REPBLICA BOLIVARIA DE VENEZUELA

MINISTERIO DEL PODER POPULAR PARA LA EDUCACION

UNIVERSIDAD DE ORIENTE NCLEO BLIVAR

TITULACIN DE AMINOCIDOS
PRACTICA N# 1

Profesor:
Dr. Cedeo Jess
Integrantes:
Boada Aura
C.I: 24690201
Bastardo Elas
C.I: 24109811
Camacho Marlin
C.I: 23638962
Gonzalez Allan
C.I:24.665.284
Gonzalez Diana
C.I:
Herrera Yvanna
C.I: 24559594
Rivera Yaribeth
C.I:24.849.455
Torres Samuel
C.I:

Ciudad Bolvar, 08 de Mayo de 2015

INTRODUCCIN.
Experimentos realizados en el siglo XIX y principios del XX dieron pie a los
conocimientos modernos de las propiedades y funciones as como de la importancia
biolgica y evolutiva que representan los aminocidos. Estos son las estructuras
bsicas que dan inicio a todos los procesos metablicos presentes en el ciclo vital de
cada ser vivo. EL trmino aminocido lo definen diversos autores de la siguiente
manera: es un -aminocido, ya que tienen un grupo amino primario (--NH2) como
sustituyente del tomo de carbono , el carbono siguiente al grupo cido carboxlico
(--COOH) (Voet, Voet y Pratt. 2007, p. 77).
Cabe destacar que los aminocidos poseen su estructura qumica propia, por lo
tanto se diferencian unos de otros a travs de su cadena lateral, la cual tiene la
capacidad de determinar qu tan soluble es el aminocido, ya que a mayor cantidad
de grupos ionizables tenga la cadena aumentara la capacidad de formar puentes de
hidrogeno.
Voet, Voet y Pratt (2007) afirmo que:
Los grupos aminos y los cidos carboxlicos de los aminocidos se
ionizan fcilmente. El valor de pK de los cidos carboxlicos se
encuentra en un pequeo rango alrededor de 2,2 mientras que los
valores de pK de los grupos -amino (pK2) son cercanos a 9,4. A pH
fisiolgico (aprox. 7,4) los grupos amino estn protonados y los cidos
carboxlicos forman sus bases conjugadas. Un aminocido puede
entonces actuar como cido y base.

Es importante resaltar que la ecuacin de Henderson Hasselbach es

determinante en los sistemas amortiguadores o tampn fisiolgico que es definido
como sistemas acuosos que tienden a resistir los cambios en el pH cuando se les
aaden pequeas cantidades de cido (H+) o base (OH-). (Nelson y Cox, 2007, p.66)

pH= pK +log

Forma no protonada(Base)
Forma protonada ( cido )

Teniendo en cuenta la ecuacin anterior El pH de una solucin acuosa refleja,

en escala logartmica la concentracin de iones de hidrogeno. (Nelson y Cox, 2007,
p.65)
+
H

+
H

1
pH=log
En este informe prctico apreciaremos la capacidad buffer de los aminocidos
como unidades estructurales de las protenas, esto nos permitir reconocer los
sistemas proteicos de mayor capacidad buffer tomando como criterio su valor de pK y
diferenciar un aminocido bsico, cido y neutro. As como tambin analizar el
comportamiento de las protenas en su punto isoelctrico.
Mediante una curva de titulacin se van a expresar los resultados obtenidos en
la prctica realizada en el laboratorio, donde se alter el nivel de acides de un
aminocido con pH inicial de 1,7 (cido), utilizando Hidrxido de Sodio (NaOH) a
una concentracin de 0,5 N aadiendo 0,5 ml cada minuto, intentando llevarlo a un
pH de 12 (Base) como punto final, midiendo cada alteracin con un pH-metro.

