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Extraction of Antioxidant Pectic
Extraction of Antioxidant Pectic
Carbohydrate Polymers
Doping Centro de Control, Universidad Sains Malaysia, 11800 USM, Penang, Malasia
Articulo de historia:
diseo de Box-Behnken (BBD) se emple para optimizar la temperatura de la incubadora (x C), extraccin
1: 50-80
Recibido el 6 de agosto de tiempo de la (x
2010Accepted 11 de agosto de 2: 2-4 h) y pH (x3: 2-4) para obtener un rendimiento de alta antioxidante pectico-polisacrido con alto
2010 contenido de cido urnico y la actividad antioxidante de la cscara del mangostn. El anlisis de varianza mostr que thecontribution del
Disponible en Internet el 18 de agosto de 2010 modelo cuadrtico fue significativo para el rendimiento de la extraccin y la actividad antioxidante whereaslinear modelo fue significativo
para el contenido de pectina. methodologywas estudio de optimizacin de superficie de respuesta usando realizadas y superficies de
respuesta se representaron en 3D a partir del modelo matemtico. Se dieron dos condi-ciones ptimas: la condicin (1) x
Palabras clave:
ExtractionMang
osteen DO; x DO; x
1= 80,0 2= 3,93 h; x3= 2.45, y la condicin (2) x 1= 67,7 2= 3.67 h;
x
Garcinia mangostana 3=
2.00. Estas condiciones ptimas rindieron pctico-polisacrido de ~12,0 a 12,4%, contenido de cido urnico
metodologa de superficie de ~20,2-21,1 mg / g, y% DPPHsc / g de extracto de 225 a 252, respectivamente. Se encontr una estrecha concordancia entre experimen-tal
OptimizationPectic- y valores predichos. Por tanto, este podra ser aplicado en la extraccin de mangostn-derivedfunctional pctico-polisacrido en la
polysaccharideResponse industria.
1. Introduccin Aparte de la celulosa, todas las paredes celulares de las plantas tienen una estructura pareci
tura que consiste en pectinas (tambin conocidos como pcticas-polisacridos)
(Lerouxel, Cavalier, Liepman, y Keegstra de 2006) Materiales derivados de plantas
La biomasa lignocelulsica es la mostabundantplant-deriva
.Estos son ampliamente utilizados como gelificantes, espesantes, estabilizantes,
materiales (egagriculturalresidues, cultivos herbceos, forestrywastes, maderas) que emulsionantes y grasas sustitutos, y se enumeran como Ingre-dients en numerosos
han sido dejados por los agroalimentarias indus-ses debido a las modernas prcticas productos alimenticios (Rolin, Nielsen, y Glahn, 1998; Willats, Knox, y Mikkelsen 2006).
agrcolas que tenan rendimiento de la produccin increasedfood tremendamente y cscaras de ctricos y manzana pomaceare actualmente el importante
paralelo
a esto es el
cantidad de residuos generados de esta cultivation.Thisoccurrence gran escala ha sourcesofpectin de fabricacin,
planteado una seria preocupacin en environmentalissues, as como las alternativas
whilstother potencialmente valiosas fuentes siguen siendo en gran medida unex-
para solucionar los problemas encuen-tered.Globally, parte de estos materiales de
plored.Recent trabajo publicado mostr que parkia speciosa podcould producir
desecho se han utilizado piensos y fertilizantes foranimal (Mamma, Kourtoglou, y
funcional pectico-polisacrido (Gan, Abdul Manaf, y Latif, 2010a, 2010b). Wong,
Christakopoulos,
Alkarkhi, y Easa (en prensa, 2010)Tambin se han extrado esta pcticas-polisacridos
de rindand durian encontrado thatthis pectico-polisacrido extrado podra Actas
biosorbente para eliminar pesada metalsuch como el plomo, el nquel, pectina
2008), Sin embargo, una gran parte de estos materiales est siendo andcopper.Water soluble extrado de una corteza durian Se analiz tambin encontr
depositedannually.In las ltimas dcadas, la biomasa lignocelulsica tiene que tena propiedades curativas de heridas (Hokputsa et al.,
attractedattention en proceso de Nery BioRe fi. Se sugiri que este sea el mayor
materialcould materia prima potencial para la produccin de bioetanol (Huang,
Ramaswamy, Tschirner, y Ramarao, 2008; Kim et al, 2010;. Kszos de 2006). Aparte de
bioetanol, productos naturales deben alsobe considered.Therefore, alimentos,
nutracuticos y pharmaceuticalindustries han entrado en el lugar donde las industrias se
buscar-cin para los nuevos ingredientes de fuentes naturales (Guerrero, Torres, y
2004). Otros efectos sobre la salud de las pectinas, tales como la reduccin de los
Nu~nez, 2008; Kasankala, Xue, Wei largo, Hong, y l, 2007; Levigne, Ralet, y Thibault,
niveles de glucosa en suero (cholesterolandYamada, 1996; Behall y Reiser, 1986),
2002; Masmoudi et al., 2008; Wu, Cui, Tang, y Gu,
Induccin de apoptosis en clulas de adenocarcinoma de colon humano (Olano-Martin,
Rimbach, Gibson, y Rastall de 2003) Y actividades contra el cncer (Yamada, Kiyohara,
y Matsumoto, 2003), Tambin fueron evidentes. Por lo tanto, esta bsqueda de
biomateriales derivados de las plantas, por tanto, ha stimulatedresearch inters en la
produccin de componentes funcionales de mayor desechos agrcolas infrautilizados,
tales como cscaras de frutas.
