LABORATORIO NOVENO: EXTRACIN DE ADN Y HEMOCLASIFICACIN

Objetivos: Aplicar los conocimientos previos del grupo sanguneo ABO y RH y ADN y correlacionarlos con la prctica.
Fundamento terico: La saliva arrastra las clulas del epitelio que recubre las paredes internas de la boca y que se
estn desprendiendo constantemente. La sal comn (NaCl), con esa concentracin, es un medio hipertnico que provoca
el estallido de las clulas y los ncleos, quedando libre las fibras de cromatina. El detergente cumple la misin de formar
un complejo con las protenas histonas y separarlas del ADN.
La purificacin del DNA es importante porque permite: Identificar mutaciones, Ver caractersticas propias de los tipos de
DNA (Polimorfismo), Para clonar (Genes especficos, fragmentos de cromosomas o individuos), Aislar DNA afectado y
compararlo con uno bueno, Detectar en las muestras, la presencia de un largo espectro de agentes patognicos,
Identificar resistencia microbiana, Evaluar desordenes genticos, neurodegenerativos, neoplsicos, inmunolgicos,
Medicina forense para la identificacin de personas, Para hacer tests de paternidad.
Hemoclasificacin: Los glbulos rojos, eritrocitos o hemates presentan en su membrana celular unas protenas que
pueden variar entre los individuos, dichas protenas estn codificadas en el ADN de cada clula (genotipo) pero su
expresin o fenotipo se observa casi exclusivo en los glbulos rojos. La ingeniera gentica ha creado unas sustancias
llamadas anticuerpos (anti-A, anti-B y anti-RH), los cuales sirven para identificar los grupos sanguneos.
Material y reactivos: Sal comn (1,5 g), Bicarbonato de sodio (5 g), Agua mineral (120 mL), Lavavajillas (5 mL),

Saliva de la boca (2 mL, aproximadamente), 15 mL de alcohol etlico 96. Hemoclasificadores, tubos para muestras
de sangre, algodn, lancetas y agujas. Lminas, tubos, papel peridico, microscopio, marcador no borrable, palillos
y clorox.
Procedimiento:
Extraccin de ADN:
1. Deposite en el tubo 10 mL de solucin tampn fro que ha pipeteado.

2. Escupe unas siete veces en el interior del frasco, teniendo la precaucin de no haber ingerido alimento alguno
en los 15 minutos previos.
3. Mueve ligeramente el frasco para que se mezclen bien.
4. Pipetea 10 mL de alcohol de 96 fro y lo deja caer resbalando por las paredes del frasco.
5. En la interfase agua-alcohol se empiezan a visualizar inmediatamente unas fibras blanquecinas que son las
molculas de ADN. Como complemento, se pueden recoger estas fibras con una varilla de cristal y teirlas
con azul de metileno para observarlo al microscopio ptico.
Hemoclasificacin:
1.
2.
3.
4.
5.

Las muestras de sangre son tomadas por la docente.

En una lmina divdala en tres parte y en cada una coloque una gota de sangre
Adicione un hemoclasificador teniendo en cuenta el nombre
Con un palillo mezcle independientemente cada uno y observe a trasluz.
Si se aglutin, ese es el grupo sanguneo.

Informe de laboratorio:
Individualmente, elabore una correlacin de lo observado con lo visto en teora. No se le olvide consultar en libros o
internet.