ACTIVIDAD CATALTICA DE LA CATALASA (ACAT)

DATOS
CATALASA
Es una encima que se encuentra presente en muchos de los tipos de clulas,
ayudando a proteger a las mismas del efecto toxico que produce el agua
oxigenada.
METODOLOGA
Materiales
Montaje de titulacin (soporte universal, bureta, pinzas, erlenmeyer); pipeta
graduada; probeta graduada; beaker de 400Ml; tubos de ensayo con gradilla;
Reactivos:
H2O2 0,05M; H2SO4 2N; KMnO4 0,01M; Extractos de catalasa (ECAT)
PROCEDIMIENTO
Este procedimiento se realiz mediante la cuantificacin de Ingeniera Agrnoma y
con las muestras que tenamos al alcance en el laboratorio. Tambin se utilizaron
algunas de las extracciones de las muestras hechas en el laboratorio por otros
compaeros.
Con anterioridad se solicit picar hielo y ubicarlo dentro de un beaker de 400ml en
el cual se pondra dentro de los tubos de ensayo una vez fuera aplicado el reactivo
a las soluciones de las muestras.
Para realizar esta cuantificacin se tom 1 gramo de muestra para cada uno de
los tubos de ensayo desde el 1 6.
Tubos de
ensayo
B
1

Muestras
Blanco
Forraje vicia

Pasto Kikuyo

Forraje avena

Descripcin de
la muestra
xxxxxxxx
Se recolecto del
municipio de
caldas Boyac a
2725 m. s. n. m
se recolecto en
Chiquinquir
Boyac a 2680
m. s. n. m
Se recolecto del
municipio de
caldas Boyac a

Evidencia

4
5

Sangre
Pasto kikuyo
(2)

Pasto estrella

2725 m. s. n. m
Animal bobino
Se recolecto en
Simijaca
Cundinamarca a
2760 m. s. n. m.
se recolecto en
Chiquinquir
Boyac a 2680
m. s. n. m

MEZCLA REACTIVA
A estos tubos se les agrego los siguientes reactivos:

TUBOS
DE
ENSAYO

4Ml de
H2O2,
0,03M

5Ml de
Buffer
Fosfato

1mL de
H2SO4
2N

Teniendo en cuenta que se le realiza este mismo procedimiento a todos los tubos.
Despus de estas dinmicas deba agitarse por 30 segundos agitar colocarlos
nuevamente en el bao de hielo y dejarlos en reposo durante 5min
Titulacin permanganomtrico

Alistar el montaje de titulacin, colocar el erlenmeyer debajo de la bureta y titular

adicionando lentamente el KMnO4, agitando, hasta que Aparezca y permanezca
un color rosado violeta plido, por 30 segundos, en la solucin reactiva, registrar
los mL de permanganato gastados en este proceso
Organizacin montaje de titulacin con reactivo permanganato de potasio
Ubicacin del beaker 50 ml
Agitacin del beaker con cada muestra mientras se deja caer el reactivo
hasta obtener coloracin sugerida en la gua, conteo de los ml empleados
en cada muestra.
Datos para actividad cataltica de catalasa (ACAT)

TUBOS DE
ENSAYO
Blanco
1
2
3
4
5
6

COLOR INICIAL
Incoloro
Rosado
Incoloro
Traslucido
Caf claro
Azul tenue
Incoloro

Aplicacin de frmulas:

COLOR FINAL
violeta
Violeta tenue
Rosado - Violeta
Rosado claro
Rosado oscuro
Rosado claro
Rosado violeta

CANTIDAD DE
REACTIVO
0,4 mL
1,1 mL
0,4 mL
0,4 mL
0,7 mL
1,1 mL
0,6 mL

mLKMnO 4 ( B ) mLKMnO 4 ( 1 )

ACAT =

Donde:

SOLUCION
10
10 mL
6
F=
1000
4 mL
F=( 1,662,5 )1000
F=4,151000

F=4150

Tubo (B)
ACAT =

( 0,4 mL ( B )1,1 mL ( 1 ) )
t ( 0,30 )

ACAT =

0,01F

0,7 mL
0,01F
t ( 0,30 )

ACAT =2,330,01F

ACAT =0,0230,01F
ACAT =2,334150

ACAT =0,96

Tubo (1)
ACAT =

( 1,1mL (1 )0,4 mL ( 2 ) )
t ( 30 )

ACAT =

0,01F

0,7 mL
0,01F
t ( 0,30 )

ACAT =2,330,01F

ACAT =0,0230,01F
ACAT =2,334150

ACAT =0,96

TUBO (2)
ACAT =

( 0,4 mL ( 2 ) 0,4 mL (3) )

t ( 0,30 )

ACAT =

0,01F

0 mL
0,01F
t( 0,30)

ACAT =00,01F

ACAT =04150
ACAT =0

TUBO (3)

ACAT =

( 0,4 mL ( 3 )0,7 mL ( 4 ) )
t ( 0,30 )

ACAT =

0,01F

0,3 mL
0,01F
t ( 0,30 )

ACAT =1mL0,01F

ACAT =0,01F
ACAT =14150

ACAT =0,41

TUBO (4)
ACAT =

( 0,7 mL ( 4 )1,1 mL ( 5 ))
t ( 0,30 )

ACAT =

0,01F

0,4 mL
0,01F
t ( 0,30 )

ACAT =1,330,01F

ACAT =0,0130,01F
ACAT =1,334150

ACAT =0,55

TUBO (5)

ACAT =

( 1,1mL (5 )0,6 mL ( 6 ) )
t ( 0,30 )

ACAT =

0,01F

0,5 mL
0,01F
t ( 0,30 )

ACAT =1,66 mL0,01F

ACAT =0,0160,01F
ACAT =1,664150

ACAT =0,69

TUBO (6)
0,6 mL ( 6 )0,4 mL(B)

ACAT =

ACAT =

0,2 mL
0,01F
t ( 0,30 )

ACAT =0,660,01F

ACAT =6,664150
ACAT =0,27