microalgas cultivadas
pero extradas de la laguna 2 de villa 1.

[Cu]
300,0

250,0

200,0 7
[Cu]

150,0
[Cu]
100,0

50,0

0,0
0 minutos 30 minutos 60 minutos 90 minutos
Tiempo

Las microalgas cultivas realizaron biorremediacin del Cu, pues estas absorbieron el Cu
segn variaba el tiempo por cada 30 minutos. En el tiempo 0 minutos la microalga absorbi
una concentracin de 250 de Cu, en los 30 minutos la microalga absorbi una concentracin
de 245 de Cu, en los 60 minutos la microalga absorbi una concentracin de 175 de Cu y,
por ltimo, en los 90 minutos la microalga absorbi una concentracin de 105 de Cu. Estos
resultados nos da un ndice de que las algas de la laguna dos de villa una podran realizar
bioabsorcion de otros metales, ya que efectivamente realizo bioabsorcion del cobre.

V. DISCUSIONES
Fotorreactor con bomba de oxgeno casero

Nuestro grupo elabor una bomba de agua casera, con materiales fciles de conseguir,
nos guiamos de un video de YouTube. Cuando introducimos la bomba en la botella, no
tuvo la fuerza necesaria para llegar hasta las algas, esto se debi a que la bomba era
de 9 voltios y el ideal era de 12 voltios.

Fotorreactor con bomba de oxigeno

Luego de dos das al observar la precipitacin de algas muertas en nuestra botella con
la muestra de la laguna, decidimos adquirir una bomba de oxigeno de acuario; sin
embargo , este era una bomba de oxgeno para acuarios, por ello no era adecuada para
 un fotorreactor de algas, ya que estas son sensibles a una bomba de oxgeno y
necesitaban una bomba de aire adecuada que filtre el co2 del aire y remueva el oxgeno
de las algas en la botella , por eso debimos haber consultado a un especialista experto
en algas o relacionado para que nos oriente en la elaboracin del fotorreactor.

Muerte de algas en el fotorreactor

Consideramos que la muestra de algas obtenidas en la laguna 2 de villa 1 , eran ricas en

macro algas , micro algas y protozoarios; sin embargo , al verterlas en una botella de 600
ml , e intentar colocarle una bomba de oxigeno casera , al ser ellas muy sensibles a esta 8
accin mecnica , adems de que la botella era muy pequea y no contena los nutrientes
necesarios para su reproduccin y no estuvieron lo suficientemente expuestas al sol , gran
parte de ellas murieron ; sin embargo a la semana siguiente al observarlas en el microscopio
, nos dimos con la sorpresa de que aun haban pequeas microalgas vivas movindose.
Entonces algunas de ellas sobrevivieron debido a que consumieron el medio de cultivo que
contena los nutrientes como K2HPO4, sulfato de Mg, cloruro de Ca, nitrato de Na y un
gramo de NaCl .Adems del co2 del ambiente que fue suficiente para su existencia, pero
hubo una mnima diversidad de algas en comparacin con la semana anterior a esa
revisin.
Bioabsorcin del cobre

A pesar de que gran parte de nuestra muestra de algas estaba muerta, algunas de ellas
sobrevivieron y si realizaron absorcin del cobre , segn los resultados obtenidos luego
de la titulacin y la grfica correspondiente .Aunque nuestras algas hayan sido de agua
dulce, en otros trabajos de investigacin en su mayora utilizan algas marinas para la
bioabsorcin de metales pesados como el plomo y el cadmio .Consideramos que hay
una gran potencial por investigar en algas de agua dulce para este fin .
VI. RECOMENDACIONES

En esta prctica de crecimiento de algas en envases de botella, considerando que

las algas son de aguas dulces de la laguna II de la universidad, para su crecimiento
y reproduccin es necesario brindarles un fotobiorreactor casero y no bombas de
oxgeno ya que las algas son muy sensibles lo que les perjudica en su ciclo trfico,
causndoles la muerte.
Para un fotobiorreactor casero, es necesario de que el motor que ayuda a filtrar el 9
CO2 del aire y poder sacar el oxgeno de las algas sea de doce volteos a ms, ya
que al usar el motor de 9 volteos no tiene la suficiente fuerza y por ello es
recomendable que este brinde un constante movimiento al ambiente acutico de las
algas, caso contrario las algas mueren.
Para el caso de nutrientes de las algas, es recomendable usar diversidades de estos,
como por ejemplo: agua, carbono, nitrgeno, fosforo y oxgeno, asi como tambin
algunos macronutrientes y micronutrientes de acuerdo a las especie de algas.
Durante el periodo de produccin de oxigeno es necesario colocar el fotobiorreactor
con algas a la luz del sol, para facilitar su crecimiento, nutricin y reproduccin de
algas.
Es necesario de que observemos da a da las algas e identificar los cambios ya sea
en aumento, crecimiento y supervivencia; asimismo, tomar datos de estas
variaciones que se observan.
Es recomendable que observemos en microscopio a las algas antes de agregar
nutrientes y de ingresar estas algas a un fotobiorreactor, tambin es importante
observarlo despus de transcurrir el tiempo pronosticado (1 semana), para poder
identificar y comparar las diferencias.
Es recomendable que para realizar la titulacin, este sea muy exacto y preciso al
momento de agregar las sustancias y/o compuestos qumicos, para poder obtener
correctos resultados, del mismo modo ello debe coincidir con el tiempo para cada
titulacin.
VII. BIBLIOGRAFIA

Field, D. J. (s.f.). google. Obtenido de

http://binational.pharmacy.arizona.edu/sites/binational.pharmacy.arizona.edu/files/all_files/Biore
m-MP.pdf

TAPIA. (FEBRERO de 2011). REVISTAS METALURGIA. Obtenido de RM: http://r

ATLAS DE MICROORGANISMOS. (2010). Obtenido de

http://www.ufjf.br/ppgpmi/files/2010/04/atlas-de-microorganismo2.pdf 10