2007).
0144-8617 / $ - see front matter 2010 Elsevier Ltd. Todos los derechos
reservados.doi:10.1016 / j.carbpol.2010.08.025
C.-Y. Gan, AA / Latif Carbohydrate Polymers 83 (2011) 600-607 601
tabla 1
mono- y disacridos. El PPE se sec entonces a 50 C a una con-
dominio experimental de diseo de Box-Behnken (BBD).
peso constante. Los rendimientos de extraccin (Y), Objeto de este estudio,
werecalculated como sigue:
Variables xj niveles de los factores
este ltimo se utiliza para la infeccin de la piel y la herida treatments.It isalso 2.3.Determination de cido urnico
ampliamente utilizado para contra la inflamacin, diarrea, clera propiedades
medicinales anddysentery.Other de la corteza fueron enumerados por
cido urnico se determin por m-hydroxydiphenylmethod
Pedraza-Chaverri, Crdenas-Rodrguez, Orozco-Ibarra, y Prez-Rojas (2008). Hasta la (Blumenkrantz y Asboe-Hansen, 1973) .Samples (0,5 ml) weremixed a fondo con
fecha, varios estudios han demostrado thatmangosteen corteza antioxidante posedo, 3,0 mlof0.0125 tetraboratesolution de sodio M (en cido sulfrico concentrado)
antitumoral, antialrgico, antiin fl amacin, actividades antibacterianas y antivirales. En
esta estera-ter, xantonas fueron reclamados para ser responsable de estos en un bao de hielo. los
biologicalactivities (Suksamrarn et al., 2006; Pedraza-Chaverri et al., 2008) .Preliminary
mezclas se calentaron en un bao de ebullicin durante 5 min y posterior-
Estudio mostr que el extracto posea alta Antioxi-dante-pectico polysaccharide.Following
el descubrimiento de medicinalphytochemicals, la extraccin ofantioxidant pectico- cuencia se enfri en un bao de hielo se aadieron mezclas con baera.El
polysaccharidefrom cscara del mangostn tambin debe llevarse a cabo. Este material 0,05 ml de 0,15% metro-phenylphenol (en 0,5% de hidrxido de sodio solu-cin) .El
maysuggest posibles aplicaciones teraputicas que se relacionan con los mangos-
absorbancias a 520 nm se registr despus se obtuvo la curva 5 standingfor
adolescente en el futuro.
min.Standard usando cido galacturnico (0-100 g / ml).
actividad 2.4.Antioxidant
Los objetivos de este estudio fueron explorar la potentialof La actividad de eliminacin de radicales libres DPPH de cada muestra se
cscara del mangostn en la produccin de pectico-polisacrido y de Opti-mizar las determinado de acuerdo con Liu et al. (2009).EPP Se destil reconstitutedwith agua y
condiciones para la extraccin de pectico-polisacrido thatobtain alto rendimiento de la previamente diluido (20.Aliquots) de cada sam-PLE (0,1 ml) se aadieron a 3
extraccin, el contenido de cido urnico y antioxidantactivity (es decir,% DPPHsc / g de soluciones DPPH mlofmethanolic (0,1 mm). Decoloraciones se midieron a 517 nm
extracto) .Response metodologa de superficie (RSM) se aplic a fi cio y explotar un despus de incubationfor 30 min a 30 C en el DPPH% dark.The que fue barrido en (%
modelo matemtico rep-resentir la relacin entre las respuestas (ieextractionyield, el DPPH
contenido de cido urnico y% DPPHsc / g de extracto) y variables (: temperatura,
tiempo de extraccin y pH).