BASES TERICAS
cido: compuesto que origina iones hidrgenos cuando se disocia en
solucin. (Diccionario Medico Ocano Mosby, p.10)
Anfiptico: compuesto que contiene regiones que son polares (o cargadas) y
regiones que son apolares. (Nelson y Cox, 2007, p.52)
Apolar: compuesto que no posee regiones negativas ni positivas.
Base: molcula que acepta o toma protones. (Diccionario Medico Ocano
Mosbi, p.155)
Concentracin: cantidad de una sustancia disuelta en otra en una mescla
homognea o una disolucin. (Larousse, Diccionario Esencial Qumica, Octava
Reimpresin, p. 116)
Constante: cantidad que tiene un valor fijo en un determinado proceso.
(Diccionario de la lengua espaola DRAE, 2014).
Disociacin: reaccin qumica consistente en dividir una molcula en
fragmentos ms simple. (Larousse, Diccionario Esencial Qumica, Octava
Reimpresin, p. 149)
Electrn: partcula subatmica de carga negativa. (Larousse, Diccionario
Esencial Qumica, Octava Reimpresin, p. 162)
Glutamato: sal formada por la combinacin de cido glutmico y una base.
Ion Dipolar: compuestos que tienen grupos cargados de polaridad opuesta.
(Voet, Voet y Pratt, 2007, p.74)
Par Acido Base Conjugados: dador de protones y su correspondiente
aceptor. (Nelson y Cox, 2007, 63)
PH Constante: el nivel de acides no es alterado por la presencia de ms
disolvente en la sustancia.

PK: expresa la fuerza relativa de un cido o base dbiles en escala

logartmica. (Nelson y Cox, 2007, 65)
PKr: grupo funcional carboxilo, animo, o ionizable que se encuentra en la
cadena lateral amino.
Polar: compuesto qumico cuyas molculas poseen un momento dipolar
considerable. (Larousse, Diccionario Esencial Qumica, Octava Reimpresin, p. 301)
Protones: partcula elementa con carga positiva. (Larousse, Diccionario
Esencial Qumica, Octava Reimpresin, p. 318)
Puente de Hidrogeno: atraccin electroesttica entre el tomo de oxigeno de
una molcula de agua y el hidrogeno de otra. (Nelson y Cox, 2007, p.48)
Punto Isoelctrico: pH al que la molcula no lleva carga elctrica neta
alguna. (Voet, Voet y Pratt, 2007, p.84)
Reacciones Acopladas:
Variacin de pH: alteracin del nivel de acides de una sustancia a causa de
un agente externo.
Titulacin: proceso que determina la cantidad de cido en una solucin dada.
(Nelson y Cox, 2007, p 64)

Discusin.
Anlisis de Resultados:
A partir de los resultados obtenidos podemos describir que mediante el
proceso de titulacin se realiz una obtencin de datos para cumplir con el objetivo
principal de la experimentacin, el cual est basado en la identificacin de diferentes
tipos de aminocidos mediante valores de pH que pueden ser establecidos en una
grfica. Sabiendo que la grfica est compuesta por un eje Y que representar la
escala de pH y un eje X que representar la cantidad de concentracin del titulante
que se agreg a la solucin. Se proceder a dar una explicacin analtica basada en la
curva representada por las variaciones de pH que tuvieron los diferentes aminocidos.
Titulacin Experimental, Aminocido A: partiendo de un punto 1,7 en la
escala de pH sin agregar titulante y finiquitando en un punto 11,68 en la escala de pH
con 50ml de NaOH (Hidrxido de Sodio), se puede decir que se llev el aminocido
desde el punto ms cido (Con mayor cantidad de protones en el medio y con el
grupo carboxilo protonado COOH+) hasta un punto base (Con el grupo amino
desprotonado NH2- y con un medio carente de protones). Al agregar 0,5 ml de
titulante durante perodos de tiempo en los que pudiera existir una variacin de pH,
este lograra ir aumentando paulatinamente.
Para lograr deducir que tipo de aminocido era, se tuvo que identificar tanto el
pKa como el pKb De acuerdo algunos autores, como: El pK a se puede determinar
experimentalmente, como el pH del punto medio de la curva en la titulacin cido
(pKa) o base (pKb) (D. Nelson y M. Cox, 2007, p.65) o puntos en la meseta en los
que no lograba distinguirse el inicio o el final, esto se determinaba en el lugar donde
se encontraba la curva menos la disminucin de la concentracin de iones de
hidrgeno en 1x101 del valor de pH donde existe la curva para los cidos, y un
aumento de la concentracin de iones de hidrgeno en 1x10 -1 de donde est la curva
en la meseta que representa los valores de pH base y no tiene final. Se logr
determinar que el pKa tendra un valor de 1,83 en relacin a la curva de la meseta que

