PRUEBAS RPIDAS PARA LA OBTENCIN DE

MICROORGANISMOS

INTRODUCCIN
Una de la tareas fundamentales del laboratorio de microbiologa es la aplicacin
de una metodologa precisa que permita la identificacin de los microorganismos
con el objetivo de identificar el agente etiolgico responsable del proceso
infeccioso y para conocer las implicaciones patolgicas, la evolucin clnica, y
aplicar una terapia antimicrobiana eficaz, un pilar fundamental en la prctica de la
microbiologa clnica lo constituye la asignacin de especie a un aislamiento
microbiano. Las pruebas bioqumicas se emplean para identificar de forma clara y
precisa, la presencia o ausencia de una enzima, de un grupo de enzimas, o de
una va metablica completa en uno o ms microorganismos.

MTODOS FENOTPICOS DE IDENTIFICACIN BACTERIANA

Actualmente, la identificacin bacteriana se realiza por medio de mtodos
convencionales, basados en las caractersticas fenotpicas, puesto que su
realizacin y coste los hace ms asequibles. Los mtodos genotpicos suelen
reservarse para las bacterias que no se pueden identificar con mtodos
convencionales.
CARACTERISTICAS DE UN MTODO RPIDO/AUTOMATIZADO IDEAL

Preciso
Rpido y productivo
Econmico
Aceptable
Realizacin simple
Entrenamiento

Reactivos comunes
Reputacin de la compaa
Buen servicio tcnico
Requerimientos de espacio y utilidad ptimos

1.

IDENTIFICACIN

1.1.

Caractersticas microscpicas.

El estudio microscpico en fresco y tras tincin revela la forma, la manera de

agruparse, la estructura de las clulas y su tamao. Las tinciones son el primer
paso, y ocasionalmente el nico, para la identificacin bacteriana. Las tinciones
ms utilizadas e imprescindibles son la del azul de metileno y la de Gram. La
tincin de Gram es, a menudo, la primera y nica herramienta de la que nos
servimos para hacer un diagnstico provisional en el proceso de identificacin de
la mayora de las bacterias teniendo en cuenta tambin el tipo de muestra y el
diagnstico presuntivo del proceso infeccioso.
Clasificacin en reas de acuerdo a lo que se busca:

Sistemas para facilitar la toma de muestras

Mtodos para ayudar al procesamiento de las muestras
Sistemas de cuantificacin microbiolgica
Mtodos para identificacin y cuantificacin de microorganismos
Sistemas especiales para anlisis de muestras de aguas, ambientales y
superficies
Sistemas de identificacin mediante mtodos moleculares
Mtodos inmunolgicos para deteccin y/o cuantificacin de
microorganismos
Otros mtodos miscelneos

1.2. Caractersticas macroscpicas

Morfologa
La morfologa de las colonias es fundamental en la identificacin preliminar y
para la diferenciacin de los microorganismos. Para la observacin morfolgica
es preferible examinar colonias de cultivos frescos crecidas en medios no
selectivos. En este paso de la identificacin es muy importante el aislamiento
de las bacterias en cultivo puro ya que esta debera estar compuesta por un
solo tipo de microorganismos y procedera de una nica clula. Las colonias de
una nica especie, cuando crecen en medios especficos y bajo condiciones
idneas se describen por sus 5 caractersticas de tamao, forma, consistencia,
y a veces por su color. El tamao de las colonias bacterianas es generalmente
uniforme entre una misma especie. Por ejemplo, las colonias de estreptococos
tienen un tamao ms pequeo que las de los estafilococos y las
enterobacterias. La forma esta determinada por los bordes y el grosor de la
colonia. El borde puede ser liso o rugoso e irregular; la colonia, abultada o
plana. La textura de la colonia es tambin importante. Puede variar desde seca
a viscosa, con superficie lisa o granular. Algunos microorganismos producen
una colonia pigmentada, lo que puede ser de ayuda en el proceso de
identificacin (ejemplo: Pseudomonas aeruginosa (pigmento verde), Serratia
marcescens (pigmento rojo) aunque en una misma especie puede haber cepas
no pigmentadas.
Hemolisis

