Objetivo general

Inducir la separacin y determinar cuantitativamente las protenas presentes

en el suero combinando dos colorimtricos con los reactivos verde bromocresol
y Biuret
Objetivos Especficos
1. Diferenciar plasma y suero sanguneo con relacin a su contenido de
protenas plasmticas.
El plasma es el componente lquido de la sangre y contiene al suero junto
con elementos coagulantes, cuando los ltimos son eliminados, el lquido
restante es el suero. Con frecuencia se confunde estos dos trminos por tanto
se expresaran algunas de sus diferencias.

Junto con los glbulos rojos, los glbulos blancos y las plaquetas, el plasma
es uno de los componentes de la sangre, la parte lquida que supone el
55% de ella.
Por el plasma circula una sustancia llamada fibringeno, que cuenta con la
propiedad de convertirse en fibrina cuando se produce la rotura de un vaso
y las plaquetas actan para formar un tapn plaquetario. Es entonces
cuando esta sustancia y sus propiedades coagulantes se convierten en
fibrina, que ya es insoluble. Llegados a este punto, el plasma sin fibringeno
pasa a ser suero.
El plasma es el "lquido circulante" y para operar con l, se extrae la parte
soluble que se transforma en insoluble (el fibringeno que se transforma en
fibrina) y se obtiene un lquido similar al de la sangre: el suero.
El suero sanguneo es principalmente agua, de un color amarillento puesto
que se disuelve con protenas, hormonas, minerales y dixido de carbono,
as como tambin es una fuente muy importante de electrolitos.
En resumen, el plasma contiene suero y factores de coagulacin; una vez
se eliminan los coagulantes como la fibrina, este lquido se convierte en
suero.
Este artculo es meramente informativo, en unComo.com no tenemos
facultad para recetar ningn tratamiento mdico ni realizar ningn tipo de
diagnstico. Te invitamos a acudir a un mdico en el caso de presentar
cualquier tipo de condicin o malestar.

2. Separar las protenas totales del suero humano

precipitacin salina.

por el mtodo de

El mtodo de precipitacin salina de las protenas es una tcnica en donde

se logra la precipitacin de una fraccin de protenas mediante el aumento de
la fuerza inica del medio. Grandes cantidades de una sal agregada a una

solucin de protenas, disminuye la interaccin protenaH2O porque quita la

capa de solvatacin, predominando la interaccin protena-protena y
generando la precipitacin de las mismas. La concentracin salina a la que se
produce la precipitacin no es igual para todas las protenas, lo que permite
usar sta propiedad para la separacin y purificacin de protenas particulares
a partir de mezclas complejas. Comnmente se usa sulfato de amonio
(NH4)2SO4 para tal fin, a causa de su gran solubilidad (760 g de sulfato de
amonio/1000 ml. de agua a una temperatura de 20C) y porque el in sulfato
divalente permite alcanzar altas fuerzas inicas. La adicin gradual de sta sal
permite el fraccionamiento de una mezcla de protenas, las cuales son
precipitadas pero no desnaturalizadas.
Las protenas que se encuentran en el suero humano y los rangos de los
valores normales de las mismas son:
Protena total: 6.4 a 8.3 gramos por decilitro (g/dL)
Albmina: 3.5 a 5.0 g/dL
Alfa-1 globulina: 0.1 a 0.3 g/dL
Alfa-2 globulina: 0.6 a 1.0 g/dL
Beta globulina: 0.7 a 1.2 g/dL
Gammaglobulina: 0.7 a 1.6 g/dL
3. Separar selectivamente la albmina con el reactivo Verde de Bromocresol
(BCG)
El verde de bromocresol es un indicador orgnico para valoracin cidobase.
Su intervalo de transicin de pH es aproximadamente entre 3.85.4,
virando de amarillo a azul-verdoso en el rango especificado.1
En solucin acuosa, ioniza para dar la forma monoaninico (amarillo),
que desprotona a pH elevado para dar forma dianinica (azul), que se
estabiliza por resonancia.
4. Construir una grfica de tendencia para protenas totales con el reactivo
Biuret.
Las lneas de tendencia se usan para mostrar grficamente las tendencias
de los datos y analizar los problemas de prediccin. Este anlisis tambin se
denomina anlisis de regresin. Mediante el uso del anlisis de regresin,
puede representarse una lnea de tendencia en un grfico ms all de los datos
reales para predecir los valores futuros.
El Biuret es un reactivo que detecta la presencia de protenas, pptidos
cortos y otros compuestos con dos o ms enlaces peptdicos en sustancias de

composicin desconocida. Est hecho de hidrxido potsico (KOH) y sulfato

cprico (CuSO4), junto con tartrato de sodio y potasio (KNaC4O64H2O). El
reactivo, de color azul, cambia a violeta en presencia de protenas, y vira a rosa
cuando se combina con polipptidos de cadena corta. El Hidrxido de Potasio
no participa en la reaccin, pero proporciona el medio alcalino necesario para
que tenga lugar.
Este es un mtodo colorimtrico que permite determinar la concentracin de
protenas de una muestra espectrofotomtricamente a una longitud de onda de
640nm (para detectar el in Cu2+).
El examen de protena total mide la cantidad total de dos clases de
protenas encontradas en la porcin lquida de la sangre: albmina y globulina.
Las protenas son partes importantes de todas las clulas y tejidos. La
albmina ayuda a impedir que se escape lquido fuera de los vasos
sanguneos.
5. Construir una grafica de tendencia para la albmina con el reactivo verde
bromocredol:
Es el 50% del total de protenas plasmticas. Se sintetiza en hgado y
permanece en circulacin durante 19 dias, hasta que se metaboliza en los
tejidos donde es fuente de aminocidos. Sus funciones ms importantes
guardan relacin con su tamao, que le mantiene dentro de la circulacin, y de
su carga elctrica, que le deja transportar hormonas, iones, frmacos, etc.
Se tomaron los valores de la albmina, ya dados en l cuantificacin de la
misma para la realizacin de la grafica. Se colocaron los valores de la
absorbancia en el eje X y la cantidad de protenas eje de las Y.
6. determinar por el mtodo grafico las cantidades de protenas totales de
albmina y de las globulina presentes en una muestra de suero de un
paciente:
Dada la grafica de tendencia, se extrapolan los valores de absorbancia
paciente y as determinar la cantidad de protena en la muestra y una vez
conocidos los valores se puede determinar si esto son o patolgicos
7. Relacionar la cantidad de protenas total de albmina y globulinas con
respecto al rango normal o al valor patolgico y deducir el estado de salud:
Se comparan los valores obtenidos con los valores normales y una vez
estudiados de existir patologa, dar el pronstico (causas, tratamiento, posibles
complicaciones, entre otros)

https://support.office.com/es-es/article/L%C3%ADneas-de-tendencia-en-gr
%C3%A1ficos-f6ffa76c-80e1-4fab-9aa0-ddc7840a7cc3
https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/003540.htm
https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/003483.htm
https://ibcmunq.files.wordpress.com/2010/03/tp2.pdf
http://candidoweb-biocuriosidades.blogspot.com/2013/12/plasma-y-suero.html
http://acemucsc.galeon.com/articulos/Bioquimica/sangre.htm