Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
LAS ENZIMAS
6.1 INTRODUCCIN
Dentro de las protenas que han alcanzado un mayor desarrollo y especializacin
en cuanto a su funcin se encuentran las enzimas. Las enzimas son
biomolculas proteicas altamente especializadas como catalizadores con lo cual
participan de manera destacada en todos los procesos metablicos que tienen
lugar en los organismo vivos, son, por tanto, biocatalizadores. El trmino enzima
viene de "En - zima" es decir, en la levadura, pues fue primeramente en las
levaduras que fermentaban los azcares para producir el alcohol donde se
estudiaron estas sustancias. Producto de ello se conocan antiguamente como
fermentos.
La mayor parte de las sustancias orgnicas existentes en los animales y
vegetales son estables a temperaturas ordinarias y si se alteran algo, lo hacen
lentamente; pero esas mismas sustancias se transforman rpidamente al
ponerse en contacto con las enzimas, descomponindose gradualmente en otras
ms sencillas y, por ltimo, en anhdrido carbnico y agua por oxidacin, o sirven,
por el contrario como sillares constitutivos por la integracin de molculas de
mayor peso y complejidad.
La catlisis es la aceleracin de un proceso qumico que transcurre lentamente
en las condiciones normales. Quiere esto decir que las enzimas; como
catalizadores que son, catalizan reacciones posibles, las cuales transcurren aun
en ausencia de ellas, pero muy lentamente. Esto es muy importante y no debe
perderse de vista, pues nos explica que las reacciones que ocurren en el
organismo viviente son reacciones lgicas que siguen y cumplen todas las leyes
qumicas.
La actividad cataltica en la enzima recae en la parte proteica. En su constitucin
qumica algunas enzimas requieren de metales (zinc, cobre, molibdeno,
magnesio, etc.) para realizar su accin. A veces algunas enzimas presentan
grupos prostticos (no proteico) tales como hemoporfirinas u otros compuestos
y muy frecuentemente requieren de coenzimas como elementos funcionales
encargados de actuar como donadores o aceptadores de tomos o grupos de
tomos. Las coenzimas son compuestos formados en el metabolismo
principalmente a partir de vitaminas. La separacin entre vitamina y coenzima a
veces es muy difcil de determinar. La vitamina es un factor nutricional, mientras
que la coenzima es un factor metablico formado a partir, generalmente, de una
vitamina.
La unin entre la apoenzima y la coenzima puede ser muy variada, desde una
unin muy estrecha, hasta una separacin total. La parte proteica es la
responsable de la actividad enzimatica que se pierde al ser destruida ya sea por
calentamiento o por desnaturalizacin. La coenzima muchas veces constituye la
parte funcional. Tambin existen enzimas que no poseen coenzimas.
La constitucin qumica de la apoenzima es similar a la ya sealada para las
protenas poseyendo todas las propiedades inherentes a las mismas, tambin
con su estructura primaria, secundaria y terciaria.
enzimticas
est
condicionada
Esto se debe a que entre enzima (E) y sustrato (S) se establece una relacin
muy estrecha formando un complejo llamado Enzima-Sustrato (E - S)
posibilitando la formacin de un compuesto de transicin (CT) activado que
permite la reaccin y la transformacin del sustrato en producto (P). Los estados
de este proceso seran:
Ntese que la energa gastada para subir, es liberada en su cada; esto ilustra el
concepto de que los cambios qumicos globales en una reaccin son
independientes del camino de la reaccin.
Varios son los factores que parecen contribuir al incremento de la velocidad de
las reacciones catalizadas por enzimas. En primer lugar la enzima puede fijar el
sustrato de forma que el enlace susceptible de modificaciones se halle muy cerca
del grupo cataltico del centro activo de tal manera que el estado de transicin
sea ms factible. En segundo lugar algunas enzimas se pueden combinar con el
sustrato formando un intermediario covalente inestable. Otras enzimas pueden
proporcionar grupos funcionales aceptadores o donadores de protones
efectuando una catlisis cido - bsica y otros, por ltimo, pueden producir una
modificacin en determinados enlaces del sustrato que permitan una reaccin
ms fcil.
6.3
Tres son los factores principales que pueden actuar sobre la actividad enzimtica
de modo sustancial; la concentracin de los elementos reaccionantes, el pH y la
temperatura.
6.3.1. Concentracin
Al explicar el mecanismo de la accin enzimtica qued establecido que la
enzima se une al sustrato como paso imprescindible para que ocurra la reaccin.
