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INTRODUCCIN
Las bacterias se encuentran en todas parte del planeta, ya sea integrando relaciones simbiticas con diversos organismo
conocidos, por ejemplo algunas se encuentran formando parte de la flora intestinas de animales y el hombre, adems
una de las caractersticas notable de ellas es que se les encuentra en diversas condiciones climticas, favoreciendo as
la produccin de nutrientes especficos que son utilizadas por otros organismos para su propia sobrevivencia, se les
encuentra en ambientes reductoras u oxidantes de materia orgnica e inorgnica. Aludiendo a lo mismo tambin se les
encuentra en aguas, suelos hmedos y secos, lugares cidos, alcalinos, y en el aire. Las bacterias hoy en da son de
gran importancia, debido a la produccin de distintas sustancias y al cultivo de algunas otras para cosechar un gran
beneficio para el hombre con el objetivo de inhibir o combatir algunas enfermedades producidas por un descontrol en el
propio organismo, como es el caso de la diabetes, el cncer y algunos otros sndromes. De la misma manera se
encuentran como autoras de diversas enfermedades en plantas, en animales y el caso muy especial, en el hombre.
Debido a la importancia radical ecolgica de estos microorganismos la presente va encaminada a proporcionar
informacin acerca de la actividad de las bacterias hetertrofas en los canales de Xochimilco, por medio de muestras de
agua del canal del puente de Urrutia, localizada dentro de la misma delegacin. La importancia de llevar a cabo
investigacin de sta ndole se debe a que los canales son de principal utilidad tanto para fines tursticos como para la
propia agricultura de los campesinos de sta regin, tambin es importante mencionar que la gran mayora de bacterias
productoras de enfermedades se encuentran en ste grupo (bacterias hetertrofas), debido a lo mismo es de principal
importancia conocer a qu se exponen las personas que visitan a los canales, adems informar qu tipo de riesgos se
corre al consumir alimentos cosechados con aguas de ste tipo, que por lo que se mencion que se utilizan para el riego
de hortalizas y otros cultivos por los campesinos de sta regin en la zonas chinamperas..
BACTERIAS HETERTROFAS EN EL AGUA DE LOS CANALES DE XOCHIMILCO
ANTECEDENTES
Las bacterias se clasifican en auttrofas y hetertrofas; las primeras utilizan compuestos inorgnicos oxidados como
nica fuente de energa y CO2 como fuente de carbono, el segundo grupo requiere una forma orgnica de carbono como
nutrientes, una de las cuales son los carbohidratos, adems utilizan CO2, pero no les satisface las necesidades de
carbono. Estas son de gran importancia, puesto que participan en los procesos de autopurificacin del agua y procesos
biogeoqumicos presentes en la misma, tambin intervienen en la produccin de diversas enfermedades (cuadro 1).
Muchas de estas bacterias presentan una gran diversidad con respecto a sus necesidades de nitrgeno, e incluso
algunas crecen en medios exentos de vitaminas.
Las bacterias hetertrofas pertenecen al grupo de las enterobacterias (tabla 1), que son negativas a la tincin de Gram,
adems tienen forma de bacilos de tamao mediano, que pueden ser aerobios y anaerobios facultativos, son
fermentativas de algunos carbohidratos, casi siempre con produccin de gas, y generalmente son mviles, reducen los
nitratos y los nitritos, necesitan de compuestos orgnicos tanto como para obtener energa como para su crecimiento. Se
asocian con enfermedades humanas, algunas de ellas son provenientes de heces fecales y la presencia de estas en
medios externos como es el agua indica una contaminacin de origen fecal, adems son productoras de enfermedades
gastrointestinales en el hombre, en algunos animales y en algunos peces que se ven perjudicados con la presencia de
estas bacterias en el agua en que ellos se encuentran, algunos ejemplos de gneros bacterianos patgenos
pertenecientes a ste grupo son las que se mencionan a continuacin: Escherichia, Shigella, Edwardsiella,Citrobacter,
Salmonella, Klebsiella,Enterobacter, Serratia, Proteus, Yersinia,y Erwinia
FAMILIA
1- Escherichieae
GENERO
Escherichia
Shigella
ESPECIE
coli.
dysenteriae,
flexneri. boydii.
sonnei.
2- Edwardsielleae
Edwardsiella
tarda
3- Salmonelleae
Salmonella
Arizona
Citrobacter
4- Klebsielleae
rhinoscleromati.
Klebsiella
pneumoniae.
