se denomina pardeamiento enzimtico la trasformacin, enzimtica en sus
primeras etapas, de compuestos fenlicos en polmeros coloreados, frecuentemente pardos o negros. Las fases de su trasformacin son las siguientes:
El pardeamiento enzimtico se observa en los vegetales ricos en compuestos
fenlicos y tambin durante la formacin de melaninas en los insectos (oscurecimiento de la cutcula) as como en los mamferos (melanomas responsables de la pigmentacin de la piel). El pardeamiento enzimtico no ocurre en los alimentos de origen animal. Por el contrario, plantea importantes problemas de coloraciones con algunas frutas y legumbres, en particular cuando se altera los tejidos de estos vegetales o se daan por golpes durante los procesos: pelado, corte, triturado para la preparacin de jugos, congelacin, deshidratacin. Recordemos los casos de las manzanas, peras, albaricoque, melocotn, pltanos, aguacate, as como la patata y championes. Sin embargo, la formacin de este color oscuro no es siempre un inconveniente; as se busca un ligero pardeamiento en la maduracin de los dtiles, en la preparacin de la sidra, fermentacin del t, secado de los gramos fermentados del cacao, as como durante el secado del tabaco.
PREVENCION DEL PARDEAMIENTO ENZIMATICO
Existen numerosos medios de impedir el pardeamiento enzimtico, pero por razones de costo, toxicidad, reglamentacin o efectos secundarios desfavorables sobre la calidad, en la prctica, solo se utilizan algunos, que mencionaremos a continuacin. No obstante, se prosigue la investigacin o aplicacin de procedimientos nuevos y ms concretamente con estudios de modificacin (metilacin) de los
sustratos fenlicos y destruccin de las quinonas (por reaccin con sustancias
provistas de grupos SH o NH2) Algunas veces es factible la seleccin de variedades pobres en sustratos fenlicos. Para otros vegetales se precisa, fundamentalmente, evitar contusiones que daen los tejidos, poniendo asi en contacto enzimas y sustratos de pardeamniento. Resulta muy eficaz la inactivacin de enzimas por el calor ( precalentado, pasteurizado, esterilizado) , pero modifican los caracteres organolpticos del producto y por lo tanto no siempre se pueden utilizar. Esto ocurre, especialmente, en las frutas y legumbres que se almacenan o mantiene en estado crudo y ms concretamente por refrigeracin, congelacin o deshidratacin. Con referencia a estos, hay que recordar que la congelacin y deshidratacin afectan a la integridad del tejido vegetal y por tanto favorecen el pardeamiento enzimtico. La adicin de compuestos reductores, que transforman las quinonas en fenoles, permite retardar p impedir el pardeamiento enzimtico, el compuesto ms frecuente es el cido ascrbico; se utiliza sobre todo para los jugos de frutas y para las frutas cortadas en trozos, segmentos o pedazos, ya que en las frutas enteras, aunque estn peladas, solo penetra lentamente. Para evitar completamente el pardeamiento enzimtico se necesitan cantidades elevadas de cido ascrbico (0,5 a 1 % del peso del producto); es esas condiciones, las polifenol oxidasas aun serian inactivadas durante su accin, antes de que el cido ascrbico desapareciese del medio. En Francia, la reglamentacin permite la adicin de cido ascrbico a jugos de frutas, en dosis inferiores a 300mg/l. La inmersin de frutas, despus del pelado y corte, en agua ligeramente salda o en una solucin de sacarosa o glucosa, limita la entrada de oxigeno hasta el tejido vegetal y su absorcin por este ltimo. A los almibares se aade frecuentemente cido ascrbico. La penetracin de azcar en los tejidos los fortalece, debido al aumento de la presin osmtica. Por lo general, las frutas destinadas a la congelacin se recubren de jarabe; se emplea una parte de jarabe al 30-50% de sacarosa, para 3 a 7 partes de frutas; el azcar acta como crioprotector y mejora la retencin de aroma. El descenso del pH retarda el pardeamiento enzimtico. Por lo general se emplean baos de cido ctrico. Contra la accin de las polifenol oxidasas puede resultar muy eficaz la eliminacin de oxigeno de los tejidos. La desoxigenacin se obtiene por vaco o por borboteo de nitrgeno; tambin puede conseguirse consumiendo el oxgeno: a este efecto, se apela al cido ascrbico o a la accin de la glucosa oxidasa y la de la catalasa.
Sin embargo, es preciso evitar colocar los tejidos vegetales en anaerobios
mientras tengan actividad fisiolgica; por lo tanto, la desoxigenacin debe seguirse inmediatamente del tratamiento de conservacin, en especial congelacin y deshidratacin. Ni que decir tiene que los embalajes sern impermeables al oxgeno. Tambin son eficaces contra el pardeamiento enzimtico y no enzimtico, el anhdrido sulfuroso y los bisulfitos; adems poseen una accin antisptica, aunque no en las dosis empleadas contra el pardeamiento. En el caso del pardeamiento enzimtico su modo de accin no est totalmente aclarado: el anhdrido sulfuroso, del que una gran parte se fija sobre los enlaces carbonilo de los azucares presentes, reacciona con la quinonas, que as quedan bloqueadas pero se piensa que tambin acta directamente sobre las polifenol oxidasas. Se observ que el cido ascrbico y la tiamina permiten reducir las dosis de bisulfito. Segn los casos, se utilizan anhdrido sulfuroso gaseoso, en disolucin, o bisulfitos. Recordaremos que el empleo del anhdrido sulfurosos gaseoso, obtenido por combustin del azufre y utilizando como proteccin contra los insectos y conservar el color de las frutas secadas al sol. Se remota a la antigedad. A veces, para las frutas destinadas a la congelacin, se practica una primera inmersin de 45 segundos en una solucin a 0,25 % de NaHSO3, seguida de una inmersin de5 mm en una solucin de 0,2 % de K2HPO4; este ltimo agente desciende de la reactividad de los polifenoles. DETRMIACION DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA. Las enzimas son catalizadores bioqumicos. Se trata de protenas, que con frecuencia contienen lo que se denomina cofactores (coenzimas, grupos prostticos e iones metlicos). La actividad de las enzimas depende de parmetros tales como el pH, la temperatura y el contenido acuoso. Las enzimas muestras una pronunciada sensibilidad frente a la temperatura; en general a 50-60C se produce su inactividad (dao) irreversible: pero existen tambin enzimas que siguen siendo activas a temperaturas de 80C. Las temperaturas muy bajas de hasta -100C limitan la actividad enzimtica. Aunque no tienen una accin perjudicial sobre la propia enzima. Para determinar la actividad enzimtica se deja que la enzima ejerza su accin sobre un sustrato adecuado en unas condiciones determinadas y se mide el
cambio de concentracin de los productos que se forman o del sustrato por