INFORME FINAL TCNICO PROYECTO PRODUCTORES DE

LULO Y MORA COMPETITIVOS MEDIANTE SELECCIN

PARTICIPATIVA DE CLONES LITE, MANEJO INTEGRADO DEL
CULTIVO Y FORTALECIMIENTO DE CADENAS DE VALOR
FONTAGRO MORA LULO
Organismo Ejecutor
Centro Internacional de Agricultura Tropical -CIATOrganizaciones Colaboradoras
COLOMBIA
Corporacin Colombiana de Investigacin Agropecuaria CORPOICA
Universidad Santa Rosa de Cabal UNISARC
Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira UNAL
Corporacin Centro Provincial de Gestin Agropecuaria del Sur del
Departamento del Huila AGROSUR
ECUADOR
El Instituto Nacional Autnomo de Investigaciones Agropecuarias
INIAP
FINANCIADO POR:
Fondo Regional de Tecnologa Agropecuaria, FONTAGRO
Palmira, Enero de 2010

EQUIPO PARTICIPANTE DEL PROYECTO

COLOMBIA
CIAT
Alonso Gonzlez
Juan Fernando Meja
Adriana Arenas
Luca Afanador
Fernando Rodrguez
Pedro Pablo Parra

Elizabeth lvarez
Germn Llano
Lina Arango
Tatiana Ovalle
Luis Armando Muoz
Ana Cecilia Romero

CORPOICA
Mario Lobo Arias
Clara I Medina C
Mara Vargas
John Jairo Aguirre M

Germn Franco
Oscar Delgado
Abelardo Osorio

UNISARC
Elizabeth Villamil Castaeda
Juan Pablo Valencia
Diana Carolina Agudelo
Andrs Leonardo Franco
Nicols lzate Ocampo
Natalia Acevedo Bernal
Vicente Vaca
Carolina Zuleta Barco

Jess Zuleta Ospina

Diana Milena Gonzlez
Cristian David Santacoloma
Adrin Mauricio Valencia
Jefferson Flrez Meja
Leidy Milena Romero
Carlos Felipe Botero

UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA-SEDE PALMIRA

Jaime Eduardo Muoz
Ana Milena Caicedo
Pedro Antonio Zapata

Diego Fernando Marmolejo Cortes

Herney Daro Vsquez Amariles
Edward Andrs Perengez

CORPORACIN CENTRO PROVINCIAL DE GESTIN AGROEMPRESARIAL DEL SUR DEL

DEPARTAMENTO DEL HUILA AGROSUR
Marco William Fonseca Daz
Esperanza Amaya
Adriana Amaya

ECUADOR
INSTITUTO NACIONAL AUTONOMO DE INVESTIGACIONES AGROPECUARIAS (INIAP)
Wilson Vsquez
Beatriz Brito
Evelyn Viteri N.
Amanda Chiluisa
J. Navarrete
Jorge Revelo
Martnez A

Pablo Viteri
Flix Bastidas
Saulo de Jess Soria.
Jenny Herrera
Cristina Sosa
Garrido P

Juan Len
Franklin Valverde
Luca Manangn
Diego Crdenas
Patricio Gallegos
Villares M.

Priscila Lpez
Pal Gmez
Jos Ochoa
Eduardo Morillo
William Viera
Asaquibay C.

Contenido
1.

RESUMEN EJECUTIVO ......................................................................................................... 6

2.

RESULTADOS OBTENIDOS Y SU INTERPRETACIN................................................................. 9

2.1.1. Evaluacin de Apomixis en Germoplasma Seleccionado de Mora de Castilla ( Rubus
glaucus Benth) ...................................................................................................................... 9
2.1.2. Reconocimiento y evaluacin de enemigos naturales asociados a perla de la tierra
Eurhizoccocus colombianus Jakubsky (1965) en tres zonas productoras de mora .....................30
2.1.3. Establecimiento de un protocolo para la multiplicacin vegetativa de plntulas
inoculadas con hongos biocontroladores como valor agregado y como estrategia preventiva
para el manejo integrado de plagas y enfermedades en campo...............................................37
2.1.4. Caracterizacin molecular y patognica de aislamientos de Colletotrichum spp.
asociados a la antracnosis de mora en el Valle del Cauca. .......................................................47
2.1.5. Antracnosis de la mora de Castilla (Rubus Glaucus Benth): Variabilidad en especies y
razas del agente causante e identificacin de fuentes de resistencia a la enfermedad. .............66
2.1.6. Evaluacin de alternativas de control biolgico de Botrytis cinerea, Colletotrichum
gloeosporioides y Colletotrichum acutatum por antagonismo con Trichoderma spp. ...............84
2.1.7. Evaluacin in-vitro del efecto de canela (Cinnamomum zeylanicum nees), para el
control de antracnosis (Colletotrichum gloeosporoides (penz) penz. & sacc.) en el cultivo de
mora (Rubus glaucus benth) ................................................................................................ 101
2.1.8. Seleccin de material gentico promisorio proveniente de programas de mejoramiento,
bancos de germoplasma existentes o colectados en campos de agricultores. ......................... 109
2.1.9. Anlisis de caractersticas fsicas, qumicas y organolpticas de los frutos de lulo y mora
y pruebas de aceptacin con la industria y otros mercados (fresco, agroindustria y
exportacin)115
2.1.10. Anlisis de la diversidad genetica de la mora cultivada (Rubus glaucus benth) y especies
emparentadas en zonas productivas del ecuador mediante marcadores moleculares ............. 126
2.1.11. Desarrollo de un programa de manejo integrado de botritis (Botrytis cinerea) en mora
de castilla (Rubus glaucus b.), en Bolvar y Tungurahua. ........................................................ 134
2.2.1. Caracterizacin molecular con marcadores RAMS de accesiones de lulo provenientes de
ecuador. 146
2.2.2. Caracterizacin agro-morfolgicamente de clones y segregantes de 39 cruzamientos
interespecficos de naranjilla para identificar materiales promisorios con caractersticas de
resistencia y/o tolerancia a plagas y enfermedades, alta productividad y buena calidad del fruto.
san francisco - la clica - pichincha, 2008 ............................................................................. 152

4
2.2.3. Identificacin molecular y caracterizacin gentica y patolgica de colletotrichum sp.
aislados de naranjilla (Solanum quitoense lam), tomate de rbol (Solanum betaceum) y
chirimoya (annona cherimola mill) provenientes de zonas productoras en ecuador................ 179
2.2.4. Manejo de la nutricin del cultivo de naranjilla (Solanum quitoense lam.) en las zonas de
produccin de la regin amaznica y noroccidente de Pichincha . ......................................... 187
2.2.5. Evaluacin de sustratos en el desarrollo de larvas de Neoleucinodes elegantalis (G.).
Tumbaco Pichincha. ......................................................................................................... 195
2.2.6.

Patogenicidad de Fusarium oxysporum f.sp. quitoense en la Seccin Lasiocarpa......... 204

2.2.7. Evaluacin agronmica y resistencia a nemtodos (Meloidogyne incgnita) y al hongo

(Fusarium oxysporum) de dos variedades de naranjilla injertas en siete accesiones de la Seccin
L asiocarpa noroccidente pichincha.................................................................................... 212
2.2.9. Evaluacin de reguladores orgnicos de crecimiento para el engrose del fruto de
naranjilla (Solanum quitoense. hbrido puyo). San Miguel de los Bancos- pichincha................. 228
2.2.10. Prospeccin de enemigos naturales del barrenador del fruto (Neoleucinodes elegantalis
(guene)) de la naranjilla (Solanum quitoense) y evaluacin de la incidencia de las plagas en su
cultivo........................................................................................................................... 233
2.2.11. Especies del nematodo del nudo de la raz (Meloidogyne sp.) asociadas a la naranjilla
(Solanum quitoense lam) en ecuador. .................................................................................. 248
2.2.12. Determinacin de las caractersticas fisicoqumicas y estudio de los ndices de calidad en
el comportamiento postcosecha de los materiales seleccionados en clones lite provenientes de
cruzamientos de naranjilla .................................................................................................. 254
2.2.14. Metodologa in vitro para la evaluacin de germoplasma de lulo Solanum spp. bajo la
presin de toxinas de Colletotrichum acutatum.................................................................... 294
2.2.15. Caracterizacin morfoagronmica de 24 materiales de lulo Solanum quitoense Lam y
Solanum quitoense * Solanum hirtum, en el departamento de Risaralda. ............................... 300
2.2.16. Caracterizacin morfoagronmica de 15 materiales de lulo Solanum quitoense Lam y
Solanum quitoense * Solanum hirtum, en el departamento de Risaralda. ............................... 303
2.2.17. Respuesta diferencial a la incidencia de los principales problemas fitosanitarios en 24
materiales de lulo Solanum quitoense Lam, S. quitoense * s. hirtum bajo condiciones
agroclimticas de Risaralda. ................................................................................................ 307
2.2.18. Respuesta a la incidencia, severidad e infestacin de los principales problemas
fitosanitarios en 15 materiales de lulo Solanum quitoense Lam, bajo condiciones agroclimticas
de Risaralda........................................................................................................................ 310
2.2.19. Evaluacin de rendimiento y calidad en 24 materiales de lulo Solanum quitoense y S.
quitoense * S hirtum en el departamento de Risaralda.......................................................... 313
2.2.20. Evaluacion de variables de rendimiento y calidad en 15 materiales de lulo Solanum
quitoense lam en el departamento de risaralda. ................................................................... 319

5
2.2.22. Evaluacion del efecto de metabolitos intermedios a partir de extractos vegetales sobre
antracnosis (Colletotrichum spp) en el cultivo de lulo la selva (Solanum quitoense x Solanum
hirtum)............................................................................................................................... 335
2.3.1. IMPLEMENTACIN DE UN LABORATORIO DE PRODUCCIN DE PLANTAS IN VITRO DE
LULO A BAJO COSTO CON PRODUCTORES. ........................................................................... 343
2.3.2.

SOCIALIZACIN DEL PROYECTO Y FORTALECIMIENTO DE CAPACIDADES .................... 344

2.3.3. SISTEMAS DE INNOVACIN FUNCIONALES PARA LAS CADENAS DE LULO Y MORA DE

COLOMBIA Y ECUADOR ESTABLECIDOS, CONSOLIDADOS Y FORTALECIDOS ............................ 345
2.3.4. LNEA BASE LEVANTADA PARA LOS CULTIVOS DE MORA Y LULO EN COLOMBIA Y
ECUADOR........................................................................................................................... 346
2.3.5.

ANLISIS ECONMICO PARA LOS CULTIVOS DE MORA Y LULO .................................. 347

3.

ANLISIS PROSPECTIVO ................................................................................................... 350

4.

PUBLICACIONES Y OTROS PRODUCTOS ............................................................................. 356

5.

EJECUCIN DEL PRESUPUESTO ........................................................................................ 362

6.

AGRADECIMIENTOS......................................................................................................... 362

Anexos
Anexo 1: Pasaportes Colletotrichum y mora.
Anexo 2: Implementacin de un laboratorio de produccin de plantas in vitro de
lulo a bajo costo con productores
Anexo 3: Estadsticas eventos y talleres Fontagro Mora Lulo
Anexo 4: Informe GIAR - Fontagro
Anexo 5: Lnea base de la mora de castilla Ecuador
Anexo 6: Lnea base mora y lulo Colombia
Anexo 7: Anlisis Econmico Cultivo de Naranjilla, Ecuador
Anexo 8: Anlisis Econmico Cultivo de Lulo, Colombia
Anexo 9: Anlisis Econmico Cultivo de Mora, Colombia
Anexo 10: Tecnologa cultivo mora, Colombia
Anexo 11: Tesis: Evaluacin de alternativas de control in vitro de Colletotrichum
gloeosporioides, Colletotrichum acutatum y Botrytis cinrea.
Anexo 12: Especies de Colletotrichum asociadas con la antracnosis de la mora de
castilla (Rubus glaucus Benth) en el Valle del Cauca.
Anexo 13: Evaluacin agronmica de materiales de lulo Solanum sp, frutal de alto
potencial para zonas tropicales.

1. RESUMEN EJECUTIVO
El proyecto Productores de lulo y mora competitivos mediante seleccin
participativa de clones lite, manejo integrado del cultivo y fortalecimiento
de cadenas de valor FONTAGRO mora lulo se llev a cabo desde el ao 2007
hasta el 2010. El objetivo general fue optimizar la productividad y calidad de lulo
(Solanum quitoense) y mora (Rubus glaucus) para fortalecer las cadenas de valor,
mejorar los ingresos de los cultivadores y proteger el ambiente, mediante la
seleccin de materiales lite y el manejo integrado de los cultivos. El desarrollo del
mismo se enfoc en los siguientes objetivos especficos: (1) Con la participacin
de los agricultores, empresas comercializadoras y procesadoras seleccionar
materiales lite de lulo y mora, con criterios de adaptabilidad, resistencia a
enfermedades, productividad y aceptacin del mercado. (2) Caracterizar las
colecciones de germoplasma, por variabilidad gentica y resistencia a plagas y
enfermedades de mayor importancia. (3) Desarrollar y evaluar estrategias de
biocontrol de las plagas y enfermedades ms importantes. (4) Evaluar el
comportamiento, calidad y rentabilidad de los clones lite seleccionados, bajo
diferentes sistemas de produccin dirigida a diferentes mercados. (5) Fortalecer la
capacidad de agricultores y tcnicos en el manejo integrado de los cultivos de
mora, lulo y desarrollar capacidades de innovacin en los actores de las cadenas
productivas. (6) Establecer y fortalecer sistemas de innovacin para el desarrollo
de los cultivos de mora y lulo en Colombia y Ecuador.
Las metas planteadas fueron: Caracterizar 30 nuevas accesiones de mora y 20 de
lulo en los bancos de germoplasma. Seleccionar 10 clones lite de mora y 20 de
lulo con alta productividad, calidad, resistencia a plagas y enfermedades y buenas
caractersticas organolpticas con aceptacin de la industria y el mercado fresco.
Identificar de 3 clones de mora y lulo resistentes a antracnosis en un grupo de 60
clones de mora y 40 de lulo, de diferentes regiones de Colombia y Ecuador.
Desarrollar metodologas de produccin masiva de material de siembra sano de
lulo y mora, de bajo costo, encontrar patrones resistentes, inductores de
resistencia y antagonistas. Determinar la relacin costo-beneficio de los clones
lites de lulo y mora, bajo diferentes sistemas de produccin dirigidos a diferentes
mercados. Establecer y consolidar sistemas de innovacin funcionales para las
cadenas de mora y lulo de Colombia y Ecuador. Elaborar una gua metodolgica
de produccin limpia de mora y lulo, dos artculos cientficos en revistas
nacionales y dos en revistas internacionales, dos cartillas y seis talleres de
capacitacin.
La metodologa implementada en el proyecto, sigui el proceso de investigacin y
desarrollo pasando por cuatro fases: (1) seleccin participativa de material
gentico, (2) caracterizacin y evaluacin del material gentico de acuerdo a los
criterios de los diferentes grupos de inters (productores, comercializadores,
agroindustria, investigadores y tcnicos), (3) desarrollo de pruebas regionales con
grupos gestores de innovacin conformados con representantes de los diferentes
actores de la cadena productiva, y (4) capacitacin y difusin de material gentico
y prcticas ms efectivas de manejo integrado del cultivo.

Como resultados relevantes se destaca la caracterizacin de 71 accesiones de

mora y 43 materiales de lulo en Colombia. En Ecuador, se caracterizaron 108
accesiones de mora y 100 hbridos interespecficos de lulo. En ambos pases se
encontraron accesiones de mora con caractersticas superiores a las comerciales;
14 en Ecuador y 9 en Colombia. Del germoplasma de lulo; se destacaron 9
materiales en Colombia con potencial para programas de mejoramiento o
produccin comercial y 9 materiales en Ecuador provenientes de cruzamientos
interespecficos. Se realiz la caracterizacin molecular de 36 materiales de lulo
colectados en Colombia y 51 accesiones colectadas en Ecuador. De esta forma
se super la meta identificando materiales superiores de mora y lulo, con
caractersticas de rendimiento, calidad de fruta y/o resistencia a enfermedades, a
partir de evaluaciones de laboratorio y campo.
En Ecuador se liber la variedad de Naranjilla de jugo INIAP- Quitoense 2009, la
cual es una seleccin de Solanum quitoense injertada sobre accesiones de S.
hirtum y S. arboreum, tolerantes a Meloidogyne incognita y Fusarium spp. Esta
variedad representa una innovacin tecnolgica al ser la primera variedad de
naranjilla que se comercializa injertada sobre patrones con tolerancia a plagas y
enfermedades. Esto est generando gran impacto ya que las evaluaciones en
campo indican que permite reducir el uso de pesticidas, por lo tanto incide en la
proteccin de la salud humana, el suelo y el medio ambiente en general.
Adicionalmente, el anlisis econmico de esta tecnologa indica una tasa de
retorno cercana al 300% por encima de la prctica comercial utilizada
actualmente.
En Colombia se generaron alternativas de propagacin masiva de material de
siembra con calidad gentica y fitosanitaria, de bajo costo para productores. Se
estableci en una de las regiones con ms tradicin en el cultivo de mora la
metodologa e instalaciones de multiplicacin masiva por estacas enraizadas con
Trichoderma, las cuales presentaron un mayor porcentaje de brotes, races y una
tendencia a que se produzcan ms plntulas. Entre las ventajas que tiene esta
metodologa con relacin a la que usan los agricultores de la zona son la mayor
productividad, obtencin de plantas sanas y la no propagacin de la perla de tierra
(Eurhizoccocus colombianus). Se desarrollaron sistemas de propagacin in vitro
de lulo a bajo costo, implementando un laboratorio de propagacin de materiales
con la organizacin de productores ASLUBEL. Se logr el apalancamiento con
otras instituciones para continuar con el trabajo.
Se evalu el modo reproductivo de ocho ecotipos de mora de castilla, los cuales
presentaron apomixis facultativa con tendencia a la sexualidad y alta viabilidad
polnica entre ellos. De acuerdo a las variaciones encontradas en la emergencia;
el ecotipo, tratamiento y ambiente influyen en la emergencia de las semillas. Esto
sugiere que debe tenerse cuidado en la multiplicacin a partir de semilla porque
los ecotipos se reproducen principalmente de forma sexual y la mayora de las
plntulas no conservaran las caractersticas de la planta madre.

Se establecieron colecciones de aislamientos y se hizo caracterizacin molecular,

morfolgica y patolgica de los agentes causales de las principales enfermedades.
Se dispone del ADN de 23 cepas de Colletotrichum sp., caracterizadas
molecularmente para conocer la variabilidad gentica. Se aislaron hongos de los
gneros Beauveria, Asperguillus y Verticillium, bacterias del gnero Bacillus y
Paenibacillus, dos virus de ADN de cadena simple circular y el parasitoide
Copidosoma sp., que estn controlando algunas plagas de la naranjilla en el
Noroccidente de Pichincha. En Colombia, se identificaron y evaluaron
controladores biolgicos y antagonistas para las principales plagas y
enfermedades, los cuales ser necesario incluir en programas de manejo
integrado de los cultivos. Se evaluaron productos fitoqumicos mediante pruebas
de biocontrol para el manejo de antracnosis en mora y lulo bajo condiciones de
laboratorio y campo en la zona del eje cafetero. Se encontr que los agentes
causales de antracnosis son Colletotrichum gloeosporioides y C. acutatum,
teniendo mayor incidencia este ltimo. 240 cepas de Colletotrichum spp., se
caracterizaron molecularmente y 50 clones de mora se evaluaron por resistencia a
antracnosis, encontrndose 4 resistentes y 46 susceptibles.
Para el control de la perla del suelo en mora (Eurizococcus colombianus), las
cepas de M. anisopliae aisladas de adultos y ninfas de perla se convierten en una
alternativa viable para el manejo de poblaciones de E. colombianus. Estos
resultados son impactantes ya que hasta el momento solo se dispona del control
qumico, pero ha sido inefectivo por la presencia de la cera que recubre los
estados ninfales de E. colombianus, y por encontrarse entre 10 a 30 cm de
profundidad.
Se construy y actualiz la lnea base para los cultivos de mora y lulo, en Ecuador
y Colombia. Se consolidaron sistemas de innovacin multi-actor funcionales para
las cadenas de mora y lulo. Como instrumento de innovacin se conformaron tres
grupos GIAR (Gestores de Innovacin en la Agroindustria Rural). La experiencia
fue exitosa porque pudo generar en poco tiempo (2 aos) procesos de
autogestin, de co-innovacin entre los actores y toma de decisiones por parte de
la asociacin de productores de APROMORA 1 y ASLUBEL2en Colombia y de
diferentes asociaciones de los cantones de la provincia de Tungurahua en
Ecuador. Se establecieron redes sociales y de trabajo conjunto con instituciones
como SENA, ICA, CORPOICA, COMIT DE CAFETEROS, Universidad Catlica
de Oriente (UCO), Universidad Nacional (UNAL), Instituto de Investigacin
AgResearch (Nueva Zelanda) y todos los departamentos tcnicos del INIAP en
Ecuador.
Se realizaron 33 eventos de capacitacin y divulgacin de los resultados en los
cuales participaron alrededor de 1713 personas. Se cuenta con guas
metodolgicas para la produccin limpia de lulo y mora. Se desarrollaron 36
trabajos de investigacin como tesis de pregrado, maestra y doctorado, 20
1
2

Asociacin de Productores de Mora

Asociacin de Productores de Lulo del Municipio de Beln de Umbra.

publicaciones entre artculos cientficos (Algunos se encuentran en proceso de

publicacin), cartillas, guas y pster.
2. RESULTADOS OBTENIDOS Y SU INTERPRETACIN
2.1.

