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INTRODUCCIN
El diagnstico clnico se basa en una recopilacin de datos que nos informan acerca del
estado de salud de un animal. Uno de esos datos son los que nos proporcionan los
anlisis clnicos, y dentro de ellos estn los informes hematolgicos.
Figura 1
TABLA I
LEU = Leucocitos/L
HEM =Hemates/L
HCT = Hematocrito %
PTC = plaquetocrito %
NEUT = Neutrfilos/L %
LINF = Linfocitos/L %
MONO = Monocitos/L %
EOS = Eosinfilos/L %
BASO = Basfilos/L %
SERIE ROJA
En el canal de clulas rojas y plaquetas, el instrumento esferocita los hemates, los hace
pasar por un capilar de uno en uno y los cuenta, dando el nmero de hemates por
volumen de plasma (HEM x106/L), y por medio del lser determina el volumen y el
ndice de refraccin de los mismos. Al estar las clulas esferocitadas, puede determinar
el volumen sin error (VOLUM. HEM), midiendo su dimetro. El volumen medio de
hemates para un perro es de 45 a 95 fL, y para un gato de 29 a 70 fL. De la suma de la
determinacin del volumen obtenido clula por clula y del nmero de hemates, se
calcula:
HC = VCM x HEM/1000
Los lmites de la curva de esta grfica deben estar comprendidos entre los valores de
volumen antes indicados, por lo que otro parmetro a tener en cuenta es el ancho de
distribucin de hemates, o el ancho de la curva (RDW), el cual representa de forma
numrica, el coeficiente de variacin del mnimo y mximo de la curva, o histograma de
la figura 2.. Su utilidad es informar numricamente de la existencia de anisocitsis, es
decir de la variacin del volumen eritrocitario. sto ocurre cuando existen varias
poblaciones de distinto tamao. Si tenemos un RDW elevado y en el histograma hay
una poblacin desplazada hacia la izquierda, y/o hacia la derecha, en el informe
aparecern cruces en anisocitsis (ANISO).
Exactamente igual que para el volumen de los hemates, obtenemos una grfica de
concentracin de hemoglobina (figura 3), donde se distribuyen de menor a mayor las
distintas cantidades de hemoglobina contenida en los hemates, siendo el ancho de esta
curva (HDW) el parmetro que nos informa sobre posibles fenmenos de anisocroma
(ANISOCR). La desviacin del histograma de hemoglobina hacia la izquierda, por tanto
implica hipocroma (HIPO) y hacia la derecha hipercroma (HIPER). El HDW, por
consiguiente, ser la desviacin estndar de la curva de hemoglobina, y un valor de este
parmetro elevado significa anisocroma, apareciendo en el informe cruces en la casilla
de ANISOCR.
Figura 3
HCM = 10 x HB/HEM.
Una vez definidos estos parmetros, veremos la utilidad de todos estos ndices, que es
simplemente poder clasificar los distintos tipos de anemias. Normalmente se define una
anemia como un descenso en los valores de hemoglobina y/o del hematocrito, por
debajo de lo normal.
Existe una tercera posibilidad de anemia, y es la que cursa con clulas macrocticas y
normocrmicas. Esta situacin puede ocurrir en gatos, a veces en infeccin por el virus
de la leucemia felina, y en perros en algunos casos raros de mal absorcin de vitamina
B12 o en tratamientos con antagonistas de los folatos (difenilhidantona y metotrexato,
por ejemplo). En un proceso de CID (coagulacin intravascular diseminada) se
producen esquistocitos, o fragmentos de hemates que pueden tambin pueden aparecer
en el histograma como clulas microcticas.
Las plaquetas se cuentan en el mismo canal que los hemates, aunque sus resultados se
diferencian de stos, debido a que tienen un ndice de refraccin distinto entre s.
Mientras que los hemates este ndice est por encima de 1.38, el de las plaquetas no
supera esta cifra. Por tanto, de la misma forma que con los hemates, tambin se obtiene
un histograma de su volumen (figura 5) o VOLUM. PLQ, as como el volumen
plaquetar medio o VPM, siendo de 6 a 11 fL en perros, y de 4 a 6 fL en gatos.