Algunas bacterias producen hemolisinas que causan la lisis de los hemates en

medios que contienen sangre. Esta hemlisis puede ser beta (zona clara
alrededor de la colonia) o alfa (halo de color verdoso alrededor de la colonia).
Cultivo
Medios de cultivo. En los medios de cultivo las bacterias se multiplican y es
necesario esperar al menos 18-24 horas para visualizarlas. En trminos
generales todas las bacterias tienen unos requerimientos nutricionales
imprescindibles para su crecimiento. Necesitan una fuente de energa, una
fuente de carbono, una fuente de nitrgeno, algunas sales, oligoelementos y
agua. Todos los medios de cultivo han de cumplir como mnimo con estos
requisitos pero en muchas ocasiones se necesitan adems otras sustancias
adicionales como vitaminas, factores o aminocidos esenciales.

Pruebas que se utilizan en la identificacin preliminar, con lectura

inmediata:

Catalasa. La catalasa es un enzima presente en la mayora de los

microorganismos que poseen citocromos. Las bacterias que sintetizan
catalasa hidrolizan el perxido de hidrgeno en agua y oxigeno gaseoso
que se libera en forma de burbujas. El principal objetivo de esta prueba es
separar Micrococacceae (positiva) de Streptococcus spp. y Enterococcus
spp. (Negativa)

Oxidasa. Esta prueba sirve para determinar la presencia de enzimas

oxidasas. La reaccin de la oxidasa se debe a la presencia de un sistema
citocromooxidasa que activa la oxidacin del citocromo el cual es reducido
por el oxgeno molecular producindose agua o perxido de hidrgeno
segn la especie bacteriana. El oxgeno acta por tanto como aceptor final
de electrones en la cadena transportadora de electrones. Por lo general, el
sistema citocromooxidasa solo se encuentra en las bacterias aerobias,
algunas anaerobias facultativas y, excepcionalmente, en alguna
microaerfila (Vibrio fetus), pero las bacterias anaerobias estrictas carecen
de actividad oxidasa. Asimismo, la presencia de oxidasa va ligada a la
produccin de catalasa, ya que sta degrada el perxido de hidrgeno que
se produce como consecuencia de la reduccin del oxgeno y cuya
acumulacin es txica.

Pruebas rpidas, con lectura en menos de 6h:

Hidrlisis del hipurato. Demuestra la capacidad de algunas bacterias para

hidrolizar el hipurato de sodio cido benzoico y glicina por la accin de la
enzima hipuricasa. Como indicador de la reaccin se utiliza ninhidrina. Esta
prueba se utiliza en la identificacin de Campylobacter jejuni, Listeria
monocytogenes, Gardnerella vaginalis y Streptococcus agalactiae.

-galactosidasa (ONPG). Esta prueba demuestra la presencia de la

enzima - galactosidasa. Hay bacterias que a pesar de poseer enzimas que
hidrolizan la lactosa ( - galactosidasas), no pueden actuar sobre ella
porque les faltan las enzimas extracelulares apropiadas (permeasas). Para
conocer si un microorganismo es productor de -galactosidasa, basta
aadir el compuesto orgnico O-nitrofenil- -D-galactopiransido (ONPG)
que es incoloro. Si la bacteria posee las enzimas hidrolizantes (
-galactosidasa), el compuesto se transforma en ortonitrofenol, un derivado
cromognico de color amarillo. Todas las bacterias fermentadoras lentas de
la lactosa son -galactosidasa positivas.

Aminopeptidasa: PYR. La Lpirrolidonil--naftilamida sirve como sustrato

para la deteccin de pirrolidonil peptidasa. Se utiliza principalmente en la
identificacin de Streptococcus pyogenes y Enterococcus spp. Tambin en
la diferenciacin de Staphylococcus lugdunensis de otros estafilocos
coagulasa negativa.