RESULTADOS EN MORA

2.1.1. Evaluacin de Apomixis en Germoplasma Seleccionado de

Mora de Castilla (Rubus glaucus Benth)3
Objetivo Del Proyecto (2): Caracterizar las colecciones de germoplasma, por
variabilidad gentica y resistencia a plagas y enfermedades de mayor importancia
2.1.1.1. Objetivos
Determinar presencia de apomixis mediante clareo de sacos embrionarios
en ecotipos de mora de castilla.
Estimar la viabilidad del polen en ecotipos de mora de castilla.
Evaluar mtodos de escarificacin en semillas de mora de castilla.
Estimar variabilidad gentica en progenies de materiales seleccionados de
mora de castilla usando marcadores RAMs.
2.1.1.2. Marco Referencial
La mora de castilla Rubus glaucus Benth, es una fruta socialmente importante
porque muchos agricultores dependen econmicamente de su cultivo. Tiene
buena aceptacin en el mercado para el consumo en fresco y procesado. Se
considera una especie en proceso de domesticacin porque las casi 11,000
hectreas cultivadas en Colombia han sido originadas mediante la seleccin de
plantas silvestres. Existen en el pas diferentes ecotipos de mora de castilla
conocidos por los agricultores de acuerdo a las caractersticas del fruto,
productividad, resistencia a factores biticos y abiticos y la presencia o ausencia
de acleos (llamados comnmente espinas). Entre los ecotipos se encuentra la
Mora Hartona caracterizada por tener frutos grandes y ciclo corto; Mora Ranchona
caracterizada por tener frutos pequeos, alta produccin y ser estacionaria,
Castilla Juntas caracterizada por tener alta produccin, plantas y frutos medianos.
Salenmora o mora sin espinas, es actualmente el ms sembrado en Colombia y
tiene alta produccin y frutos medianos a grandes.
A pesar de ser un cultivo importante las investigaciones realizadas sobre su
biologa floral y modo de reproduccin han sido limitadas. Se han hecho
descripciones de la flor, el fruto y de los polinizadores pero no se ha profundizado
en los mecanismos de reproduccin. Estudios de los mecanismos de reproduccin
en el gnero Rubus han dado a conocer la apomixis como un proceso en el cual
3

Diego Fernando Marmolejo Cortes

10

se producen embriones maternos sin la fertilizacin. La apomixis ha sido reportada

en moras europeas, asiticas y americanas. Una de las actividades agronmicas
ms importantes en el cultivo de la mora es la propagacin, se utilizan
comnmente mtodos vegetativos como acodos terrestres, acodos areos,
esquejes, microesquejes; los esquejes o estacas son los ms comunes porque es
sencillo de aplicar y econmico, pero es un medio de diseminacin de antracnosis
(Colletotrichum sp.), una enfermedad muy limitante del cultivo. La propagacin por
semilla ha sido poco utilizada por agricultores porque las semillas de mora tienen
dormancia, estn encerradas en un endocarpio duro esclerenquimatoso que
restringe la germinacin (Sugae, 2007).
En los ltimos aos especialmente en el departamento de Antioquia, Colombia, se
est propagando cultivos comerciales a travs de semilla. Los agricultores que
estn propagando mora por semilla aseguran que las plantas hijas tienen
crecimiento uniforme y conservan las caractersticas deseables de las plantas
madres. La propagacin por semilla puede proporcionar ms plantas que los otros
mtodos de propagacin debido al nmero de semillas que tiene un fruto y el
nmero de frutos que produce una planta, adems puede ser un mtodo
apropiado para prevenir enfermedades, y de conservar el genotipo ex situ. Dada la
importancia que tiene la mora de castilla para los agricultores de la regin Andina
y el desconocimiento que se tiene sobre esta especie se hace necesario realizar
estudios bsicos para determinar el comportamiento reproductivo para desarrollar
futuros programas de mejoramiento gentico.
2.1.1.3. Metodologa
El estudio se realiz con ocho ecotipos de la coleccin de materiales de mora de
castilla (Rubus glaucus) de la Universidad Nacional de Colombia, sede Palmira,
localizada en el corregimiento de Tenerife municipio del Cerrito Departamento
Valle del Cauca. Los anlisis de laboratorio se realizaron el laboratorio de Biologa
Molecular de la Universidad Nacional de Colombia sede Palmira. De los ecotipos
usados siete tienen acleos (Ranchona Juntas, Castilla Juntas, Sara, Abrazos,
Guatica, Trujillo espinas, San Antonio) y uno sin acleos (Salenmora).
Metodologa para determinar presencia de apomixis mediante clareo de
sacos embrionarios en ecotipos de mora de castilla.
a. Colecta de flores
Se colectaron flores antes de la polinizacin en horas de la maana y se colocaron
en viales que contenan la solucin fijadora FAA (Formaldehido: cido actico
glacial: etanol absoluto: agua destilada en proporcin 3:3:4, v/v), las flores se
dejaron en la solucin durante 24 horas a temperatura ambiente y posteriormente
se almacenaron en etanol al 70% a 4C.

11

b. Extraccin de ovarios
De cada ecotipo se extrajeron ovarios individualmente con ayuda de un
estereoscopio y almacenados en viales con etanol al 70% hasta proceder al clareo
(Figura 1).

Figura 1. Pistilos de mora de castilla.

c. Deshidratacin y clareo de ovarios

Se sigui la metodologa descrita por Young et al., (1979) donde se usa salicilato
de metilo con modificaciones.
d. Visualizacin y anlisis de ovarios
Los ovarios clareados se montaron sobre salicilato de metilo al 100% y se
observaron en un microscopio de contraste de interferencia, se clasificaron como
sexual, apomctico, atrofiado, estril y mltiple de acuerdo a la presencia o
ausencia de las clulas de los sacos embrionarios. Se analizaron 80 ovarios por
cada ecotipo. Los datos fueron sometidos a la prueba de ji-cuadrado para probar
si la apomixis es independiente o dependiente de los ecotipos.
Metodologa para estimar la viabilidad del polen en ecotipos de mora de
mora de castilla.
a. Colecta de botones florales
De cada ecotipo se colectaron botones florales en horas de la maana y se
colocaron en viales que contenan etanol absoluto: cido actico glacial 3:1 v/v. Se
dejaron en la solucin 24 horas a temperatura ambiente y luego almacenada a
4C.

12

b. Tincin y anlisis de botones florales

De cada ecotipo se extrajeron anteras con la ayuda de un estereoscopio y se
montaron sobre un portaobjetos para macerarse y teirse con carmn actico. Los
granos de polen fueron clasificados de acuerdo a la tincin como viables (teidos)
e inviables (sin tincin).
c. Anlisis estadstico
Se hizo un anlisis de varianza (ANDEVA), diseo completamente al azar donde
cada botn floral fue una repeticin y cada ecotipo un tratamiento. Para comparar
la viabilidad en los ecotipos se us la prueba de rango mltiple de Duncan.
Metodologa para evaluar mtodos de escarificacin en semillas de mora de
castilla.
Se cosecharon frutos maduros de plantas que se dejaron a libre polinizacin, de
ecotipos provenientes del banco de germoplasma (Figura 2).

Figura 2. Frutos maduros de mora de castilla

Los frutos colectados se partieron, se extrajeron las semillas y el jugo

manualmente, esta mezcla se almacen en frascos de vidrio con agua para
facilitar el proceso de fermentacin (Figura 3). Despus de ocho das de
fermentacin las semillas se pasaron por un colador de malla fina y se removieron
mecnicamente bajo una corriente de agua (Figura 4). Luego las semillas se
secaron sobre cajas plsticas a temperatura ambiente durante 8 horas
aproximadamente. Se realizaron dos ensayos para evaluar mtodos de
escarificacin.

13

Figura 3. Fermentacin de semillas de mora

Figura 4. Lavado de semilla en malla fina bajo corriente de agua

Ensayo uno.
En el primer ensayo se evaluaron cuatro tratamientos de escarificacin en cuatro
ecotipos de mora de castilla. (Tabla 1)
Tabla 1. Descripcin de los tratamientos
TRATAMIENTO
cido sulfrico 20%
cido ascrbico
500ppm
cido ctrico 50ppm
Agua

Tiempo de
inmersin
30 minutos
24 horas
72 horas
5 minutos

14

Ensayo dos
En el segundo ensayo se evaluaron seis tratamientos de escarificacin en cinco
ecotipos de mora de castilla (Tabla 2).
Tabla 2. Descripcin de los tratamientos de escarificacin realizados
a los ecotipos en el ensayo dos
Tratamiento
cido Sulfrico 60%
cido Sulfrico 60%
cido Sulfrico 60%
cido Ctrico
Choque trmico
Agua

Tiempo de inmersin
5 minutos
15 minutos
25 minutos
24 horas
5 minutos caliente/frio
5 minutos

Siembra de semillas
Las semillas se sembraron en bandejas de germinacin de 128 alvolos con turba
previamente desinfectada (Figura 5). Se hizo monitoreo diario para calcular los
porcentajes y tiempos de emergencia.

Figura 5. Emergencia de semillas

Anlisis de datos
Para evaluar los tratamientos de escarificacin sobre los ecotipos en los dos
ensayos se us un diseo completamente al azar y para comparar los
tratamientos y los ecotipos se utiliz la prueba de rango mltiple de Duncan.
Metodologa para la extraccin de ADN de plantas madre e hijas
Para la extraccin de ADN se utiliz el protocolo de Dellaporta et al., 1983
modificado por Palacio, 2003. Aunque las cantidades de ADN fueron altas hubo
problemas con la amplificacin va PCR debido a la presencia de compuestos
fenlicos en el ADN, para lo cual se realiz la purificacin del ADN usando un
protocolo con Fenol- Cloroformo. En la extraccin de ADN de plntulas se utiliz el

15

kit DNeasy Plant Mini kit de QUIAGEN. En la Figura 6 se observan los patrones
de ADN obtenidos con los tres mtodos.
Los ADN totales fueron visualizados en geles de agarosa 0.8% y teidos con
bromuro de etidio. Para determinar la concentracin de ADN se realiz una curva
de dilucin con ADN del bacterifago Lambda de Concentracin inicial 30 ng/l y
llevado a una concentracin final de 10, 45, 60 y 100 ng/l. El ADN cuantificado se
diluy en agua tipo HPLC hasta 5 y 10 ng/ l y se almacen a 20 C.
Extraccin ADN con protocolo DELLAPORTA

Purificacin de ADN usando Fenol-Cloroformo

Extraccin ADN usando KIT

Figura 6. Calidad de ADN extrado con: protocolo, fenol-cloroformo y kit

Amplificacin de ADN va PCR RAMs

Para la amplificacin va PCR RAMs se evaluaron 4 cebadores (Tabla 3); se
prepar un cctel con un volumen final de 25 l. Buffer 1X, MgCl2 1.5 mM, dNTPs
0.2 mM, Taq Polimerasa 1 U/ l, cebador 2 M y ADN 5ng/ l.
Tabla 3. Cebadores RAMs
CEBADOR
CA
AG
TG
CCA

SECUENCIA (5' a 3')

DBD A (CA)7
HBH (AG)7 A
HVH (TG)7 T
DDB (CCA)5

Designaciones usadas para los sitios degenerados: H (A, T o C); B (G, T o C); V
(G, A o C) Y D (G, A o T). La amplificacin se realiz en un termociclador Bio Rab
PTC-100 Programable Termal Controller de MJ Research, Inc , usando las
siguientes condiciones: desnaturalizacin inicial de 95 C por 5 minutos, seguido
de 37 ciclos de 95 C por 30 segundos; la temperatura de hibridacin vari para
cada cebador as: 50 C cebador (AG -CA), 55 C cebador (TG ) y 58 C cebador
(CCA) por 45 segundos; extensin inicial de 72 C por 2 minutos y final de 72 C
por 7 minutos.

16

Visualizacin de los productos amplificados

Los productos amplificados fueron separados por electroforesis en geles de
agarosa al 1.5 y 2% y visualizados bajo luz ultravioleta. La longitud de los
productos de amplificacin fue estimada por comparacin con un marcador de
peso molecular de 100pb de (Promega). Para observar las bandas se utilizaron
geles de poliacrilamida al 7%, corridos en buffer TBE 0.5X (Tris-borato EDTA,
0045M; EDTA, 0.001M) y N, N, N, N tetra metileno diamina (TMED) y persulfato
de amonio 10%, teidos con bromuro de etidio (Figura 7).

Figura 7. Patrones de bandas obtenidos con cada cebador

Anlisis de los datos moleculares

Con los patrones de bandas de ADN obtenidos de los medios hermanos se gener
una matriz binaria de ausencia (cero) y presencia (uno). Las estimaciones de
similitud fueron calculadas con el mtodo de Nei y Li (1979). Se realiz un anlisis
clster por el mtodo UPGMA y gener un dendograma utilizando el paquete
estadstico NTSYS-pc versin 2.0.
Para el clculo de las frecuencias allicas, heterocigocidad, loci polimrfico se
utiliz el paquete estadstico TFPGA versin 1.3.

17

2.1.1.4. Resultados y Discusin

a. Evaluacin de apomixis en ocho ecotipos de mora de castilla
La presencia de apomixis fue encontrada en ocho ecotipos de mora de castilla
pertenecientes a la coleccin de materiales de mora de castilla de la Universidad
Nacional de Colombia Sede Palmira. El saco embrionario del tipo Polygonum
(ocho ncleos) fue encontrado en la mayora de los ovarios evaluados en todos los
ecotipos y el de tipo Oenothera (4 ncleos) tambin fue encontrado pero en
menor proporcin (Figuras 8 y 9). De las rutas de apomixis en la mora de castilla
se encontr la gametoftica donde la formacin del embrin se lleva a cabo a partir
de la ovoclula por partenognesis sin que ocurra la unin del gameto masculino
con el femenino. De los dos tipos de apomixis gametoftica se pudo verificar la
aposporia en la cual el saco embrionario se forma a partir de la nucela. Sacos
mltiples o facultativos, caractersticos de las moras apomcticas se encontraron
en 6 ecotipos (Mora sin espinas, Trujillo Espinas, Ranchona Juntas, Abrazos, Sara
y Guatica) (Tabla 4).
La prueba de chi-cuadrado demostr que la apomixis es dependiente de los
ecotipos es decir que se encuentra en todos pero en diferentes proporciones. El
ecotipo guatica es el ms apomctico, el 37.5% de los ovarios son apomcticos y el
ecotipo menos apomctico es Ranchona juntas con 83,75% de los ovarios
sexuales. En general todos los ecotipos son facultativamente apomcticos
primando la sexualidad.
Tabla 4. Anlisis del saco embrionario de ocho ecotipos de mora de castilla
Porcentaje de sacos Embrionarios (n=80 ovarios)
Ecotipo

Sexual

Aposprico

estril

atrofiado

Facultativo

Mora sin espinas

73,75

13,75

Castilla Juntas

78,75

11,25

6,25

0,0

6,25

7,50

2,50

0,0

Trujillo espinas

88,75

3,75

1,25

1,25

5,00

67,5

25,0

3,75

3,75

0,00

Ranchona
Juntas
Guatica

83,75

11,25

1,25

1,25

2,50

46,25

37,5

0,0

1,25

15,0

Sara

76,25

20,0

0,0

0,0

3,75

Abrazos

53,40

33,3

0,0

0,0

13,3

San Antonio

Este es el primer reporte de apomixis en las moras de castilla Colombianas y

deber ser tenido en cuenta para iniciar programas de mejoramiento gentico ya
que las ventajas que ofrece la apomixis facultativa son muchas. Se destacan la
fijacin inmediata de caracteres deseables en genotipos superiores, no se
necesita control riguroso de la polinizacin y permite la clonacin de hbridos
superiores. Esto se traduce en reduccin de costos de produccin de cultivares,
reduccin mnima del aislamiento fsico para conservar lneas homocigotas y para
los agricultores principalmente de pases en desarrollo permite sostener altos

18

rendimientos por tiempo indefinido, usando parte de las semillas cosechadas sin
prdidas en la produccin debidas a la segregacin.

Figura 8. Sacos embrionarios de mora de castilla. A saco embrionario tipo onotera. B saco embrionario
aposprico. C y D saco embrionario sexual. Designaciones usadas o: ovoclula, n: nucleo polar, s:
sinergidas, a: antipodas

Figura 9. Sacos embrionarios de mora de castilla, A. mltiple. B saco con tres ncleos polares. C
saco aposprico en formacin. D. ovoclula y ncleos polares.

19

Para Rubus glaucus (tabla 4) hubo ecotipos con el 37% (Guatica) de apomixis y
en todos apomixis facultativa, lo que ha sido demostrado en varias especies de
moras. Einset (1951), en especies de mora con diferentes ploidias, encontr que
todas las plantas parentales tuvieron una alta proporcin de medios hermanos
apomcticos producidos a travs de pseudogamia en vulos no reducidos, adems
encontr numerosos casos de partenognesis en las especies tetraploides.
En este trabajo se encontraron sacos embrionarios apospricos en los ocho
ecotipos de mora evaluados lo que se ha demostrado en moras. Pratt y Einset
(1955) encontraron sacos aposporicos; Prat et al., (1958) en Rubus ideus especie
triploide encontraron sacos embrionarios apospricos y reducidos, adems
demostraron la pseudogamia en polinizaciones experimentales. Asker y Jerling
(1992) mencionan que los sacos mltiples son caractersticos en las especies
apomcticas de mora, lo que pudo corroborarse en seis de los ocho ecotipos
evaluados en este estudio (tabla 4).
En mora sin espinas, el ecotipo ms cultivado en Colombia, se encontr 13,8%
de apomixis y 6,25% de sacos facultativos lo que debe tenerse en cuenta si se
piensa multiplicar semillas para sembrarlas comercialmente ya que la mayora de
las plntulas van a tener segregacin, explicada por el 73.8% de sacos
embrionarios sexuales. Esto se ha observado en los experimentos realizados en
Ecuador por el INIAP, donde las semillas del ecotipo sin espinas muestran
segregacin. San Antonio un ecotipo muy cultivado por su alta produccin, tiene
67,5% de sexualidad y 25% de apomixis lo que puede explicar la masiva
multiplicacin de semillas en Antioquia donde los agricultores afirman que las
plntulas tienen un desarrollo uniforme y conservan las caractersticas de la planta
madre.
b. Viabilidad del polen en ocho ecotipos de Mora de Castilla.
La tincin de los granos de polen con carmn actico permiti estimar la viabilidad
del polen en los ocho ecotipos de mora de castilla. En total se contaron 87.969
granos viables y 11.866 inviables. Fue necesario transformar los porcentajes de
viabilidad a arcoseno para cumplir con el primer postulado del anlisis de varianza
(ANDEVA) el cual requiere que los datos tengan una distribucin normal y no
binomial que ocurre cuando se trabaja con porcentajes. Con los datos
transformados se realiz un anlisis de varianza bajo un diseo completamente al
azar para establecer si existan diferencias significativas entre la viabilidad de
ecotipos (tabla 5).
Tabla 5. ANDEVA de viabilidad polnica de ocho ecotipos de mora
Fuente
Ecotipo
Botn floral
Error
Total

GL
7
4
28
39

CM
0.16
0.01
0.033

F-Valor
4.85
0.41

*diferencias significativas =0.05

Pr > F
0.0011 *
0.8026

20

Como hubo diferencias significativas entre ecotipos (tabla 5) se realiz una

comparacin de los promedios con la prueba de rango mltiple de Duncan. En la
figura 10, se muestran los promedios transformados a arcoseno y se indican las
diferencias significativas. Salenmora fue estadsticamente superior a los dems
ecotipos: 1,45 de viabilidad polnica. Los ecotipos Ranchona Juntas y Trujillo
espinas fueron superiores al ecotipo Castilla Juntas e iguales a Abrazos, San
Antonio, Sara y Guatica.

Figura 10. Viabilidad polnica en ocho ecotipos de Mora de Castilla. Promedios con la misma letra
no difieren estadsticamente, =0.05

Una de las razones de las diferencias en la viabilidad polnica entre ecotipos

puede explicarse por la variabilidad gentica, Nybom, (1985) menciona que la
diversidad gentica influye en los procesos anteriores a la formacin del grano de
polen entre y dentro de cada especie de mora y segn la caracterizacin
molecular hecha por Morillo et al., (2005) entre los ecotipos de mora evaluados
hay variabilidad gentica.
El polen fue colectado el mismo da y manipulado de igual forma para todos los
ecotipos. Se hicieron observaciones de ttradas en todos los ecotipos, la
prevalencia de ttradas normales confirm la alta viabilidad (Figura 11). Los
ecotipos que tuvieron las viabilidades ms altas Salenmora, Ranchona Juntas,
Trujillo Espinas y San Antonio (Figura 10), usualmente tienen buenas
producciones. Aunque no se hizo una correlacin entre el nmero de frutos
producidos y la viabilidad polnica, las producciones observadas y las
investigaciones hechas en otras moras permiten suponer que en la mora de
castilla la calidad del polen influye en la produccin de frutos.

21

Figura 11. A Grano de polen viable (teido) e inviable (transparente). B ttradas normales

La frecuencia de viabilidad polnica en los ecotipos de mora fue alta del 80 al 99%
(tabla 6), contrastando con la mayora de las moras en donde la viabilidad es
usualmente baja. Gustaffson (1943) report baja viabilidad en moras suecas
tiendo granos de polen con azul de algodn. En especies triploides report 8%
de viabilidad y en tetraploides 54% de viabilidad en contraste con diploides que
tuvieron 81% de viabilidad.
Tabla 6. Frecuencia de viabilidad polnica en ocho ecotipos de mora de castilla
Ecotipo
Salenmora
Trujillo Espinas
Ranchona Juntas
Sara
San Antonio
Guatica
Castilla Juntas
Abrazos

granos viables
10438
10627
11776
14126
13657
10627
7313
9640

granos inviables
89
703
872
3110
2019
2154
1799
1148

Viabilidad del polen (%)

99.15
93.8
93.1
81.96
87.12
83.15
80.26
89.36

En este trabajo se embolsaron botones de todos los ecotipos (Figura 12) para
evaluar autoincompatibilidad; la tendencia fue la limitada formacin de frutos y
semillas comparada con la libre polinizacin. En Salenmora, San Antonio y
Guatica se produjo buen tamao y cantidad de frutos en flores embolsadas.

22

Figura 12.Desarrollo de frutos proveniente de flores embolsadas y a libre polinizacin.

A y B frutos de Salenmora, C y D frutos de Trujillo espinas.

c. Evaluacin de mtodos de escarificacin en semillas mora de castilla

Se realizaron dos ensayos para evaluar diferentes tratamientos de escarificacin
en ecotipos de mora de castilla. En los dos ensayos llevados a cabo, la
emergencia comenz a los 60 das despus de la siembra. Con cido sulfrico se
registr los porcentajes ms altos de emergencia 82% a los 106 das despus de
la siembra. Los ecotipos respondieron de manera diferenciada a los tratamientos
(Tabla 7y 8). La propagacin por semilla puede proporcionar ms plantas que los
otros mtodos de propagacin debido al nmero de semillas que tiene un fruto y el
nmero de frutos que produce una planta, adems puede ser un mtodo
apropiado para prevenir enfermedades trasmisibles por mtodos de propagacin
vegetativa (i.e la perla del suelo).
Ensayo 1.
No se encontraron diferencias significativas entre tratamientos de escarificacin
usando la prueba de rango mltiple de Duncan. Se encontraron diferencias
significativas entre ecotipos. Los ecotipos con acleos Ranchona Juntas y Trujillo
Espinas tuvieron los porcentajes de emergencia ms altos con 30 y 28%
respectivamente y el ecotipo UNPM44 colectado en Ginebra tuvo el porcentaje de
emergencia ms bajo 3.6%. (Tabla 7).