Figura 5
Estos dos parmetros nos van a ser de gran utilidad para evaluar una trombocitopenia.
Un VPM aumentado nos estar indicando una activacin de la trombopoyesis, dado que
las plaquetas grandes suelen ser ms jvenes que las pequeas, y la causa puede ser
debida a una trombocitopenia, aunque no se pueda diferenciar el origen de la misma.
VPM aumentados tambin se pueden hallar en alteraciones de la mdula sea,
coagulacin intravascular diseminada y trombocitopenia inmunomediada. Adems, para
las plaquetas tambin se obtienen otros ndices, como son el plaquetocrito o PTC, que
indica la relacin del volumen de plaquetas con el de la sangre total, y el ancho de
distribucin de plaquetas (PDW) que representa el ancho de la curva de VOLUM. PLQ.
Nos podemos encontrar un PDW aumentado en trombocitopenias inmunomediadas y en
ehrlichiosis. En este caso el nmero de plaquetas es pequeo y la curva de VOLUM.
PLQ es casi una lnea (figura 6).
Tambin podemos saber si existe agregacin plaquetaria, por una imagen caracterstica
que se visualiza en la grfica de perox (figura 7). En esta grfica se observa una nube de
puntos de forma lineal, orientndose a 45 0 en dicha grfica. Esa nube de puntos son
plaquetas agregadas, y el nmero total de plaquetas puede estar disminudo. En otras
ocasiones podemos observar un pico a la izquierda del histograma de plaquetas, que
corresponde a fragmentos de hemates.
Figura 6
La trombocitopenia nos indica el desarrollo de un proceso patolgico, aunque hay que
tener en cuenta que algunas circunstancias nos pueden llegar a disminuir el nmero de
plaquetas. El almacenamiento de la sangre por espacio de 2 das, no afecta al recuento
de plaquetas, segn Willard en 1989, siendo este hecho adems comprobado en nuestro
laboratorio. Sin embargo, el uso de heparina sdica-litio como anticoagulante,
disminuye el nmero de plaquetas. En los gatos la agregacin de plaquetas es un hecho
frecuente, por lo que a veces se puede obtener una falsa trombocitopenia. Esta situacin
suele aparecer en muestras muy pequeas, donde la proporcin de anticoagulante en el
tubo de muestra, respecto a la sangre, es alta.
Figura 7
LEUCOCITOS
Dos son los canales por los que el instrumento determina el nmero de leucocitos y sus
diferentes tipos de poblaciones, as como clulas precursoras y patolgicas de la serie
blanca. Uno de ellos es el canal de peroxidasa. En este canal se clasifican los distintos
tipos de leucocitos. Una vez lisados los hemates, se cuenta el nmero de leucocitos
(entre 5.000 y 15.000), y por mtodos citoqumicos se determina la actividad
peroxidsica de cada poblacin de leucocitos, clasificndose cada uno de ellos en base a
su tamao y actividad peroxidsica. En la figura 8 se muestran las distintas reas donde
se orientan cada una de las poblaciones de leucocitos en un perro.
Figura 8
As, los linfocitos se agrupan hacia la izquierda y abajo del histograma, ya que son
clulas pequeas y poco teidas, y los neutrfilos arriba y a la derecha, al ser mayores y
poseer mayor tincin. En gatos, los eosinfilos son las clulas ms grandes, aunque no
se tien con la peroxidasa, por lo que se localizan en la parte superior de la grfica,
encima de los neutrfilos. Como hemos visto anteriormente, tambin se cuentan en el
canal de perox las plaquetas agregadas. Existe un parmetro que es el ndice de
actividad peroxidsica media de la poblacin de neutrfilos, o MPXI. Si es alto, indica
la presencia de cayados, dando alarmas en forma de cruces en la casilla D. IZQ. Si por
el contrario es bajo, indica una patologa de la serie mieloide. El MPXI en un perro se
halla comprendido entre 0 y 8, y en un gato entre 0 y 10.
