Revista de la Facultad de Medicina

versin impresa ISSN 0798-0469

RFMv.24n.2Caracasjul.2001

Revista de La Facultad de Medicina, Volumen 24 Nmero 2, 2001 (157162)

EVALUACIN DEL TEST RPIDO ONTRAK

TESTSTIK PARA DETECTAR COCANA Y
MARIHUANA EN MUESTRAS DE ORINA
C Expsito de G1, M Borges de F1 y E Trejo2.
1. Ctedra de Toxicologa, Escuela de Bioanlisis, Facultad de Medicina,
Universidad Central de Venezuela.
2. Laboratorio de Neuroqumica, Instituto de Medicina Experimental, Facultad
de Medicina, Universidad Central de Venezuela.

RESUMEN:
Este estudio tiene como objetivo evaluar la validez del test rpido
TesTstik para detectar cocana y marihuana en muestras de orina,
comparndolo con el mtodo de inmunofluorescencia polarizada (FPIATDx) y el inmunoenzimtico heterogneo (ELISA), en vista de su
prxima introduccin en el mercado venezolano. Se recolectaron 69
muestras de orina en las cuales se realizaron 58 determinaciones para
marihuana y 61 para cocana. Este test es sensible a concentraciones de
droga iguales o cercanas a los valores de cut-off (300 ng/mL para
cocana y 50 ng/mL para marihuana) establecidos por el Instituto
Nacional de Drogas de Abuso (NIDA). De acuerdo a los resultados
obtenidos no se observaron variaciones significativas entre el TesTstik y
los otros mtodos, lo que nos permite concluir que el TesTstik es un test
confiable que se puede aplicar cuando se requiera de un resultado
rpido.
Palabras Clave: Drogas de abuso, Marihuana, Cocana, Mtodos de
anlisis en orina, Inmunofluorescencia polarizada, Inmunoenzimtico
heterogneo.
ABSTRACT:

The objective of this study is to evaluate the validity of the TesTstik in

comparison with fluorescence polarization immunoassay (FPIA-TDx) and
heterogeneous enzyme immunoassay (ELISA), since this test will be
soon introduced in Venezuela. Analysis was performed on 69 urine
samples, 58 to detect cannabinoids and 61 to detect cocaine. This test is
sensitive to drug concentrations at or around the estated cut-off values
(cocaine 300 ng/mL and cannabis 50 ng/mL) established by the National
Institute of Drug Abuse (NIDA). TesTstik agrees well with the results
obtained from FPIA-TDx and ELISA. The evaluation of the test assay
showed reliable results and may be recommended when an immediate
preventive test result is required.
Key Words: Abuse drugs, Cannabis, Cocaine, Urine analisys methods,
Fluorescence polarization immundassay, Heterogeneous enzyme
immundassay.
__________________

INTRODUCCIN
El problema de la drogadiccin es universal. Prcticamente no existe
nacin que no se vea afectada de alguna manera por el abuso de
sustancias que causan dependencia, lo mismo las de consumo lcito
como el alcohol, el tabaco y los medicamentos psicotrpicos como las de
uso ilegal que afectan la psiquis y la conducta, principalmente en los
jvenes(1).
El consumo de sustancias que alteran el estado anmico y psicolgico de
los individuos, desde hace mucho tiempo ha sido tema de inters para
las distintas sociedades en cada etapa de la historia(2).
En los ltimos aos se ha observado un importante incremento en el
consumo de drogas de abuso en pases occidentales, lo que ha trado
como consecuencia la creacin de un gran nmero de centros para el
tratamiento de farmacodependientes y un incremento en el anlisis de
estas drogas en fluidos biolgicos, como herramienta de terapia(3).
Los mtodos de ensayo utilizados para detectar, confirmar y cuantificar
drogas son parte importante en el proceso de deteccin de drogas. La
sensibilidad, especificidad y precisin de los mismos son crticos para la
generacin de resultados vlidos y confiables(4).
Las diversas metodologas para detectar drogas de abuso, incluyen entre
otras inmunofluorescencia polarizada (FPIA), ensayos
inmunoenzimticos (ELISA) y radioinmunoensayos (RIA). Adems,

