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Tierra Tropical (2013) 9 (2): 229-236

EXTRACCIN DE QUITINA Y SU DERIVADO A PARTIR DEL


EXOESQUELETO DE CAMARN Y SU PRUEBA EN EL CULTIVO DE
PIA (Ananas comosus)
L. Kaiber y B.K. Singh1
Universidad EARTH
Las Mercedes de Gucimo, Limn, Costa Rica
Recibido 29 de noviembre 2012. Aceptado 30 de septiembre 2013.

RESUMEN
La investigacin se realiz en la Universidad EARTH y se bas en buscar alternativas de
fertilizantes y productos para la sanidad del cultivo de pia. Se utilizaron los residuos de
camarones para la elaboracin de los productos. Se hizo la extraccin de la quitina y sus
derivados en laboratorio para seguir con la elaboracin de los productos a ser evaluados. Los
productos evaluados fueron: cscara de camarn (T1), quitosn (T2) y metablitos microbianos
(SINMAX Silver) (T3). Se realizaron mediciones de biomasa, contenido de nutrientes y salud de
plantas. Los resultados de biomasa mostraron que T2 posee diferencia estadsticamente
significativa (p<0.05), en relacin al T1 y T3. La variable de clorofila present diferencia
significativas (p<0.05) en el T1 y T2 con respecto al T3; mientras que los anlisis foliares
demostraron que todos los tratamientos presentaban niveles ptimos a alto de N, P y K.
Palabras clave: camarn, pia, producto, quitina, quitosn.

ABSTRACT
The research which was conducted at EARTH University considered fertilizer alternatives and
products for vigor for a pineapple crop. For the elaboration of the products, chitin and its
derivatives were extracted from the exoskeleton of shrimp. The products evaluated were: shrimp
exoskeleton (T1), chitosan (T2), and microbial metabolites (SINMAX Silver) (T3). The biomass,
nutritional content, and vigor of the plants were determined. The biomass production results
demonstrated that T2 has a statistically significant difference (p<0.05), compared to T1 and T3.
The chlorophyll content presented a significant difference (p<0.05) in T1 and T2 compared to
T3. The foliar analysis demonstrated that all treatments presented high levels of N, P, and K.
Key words: shrimp, pineapple, product, chitin, chitosan.

INTRODUCCIN
La produccin acucola mundial de crustceos en 2010 represent un 5.7 millones de toneladas;
eso representa un 9.6 % de la produccin mundial. La acuicultura constituye uno de los factores
de mayor importancia para pases como Ecuador a nivel de Latinoamrica, y China, Taiwn,
Indonesia y Tailandia en el continente asitico, debido al amplio litoral que poseen estos pases
(Mar Viva, 2010).
El cultivo de crustceos es todava una actividad poco desarrollada a nivel de Latinoamrica, y la
gran mayora de proyectos de camarn se desarrollan en aguas salobres. Segn datos del Instituto

1
Contacto: B.K. Singh (bksingh@earth.ac.cr)

ISSN: 1659-2751
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Costarricense de Pesca y Acuicultura (INCOPESCA), existen en Costa Rica 1500 ha dedicadas a