En toda reaccin enzimtica debemos suponer la presencia de los siguientes
estados: enzima, sustrato, complejo enzima - sustrato; complejo enzima -
Esto es muy importante, pues como todas las reacciones enzimticas estn en
cadena generalmente, donde el producto de una reaccin es el sustrato del
siguiente, la concentracin de los diferentes productos acta regulando el
proceso en su conjunto.
6.3.2. pH
La reaccin del medio es de gran importancia en toda enzima. La enzima slo
es activa en una zona determinada del pH, que vara desde 1.5 para la pepsina
hasta 8.5 - 10 para la tripsina y la fosfatasa alcalina de los mamferos.
Con esta y algunas otras excepciones, el pH ptimo de la mayora est
comprendido entre 5 y 7. La dependencia entre la eficacia enzimtica y el pH
tiene su explicacin en su naturaleza proteica.
Cuando la enzima se va alejando de su pH ptimo ya sea hacia la zona cida o
bsica, comienza a disminuir su actividad hasta que finalmente se inactiva. Esto
se explica por el hecho de su carcter proteico y la influencia del pH sobre la
estructura del centro activo de la enzima. Igualmente el pH puede influir sobre la
estructura inica del sustrato.
6.3.3. Temperatura
La velocidad de casi todas las reacciones qumicas, catalticas o no, aumenta
con la temperatura. Las reacciones catalizadas por enzimas obedecen tambin
a esta ley cintica general, pero con alguna salvedad. La elevacin de la
temperatura estimula la accin enzimtica hasta cierto grado (temperatura
ptima), cercana al de los animales de sangre caliente, pasado el cual se debilita
y hasta es destruida, dado el carcter termolbil de la enzima.
Esta inactivacin de la enzima est ligada a su naturaleza proteica y a su estado
coloidal (desnaturalizacin y en cierto caso coagulacin). En la figura 6,4 se
puede observar esta dependencia.
Activadores metlicos
Inhibidores competitivos
6.4.3.
Inhibidores no competitivos
3. Hidrolasas
3.1 Estearasas
3.2 Carbohidrasas
3.3 Hidrolizan grupos ter
3.4 Peptidasas
3.5 Desaminasas
3. 6 Actan sobre enlaces anhidro-cido
4.- Liasas
4.1Carbonocarbonoliasas
4.2
Carbono-oxgeno liasas
4.3 Carbono-nitrgeno liasas
4.4 Carbono-sulfuro liasas.
5. Isomerasas
5.1 Racemasas y epimerasas
5.2 Cis-trans isomerasas
5.3
oxidoreductasas
Intramolecular
5. 4 Intramolecular transferasas
6. Ligasas o sintetasas
6. 1 Forman enlaces carbono-oxgeno (C-O)
6.2 Forman enlaces carbono-sulfuro (C-S)
6.3 Forman enlaces carbono-nitrgeno (C-N)
6.4 Forman enlaces carbono- carbono (C-C).
Estudiaremos las ms importantes de cada grupo, al mismo tiempo que daremos
su clasificacin particular para que sirvan de gua para el estudio posterior de
ellas dentro del metabolismo.
6.6.1 Oxidorreductasas
Este grupo de enzimas, vitales para el funcionamiento celular, constituye uno de
los ms interesantes, a la vez complejo, del metabolismo
La energa que requieren los organismos superiores para el mantenimiento de
sus funciones vitales es obtenida de la oxidacin de los productos alimenticios.
El resultado qumico global de estos procesos de oxidacin es un continuo
consumo de oxgeno y la produccin de anhdrido carbnico y agua. Este
importante trabajo es realizado por una serie de enzimas, conocidas como
Oxidorreductasas, redoxasas o enzimas redox, o sea, enzimas que catalizan
reacciones de oxidacin-reduccin.
Recordemos que con el nombre general de oxidacin se indican determinadas
reacciones que transcurren con prdida de electrones. La prdida de electrones
.
El NAD, o como veremos ms adelante el NADP, es el elemento encargado de
fijar los dos hidrgenos procedentes del sustrato, hecho que ocurre en varias
etapas segn veremos en la figura 6.9.
Mientras un tomo de hidrgeno (un electrn y un protn H) se fija a un carbono
del ncleo piridnico, el otro electrn neutraliza la carga positiva del nitrgeno y
el segundo protn queda en solucin.
Existen unas 200 enzimas que dependen del NAD y del NADP para realizar su
accin. Se conocen con el nombre de Deshidrogenasas anaerobias ya que no
necesitan de la presencia del oxgeno para realizar su trabajo.