LAP. Se utiliza para la deteccin de la enzima leucina aminopeptidasa

(LAP) y es una de las pruebas para la identificacin de cocos grampositivos
catalasa negativa; diferencia especficamente los gneros Aerococcus y
Leuconostoc de Streptococcus, Enterococcus, Lactococcus, y Pediococcus.

Ureasa. Determina la capacidad de un organismo de desdoblar la urea

formando dos molculas de amoniaco por accin del enzima ureasa. Esta
actividad enzimtica es caracterstica de todas las especies de Proteus y se
usa sobre todo para diferenciar este gnero de otras enterobacterias que
dan negativo o positivo retardado. La prueba tambin se utiliza para
diferenciar Physobacter phenylpyruvicus de Moraxella spp. Helicobacter
pylori y Brucella spp. Tambin hidrolizan la urea. Esta prueba puede ayudar
en la identificacin de Cryptococcus spp. Que produce un resultado positivo
despus de una incubacin prolongada.

Indol. Mediante esta prueba se detecta la liberacin de indol en un cultivo

bacteriano. Dicha liberacin se debe a la degradacin del aminocido
triptfano mediante el enzima triptofanasa.

Pruebas lentas, con lectura de 18 a 48h

xido-Fermentacin. Mediante esta prueba se va a determinar si la

utilizacin de los hidratos de carbono por parte de un microorganismo se
realiza por va oxidativa (proceso aerbico, presencia de oxgeno) o por va
fermentativa (proceso anaerbico, ausencia de oxgeno).

Reduccin de nitratos. Sirve para determinar la capacidad de un

organismo de reducir el nitrato en nitritos. Se utiliza para asignar bacterias a
la familia Enterobacteriaceae, en la diferenciacin de Moraxella catarrhalis
del gnero Neisseria y en la identificacin de bacilos grampositivos
aerobios.

Rojo de metilo. El rojo de metilo es un indicador de pH. Acta entre pH 4,2

y 6,3 variando desde rojo (pH 4,2) a amarillo (pH 6,3). Mediante esta
prueba se comprueba la capacidad de un microorganismo de producir y
mantener estables los productos terminales cidos de la fermentacin de la
glucosa por la va de la fermentacin cidomixta. Se utiliza como parte de la
identificacin a nivel de especie de los bacilos entricos gramnegativos.

Voges-Proskauer. Permite observar si el microorganismo fermenta la

glucosa por la va butanodilica. Si es as, se forma un producto intermedio
(acetona) que forma un complejo de color rojizo con el -naftol. Se usa en
la identificacin a nivel de especie de bacilos entricos gramnegativos,
Aeromonas spp., y Vibrio spp.

Agar hierro de Kligler. Mediante esta prueba se puede determinar:

a. La capacidad de un microorganismo de metabolizar un hidrato de
carbono especfico (en este caso glucosa, lactosa o ambas) incorporado
en un medio de crecimiento bsico.
b. Produccin o no de gases: CO2 e H2 como productos finales del
metabolismo de los hidratos de carbono.

c. Produccin de cido sulfhdrico (SH2). El medio de Kligler contiene como

hidratos de carbono la glucosa y la lactosa. Existe otro medio, el triple
sugar iron (TSI) que posee un tercer hidrato de carbono, la sacarosa.

Fermentacin de azcares. Las bacterias anaerobias o anaerobias

facultativas a menudo fermentan carbohidratos cidos orgnicos y gas (H2
o CO2). Estos pueden detectarse incluyendo en el medio un indicador de
pH.

Hidrlisis de la esculina. Hay microorganismos con capacidad de

hidrolizar la esculina en esculetina y glucosa. La esculetina reacciona con
una sal de hierro para formar un compuesto castao oscuro o negro. El
citrato frrico acta como indicador de la hidrolisis de la esculina. Si se
aade bilis al medio se inhibe el crecimiento de la mayora de
microorganismos del gnero Streptococcus pero no de la especie
Streptococcus bovis y tampoco inhibe el crecimiento de microorganismos
de los gneros Enterococcus y Listeria.