la produccin de camarn. La industria camaronera de Costa Rica est caracterizada por
medianos y pequeos productores. Con un total de 116 productores de camarones en Costa Rica,
siendo 65 productores de la zona de Guanacaste, que para el ao de 2007 produjeron 3649 Mg de
camarn, y 51 productores en Puntarenas que alcanzaran una produccin de 1625 Mg para el
mismo ao. A nivel centroamericano, Costa Rica representa un 20.4 % de la produccin, siendo
el primer productor Guatemala, seguido de Nicaragua (Otrola7, 2008).
Los rendimientos de canal de los crustceos son relativamente bajos, apenas un 30 % del peso
vivo de las especies es aprovechable para el consumo humano, lo dems est constituido de
exoesqueleto, vsceras, que son considerados como contaminantes ambientales o residuos. Sin
embargo, estos poseen algunos compuestos de valor comercial que no son aprovechados, que
pueden ser utilizados para la obtencin de quitina y su derivado funcional, el quitosn (Zuiga,
1987).
La quitina es una sustancia que forma parte de las estructuras celulares de hongos, bacterias,
insectos, arcnidos, crustceos, nematodos y de organismos invertebrados, como anlidos,
moluscos, cefalpodos y hemicordados, (Angarita et al., 2001). La quitina tiene una estructura
muy parecida a la celulosa, la diferencia es que en el carbono 2 contiene un grupo hidroxilo en la
celulosa y un grupo acetamida en la quitina. Otra caracterstica importante del polmero es su
elevada masa molecular, adems de una estructura porosa que le permite absorber mucha agua
(Zapata, 2008).
Algunas investigaciones demostraron que la aplicacin de quitosn, asperjado foliarmente o en
tratamiento radicular, reduce significativamente la infeccin creando barreras fsicas (Caprile,
2000). El quitosn es un inductor de doble propsito, capaz de inducir respuestas de defensa y de
poseer actividades antifngicas directas. Adems, posee actividad antibacteriana y antifngica,
es quelante de metales de transicin en efluentes residuales y tiene aplicacin cosmtica y
mdica, ya que es un material biocompatible.
La aplicabilidad en la agricultura ha sido incrementada en los ltimos aos, debido a los estudios
realizados sobre las propiedades de estos polisacridos. La quitina y sus derivados actan
biolgicamente sobre las plantas y los microorganismos que interaccionan con ellos. Se
identifican cuatro vertientes de investigacin fundamentales en la aplicacin de la quitina en la
agricultura: 1) proteccin vegetal contra plagas y enfermedades antes y despus de la cosecha;
2) potenciacin de la accin de microorganismos antagonistas y controles biolgicos;
3) potenciacin de la relaciones simbiticas beneficiosas plantas-microorganismos; y
4) regulacin del crecimiento y desarrollo de las plantas (Ramrez, 2000).
El propsito de esta investigacin fue buscar alternativas de fertilizacin y productos para
sanidad del cultivo de pia. Fueron desarrollados productos que utilizaron como materia prima
base los desechos de camarones que se generan por las empresas pesqueras en Costa Rica. Con
el aprovechamiento de los desechos generados se establece la oportunidad de desarrollar nuevos
productos con base en el compuesto abundante, en este caso la quitina y quitosn (Escorcia,
2009), y a la vez encontrar soluciones inteligentes para la problemtica ambiental generadas por
la actividad. Ambos compuestos encontrados en los desechos son alternativas contra el ataque de
hongos, bacterias y como un medio de nutricin para la planta.
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METODOLOGA
Esta investigacin se realiz en el Laboratorio Experimental Campestre de Suelos y Aguas
(LECASA) y en el Laboratorio de Suelos y Aguas (LSA) de la Universidad EARTH, ubicada en
las Mercedes de Gucimo, Limn, Costa Rica. La temperatura promedio es de 25 C, una
precipitacin promedio anual de 3500 mm y una altitud de 78 msnm (Universidad EARTH,
2012). El cantn de Gucimo se caracteriza por la expansin de grandes fincas productoras de
banano y pia en el pas.
La materia prima principal utilizada en la investigacin fueron las cscaras de camarn, las
cuales recibieron un lavado previo al secado. Posteriormente se realiz un secado bajo
condiciones de invernadero que finaliz en 5 das. Una vez el material seco se hizo la molienda
del mismo en laboratorio, utilizando un molino con alta capacidad de trituracin. Seguidamente,
con la materia prima en condiciones de uso, se realiz el tratamiento qumico para la obtencin
de los polmeros. Primero se llev a cabo el proceso de desproteinizacin, con 2M KOH a una
temperatura de 100 C por una hora, con una relacin de KOH y cscara de camarn de 11:1.
Una vez transcurrido la hora, se lav la mezcla con agua destilada y agreg 10 % HNO3 y 0.1 %
goma agar y se dej en agitacin por 2 h. Al finalizar estos tratamientos, se regul en pH a 4.
El experimento se bas en la elaboracin de dos productos, los cuales posteriormente se
aplicaron como tratamientos para el cultivo de pia. El primer tratamiento (T1) consisti en la
utilizacin de cscara de camarn (7 %) ms goma guar (0,1 %). Se elev el pH con KOH y
posteriormente se baj el pH a 4 con HNO3. La formulacin del tratamiento 2 (T2) consisti en
la utilizacin del quitosn al 5 %, que se obtuvo de la extraccin de las cscaras de camarn. El
tratamiento 3 (T3) se bas en una formulacin ya existente en el mercado, el SINMAX Silver al
10 %, es decir, en 1 L de producto en 10 L de agua.
Se realiz un experimento completamente al azar, con tres tratamientos y con cuatro repeticiones
por tratamiento, con un total de 12 parcelas. El total del rea utilizado fue de 100.8 m2, sembrada
de pia MD2 en LECASA. Los muestreos de suelos se realizaron al inicio del proyecto.
Seguidamente, se realizaron tres muestreos de suelos a lo largo del proyecto, que comprendieron
dos submuestras por parcela, y por cada tratamiento ocho submuestras, formando una mezcla
representativa y homognea por tratamiento. Las muestras se tomaron utilizando un barreno en
puntos al azar en las parcelas de cada tratamiento.
En el transcurso del proyecto tambin se realizaron tres muestreos foliares que abarcaban cuatro
muestras del tejido foliar de las plantas por tratamiento. Para las muestras de suelos se efectu un
anlisis qumico regular: pH en agua, Ca, Mg, P, K, Fe, Cu, Zn y Mn extrable con Olsen
modificado. De la misma forma para las muestras foliares K, Ca, Mg, P, N, Fe, Cu, Zn y Mn.
En los tres tratamientos se realiz la medicin de biomasa con el propsito de evaluar la biomasa
foliar hmeda y seca de las plantas de pia. Se realizaron tres muestreos en el transcurso del
experimento: el primer a las 10 semanas, el segundo a las 14 semanas y el tercero a las
20 semanas de sembrada. Se tom en cada muestreo una planta por cada parcela por un total de
cuatro plantas por tratamiento.
Los datos se tomaron al azar en todos los tratamientos. Los resultados obtenidos durante el
desarrollo del proyecto fueron analizados mediante un anlisis de varianza (ANOVA) (Di Rienzo
et al., 2011), con las correlaciones generadas por las tres mediciones en el tiempo.
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RESULTADOS Y DISCUSIN
Para las medias de biomasa foliar fresco y seca de los tratamientos evaluados, exista una
diferencia estadsticamente significativa (p<0.05) del T2 con relacin a los dems tratamientos
(Figura 1). Sin embargo, no existieron diferencias significativas entre el T1 y T3 (Figura 1). El
ndice de clorofila de las hojas se correlacion positivamente con los rendimientos del cultivo.
En ese anlisis existi una diferencia significativa (p<0.05) entre el T2 y el T3, representando el
T2 el mayor ndice de clorofila. El T1 adems represent una diferencia estadsticamente
significativa (p<0.05) con relacin al T3 (Figura 1).
1600 350

