UNIVERSIDAD PRIVADA

ANTONIO GUILLERMO URRELO

TESIS:

Determinacin de la actividad antifngica in vitro del

aceite de Satureja nubigena Pachachamcua frente a
Sporothrix schenckii.

INVESTIGADORAS:
Bach. Cinthya L. Snchez Soto.
Bach. Rosa D. Bustamante Bautista.
ASESORES:
Mg. Q.F. Jssica Nathalie Bardales Valdivia.
Q.F. Jaime Alexander Quijada Acua.
 INTRODUCCIN:

ESPOROTRICOSIS
Infeccin mictica de evolucin subaguda
o crnica, adquirida por inoculacin
traumtica o por inhalacin de conidios
de Sporothrix schenckii.
Se localiza principalmente en cara y en
extremidades torcicas y plvicas.
 INTRODUCCIN:

OMS
Ms del 80 % de la poblacin mundial
usa la medicina tradicional para cubrir sus
necesidades en la atencin primaria,
En nuestro pas existe alrededor de 80 mil
especies vegetales de las cuales solamente
2000 se vienen empleando con fines curativos.
Siendo necesario evaluar las propiedades
medicinales de estas plantas.
 INTRODUCCIN:

POR TALES MOTIVOS

Se decidi determinar el efecto antifngico

del aceite esencial de las hojas de Satureja
nubigena Pachachamcua frente a
Sporothrix schenckii para contribuir con una
fuente de informacin acerca de su actividad
y a la disminucin de la incidencia de este
problema que afecta a un alto
porcentaje de la poblacin.
 OBJETIVOS:
GENERAL:

Determinar la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de las hojas de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

ESPECFICOS:

Extraer el aceite esencial de las hojas de Satureja nubigena Pachachamcua.

Comparar los resultados obtenidos de la actividad antifngica in vitro de las diferentes
concentraciones del aceite esencial de las hojas de Satureja nubigena Pachachamcua apoyados
con una prueba estadstica.
Comparar los resultados obtenidos de la actividad antifngica in vitro de las diferentes
concentraciones del aceite esencial de las hojas de Satureja nubigena Pachachamcua frente a
los grupos controles apoyados con una prueba estadstica.
Determinar la concentracin mnima inhibitoria del aceite esencial de las hojas de Satureja
nubigena Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.
 MARCO TERICO:
ESPOROTRICOSIS

EPIDEMIOLOGA
Esta micosis se conoce como cosmopolita
debido a su amplia distribucin.

Pases endmicos de Amrica:

Brasil, Mxico, Colombia, Per, Uruguay,
Venezuela, Costa Rica, Guatemala y los Estados
Unidos de Norteamrica.
 MARCO TERICO:
ESPOROTRICOSIS

ETIOLOGA
El agente causal es Sporothrix schenckii,
hongo dimrfico que vive como saprfito del
suelo, materia orgnica, vegetales y otros
sustratos.
Se adquiere principalmente por
inoculacin traumtica de conidios y
rara vez penetra por inhalacin.
MARCO TERICO:
ESPOROTRICOSIS

ETIOLOGA
Sporothrix schenckii.
Clasificacin taxonmica:
Reino: FUNGI.
Phylum: ASCOMYCOTA.
Clase: EUASCOMYCETES.
Orden: OPHIOSTOMATALES.
Familia: OPHIOSTOMATACEAE.
Gnero: Sporothrix.
Especie: S. schenckii.
 MARCO TERICO:
ESPOROTRICOSIS

ETIOLOGA
Sporothrix schenckii.

Fase filamentosa:
Crece a temperaturas inferiores a 37C.
Presenta colonias de crecimiento lento (3-5 das).
Inicialmente claras y hmedas, que
posteriormente se convierten en colonias
duras y arrugadas de color marrn o negro en
su totalidad o por zonas.
 MARCO TERICO:
ESPOROTRICOSIS

ETIOLOGA
Sporothrix schenckii.

Fase levaduriforme:

Crece a 37C en medios enriquecidos y en los

tejidos parasitados.