23

Tabla 7. Promedios de emergencia de los tratamientos sobre los ecotipos

TRATAMIENTO
cido sulfrico
20%
cido ascrbico
500ppm
cido ctrico
50ppm
Agua
Promedio

TRUJILO
ESPINAS
36,5

TRUJILO SIN
ESPINAS
27,1

UNPM12

UNPM44

Promedio

54,2

29,97

22,9

8,3

36,2

4,2

17,9

27

14,6

14,6

14,55

29,2
28,92

24
18,5*

16,7
30,42

6,3
3,62*

19,05

Diferencias significativas entre promedios*, =0,05

Para Ranchona Juntas a los 97 das se registr 36.5% de emergencia y a los 118
das 54% con el tratamiento 1; para el ecotipo Trujillo Espinas con el tratamiento
1, se observ 36% a los 118 das en contraste con UNPM45 que en el mismo
perodo de tiempo germin slo el 2.03 %, con el mismo tratamiento (Figura
13).Se realiz seguimiento a las hijas al ecotipo Trujillo sin espinas para observan
la segregacin. Hubo segregacin en el ecotipo sin acleos, la mayora de las
hijas presentaron acleos, se evidencia que el carcter acleos no es estable
porque hay plantas que tienen acleos hasta el primer entrenudo del tallo y en
otros casos los acleos estn dispersos o sobre los foliolos.
Ensayo 2
Se encontraron diferencias significativas entre tratamientos; el tratamiento cido
sulfrico al 60% tuvo el promedio de emergencia ms alto 52.2% y con los
ecotipos Salenmora 1 y Sara se registraron emergencias del 82,3 y 80,2%
Tambin se encontraron diferencias significativas entre ecotipos, Castilla Juntas,
Sara, Guatica y Salenmora registraron mejores emergencias que Tenerife (tabla
8). Salenmora no fue constante en la germinacin, cuando se evaluaron tres
plantas de este ecotipo hubo diferencias significativas entre ellas seguramente
debido a las diferencias genticas entre ellas explicadas por el 73% de ovarios
sexuales y la viabilidad Polnica del 99%.

24

Figura 13. Porcentajes de emergencia de ecotipos de mora de castilla bajo 4 tratamientos de

escarificacin
Tabla 8. Promedios de emergencia de seis tratamientos de escarificacin en ecotipos de mora de
castilla
Tratamiento
cido sulfrico

Salen

Castilla

mora1

Juntas

82,3

62,5

20,8

22,9

51,0

22,9

Tenerife

Salen

Guatica

Sara

35,4

57,3

13,5

27,1

61,5

33,3

14,6

52,1

13,5

46,9

mora7

Salen

Promedio

mora 6

Trata

80,2

27,1

52.229

47,9

51,0

41,7

37.643

33,3

20,8

37,5

38,5

36.771

24,0

39,6

35,4

42,7

49,0

36.443

25,0

22,9

60,4

60,4

34,4

35.400

57,3

31.700

60%

Choque
trmico
cido ctrico

AB

50ppm
cido sulfrico

AB

30%

AB

cido sulfrico
20%

agua

1,0

56,3

20,8

34,4

22,9

29,2

Promedio

26.200

55.050

22.900

32.117

40.783

50.167

41.333

Ecotipo

BC

AB

Tratamientos y ecotipos con diferente letra difieren estadsticamente, =0,05

Desde el inicio de la emergencia a los 60 das hasta los 90 das se registr poca
emergencia; pasados 90 das y hasta los 106 das se pas de promedios del 10 al
55%. Figura 14.
En este trabajo se registraron emergencias del 82% a los 3,5 meses despus de
la siembra escarificando con cido sulfrico (tabla 8). Los ecotipos respondieron
de manera diferenciada a los tratamientos. Castilla Juntas, Sara, Guatica y
Salenmora tuvieron emergencias ms altas que Tenerife. Salenmora no fue
constante en la emergencia porque se evaluaron tres plantas de este ecotipo y
hubo diferencias significativas entre ellas. Sugae, (2007) registr diferencias
significativas entre especies.

25

Figura 14. Promedios de emergencia en ecotipos de mora de castilla bajo tratamientos de

escarificacin.

El choque trmico y el cido ctrico son tratamientos que deben tenerse en cuenta
porque registraron emergencias de 61 y 51%, respectivamente. Adems son
tratamientos sencillos de aplicar y no requieren mayores cuidados por parte de los
agricultores. El cido ctrico puede obtenerse en las fincas a partir de limones que
tienen altas concentraciones de cido ctrico. Aunque el cido sulfrico es el
tratamiento ms eficiente no es sencillo de aplicar dados los costos y restricciones
que tiene la comercializacin, adems de los cuidados que deben tenerse para su
manipulacin que difcilmente pueden tenerse en condiciones de campo. Su
aplicacin se puede realizar para investigacin en programas de mejoramiento
gentico.
d. Variabilidad gentica en medias hermanas de seis ecotipos de mora
de castilla.
Usando 4 cebadores RAMs se estim la variabilidad gentica en cinco progenies
de medios hermanos de los ocho ecotipos evaluados de mora de castilla. En todos
los ecotipos se encontr variabilidad gentica y se detectaron duplicados. Algunos
parmetros genticos como porcentaje de loci polimrfico y heterocigocidad fueron
estimados usando el programa TFPGA (herramientas para el anlisis gentico de
poblaciones). El nmero de loci evaluado estuvo entre 57 y 49 significativos si se
tiene en cuenta que se generaron de 4 cebadores RAMs y el nmero de loci
polimrfico fue bajo entre 16 y 34 %. La heterocigocidad fue baja y estuvo entre
0.10 y 0.25.
La polinizacin de la mora es predominantemente cruzada y es facilitada por la
diferenciacin temporal de los sexos donde el polen esta receptivo antes que los

26

ovarios, lo que puede explicar la variabilidad gentica encontrada en los medios

hermanos. Con el paquete estadstico NTSYS se construyeron dendogramas de
cada ecotipo para observar agrupamientos genticos de los medios hermanos.
Tabla 9. Parmetros genticos
Material

Heterocigocidad
insesgada

% loci polimrfico

Ranchona Juntas

0.15

38.9

Abrazos

0.10

32.6

Castilla Juntas

0.13

35.3

Trujillo espinas

0.22

54

Guatica

0.25

57.9

e. Agrupamientos genticos de los medios hermanos

Ecotipo Ranchona Juntas
El anlisis mediante el coeficiente de Nei li (1979) a un ndice de similaridad de
0.94 diferenci los medios hermanos en 6 grupos, un grupo grande con 6
duplicados y dos grupos con tres duplicados cada uno (Figura 15).

Figura 15. rbol de la estructura gentica de medios hermanos de Ranchona juntas basado en el
coeficiente de similaridad de Nei-li, calculado de 4 cebadores RAMs.

Ecotipo abrazos
A un ndice de similaridad de 0.97 se formaron dos grupos grandes, un grupo con
dos subgrupos y cuatro duplicados y en el otro grupo dos subgrupos y dos
duplicados.

27

Figura 16. rbol de la distancia gentica de medios hermanos de Abrazos basado en el coeficiente
de similiaridad de Nei-Li, calculado de 4 cebadores RAMs.

Ecotipo Castilla Juntas

A un ndice de similaridad de 0.94 se formaron 3 grupos un grupo grande con 5
subgrupos y tres duplicados un grupo con dos individuos y el otro con un individuo
sin duplicados.

Figura 17. rbol de la estructura gentica de medios hermanos de castilla Juntas basado en el
coeficiente de Nei-Li, calculado de 4 cebadores RAMs.

28

Ecotipo Guatica: A un ndice de similaridad de 0.87 se formaron tres grupos un

gran grupo con 5 subgrupos y dos duplicados, un grupo con dos subgrupos y el
otro con un individuo.

Figura 18. rbol de la estructura gentica de medios hermanos de guatica basado en el coeficiente
de Nei-Li, calculado de 4 cebadores RAMs.

Ecotipo Trujillo sin espinas

A un ndice de similaridad de 0.86 se formaron cinco grupos, cada grupo con
subgrupos y un grupo grande con 2 duplicados.

Figura 19.rbol de la estructura gentica de medios hermanos de Trujillo con espinas basado en el
coeficiente de Nei-Li, calculado de 4 cebadores RAMs.

El anlisis de agrupamiento evidenci la variabilidad encontrada en todos los

ecotipos y la segregacin existente en los medios hermanos. En todos los ecotipos

29

se encontraron duplicados y formacin de grupos genticos. Hay ecotipos con

mayor variabilidad gentica en las progenies de medios hermanos posiblemente al
grado de heterocigocidad y al porcentaje de polinizacin cruzada que tenga cada
ecotipo.
Los resultados de esta investigacin concuerdan con las investigaciones
realizadas para evaluar variabilidad gentica en progenies de moras apomcticas
usando marcadores dominantes. Marcadores dominantes como AFLPs y RAPDs
han sido usados para estimar variabilidades en medios hermanos de especies de
Rubus apomcticas. Amsellem et al., (2001) reportaron que con estos marcadores
se pudo discriminar variabilidad y uniformidad gentica en medios hermanos de
individuos de Rubus alceifolius.
Estos resultados demuestran que las especies de mora apomcticas
pseudogmicas, tienen baja variabilidad dentro y entre progenies aunque la
reproduccin sexual contribuye a la variabilidad gentica en poblaciones naturales.
2.1.1.5. Conclusiones
La presencia de apomixis facultativa fue encontrada en ocho ecotipos de
mora de castilla pertenecientes a la coleccin de materiales de mora de
castilla de la Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira. Predomin
la sexualidad, ya que entre 30 y 83 % de los ovarios evaluados fueron
sexuales.
Se encontr alta viabilidad polnica entre el 80 y 99 % de los granos
evaluados.
La apomixis facultativa y la alta viabilidad polnica encontrada sugiere la
presencia de speudogamia donde el polen es necesario para la produccin
de semillas y frutos.
La baja variabilidad gentica, loci polimrfico entre 16 y 34% y
heterocigocidad entre 0.10-0.25, la formacin de grupos genticos y
plntulas con el mismo genotipo concuerdan con los reportes hechos en
moras apomcticas facultativas.
La emergencia de semillas de mora bajo tratamientos de escarificacin en
promedio tard 60 das y se registr emergencias hasta cinco meses
despus de la siembra.
Los porcentajes de emergencia ms altos del 80% se obtuvieron
escarificando con cido sulfrico al 60%.
Los tratamientos cido ctrico y choque trmico registraron 61 y 51% de
emergencia y deben tenerse en cuanta debido a su fcil manipulacin en
campo.
De acuerdo a las variaciones encontradas en los porcentajes de
emergencia; el ecotipo, sustrato, tratamiento de escarificacin y ambiente
influyen en la emergencia de las semillas de mora de castilla.

30

2.1.1.6. Bibliografa
AMSELLEM, L.; NOYER, J.; HOSSAERT, M. (2001) Evidence For A Switch In The Reproductive Biology Of
Rub us Alceifolius (Rosaceae) Towards Apomixis, Between Its Native Range And Its Area Of Introduction. A.J
of Bot 88(12): 22432251.
CRANE, M. (1943). Reproductive versatility in Rub us. I. Morphology and inheritance. Joun of Gen (40): 109
118.
GUSTAFSSON, A. (1943). The genesis of the European blackberry flora. Lunds Univers Ars (39):1200.
KOLLMANN, J.; STEINGER, T.; BARBARA, R. (2000). Evidence of sexuality in European Rubus (Rosaceae)
species based on AFLP and Allozyme analysis. Ame Journ of Bot. 87(11): 1592-1595.
WERLEMARK, G.; NYBOM, H. (2003).Pollen donor impact on progenies of pseudogamous blackberries
(Rub us subgen. Rub us). Euphytica 133:7180,

2.1.2. Reconocimiento y evaluacin de enemigos naturales asociados

a perla de la tierra Eurhizoccocus colombianus Jakubsky (1965)
en tres zonas productoras de mora4
Objetivo del Proyecto (3):Desarrollar y evaluar estrategias de biocontrol de las
plagas y enfermedades ms importantes.
2.1.2.1. Objetivos especficos
Realizar el reconocimiento de especmenes de perla de la tierra y sus
enemigos naturales
Evaluar la patogenicidad de los enemigos naturales ms promisorios en
condiciones de laboratorio.
2.1.2.2. Marco Referencial
En Colombia, el manejo fitosanitario de la mora (Rubus glaucus) es considerado el
mayor limitante de la produccin. El primer estudio sobre insectos-plaga asociados
al cultivo fue realizado por Choucair (1962), quien registr a la perla del suelo
Margarodes sp., adherido a la raz de la planta succionando savia. Figueroa
(1965) citado por Martnez (1974) la encontr sobre arracacha, Arracacia
xanthorrhiza Bancr., en el Valle del Cauca y la identific como Eurhizococcus
brasiliensis. En el mismo ao, Jakusky corrobor la identificacin como E.
colombianus. Martnez (1974), report la presencia de perla de la tierra asociada a
mora en la localidad de Costa Rica (Ginebra, Valle del Cauca).
La especie Eurhizococcus colombianus se encuentra clasificada en el Orden:
Heteroptera, Familia: Margarodidae, Tribu: Eurhizococcini (Jakubski, 1965).
Especie que ha afectado la produccin de mora en el Valle del Cauca durante los
ltimos 30 aos. Los estados ninfales fijan su estilete en las races de las plantas
4

Ana Milena Caicedo. Universidad Nacional de Colombia.

31

para extraer la savia, conllevando a su deterioro progresivo hasta causar la muerte

de las mismas (Foldi, 2005). El control con el uso de insecticidas de sntesis no
han sido efectivos por la presencia de la cera que recubre los estados ninfales
adheridos a la raz y la profundidad a la cual se encuentran, entre 10-30 cm de
profundidad, factores que contribuyen a la ineficacia del manejo qumico.
Adicionalmente, las condiciones topogrficas (pendientes) y climticas (alta
pluviosidad), favorecen la baja residualidad y penetrabilidad de los productos
qumicos (Zapata, 2009).
Tanto la hembra como los machos solo cumplen funciones de reproduccin y no
se alimentan. Las hembras suben a la superficie del suelo para aparearse y
despus vuelven a las races para ovipositar los huevos en un ovisaco. El
desarrollo tanto de machos como hembras se caracteriza por estados podos, a
excepcin del primer estado ninfal, el cual es circular, pequeo, 0.7-1.4 mm de
largo y 0.2-0.6 mm de ancho y se le conoce como gateador o crawler (en ingls)
(Foldi, 2005). Algunos autores como Osorio (2005), Carvajal (2002) y Lopera
(2001), hacen referencia a este estado como estado larval, lo cual est
errneamente designado, considerando que el estado larval se presenta en
insectos holometbolos (metamorfosis completa) y la perla de la tierra es un
insecto hemimetbolo (metamorfosis incompleta) el cual se desarrolla en huevos,
ninfas, quistes y adultos (Foldi, 2005).
Como alternativa de control se presenta el desarrollo y evaluacin de una
propuesta de manejo integrado de E. colombianus en cultivos de mora en el Valle
del Cauca, basada en el reconocimiento de la especie-plaga y los principales
enemigos naturales y su posterior identificacin, multiplicacin y evaluacin en
campo. Diversos estudios con insecticidas qumicos han sido evaluados para las
diferentes especies de perla de tierra a nivel mundial. De Klerk (1987) evalu el
efecto del Hexaclorobutadieno incorporado al suelo para el control de adultos.
Gonzlez et al (1969) evalu 37 insecticidas sobre todos los estados de perla
Margarodes vitis en condiciones de laboratorio, ninguno produjo resultados
satisfactorios. Productos como Dioxathion, Disulfuton, Phorate, Parathion y
Carbophenothion, aunque no causaron mortalidad a los adultos, inhibieron la
eclosin de los huevos. En Colombia, no se conoce ningn estudio sobre
evaluacin de insecticidas sobre E. colombianus.
2.1.2.3. Metodologa
El reconocimiento de los estados biolgicos y bsqueda de los enemigos
naturales asociados a E. colombianus, se realiz en zonas productoras de mora
del departamento del Valle del Cauca, municipio de Ginebra, corregimiento de
Juntas, vereda Portugal y en la corregimiento Cocuyos, vereda la Cascada, Valle
del Cauca, en fincas ubicadas a una altura promedio entre 2.100 y 2245 m.s.n.m.
y temperatura promedio de 16 5C y humedad relativa de 80 5 %. En el
departamento de Risaralda se muestre la zona de Santa Rosa de Cabal, vereda

32

La Paloma a 1800 m.s.n.m. y temperatura promedio de 17 C y en el

departamento de Caldas, en el programa de sistemas agropecuarios de la
seccional Sena Manizales a una altura promedio de 2.153 msnm y temperatura
promedio de 18 5C y HR de 80 5%.
Se realizaron salidas peridicas cada tres meses durante 18 meses. En cada una
de las zonas seleccionadas se colectaron especmenes de los diferentes estados
de perla de tierra y muestras de suelo en diez sitios diferentes, tres plantas por
sitio y tres muestras de suelo por planta con barreno sacabocado a una
profundidad entre 0-30 cm. Las muestras de especmenes se almacenaron en
viales plsticos y el suelo en bolsas plsticas, rotuladas y transportadas en
neveras de icopor al laboratorio de cra de insectos de la universidad Nacional
sede Palmira, para su procesamiento e identificacin.
Procesamiento muestras en laboratorio
Los especmenes colectados en campo se clasificaron de acuerdo a su estado,
huevos, ninfas (quistes) y adultos para su diagnstico taxonmico. El resto de
especmenes se sumergieron en una solucin de hipoclorito al 3% durante 3
minutos y se lavaron tres veces con agua destilada estril. Posteriormente, se
confinaron en vasos plsticos con arena estril y los individuos que presentaban
sintomatologa de infeccin por hongos, se separaron en cmaras hmedas, para
su aislamiento, purificacin, multiplicacin e identificacin. Los especmenes sanos
se sometieron a un proceso de cuarentena para su uso en bioensayos de
laboratorio.
Las muestras de suelo de cada zona se mezclaron y se procesaron 10 submuestras de 300 g, con 10 larvas de Diatraea saccharallis como insecto-trampa
durante siete das. Las larvas muertas y con cambios de color se lavaron y se
colocaron en cmaras hmedas para la recuperacin de hongos y trampas White
para la recuperacin de nematodos entomopatgenos. Una vez recuperados y
debidamente aislados, purificados, identificados y almacenados, se multiplicaron
masivamente bajo condiciones de laboratorio. A cada muestra de suelo se le
realiz tres veces el mismo procedimiento.
Pruebas de patogenicidad
Se realizaron bioensayos para determinar la mortalidad de ninfas de segundo
instar de E. colombianus. Se utiliz el mtodo de inmersin y la unidad
experimental consisti en un vaso plstico de 5 onzas con 3g de arena estril y
3% humedad (v/v) y un solo individuo. Cada tratamiento cont con 10 unidades
experimentales y tres repeticiones en el tiempo. Se evalu una sola dosis, 1x10 10
esporas/ml. El tratamiento control slo se le aplic agua estril.
Se utiliz el diseo de bloques completos al azar con tres repeticiones en el
tiempo. El bloque, el criterio de bloque fue la repeticin en el tiempo. La evaluacin
se realiz a los cinco y nueve das despus de inoculados. Se registr el nmero

33

de insectos muertos, los cuales se pasaron a cmara hmeda para la esporulacin

del hongo. Los datos se sometieron a anlisis de varianza y separacin de medias
por Tukey. Los tratamientos fueron los aislamientos nativos de Metarhizium
anisopliae y Paecilomyces fumosoroseus y cepas comerciales de Metarhizium
anisopliae y Beauveria bassiana.
2.1.2.4. Resultados y discusin
a) Reconocimiento de E. colombianus
Se obtuvieron especmenes de todos los estados biolgicos de E. colombianus,
huevos y ninfas de primer instar (Fig. 20); ninfas de segundo, tercero, prepupa y
hembra adulta de E. colombianus (Fig. 21). Es importante resaltar que durante
todo el tiempo de muestreo siempre se encontraron los diferentes estados, lo cual
sugiere el traslape de generaciones, lo que permite la persistencia del insecto
durante todo el ciclo del cultivo. Adicionalmente, se observ que las hembras
adultas presentan una marcada diferencia de tamaos, encontrndose individuos
con un tamao de hasta 4 veces de diferencia (Fig. 22). Las especies de la familia
Margaroridae tienen la capacidad de reproducirse por partenognesis tipo
telitoquia facultativa, permitiendo que las hembras produzcan huevos sin
necesidad de cpula con el macho, siendo posible obtener hembras tanto de
reproduccin sexual como asexual (Fig. 23). Es importante resaltar el hallazgo de
pupas y adultos machos de E. colombianus, lo cual no haba registrado por ningn
autor hasta la fecha (Fig. 24).

Figura 20. Huevos, Ninfas de primer instar de E. colombianus

Figura 21. Ninfas de segundo, tercer, cuarto instar. Prepupas y

Hembra adulta de E. colombianus

34

Figura 22. Hembras de diferente tamao de E. colombianus

Figura 23. Hembras partenogenticas y sexuales de E. colombianus

Figura 24 . Pupa y preimago de macho de E. colombianus

Reconocimiento de enemigos naturales

Se procesaron 154 muestras de suelo procedentes de cuatro sitios de tres
departamentos diferentes. Todas las muestras fueron positivas para hongos
entomopatgenos. Se capturaron adultos y ninfas de E. colombianus con
presencia del hongo M. anisopliae y P. fumosoroseus de la vereda Portugal,
municipio de Ginebra (Fig. 25). En Risaralda y Caldas se aislaron cuatro
aislamientos de M. anisopliae y dos de B. bassiana. No fue posible recuperar
nematodos entomopatgenos asociados a estados de E. colombianus.

35

Figura 25. Desarrollo natural del hongo M. anisopliae sobre ninfas y adultos de E. colombianus.

Las cepas aisladas tanto de especmenes de E. colombianus como de perla de

tierra como del insecto-trampa, fueron aisladas, purificadas y almacenadas en el
laboratorio (Fig. 26).
Pruebas de patogenicidad:
El tratamiento que caus la mayor mortalidad a las ninfas de tercer estado fue M.
anisopliae aislado de Portugal, con 53% y 100% a los cinco y nueve das despus
de inoculados respectivamente. En contraste, P. fumosoroseus caus slo el 6.6%
a los cinco das y el 67 % a los nueve das. Los hongos comerciales evaluados de
M. anisopliae y B. bassiana a los cinco das de inoculados causaron mortalidades
entre 6 y 23 %, pero a los nueve das M. anisopliae alcanz el 70% de mortalidad
y B. bassiana lleg a slo 36%.