Estas deshidrogenasas actan sobre diferentes sustratos que poseen en su
estructura funciones alcoholes a los cuales deshidrogenan pasando estas a
aldehdo o cetona, segn se trate del carbono que posee el grupo alcohol. A
manera de ejemplo citaremos la lctico deshidrogenasa que produce la
deshidrogenacin del cido lctico segn la ecuacin:
Las enzimas que contienen el FAD y al FMN como grupo prosttico, estos se
mantienen firmemente unidos actuando ms bien como grupo prosttico que
como coenzimas
Por otra parte los hidrgenos presentes en las coenzimas reducidas (FADH y
FMNH ) pueden pasar en unos casos a los citocromos y en otros a la coenzima
Q continuando de esta manera el proceso oxidorreduccin.
Las flavoprotenas parecen desempear una doble funcin en los procesos de
oxidacin-reduccin celular.
Algunas son intermediarias entre las deshidrogenasas que actan con el NAD y
el citocromo oxidado, se denominan citocromos reductasas: otras actan en
diversos sustratos que son productos del metabolismo, de importancia variable.
Estas ltimas inician, por tanto, la oxidacin de los metabolitos.
A manera de ejemplo una reaccin catalizada por una deshidrogenacin aerobia
con el FAD como coenzima.
2
+3
Todo hace suponer que presentan una accin destacada en la oxidacin del
NADH
4. Hemoenzimas
2
Son enzimas constituidas por una protena unida a uno o varios grupos hemo en
los cuales el hierro puede estar bi o trivalente, o variar entre estas valencias
durante la accin enzimtica. Entre ellas se encuentran los citocromos, las
catalasas y las peroxidasas.
Citocromos: Son enzimas mitocondriales que presentan constitucin de
cromoprtidos. Su identificacin y estudio se realizan por bandas tpicas de
absorcin en su estado reducido. En la cadena respiratoria, participan en el
transporte de electrones desde las flavoprotenas hasta las citocromo oxidasa.
El sistema de los citocromos de los animales superiores est formado por tres
componentes: citocromo oxidasa, citocromo B y citocromo C. Sealaremos
algunas caractersticas de ellos.
La Citocromo oxidasa es una de las enzimas ms importantes en los procesos
de oxidacin celular, pues es la nica que cataliza la oxidacin de los citocromos
por el oxgeno. Aunque existen otras posibilidades para la utilizacin del oxgeno
por los tejidos, el sistema que emplea la citocromo oxidasa y los citocromos es
de gran importancia. En la prctica es el responsable de la mayor parte de las
oxidaciones.
La citocromo oxidasa est, junto con el oxgeno, en uno de los extremos de la
cadena de estas oxidaciones, lo cual, en razn de ser la principal de todas, le da
importancia especial.
El nico sustrato que se conoce de la citocromo oxidasa es el citocromo C
catalizando su oxidacin por el oxgeno molecular. Es el nico mecanismo
biolgico conocido capaz de oxidar al citocromo C reducido.
La citocromo oxidasa es una protena con ferro porfirina como grupo prosttico.
Es inactiva por los cianuros y el xido de carbono. Algunos autores la consideran
igual al sistema formado por los llamados citocromo A y A3. Se encuentra
presente en todas las clulas animales y vegetales de organismos que necesitan
oxgeno para la vida normal.
Los citocromos, incluyendo a la citocromo oxidasa como uno de ellos, pueden
existir en dos estados de oxidacin. Al estado oxidado el tomo de hierro de la
porfirina es trivalente, mientras que es estado reducido es bivalente.
El citocromo B forma parte de un complejo enzimtico que determina la oxidacin
del cido succnico. Es oxidado con facilidad por el citocromo C y reducido
rpidamente por el sistema enzimtico que oxida al cido succnico.
El citocromo C es el ms estudiado de todos por la estabilidad que tiene y la
concentracin relativamente alta que se encuentra en los tejidos animales. Los
preparados considerados ms puros contienen 0,465% de hierro. Por
tratamientos con cidos se ha podido separar del citocromo C una porfirina que
result igual a la protoporfirina de la hemoglobina: por tanto, su grupo prosttico
es una hierro porfirina, la cual se encuentra unida a la parte proteica por medio
del aminocido cistena (figura 6.13).
En las oxidaciones celulares del sistema de los citocromos acta en cadena
(cadena respiratoria). La citocromo oxidasa (citocromo A + A ) cataliza la
oxidacin del citocromo C por el oxgeno del aire. A su vez, el citocromo C
oxidado, oxida por una parte al citocromo B que acta en el sistema oxidante del
3
cido succnico y por otra, a enzimas del tipo de las flavo protenas, que actan
en las oxidaciones celulares.
