Calidad microbiolgica de del rio usivar y la vertiente de la calaboza

Andrs Camilo Guzmn Lucas

Cristian Camilo Nio Hidalgo
Lacides Jose Contreras Romero
Hubiacj Gonzalez Morales

Analisis microbiano del rio usivar y la calaboza

Asesor
Biol. Javier Carreo
Profesor programa de Biologa Ambiental

Fundacin Universitaria Internacional del Trpico Americano

Facultad de ciencias naturales y agropecuarias
Yopal
2016

El cao Usivar nace al nor-ocidente del municipio de Yopal, a 350 msnm y sus aguas fluyen
hacia el suroeste para desembocar en el Ro Charte, en el mismo municipio a 240 msnm. En
su recorrido drena las aguas de 3 km2, hasta llegar a su desembocadura en el Ro Charte.

En su recorrido de 10 km, el cao Usivar recibe las aguas del canal de la marginal del llano,
y otros corrientes menores que nacen en las estribaciones del cerro el Venado, dicho
recorrido se puede caracterizar una subcuenca, con una longitud de 12 km desde su
nacimiento hasta el lugar conocido como San Rafael de Morichal. Este cuerpo receptor
desemboca al Ro Charte.

La quebrada la Calaboza ha sido fuente de captacin desde el inicio de la potabilizacin del

agua para el municipio de Yopal; en 1997 donde dio su inicio se captaban 80 lt/seg por una
lnea de conduccin de 10 que se reduce a 6 en la entrada a la Planta de Tratamiento de
Agua Potable, actualmente esta fuente no est siendo utilizada solo se captan 90lt/seg en
temporada invernal concesionados por la Autoridad Ambiental en emergencia.
Conocer la calidad microbiana del agua resulta de gran relevancia, dado el riesgo asociado
con la ingesta de agua contaminada con bacterias patgenas, virus, protozoarios y
helmintos provenientes de las heces fecales de humanos y animales (Organization, 2004).
En el monitoreo que se realiza para evaluar la calidad del agua desde el punto vista
microbiolgico, es prcticamente imposible medir los organismos presentes; por ello se ha
desarrollado un mtodo en el que se consideran bacterias indicadoras1. As, el grupo de
bacterias coliformes se aplica como prueba general de monitoreo de calidad del agua y se
ha utilizado en todo el mundo a lo largo de los ltimos 100 aos para llevar a cabo estudios
de agua potable, contaminacin de sistemas acuticos, fuentes de contaminacin de aguas
residuales crudas y sistemas de tratamiento de aguas residuales y aguas recreativas (Rose y
Grimes, 2001).

Justificacin
El rio usivar y la calaboza han siendo afectados debido a la contaminacin generada por las
comunidades ubicadas a su alrededor. Esta afectacin se genera por desperdicios humanos e
industriales por el desarrollo de actividades que generan desechos rio arriba, los cuales
afectan el ciclo natural del rio alterando su composicin microbiolgica. Es importante
recalcar que el agua es un material importante para toda la comunidad biotica, ya que este
es el fundamento de la vida: un recurso crucial para la humanidad y para el resto de los
seres vivos. Todos la necesitamos, y no solo para beber. Nuestros rios y lagos, nuestras

aguas costeras, maritimas y subterraneas, constituyen recursos valiosos que merecen

proteccion.
Asimismo, el agua contribuye a la estabilidad del funcionamiento del entorno y de los seres
y organismos que en el habitan, es por tanto, un elemento indispensable para la subsistencia
de la vida animal y vegetal del planeta. Es decir, que "el agua es un bien de primera
necesidad para los seres vivos y un elemento natural imprescindible en la conformacion de
los sistemas medioambientales". Conocer la calidad microbiolgica resulta muy importante
debido a que con estos resultados podemos saber el estado actual del rio y as determinar
los diferentes organismos que all habitan y su posible afectacin al ecosistema.

Objetivo General
-

Establecer la calidad microbiolgica de las diferentes cuencas que se van a evaluar.