Figura 26. Aislamiento y purificacin de Metarhizium (A) y Paecilomyces (B) de estadios de perla
de la tierra

36

Los resultados obtenidos son contrastantes con respecto a las evaluaciones

realizadas por Carneiro et al (1994), encontraron que a una concentracin entre
105 y 108 conidias/ml de Paecilomyces fumosoroseus caus una mortalidad del
94% en contraste con los hongos B. bassiana y M. anisopliae con slo un 30% de
mortalidad, 28 das despus de inoculados.
Carvajal (2002), evalu el efecto patognico de tres cepas de P. fumosoroseus
aislados sobre sobre E. colombianus, obtuvo mortalidades entre 29 y 86% de
mortalidad a una temperatura de 17 C con una concentracin de 1x10 7 despus
de 29 y 42 das de inoculacin. Farfn, (2006) evalu el efecto de diferentes
formulaciones de P. fumosoroseus sobre ninfas y adultos de perla de la tierra. La
formulacin en granulado mostr mortalidadades de 35%, el doble que la obtenida
con los polvos mojables, 15% de mortalidad 30 das despus de inoculados.
Lopera (2001), evalu el efecto patognico de varias cepas de M. anisopliae con
una concentracin de 1x10 8 esporas/ml, las cuales no causaron ningn efecto
patognico despus de 40 das de aplicacin.
2.1.2.5. Conclusiones
Los resultados obtenidos permiten considerar a la cepa nativa de M. anisopliae
como una alternativa viable para el manejo de poblaciones de E. colombianus en
cultivos de mora en el municipio de Ginebra.
2.1.2.6. Bibliografa
CARNEIRO, R. M. D. G.; SORIA, S. de J.; Kulczynki, S. M.; SILVA, J. B. Patogenicida d de
Paecilomyces fumosoroseus isolado CG 259 Eurhizococcus brasiliensis Hempel (Homoptera:
Margarodidae). Anais da Sociedad de Entomolgica do Brasil, v.23, n. 2, p. 345-348, 1994.
FOLDI, I. Y SORIA, S.J. Les Cochenilles nuisibles a la Vigne en Amerique du Sud (Homoptera:
Coccoidea). En: Annals Soc. Ent. France. (N.S.), 1089.25 (4)411-430.
JAKUBSKI, A.W. 1965. A critical revision of the families Margarodidae and Termitococcidae
(Hemiptera: Coccocidae). London; [s.n.], p.p. 171-181.
LOPERA, 2001. Evaluacin de la patogenicidad de aislamientos de Metharhyzium anisoplae
OSORIO J.C. 2005. Distribucin radical de la perla de la tierra Eurhizococcus colombianus y
relacin con factores ambientales en mora. Tesis Ingeniero Agrnomo. Universidad Nacional Sede
Medelln.
ZAPATA, P. 2009. El cultivo de la mora. Tesis especializacin en frutales tropicales. Universidad
Nacional de Colombia. 102 p.

37

2.1.3. Establecimiento de un protocolo para la multiplicacin

vegetativa
de
plntulas
inoculadas
con
hongos
biocontroladores como valor agregado y como estrategia
preventiva para el manejo integrado de plagas y enfermedades
en campo5.
Objetivo del Proyecto (1): Con la participacin de agricultores, empresas
comercializadoras y procesadoras seleccionar materiales lite de lulo y mora, con
criterios de adaptabilidad, resistencia a enfermedades, productividad y aceptacin
del mercado.
Objetivo del Proyecto (5): Fortalecer la capacidad de agricultores y tcnicos en el
manejo integrado de los cultivos de mora y lulo y desarrollar capacidades de
innovacin en los actores de las cadenas productivas
2.1.3.1. Objetivos
Multiplicar plntulas limpias con sustrato tratado e inoculado con hongos
biocontroladores, para beneficio social de los integrantes de ASOFAMORA.
Evaluar la eficacia de productos biolgicos como una alternativa eficaz para
el enraizamiento y el manejo integrado de plagas y enfermedades de
manera amigable con el medio ambiente desde el invernadero.
Establecer en la vereda Costa Rica instalaciones para multiplicar
vegetativamente Rubus glaucus.
2.1.3.2. Marco Referencial
La mora de castilla, Rubus glaucus Benth, ha sido cultivada por los agricultores de
economa campesina de las zonas de ladera del Valle del Cauca (1800-2400
m.s.n.m.), especialmente en los municipios de Guacar y Ginebra, adquiri
importancia su cultivo por rea y produccin desde los aos 1960, posibilitando la
expansin del cultivo y la creacin de una cooperativa de productores de mora
con sede en el corregimiento de Costa Rica, municipio de Ginebra. Para la
siembra de toda el rea se utilizaron ecotipos nativos de la regin: la mora
ranchona, hartona y castilla. Esta rea sembrada y su produccin disminuy
paulatinamente a tal punto que el cultivo casi desaparece del municipio de
Ginebra y Guacar hacia el ao 1998 a causa de malas prcticas de manejo como
la multiplicacin vegetativa por races o cepas y el acodo de punta con sustratos
(suelo) extrados de los lotes cultivados ya contaminados. Esta situacin ha
contribuido a que en la zona se presente un complejo de plagas y enfermedades
limitantes para el cultivo de la mora, principalmente aquellas que tienen que ver
con el sistema radical como: perla de la tierra Eurhizococcus colombianus, el
picudo del cuello de la planta Zascelis sp y el barrenador de tallos, ramas y races
Hepialus sp y pudricin de races Verticillium sp, Fusarium sp y Rosellinia sp.
5

Pedro Zapata, Jaime Eduardo Muoz y Herney Daro Vsquez.

38

Se estn desarrollando en el Valle del Cauca programas de siembra y renovacin

de reas de mora con el ecotipo mora sin espinas denominado tambin como
mora lisa o mora salentuna. Este ecotipo est presentando excelente
comportamiento en calidad, produccin, vigor y adaptacin pero hay que realizar
evaluaciones de tolerancia a plagas y enfermedades y los riesgos que se
presenten al sembrar un solo material gentico. Como estrategia para corregir
esta problemtica se propone la elaboracin de un protocolo para la seleccin,
multiplicacin vegetativa y la produccin de plntulas empleando sustratos y
semillas (esquejes) tratados e inoculados con mezcla de hongos biocontroladores;
para ofrecer un material de excelente calidad y con tratamientos preventivos para
el manejo de plagas y enfermedades del suelo en el campo.
Desde el ao 2002, la Universidad Nacional de Colombia, sede Palmira por
intermedio del Programa de Investigacin en Diversidad Biolgica y Frutales
Tropicales, en su lnea de investigacin en mora ha colectado y caracterizado la
diversidad biolgica del sur occidente colombiano con marcadores morfolgicos y
moleculares y ha evaluado algunos mtodos de multiplicacin vegetativa con
resultados que dependen del genotipo. ASOFAMORA (Asociacin de Familias
Productoras de Mora) en colaboracin con FONTAGRO estn estableciendo y
renovando 60 hectreas de mora sin espinas con 120 agricultores y ha decidido
hacerlo con plntulas seleccionadas, limpias obtenidas en invernadero de acuerdo
a un protocolo de multiplicacin de semilla.
2.1.3.3. Metodologa
a. Multiplicacin de la mora de castilla sin espina por el mtodo de
esqueje o estaca, protocolo
Este es el mtodo ms recomendado en la multiplicacin de la MORA SIN
ESPINA, por razones fitosanitarias y genticas, este mtodo es el que ms se est
empleando en ASOFAMORA para la ejecucin de sus planes se siembra, es el
ms conveniente y econmico ya que:
No se trasmiten plagas y enfermedades del suelo.
Es el mtodo por el cual se consigue mayor cantidad de material de estacas
por planta mensualmente.
Brinda varias alternativas de manejo al productor entre ellas la siembre
directa en campo que ahorra hasta el 80% de los costos por semilla
Para la obtencin de material de siembra por este mtodo, se procede de la
siguiente manera:
b. Preparacin y alistamiento de la herramienta a emplear (manejo y
tratamiento)
Tijera podadora con buen filo
Desinfectante (yodo al 10% o hipoclorito de sodio al 10%)

39

Despus de un da de trabajo lavar la tijera con agua y jabn, limpiar

con alcohol y colocar 2 gotas de aceite.
Guantes
Nota: durante la jornada de trabajo limpiar peridicamente la hoja de la tijera con
la solucin desinfectante (Figura 27).

Figura 27. Tratamiento de desinfeccin de la tijera durante el proceso.

Foto de: Pedro A. Zapata

c. Seleccin de plantas madre en campo

Se hace necesario seleccionar las plantas madres de las cuales se va a
recolectar el material (Figura 28). Estas deben tener caractersticas de buena
produccin, calidad de fruta, vigorosas, tolerantes a plagas y enfermedades, y,
que se encuentren adaptadas y aclimatadas a la regin (Franco y Giraldo 2002)
Recoleccin de estacas en el campo
Una vez seleccionada la planta madre, se elegirn
las ramas productivas en las que ya fueron
cosechados sus frutos y se procede a dividir o
cortar estacas con las yemas, las estacas deben
tener consistencia leosa o semileosa y se
cortaran del tercio medio de la rama, dejando
aproximadamente 1 cm de rama secundaria o de
pecolo de hoja para proteger las yemas, el corte
debe ser inclinado o en bisel (Figura 29). Una vez
cortadas las estacas o esquejes se deben colocar
en la sombra y se deben utilizar en el menor
tiempo posible (Franco y Giraldo 2002).
Figura 28. Seleccin de plantas
madre en campo. Foto de:
Germn Franco.

40

Figura 29. Corte y recoleccin de estacas en campo. Foto de: Pedro A. Zapata

d. Tratamiento
estacas

desinfeccin

de

Despus de la recoleccin de estacas se debe

seguir el siguiente tratamiento de desinfeccin:
Lave las estacas con agua limpia y desinfecte:
Sumergir las estacas por 10 minutos en
una solucin de 1 parte de agua y 2 partes de
jugo de limn (Figura 30)
Sumergirlas durante media hora en:
Figura 30. Tratamiento de estacas con
Limn Rugoso. Foto de: Pedro A.
Zapata

Previcur (IA: Propamocarb-HCl): 3 cc/litro.

Dejar secar a la sombra durante 30
minutos y realice la siembra.

e. Construccin de Viveros
La multiplicacin masiva de estacas, requiere de condiciones controladas como
lluvia, humedad relativa y sombra, para lo cual se deben construir viveros con los
materiales disponibles en la zona (guadua), utilizar plstico transparente calibre 6
y tela Sarn del 65 o 75%, los mdulos no deben superar un rea de 8 x 8 m
(Figura 31).

Figura 31. Construccin de invernaderos en Campo con mnimo de

insumos. Foto de: Pedro A. Zapata

41

f. Construccin de germinadores
Una vez tratadas y desinfectadas las estacas, se pueden colocar en camas de
aserrn para que germinen (Figura 32), como se presenta a continuacin:
Construir una cama de material de guadua, a una altura de 60 cm del piso,
y con las siguientes dimensiones: 1 m de ancho x 20 cm de profundidad x el
largo necesario para el nmero de estacas que se desea sembrar.
Utilizar como sustrato aserrn limpio y grueso de madera blanca.
Desinfectar el aserrn utilizando agua hirviendo o por el mtodo de
solarizacin
Una vez desinfectado el aserrn, proceder a sembrar las estacas de la
siguiente manera:
Ubicar las estacas en hilera y de forma horizontal sobre el aserrn, dejando
un espacio de 2 cm entre estacas. Tapar completamente las estacas con
una capa delgada de aserrn. Humedecer el germinador.
Cubrir el germinador con un umbrculo construido en helecho o sarn.
A los 20 o 30 das del trasplante, se presenta germinacin de plntulas
provenientes de las yemas de las estacas (parte area y parte radicular)
(Figura 33). En ese momento las plntulas estn listas para ser trasplantas
al hoyo en el campo o se pueden cortar la fraccin de estaca que tiene la
plntula germinada y se puede sembrar en bolsa con suelo preparado.

Figura 32. Plntulas

producidas en Germinadores
de Aserrn. Foto de: Pedro A.
Zapata

Figura 33. Germinador con

aserrn de pino ptula. Foto de:
Pedro A. Zapata

g. Construccin de almcigos
Las estacas se pueden llevar a bolsas plsticas con sustrato preparado en forma
de siembra directa o plntula, como se presenta a continuacin:

42

Preparacin de medio o sustrato

Utilizar suelo negro y de textura liviana que no se haya trabajado en
agricultura, mezclar bien 3 partes de este suelo con una parte de materia
orgnica compostada (por ejemplo pulpa de caf descompuesta).
Tamizar la mezcla para sacar piedras, trozos de madera y para que
quede homognea
Desinfectar la mezcla por el mtodo de solarizacin (Figura 34)
Llenar las bolsas como se presenta a continuacin (Figura 35)

Figura 35 Preparacin y mezcla

adecuada del sustrato. Foto de: Pedro A.
Zapata

Figura 34. Bolsas listas con sustrato

tratado para el transplante de las
plntulas. Foto de: Pedro A. Zapata

Llenado de bolsas
Se utilizan bolsas de polietileno de color negro calibre uno y medio o dos,
perforadas a los lados y al fondo y de un tamao de 15 cm x 10 cm.
Siembra de la estaca
Desinfectar la estaca como se mencion anteriormente y sembrarla inclinada en la
bolsa, dejando por fuera una yema.
Se puede sembrar la fraccin de estaca ya germinada con la plntula en la bolsa.
Procedimiento para el trasplante de estacas con brotes o plntulas a la
bolsa
Este es el paso ms delicado en el proceso de multiplicacin debido a que el
sistema radical de las plantas se puede lastimar, causando dao fsico y
posibilitando la entrada de microorganismos patgenos.
El procedimiento a seguir durante el trasplante es el siguiente:
Debe llenarse la bolsa con el sustrato hasta llenar las partes de
ella.
La plntula trada del germinador se coloca cuidadosamente sobre la
superficie del sustrato y se adicionan diez gramos de inculo

43

comercial de micorriza de manera que quede en contacto con la raz

de la planta.
Luego se agrega suavemente el sustrato restante para completar el
llenado de la bolsa con la plntula.
El cuello de la plntula debe quedar en el borde de la superficie del
sustrato
Regar inmediatamente (Burbano 2007).
Mantenimiento del almcigo
Se deben regar peridicamente las bolsas de acuerdo a las condiciones
climticas, adicionar agua de tal manera que las plantas se mantengan en
condiciones hmedas evitando el exceso de humedad.
h. Plan de inoculacin
En el momento de trasplante o despus de la germinacin se les debe adicionar a
las plantas como tratamiento preventivo una mezcla de los siguientes productos:
A base de
A base de
A base de
A base de

Trichoderma harzianum : 5 gr/litro

Paecilomyces lilacinus 4 gr/litro
Metarhizium anisopliae 4 gr/litro
Beauveria bassiana 4 gr/litro

Como alternativa se puede utilizar un producto comercial que rena una mezcla de
los hongos anteriores en una concentracin de: 5 gr/litro (Castellanos y Botero
2003a) (Figura 36).
i. Plan de fertilizacin
Aplicar cada cinco das con el agua de riego
la mezcla de los siguientes productos:
Fosfacel (fosfato diamnico): 2 gr / litro
Cosmocel (N-P-K- elementos menores)
2 g/ l.
Kelatex-Zinc: 1g/l
(Ethylendiaminotetracetato Zn (II) sdico),
Transcurrido un mes despus de la
Figura 36. Tratamiento con hongos
biocontroladores. Foto de: Ana Milena
Caicedo

germinacin las plntulas estn listas para el

trasplante a campo.

El empleo de hongos entomopatgenos y antagnicos para el control de

plagas y enfermedades de la rhizosfera de la planta de mora y almcigos.
El Trichoderma el cual fue seleccionado para ser utilizado como biocontrolador y
promotor de races es un hongo nativo del suelo que crece y se desarrolla sobre

44

sustrato orgnico en descomposicin. Presenta propiedades antagnicas sobre

varios hongos fitopatgenos del suelo. El Trichoderma crece como un moho verde
azul sobre los sustratos, produce gran nmero de esporas de fcil diseminacin y
crece mejor en suelos con pH superior a 6. Se produce fcilmente en laboratorio y
su gran potencial reproductivo permite obtener niveles de inoculo muy alto en poco
tiempo (Castro y Daz 2001)
El trabajo se realiz en el vivero de ASOFAMORA localizado en el corregimiento
de Costa Rica municipio de Ginebra (Valle) a una altura de 1200 metros sobre el
nivel del mar, el cual fue dotado con fondos del proyecto. Se construy con
recursos de Fontrago un invernadero de 8 x 8 metros con cubierta de plstico
trasparente calibre 6 y con malla sarn del 75% y se construyeron camas altas del
suelo a una altura de 80 cm, 1 m de ancho por 7 m de largo, como sustrato se
emple aserrn de madera de pino patula. Como unidad experimental se utilizaron
estacas de mora de castilla cultivar mora sin espina con 3 yemas vegetativas,
cada una, y de un tamao promedio de 18 a 20 cm, las cuales fueron
seleccionadas por su sanidad y buen estado.
El material vegetal fue recolectado en el campo y llevadas al vivero en donde
fueron divididas con tijeras podadoras. Para evaluar el efecto
del hongo
trichoderma sobre el enraizamiento de las estacas se emplearon los siguientes
tratamientos (Figura 37):
T1 = Multibiol: (Inculo comercial lquido que contiene Trichoderma)
T2 = Trichotropico: (Inculo Comercial en polvo que contiene Trichoderma)
T0 = Limn y cristales de sbila (Control)
Se utilizaron 20 estacas por tratamiento con
tres repeticiones (3 estacas x 3 tratamientos
x 3 repeticiones = 180 estacas) (Figura 39).
Se realiz una aplicacin de los tratamientos
al inicio de experimento en dosis de 8
gramos por litro de los inculos comerciales
y para el tratamiento testigo con limn y
cristales de sbila se emple 50 % de agua
y 50% de partes iguales de limn y cristales
de sbila (Figura 38).
Figura 37. Estacas sometidas a los

Los tratamientos y sus repeticiones se diferentes tratamientos. Foto de: Ana

Milena Caicedo
distribuyeron al azar en las camas que
contenan el sustrato enraizador.

45

Figura 39. Distribucin de las

estacas con los diferentes
tratamientos en las camas. Foto de:
Ana Milena Caicedo

Figura 40. Estacas evaluadas visualmente. Foto

de: Pedro A. Zapata

Figura 38 Aplicacin de los diferentes

tratamientos en las camas. Foto de: Ana
Milena Caicedo

Evaluacin
Se evaluaron las variables: porcentaje
de estacas que presentaron formacin
de brotes de follaje, porcentaje estacas
que presentaron emisin de races y
porcentaje de estacas que presentaron
formacin de brotes de follaje y emisin
de races (plntulas) (Figura 40).
Esta evaluacin se realiz a los 28 das
despus del trasplante de las estacas a
las camas.

2.1.3.4. Resultados y discusin

TRATAMIENTO

T0
T1
T2

Tabla 10. Resultados obtenidos en los diferentes tratamientos.

N
DE % FORMACION % FORMACION % FORMACION
ESTACAS
BROTES
RAICES
BROTES
+
RAICES
60
53
30
8
60
66
46
28
60
68
38
20

Con relacin al porcentaje de formacin de brotes (tabla 10) se encontr una

mejor respuesta con los tratamientos uno y dos (superior al 50%), que
corresponden a los tratamientos con TRICHODERMA. Con respecto al porcentaje
de formacin de races los resultados son similares a los anteriores, los
tratamientos uno y dos tambin mostraron una mejor respuesta. Para la formacin
de plntulas (brotes ms races), aunque los resultados fueron bajos se ve una

46

tendencia a presentar los porcentajes ms altos las plntulas inoculadas con

TRICHODERMA, esto indica que puede existir un efecto del hongo en el
enraizamiento de los esquejes (Figuras 41, 42,43).

Figura 41. Enraizamiento sin Trichoderma. Foto de: Pedro A. Zapata

Figura 42. Enraizmaiento con trichoderma (Multibiol). Foto de: Pedro A.

Zapata

Figura 43. Enraizamieto con trichoderma (Trichotropico). Foto de:

Pedro A. Zapata

47

Las estacas que producen solo brotes o races se siembran en bolsas y un alto
porcentaje de ellas producen plantas completas. Este tipo de multiplicacin tiene
como ventajas con relacin al que usan los agricultores de la zona que se
producen plantas sanas (libres de plagas y enfermedades), porque provienen de
plantas madres seleccionadas, corresponden a la variedad seleccionada, no se
propaga la perla de tierra principal plaga de la zona, la cual causa porcentajes de
mortalidad de plantas muy altas y es la principal causa de abandono de los
cultivos. La utilizacin de plantas provenientes de estos sistemas de multiplicacin
garantiza el establecimiento de cultivos sanos con posibilidades de mayor
duracin y productividad
2.1.3.5. Conclusiones
Los experimentos de enraizamiento con esquejes de Mora, empleando
hongos antagnicos constituyen una alternativa ambientalmente sostenible
para mejorar la produccin de plntulas sanas en viveros.
La manipulacin y metodologa de germinacin del esqueje en camas con
aserrn debe revisarse y ajustarse.
Qued establecido en una de las regiones con ms tradicin en el cultivo de
mora una metodologa e instalaciones adecuadas para producir plntulas
2.1.3.6. Bibliografa
BURBANO, B.M.I. 2007: Evaluacin de los diferentes mtodos de propagacin de la Mora (Rubus
Glaucus Benth) Universidad Nacional de Colombia sede Palmira. 91p.
CASTELLANOS, C.P.A; BOTERO, I.R.G. 2003: Produccin de Mora. (Rubus Glaucus Benth) Con
tutores
vivos. COOPORACION COLOMBIANA DE INVESTIGACION AGROPECUARIA
COORPOICA. 105p.
CASTRO, R.D.; DIAZ, J.J. 2001: Alternativas para el manejo integrado para el cultivo de la Mora de
Castilla (Rubus Glaucus Benth). Universidad Catlica de Oriente, Unidad de biotecnologa vegetal.
73p.
FRANCO, G; GIRALDO C. 1998: El cultivo de la Mora. COOPORACION COLOMBIANA DE
INVESTIGACION AGROPECUARIA COORPOICA 81p.
FRANCO, G; GIRALDO C. 2002: El cultivo de la Mora. COOPORACION COLOMBIANA DE
INVESTIGACION AGROPECUARIA COORPOICA 79p.

2.1.4. Caracterizacin molecular y patognica de aislamientos de

Colletotrichum spp. asociados a la antracnosis de mora en el
Valle del Cauca6.
Objetivo Del Proyecto (2): Caracterizar las colecciones de germoplasma, por
variabilidad gentica y resistencia a plagas y enfermedades de mayor importancia
6

Arenas, Adriana, Alvarez Elizabeth y Gonzlez Alonso.