existen mtodos de deteccin rpidos donde los resultados se obtienen a

simple vista, sin necesidad de usar costosos equipos automatizados(5).
A pesar de que en la literatura podemos encontrar gran cantidad de
investigaciones donde comparan estos ensayos de manera de comprobar
la validez, la sensibilidad y la especificidad de cada uno de ellos(6,7,8),
para el caso del ONTRAK TESTSTIK, test rpido objeto de nuestro
estudio, la nica informacin disponible en tal sentido la suministra de
manera muy suscinta el inserto de la casa comercial que lo
suministra(9).
Dado el gran auge de compaas o casas comerciales que hoy en da
fabrican y expenden kits rpidos o "in situ" para la deteccin de drogas,
es importante evaluar la validez de estos nuevos productos en la medida
que van apareciendo en el mercado y son usados para diferentes
programas de deteccin de drogas(10).
Por lo anteriormente expuesto y tomando en cuenta que este test ser
introducido para uso profesional en Venezuela, nos propusimos evaluar
la validez del mtodo ONTRAK TESTSTIK para la deteccin de marihuana
y cocana en muestras de orina, comparando los resultados obtenidos
con este ensayo, con los obtenidos por el Inmnunoensayo Enzimtico
Heterogneo (ELISA) y el Inmunoensayo de Fluorescencia Polarizada
(FPIA). Todo esto con el objeto de establecer el grado de confiabilidad
del ONTRAK TESTSTIK como un test rpido para la deteccin, en este
caso en particular, de marihuana y cocana.
MATERIALES Y MTODOS
Para nuestro estudio se procesaron 69 muestras de orina provenientes
de sujetos presuntamente consumidores de drogas de abuso, en
particular marihuana y cocana, recolectadas en el laboratorio de
UNIDEME ubicado en el Instituto de Medicina Experimental de la
Facultad de Medicina de la Universidad Central de Venezuela, Caracas,
siguiendo todos los pasos de la cadena de custodia. El procesamiento de
las muestras por el mtodo FPIA-TDx y por el TesTstik se realiz en
UNIDEME y por el mtodo de ELISA en el laboratorio asistencial SURBCA
de la Escuela de Bioanlisis de la Facultad de Medicina de la Universidad
Central de Venezuela.
Para cada mtodo empleado se realizaron un total de 58
determinaciones para marihuana y 61 para cocana, esto debido a que
no todos los sujetos requeran la deteccin de ambas drogas
simultaneamente.
Para nuestro estudio utilizaremos los valores de cut-off tanto para
marihuana como para cocana recomendados en los kits comerciales
correspondientes a cada ensayo, estos son: Marihuana Cocana
Cut-off (ng/mL) Cut-off (ng/mL)

ELISA 50 300
TDx 25 300
ONTRAK TESTSTIK 50 300
Las metodologas utilizadas fueron:
1. Inmunoenzimtico Heterogneo (ELISA): Para este mtodo las
muestras se procesaron en el Stat Fax 303 Plus, para lo cual se
usan los kits comerciales especficos para cada droga(11).
2. Inmunoensayo de Fluorescencia Polarizada (FPIA): Para este
mtodo las muestras se procesaron en el TDx de la casa Abbott,
para lo cual se utilizaron los test comerciales especficos para cada
droga(12).
3. ONTRAK TesTstik: Para este ensayo se utilizaron los test rpidos
que vienen en envolturas individuales para cada droga y para cada
muestra de orina(13).
Anlisis Estadstico
El grado de concordancia entre el TesTstik, el FPIA-TDx y el ELISA se
realiz de acuerdo al nmero de resultados positivos y negativos
obtenidos tanto para las determinaciones de cocana como para las de
marihuana (THC), el mismo se hizo aplicando la prueba de Chi Cuadrado
y el nivel de significacin (p) seleccionado fue de 0,05. La prueba fue
aplicada empleando el programa Graph PAD Stat (Gpis).
RESULTADOS
Con el objeto de demostrar que no se obtuvieron resultados falsos
positivos con el TesTstik se procesaron diez muestras de orina obtenidas
de sujetos no consumidores de drogas. Estos resultados fueron
comparados con el FPIA-TDx y con el ELISA (Tabla 1).

Tabla 1: Comparacin de los resultados obtenidos por los tres mtodos

empleados con respecto a las muestras libres de droga

Negativos

FPIATDx

TesTstik

Positivos

ELISA

FPIA-TDx

TesTstik

ELISA

THC

10

10

10

Cocana

10

10

10

En la Tabla 2 y 3, se presentan los resultados obtenidos con el TesTstik,

utilizando los calibradores y controles comerciales para marihuana (THC)
y cocana rutinariamente empleados por el FPIA-TDx y el ELISA
respectivamente.
Tabla 2: Resultados obtenidos con el TesTstik utilizando los calibradores
del FPIA-TDx