Enterobacter
Hafnia
Serratia
5- Proteeae
Proteus
Morganella
Providencia
6- Yersinieae
Yersinia
7- Erwinieae
Erwinia
Pectobacterium.
mirabilis.
oxytoca.
ozalnae.
vulgaris. morganii
alcalifaciens.
stuartii.
Rettgeri.
pestis.
Pseudotuberculosis
enterocolitica. intermedia. fredriksenii.
Ruckeri.
Los sntomas de las enfermedades de enterobacterias se debe en gran parte a la produccin de endotoxinas que ellas
fabrica, por ejemplo las enterotoxinas de E. coli tienen importancia en las enfermedades diarreicas, Salmonella y Shigella
son francamente patgenas, otros gneros como Proteus, Serratia y Enterobacter, con patgenos oportunistas que
producen enfermedades bajo determinadas condiciones, por ejemplo en casos de traumatizacin de tejidos (mastitis),
estados de debilidad, heridas y desnutricin.
La infeccin o riesgo a sufrir alguna enfermedad por alguna enterobacteria se produce en la mayora de los casos por
ingestin, ya sea por agua contaminada o en alimentos que tambin es muy comn su presencia, sobre todo los que
estn en contacto con el ambiente exterior como los que se elaboran y se consumen en los puestos de mercados, calles,
etc.es por esto que debe tenerse mucha precaucin de no consumir alimento en cualquier lugar. La contaminacin fecal
del agua y de los alimentos en contacto con ella est determinada por la presencia de E. coli, organismos coliformes,
Estreptococcus fecalis y el Clostridium perfringens.
Como ya se mencion, las bacterias hetertrofas requieren sustratos ricos en nutrientes de carbono, por lo tanto una
concentracin elevada de compuestos orgnicos en el agua o donde quiera que exista sta revela la presencia de ste
tipo de bacterias
En el canal de cuemanco se han hecho una gran cantidad de investigaciones bacteriolgicas cuantitativas, una de ellas
revela la presencia de Pseudomona aeruginosa, Pseudomona putida, E. coli, entre otras. La distribucin del grupo
coniforme en aguas dulces representa un peligro para la salud humana, debido a un aumento de de aguas negras, de
desechos domsticos, de residuos industriales, en su mayoras residuos orgnicos, y drenajes de campor agrcolas se
has reportados la presencia de bacilos Gram negativos y Cocobacilos, en formas de cadenas: Sarcinas, Estafilococos y
Diplococos, Tambin se han identificado bacterias Grampositivas, como el subgnero Aerobacillus; esporgeno,
Grampositivo que produce gas. De acuerdo con algunos resultados obtenidos en muestras de agua del canal de
Cuemanco, las densidades de bacterias coliformes, tanto totales como fecales, superan las 594 NMP X 100 ml.; en la
mayora de los puntos de muestreo en agua y sedimento (Soto y Esquivel, 2003).
Un estudio realizado por profesores investigadores de la UAM- X demuestra valores mnimos encontrados de 37
NMP X 100ml.; stos resultados resaltan la influencia de los asentamientos humanos sobre los niveles de coliformes. As,
la mayor parte de los valores encontrados exceden los mximos aceptables de acuerdo con las normas de calidad del
agua para uso y consumo humanos*.
Cuantificaciones tomadas en el canal han demostrado la presencia de Escherichia, Shigella, Arizona, Citrobacter,
Enterobacter, Serratia, Pectobacterium y Proteus, sin embargo, an no se encuentran los gneros: Edwarsiella,
Salmonella, Providencia y Klebsiella
En el siguiente cuadro se pueden observar algunas bacterias que estn presentes en las aguas superficiales, la
enfermedad o infeccin que causan y los diversos sntomas (Lenntech, 2005).
BACTERIA
Aeromas
Salmonella thypi
SINTOMAS
Diarrea muy liquida con sangre y
moco
Campilobacteriosis
Gripe, diarrea, dolor de cabeza y
estomago, fiebre calambres y
nauseas
Infecciones del tracto urinario, meningitis Diarrea acuosa, dolores de
neonatal, enfermedades intestinales
cabeza, fiebre, uremia homiletica,
daos hepticos
Plesiomonas- infeccin
Nauseas, dolores de estomago y
diarrea acuosa, a veces fiebre,
dolores de cabeza y vomito
Fiebre tifoidea
Fiebre
Streptococus
Enfermedad gastrointestinal
Campylobacter jejuni
Escherichia coli
Plesomonas shigellodes
Salmonella sp
ENFERMEDAD/INFECCION
Enteritis
salmonelosis
Fuerte diarrea
_____________*Investigacin realizada por los profesores: Ruth Soto Castor y Alfonso Esquivel Herrera, del departamento El hombre y su ambiente de la
universidad Autnoma Metropolitana- Xochimilco.