48

2.1.4.1. Objetivos
Objetivo General
Evaluar la variabilidad inter e intraespecfica del agente causante de la antracnosis
en cultivos de mora (Rubus glaucus) del Valle del Cauca, mediante pruebas
moleculares y de patogenicidad.
Objetivos Especficos
Estandarizar pruebas de patogenicidad en laboratorio, y caracterizar
patognicamente aislamientos de Colletotrichum spp. asociados a la
antracnosis en cultivos de mora del Valle del Cauca.
Identificar la(s) especie(s) de Colletotrichum asociada(s) a la Antracnosis en
cultivos de mora del Valle del Cauca, mediante cebadores especie
especficos (CgInt , CaInt2 y Col1) y SSCP.
Determinar mediante la tcnica molecular RAMS, la variabilidad
intraespecfica de aislamientos vallecaucanos de Colletotrichum spp.
causantes de la Antracnosis en mora.
2.1.4.2. Marco Referencial
El cultivo de la mora se ve afectado por varias enfermedades, entre las ms
importantes se encuentra la antracnosis (Colletotrichum spp. Corda), el moho gris
(Botrytis cinerea), el mildeo velloso (Peronospora spp), mildeo polvoso (Oidium
spp.) (Franco et al. 2002), la roya (Spirechina loeseneriana o Gerwasia lagerheim),
marchitez y pudricin de raz (Verticillium spp., Fusarium spp., Rosellinia spp.)
(Franco et al. 2000).
La antracnosis causada por Colletotrichum spp., no se reporta como la principal
limitante a la produccin del cultivo de mora, sin embargo cada vez cobra mayor
inters en el campo fitopatolgico debido a que afecta entre el 53% y el 70% de
los tallos de las plantas cultivadas (Tamayo 2003), presenta incidencias que
pueden alcanzar el 100% (J. Zuleta, datos no publ.) y merece especial atencin en
todas las pocas del ao.
La especie C. gloeosporioides, es un hongo de distribucin cosmopolita
predominante en los trpicos y subtrpicos (Sutton 1992), que muestra el mayor
grado de diversidad morfolgica, biolgica y el ms amplio rango de hospederos
de todas las especies de Colletotrichum (Gaztambide 2005), afectando frutos
como el de la manzana, aguacate, higo, ctricos, aj, tomate, calabaza, tomate de
rbol, fresa (Johnston et al. 1997), mango, banano, papaya, guayaba y uva (Dodd
et al. 1992).
C. acutatum Simmonds (1965 ) puede tambin causar una amplia gama de
enfermedades de antracnosis sobre importantes cultivos econmicos, de los

49

cuales la fresa es uno de los ms importantes, afecta tambin frutos como la

almendra, manzana, aguacate, arndano, ctricos, arndano agrio, uva, kiwi,
papaya, melocotn, pacana, pimienta, y tomate (Guerber et al. 2001).
Las tcnicas moleculares son una alternativa complementaria para la identificacin
de las especies de Colletotrichum que permiten establecer diferencias entre los
aislamientos. El mtodo de reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) se utiliza
para amplificar fragmentos de ADN, que mediante iniciadores como los ITS y los
RAMS, generan copias de regiones especficas o al azar de la cadena de ADN
(Starr et al. 1998), siendo de importancia para determinar la variabilidad gentica
de los organismos.
La gravedad de los daos causados por Colletotrichum spp. se debe a la carencia
de conocimientos adecuados sobre el agente causante de la enfermedad y su
hospedero. Las nicas herramientas de control a disposicin de los agricultores
son algunas prcticas culturales y el uso excesivo de agroqumicos, que resulta en
alto contenido de residuos txicos, representando un riesgo para el consumidor
por la aplicacin directa sobre la fruta.
En consecuencia, es necesario llevar a cabo investigaciones como las del
presente trabajo en el que se realiz la caracterizacin molecular y patognica de
Colletotrichum spp., aislado de cultivos de mora del Valle del Cauca (Colombia),
las especies asociadas con la enfermedad se identificaron mediante el uso de
cebadores especficos y el anlisis del polimorfismo conformacional de cadena
simple (SSCP). Dentro de cada especie identificada se evalu la variabilidad y
composicin poblacional del patgeno, mediante el empleo de micro satlites
amplificados al azar RAMS (Random Amplified Microsatellite por sus siglas en
ingls), y pruebas de patogenicidad en 53 aislamientos inoculados en material de
mora con susceptibilidad intermedia.
Estos resultados contribuyeron a una mayor comprensin de la enfermedad,
proporcionando herramientas tiles para posteriores estudios relacionados con el
diseo de alternativas tecnolgicas para el manejo integrado de la antracnosis en
mora, de modo que se generen cambios encaminados a mejorar
significativamente el estado fitosanitario del cultivo de la mora.
2.1.4.3. Metodologa
Colecta de muestras
La colecta de tejido de mora de Castilla afectado por Antracnosis se realiz en los
municipios productores de sta fruta en el Valle del Cauca (Colombia): Buga,
Tulu, Ginebra, Palmira, Cerrito, Guacar, Trujillo, Jamund y Dagua.
La caracterizacin patognica y molecular de los aislamientos se realiz en el
Laboratorio de Patologa de Frutas del Centro Internacional de Agricultura
Tropical, ubicado en la ciudad de Palmira (Colombia), a una altura de 965 msnm,

50

temperatura promedio 24C, humedad relativa de 76% y una precipitacin media

anual de 965mm.
Para la obtencin de las muestras se visitaron cultivos de mora en los que se
colectaron mnimo cuatro muestras de tallo y/o fruto con sntomas tpicos de la
enfermedad como lesiones ovales de color violceo alrededor de la espina, muerte
descendente de ramas, frutos momificados o con necrosamiento en drupas. Las
muestras de fruto y tallo (3-5 estacas de 20 cm) fueron cortadas, cada muestra fue
depositada en una bolsa de papel debidamente etiquetada, protegida por una
bolsa plstica. Se conservaron en una nevera de icopor acondicionada con
bloques de hielo hasta el momento de ser procesadas. Cada sitio de colecta fue
geo- referenciado mediante el empleo de un geoposicionador satelital Etrex
Garmin (Taiwn).
Obtencin de aislamientos monospricos
Esporulacin en medio de cultivo Agar Marthur
Esporulacin en cmara hmeda
Crecimiento del aislamiento monosprico ace
Almacenamiento del cultivo monosprico
Pruebas de patogenicidad
Para llevar a cabo la prueba de patogenicidad se realiz un ensayo piloto con seis
de los 53 aislamientos de Colletotrichum spp. Cada aislamiento fue inoculado en
tres ecotipos de mora denominados por los agricultores Castilla, Hartona y Sin
Tuna, los cuales han registrado bajo condiciones de campo reacciones de
susceptibilidad, resistencia y alta resistencia respectivamente. Se evalu el mismo
material para todos los ecotipos excepto Castilla donde se evaluaron dos
materiales, los cuales bajo condiciones de campo presentaron diferencias en su
comportamiento frente a la antracnosis: el primero procedente del municipio de
Buga, y con una incidencia del 90% de antracnosis fue designado como Castilla
susceptible y el segundo procedente del municipio de Guacar y con una
incidencia del 8% de antracnosis, fue designado como Castilla intermedio.
Se realizaron evaluaciones al da 1, 2, 3, 6, 7, 9, y 12 despus de la inoculacin.
En las evaluaciones se midi el largo y ancho de la lesin y se multiplicaron
ambos valores entre s para efectos de comparacin; con el valor arrojado por la
multiplicacin se calcul el porcentaje del tamao de la lesin denominado rea
de la lesin. A partir de los resultados obtenidos se seleccion el ecotipo Castilla
intermedia para inocular los 53 aislamientos de Colletotrichum spp., utilizando para
ello la metodologa descrita, excepto que se establecieron 5 repeticiones y los
tiempos de evaluacin fueron al da 5, 9, 13, 17 y 21 despus de la inoculacin.

51

Pruebas moleculares
Extraccin de ADN: Se extrajo el ADN de 53 aislamientos monospricos
seleccionados, siguiendo el protocolo de Mahuku (2004) con modificaciones
reportadas por lvarez et al. (2004).
PCR con cebadores especficos: la identificacin molecular de las especies de
Colletotrichum asociadas a la antracnosis en mora de Castilla, se realiz mediante
PCR, amplificando las regiones especficas del ADN ribosomal del hongo,
mediante el cebador universal ITS4 (5TCCTCCGCTTATTGATATGC-3) en
combinacin con los cebadores especie especficos para C. gloeosporioides
(CgInt) (5GGCCTCCCGCCTCCGGGCGG3), C. acutatum (CaInt2) ((5GGGGAGCCTCTCGCGG-3) y con el cebador taxn especfico (Col1) (5GCCGTCCCCTGAAAAG-3) (Afanador et al. 2003) para una especie an no
identificada asociada con algunos frutales tropicales.
Identificacin de especies mediante anlisis SSCP: la identificacin de las
especies de Colletotrichum realizada previamente con cebadores especie
especficos se confirm mediante el empleo de electroforesis SSCP (del ingls
Single-strand-conformation polymorphism) de la regin 5.8S interna transcrita
(ITS) del ADN ribosomal empleando la metodologa desarrollada por Kong et al.
(2004).
Amplificacin al azar de microsatlites (RAMS): inicialmente se evaluaron los
cebadores CCA (DDB (CCA)5), CGA (DHB (CGA)5), GT (VHV (GT)5 G), AG (HBH
(AG)7 A), CT (DYD (CT) 7C), TG (HVH (TG) 7T), ACA (BDB(ACA)5) y CA(DBDA
(CA) 7), donde los sitios degenerados pueden remplazar las bases entre parntesis
para H (A, T o C), B (G, T o C), V (G, A o C) y D (G, A o T) con seis muestras
representativas por especie y la mayora de zonas de muestreo, con el fin de
determinar el grado de polimorfismo ofrecido por stos.
Electroforesis en agarosa: el producto amplificado de RAMS se separ por
electroforesis en un gel de agarosa al 2% teido con bromuro de etidio (0.1 ppm)
empleando buffer TBE 0.5X (Trisma base, cido brico y ETDA), a 100 V. En
cada gel se incluy 5 l de marcador de peso molecular de 1 Kb; las bandas se
visualizaron bajo luz ultra violeta y la imagen obtenida se captur utilizando un
lector de geles Gel Doc 2000 (BioRad, USA Inc.).
Anlisis estadstico
Para establecer los niveles de patogenicidad, se emplearon datos obtenidos a
partir del rea de la lesin desarrollada sobre el tallo, y se analizaron por medio
del programa Statistic versin 8.0 (Analytical Software, St. Paul, Minn) segn un
diseo completamente al azar para cada da de evaluacin y para el rea bajo la
curva del progreso de la enfermedad (ABCPE). Para todos los das de evaluacin
se realiz un anlisis de varianza (ANOVA) y una prueba de comparacin mltiple
de Dunnett (POSTANOVA) con un nivel de significancia del 5% que permiti

52

determinar los aislamientos que presentaron diferencias significativas frente al

control.
Con base en los perfiles de bandas generados por los cebadores universales
seleccionados, los fragmentos de ADN se analizaron como un carcter
independiente y los del mismo tamao se consideraron como un representante del
mismo locus gentico; generando as una matriz binaria de ausencia (0) y
presencia (1) para los 53 aislamientos de Colletotrichum spp., y el grupo externo
comprendido por las especies Phaeoisariopsis griseola y Colletotrichum
lindemuthianum.
Se realiz un anlisis de correspondencia mltiple mediante el programa
estadstico SAS (SAS Institute Inc. 2000). El anlisis asocia todos los aislamientos
con las caractersticas con que fueron calificados, es decir, asocia todas las filas
con las columnas determinando el nivel de proximidad o asociacin. Empleando el
paquete estadstico POPGEN versin 1.32 (Yeh et al 1999), se calcul la
heterocigocidad promedio (h) de acuerdo a la frmula de Nei (1973) y el
porcentaje de loci polimrficos, para cada uno de los cebadores, las especies y la
poblacin general.
2.1.4.4. Resultados y discusin
Caracterizacin morfolgica del material colectado
En campo la mayor incidencia de la antracnosis en mora de Castilla del Valle del
Cauca, se observ en los municipios de Jamund, Dagua, Buga y Palmira, con
valores estimados entre 80 y 100%. La menor incidencia de la enfermedad se
registr en algunas fincas de los municipios de Ginebra, Guacar, Tulu, Cerrito y
Trujillo, con valores entre el 5 y 20%.
Los ecotipos donde se aisl Colletotrichum spp., en mora de Castilla fueron
principalmente Castilla y Hartona, encontrndose en una menor proporcin la
Regional, Hartona Negra, Hartona Blanca, y Ranchona.
El 98% de los aislamientos fueron obtenidos a partir de lesiones ovales de color
prpura desarrollados en la base de las espinas del tallo, sobre las que se observ
el desarrollo en cmara hmeda de acrvulos y masas de esporas color salmn
(Figura 1) y el 2% restante se obtuvo de fruto a partir de las masas de esporas
color salmn.

53

Figura 1. Sntomas y signos tpicos de antracnosis en tallos de mora de Castilla. A: lesin oval
tpica color prpura en tallo, B: acrvulos y masas de esporas color salmn sobre la espina, C:
Acrvulos y masas de esporas color salmn en tallo.

Caracterizacin morfolgica de Colletotrichum spp.

Mediante una evaluacin macroscpica y microscpica de las colonias, se
confirm que los 53 aislamientos pertenecen al gnero Colletotrichum spp.,
observndose en medio PDA caractersticas como micelio de color verde oliva a
grisceo o blanco crema, presencia de acrvulos con masas de esporas de color
salmn; en algunos casos, con caractersticas tpicas de la especie C. acutatum,
con forma ahusada y pices agudos (Figura 2A, 2B y 2E) y en otros, tpicas de la
especie C. gloeosporioides, con conidias cilndricas de pices redondeados
(Figura 2C, 2D y 2F).

Figura 2. Colonias tpicas de Colletotrichum spp., en medio PDA y estructuras reproductivas. A y

B: Colonias de C. acutatum; C y D: colonias de C. gloeosporioides; E y F: esporas tpicas de C.
acutatum y C. gloeosporioides respectivamente.

Establecimiento de un cepario
A partir de las colectas realizadas, se estableci el cepario con 80 aislamientos de
Colletotrichum spp., provenientes de los principales municipios productores de
mora del Valle del Cauca. La coleccin se conserva en forma de cultivos

54

monospricos guardados en papel filtro a -20 C, en el laboratorio fitopatologa de

frutas del CIAT. Para este estudio se seleccionaron 53 aislamientos del cepario,
representativos en el nmero de municipios, fincas y ecotipos aislados.
Patogenicidad
Los sntomas observados en los tallos inoculados con Colletotrichum spp. bajo
condiciones de laboratorio consistieron en manchas generalmente ovaladas con
bordes irregulares de color violceo o negro, que avanzaron en forma diferente
entre los aislamientos lo que permiti relacionar el rea de lesin con el nivel de
patogenicidad. Los controles (tallos inoculados con bloques de agar sin micelio) no
presentaron ningn tipo de sntoma a travs de los 21 das de duracin del
experimento. En la Figura 3 se presenta el avance del progreso de la enfermedad
del aislamiento DaJ-46C1 inoculado en un nico clon Castilla.

Figura 3. Dao causado por Colletotrichum spp. en segmentos de tallos de mora del clon Castilla
para el aislamiento DaJ-46C1.

El anlisis de varianza mostr diferencias significativas (P<0.001) entre los

aislamientos para el rea de la lesin (cm2), durante todos los das de evaluacin y
para el rea bajo la curva del progreso de la enfermedad (ABCPE). Se
establecieron cinco niveles de patogenicidad: muy alto, alto, intermedio, bajo y no
patognico. Los niveles patognico alto e intermedio se seleccionaron a partir de
los aislamientos que presentaron diferencias significativas frente al control durante
los das de evaluacin, y los niveles de patogenicidad bajo y no patognico se
determinaron de acuerdo a la separacin de medias LSD en el ABCPE.
De los 53 aislamientos evaluados el 3.8% no produjo sntomas en los tallos
inoculados (aislamientos GiC-23T y TuL-98), el 22.6% resultaron con un nivel de
patogenicidad bajo, el 43.4 % presentaron un nivel intermedio, el 17% un nivel alto
y el 13.2% presentaron un nivel de patogenicidad muy alto.
En la Figura 4 se muestra que los aislamientos de los municipios de Trujillo,
Guacar y Buga son los ms diversos en cuanto a niveles de patogenicidad,
presentando niveles muy altos, altos, intermedios y bajos. Palmira, Jamund y
Dagua tienen un nivel intermedio de patogenicidad, y Ginebra fue el nico
municipio con aislamientos sin nivel intermedio, presentando solo aislamientos en
los niveles de baja patogenicidad (50% del total de aislamientos de baja
patogenicidad) y no patognico (50% del total de aislamientos de los no
patognicos).

55

Figura 4. Nivel de patogenicidad por municipio de 53 aislamientos de Colletotrichum spp.

inoculados en tallos de mora clon Castilla del Valle del Cauca.

Los aislamientos de nivel patognico muy alto se aislaron de los ecotipos Castilla
(57.1%), Hartona (14.3%), Hartona negra (14.3%) y Regional (14.3%); los
aislamientos no patognicos se encontraron en Hartona negra (50%) y Hartona
blanca (50%). Los ecotipos de los cuales se obtuvieron aislamientos con mayor
diversidad en los niveles de patogenicidad fueron Regional y Hartona (Figura 5).

Figura 5. Porcentaje de los aislamientos con diferentes niveles de patogenicidad (muy alto, alto,
intermedio, bajo y no patognico) obtenidos a partir de distintitos ecotipos de mora del Valle del
Cauca.

Se encontraron diferencias significativas (F=34.3; P <0.001) entre C. acutatum y

C. gloeosporioides, con respecto a la patogenicidad de los aislamientos,
resultados de patogenicidad demostraron que C. gloeosporioides es ms
patognico que C. acutatum. Ginebra es el municipio que posee el mayor
porcentaje de aislamientos pertenecientes a la especie C. acutatum dentro de la
cual el 50% pertenecen al nivel bajo y el otro 50% al nivel no patognico.

56

Identificacin de especies mediante la amplificacin de los cebadores

especie especficos
El ADN obtenido utilizando el mtodo de extraccin Mahuku et al (2004) con
modificaciones (lvarez et al. 2004), fue de buena calidad y con concentraciones
entre los 5 ng/L y 83ng/L (Figura 6). Los cebadores taxn-especfico CaInt2
para la especie C. acutatum en combinacin con el iniciador ITS4 amplificaron un
fragmento de 490-pb y el cebador CgInt para la especie C. gloeosporioides, en
combinacin con el ITS4 amplificaron un producto de ADN de 450-pb (Figura 7, 8)
1

4 5

7 8

9 10 11 12 13 14 M

Figura 6. Electroforesis en gel de agarosa al 0.8 % de ADN genmico total de Colletotrichum spp.
aislado de mora de Castilla del Valle del Cauca.

M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
M

M 1 2 3
M

500pb

4 5

6 7

8 9 10 11 12 13 14 15

500pb

Figura 7. Visualizacin en gel de agarosa al 1.2%. de 14 aislamientos amplificados mediante los

cebadores taxn-especfico. A: cebador CaInt2 para la especie C. acutatum y B: cebador CgInt
para la especie C. gloeosporioides. M: marcador de peso molecular de 100pb, 1: Gi-20t, 2: GiC-23f,
3: GiC-23t, 4: GiP-17C1, 5: GiP-17C2, 6: BuM-66, 7: GuL-81, 8: GuL-89, 9: PaA-35, 10: DaJ-46C1,
11: DaJ-46C2, 12: DaJ-50, 13: DaJ-51, 14: DaJ-59, 15: Control negativo.

57

M 1

7 8

M 1

3 4

7 8 M

500pb

500pb
Figura 8. Visualizacin en gel de agarosa al 1.2% de los controles referencia y cuatro aislamientos
(Identificados como C. gloeosporioides excepto GiC-20t) amplificados mediante los cebadores
taxn-especfico. A: CaInt2 y B: CgInt. M: marcador de peso molecular de 100pb, 1: DaJ-50, 2:
GiC-20t, 3: GuL-81, 4: GuL-93, 5: Col1, 6: GND-1 C (Control referencia para C. gloeosporioides), 7:
TOM 009 (Control referencia para C. acutatum), 8: Control negativo, M: marcador de peso
molecular de 100pb

Los productos de amplificacin con los cebadores especie-especficos indican que

el 19% de los aislamientos provenientes de mora de Castilla del Valle del Cauca
pertenecen a la especie C .acutatum, el 81% pertenecen a la especie C.
gloeosporioides, y ninguno a la poblacin de Colletotrichum spp. El aislamiento
79C1 mostr una reaccin inespecfica, no amplificando para ninguno de los
cebadores especie especfico; sin embargo, mediante el patrn SSCP, amplific
para la especie C. gloeosporioides.
Electroforesis SSCP
Los 53 aislamientos amplificaron con los cebadores ITS1-ITS4 generando un
fragmento de 580 pb en gel de agarosa 1.2%. A partir de dicho fragmento y
empleando la tcnica de SSCP se observ un patrn de bandas caracterstico
para las especies C. acutatum y C. gloeosporioides al igual que para los controles
Phaeoisariopsis griseola, Colletotrichum lindemuthianum y Colletotrichum spp.
Las especies C .gloesporioides y C. acutatum presentaron un patrn conjunto de
cinco bandas; la banda 3 fue comn a ambas especies y las bandas 2, 10 y 11
fueron especficas para cada especie. La estructura secundaria de las bandas 10 y
11 permitieron una movilidad electrofortica mediante SSCP mayor a la de las
dems bandas y fueron tiles para diferenciar C. gloeosporioides y C. acutatum

58

respectivamente, corroborando as la identificacin de los aislamientos con los

cebadores especie-especficos (Figura 9).
Para la electroforesis de los SSCP, 43 aislamientos fueron identificados como C.
gloeosporioides y 10 aislamientos como C. acutatum; ninguno de los aislamientos
de mora Castilla present el patrn correspondiente a la especie no identificada de
Colletotrichum. Adicionalmente para los aislamientos BuM-66 y PaA-35
previamente identificados como C. gloesporioides mediante cebadores especficos
se encontraron tres bandas adicionales (Figuras 9 y10), aunque estas variaciones
no enmascaran el patrn en los SSCP. Los controles referencia P. griseola y C.
lindemuthianum, presentaron un patrn de seis bandas; la banda 6 fue compartida
por ambas especies y las bandas 3, 7, 12 y 13 fueron especficas para cada una.
La especie no identificada de Colletotrichum present un patrn de tres bandas,
dos de ellas compartida con las especies C. gloeosporioides y una particular de la
especie. El patrn general presentado por cada control referencia, fue utilizado
como base para identificar los 53 aislamientos de Colletotrichum spp. de mora de
Castilla.

Figura 9. Representacin esquemtica de los patrones de SSCP hallados para las especies P.
griseola, C. lindemuthianum, Colletotrichum spp., C. acutatum, C. gloeosporioides durante la
electroforesis de un gel no desnaturalizante.

RAMS
Se gener una matriz de 112 bandas de carcter polimrfico a partir de los
cebadores ACA, CA, GT, CT y AG. El nmero de bandas por cebador vari de 17
(CT) a 33 (AG). Se encontraron 15 bandas exclusivas para el grupo externo (P.
griseola, C. lindemuthianum), 4 bandas particulares y 3 no polimrficas para la
especie C. acutatum y 3 bandas particulares y 1 no polimrfica para C.
gloeosporioides. La Figura 11 presenta un ejemplo del perfil de amplificacin
RAMS para el cebador GT.

59

Figura 10. Electroforesis SSCP de Colletotrichum spp. en gel de poliacrilamida. 1-6. aislamientos
que amplificaron para C. gloeosporioides con los cebadores especficos, 7. C. gloeosporioides, 8.
C. acutatum, 9. C. lindemuthianum, M. Ladder 1kb.

M 1 2
(-) M M

9 10 11 12 Cl

Pg

Figura 11. Patrones de bandas gnerados por el cebador GT. M: marcador de peso molecular de
1Kb, 1-3: aislamientos TrC-106, TrC-107 y TrS-117, 4-7: aislamientos CeR-122, CeR-123, CeR126, CeR-128 8-12: aislamientos JaN-143, JaN-147as, JaN-147co, JaN-149 y JaN-151, Cl: C.
lindemuthianum , Pg: P griseola , (-): Control negativo, M: marcador de peso molecular de 100pb.