1400 Fresca b
c 300
Seca b

ndice de clorofila
1200
Biomasa (g/planta)

a 250
1000 a a
200
800
150
600
100
400 b

200 a a 50

0 0
T1 T2 T3 T1 T2 T3
Tratamiento

Figura 1. Medias en biomasa foliar (fresca y seca) (izquierda) y ndice de clorofila a las
20 semanas despus de la siembra (derecha) (por cada variable, letras distintas indican
diferencias estadsticamente significativas, p0.05).

El ndice de clorofila de las hojas tambin se correlacion positivamente con el N en las plantas.
Esta relacin es atribuida a que del 50 % al 70 % del N de las hojas, integrantes de enzimas que
estn asociadas a los cloroplastos (Argenta, 2001). El T2 obtuvo las medias ms altas en relacin
a la absorcin de nutrientes de la planta, sin embargo existe apenas una diferencia significativa
(p<0.05) del N del T2 en relacin al T1 y T3 (Figura 2). Sin embargo, esta diferencia excede el
en rango ptimo del cultivo de 1.5 % a 2.0 % (Molina, 2007). A pesar de no haber una diferencia
significativa entre el T1 y T3, el T1 obtuvo una media mayor (Figura 2) y ambos se encuentran
en rangos ptimos (Molina, 2007). Con el P y K no existi diferencia estadsticamente
significativa (p<0.05) entre los tratamientos (Figura 2). Las concentraciones de P para todos los
tratamientos excedieron el rango ptimo para pia, 0.1 % a 0.12 % mientras las concentraciones
de K para todos los tratamientos se encontraron en el rango ptimo, 2.0 % a 4.0 % (Molina,
2007). En el anlisis foliar de Ca, encontr una diferencia estadsticamente significativa (p<0.05)
entre T3 y los otros dos tratamientos (Figura 2). Sin embargo, las concentraciones de Ca, as
como de Mg, se encontraron en los rangos ptimos, 0.3 % a 0.5 % y 0.2 % a 0.4 %,
respectivamente (Molina, 2007).
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3.0 a
a T1
a
T2
2.5 b
Concentracin foliar (%)
T3

a
2.0
a

1.5

1.0

b
0.5 a a a a a
a a a
0.0
N P K Ca Mg
Macronutrientes
Figura 2. Concentracin de macronutrientes de cada tratamiento en las muestras foliares
evaluadas (por cada macronutriente, letras distintas indican diferencias
estadsticamente significativas, p0.05).