METODOLOGA EMPLEADA
Para la caracterizacin de bacterias hetertrofas en el canal de Cuemanco, se tomaron tres muestras de agua del canal
que se encuentra en el puente Urrutia, las cuales fueron tomadas en condiciones de esterilidad, adems despus del
muestreo fueron conservadas en refrigeracin, a dichas muestras se les hicieron una serie de diluciones para sembrarlas
en placas de Agar Mc Konkey y agar nutritivo por lo que se sigui el siguiente procedimiento:
Para el recuento de microorganismos, se realizo un recuento en placa, esto con el objetivo de determinar el nmero de
bacterias formadoras de colonias presentes en las muestras colectadas, adems de realizar algunas series de pruebas
que revelen la existencia de bacterias hetertrofas.
Morfologa celular (tincin de Gram), tabla 2, para determinar si las bacterias encontradas son negativas o positivas y a
partir de esto seleccionar las cepas puras, para lo cual se prepararon 36 frotis en portaobjetos, de cada una de las
colonias aisladas en el agar nutritivo, para determinar cepas puras bacterianas.
1) Fijar las clulas con calor
2) Agregar Azul Violeta (Cristal Violeta) y
esperar 60
segundos. (Moradas/Gram
Positiva).
3) Enjuagar con agua.
4) Agregar Lugol y esperar 60 segundos.
Tabla 2. Procedimiento de 5) Enjuagar con agua.
la tincin de Gram 6) Agregar alcohol y acetona.
7) Enjuagar con agua.
8) Agregar Safranina y esperar 1 minuto.
Adems se realizaron las siguientes pruebas bioqumicas (Rosadas/Gram Negativa).
9) Agregar aceite de inmersin
convencionales:
Citrato de Simmons, el cual indica la capacidad de las bacterias de metabolizar el citrato, adems de la prueba
de la Ureasa, SIM, Produccin de gas, Reduccin de nitratos, reduccin de nitritos y la fermentacin de la
glucosa, sacarosa, lactosa, ADNasa y Gelatinaza.
Por ltimo, se determin la actividad microbiana a 12 antibiticos, con la ayuda de antibiogramas.
RESULTADOS
Las muestras tomadas fueron marcadas de las siguiente forma: X1, X2 Y X3, de las cuales al ser sembradas en placas
con agar Mc Konkey, resultaron colonias con las siguientes caractersticas: X1-Colonias rosas y transparentes, X2Colonias rosas con halo y colonias incoloras y X3- Colonias rosas y colonias amarillas.
Utilizando el mtodo por medio de estras en placas de agar nutritivo; de la muestra X1 se resembraron 8 colonias,
de X2 fueron resembradas 12 colonias y de X3 16
Las colonias de bacterias crecidas en stas placas se volvieron a sembrar en cajas a agar nutritivo, las cuales fueron de
color amarillo, a excepcin de la colonia 8, que fue de color amarillo-anaranjado en el agar nutritivo.
TINCIN DE GRAM: Se prepararon 36 portaobjetos con tincin de Gram, de cada una de las colonias aisladas en el agar
nutritivo, con el objetivo de determinar cules eran cepas puras, a las que haran las pruebas posteriores. Se obtuvieron:
17 cepas puras(X13, X15, X12, X211, X24, X22, X23, X29, X210, X31, X34, X21, X39,X17, X16, X27, X312) y las
restantes fueron mixtas.
Las cepas puras y mixtas fueron pasadas a medios lquidos da caldo nutritivo, al siguiente da las cepas puras se
resembraron en placas de agar nutritivo,
Las cepas puras fueron fueron evaluadas con las respectivas pruebas bioqumicas, y posteriormente fueron sometidas a
respuesta a 12 antibiticos, cuyos resultados se muestran a continuacin:
Con respecto a las pruebas bioqumicas ensayadas a las 17 cepas se identificaron los siguientes gneros de bacterias:
E. coli, P. morgagnii, Pseudomona, shigella Sp, C. diversus, Providencia Sp, Enterobacter Sp y Kliepsiella Sp.
Tabla 3, muestras los resultados totales obtenidos por las bioqumicas y antibiticos ensayados:
glucosa
sacarosa
lactosa
citrato
Anaer. Fac.
Indol
Ac. Sulfrico
Movilidad
Gas
Ureasa
ADN asa
Red. Nitratos
Red. Nitritos
ANTIBIOTIC.