Objetivos Especficos
-

Realizar muestreos peridicos con el fin de determinar la variacin en la cantidad

microbiana
Determinar los diferentes tipos de microorganismos presentes en la muestra

Materiales y mtodos
A continuacin, seguiremos una serie instrucciones y cuidados que se deben tener en cuenta
para la toma de muestras de aguas, con el fin de obtener una muestra representativa de la
misma y as poder determinar sus caractersticas microbiolgicas.
PROCEDIMIENTO

1. Organice las botellas rotuladas, los reactivos, formatos e insumos listados, para las
estaciones que va a visitar.
2. Cuando llegue a la estacin que visita, saque todo el material correspondiente al sitio de
muestreo.
3. Diligencie el formato de captura de datos

4. Calibre el pH metro y conductmetro, por lo menos una vez al da, siguiendo los
procedimientos descritos en los instructivos respectivamente. Diligencie el tem Calibracin
del formato.
5. Cuando se estime que el agua a analizar contiene trazas de cloro, cloraminas u ozono,
ser necesario neutralizar su efecto bactericida con una solucin acuosa de tiosulfato de
sodio al 3% adicionando 0,2 ml de este para un volumen de 250 ml de muestra.
METODOS DE RECOLECCION Y CONSERVACIN
MUESTRA MICROBIOLOGICA: RIOS, LAGOS, ARROYOS O ESTANQUES

En un curso de agua, se debe evitar extraer muestras en lugares afectados por

aportes accidentales de otros cursos o por descargas residuales domesticas o
industriales, salvo que se quiere estudiar especficamente a lo mismo.

Para reservas y estanques, se debe extraer lejos de las orillas y cerca del conducto de
salidas para mxima representatividad.

PROCEDIMIENTO
Destapar el frasco, manteniendo la tapa en la mano y hacia abajo, cuidando que no toque
ningn objeto durante la toma de muestra.
Tomar el frasco por el medio y sumergirlo rpidamente hasta unos 20 cm de profundidad,
llenndolo. Dirigir la boca en sentido contrario a la corriente; si no hay movimiento
Seguidamente se etiqueta la muestra para evitar confusiones en la identificacin de las
muestras debe llevar: nmero de muestra, lugar de muestreo, lugar, fecha, hora, nombre del
recolector, parmetros medidos in situ (caudal, pH, temperatura).
CUIDADO DE LAS MUESTRA

Las muestras deben estar bien selladas para evitar derrames o contaminacin
Los frascos sern colocados en neveras refrigeradas 4C y protegerlas de la luz,
adems tener cuidado de contaminar la muestra.

Para el anlisis de las muestras deben ser inmediatas, las muestras no debern sobrepasar
las 24 horas as sern confiable los datos analticos.

Recuento en placa profunda, y placa en superficie Preparacin de Dilucione

1. Realice inicialmente los clculos de diluciones decimales iguales a 10-1, 10-2 y 10-3,
2. con las tres diluciones preparadas, proceda a inocular diferentes cajas Petri vacas y con
agar SPC (siembra en profundidad y en superficie).
3. Para la siembra en profundidad: De la dilucin 10-1, tome con una pipeta estril de 1mL
de capacidad, 1mL y colquelo en una caja de Petri estril; repita este procedimiento en
otra caja (cada dilucin tendr un duplicado), y de igual forma para las dos siguientes
diluciones.
5. Cuando haya sembrado todas las cajas (seis cajas en total), proceda a verter agar
Standard Plate Count SPC (Agar para conteo estndar), fundido y mantenido a 45C
aproximadamente. Homogenice cada caja, realizando movimientos circulares y en ocho,
hasta que el agar inicie su polimerizacin.
6. Para la siembra en superficie: De la dilucin 10-1, tome con una pipeta estril de 0,1mL
de capacidad, 0,1mL y colquelo en la superficie de una placa de agar SPC y con asa de
vidrio, inmediatamente homogenice el inculo por toda la superficie del agar; repita este
procedimiento en otra caja (cada dilucin tendr un duplicado), y de igual forma para las
dos siguientes diluciones. 7. que, en la tcnica en superficie, debe utilizar 0.1mL de la
dilucin y en la tcnica en profundidad 1 mL.
8. Incube invertidas las cajas a 372C. Revise las cajas a las 24 horas de incubacin y
realice un recuento de las colonias visibles; incube nuevamente y revise a las 48h, realice el
recuento (Estas temperaturas y tiempos se aplican para el anlisis de bacterias aerobias
mesfilas).

9. Para el recuento de Mohos y Levaduras, aplique la misma tcnica (profundidad y

superficie), e incube invertidas las cajas a 25C por 3 a 5 das (al igual que en el recuento
de bacterias aerobias mesfilas, realice conteos a los 3 y posteriormente a los 5 das de
incubacin).
10. Con los datos obtenidos en los recuentos, proceda a realizar los clculos, de acuerdo a
los volmenes utilizados en la siembra y al factor de dilucin de cada pareja de caja.