UN 100
cont- UN muestra
% DPPH (2)
Carolina del Sur / G de extracto =
UNcont W EPP
2. Materiales y mtodos
dnde UN contSe define como absorbancia del control,UN muestraestaba
definida como la absorbancia de la muestra (los extractos), mientras W EPP
2.1.Materials
se define como el peso de PPE.
3 3 2 3
2
Y= + (4)
o+ yoxyo+ iix yo ijxyoxj+
yo=1 yo=1 yo=1 j=1+1
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Tabla 2
BBD con las respuestas observadas y valores predichos para rendimiento de pctico-polisacrido (%), contenido de cido urnico (mg / g) y el extracto% DPPHsc / g.
un
correr niveles variables codificadas observado (Y Predicho (Y
1) o)
x x x Rendimiento (%) contenido de cido DPPHsc% / Rendimiento (%) contenido de cido DPPHsc% /
1(temperatura) 2(hora) 3(PH)
urnico (mg / g) gextract urnico (mg / g) gextract
un
La media de la determinacin por triplicado.
El anlisis 2.6.Statistical
3.1.1.Extraction rendimiento
Se puede observar que la variable con el mayor efecto sobre
12.1% .La a la 23.5 rendimiento mximo (23,5%) se encontr en condiciones de rendimiento de la extraccin era el trmino lineal de pH (x
experimentalson x 3) Seguido de cuadrtica
DO, x plazo del pH (x2 ) Y el trmino lineal de la temperatura de extraccin (x
1= 80 2= 3,0 h y x3= 4,0. Una amplia 3 1)
gama de contenidos urnico Tambin se encontr fue encontrado (5,5 a 20,6 mg / (Tabla 3) .Sin Embargo, trmino lineal del tiempo de extraccin (x
g) y themaximum punto (20,6 mg / g) en condiciones de x 2),cuadrtico
DO, trminos de temperatura y el tiempo de extraccin (x2 y x2 ) Y todo el
1= 65 1 2
x (trminos de interaccinx
2= 4 h y x3= 2.0.On otro lado, la propiedad antioxidante 1x2,x1x3y x2x3) Se encontraron insignificante
(% DPPHsc extracto / g) oscil desde 85,4 hasta 251,2% / valor ms alto g.El% (pag> 0,05). Resultados muestra en Tabla 3 sugerido que slo la temperatura de
DPPHsc / g de extracto (251,2% / g) se encontr en condiciones de extraccin changeof y el pH tuvieron efectos significativos (pag<0,05) en el rendimiento
de EPP. Tiempo de extraccin sin embargo, no dio ninguna fi cante sig-ni (pag> 0,05) la
x DO,x contribucin a los yield.This podra Debido a thetime requerido para la extraccin ha
1= 80 2= 4 h y x3= 3.These condiciones variaron dependiendo
en el required.Therefore respuesta, proceso ptimo conditionshould ser alcanzado su mximo pointafter 2 h de incubacin. El coeficiente de determinacin (R
investigado con el fin de obtener rendimiento de extraccin alta, contenido de
cido urnico y la actividad antioxidante.
2
) del
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Tabla 3
ANOVA para modelos de superficie de respuesta: se estima un modelo de regresin de la relacin entre las variables de respuesta (rendimiento, contenido de cido urnico y DPPHsc% / g) y variables independientes ( x
1,x2,x3).
Rendimiento (%)un
Modelo 233.79 9 25.98 13.24 0,0013
Cuadrtico 42.61 3 14.20 7.24 0.0150
x1 19.55 1 19.55 9.97 0,0160
x2 1.82 1 1.82 0.93 0.3675
x3 167,06 1 167,06 85.18 <0,0001
x2 9.68 1 9.68 4.93 0,0617
1
x2 1.05 1 1.05 0.53 0.4886
2
x2 28.81 1 28.81 14.69 0,0064
3
x 0.23 1 0.23 0.12 0.7398
1x2
x 2.51 1 2.51 1.28 0.2951
1x3
x 4.57 10-5 1 4.57 10-5 2.33 10-5 0.9963
2x3
Residual 13,73 7 1.96
Falta de ajuste 10.16 3 3.39 3.80 0.1149
Total 247.51 diecisis
contenido de cido urnico (mg / g)segundo
Modelo 349,25 3 116.42 36.90 <0,0001
Lineal 349,25 3 116.42 36.90 <0,0001
x1 74.42 1 74.42 23.59 0.0003
x2 3.19 1 3.19 1.01 0.3326
x3 271,63 1 271,63 86.10 <0,0001
Residual 41.01 13 3.15
La falta de fi cio 28.42 9 3.16 1.00 0.5429
Total 390,26 diecisis
% DPPHsc / g de extracto (% / g)do
Modelo 33,077.79 9 3675.31 103,77 <0,0001
Cuadrtico 9391.66 3 3130.55 88.39 <0,0001
x1 15,597.25 1 15,597.25 440,38 <0,0001
x2 1060.12 1 1060.12 29.93 0.0009
x3 5794.00 1 5794.00 163.59 <0,0001
x2 2949.36 1 2949.36 83.27 <0,0001
1
x2 1353.08 1 1353.08 38.20 0.0005
2
x2 4159.56 1 4159.56 117.44 <0,0001
3
x 1004.50 1 1004.50 28.36 0,0011
1x2
x 227,16 1 227,16 6.41 0,0391
1x3
x 3.10 1 3.10 0.09 0.7758
2x3
Residual 247.93 7 35.42
La falta de fi cio 21.40 3 7.13 0.13 0.9399
Total 33,325.72 diecisis
un
El coeficiente de determinacin (r2) Del modelo fue 0.9445.