AM
R
S
I
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AK
R
S
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GE
R
S
I
x13 x15 x12 x211 x24 x22 x23 x29 x210 x31 x34 x21 x39 x17 x16 x27 x312
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88.2353
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82.3529
17.6471
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DISCUSIN DE RESULTADOS
De acuerdo a los resultados obtenidos, las principales caractersticas que presentan las bacterias hetertrofas aisladas
en ste canal son las siguientes:
a).- Tienen una gran actividad hacia los azucares como la glucosa, sacarosa y lactosa,88,82 y 94%
respectivamente, utilizndolos como medios de nutrientes.
Al presentar una gran actividad hacia los carbohidratos, revela su importancia en las distintas fuentes de utilidad de los
mismos, como parte de una red alimenticia en la degradacin de los distintos azcares ya sea al hidrolizar las molculas
mayores, en ste caso algunos polisacridos, o degradarlos por otros medios realizando diferentes procesos tiles y
capaces en la digestin de azcares.
b).- Pocas veces utilizan el citrato como nica fuente de nutrientes (53%), como ya se dijo, utilizan como primera
fuente de nutricin a los carbohidratos.
Esta es la principal caracterstica para diferenciarlas de los dems grupos bacterianos, puesto que como ya se
mencion su primer recurso nutritivo son los carbohidratos, y en raras ocasiones aluden a otros compuestos orgnicos
como es el caso del citrato como nica fuente de carbono y fosfato de amonio como fuente de fosfato
c).- La mayora de las bacterias encontradas son anaerobios facultativos (88%).
Esto indica que algunas pueden vivir tanto en ausencia como en presencia de oxgeno.
d).- No producen Acido Sulfrico(100%).
Esto representa una caracterstica principal de ste grupo de bacterias (Hetertrofas).
e).- En medios de SIM, la mayora de las bacterias hetertrofas presentan movilidad (88%). Esto lleva a una
diferencia muy especfica a comparacin de otros grupos, pues esto indica la extensa distribucin de estas bacterias en
diferentes regiones de la corteza terrestre, es decir se les encuentra en todas partes.
f).- Otra caracterstica es la produccin de gas (82%). Como parte de la fermentacin y degradacin de compuestos
con alto contenido de carbono como es el caso de los azcares que contiene los medios suficientes para el crecimiento
de las bacterias hetertrofas, pues los principales son los que contienes carbono y nitrgeno.
g).- Algunas presentan actividad sobre la urea(76%), es decir en su metabolismo intervienen compuestos con alto
contenido de nitrgeno como la urea, adems participan en la degradacin de los mismo produciendo de sta forma
iones amonio, CO2 y H2, poseen enzimas ureasas.
h).- Son positivas a la ADNasa(88%).
i).- Todas reducen los nitratos y los nitritos (100 y 82%, respectivamente). Esto radica en la importancia de
participacin en los ciclos del nitrgeno y en la gran actividad de ambientes ricos en compuestos del nitrato y del nitrito.
De acuerdo con estos resultados el agua de los canales de Xochimilco es rica en compuestos puros orgnicos que
permiten el crecimiento no slo de bacterias hetertrofas, sino de una gran nmero de bacterias de otras familias y
algunas veces son productoras de enfermedades
Y con respecto a la respuesta a diferentes antibiticos ensayados, podemos decir de las bacterias hetertrofas que:
a).- Presentan resistencia a la ampicilina, Cefalotina y Carbenicilina,
b).- son sensibles al trimetoprim sulfametoxazol, a la Cefotaxima, Netilmicina, Pefloxacina, Nitrofurantona,
Ceftriaxona, Cloranfenicol, Amikacina y Gentamicina.
Esto indica al mismo tiempo de utilizar estos antibiticos como caracterizacin para las bacterias hetertrofas se debe
tener mucho cuidado en el tratamiento de las distintas enfermedades producidas por ste grupo de bacterias, puesto
que presentan resistencia a los antibiticos de uso muy comn para el tratamiento de enfermedades respiratorias, por lo
que sera de mucha utilidad tener acceso a los distintos antibiticos observados de las que las bacterias sean ms
sensibles.