6.6.2. Transferasas
Las Transferasas son un grupo amplio de enzimas del metabolismo intermediario
que tienen como caractersticas catalizar reacciones de transferencia entre dos
sustratos. Pueden transferir tomos, molculas o restos moleculares de un
sustrato que acta como donador del grupo en cuestin a otro que acta como
aceptor. Realizan un papel muy importante en el metabolismo y en particular en
ciertas reacciones de sntesis. Entre las principales transferasas se cuentan:
transaminasas,
transcetolasas,
transaldolasas,
transglucosidasas
y
transpeptidasas.
Transmetilasas
Son tambin llamadas metil transferasas y catalizan la transferencia del grupo
metil. Generalmente la transferencia se hace a partir de la metionina que posee
grupos metilicos hbiles.
Estos grupos metlicos son necesarios en las rutas biosintticas de varias
sustancias entre otras en la fonacin de creatina, colina, fosfolpidos, etc., as
como para metilar los productos de excrecin.
Transacetilasas
Se conocen tambin como acetiltransferasas y las mismas catalizan la
transferencia del radical acetil. Su coenzima es la coenzima A.
Las transacetilasas ms importantes estn comprendidas dentro del complejo de
la pirvico deshidrogenasa (pirvico descarboxilasa) donde actan aceptando al
grupo acetl del cido lipoico el cual es recibido por la coenzima A. Esta enzima
recibe el nombre de lipoato-acetil transferasa y la reaccin en cuestin aparece
en la figura 6.15.
La coenzima A es una estructura algo compleja que est formada por la unin
del cido pantotnico (vitamina del complejo B), el cido adenlico y un resto de
cisteina (figura 6.16). El resto de cistena posee un grupo de azufre (SH) que
constituye la parte activa de la coenzima,
La coenzima A es adems un compuesto muy activo dentro del metabolismo
pues participa en la activacin de los cidos grasos junto y a las tiolasas dentro
de la beta oxidacin de los cidos grasos. Adems, en la descarboxilacin del
cido cetoglutrico en el ciclo de Krebs acta formando parte del succinl CoA.
Una reaccin muy importante relacionada con esta coenzima es ceder el grupo
acetl para formar la acetilcolina, transmisor sinptico del sistema nervioso.
6.6.3. Hidrolasas.
Las hidrolasas son enzimas que producen la hidrlisis de los sustratos. Es decir,
rompen determinados enlaces (C-0, C-N y P-0) susceptibles de ser hidrolizadas
por el agua.
Las hidrolasas se encuentran en el tubo digestivo donde participan
destacadamente en la hidrlisis de los compuestos ingeridos, previo a la
asimilacin. Tambin existen las hidrolasas en los lisosomas, partculas
subcelulares que actan en la digestin intracelular.
Entre las principales hidrolasas tenemos: las desaminasas que incluyen la
ureasa, arginasa, glutaminasa, asparaginasa. etc. Las protasas que incluyen
dos tipos: las proteinasas o endopeptidasas con la pepsina, tripsina y
quimotripsina y las peptidasas o exopeptidasas que incluyen las dipeptidas,
carboxipeptidas y aminopeptidasas Las estearasas con la lipasa, colinesterasa.
lecitinasa y fosfatasa. Las carbohidrasas que incluyen las glucosidasas como las
maltasas, sacarasas y lactasas y las poliasas que son amilasas, celulasas,
hialuronidasas, etc. Adems, pertenecen a las hidrolasas las nucleasas y las
ATP asas.
Dentro del metabolismo tendremos la oportunidad de estudiar la mayora de
estas enzimas.
6.6.4. Liasas:
Constituye un grupo heterogneo de enzimas que catalizan la remocin de
grupos de sustratos por mecanismos diferentes a la hidrlisis. Generalmente
actan rompiendo el enlace C - C o C - O. Este grupo incluye las descarboxilasas,
hidratasas, fosforilasas y aldolasas.
Las principales enzimas de este grupo sern estudiadas en el metabolismo.
Veamos el caso de las descarboxilasas como ejemplo de grupo.
Descarboxilasas
Son enzimas que catalizan la reaccin de descarboxilacin o remocin del grupo
carboxlico como CO . Presentan como coenzima un derivado de la vitamina B
o tiamina, conocido como pirofosfato de tiamina.
2
6.6.5. Isomerasas
Estas enzimas catalizan todas las reacciones de interconversin de ismeros
entre s, Incluyen las racemasas, epimerasas, cis-transisomerasas y las
cetoaldoisomerasas.
6.6.6. Ligasas o sintetasas.