representaba el cido y pKb un valor de 9,13 esto va a representar el aminocido

Fenilalanina ya que su punto isoelctrico es de 5,48 y en la grfica existe una
semejanza casi total con el mismo, as como la caracterstica de permanecer constante
a un valor de la escala de pH de 11,50 en adelante.
Titulacin simulada, aminocido B: Este aminocido present una meseta
mucho ms grande en los pHs cidos, por lo que se deduce que hay una mayor
cantidad de amortiguacin para que este compuesto entrara en su in dipolar, se
describi que exista una reaccin acoplada de puntos de amortiguacin que creaban
una mayor resistencia a ceder protones ya que el medio aunque se le agregara una
cantidad relativamente alta del titulante, no alteraba al aminocido; por lo que se
concluy que la cadena lateral del aminocido estaba cargada negativamente y por
eso represent tanta capacidad de amortiguacin en un medio cido, aun cuando se le
colocaba una mayor cantidad de titulante para que este creara una variabilidad de pH
y volviera el medio ms base.
Se concluy que era aminocido Glutamato (cido Glutamtico) ya que
presenta un pKr de 4,27 en la grfica, el cual es ms cercano al pK r del Glutamato
que 4,25 y su meseta est cargada negativamente quedndose mucho ms tiempo en
forma cida o ms protonada y describiendo una mayor resistencia o amortiguacin al
cambio cido-base del medio, se concluy que a parte de estas caractersticas el
aminocido Glutamato sera el ms adecuado para representar este tipo de grfica. Su
punto isoelctrico se encuentra determinado entre el pKa y pKr ya que es el lugar en el
que se encuentra el in dipolar (Grupo amino protonado NH 3+ y el grupo Carboxilo
desprotonado COO- y afectando a la cadena lateral, pero sin influir sobre el carbono
quiral), Quedando el pI con un valor de 3,25.
Titulacin simulada, aminocido C: En esta grafica de acuerdo a las
titulaciones es inversa a la grfica anterior, esto quiere decir que si utilizamos
razonamiento lgico para evaluar la longitud de las mesetas, logramos observar que
se mantiene al colocar mayor cantidad de titulante en pHs ms bsicos, por lo que se
puede decir que es un aminocido con cadena lateral cargada positivamente, mas sin

embargo existen aminocidos como la Tirosita y la Cistena quienes no estn

cargados positivamente y poseen un pK r Elevado, por lo que no se puede despreciar
ninguno de estos dos antes de verificar los valores de pKa y el punto isoelctrico.
En la curva que se encuentra en los pHs cidos est a pH 3,20, se determina
el pKa disminuyendo de la frmula de pH una concentracin de 1x10 1 de iones de
hidrgeno obteniendo as un pKa de 2,20 dando asi un valor caractersticos de cuatro
aminocidos con valores cercanos, aumentando la posibilidad de encontrar cul
aminocido es. Para la curva encontrada en pH base antes de comenzar la meseta, se
encuentra el pH de 8,12 en su comienzo, por lo que logramos deducir el pK b con un
aumento de la concentracin de iones de hidrgeno en 1x10 -1 dando as un resultado
de 9,12 el cual el ms cercano de los pKb es la Tirosina y descartando los otros tres
posibles aminocidos, ya que sin la necesidad de calcular pK r (sabiendo que lo tiene)
el cual se presentar ms adelante en la meseta base con un valor de 10,07 pK r (D.
Nelson y M. Cox, 2007, p.78) Las comparaciones son casi exactas y se logran
identificar claramente tanto en la grfica como en los valores de pH. Su punto
isoelctrico est determinado por un valor de 5,65 ya que entre pK a y pKb se
encuentra el in dipolar del carbono quiral.