FPIATDx

TesTstik

FPIATDx

THC

TesTstik

Cocana

35ng/ml

Negativo

500ng/ml

positivo

50ng/ml

Positivo

3000ng/ml

positivo

110ng/ml

Positivo

Tabla 3: Resultados obtenidos con el TesTstik utilizando los calibradores

para el ELISA

ELISA

TesTstik

ELISA

TesTstik

THC

Cocana

0ng/ml

Negativo

0ng/ml

Negativo

20ng/ml

Negativo

300ng/ml

Negativo

50ng/ml

Positivo

100ng/ml

Positivo

En la Figura 1, se resumen los resultados positivos y negativos para

THC obtenidos por el mtodo FPIA-TDx y el TesTstik.
En la Figura 2, se resumen los resultados positivos y negativos de
cocana obtenidos por el mtodo FPIA-TDx y el TesTstik. En la Figura
3, se resumen los resultados positivos y negativos para THC obtenidos
por el mtodo de ELISA y el TesTstik.
En la Figura 4, se resumen los resultados positivos y negativos para
cocana obtenidos por el mtodo ELISA y el TesTstik.
En la Figura 5, se muestran los resultados positivos y negativos para
THC obtenidos por los tres mtodos.
En la Figura 6, se muestran los resultados positivos y negativos para la
cocana obtenidos por los tres mtodos.

Figura 1:Comparacin de los valores positivos y negativos

para THC por el mtodo TDx y el TesTstik
Figura 2: Comparacin de los valores positivos y negativos
para cocana por el mtodo TDx y el TesTstik

Figura 3: Comparacin de los valores positivos y negativos

para THC por el mtodo ELISA y el TesTstik
Figura 4: Comparacin de los valores positivos y negativos
para cocana por el mtodo ELISA y TesTstik
Figura 5: Comparacin de los valores positivos y negativos
para THC por los tres mtodoS empleados
Figura 6: Comparacin de los valores positivos y negativos
para cocana por los tres mtodos empleados

DISCUSIN
En nuestro estudio comenzamos por procesar 10 muestras de orina
recolectadas por sujetos no consumidores de drogas, con el objeto de
demostrar que no se obtuvieron resultados falsos positivos con el
TesTstik. Esta muestras se analizaron tanto con el TesTstik como con el
FPIA-TDx y el ELISA obtenindose resultados negativos para los tres
mtodos tanto para marihuana (THC) como para cocana. En un estudio
realizado por Jenkins et al(10) para evaluar la validez del EZ-Screen, un
test rpido para marihuana, en muestras de orina libres de droga,
comprob que con este test no se obtienen falsos positivos, an cuando
es capaz de detectar concentraciones de THC menores de 5 ng/mL,
demostrando as una mayor confiabilidad de la validez del test.
Por otra parte, cuando realizamos determinaciones con el TesTstik
utilizando los calibradores y controles de FPIA-TDx y de ELISA a
diferentes concentraciones de droga en los cuales estaban incluidos los
valores de cutoff establecidos para el TesTstik, tanto para THC como para
cocana, observamos que para el THC concentraciones de 35 ng/mL
(FPIA-TDx) y 20 ng/mL (ELISA) resultaron negativos para el TesTstik,
mientras que para concentraciones iguales o mayores de 50 ng/mL
(FPIA-TDx y ELISA) resultaron positivos para el TesTstik. Con respecto a
la cocana, concentraciones de 500 ng/mL y 3000 ng/mL (FPIA-TDx)
resultaron positivas para el TesTstik, sin embargo para el calibrador de
300 ng/mL correspondiente al ELISA, el TesTstik arroj resultado
negativo, siendo esta la concentracin de cutoff establecida por el
fabricante de este test.
Armbruster et al(14) verificando los cutoff en un estudio con el test
rpido ONTRAK, utilizando los calibradores y controles de Abbott FPIATDx para anfetaminas, barbitricos, cocana, PCP y THC observaron que
en aquellos con valores por debajo de la concentracin de cutoff
establecida para el ONTRAK dieron negativos y aquellos con valores por
encima de la concentracin de cutoff establecida para el mismo test
dieron positivos. Sin embargo en este estudio se observaron algunas
discrepancias, por ejemplo para la morfina con un valor para el control