Hay tambin un rea donde se agrupan las LUC o clulas grandes no teidas, que
corresponden a linfocitos grandes hiperactivos, linfoblastos, mieloblastos y en general
clulas patolgicas. El porcentaje de LUC normal se halla entre el 0 y 3 % en perros, y
entre el 0 y 1 % en gatos. Estas clulas no se tien con peroxidasa, y su aumento nos
puede ayudar a diagnosticar una posible leucemia. La figura 9 muestra una grfica de un
perro (resultado real) con leucemia linfoblstica aguda (foto 1). Se puede observar como
la mayora de las clulas estn encuadradas en la zona de LUC, ya que los linfoblastos
son clulas grandes que no se tien con la peroxidasa. Tambin se observa una
poblacin anormal en el histograma de baso-lobularidad, en la zona correspondiente a
los basfilos, debida a un aumento de linfoblastos. Un aumento de LUC se traduce en
alarmas como IG + (granulocitos inmaduros), ATIP + (linfocitos atpicos).
Figura 9
Foto 1
CONCLUSIONES
El gran avance de los analizadores hematolgicos son las grficas que procesan. En el
caso de los hemates, por medio de curvas que representan su tamao y cantidad de
hemoglobina, podemos ser capaces de clasificar, a simple vista, el tipo de anemia e
incluso detectar clulas rojas precursoras. Tambin podemos saber si existen fragmentos
de hemates. Con las plaquetas podemos saber si su nmero es real, por estar o no
agregadas. Pero el mayor avance en hematologa veterinaria, con este tipo de
instrumentos, es la determinacin de los distintos tipos de clulas blancas. Se pueden
determinar las cinco poblaciones de leucocitos en perros y gatos, pudiendo saber por su
nmero si existe un proceso inflamatorio, desviacin a la izquierda, tendencia a un
proceso alrgico o una infeccin parasitaria. Pero lo ms importante es que podemos
detectar clulas tumorales, en forma de clulas precursoras, y por medio de las grficas
y los ndices numricos, saber si el animal es normal o presenta alguna alteracin como
las leucemias, parvovirosis o eosinofilia, entre otras.
Por tanto, la ventaja que presenta, los informes de este tipo es la rapidez y la precisin
con la que nos enfrentamos a una patologa de tipo hematolgico, o de otro tipo, pero
que se refleja en cambios en los parmetros normales sanguneos. Aprendiendo a
observar todos los datos que el informe nos proporciona, sacaremos el mayor partido a
los resultados hematolgicos.
TABLA II
HB 13 2-------------------------------------------------------------- HB 8 14
HTC 40 63----------------------------------------------------------HTC 24 45
CHCM 30 36-------------------------------------------------------CHCM 30 36
Valores normales, para perros y gatos, de los distintos parmetros que suelen aparecer
en los informes hematolgicos.
BIBLIOGRAFIA
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- Ialongo P., Vignetti M., Cigliano G., et al. Flo cytometric measurement (H. 1
Technicon) of microcytic and hypercromic red cell populations in pediatric patients
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- Mansberg HP, Saunders AM and Groner W. Histochem and Cytochem. 1974; 22 (7):
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- Weiser M.G. Modification and evaluation of a multichanel blood cell counting system
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- Willard M.D., Tvedten H.W., Turnwald G.H.. Small Animal Clinical Diagnosis by
Laboratory Methods. Philadelphia, P.a: Saunders; 1989.
Los leucocitos son las clulas que, por sus caractersticas, nos proporcionan ms
informacin sobre el estado general de salud de un paciente. Responsables de la defensa
del organismo, ya que eliminan cualquier agente infeccioso (bacterias, virus o
parsitos), actan en procesos inflamatorios, son los mediadores del funcionamiento de
las vacunas y, como cualquier otro tipo de clulas, pueden sufrir alteraciones, dando
lugar a diversas neoplasias.
Los leucocitos se dividen, segn la presencia o ausencia de grnulos en su citoplasma,
en granulocitos y agranulocitos.
Granulocitos:
- Neutrfilos.
- Eosinfilos.
- Basfilos.
- Agranulocitos:
- Monocitos.
- Linfocitos.
Neutrfilos: 45 76 %./ 35 75 %.
Linfocitos: 16 45 %. / 20 55 %.
Monocitos: 1 - 8 %./ 1 - 4 %.