Tabla de titulacin de Ph con amortiguacin por (NaOH)

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

1) David L. Nelson y Michael M. Cox (2007). Lehninger, Principios de

Bioqumica. (4a ed.) Barcelona: Editorial OMEGA.
2) Diccionario de la lengua espaola DRAE. (2014). Extrado el 06 de mayo del
2015 desde: http://lema.rae.es/drae/?val=constante

3) Diccionario Medico Ocano Mosby. (6a ed.). (2009). Barcelona, MO: Mosby.
4) Donald Voet, Judith G. Voet y Charlotte W. Pratt (2007). Fundamentos de
Bioqumica. La vida a nivel molecular. (2a ed.). Buenos Aires: Editorial
Medica Panamericana

5) Uria Lucena Cayuela (2007). Diccionario Esencial de Qumica. 8va

Reimpresin. Editorial: Larousse.
6) Miguel Aguilera Ortiz (2011). Propiedades funcionales de las antocianinas.
Revista de Cs. Biolgicas y de la Salud. Extrado el 07 de mayo del 2015
desde:
06.pdf

http://www.biotecnia.uson.mx/revistas/articulos/16-BIO-11-DPA-

ANEXOS

Pigmento del Repollo Morado

Antocianina: Grupo de pigmentos de color rojo, hidrosolubles, ampliamente
distribuidos en el reino vegetal. (Fennema, 1993).
Qumicamente las antocianinas son glucsidos de las antocianidinas, es decir, estn
constituidas por una molcula de antocianidina, que es la aglicona, a la que se le une
un azcar por medio de un enlace -glucosdico. De todas las antocianidinas que
actualmente se conocen (aproximadamente 20), las ms importantes son la
pelargonidina, delfinidina, cianidina, petunidina, peonidina y malvidina, nombres que
derivan de la fuente vegetal de donde se aislaron por primera vez; la combinacin de
stas con los diferentes azcares genera aproximadamente 150 antocianinas.
El color de las antocianinas depende de varios factores intrnsecos, como son
los sustituyentes qumicos que contenga y la posicin de los mismos en el grupo
flavilio; por ejemplo, si se aumentan los hidroxilos del anillo fenlico se intensifica el
color azul, mientras que la introduccin de metoxilos provoca la formacin del color
rojo (Badui, 2006).
Recientemente,

diversos

materiales

conteniendo

antocianinas

estn

siendo

incorporados a productos alimenticios, donde tales productos requieren investigacin

a futuro para demostrar sus efectos fisiolgicos.
La antocianina que se encuentra presente en el pigmento del repollo morado da lugar
a la cianidina, tambin llamada cianidol, Su frmula molecular es C15H11O6. Es un
pigmento presente de forma natural en varios vegetales, verduras o frutas. Se trata del
pigmento ms representativo de la clase de los antocianididines (o antocianidoles).
Normalmente es de color violeta (en el caso del repollo morado) y puede cambiar de
color si cambia su estructura. Esta modificacin normalmente es inducida por un
cambio en el pH.

Cambia de color por ser un electrolito de carcter dbil con caractersticas cido-base,
la cual permite que acte como indicador de la acidez o basicidad de una solucin
acuosa. En dado el caso del repollo morado la sustancia acida se torn con un color
rojo claro mientras que la bsica con un color verde oscuro.