Coeficiente de similitud de Nei-Li

El anlisis para los 53 aislamientos, a un valor de 0.47, diferenci las dos especies
de Colletotrichum halladas, las cuales generaron el grupo A para la especie C.
gloeosporioides y el grupo B para la especie C. acutatum (Figura 12). El grupo
externo C. lindemuthianum se separ de las especies C. gloeosporioides y C.

60

acutatum a un coeficiente de similitud de 0.34, mientras que P. griseola lo hizo a

un coeficiente de similitud de 0.305.

Figura 12. Dendrograma de la estructura gentica de los 53 aislamientos de Colletotrichum spp.

basados en el Coeficiente de Similitud de Nei-Li y calculado de los datos combinados de los cinco
cebadores Microsatlites RAMs, con el mtodo de clasificacin UPGMA.

Con el fin de facilitar la presentacin de las relaciones genticas entre los

aislamientos se construyeron dendogramas separados para cada especie. El
primero, incluye todos los aislamientos de C. gloeosporioides (grupo A), el cual
forma 8 subgrupos a un coeficiente de similitud de 0.665 (Figura 13). El subgrupo
A1 lo conforman dos aislamientos de Ginebra (100%) ambos de baja
patogenicidad. El subgrupo A2 est conformado principalmente por el 86% de
aislamientos de Dagua, el 80% de Guacar y el 40% de Palmira, siendo el 40% de
los aislamientos de nivel patognico alto. El subgrupo A3
lo conforman
aislamientos de Trujillo (100%), Cerrito (100%), Jamund (100%), Tulu (75%), y
Buga (50%), con el 57% de aislamientos de patogenicidad muy alta. El subgrupo
A4 lo conforma un aislamiento de Tulu de nivel intermedio. El subgrupo A5 est
conformado por un aislamiento de Dagua con un nivel de patogenicidad alto y otro
de Palmira de nivel intermedio. Un aislamiento de Guacar de nivel patognico alto
conforma el subgrupo A6. Al subgrupo A7 pertenece un aislamiento de Palmira de
nivel intermedio de patogenicidad, y el subgrupo A8 est conformado por los
niveles: muy alto, alto e intermedio pertenecientes al municipio de Buga.

61

Figura 13. Dendrograma de la estructura gentica de Colletotrichum gloeosporioides basados en el

Coeficiente de Similitud de Nei-Li.

En cuanto a C. acutatum (grupo B) se diferenciaron 4 subgrupos a un coeficiente

de similitud de 0.62 (Figura 14). El subgrupo B1 lo conforman aislamientos de
Ginebra (60%) y Palmira (100%) con los niveles de patogenicidad bajo (37.5%) y
no patognico (50%). El subgrupo B2 est conformado por el 100% de los
aislamientos de Guacar y el 100% de Tulu con niveles bajo de patogenicidad
(12.5%) y no patognico (50%). El subgrupo B3 lo conforma un aislamiento de
Trujillo (100%) de baja patogenicidad (12.5%). El subgrupo B4 est conformado
por el 37.5% de aislamientos de baja patogenicidad pertenecientes a los
municipios de Ginebra (40%) y Buga (100%).

Figura 14. Dendrograma de la estructura gentica de Colletotrichum acutatum basados en el

Coeficiente de Similitud de Nei-Li y calculado de los datos combinados de los cinco cebadores
Microsatlites RAMs, con el mtodo de clasificacin UPGMA.

62

Diversidad gentica
Los valores de heterocigosidad de Nei (1973) hallados para cada uno de los cinco
cebadores evaluados vari entre 0.26990.1525 (cebador CT) y 0.35890.1613
(cebador CA) y todos presentaron un 100% de loci polimrficos.
Los anlisis de diversidad gentica para el conjunto de los cinco cebadores,
mostraron que los aislamientos de Colletotrichum spp., son variables con una
diversidad total (HT) de 0.30940.0268 y una diversidad dentro de cada municipio
evaluado (HS) de 0.20740.0116. La heterocigosidad de Nei (1973) para los
aislamientos como una poblacin total fue de 0.31220.1620 lo que revela
polimorfismo gentico. Para C. gloeosporioides el h fue de 0.2741 0.1833, el HT
de 0.27600.0336 y el HS de 0.15980.0125, y para C. acutatum el h fue de
0.32050.1517, el HT de 0.33310.0249 y el HS de 0.04030.001 para C.
acutatum.
El municipio de Ginebra exhibi el valor ms alto tanto de heterocigosidad de Nei
(0.28700.1613) para el total de los cebadores y para el porcentaje de loci
polimrficos (86.61%). El anlisis de heterocigosidad de Nei para Ginebra por
especie permiti determinar la influencia en dicho resultado de las dos especies,
encontrndose un valor de 0.10730.1823 para C. gloeosporioides y un valor de
0.24210.1953 para C. acutatum. El municipio de Jamund present el valor ms
bajo tanto de heterocigosidad de Nei (0.10050.1771) como para porcentaje de
loci polimrficos (27.68%).
La AMOVA para los 53 aislamientos siguiendo el agrupamiento por municipios
mostr que el 19.18% de la variacin gentica es atribuida a las diferencias entre
los municipios con un nivel de confianza del 0.01%, y el 80.82% dentro de los
mismos municipios. El ndice de diferenciacin gentica (F ST) encontrado fue de
0.192 (P <0.001). El AMOVA para cada una de las especies arroj que la variacin
gentica atribuida a las diferencias entre los municipios para la especie C.
gloeosporioides fue de 23.40 % (P<0.001) y la restante variacin 76.60% se
present dentro de los municipios, con un FST de 0.234. La variacin gentica
atribuida a las diferencias entre los municipios para C. acutatum fue de 11.59%
(P<0.001) y el 88.41% dentro de los mismos, con un F ST de 0.116.
Esto sugiere que las diferencias entre municipios es ms marcada para la especie
C. gloeosporioides. El FST para cada cebador fue variable, desde 0.133 para el
cebador ACA hasta un mximo de 0.356 para el cebador AG; los dems
cebadores presentaron los siguientes valores AC 0.139, CT 0.144 y GT 0.156, los
cuales son apropiados para determinar diferencias genticas segn criterio de
Wright (1978).
En cuanto a los niveles de patogenicidad establecidos analizados con los datos de
RAMS, permitieron observar que el nivel patognico bajo presenta el ms alto
(0.31530.1395) ndice de diversidad gentica mientras que el nivel no patognico
(0.16270.235) muestra el menor ndice.

63

Distancia gentica
La Tabla 1 muestra que los municipios de Guacar y Trujillo presentan el valor ms
bajo de distancia gentica (0.0572) y el ms alto de identidad gentica (0.9444),
mientras que los municipios Ginebra y Jamund poseen el valor ms alto de
distancia gentica (0.2787) y el ms bajo de identidad gentica (0.7567), stos
resultados pueden observarse en rbol obtenido por medio del anlisis UPGMA
(Figura 15).
Tabla 1. Distancia e identidad gentica insesgada de Nei (1978) por municipios. Identidad gentica
(sobre la diagonal) y distancia gentica (debajo de la diagonal)
Municipios
Ginebra Palmira Dagua
Buga Guacar Tulu Trujillo Cerrito Jamund
Ginebra
****
0.9189
0.8341 0.9225
0.9035
0.8849
0.8626
0.7632
0.7567
Palmira
0.0846
****
0.9178 0.9153
0.9172
0.8796
0.8875
0.8496
0.8120
Dagua
0.1815
0.0858
****
0.8988
0.9073
0.8526
0.8967
0.8220
0.8058
Buga
0.0806
0.0885
0.1066
****
0.9301
0.9152
0.9271
0.8499
0.8454
Guacar
0.1015
0.0864
0.0973 0.0724
****
0.9426
0.9444
0.8585
0.8729
Tulu
0.1223
0.1283
0.1594 0.0886
0.0591
****
0.9252
0.8642
0.8699
Trujillo
0.1477
0.1194
0.1090 0.0757
0.0572
0.0777
****
0.8814
0.9026
Cerrito
0.2702
0.1630
0.1960 0.1627
0.1526
0.1460
0.1263
****
0.9381
Jamund
0.2787
0.2082
0.2159 0.1680
0.1359
0.1393
0.1025
0.0639
****

Figura 15. rbol de distancia de Nei (1978) basado en el coeficiente de similitud de Nei -Li y el
mtodo UPGMA mediante el programa estadstico POPGEN para aislamiento de Colletotrichum
spp. provenientes de nueve municipios usando microsatlites RAMS.

Mediante cebadores especie especficos y SSCP, se identificaron las especies C.

gloeosporioides (81%) y C. acutatum (19%) como asociados a las poblaciones del
agente causante de la antracnosis en la mora de Castilla (Rubus glaucus) del
Valle del Cauca. Estudios preliminares realizados por Saldarriaga (2005) reportan
la especie C. acutatum como el agente causante de la antracnosis en mora,
mientras que Forero de la Rotta et al (2002) reportan la especie C. gloeosporioides
como la causante de la enfermedad. De igual manera Cedeo et al. (1992), en
estudios realizados en Venezuela sobre la caracterizacin morfolgica y
patognica de los aislamientos de Colletotrichum spp., aislados de mora Castilla,

64

comprob que la enfermedad es provocada por el hongo C. gloeosporioides. Sin

embargo no se han reportado estudios donde se encuentren ambas especies
asociados a plantaciones de mora.
La tcnica de cebadores especie especficos y la de electroforesis SSCP,
constituyeron una herramienta til para la identificacin de las especies del
patgeno. La tcnica SSCP permiti confirmar los resultados obtenidos mediante
el empleo de los cebadores especficos, y aunque requiere de un mayor tiempo de
ejecucin, tambin permiti determinar la especie (C. gloeosporioides) a la cual
pertenece el aislamiento GuL-79C1 el cual no logr ser identificado mediante el
empleo de cebadores especie especficos.
Las especies C. acutatum y C. gloeosporioides se separaron tambin de acuerdo
al nivel de patogenicidad, siendo la especie C. acutatum menos patognica que la
especie C. gloeosporioides. En dos casos particulares en los que se aisl C.
acutatum y C. gloeosporioides de la misma lesin, C. acutatum present baja
patogenicidad, mientras que C. gloeosporioides mostr un nivel de patogenicidad
intermedio. Tambin es probable que C. acutatum presente un nivel de
patogenicidad bajo frente al ecotipo Castilla intermedio en el que fue inoculado y
se halla especializado en atacar otro tipo de clones, donde si es patognico, por lo
que se sugiere realizar pruebas de virulencia con los aislamientos obtenidos frente
a los diferentes materiales de mora del Valle.
En el caso de C. acutatum aislado de mora, se podra pensar que esta especie es
patgena en especies vegetales diferentes, en las cuales podra mostrar niveles
mayores de patogenicidad a los reportados en este cultivo, lo que podra indicar
que C. acutatum es un hospedero transitorio de la mora en espera de hospederos
susceptibles.
El 91% de los aislamientos de C. gloeosporioides mostr niveles de patogenicidad
intermedio y muy alto, mientras que el 9% fue de baja patogenicidad, lo cual
puede deberse a variaciones genticas del patgeno y/o resistencia parcial del
genotipo de mora.
Los aislamientos de Colletotrichum spp., provenientes de los ecotipos Castilla y
Hartona Blanca del municipio de Ginebra, resultaron ser de baja patogenicidad y
no patognicos, lo que podra deberse a que ambos ecotipos estn relacionados
con resistencia a la enfermedad, sin embargo se hace necesario realizar un
estudio de caracterizacin del germoplasma de mora para establecer las reales
diferencias genotpicas de ambos ecotipos.
En el Valle del Cauca existe una gran diversidad de ecotipos de mora, siendo en
este estudio predominantes los ecotipos Castilla y Hartona, y encontrndose en
menor proporcin: Hartona Blanca, Hartona Negra, Regional y Ranchona, los
cuales podran responder a variaciones dentro de la misma Castilla o ser
genotipos diferentes que por sus caractersticas agronmicas de baja
productividad o calidad de la fruta, no han sido adoptados completamente por los

65

agricultores. Sin embargo, observaciones del comportamiento de estos ltimos

ecotipos frente a la antracnosis en campo, indican un aparente nivel de resistencia
a la enfermedad, informacin que debe ser confirmada y aprovechada para
estudios posteriores, con el fin de identificar fuentes de resistencia a la antracnosis
en mora de Castilla.
En el anlisis de varianza molecular se obtuvo una variacin entre los municipios
(poblaciones geogrficas) del 19.18% y dentro de los municipios del 80.82%. El
valor de Fst 0.192 (P<0.001) indic una gran estructuracin gentica (Wright 1978)
entre los municipios en las plantaciones de mora del Valle del Cauca. Los estudios
en fresa de Urea-Padilla et al (2002) tambin hallaron valores de Fst muy
cercanos al encontrado en mora de 0.15 (P0.05).
A pesar de la gran diferenciacin gentica entre los municipios, no se descarta la
existencia de flujo gentico sin efecto influyente sobre la estructura poblacional, ya
que no todos los aislamientos de un mismo municipio se agruparon, siendo
probablemente uno de los factores la diseminacin del patgeno debida al
intercambio de material de propagacin de mora entre los agricultores.
2.1.4.5. Conclusiones
Se encontraron dos especies de Colletotrichum spp. asociados a los cultivos
de mora del Valle del Cauca, los cuales corresponden a C. acutatum y C.
gloeosporioides.
La tcnica SSCP confirman los resultados obtenidos mediante el empleo de
cebadores especie-especficos, indicando que es una poderosa herramienta
para distinguir la especie C. acutatum de C. gloeosporioides.
El mtodo de inoculacin implementado en laboratorio, con pequeas cmaras
hmedas result ser muy til y efectivo para determinar el nivel de
patogenicidad de los aislamientos.
El 91% de los aislamientos de C. gloeosporioides mostr niveles de
patogenicidad intermedio y alto, mientras que el 100% de los aislamientos de
C. acutatum mostraron un nivel de patogenicidad bajo y no patognico.
El municipio de Buga present la mayor cantidad de aislamientos con
patogenicidad muy alta, mientras que el municipio de Ginebra mostr la mayor
cantidad de aislamientos poco patognicos.
Los microsatlites RAMS son apropiados para detectar y medir relaciones
genticas y variaciones entre y dentro las poblaciones de C. acutatum y C.
gloeosporioides.
Existe una falta de correlacin entre los microsatlites RAMS y los niveles de
patogenicidad en Colletotrichum spp., debido a que estos marcadores
moleculares muestrean tericamente todo el genoma del hongo, y no
necesariamente encierran los genes de patogenicidad.
La diversidad gentica total (0.30940.0268) para los aislamientos colectados
en el Valle del Cauca sugieren que las poblaciones tienen una distribucin
genotpica heterognea.

66

La diversidad gentica total para C. gloeosporioides en los cultivos de mora del

Valle del Cauca fue de 0.27600.0336, la cual es considerada alta en
comparacin con otros estudios.
El hecho que la especie C. acutatum haya presentado niveles de patogenicidad
bajos es relativamente de gran importancia debido a la alta diversidad
encontrada, ya que esto hara ms difcil el manejo de la antracnosis en el
cultivo.
El valor de Fst (0.192; (P<0.001) indic una gran estructuracin gentica entre
los diferentes municipios evaluados en las plantaciones de mora del Valle del
Cauca.
Este estudio es un primer avance para lograr el manejo integrado de los
agentes causales de la antracnosis en cultivos de mora del Valle del Cauca.
2.1.4.6. Bibliografa
ABANG, M. M., S. WINTER., K. R. GREEN., P. HOFFMANN., H. D. MIGNOUNA & G. A. WOLF.
2002. Molecular identification of Colletotrichum gloeosporioides causing anthracnose in Nigeria.
Plant Pathology 51: 6371.
AFANADOR, L., D. MINZ., M. MAYMON & S. FREEMAN. 2003. Characterization of Colletotrichum
isolates from tamarillo, passiflora, and mango in Colombia and identification of a unique species
from the genus. Phytopathology 93(5):579-587.
PERFECT, S. E., H. B. HUGHES., R. J. OCONNELL & J. R. GREEN. 1999. Colletotrichum: A
Model Genus for Studies on Pathology and FungalPlant Interactions. Fungal Genetics and Biology
27: 186198.
SUTTON, B.C. 1992. The genus Glomerella and its anamorph Colletotrichum. p1-26. en: Bailey J.A
& Jeger M.J (eds). Colletotrichum: Biology, Pathology and Control: CAB International, Wallingford,
England.
SWART-MERCIA, G. 1999. Characterization of Colletotrichum isolates from tamarillo, passiflora,
and mango in Colombia and identification of a unique species from the genus. Tesis Postgrado.
Pretoria, Universidad de Pretoria, Facultad de Biologa y Ciencias Agrcolas.p142-172.

2.1.5. Antracnosis de la mora de Castilla (Rubus Glaucus Benth):

Variabilidad en especies y razas del agente causante e
identificacin de fuentes de resistencia a la enfermedad 7.
Objetivo del Proyecto (2): Caracterizar las colecciones de germoplasma, por
variabilidad gentica y resistencia a plagas y enfermedades de mayor importancia
2.1.5.1. Objetivo General
Buscar fuentes de resistencia a Colletotrichum spp. en germoplasma colombiano
de Rubus spp. y genes anlogos de resistencia a enfermedades (RGAs)
7

Lucia Afanador Kafuri, Elizabeth lvarez, Alonso Gonzlez

67

asociados con sta, con base en la caracterizacin molecular del germoplasma y

la evaluacin de la variabilidad existente en las poblaciones del patgeno.
2.1.5.2. Marco Referencial
La Antracnosis es una enfermedad que se encuentra presente en todas las
regiones productoras de mora de Castilla de Colombia, con incidencias que van
del 50 al 73%. Dada la importancia de esta enfermedad en las principales zonas
productoras de mora en el pas, se hace necesario iniciar estudios encaminados a
un mayor conocimiento de sus agentes causales, y del comportamiento del
germoplasma existente frente a las poblaciones del patgeno, aspectos
indispensables para la planificacin de estrategias adecuadas para su manejo y
control en los cultivos de las zonas productoras del pas. La identificacin correcta
y oportuna de los agentes responsables de la Antracnosis de la mora de Castilla y
de la variabilidad en sus poblaciones son aspectos indispensables para entender
mejor la epidemiologa de esta enfermedad y constituyen la base para el
desarrollo de programas de mejoramiento gentico de esta especie.
2.1.5.3. Metodologa
Colecta de cepas de Colletotrichum spp.
Se llev a cabo en 38 municipios de ocho departamentos productores de mora en
Colombia. En cada municipio se visitaron cuatro fincas y en cada una se tom
cuatro muestras de tallos, ramas y/o frutos con sntomas tpicos de Antracnosis.
Aislamiento, identificacin y almacenamiento del hongo
Los aislamientos monoconidiales del hongo se hicieron en medio PDA. Las
colonias fungosas se identificaron de forma preliminar mediante observacin al
microscopio (aumento de 400X) de estructuras reproductivas tales como
acrvulos, masas de esporas, presencia o ausencia del estado sexual, presencia o
no de setas y estudio de las caractersticas de crecimiento de las colonias en el
medio de cultivo. Los cultivos se almacenaron en cuadros de papel filtro
colonizados por micelio y esporas del hongo, a una temperatura de 4C.
Evaluacin de patogenicidad
Se evaluaron 240 aislamientos de Colletotrichum spp. obtenidos de tejidos
afectados por antracnosis, en cultivos de las zonas seleccionadas para el estudio.
Las pruebas de patogenicidad se realizaron siguiendo la metodologa descrita por
Stewart et al., (2003), consistente en cortar porciones de tallo de 20 cm de largo y
de 3 a 4 cm de dimetro. A cada tallo se le sellaron los dos extremos con parafina
y luego se desinfectaron superficialmente con hipoclorito de sodio al 1% por 5
min., seguido de dos enjuagues en agua de la llave y un enjuague final con agua
deionizada. Los tallos lavados se dejaron secar al aire y luego se almacenaron en
un cuarto fro a una temperatura de 10C.

68

La inoculacin de cada tallo se realiz mediante una herida en la parte central del
mismo, con la ayuda de un bistur. En el interior de sta se introdujo un disco de
agar con micelio del hongo y luego se sell la herida con papel Parafilm para
asegurar el inoculo en su sitio y evitar la prdida de humedad. Como inoculo se
utiliz un aislamiento monoconidial del hongo, de 12 das de edad crecido en
medio de cultivo PDA. Como control se utilizaron tallos inoculados con un bloque
de agar agua. Los tallos inoculados fueron incubados en cajas plsticas con tapa
provistas con una rejilla plstica en la base y 50 ml de agua demonizada para
proporcionar condiciones de humedad en el interior de la misma. La incubacin se
realiz bajo condiciones controladas de cuarto de crecimiento con 8 horas de luz y
16 de oscuridad y una temperatura de 22 a 24C (Figura 44)

Figura 44. Metodologa de evaluacin de patogenicidad de aislamientos de Colletotrichum spp. de

mora en tallos desprendidos y bajo condiciones de cuarto de crecimiento.

La evaluacin de la respuesta de cada tejido a la inoculacin con el hongo se hizo

cada cinco das hasta el da 20 despus de la inoculacin. En cada tallo se midi
el ancho y largo de la lesin desarrollada en la zona de inoculacin, considerando
sta como una elipse y su relacin con respecto al rea total del tallo inoculado,
para lo cual se midi el largo y contorno del mismo. Los datos generados fueron
utilizados para calcular el rea bajo la curva de progreso de la enfermedad
(AUDPC) y un ANOVA para establecer diferencias entre los aislamientos
evaluados. La informacin se analiz mediante un diseo experimental de Bloques
completos al azar, utilizando el paquete estadstico SAS. Para evaluar la
diferencias estadsticamente significativas se aplic la prueba LSD ( 0.05).
Caracterizacin molecular de cepas de Colletotrichum spp.
Para la extraccin de ADN cada aislamiento fue crecido en medio lquido caldo de
papa ms dextrosa (200 g de papa, 20 gr de dextrosa por 1 L de agua destilada)
por un tiempo de 10 das bajo condiciones de oscuridad y sin agitacin. El micelio
fue cosechado al vaco y luego se liofiliz por 24 horas. La extraccin se realiz a
partir de micelio macerado con nitrgeno lquido, utilizando una cantidad
equivalente en volumen a 100l.