Coagulasa. Permite determinar la capacidad de coagular el plasma por la

accin de la enzima coagulasa. Se utiliza para diferenciar S. aureus
(coagulasa positivo) de otras especies de Staphylococcus. La prueba de la
coagulasa en tubo se puede leer tras incubacin de 4h, pero si es negativa
debe incubarse hasta 24h.

Fenilalanina-desaminasa. Esta prueba determina la capacidad de un

microorganismo para desaminar el aminocido fenilalanina en cido
fenilpirvico por la actividad enzimtica de la fenilalanina desaminasa, con
la consiguiente acidez resultante. Esta actividad enzimtica es
caracterstica de todas las especies de los gneros Proteus, Providencia y
Morganella por lo que se utiliza para separar estos tres gneros de otros
gneros de enterobacterias.

ADNasa. Se basa en la capacidad que poseen ciertas bacterias para

hidrolizar enzimticamente el ADN produciendo una mezcla de mono y
polinucletidos.

Hidrlisis de la gelatina. Esta prueba muestra la capacidad de ciertos

microorganismos para hidrolizar la gelatina a pptidos y aminocidos,
mediante la accin de enzimas especficas denominadas gelatinasas.

Descarboxilasas. La descarboxilacin es un proceso en el cual las

descarboxilasas atacan el extremo carboxilo de los aminocidos, formando
la correspondiente amina. Los tres aminocidos que se ensayan en la
identificacin de enterobacterias son arginina, lisina y ornitina. La
descarboxilacin de lisina y ornitina da cadaverina y putrescina (diaminas),
mientras que la descarboxilacin de arginina da citrulina por accin de una
dehidrolasa. Esta prueba se debe realizar con un tubo control que contiene
el medio base sin aminocido. Como la descarboxilacin es una reaccin
anaerbica, se debe cubrir el medio con una capa de aceite mineral estril.
El proceso se produce en dos etapas: por fermentacin de la glucosa se
produce una acidificacin del medio (pH < 6,0), apareciendo color amarillo.
La acidificacin es necesaria para que ocurra la descarboxilacin. Este
ltimo proceso da lugar a la formacin de las aminas que elevan el pH con
el consiguiente viraje del indicador a color violeta. Esta prueba se utiliza
tanto en la identificacin de bacilos gramnegativos como de bacilos y cocos
grampositivos.

Lipasa. Se basa en la capacidad que tienen ciertas bacterias de

descomponer las grasas en cidos grasos y glicerol, por accin de la
enzima lipasa.

Lecitinasa. La prueba de la lecitinasa pone de manifiesto la produccin de

dicha enzima por determinados microorganismos, capaces de actuar sobre
la lecitina, sustancia orgnica nitrogenada y fosfatada, contenida
principalmente en la yema de huevo.

Utilizacin de citrato. Esta prueba sirve para determinar si un

microorganismo es capaz de utilizar citrato como nica fuente de carbono y
compuestos amoniacales como nica fuente de nitrgeno en su
metabolismo, provocando una alcalinizacin del medio. Entre las
enterobacterias estas caractersticas se dan en los siguientes gneros:
Enterobacter, Klebsiella, Serratia, Citrobacter y algunas especies de
Salmonella. Sin embargo, Escherichia, Shigella, Yersinia, Salmonella typhi y
Salmonella paratyphi son incapaces de crecer utilizando citrato como nica
fuente de carbono.

Utilizacin de malonato. Pone de manifiesto la capacidad que poseen

determinadas bacterias de utilizar el malonato de sodio como nica fuente
de carbono, con la consiguiente liberacin del catin, que en presencia de
iones agua produce alcalinidad. Solamente los microorganismos que
pueden usar simultneamente malonato de sodio como fuente de carbono y
sulfato de amonio como fuente de nitrgeno son capaces de ejercer una
accin tampn produciendo hidrxido de sodio. El aumento de la alcalinidad
resultante hace que el azul de bromotimol cambie de verde a azul. Los
microorganismos malonato negativos que fermentan glucosa hacen que el
indicador cambie de verde a amarillo. Se utiliza en la diferenciacin de
especies entre las Enterobacteriaceae. La mayora de las especies de
Enterobacter y Klebsiella utilizan malonato de sodio.