La colonia tiene aspecto cremoso y brillante

que se torna de color gris o crema.
 MARCO TERICO:
ESPOROTRICOSIS

CARACTERSTICAS CLNICAS
Puede causar mltiples sndromes, el ms
frecuente es la forma cutnea, que se
caracteriza por la aparicin de ndulos
ulcerativos o verrucosos que afectan a piel,
tejido subcutneo y sistema linftico
adyacente.
 MARCO TERICO:
Satureja nubigena Pachachamcua
CLASIFICACIN TAXONMICA:

Reino: PLANTAE.
Filo: ANGIOSPERMAE.
Clase: MAGNOLIOPSIDA.
Orden: LAMIALES.
Familia: LAMIACEAE.
Gnero: Satureja.
Especie: S. nubigena.
Autor: (Kunth) Briq.
Altitud: 3000 y 4000 msnm.
Regin: Sierra.
 MARCO TERICO:
Satureja nubigena Pachachamcua
CARACTERSTICAS MORFOLGICAS:
Planta herbcea, postrada, pequea, de 10 25 cm
de largo y aromtica, presenta tallos delgados y
radicantes, flores blancas y hojas pequeas.

ORIGEN Y DISTRIBUCIN:
Originaria del Per; se encuentra en la parte
alta de los andes, entre los 3000 y 4000 msnm;
crece entre pajonales, en espacios abiertos y
caminos abandonados.
UTILIDAD MDICA:
Usado contra el soroche o mal de atura y
para contrarrestar el frio y no es toxica.
MTODO DE INVESTIGACIN.
DEFINICIN DE LA MUESTRA:
Satureja nubigena Pachachamcua
Se trabaj con 15 kg de la especie la cual fue
obtenida del distrito Jos Sabogal, provincia de
San Marcos, departamento de Cajamarca.

Sporothrix schenckii
Se trabaj con cepas aisladas en el Laboratorio
de Referencia de Salud Pblica de la DIRESA
Cajamarca, de pacientes contaminados con el
hongo.
 MTODO DE INVESTIGACIN.
EXTRACCIN DEL ACEITE ESENCIAL:
La extraccin del aceite esencial e las hojas se
realizo apoyadas con el equipo llamado alambique
destilador.
Transcurrido el tiempo de la
extraccin, agregamos sulfato de
sodio para atrapar los restos de
agua. Posteriormente se midi y se
recogi el aceite esencial en un
frasco de color mbar con tapa,
almacenndolo en refrigeracin
hasta su utilizacin para evitar
reacciones oxidativas que pudieran
alterar su composicin.
MTODO DE INVESTIGACIN:

DILUCIN EN AGAR:
Esta prueba se basa en la inhibicin del crecimiento fngico, mediante la dilucin de
la sustancias activas (aceite esencial de las hojas de Satureja nubigena
pachachamcua) en el agar, y posteriormente se evidencia por la ausencia de
crecimiento en las placas.
 DILUCIN EN AGAR:
ELABORACIN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO
Aceite esencial de las hojas de Pachachamcua/Agar Sabouraud

LUEGO SE PROCEDI A SEMBRAR E INCUBAR:

CRECIMIENTO LEVADURIFORME CRECIMIENTO FILAMENTOSO

A 37C por 48 horas. A 25C por 15 das.
 RESULTADOS
FASE LEVADURIFORME (RESULTADOS OBTENIDOS A LAS 48 H)

Leyenda: (-) No crecimiento. (+) Crecimiento.

Grfico N 01: Resultados obtenidos de todos los grupos de la forma de

crecimiento levaduriforme.
 RESULTADOS
FASE FILAMENTOSA (RESULTADOS OBTENIDOS A LOS 15 DAS)

Leyenda: (-) No crecimiento. (+) Crecimiento.

Grfico N 02: Resultados obtenidos de todos los grupos de la forma de

crecimiento filamentosa.
 RESULTADOS
PRUEBA ESTADISTICA DE MANN - WHITNEY

FASES:
LEVADURIFORME Y FILAMENTOSA

EVALUACIN DE MUESTRAS INDEPENDIENTES VALOR DE p

GRUPO PROBLEMA (1-5) VS GRUPO PROBLEMA (1-5) P = 1,000

GRUPO CONTROL VS GRUPO PROBLEMA (1-5) P = 0,025

p de 0,05 = existe diferencia significativa

p de 0,05 = no existe diferencia significativa.
 DISCUSIN
No se ha podido encontrar la suficiente informacin de los aceites esenciales de
Satureja nubigena para justificar el efecto obtenido en el presente trabajo de
investigacin, pero posiblemente contenga algunos de los aceites esenciales
presentes en las diversas Saturejas estudiadas.