segundo
El coeficiente de determinacin (r2) Del modelo fue 0,8949.
do
El coeficiente de determinacin (r2) Del modelo fue 0,9926.
modelos previstos en esta respuesta fue 0.9445 y pag-valor para Lackof Fit fue 0,1149. 3.2.Interpretation del modelo de superficie de respuesta y grfico de contorno
Estos valores daran una buena relacin fi cio de themathematic modelo de la ecuacin.
(5).
3.2.1.Extraction rendimiento
En tres dimensiones (3D) trama y grfico de contorno para la extraccin
contenido de cido 3.1.2.Uronic rendimiento como una funcin de la temperatura de extraccin y el pH se da enHigo.
1. Resultado dado en Tabla 3 muestra que el tiempo de incubacin fue de notsigni fi
trmino lineal de pH (x cativamente (pag > 0,05) contribuyeron a esta response.Therefore, 3DPlot se muestra
3) Mostr el mayor efecto (pag <0,0001) en
contenido de cido urnico seguido de tiempo temperatura de extraccin (x slo en el nivel cero del tiempo de extraccin (3 h) .Es canbe observ que el pH
1).
demostr un aumento exponencial enla respuesta cuando el pH aumenta (Higo. 1),
trmino lineal del tiempo de extraccin fue sin embargo insignificante (pag > 0,05) a Mientras que la extraccin de tem-peratura tiene un ligero impacto negativo (es decir,
esta contribution.The coeficiente de determinacin (R2) De los modelos thepredicted en el rendimiento disminuy con theincrement de temperatura) .Result tambin muestra
esta respuesta fue 0,8949 y pag-valor para Lackof Fit fue 0,5429. Estos valores daran que en el regionwhere pH alto (pH> 3,5) independientemente de la temperatura dara
una buena relacin fi cio de themathematic modelo de la ecuacin. (6). un alto rendimiento del PPE (17,6%). A medida que disminuye el pH, el rendimiento
del PPE decreasedto 14,7% a la temperatura de extraccin superior a 55,5
y los trminos de segundo grado de temperatura de extraccin (x2 ) Y pH (x tura dara un mayor rendimiento del PPE que van desde 15.4 a 16,1% .Segn Renard,
1, x 1 3, Crpeau, y Thibault (1995)y Wang, Pagn, y Shi (2002), Este hecho podra debido a la
x2 ) Dio el mayor efecto (pag <0,0001) seguido por trmino cuadrtico interrupcin inducida por pared celular y solubilizacin de materiales de la pared celular
3
en mayor pHcondition.
de tiempo de extraccin (x2 ), Trmino lineal del tiempo de extraccin (x
2 2),enterrar-
plazo de la accin x
1x 2y
x1x3.Sin Embargo, trmino de interaccin de x2x3
2
no fue signi fi cativa (pag> 0,05). El coeficiente de determinacin (R )
de los modelos previstos en esta respuesta fue 0,9926 y pagLa falta de -valuefor Fit fue
0,9399, lo que sugiere una excelente fi cio al modelo themathematical (Ec.(7)) .La Predijo
modelos parecan canreasonably representan los valores observados. Por lo tanto, las contenido de cido 3.2.2.Uronic
respuestas weresuf fi cientemente explicados por los modelos. Por otro lado, el aumento de la temperatura de extraccin y
baj la condicin de pH habra aumentado el cido urnico con-tienda de campaa del
PPE. Esto es contrario al resultado obtenido en la extraccin de
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Higo. 1.grfico tridimensional contorno parcela para rendimiento de extraccin como una funcin de la temperatura y el pH a perodo de incubacin de 3 h.
