En el presente informe se tiene como objetivo, determinar el espectro visible de una
sustancia, comprobar la ley de Beer Lambert y mostrar su aplicacin para determinar la concentracin de soluciones coloreadas o muestras biolgicas, todo esto teniendo en cuenta algunos conceptos determinantes para entender los procedimientos realizados. La espectrofotometra se basa en la propiedad que tienen las sustancias de absorber y emitir energa en forma de radiacin electromagntica (luz), la energa transmitida, absorbida y reflejada en una superficie dada, en funcin de la longitud de onda (); se basa en el anlisis qumico de sustancias para medir su concentracin, aprovechando la capacidad que stas tienen para formar complejos coloreados. Hay diferentes longitudes de onda a las cuales se puede absorber una concentracin y un color especifico, ya que la luz absorbida no solo depende de la concentracin, sino tambin del color de la solucin. La espectrofotometra tiene como principio qumico la ley de Bourguer- Lambert- Beer, la cual establece que la absorbancia de una solucin depende de la concentracin de las molculas que la absorben y de la distancia que recorre el rayo en el medio absorbente, es decir que, cuanto mayor sea la trayectoria del rayo en la solucin del analito de una concentracin dada, habr ms especies que absorban la radiacin y la atenuacin ser mayor. (Douglas A. 2000, p. 575) Cada solucin tiene unalongitud de onda ptima, la cual es el punto donde se absorbe la mayor cantidad de luz; sta se hace mediante la realizacin de una curva espectral y consiste en medir la absorbencia de la solucin, sometiendo sta a todas las longitudes de onda que permita el espectrofotmetro. En la espectrofotometra se pueden realizar varias pruebas, entre ellas est la realizacin de la curva espectral, explicada anteriormente; el control de exactitud del espectrofotmetro utilizado, el cual se hace midiendo la absorbancia de una solucin certificada y se comparan los valores que arroje el equipo con los de referencia; el control de la precisin en el cual se mira el grado de concordancia o similitud que hay entre los valores de absorbancia que indica el equipo al someter varias veces una solucin a la misma longitud de onda; tambin se puede mirar el comportamiento que tendr el equipo en funcin del tiempo mediante una prueba llamada control de la estabilidad fotomtrica. En el siguiente informe se describen y se explican los resultados obtenidos al realizar las pruebas anteriormente mencionadas.
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