Los micronutrientes de Cu y Zn tuvieron diferencias estadsticamente significativas (p<0.05)


entre tratamientos con siempre las plantas con T2 con la mayor concentracin de cada
micronutriente (Figura 3). Sin embargo, ninguno de los micronutrientes encontraron en
concentraciones ptimas para el cultivo de pia; con Fe y Mn en exceso y Cu y Zn en
concentraciones bajas (Molina, 2007).
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1000
a
800 T1
a a T2 a

Concentracin foliar (mg/kg)


600 a
T3
a
400

200

20
b
15 c a a

10 b a

0
Fe Cu Zn Mn
Micronutrientes
Figura 2. Concentracin de micronutrientes de cada tratamiento en las muestras foliares
evaluadas (por cada micronutriente, letras distintas indican diferencias
estadsticamente significativas, p0.05).

El anlisis de suelos es una herramienta que evala nutrientes para evitar problemas de balance.
Para lograr altos rendimientos y calidad, es importante el equilibrio de estos nutrientes en el
suelo. Un desbalance puede causar deficiencias y toxicidades, provocando estrs en los cultivos;
por eso, es importante que los suelos tengan las concentraciones de los nutrientes en los rangos
ptimos para evitar un efecto negativo en la productividad del cultivo.
En todos los tratamientos el pH del suelo se mantuvo bajo en relacin al muestra inicial
(Cuadro 1). Tambin, con todos los tratamientos, debido a la aplicacin de productos cidos, el
suelo se categoriz en un rango de pH bajo (Molina, 2007). Con la excepcin de K y P en el
suelo con T1 y Zn en el suelo con T2, los niveles de K, Ca, Mg, P y Zn en el suelo se
encontraron bajos de rango ptimo desde el inicio hasta al fin del experimento (Cuadro 1). Por
otro lado, los niveles de Fe y Mn fueron en exceso de los rangos ptimos. Solamente el Cu se
encontr en el rango ptimo en el suelo (Cuadro 1).

Cuadro 1. Anlisis de suelos por tratamientos evaluados y rangos ptimos para la pia.
pH K Ca Mg P Fe Cu Zn Mn
-------- cmol+/kg -------- ------------------- mg/kg -------------------
Inicial 4.73 0.22 4.91 1.89 7.7 187 9.2 2.4 77
T1 4.56 0.78 4.51 1.59 14.7 208 9.0 2.7 98
T2 4.55 0.17 4.32 1.59 9.0 198 9.7 3.0 88
T3 4.52 0.20 4.35 1.63 9.4 203 10.0 2.7 92
ptimo 6 a 7 0.5 a 0.8 6 a 15 3a6 20 a 50 10 a 50 1 a 20 3 a 10 10 a 50
Molina (2007).
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CONCLUSIONES
El T2 mostr resultados con diferencias estadsticamente significativas en la produccin de
biomasa foliar fresca y seca. Eso implica un mayor tamao de las plantas en comparacin a los
otros tratamientos. Siendo as, tambin se ve reflejado en el ndice de clorofila que el T2 posee
diferencia en relacin a los dems tratamientos. Sin embargo, el T1 tambin mostr diferencia
con relacin al T3.
De acuerdo a los niveles nutricionales de las plantas, se demostr que hubo una diferencia
estadsticamente significativa del N en el T2 en relacin al T1 y T3. Sin embargo, el T1 tambin
se encuentra en rangos ptimos para el cultivo de pia. Con relacin a P y K no existi diferencia
entre los tratamientos. No obstante, el Ca y el Zn presentaron diferencia estadsticamente
significativa con relacin al T3.
La aplicacin de los productos en el suelo result en una acidez moderada, debido al bajo pH de
los productos aplicados. En el transcurso de las evaluaciones, el Cu se mantuvo en sus niveles
ptimos. Los nicos elementos que se mantuvieron en rangos altos fueron Fe y el Mn.
La elaboracin de nuevos productos que mejoran la salud de las plantas, provenientes de fuentes
alternativas pueden generar resultados positivos e importantes para el sector agrcola, de los que
se destacan: la reduccin de productos qumicos que causan actualmente uno de los principales
problemas nacionales, productos con otros elementos esenciales para el crecimiento de la planta
sin la necesidad de agregar otras fuentes y la utilizacin de los desechos que provocara un
impacto negativo al medio ambiente.

AGRADECIMIENTOS
Este estudio se pudo realizar gracias al financiamiento brindado por la Administracin
Acadmica y la Unidad de Investigacin de la Universidad EARTH, Gucimo, Costa Rica.

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