Prueba de CAMP. Sirve principalmente para determinar la capacidad de un

microorganismo para producir una protena conocida como factor CAMP. La
protena produce un efecto sinrgico con la -hemolisina de S. aureus
sobre eritrocitos ovinos y bovinos que se observa como un fenmeno ltico
en la interseccin de los dos microorganismos cuando se siembran en
proximidad. Como alternativa se puede utilizar el CAMP inverso. En esta
prueba la hemlisis producida por algunos microorganismos se inhibe por la
-hemolisina de S. aureus (por ejemplo, la produccin de fosfolipasa D de
Arcanobacterium haemolyticum o la fosfolipasa E de Rhodococcus spp.)

Pruebas basadas en la resistencia a ciertas sustancias

Optoquina. El clorhidrato de etilhidroxicuprena (optoquina) inhibe a muy

baja concentracin (5 g/ml o menos) el crecimiento de S. pneumoniae,
mientras que no afecta al crecimiento de otros Streptococcus alfahemolticos.

Bacitracina. Esta prueba puede utilizarse como diagnstico presuntivo en

la identificacin de Streptococcus beta hemoltico del grupo A de Lancefield,
ya que, a diferencia de la mayora de los estreptococos, suelen ser
sensibles a bajas concentraciones de bacitracina.

Solubilidad en bilis. Se basa en la capacidad de determinadas especies

bacterianas de lisarse en presencia de sales biliares, las ms utilizadas de
las cuales son el taurocolato y el desoxicolato de sodio. Ambas provocan un
descenso de la tensin superficial, que, unido a la actuacin de enzimas

autolticos, destruyen la clula. El efecto de esta enzima autoltica se pone

de manifiesto sobre colonias de S. pneumoniae crecidas en medios slidos,
en las que se aprecia una umbilicacin central, y tambin en colonias
mucoides.

Crecimiento en caldo hipersalino. Determina la capacidad de algunos

microorganismos de desarrollarse en medios de cultivo con una
concentracin de cloruro sdico del 6,5%.

PRUEBAS RAPIDAS PARA LA DETECCION DE MICROORGANISMOS EN LA

LECHE

Inmunoensayos
La prueba de inmunoensayo se basa en una interaccin de antgenos y
anticuerpos que pueden ser visualizada por aglutinacin o formacin de grumos,
desarrollo de colores a partir de sustratos cromogticos, formacin de una
inmunobanda o fluorescencia. El test de ELISA para detectar Salmonella y Listeria
se desarroll sobre los aos 80, este test emplea micro ELISA acompaada de Ac
monoclonales para Salmonella o Listeria. En estudios efectuados sobre las
muestras contaminadas artificialmente con Salmonella, para evaluar kit de ELISA
con el mtodo convencional no se encontraron diferencias significativas ni en su
sensibilidad ni especificidad. (June, 1992).
Aglutinacin Latex
Este es el mtodo ms simple de los Inmunoensayos desarrollados recientemente.
El test usa partculas de Polietileno latex las cuales contactan con el anticuerpo.
En presencia deantgenos en la muestra, la reaccin se verifica despus de la
incubacin, si no existe antgenos las partculas latex formaran un sedimento
(Reybroeck, 1996).
Inmuno conteo magntico
Un nuevo enfoque para facilitar la inmunocaptura de antgeno en muestras de
alimentos lo constituye el Inmuno conteo magntico. En este mtodo, una muestra
de alimento se liga con un contador ferrometlico cubierto en plstico con los
anticuerpos (Ac) especficos para el M.O patgeno, despus de un perodo de
incubacin para que permita la inmunocaptura, el material no unido al