yield.This ocurrencia sugiri que el rendimiento total de EPP mightnot contribuy disminucin que van desde 11,3 hasta 15,0 mg / g. Esto podra ser explainedthatlower
solamente por pctico-polisacrido. superficie en tres dimensionalresponse para el pH y alta temperatura favorece la extraccin ofpectic-polisacrido travs de la
contenido de cido urnico de PPE como una temperatura funcin ofextraction y pH se interrupcin de los enlaces ster andhydrogen lazos entre EPP y la pared celular y el
da enHigo. 2. Una vez ms, incubationtime no fue significativamente (pag > 0,05) aumento de la tasa de di-fusin del PPE (Renard et al., 1995; Wang et al., 2002; Cho y
contribuyeron a esta respuesta (Tabla 3) Y por lo tanto la superficie de respuesta se Hwang, 2000; Masmoudi et al., 2008).
muestra slo atzero nivel de tiempo de extraccin (3 h).Figura 2 muestra que un alto
contenido uronicacid (16,2 mg / g) se podra conseguir en la regin de pH de
temperatura 3.1and de 80,0C o pH 2,0 y temperatura de 50,0 C.As pH aument con
oftemperature decremento, esta respuesta
Higo. 2.parcela y el contorno grfico tridimensional para el contenido de cido urnico como una funcin de la temperatura y el pH a perodo de incubacin de 3 h.
C.-Y. Gan, AA / Latif Carbohydrate Polymers 83 (2011) 600-607 605
Higo. 3.parcelas y grficos de contorno para% DPPHsc extracto / g como funcin de la temperatura y el tiempo a diferentes pH tridimensional: (a) pH 2; (B) pH 3; (C) pH 4.
606 C.-Y. Gan, AA / Latif Carbohydrate Polymers 83 (2011) 600-607
Tabla 4
Predicho y los valores experimentales en condiciones ptimas.
correr Las variables de proceso Los valores predichos Los valores experimentalesun
temperatura de la incubadora (DO) Extractiontim pH Rendimiento (%) acidcontent urnico DPPHsc% / Rendimiento (%) acidcontent urnico DPPHsc% /
e (h) (mg / g) gextract (mg / g) gextract
un
La media de la determinacin por triplicado.
actividad antioxidante al eliminar los radicales libres DPPH. Podra alsobe observado que referencias
el incremento de la temperatura de extraccin o el valor ofpH Decre-ment aumentara
la activity.Thisis antioxidante consistente con el resultado obtenido del contenido de
cido urnico (Seccin 3.2.2) .Extract De pH 3,0 o menor parece obtener ahigher Atkinson, CA, y Doney, AN (1992) .Optimum experimentaldesigns.Oxford:
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Con base en los hallazgos anteriores, un estudio de optimizacin fue per-
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extraccin con un alto rendimiento del PPE, el contenido de cido urnico y la actividad 47, 85-89.
antioxidante-idant.Tabla 4 muestra dos condiciones ptimas basadas oncombination de Kszos, LA (2006) .Bioenergy de swithgrass: La reduccin de los costes de produccin
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de 67,7C, timeof extraccin de 3,67 hy pH de 2. Estos condiciones ptimas produjeron
PPE de~El 12,1%, el contenido de cido urnico ~20,6 mg / g y% DPPHsc / g Lerouxel, O., Cavalier, D., Liepman, A., y Keegstra, M. (2006). La biosntesis de la planta
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pcticas-oligosacridos inducen apoptosis en las clulas adenocarci-noma de colon humano in vitro.
y antioxidantactivity.According de ANOVA, los efectos de Investigacin contra el cncer, 23(1A), 341-346.
temperatura de extraccin, tiempo de extraccin y el pH fueron signi fi Pedraza-Chaverri, J., Crdenas-Rodrguez, N., Orozco-Ibarra, M., y Prez-Rojas, JM
modelos cant.Quadratic fi tted a las respuestas de
rendimiento de la extraccin (2008) .Medicinal propiedades de mangostn (Garcinia mangostana).Alimentos andChemical
Toxicologa, 46, Desde 3.227 hasta 3.239.
y antioxidantactivity whereaslinearmodelwas fi tted touronicacid contentforpredicting
el Opti-malconditionswere responses.Two determinado: (1) la extraccin Renard, CMGC, Crpeau, MJ, y Thibault, JF (1995) .Structure de repetir
temperatureof80.0C, tiempo de extraccin of3.93 h y of2.45 pH, y (2) Temperatura de unidades en la columna vertebral rhamnogalacturonic de manzana, remolacha y ctricos
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extraccin de 67,7C, tiempo de extraccin de 3,67 h andpH of2.Both
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