Algunos de los principales

fitoconstituyentes de la familia
Satureja son el timol y el carvacrol de
los cuales podemos mencionar que:

incrementan la permeabilidad de la membrana citoplasmtica dejando que filtren los

constituyentes qumicos que son esenciales para el metabolismo, tales como iones,
ATP, cidos nucleicos y aminocidos esenciales ocasionando la destruccin del hongo.
 CONCLUSIONES:
1. Se determin la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de las hojas de
Satureja nubigena Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii, resultado que se
expres en los grupos problema de las dos fases de crecimiento, en los cuales se
obtuvo resultado negativo para crecimiento.
 CONCLUSIONES:
2. Se extrajo el aceite esencial de las hojas de Satureja nubigena Pachachamcua
apoyados con el equipo llamado alambique destilador con el mtodo de arrastre de
vapor.
 CONCLUSIONES:
3. Se compar los resultados obtenidos de la actividad antifngica in vitro de las
diferentes concentraciones del aceite esencial de las hojas de Satureja nubigena
Pachachamcua apoyados con la prueba estadstica MANN-WHITNEY la cual arroj
como resultados tanto para las comparaciones de la fase levaduriforme as como
para la filamentosa un valor de p de 1,000 valor mayor a 0,05 lo que indica que no
existe diferencia significativa en las diferentes comparaciones de los grupos
problema concluyendo que el aceite esencial de Satureja nubigena Pachachamcua
presenta actividad antifngica tanto para la fase levaduriforme como para la fase
filamentosa en todas las concentraciones trabajadas.

Prueba estadstica MANN-WHITNEY

vs P = 1,000
p de 0,05 = no existe diferencia significativa.
 CONCLUSIONES:
4. Se compar los resultados obtenidos de las diferentes concentraciones del aceite
esencial de las hojas de Satureja nubigena Pachachamcua frente a los grupos
controles apoyados con la prueba estadstica MANN-WHITNEY la cual arroj como
resultados tanto para las comparaciones de la fase levaduriforme as como para la
filamentosa un valor de p de 0,025 valor menor a 0,05 lo que indica que existe
diferencia significativa en las diferentes comparaciones de los grupos problema
con los grupos control debido a que en los grupos control se present crecimiento en
cada una de las fases concluyendo que el aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua presenta actividad antifngica tanto para la fase levaduriforme
como para la fase filamentosa en todas las concentraciones trabajadas.

Prueba estadstica MANN-WHITNEY

vs P = 0,025
p de 0,05 = existe diferencia significativa
 CONCLUSIONES:
5. Se determin la concentracin mnima inhibitoria del aceite esencial de las hojas de
Satureja nubigena Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii la cual consisti en
la menor concentracin utilizada 5L/mL de agar tanto para la fase filamentosa
como para la levaduriforme debido a que en todos los grupos problema se present la
actividad antifngica.

Fase levaduriforme Fase filamentosa

vs vs

(+) (-) (+) (-)

Crecimiento No crecimiento. Crecimiento No crecimiento.
 RECOMENDACIONES:
Realizar estudios in vivo, ya que Sporothrix schenckii muestra una marcada
susceptibilidad in vitro frente al aceite de las hojas de Satureja nubigena
Pachachamcua, y en su uso rutinario por parte de la poblacin podra estar
ocurriendo lo mismo.
El aceite esencial de las hojas de Satureja nubigena Pachachamcua, posee una
importante actividad antifngica; sin embargo sugerimos que su uso se limite a
pacientes con diagnstico definitivo y prescrito por un profesional de salud.
Hacer de conocimiento los resultados obtenidos en el presente trabajo de
investigacin a las autoridades Regionales de Salud de Cajamarca, para involucrar
en las medidas de prevencin a tomar, previos estudios.
En base a estos resultados profundizar otras investigaciones, para determinar
factores de asociacin, respecto a otro tipo de infecciones micticas.
Investigar nuevas formas de tratamiento, para esporotricosis cutnea, en base a los
resultados obtenidos en la presente investigacin.
Gracias.
GRACIAS.