inmunoconteo puede ser rpidamente eliminado mediante fuerza magntica. Dos

test para detectar Listerias han sido ensayado y los mismos no requieren perodos
de preenriquecimiento, el mtodo ha sido capaz de detectar una Listeria en
muestras que contienen >1x10 4 ufc/mL banales. La sensibilidad se mantuvo por
debajo de 104 para Listerias totales y 0.6 ufc/g para la L.monocitogenes (Jackson
et al, 1992).
Reaccin enzimtica en cadena con Inmunoensayo fluorescente.
Los ltimos avances en la deteccin rpida de patgenos en los alimentos fue
introducida en 1992, es una versin de la tecnologa ELISA que emplea medida
fluorescente como indicador de reaccin positiva. Con esta tcnica se han
ensayado sistemas de inmunodiagnstico multiparamtrico para la deteccin
directa de antgeno de Salmonella, Listeria, o enterotoxinas en los alimentos. El
sistema emplea un receptculo de fase slida, una pipeta revestida con
anticuerpos en su superficie interior para ayudar a la captura del antgeno
especfico, adems cuenta con un esquema especialmente diseado para ello,
conteniendo todos los reactivos predispensados que son requeridos para el
contraste. A diferencia del protocolo de ELISA el Inmunocontraste fluorescente en
cadena enzimtica es completamente automatizado y no requiere ninguna
manipulacin manual (Vasavada, 1993).

Hibridacin de los cidos Nucleicos.

La tcnica de hibridacin de cidos Nucleicos (AN) puede ser empleada para
detectar M.O patgenos de una forma rpida y exacta. El mtodo incluye una
porcin de una cadena simple de AN que puedan ligarse a los ADN o RNA
especficos presentes en los alimentos. Una prueba comercial para detectar
Salmonella fue introducida por Fitts (1985), con este ensayo los resultados son
obtenidos en un periodo de 48 horas a diferencia del mtodo convencional que
requiere de 5 a 7 das. El mtodo es rpido, sensible y especfico pero el empleo e
istopos radioactivos limita su uso en muchos laboratorios. Ensayos de hibridacin
de AN para Salmonella y Listeria que utilizan la deteccin enzimtica y un punto
terminal colorimtrico se han desarrollado en los ltimos tiempos (Curiale et al,
1990). En comparacin del mtodo de hibridacin colorimtrico de DNA con los
procedimientos convencionales para la deteccin de Salmonella en un total de
1000 muestras de alimentos, representando a 20 tipos diferentes donde se inclua
la LDP, suero de queso liofilizado y leche achocolatada entre otros, se concluy
que el mtodo de hibridacin era tan efectivo como los mtodos oficiales,
llegndose a reconocer por estudios interlaboratorios como mtodo oficial (Chan
et al, 1990).
PCR

El PCR es una tcnica utilizada para amplificar un segmento de DNA que es

franqueado por dos regiones de la frecuencia conocida. Es un protocolo tpico de
PCR la DNA polimerasa termoestable y un 5 3 oligonucleotido especifico son
sometidos a una serie de reacciones de polimerizacin para amplificar la molcula
de DNA a 102 molculas. El DNA amplificado es detectado mediante el uso de gel
agarosa o una hibridacin meridional empleando una prueba sexolgica. El PCR
ha sido usado para la deteccin de bacterias patgenas como E. coli (Gooding y
Choudary 1997), L. monocitgenes (Wernars et al, 1991), Microbacterium
tuberculosis (Sjobring et al, 1990) y otros. Esta tcnica ha sido una alternativa
atractiva para la deteccin de bajas concentraciones de M.O patgena (102 ufc/g).
Esta tcnica es altamente sensible, especfica y no requiere de cultivos de
enriquecimientos. Sus principales limitaciones la constituyen la obtencin del
preparado de DNA para la amplificacin, la produccin de un preparado PCR no
especfico y el requerimiento de un ambiente de trabajo muy limpio. Tambin los
M.O que son muertos durante el procesamiento no son reconocidos como tale y si
un DNA est presente lo dar como falsos positivos. Este problema puede ser
resuelto mediante un corto paso de enriquecimiento previo a la extraccin del
DNA, no obstante constituye uan atractiva tcnica con posibilidades de ser
utilizada en la microbiologa lctea (Vasavada, 1993).
Tecnologa de Gen Lux o Mtodos basados en fagos.
Un concepto completamente novedoso con posibilidades de extensin dentro del
campo de la analtica de patgenos en alimentos es la enumeracin rpida de M.O
con fagos recombinantes con genes Lux. El principio requiere la introduccin
(clonacin) de los genes encontrados en bacterias luminiscentes en los genomas
del bacterifago. Al infectarse la bacteria hospedera (oscura) por el fago, esta
produce bioluminiscencia. La intensidad de la medida de luminiscencia con un
luminmetro es relativa a la concentracin de la bacteria en cuestin. Varias
explicaciones interesantes de esta tcnica han sido desarrolladas en laboratorios
microbiolgicos de los alimentos, incluyendo la deteccin de patgenos
especficos y organismos indicadores, monitoreo de actividad de cultivos y
bacterifagos, evaluacin de la eficacia de antibiticos y otras sustancias con
actividad antimicrobiana, as como en la prediccin de la vid til en anaquel (Baker
et al, 1992).