positivo de 250 ng/mL y para el estandard de 200 ng/mL se reportaron

resultados positivos para el ONTRAK con un valor de cutoff de 300
ng/mL. De acuerdo a este estudio esta variacin puede deberse a la
interpretacin del resultado segn la persona que realiza el test. Para
estos autores cuando se utiliza "el espectofotmetro de los ojos" algunos
analistas reportan resultados negativos en lugar de positivos y lo
contrario tambin. Esto es factible ya que estos test rpidos son ms
subjetivos que aquellos mtodos que utilizan instrumentos de medicin.
De cualquier manera y a pesar de lo anteriormente dicho, en este
estudio las diferencias entre analistas en interpretar los resultados del
ONTRAK, se observaron en muestras con concentracin de droga igual o
cercana al cutoff, pero no para aquellas con concentraciones claramente
por debajo o por encima del cutoff establecido por el mtodo.
Por otra parte, cuando comparamos los resultados obtenidos por el
TesTstik y el FPIA-TDx, tanto para THC como para cocana, observamos
que para un total de 58 determinaciones para THC, los resultados
positivos fueron 17 (29,3%) para el FPIA-TDx y 11 (18,9%) para el
TesTstik y los resultados negativos fueron 41 (70,6%) para FPIA-TDx y
47 (81,0%) para el TesTstik. Con respecto a la cocana encontramos que
de 61 determinaciones, los resultados positivos fueron 20 (32,7%) para
el FPIA-TDx y 18 (29,5%) para el TesTstik y los resultados negativos
fueron 41 (67,2%) para el FPIA-TDx y 43 (70,4%) para el TesTstik. Se
podra pensar que la pequea discrepancia que se observa en los
resultados para THC se deba a que el valor de cutoff para esta droga en
el FPIA-TDx es de 25 ng/mL mientras que el establecido para es TesTstik
es de 50 ng/mL, de manera que aquellas muestras con concentraciones
de THC por debajo de 50 ng/mL que dieron negativas para el TesTstik y
positivas para el FPIA-TDx. Con respecto a la cocana no sucedi lo
mismo ya que para ambos mtodos el valor de cutoff es el mismo 300
ng/mL. Sin embargo al comparar estos dos mtodos analticos con
respecto a los resultados obtenidos no se observ diferencia
estadisticamente significativa.
Luego hicimos la comparacin de los resultados obtenidos por el TesTstik
y el ELISA, tanto para THC como para cocana, observamos que para un
total de 58 determinaciones para THC, los resultados positivos fueron 13
(22,4%) para el ELISA y 11 (18,9%) para el TesTstik y los resultados
negativos fueron 45 (77,5%) para el ELISA y 47 (81,0%) para el
TesTstik. Con respecto a la cocana encontramos que de 61
determinaciones, los resultados positivos fueron 22 (37,9%) para el
ELISA y 18 (29,5%) para el TesTstik y los resultados negativos fueron 39
(63,9%) para el ELISA y 43 (70,4%) para el TesTstik. Al comparar estos
dos mtodos analticos con respecto a los resultados obtenidos no se
observ diferencia estadisticamente significativa.
Por otra parte, al comparar resultados negativos y positivos para ambas
drogas obtenidos por los tres mtodos empleados, no encontramos
diferencia estadsticamente significativa.

En un estudio realizado por Kintz et al(15) para evaluar el test rpido

Rapidrog Cannabis, test basado en el mismo principio del TesTstik
(inmunocromatografa), compararon los resultados obtenidos con este
test con respecto a los obtenidos por FPIA y GC/MS y obtuvieron 52
resultados positivos con el Rapidrog, 54 con el FPIA y 54 con la GC/MS,
los negativos fueron 40 con el Rapidrog, 38 con el FPIA y 38 con la
GC/MS, lo que comprueba la gran confiabilidad de este test.
Crouch et al(16) encontraron una buena correlacin al comparar los
resultados obtenidos por el inmunoensayo ONLINE comparndolos con el
TesTcup, test rpido basado en el mismo principio del TesTstik, as
observaron que para un total de 250 muestras negativas y 100 muestras
presuntamente positivas para cocana, opiaceos y THC, solo una dio
positiva para THC y para opiceos por el TesTcup que dio negativa con el
ONLINE, de la misma manera obtuvieron 9 resultados negativos para
cocana y 8 para THC por el TesTcup que con el ONLINE resultaron
positivos.
En un estudio realizado por Tsai et al(17) compararon los resultados
obtenidos con el TesTstik y con el Abuscreen ONTRAK, encontrando una
buena correlacin entre los resultados. El porcentaje de coincidencia
entre el TesTstik y el ONTRAK fue del 100% tanto para THC como para
cocana, por lo que estos autores concluyen que el TesTstik es
comparable con otros inmunoensayos disponibles en el mercado.
Nuestros hallazgos concuerdan con el estudio realizado por estos autores
ya que an cuando el porcentaje de coincidencia no fue del 100% s
obtuvimos una buena correlacin entre los resultados al comparar el
TesTstik con el FPIA-TDx y el ELISA.
CONCLUSIONES
Del estudio realizado por nosotros podemos concluir que a travs del
TesTstik se obtienen resultados satisfactorios para las determinaciones
de THC y cocana al compararlos con inmunoensayos automatizados
como el FPIA-TDx y el ELISA, usados como mtodos de referencia, por lo
tanto se recomienda su uso como un test rpido, confiable que adems
tiene la ventaja de dar resultados en pocos minutos, es fcil de usar, no
necesita de personal altamente entrenado y no requiere de reactivos
costosos ni de aparatos automatizados.

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Edificio del Decanato, Oficina 50 P.B., Ciudad Universitaria, Caracas
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Tlfs: (0212) 5619871 (0414) 2634154 Fax: (0212) 3214385
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