69

La extraccin de ADN se realiz a partir de micelio macerado siguiendo la

metodologa descrita por Maluku (2004) con modificaciones de lvarez et al.
(2004). La calidad del ADN se determin mediante electroforesis en un gel de
agarosa al 0.8% y se cuantific mediante fluorometra en un Fluormetro Hoefer
DyNA Quant 200.
Identificacin de especie con cebadores especie especficos
Se evaluaron 240 muestras de ADN obtenidas a partir de 240 aislamientos de
Colletotrichum spp. La identificacin molecular de las especies de Colletotrichum
se realiz mediante amplificacin por PCR de regiones especficas del ADN
ribosomal del hongo, empleando para ello el cebador universal ITS4
(TCCTCCGCTTATTGATATGC) en combinacin con los cebadores especie
especficos para C. gloeosporioides (CgInt) (GGCCTCCCGCCTCCGGGCGG), C.
acutatum
(CaInt2)
(GGGGAGCCTCTCGCGG)
y
C.
boninense
(GCCGTCCCCTGAAAAG). Adicionalmente, se emplearon tres cepas referencia
de las especies C. gloeosporioides, C. acutatum y C. boninense, como grupo
externo se utiliz una cepa del hongo Pyricularia oryzae. La composicin de la
reaccin de amplificacin es indicada en la Tabla 11.
Tabla 11. Composicin de la reaccin para amplificacin por PCR de ADN de Colletotrichum spp.
mediante cebadores especie especficos y micro satlites.
Componente reaccin
Agua HPLC
Buffer 10x
dNTPs (2.5 mM)
Magnesio (50 mM)
Cebador (c/u) (50 M)
Enzima (5U/ l)
ADN (5 ng/ l)
Volumen final

Volumen
18.03 l
2.5
2.5
0.75
0.2
0.02
1
25 l

La amplificacin del ADN de cada aislamiento se realiz en un termociclador PTC100 de MJ Research, utilizando el siguiente perfil: un ciclo inicial de denaturacin a
95C por 5 minutos, seguido de 40 ciclos a 95C por 30 segundos, 60C por 30
segundos, 72C por 1 minuto y una extension final a 72C por 5 minutos. Los
fragmentos amplificados se separaron en un gel de agarosa al 1.5% en buffer TBE
y se visualizaron mediante tincin con bromuro de etidio.
Evaluacin de la diversidad gentica de las especies Colletotrichum
La diversidad intra y entre especies de las poblaciones de Colletotrichum
representativas de las ocho zonas productoras de mora, se determin mediante el
empleo de cebadores Ap-PCR derivados de secuencias micro satlite: cebadores
(GACA)4, (GACAC)3, (AGG)5, MR, (TCC)5, y mediante el anlisis de las regiones
del ADN ricas en A y T.

70

Para la amplificacin por PCR se utiliz la misma composicin de la reaccin

utilizada en la identificacin de especies mediante cebadores especie especficos
(Tabla 12). El perfil de amplificacin utilizado consisti en: un ciclo inicial de
denaturacin a 95C por 5 min, seguido de 30 ciclos a 95C por 30 s, 60C por 30
s, 72C por 1 min y 30 s; y una extension final a 72C por 5 min.
Para el anlisis mediante regiones del ADN ricas en A y T, se realiz la digestion
de 500 ng de ADN total de cada aislamiento del hongo con 0.5 unidades de la
enzima HaeIII, ms 4 l de RNAsa. La reaccin luego se incub a 37C por 16
horas y los fragmentos producto de la digestion se separaron en un gel de agarosa
al 1.8%% en buffer TAE y se visualizaron mediante tincin con bromuro de etidio;
la imagen obtenida se captur utilizando un lector de geles Gel Doc 2000
(BioRad).
Con el fin de analizar los resultados obtenidos de forma global, se realiz un
anlisis de Coordenadas Principales con los datos combinados de los cinco
marcadores microsatlites, utilizando el programa SAS.
El anlisis de los datos de regiones ricas en A y T se llev a cabo con el paquete
estadstico NTSYS-PC (Numerical Taxonomy and Multivariate Analysis System),
versin 2.0, mediante organizacin de los datos en una matriz binaria, asignndole
el numero 0 a la ausencia de banda y 1 a la presencia de sta. Posteriormente, se
gener una matriz de similitud mediante el empleo del coeficiente de Coincidencia
Simple; seguido de un anlisis por el mtodo de agrupamiento UPGMA
(Unweighted pairgroup method using arithmetic average), y grficamente se
evalu por medio de la generacin de un dendograma.
Caracterizacin de germoplasma de mora de Castilla
Multiplicacin de germoplasma de Rubus spp.
El germoplasma de mora de Castilla con fines de caracterizacin se multiplico bajo
condiciones in Vitro y luego es establecido bajo condiciones de casa de malla en
CIAT, Palmira. Cada planta se sembr de forma individual en un matero plstico
de 6 con un sustrato compuesto por capote o suelo de vivero, suelo CIAT y arena
en una proporcin 4:1:1 respectivamente.
Evaluacin de germoplasma de Rubus spp. por su resistencia a la antracnosis
Se evalu la respuesta de 58 accesiones de Rubus spp. a la antracnosis mediante
la inoculacin artificial con 16 aislamientos de Colletotrichum spp.. El grupo de
accesiones evaluado est compuesto por: 43 accesiones pertenecientes a la
coleccin colombiana de Rubus spp. manejada por Corpoica, 12 genotipos
colectados en las zonas de estudio, un clon comercial y dos genotipos
pertenecientes a la coleccin de la Universidad Nacional de Colombia, sede
Palmira. El pasaporte de cada genotipo es presentado en el Anexo 1.

71

La metodologa de inoculacin utilizada fue la de Stewart et al., (2003) modificada

para planta completa. Se inocularon plantas de cuatro meses de edad y crecidas
bajo condiciones de casa de malla. A cada planta se le realiz una herida pequea
en la parte media del tallo, luego sobre la herida se deposit un disco de agar con
micelio del hongo de 10 das de edad y finalmente se cubri con una cinta de
Parafilm. Las plantas inoculadas se incubaron durante cinco das en una cmara
hmeda, despus de este tiempo se llevaron a un invernadero donde
permanecieron 20 das ms. La respuesta de cada genotipo a la enfermedad se
determin a partir del da 10 despus de la inoculacin y cada cinco das hasta el
da 25. La resistencia o susceptibilidad de la planta a la enfermedad se determin
mediante el empleo de una escala de severidad de 1 a 6, diseada mediante la
combinacin de sntomas presentados por la planta, tales como desarrollo de callo
en el sitio de la inoculacin (Grado 1) hasta muerte completa de la planta o rama
(Grado 6) (Figura 45). Las plantas con grados 1 a 2 fueron consideradas como
resistentes (R), aquellas con grados 3 a 4 como intermedias (I) y las que
presentaron grados 5 a 6 como susceptibles (S).

Figura 45. Escala de severidad para la evaluacin de resistencia a la antracnosis en germoplasma

de mora de Castilla: Grado 1 planta resistente, Grado 6 planta susceptible.

Los datos generados fueron utilizados para calcular el rea bajo la curva de
progreso de la enfermedad (AUDPC) y un ANOVA para establecer diferencias
entre los genotipos evaluados.
Caracterizacin molecular de germoplasma de Rubus spp. mediante micro
satlites (RAMS)
La variabilidad gentica del germoplasma de Rubus spp. se determin mediante la
tcnica de amplificacin al azar de micro satlites RAMS. Se evaluaron los
cebadores CCA, CGA, GT, AG, CT, TG, ACA y CA en 66 accesiones de Rubus
spp., 43 de ellas pertenecientes al Banco de Germoplasma de Corpoica.
La amplificacin del ADN de cada genotipo se realiz en un termociclador PTC100 de MJ Research, utilizando un perfil de amplificacin especfico para cada
cebador (Tabla 2). La reaccin de PCR fue de un volumen final de 12.5 l y

72

estuvo compuesta de buffer Taq a una concentracin de 1X M/l, 0.22 mM de

dNTPs, 0.65 M del cebador, 2.2 mM de MgCl2, 1 l de 5ng/l de ADN, agua
ultra pura grado HPLC y 0.06 U/l de taq polimerasa. Los fragmentos amplificados
se separaron en un gel de agarosa al 1.8% en buffer TAE y se visualizaron
mediante tincin con bromuro de etidio; la imagen obtenida se captur utilizando
un lector de geles Gel Doc 2000 (BioRad).
El anlisis de los datos se llev a cabo con el paquete estadstico NTSYS-PC
(Numerical Taxonoma and Multivariate Analysis System), versin 2.0, para lo
cual, stos se organizaron en una matriz binaria, asignndole el numero 0 a la
ausencia de banda y 1 a la presencia de sta. Posteriormente, se gener una
matriz de similitud mediante el empleo del coeficiente de Coincidencia Simple
(SM); la cual se analiz por el mtodo de agrupamiento UPGMA (Unweighted
pairgroup method using arithmetic average), y grficamente se evalu por medio
de la generacin de un dendograma.
Tabla 12. Perfiles de amplificacin empleados para la amplificacin de ADN de Rubus spp.
mediante el empleo de cebadores micro satlites (RAMS).
Etapas
amplificacin
1
2
3
4
5
6
7

ACA
95C
5min
95C1min
49C 45s
72C
3min
35 ciclos
desde 2
72C
10min
10C
30min

Condiciones de amplificacin para cada cebador

CT
CA-AG
CGA
CCA-TG
95C
95C
95C
95C 5min
5min
5min
5min
95C 40s
95C 40s
95C 40s
95C 40s
41C 45s
50C 45s
61C 45s
55C 45s
72C
72C
72C
72C 2min
2min
4min
2min
35 ciclos
35 ciclos
37 ciclos
35 ciclos
desde 2
desde 2
desde 2
desde 2
72C
72C
72C
72C
10min
10min
10min
10min
10C
10C
10C
10C
30min
30min
30min
30min

GT
95C
5min
95C 30s
58C 45s
72C
2min
35 ciclos
desde 2
72C
7min
10C
30min

2.1.5.4. Resultados y Discusin

Colecta aislamiento y conservacin de cepas de Colletotrichum spp.
Se realizaron colectas del hongo en 38 municipios y 156 fincas de los ocho
departamentos productores de mora: Antioquia, Caldas, Cundinamarca, Huila,
Quindo, Risaralda, Santander y Valle del Cauca. Se conform un cepario de 458
aislamientos de Colletotrichum spp., el cual hace parte de la Coleccin de Hongos
fitopatgenos del Laboratorio de Patologa de frutas del CIAT, Palmira.
Las caractersticas morfolgicas de los aislamientos obtenidos indicaron la
presencia de dos especies de Colletotrichum asociadas con la antracnosis en
mora de Castilla en Colombia, las especies C. gloeosporioides y C. acutatum, Las
colonias tienden a tener una coloracin gris a gris oliva con tonalidades claras a

73

oscuras, especialmente en aquellas cepas con una tipologa propia de C.

gloeosporioides (Figura 46A parte superior). En aislamientos con tipologa propia
de C. acutatum, la colonia tiende a presentar una coloracin blanca a gris claro
(Figura 46A parte inferior).
La mayora de los aislamientos no presenta esporulacin evidente, sta se
observa principalmente en aquellos aislamientos con tipologa de C.acutatum, en
los cuales la esporulacin tiende a ser de dos tipos: central o distribuida en toda la
colonia y de color amarillo rojizo o amarillo plido. En varios de los aislamientos
pertenecientes a la especie C. gloeosporioides se encontr la fase sexual en
medio de cultivo, presente como estructuras de color caf oscuro o negro
inmersas en la colonia, de consistencia compacta y resistentes al rompimiento, las
cuales correspondieron a peritecios tpicos del teleomorfo Glomerella cingulata
(Figura 46B y 46C).

Figura 46. Caractersticas morfolgicas de aislamientos de Colletotrichum spp. de mora. A:

colonias monoconidiales de C. gloeosporioides (parte superior) y C. acutatum (parte inferior); B:
peritecios inmersos en medio de cultivo, C y D: peritecios, ascas y ascosporas de Glomerella
cingulata.

La mayora de los aislamientos evaluados se caracterizaron por presentar conidias

de forma oblonga - elptica, sin embargo tambin se observaron esporas elpticofusiformes y elpticas (Figura 47).

Figura 47. Caractersticas morfolgicas de esporas de Colletotrichum spp. de mora de Castilla

(100X). cepa C005: elptica- fusiforme, cepa Q003 (1): oblonga elptica y cepa H030: elptica.

Es importante resaltar que los criterios morfolgicos utilizados para la

diferenciacin de especies de Colletotrichum son excesivamente variables. Sin

74

embargo, algunos autores distinguen las especies de este gnero con base en
algunos caracteres como el tamao y forma de las conidias y apresorios. Sutton
(1980) y Bailey & Jeger (1992) describen las conidias de C. gloeosporioides con
pices obtusos y de tamao variable entre 12.0-17.0 x 3.5-6.0 m, y los apresorios
como clavados o irregulares y algunas veces compuestos (6.0-20.0 x 4.0-12.0m).
A diferencia de C. gloeosporioides, C. acutatum se caracteriza por presentar
conidias rectas, fusiformes y con extremos agudos (8.0-16.5 x 2.5-4.0m). Los
apresorios formados por este especie son oscuros, clavados, ovalados, obovados
o irregulares, con mrgenes enteras o estrechamente lobuladas (8.5-10 x 4.56m) (Bailey & Jeger 1992, Arx 1970).
Por su parte, C. boninense se caracteriza por presentar apresorios oscuros, con
bordes irregulares (6.0-17.0 x 4.0-15.0 m). Las conidias se forman en masas
naranjas, son rectas, cilndricas y obtusas en los extremos (13-15.5 x 5-6m)
(Moriwaki et al. 2003).
De acuerdo con lo reportado en la literatura acerca de la forma de las conidias de
las especies de Colletotrichum, el 69.58% de los aislamientos evaluados present
conidias caractersticas de C. gloeosporioides y/o C. boninense. Las cepas
restantes presentaron conidias con uno o los dos pices agudos, lo cual es
considerado como un carcter importante en la descripcin morfolgica de C.
acutatum.
Evaluacin de patogenicidad
El rea bajo la curva del progreso de la enfermedad (ABCPE) mostr diferencias
significativas entre localidades (Tabla 13). Se identificaron dos grupos de
patogenicidad: uno conformado por los aislamientos provenientes de Caldas y
Risaralda (25%) y un segundo conformado por los aislamientos de Antioquia,
Cundinamarca, Huila, Quindo, Santander y Valle del Cauca (75%) (Figura 48).
Tabla 13. Agrupamiento de aislamientos de Colletotrichum spp. de mora de Castilla inoculados en
tallos de mora con base en ANOVA y Duncan 5%.
1

Localidad
Cantidad de aislamientos x Rep. Media ABCPE
Agrupamiento
Caldas
90
344.20
a
Risaralda
99
258.96
b
Huila
90
67.20
c
Cundinamarca
90
61.66
c
Valle del Cauca
90
56.76
c
Quindo
101
45.34
c
Santander
99
44.64
c
Antioquia
91
40.66
c
1=rea bajo la curva de progreso de la enfermedad (%/das); 2= Agrupamiento de localidades
segn patogenicidad de los aislamientos de acuerdo a su origen.

75

Figura 48. Respuesta de tallos de mora de Castilla a la inoculacin artificial con aislamientos de
Colletotrichum spp.. Izquierda: respuesta al aislamiento A040 de patogenicidad baja; derecha:
respuesta al aislamiento AN004b de patogenicidad alta.

De acuerdo a estos resultados los aislamientos provenientes de cultivos de Caldas

y Risaralda fueron los ms patognicos, mientras que aquellos de Antioquia,
Cundinamarca, Huila, Quindo, Santander y Valle del Cauca presentan niveles de
patogenicidad intermedia, baja o muy baja.
En el anlisis dentro de localidades, el rea bajo la curva del progreso de la
enfermedad (ABCPE) mostr diferencias estadsticamente significativas para los
aislamientos provenientes de los departamentos de Antioquia, Quindo, Santander
y Valle del Cauca, mientras que en las cinco localidades restantes no se observ
diferencias significativas entre aislamientos. Se logr la conformacin de mximo
tres grupos dentro de cada localidad: uno de patogenicidad alta, otro de intermedia
y un tercero de patogenicidad baja a muy baja (Tabla 49).
Figura 49. Nivel de patogenicidad de aislamientos de Colletotrichum spp. de mora de Castilla
procedentes de cultivos de los departamentos de Antioquia, Quindo, Santander y Valle del Cauca,
segn ANAVA para el parmetro rea Bajo la curva de progreso de la enfermedad (ABCPE).
Localidad

Nivel de patogenicidad
Alta Intermedia Baja
a
Antioquia
18
57
25
Quindio
21
18
61
Santander
29
32
39
Valle del Cauca 28
55
17
a = Porcentaje de aislamientos dentro de cada departamento con patogenicidad alta,
intermedia y baja

Los aislamientos del departamento de Antioquia y Valle del Cauca tienden a

presentar un nivel de patogenicidad intermedia, 57% y 55% respectivamente. El
61% de los aislamientos de Quindo tienden a presentar un nivel de patogenicidad
baja; mientras que en Santander, el nivel de patogenicidad entre aislamientos
tiende a distribuirse de forma muy similar entre las tres categoras: 39% de
patogenicidad baja, 32% con intermedia y 29% con patogenicidad alta.
La tendencia observada en las pruebas de patogenicidad, indica que los
aislamientos con mayor patogenicidad (patogenicidad alta e intermedia),

76

independiente de su zona de origen, pertenecen a la especie C. gloeosoporioides,

mientras que aquellos de patogenicidad baja a muy baja estn asociados con la
especie C. acutatum. Sin embargo, es importante destacar que las dos especies
presentaron una cierta preferencia por ciertos tejidos en la planta, la especie C.
gloeosporioides se encontr asociada en un mayor grado a lesiones en tallo y C.
acutatum a lesiones en fruto y botones florarles; lo cual podra explicar la
diferencia observada en patogenicidad para las dos especies, dado que la prueba
realizada solo permiti evaluar la infeccin del patgeno en tejido de tallo.
Una tendencia similar se observ con relacin a la tasa de crecimiento del hongo,
aquellos aislamientos identificados como C. gloeosporioides tienden a tener una
tasa de crecimiento mayor y una patogenicidad alta a intermedias, mientras que
los pertenecientes a la especie C. acutatum, en general presentan una tasa menor
de crecimiento y niveles bajos de patogenicidad en tallo. La especie C. acutatum
es un patgeno altamente especializado en el tejido que ataca en cada hospedero,
y se la encuentra asociada especialmente con sntomas en flores y frutos. En
algunos casos, ataca tejidos jvenes, mientras que en otros este tipo de tejido
puede ser completamente inmune a la infeccin. Un ejemplo de ello ocurre en
ctricos, hospedero en el cual esta especie ataca preferiblemente las flores, sin
producir ningn tipo de sntomas en hojas jvenes. En el caso de manzana, ataca
preferiblemente los frutos, sin causar sntomas en las hojas. El patgeno es
considerado en sentido amplio cmo hemibiotrofo, ya que posee una fase biotrofa
y necrotrofa dependiendo del hospedero y del tejido infectado en un hospedero
particular (Prez et. al, 2005).
Caracterizacin molecular de cepas de Colletotrichum spp.
Se proces un total de 240 aislamientos, de los cuales se obtuvo ADN de alta
calidad y con rendimientos de 50 a 235 ng/l (Figura 50).

Figura 50. Electroforesis de ADN total de Colletotrichum spp. de mora de Castilla en gel de agarosa
al 0.8%.

Identificacin de especie con cebadores especie especficos

Los resultados de la identificacin molecular de los aislamientos indican a la
especie C. gloesporioides (67%) como la ms predominante, seguida de C.
acutatum (32%) y en forma muy incipiente C. boninense (1%). La especie C.
gloeosporioides se encontr principalmente en los departamentos de Valle,
Antioquia, Cundinamarca, Huila y Santander. La especie C. acutatum predomin

77

en la zona cafetera, departamentos de Caldas, Quindo y Risaralda, mientras que

C. boninense solo se encontr en Risaralda.
El cebador taxn-especfico CaInt2 en combinacin con el ITS4 amplific un
fragmento de ADN de 490-pb para el 32% de los aislamientos evaluados y el
aislamiento referencia de C. acutatum Tom-21. Para el 68% restante no se obtuvo
amplificacin (Figura 51a). El cebador especie-especfico CgInt utilizado en
combinacin con el ITS4 amplific un fragmento de ADN de 450-pb para el 67%
de los aislamientos y la cepa referencia de C. gloeosporioides GND-1; para el
33% restante no se obtuvo amplificacin (Figura 51b).
En el caso del cebador Col1 utilizado en combinacin con ITS4, slo se obtuvo
producto de amplificacin con el ADN de los aislamiento R001 y R033 de
Risaralda (1%) y para la cepa referencia de C. boninense Pass-52; dando como
resultado un fragmento de 520-pb (Figura 51c).
Los aislamientos identificados molecularmente como pertenecientes a la especie
C. gloeosporioides tienden a presentar tasas de crecimiento alta e intermedia,
mientras que aquellas identificadas como C. acutatum presentan tasas de
crecimiento baja o muy bajas. Una tendencia muy similar fue observada en las
pruebas de patogenicidad, en la cual los aislamientos con mayor patogenicidad
(patogenicidad alta e intermedia), independiente de su zona de origen, pertenecen
a la especie C. gloeosoporioides, mientras que aquellos de patogenicidad baja a
muy baja estn asociados con la especie C. acutatum.
Los resultados obtenidos indican la presencia simultnea de tres especies de
Colletotrichum en mora de Castilla; C. gloeosporioides, C. acutatum y C.
boninense; las cuales al parecer estn asociadas con rganos diferentes en la
planta: tallos, frutos y botones florales; algo ya observado en otros frutales y
especies de plantas, especialmente en relacin a C. acutatum. (Prez et. al, 2005;
Adaskaveg y Forster, 2000; Adaskaveg y Hartin, 1997; Forster y Adaskaveg,
1999).
La presencia simultnea de estas tres especies en mora podra tener
implicaciones desde el punto de vista epidemiolgico y por consiguiente en el
manejo de la enfermedad, especialmente en lo relacionado con el control qumico,
teniendo en cuenta que ya existen reportes en los cuales se indica especialmente
una respuesta diferencial de las especies C. gloeosoporioides y C. acutatum a la
accin de ciertos fungicidas, especialmente del tipo de los Benzimidazoles
(Adaskaveg y Hartin, 1997; Bernstein et. al, 1995; Freeman et. al, 1998; Prez et.
al, 2004).

78

1 2 3 4 5

6 7 8 9 10 11 12 13 M
A

bp 1636
1018
507

1 2 3 4 5

6 7 8 9 10 11 12 13 M
B

1636
1018
507

1 2 3 4 5

6 7 8 9 10 11 12 13 M
C

1636
1018

507

Figura 51. Identificacin taxa-especfica de C. gloeosporioides, C. acutatum y C. boninense con

base en la regin ITS del ADNr. M: marcador de peso molecular 1 Kb; 1 a 3: aislamientos
referencia para las especies C. gloeosporioides, C. acutatum y C. boninense, respectivamente; 4 a
12 aislamientos de Colletotrichum de mora; 13 control negativo.