PRUEBAS
RAPIDAS
PARA
MICROORGANISMOS EN LA CARNE

LA

DETECCION

DE

Pruebas de aglutinacin
El antgeno o el anticuerpo se fijan a una partcula de gran tamao, como una
clula o una bolita de ltex. Se forma un cogulo visible que est constituido por el
antgeno, el anticuerpo y las partculas a las que se fijan

Puede ser:
Directa: intervienen antgenos o anticuerpos que forman parte de manera
natural de una partcula de mayor tamao
Indirecta: los antgenos o los anticuerpos se adsorben de forma artificial a
una partcula, por ejemplo, una partcula de ltex.
ELISA
Acrnimo del ingls Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, Ensayo por
inmunoabsorcin ligado a enzimas. Tcnica de inmunoensayo en la cual un
antgeno inmovilizado se detecta mediante un anticuerpo enlazado a una enzima
capaz de generar un producto detectable como cambio de color o algn otro tipo.

Separacin inmunomagntica (IMS)

Herramienta de laboratorio eficaz que puede aislar las clulas de fluidos
corporales o clulas cultivadas.
Se utiliza como un mtodo de cuantificacin de la patogenicidad de los alimentos.
Los anticuerpos revestidos de perlas paramagnticas se unen a los antgenos
presentes en la superficie de clulas as captura las clulas y facilita la
concentracin de estas a las perlas adjuntas.
El proceso de concentracin es creado por un imn colocado en el lado del tubo
de ensayo llevando las perlas a la misma.
Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR)
Tcnica de laboratorio utilizada para amplificar secuencias de ADN.
El mtodo utiliza secuencias cortas de ADN llamados cebadores para seleccionar
la parte del genoma a amplificar.
La temperatura de la muestra se sube y se baja repetidamente para ayudar a la
enzima de replicacin del ADN a duplicar la secuencia del ADN que est siendo
copiada.
Se producen billones de copias de la secuencia en estudio en slo unas pocas
horas.
Tras la amplificacin resulta mucho ms fcil identificar con una muy alta
probabilidad, virus o bacterias causantes de una enfermedad.

FILM HIDRATABLE: FILM 3M

SISTEMA SIMPLATE : BIOCONTROL MICROBIOLOGICO

SISTEMAS BASADOS EN ATP

CONCLUSIN
En sentido general los mtodos rpidos expuestos presentan una serie de
aspectos en comn:

Fciles de automatizar
Poseen una alta sensibilidad
Son mtodos simples
Se pueden obtener lecturas no destructibles

Bibliografa:

Fernndez, A. Garcia.C.Saz, J & Valdezate, S. (2010). Metodos de

identificacin bacteriana en el laboratorio de microbiologa. Mayo 12, 2016,
de seimc Sitio web:
https://www.seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimientosmic
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Redvet. (2006). Mtodos de ensayos rpidos de deteccin de

microorganismos en la leche. Mayo 07, 2016. Sitio web:
http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n070706/070603.pdf