Eosinfilos: 1 10 %. / 1 10 %.
Basfilos: 0 2 %./ 0 2 %.
Debemos considerar cmo acta cada tipo de leucocito para poder entender en qu tipo
de alteraciones puede variar su nmero, lo cual se reflejar en la frmula leucocitaria.
De forma general, podemos dividirlos en fagocitos e inmunocitos.
Los fagocitos son los neutrfilos, eosinfilos, y monocitos. Son clulas que aparecen
como primera lnea de defensa contra agentes infecciosos. Su nmero, por tanto, se
incrementar en todos los procesos que impliquen una agresin, tanto bacteriana como
parasitaria. Hay que tener en cuenta, sin embargo, que los eosinfilos no tienen un papel
predominantemente fagocitario, como veremos ms adelante. Aunque todos los
fagocitos no actan de la misma forma, es importante sealar que son atrados, frente a
cualquier agresin, hacia un lugar especfico del organismo por medio de antgenos
(propios o extraos), o por sustancias quimiotcticas liberadas. Este fenmeno de
atraccin celular se denomina quimiotaxis. Esto significa que en procesos
inflamatorios, donde se libera una gran cantidad de este tipo de mediadores, tambin
nos encontraremos con un alto porcentaje de fagocitos.
1. Infecciosos.
2. Inflamatorios.
3. Inmunomediados.
Los inmunocitos son los linfocitos. stos se dividen en linfocitos T y B. Los linfocitos T
son los responsables de la inmunidad celular. Su papel es el de reconocer a un antgeno
extrao y desencadenar toda la respuesta inmunitaria. Aparte de controlar y regular el
sistema inmunitario, tambin pueden actuar directamente sobre virus o clulas
tumorales. Los linfocitos B por su parte, tras su transformacin en clulas plasmticas,
producen inmunoglobulinas o anticuerpos, siendo los responsables de la inmunidad
humoral. El papel de los anticuerpos es mediar en la identificacin exacta del antgeno
extrao, y promover en definitiva la actuacin especfica de las clulas fagocticas y en
general la respuesta inmunitaria. Ciertos clones de linfocitos B permanecen como
circulantes actuando como memoria del sistema inmunitario y facilitando una respuesta
ms rpida ante una posterior exposicin a los mismos antgenos. Las clulas de
memoria son las responsables de la inmunidad que se adquiere al paso de muchas
infecciones o inducida por la vacunacin.
El nmero de linfocitos se elevar en procesos:
Inmunomediados.
Independientemente de las agresiones que sufra el organismo, otro tipo de causas puede
incrementar el nmero total de leucocitos, o en particular de alguno de sus tipos. El
ejemplo ms claro lo tenemos en la accin de los glucocorticoides sobre los leucocitos,
los cuales inducen a un aumento del nmero total de los mismos, y en particular de
neutrfilos, adems de producir linfopenia.
NEUTRFILOS.
Neutrfilo
Cayado
MONOCITOS.
Los monocitos tienen forma irregular, con el citoplasma basfilo (azulado), a menudo
con vacuolas, y ncleo grande. Es la clula ms grande de todos los leucocitos, y si no
se posee demasiada experiencia se puede llegar a confundir con los cayados. Los
monocitos cuando se encuentran dentro de los tejidos, se denominan macrfagos.
Monocito
EOSINFILOS.
Son clulas con ncleo bilobulado, redondas y con grnulos de color rojo-anaranjado,
cuyo contenido son sustancias antihistamnicas que inhiben la liberacin de histamina y
serotonina por parte de los mastocitos. Su funcin principal es como mediadora en los
procesos alrgicos, aunque tambin aparece en procesos parasitarios. As mismo actan
como moderadores de la inflamacin aguda.
Eosinfilo
BASFILOS.
Es raro encontrar en la sangre basfilos. Son clulas redondas, algo mayores que los
neutrfilos, con el ncleo irregular (suele ser trilobulado) y el citoplasma con grnulos
de intenso color azul. Las Ig E, involucradas en cierto tipo de reacciones de
hipersensibilidad, los estimulan, produciendo la liberacin de la histamina y heparina
que contienen sus grnulos, desencadenando todas las reacciones inflamatorias. La
basofilia suele acompaar a la eosinofilia, debido a su papel en los procesos alrgicos. A
veces pueden observarse en nmero elevado en mastocitomas.