Con los resultados de las respuestas a los doce antibiticos ensayados a stas bacterias, la comparacin con tres
cepas puras estndar(Tabla 4) para establecer una posible relacin con las cepas bacterias hetertrofas ( correlacin de
Pearson), encontramos una relacin mayor de las cepas X16 y X15 con Pseudomona aeruginosa, y una muy baja
relacin de stas dos cepas con E. coli y S. aureus, sin embargo hubo una estrecha relacin de las cepas restantes con
S. aureus y a la ves una mnima semejanza con E. coli. De las 17 cepas. En esto radica la importancia de utilizar
antibiticos necesarios en la prevencin de enfermedades producidas por bacterias hetertrofas, sin embargo, es
importante la clara participacin de stas bacterias dentro de los ciclos del nitrgeno y del carbono en los lugares donde
se encuentren, as como tambin por medio de la produccin de gas, su presencia en lugares expuestos a procesos de
putrefaccin de la materia muerta, como algunos ros, basureros, y especialmente en los canales como es el caso de
Xochimilco.
CORRELACIN DE PEARSON
CEPAS
X34
DISTANCIA
Pseu
Stap
h
E.
coli
glucosa
sacarosa
0
1
1
1
1
1
X31
lactosa
citrato
1
1
1
0
1
0
X39
Anaer. Fac.
Indol
Ac. Sulfrico
0
0
0
0
0
0
Movilidad
Gas
Ureasa
0
0
0
0
0
0
ADN asa
Red. Nitratos
I
R
I
R
0
1
0
0
0
1
S
I
0
0
1
0
0
0
PEF
I
R
0
0
0
0
0
1
NF
S
I
R
0
1
1
1
0
0
0
0
0
I
R
0
1
0
0
0
1
CB
I
R
CL
S
I
R
X27
X211
X312
X21
Red. Nitritos
ANTIBIOTIC
AM
X24
X17
X210
S
SXT
CTX
X12
NET
X13
X23
X29
X22
CF
STAPH
ECOLI
CRO
PSEU
X16
X15
AK
GE
S
I
R
1
0
0
1
0
0
1
0
1
CONCLUSIONES
De acuerdo a los resultados obtenidos, las principales caractersticas encontradas que presentan las bacterias
hetertrofas son las siguientes:
- Tienen gran actividad hacia los azucares como la glucosa, sacarosa y lactosa, utilizndolos como medios de
nutrientes
- Pocas veces utilizan el citrato como nica fuente de nutrientes
- La mayora de las bacterias encontradas son anaerobios facultativos
- No producen cido Sulfrico.
- En medios de SIM, la mayora de las bacterias hetertrofas presentan movilidad
- Otra caracterstica es la produccin de gas
- Algunas presentan actividad sobre la urea
- Son positivas a la ADNasa.
-Todas reducen los nitratos y los nitritos.
-Presentan resistencia a la ampicilina, Cefalotina y Carbenicilina,
- Son sensibles al trimetoprim sulfametoxazol, a la Cefotaxima,
Ceftriaxona, Cloranfenicol, Amikacina y Gentamicina.
Netilmicina,Pefloxacina,
Nitrofurantona,
La reduccin de los nitratos y los nitritos, la produccin de ureasa y su actividad sobre los sustratos ensayados revelan la
importancia de estos microorganismos en los ciclos del nitrgeno y la materia orgnica. De las bacterias encontradas, E.
coli, P. morgagnii, Pseudomona, shigella Sp, C. diversus, Providencia Sp, Enterobacter Sp y Kliepsiella Sp., se
encuentran en variedades extensas en los canales de Xochimilco.
Esto indica al mismo tiempo de utilizar estos antibiticos no solamente como forma para caracterizar a este grupo de
bacterias sino como una forma de proteger, cuando se ha sido infectado por un gnero bacteriano perteneciente a estos
por que se debe tener mucho cuidado en el tratamiento de las distintas enfermedades producidas por bacterias
hetertrofas, puesto que presentan resistencia a los antibiticos de uso muy comn para el tratamiento de enfermedades
respiratorias , por lo que sera de mucha utilidad tener acceso a los distintos antibiticos observados anteriormente a lo
que estas bacterias no ponen resistencias.
En esto radica la importancia de utilizar antibiticos necesarios en la prevencin de enfermedades producidas por
bacterias hetertrofas, sin embargo, es importante la clara participacin de stas bacterias dentro de los ciclos del
nitrgeno y del carbono en los lugares donde se encuentren, as como tambin por medio de la produccin de gas, su
presencia en lugares expuestos a procesos de putrefaccin de la materia muerta, como algunos ros, basureros, y
especialmente en los canales como es el caso de Xochimilco.
La actividad de degradar azcares como nica fuente de nutrientes hace importante la presencia de estas bacterias en
los canales de Xochimilco, puesto que funcionan como autopurificacin del agua, y participan en la red alimenticia
favoreciendo los nutrientes ms sencillos a otros organismos que se encuentran en estos canales.
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