LINFOCITOS.
Este tipo de clulas, pequeas, de forma redonda y con un ncleo de color azul oscuro
intenso que ocupa todo el citoplasma, tiene muchos subtipos y distintas funciones:
linfocitos B circulantes (clulas de memoria), clulas plasmticas (producen
anticuerpos), linfocitos T citotxicos (antivirales), supresores (inhiben la respuesta
inmune) y coadyuvantes o helper (inducen la multiplicacin y diferenciacin de los
linfocitos B y otros linfocitos T).
Linfocito
CUADRO 1
Cefalosporinas
FeLV-FIV
Leucemias (mieloides)
Anestesia
LINFOCITOS LINFOCITOSIS Estrs (en gatos)
Leucemia linfoctica
Vacunas
LINFOPENIA Glucocorticoides
Quilotrax
Linfosarcomas
MONOCITOS MONOCITOSIS Inflamacin crnica
Anemia autoinmune
PIF
EOSINFILO EOSINOFILIA Alergias
Parsitos (filariosis)
Granuloma eosinoflico
EOSINOPENIA Glucocorticoides
BASFILOS BASOFILIA Hipersensibilidad (alergias)
Mastocitomas
CONCLUSIONES
La frmula leucocitaria, como hemos visto, nos puede dar gran informacin sobre el
estado general de salud de un animal, pero hay que considerar tambin el nmero total
de leucocitos, para su correcta evaluacin. Como cualquier resultado analtico, la
frmula leucocitaria por s misma no es capaz de confirmarnos una patologa especfica.
Si los resultados obtenidos nos inducen a pensar que existe algn proceso patolgico,
esta sospecha se debera complementar con otro tipo de anlisis. En el caso de
inflamaciones, si son debidas a parsitos habr que detectarlos por medio de pruebas
inmunolgicas u observacin directa. Si el proceso es bacteriano, debera buscarse el
origen y realizar cultivos microbiolgicos. Actualmente existen mtodos analticos que
nos evidencian la presencia de ciertos virus. Las neoplasias nicamente se pueden
confirmar por estudios anatomopatolgicos, como citologas o biopsias. Todos estos
mtodos confirmativos, inducidos por los resultados de la frmula leucocitaria, siempre
apoyan al diagnstico clnico.
BIBLIOGRAFIA
-Cowell R.I., Tyler R.D. and Meinkoth J.H. Citologa y hematologa diagnstica en el
perro y el gato. Multimdica. Barcelona, 1999.
- Rebar A..H. The white cell and disease. Veterinary Learning System. USA, 1990
RETICULOCITOS.
Los reticulocitos son clulas precursoras de los hemates y una elevada concentracin de
IR = (% Hematocrito/45) x % Reticulocitos
COAGULACIN.
Las pruebas de coagulacin se determinan en un coagulmetro Coatron M1 (Kemia)
monocanal termostatizado, en plasma obtenido de sangre recogida en citrato sdico. La
concentracin de citrato debe ser del 3,2 % y la proporcin sangre:citrato debe ser de
9:1.
Fibringeno
Hay que tener en cuenta que el citrato sdico de los tubos est en forma lquida y en
cantidad considerable, por lo que si la cantidad de sangre extrada no llega a la marca de
llenado que indican todos los tubos, sta estar ms diluda y por tanto los tiempos de
coagulacin pueden ser ms alargados.
Los trombos que aparecen en ciertas enfermedades estn formados por fibrina con
enlaces cruzados, cuya digestin producida por la plasmina, da lugar a los PDF
molecularmente distintos a los del fibringeno. La aparicin de PDF detectables en una
muestra de sangre con citrato sdico, es indicativo de un proceso de caogulacin
intravascular diseminada (CID).
BIBLIOGRAFIA
- Kitchen, S., Olson, J.D. and Preston, F.E. Quality in Laboratory Hemostasis and
Thrombosis. Wiley-Blackwell, 2009.