Anlisis de diversidad de especies de Colletotrichum mediante marcadores ISSR

Se evaluaron ocho cebadores Ap-PCR, los cuales mostraron una diversidad
moderada dentro de las dos especies de Colletotrichum registradas como las ms
importantes para mora de Castilla en Colombia.
La evaluacin de diversidad intra y entre especies de Colletotrichum de mora de
Castilla confirm la separacin de las poblaciones del hongo en tres especies
diferentes, las que a su vez se distribuyen en seis grupos genticos (Figura 52).
Los aislamientos pertenecientes a la especie C. gloeosporioides se encuentran en
su mayora ubicados en el Grupo 1 (82%) y el Grupo 2 (14%) con muy poca
representacin en los grupos restantes. Los aislamientos pertenecientes a la
especie C. acutatum se encuentran principalmente presentes en los grupos
genticos 4 (44%) y 5 (47%) con poca representacin en los grupos 3, 6 y ninguna
en el grupo 2. Los aislamientos de la especie C. boninense se ubicaron en el
grupo gentico 6 junto a otros aislamientos de las otras dos especies identificadas.

79

Figura 52. Grfico de dispersin en 3D del anlisis de Correspondencia Mltiple para 240
aislamientos colombianos de Colletotrichum spp. de mora de Castilla con base en un anlisis con
cebadores Ap-PCR derivados de micro satlites.

El anlisis por zona geogrfica, mostr una mayor diversidad en aislamientos

provenientes de Risaralda y Santander, intermedia en aislamientos de Huila,
Caldas, Quindo, Valle y Cundinamarca; y la ms baja se encontr en aislamientos
provenientes del departamento de Antioquia.
Estos resultados indican una mayor diversidad gentica para la especie C.
acutatum y moderada a baja para C. gloeosporioides. La baja diversidad
encontrada en la especie C. gloeosporioides, indica la presencia de un mecanismo
de reproduccin de tipo asexual predominante en las poblaciones analizadas, lo
que ha conllevado a la existencia de una poblacin clonal, que se ha diseminado
por medio de semilla vegetativa del hospedero a travs de todas las zonas
productoras de mora en Colombia, lo que explicara la presencia en todas las
regiones evaluadas de un grupo gentico comn.
Aunque, la fase sexual de
laboratorio, sta parece no
variacin gentica para esta
diseminacin bajo condiciones

C. gloeosporioides fue detectada en campo y

jugar un papel importante como mecanismo de
especie en mora de Castilla, ni tampoco en su
de campo.

La presencia simultnea de ambos mecanismos de reproduccin en C.

gloesporioides de mora de Castilla, hacen de ste un patgeno ms exitoso y con
mayor capacidad de adaptacin a condiciones ambientales diferentes.
Anlisis de diversidad mediante regiones de ADN ricas en A+T
La evaluacin de diversidad intra y entre especies de Colletotrichum de mora de
Castilla mediante el anlisis de regiones del ADN ricas en A+T dio como resultado
la conformacin de cinco grupos genticos, en los cuales se distribuyen las tres

80

especies del hongo previamente identificadas (Figura 53). El Grupo I conformado

por 141 aislamientos (59%), Grupo II por 44 aislamientos (18.5%), Grupo III por 21
(9%), Grupo IV por 32 aislamientos (13%) y el Grupo V por tres aislamientos
(0.5%).
Los aislamientos pertenecientes a la especie C. gloeosporioides se encuentran
ubicados en su mayora en el Grupo I (87%) y en una menor proporcin en el
Grupo III (13%). Los aislamientos de la especie C. acutatum se ubicaron en los
grupos genticos II (58%) y IV (42%). El nico aislamiento analizado de la especie
C. boninense se ubic en el Grupo gentico V junto con el aislamiento referencia
de la especie C. acutatum. La similitud de los aislamientos dentro de cada grupo
fue del 100%. La similitud entre los grupos de la especie C. gloeosporioides fue
del 54% y entre los de la especie C. acutatum del 64%.
La similitud entre las especies C. gloeosporioides y C. acutatum fue mayor (67%)
entre los aislamientos pertenecientes a los Grupos II y IV, que entre los de los
Grupos I y II (55%). El aislamiento de la especie C. boninense presento una
mayor similitud con los aislamientos de la especie C. acutatum (72% y 78%) que
con aquellos de la especie C. gloeosporioides (64% y 71%).

Figura 53. Dendograma de 240 aislamientos de Colletotrichum spp. basado en un anlisis de

regiones de ADN ricas en A+T, utilizando el mtodo UPGMA del programa NTSys (v.1.8)

Caracterizacin molecular de germoplasma de Rubus spp. mediante micro

satlites (RAMS)
El anlisis de diversidad del germoplasma de Rubus spp. mediante marcadores
RAMs permiti agrupar las 66 accesiones en seis grupos genticos (Figura 10):
Grupo I integrado por 61 de las accesiones, grupo II, III y IV por una accesin cada
uno y grupo VI por las accesiones ILS2377 e IVC024. Las accesiones

81

pertenecientes al Grupo I presentan una similitud entre ellas del 100% y con el
resto de la poblacin del 60%. Las accesiones ILS2377 e IVC024 presentaron
una similitud entre ellas del 88% y con el resto de la poblacin del 63%. Estos
resultados indican que la poblacin de Rubus spp. analizada es genticamente
homognea con una porcin muy pequea de individuos genticamente
diferentes.
Los microsatlites RAMS mostraron muy baja diversidad dentro del germoplasma
colombiana de Rubus spp., conformado en su gran mayora por mora de Castilla
perteneciente a la especie Rubus glaucus y unos pocos representantes de
especies silvestres e introducidas. El 8% de las accesiones mostraron
polimorfismo, mientras que el 98% fueron monomrficas para los ocho cebadores
evaluados (Figura 54). Las accesiones polimrficas corresponden a especies
silvestres e introducidas en su mayora, las cuales podran pertenecer a R.
urticifolius, R. robustus y R. idaeus (datos no confirmados).

Figura 54. Dendograma de 66 accesiones de Rubus spp. basado en un anlisis con marcadores
RAMs utilizando el mtodo UPGMA del programa NTSys (v1.8).

Evaluacin de germoplasma de Rubus spp. por su resistencia a la antracnosis

El rea bajo la curva del progreso de la enfermedad (ABCPE) mostr diferencias
significativas entre tratamientos y entre repeticiones (Tabla 14). Se identificaron
tres grupos de respuesta a la antracnosis entre los materiales de Rubus spp.; un
primer grupo de alta susceptibilidad, un segundo de susceptibilidad intermedia y
un tercero de genotipos medianamente resistentes y resistentes.

82
Tabla 14. Anlisis de Varianza para ABCPE de 58 genotipos de mora pertenecientes al Banco
colombiano de Germoplasma de Rubus spp.
Fuente de variacin Grados de libertad Cuadrado medio Valor de F Probabilidad > F
rep
2
412,154
3,75
0,0239
trat
450
3351,157
30,5
<.0001
Nivel de significancia estadstica (=0.05)

El anlisis individual por tratamiento mostr diferencias estadsticamente

significativas entre genotipos cuando estos fueron inoculados con las cepas
26(AN034a), 47(C030), 82[S035 (1)], 116(V130), 131(H013), 192(R001),
193(R002b) y 248(CD028), aislamientos pertenecientes a las especies C.
gloeosporioides y C. boninense. La mayor virulencia fue observada para el
aislamiento 161 y la menor en el aislamiento 192 correspondiente a la especie C.
boninense (Tabla 15). El mayor coeficiente de variacin (CV) fue observado con el
aislamiento 192 (69%) y el ms bajo con el aislamiento 116 (8%). Para los ocho
tratamientos restantes, todos pertenecientes a la especie C. acutatum, no se
encontraron diferencias estadsticamente significativas entre genotipos.
Tabla 15. Media y coeficiente de variacin para la respuesta de 58 genotipos de Rubus spp. frente
a nueve aislamientos de Colletotrichum spp. con base en ANOVA (=0.05)
Tratamiento
161
248
82
47
131
116
193
26
192

Media General
62.1379
60.7222
59.9393
59.24359
58.8046
58.2222
57.7011
47.9151
8.2858

CV
20.84606
18.59897
24.59502
20.91947
20.95941
7.775066
25.70742
30.49379
68.8566

Los genotipos ILS1817, ILS2363, ILS2366, ILS2372 y ILS2377 fueron resistentes

a todos los aislamientos evaluados, excepto en el caso del ILS2372 que mostr
una reaccin intermedia al aislamiento 193. Los 53 genotipos restantes fueron
susceptibles o medianamente susceptibles a todos los aislamientos de la especie
C. gloeosporioides y resistentes a los de la especie C. acutatum.
Estos resultados confirman lo encontrado en las pruebas de patogenicidad, en las
cuales se observ una mayor virulencia en aislamientos pertenecientes a la
especie C. gloeosporioides y menor para los de la especie C. acutatum. Sin
embargo, de nuevo es importante resaltar que al parecer estas diferencias se
deben a la preferencia de las dos especies para atacar ciertos tejidos de la planta,
lo que no permitira descartar completamente a la especie C. acutatum como
importante en la epidemiologa de la antracnosis de la mora en Colombia,
hacindose entonces necesario considerar estudios futuros los cuales permitan
identificar de forma clara el papel que esta especie est jugando en el desarrollo
de la enfermedad.

83

2.1.5.5. Conclusiones
Las poblaciones colombianas de Colletotrichum spp. agente causante de la
antracnosis en mora de Castilla, estn conformadas en su mayora por las
especies C. gloeosporioides y C.acutatum y en un grado no significativo por
la especie C. boninense.
Los aislamientos provenientes de zonas productoras de mora en Caldas y
Risaralda presentan mayor patogenicidad.
Dentro de los departamentos de Antioquia, Quindo, Santander y Valle del
Cauca se detect mayor variacin patognica entre los aislamientos. Los
aislamientos de los departamentos restantes no presentan diferencias
significativas entre ellos.
Los aislamientos identificados como C. gloeosporioides presentan niveles
de patogenicidad alta, intermedia y baja; mientras que los de la especie C.
acutatum tienden a presentar niveles de patogenicidad baja a muy baja.
La evaluacin de diversidad intra y entre especies de Colletotrichum de
mora de Castilla confirm la separacin de las poblaciones del hongo en
tres especies diferentes, las que a su vez se distribuyen en seis grupos
genticos. El anlisis por zona geogrfica, mostr una mayor diversidad en
aislamientos provenientes de Risaralda y Santander, intermedia en
aislamientos de Huila, Caldas, Quindo, Valle y Cundinamarca; y la ms
baja se encontr en aislamientos provenientes del departamento de
Antioquia.
Se identific una mayor diversidad gentica para la especie C. acutatum y
moderada a baja para C. gloeosporioides.
Los microsatlites RAMS mostraron muy baja diversidad dentro del
germoplasma colombiana de Rubus spp., conformado en su gran mayora
por mora de Castilla perteneciente a la especie Rubus glaucus y unos
pocos representantes de especies silvestres e introducidas.
Se identific dentro del germoplasma colombiano de Rubus spp. cinco
genotipos resistentes a la antracnosis y 53 susceptibles a aislamientos
representativos de C. gloesporioides, la especie ms importante causante
de esta enfermedad en Colombia.
2.1.5.6. Recomendaciones
Desarrollar una metodologa que permita evaluar la respuesta del germoplasma de
Rubus spp. a la especie C. acutatum, de tal manera que se pueda identificar el
papel que esta especie est jugando en la epidemiologa y desarrollo de la
antracnosis de la mora de Castilla en Colombia.
Evaluar germoplasma de Rubus spp. perteneciente a especies diferentes a R.
glaucus, en particular especies silvestres, las cuales pueden representar una
fuente importante de genes de resistencia a la antracnosis y otras enfermedades
de este cultivo en Colombia.

84

2.1.5.7. Bibliografa
AFANADOR KAFURI, L., MINZ, D., MAYMON, M. y FREEMAN, S. 2003. Characterization of
Colletotrichum isolates from tamarillo, passiflora, and mango in Colombia and identification of a
unique species from the genus. Phytopathology 93:579 587.
LVAREZ, E., C. A. OSPINA, J. F. MEJIA y G. A. LLANO. 2004. Caracterizacin morfolgica,
patognica y gentica del agente causal de la antracnosis (Colletotrichum gloeosporioides) en
guanbana (Annona muricata) en el Valle del Cauca. Fitopatologa Colombiana 28(1):1-8.
BAILEY, J. A. & M. J. JEGER. 1992. Colletotrichum: Biology, Pathology and Control. Redwood
Press Ltd., CAB International, UK. 388 P.
STEWART, P.J., CLARK, J.R. y FENN, P. 2003. Evaluation of resistance to Erwinia amylovora
and Botryosphaeria dothidea in Eastern U.S. blackberry cultivars. Horticultural Studies, AAES
Research Series 520: 32 34.
SUTTON, B. C. 1980. The Coelomycetes. Fungi Imperfecti with Pycnidia, Acervuli and Stromata.
Commonwealth Mycological Institute . Kew, UK. 696 P.

2.1.6. Evaluacin de alternativas de control biolgico de Botrytis

cinerea, Colletotrichum gloeosporioides y Colletotrichum
acutatum por antagonismo con Trichoderma spp8.
Objetivo del Proyecto (3): Desarrollar y evaluar estrategias de biocontrol de las
plagas y enfermedades ms importantes.
2.1.6.1. Objetivos
Objetivo General
Evaluar alternativas no convencionales a los agroqumicos para el control de B.
cinerea, C. gloeosporioides y C. acutatum, aislados de mora y lulo.
Objetivos Especficos
Determinar la efectividad antagonista en cultivos duales y filtrados libres,
sobre B. cinerea, C. gloeosporioides y C. acutatum in Vitro, de seis cepas
de Trichoderma spp.
Evaluar y determinar la efectividad de extractos vegetales de Tagetes
patula, Swinglea glutinosa, Furcraea macrophylla y Lixiviado de Raquis de
Pltano, para el control de C. gloeosporioides, C. acutatum y B. cinerea In
Vitro.
Realizar pruebas en plantas de mora inoculadas en condiciones de
invernadero con C. gloeosporioides aislado de mora utilizando las
alternativas ms efectivas identificadas In Vitro, en el control de este
patgeno.
8

Arango, Lina.

85

2.1.6.2. Marco Referencial

El moho gris o pudricin del fruto causado por Botrytis cinerea Pers, es
considerada una de las enfermedades ms comunes y serias del gnero Rubus y
de otros pequeos frutos como fresas, uvas, frambuesa a nivel mundial (Molina et
al. 2004). Tamayo & Pelez (2000) reportaron prdidas de frutos de mora entre
50% y 76% en Colombia, a causa de esta enfermedad.
El control qumico para el manejo de estas enfermedades requiere aplicaciones
frecuentes de fungicidas, que causan serios riesgos ambientales, problemas de
salud y pueden resultar en la aparicin de hongos resistentes al fungicida,
incrementando los costos de produccin para muchos agricultores en regiones
tropicales (Onyeka et al. 2006). Teniendo en cuenta estos aspectos se hace
necesario llevar a cabo investigaciones que busquen estrategias de manejo
integrado como alternativa al inadecuado uso de agroqumicos en los diferentes
cultivos. En este trabajo, se evaluaron seis cepas de Trichoderma spp. como
agentes antagonistas para el control de B. cinerea, C. gloeosporioides y C.
acutatum., as como tambin extractos vegetales de Fique (Furcraea macrophylla
Baker), Tagetes patula Link., Swinglea glutinosa Merr. (Ecoswing) y
adicionalmente lixiviado de raquis de pltano.
2.1.6.3. Metodologa
Reactivacin de Aislamientos
Se realiz la reactivacin de aislamientos 9 conservados en papel filtro dos de C.
gloeosporioides y dos de C. acutatum, que fueron aislados de tallos y frutos de
mora afectados por Antracnosis. As mismo, se reactiv un aislamiento de B.
cinerea de la coleccin de microorganismos del laboratorio de Patologa (CIAT), y
dos cepas de C. acutatum aislados de lulo (Tabla 16).
Tabla 16. Aislamientos reactivados de los patgenos
Aislamiento
Especie
BuU-130
C. gloeoesporioides
TrC-106
C. gloeoesporioides
GiC-23f
C. acutatum
PaA-29C2
C. acutatum
71
C. acutatum.
40a
C. acutatum
12v
Botrytis cinrea

a controlar con las alternativas propuestas.

Patogenicidad
Municipio
Muy alta
Buga
Muy alta
Trujillo
Baja
Ginebra
Baja
Palmira
Muy alta
Timbio
Alta
Santa Rosa
Ginebra

A partir del trabajo realizado por Arenas (2007) sobre caracterizacin molecular y patognica de
aislamientos de Colletotrichum spp. asociados a la antracnosis de mora en el Valle del Cauca.

86

Alternativas de control propuestas (Pruebas In vitro)

Se evalu la capacidad inhibitoria de tratamientos alternos de control de seis
aislamientos de Trichoderma spp. y extractos de plantas como T. patula,
Ecoswing, F. macrophylla y adicionalmente lixiviado de raquis de pltano. Para
esto se llevaron a cabo pruebas In Vitro y una prueba en invernadero para validar
los resultados In Vitro en plantas inoculadas, lo cual se realiz como se describe a
continuacin:
Evaluacin de cultivos duales
Con los aislamientos de C. gloeosporioides, C. acutatum y B. cinerea puros, se
realizaron las pruebas in Vitro con las alternativas de control propuestas. Las
evaluaciones de antagonismo se realizaron en medio PDA con cido lctico (39 g
PDA y 10 ml de cido lctico 25% por litro de medio). Las evaluaciones se
realizaron cada dos das durante 10 das, registrando el radio de crecimiento de
los patgenos hacia Trichoderma spp.
En el ltimo da de evaluacin, se determin el porcentaje de inhibicin de
crecimiento radial (ICR) mediante la frmula de Dennis y Webster (1971):
ICR (% ) = (R1-R2) 100/R1, donde R1 es la distancia ms lejana recorrida por el
patgeno y R2 es la distancia recorrida por el patgeno hacia el antagonista.
Evaluacin de Filtrados libres de las cepas de Trichoderma spp.
En un segundo ensayo se realiz la evaluacin del filtrado libre de las cepas de
Trichoderma spp. enfrentadas anteriormente, a excepcin de la cepa 47-PDA-3A
la cual fue reemplazada por el producto Tichotrpico (mezcla de T. harzianum y
T. koniingi, producido por Soluciones Microbianas del Trpico), debido a que
presentaba morfologa y comportamiento muy similar a la cepa 19-TSM-3A, y a
que se present la oportunidad de probar el producto en mencin.
Evaluacin de Extractos vegetales
Para evaluar los extractos de Swinglea glutinosa (Ecoswing) al 2%, de Fique al
10% (concentracin ms efectiva en el control de C. gloeoesporioides en
guanbano reportada por Rojas (2008)), Tagetes patula al 5% y Lixiviado de
Raquis de Pltano LRP al 10%, se prepararon medios de cultivo PDA modificados
con cada uno de los extractos.
Evaluacin de control qumico
Mirage (Ingrediente activo: Procloraz) fue evaluado en dosis comercial de 1.0
mL/L de agua (450 g/L de ingrediente activo, Procloraz), este tratamiento
constituy el control (-), para realizar las comparaciones con los diferentes
extractos vegetales. Cada uno de los extractos fue utilizado para preparar medios

87

modificados con PDA como base (39g/L de agua destilada) en la concentraci n

especificada para cada uno.
En cada uno de los medios preparados, se realizaron mediciones del dimetro de
crecimiento de cada uno de los patgenos, cada dos das despus de la siembra,
durante 12 das para B. cinerea, 14 das para los aislamientos de Colletotrichum
de mora y 16 das para los C. acutatum de lulo. Como testigos se utilizaron PDA y
Procloraz, fungicida reportado como efectivo por Rojas (2008) en la inhibicin In
Vitro de C. gloeoesporioides obtenido de guanbana.
Todas las pruebas In Vitro se realizaron en un diseo de bloques completamente
al azar (DBCA) para B. cinerea, y en un diseo de parcelas divididas tanto para los
aislamientos de Colletotrichum de mora como para los C. acutatum de lulo, con
cuatro repeticiones y tomando una caja petri como unidad experimental.
Evaluacin en Invernadero
Este ensayo se llev a cabo en cmara hmeda a una temperatura de 24 y
humedad relativa de 60-70%. Los tratamientos se aplicaron, a plantas de mora
variedad Castilla de cinco meses de edad, susceptible al patgeno C.
gloeosporioides establecidas en potes. Los tratamientos evaluados fueron la cepa
comercial Trichoplant y la cepa TrmV-01(coleccin CIAT), las cuales presentaron
el mejor comportamiento como antagonista en las pruebas In Vitro, y el extracto de
T. patula y el producto Ecoswing, siendo estos los tratamientos ms efectivos
determinados en las pruebas in Vitro, para el control de C. gloeosporioides.
Estos tratamientos fueron evaluados en planta, contra un testigo sin aplicacin de
productos y otro con Procloraz (ingrediente activo de Mirage).
Los tratamientos se aplicaron, una semana antes, el mismo da y una semana
despus de la inoculacin del patgeno. La inoculacin se hizo mediante una
herida superficial en la epidermis del tallo principal, en donde se coloc un disco
de medio con micelio del aislamiento ms agresivo de C. gloeosporioides,
adherido al tallo con parafilm. Las plantas se dejaron en cmaras hmedas
durante 72 horas. Las evaluaciones se iniciaron 5 das despus de la inoculacin
con el patgeno y posteriormente durante 20 das ms, cada 5 das. Las
evaluaciones se realizaron de acuerdo con la escala de severidad de AfanadorKafuri (2009), la cual se presenta a continuacin:
Grado 1: Desarrollo de callo en el sitio de la inoculacin (0%)
Grado 2: Desarrollo de lesin necrtica alrededor del sitio de la inoculacin (3%)
Grado 3: Lesin necrtica ms marchitamiento (15%)
Grado 4: Lesin necrtica ms amarillamiento y muerte de hojas comprometidas
con la zona de inoculacin o por encima de sta (25%).
Grado 5: Muerte de hojas comprometidas con la zona de inoculacin o por encima
de sta. Muerte del pice de la planta (45%).
Grado 6: Muerte completa de la planta o rama (75%).

88

La prueba en invernadero se realiz en un diseo de bloques completamente al

azar con cuatro repeticiones y tomando una planta como unidad experimental.
2.1.6.4. Resultados y discusin
Los datos obtenidos en los diferentes ensayos no cumplieron con la prueba de
Normalidad (Kolmogorov-Smirnov p<0.05), debido a esto se realiz una
transformacin arcoseno de los datos, sin embargo, estos tampoco cumplieron
con el supuesto de Normalidad, por lo cual se realiz un anlisis no paramtrico
Kruskal-Wallis (Tabla 17).
Tabla 17. Prueba de Normalidad y homogeneidad de varianza de los datos transformados para los
ensayos realizados con los diferentes patgenos.
Patgeno

Ensayo

B. cinrea

Cultivos duales
Filtrados libres
Extractos vegetales
Cultivos duales
Filtrados libres
Extractos vegetales
Cultivos duales
Filtrados libres
Extractos vegetales

Colletotrichum
(mora)
C. acutatum
(lulo)

Normalidad
(K-S)
d=0.248 p<0.05
d=0.254 p<0.05
d=0.194 p>0.2
d=0.233 p<0.01
d=0.231 p<0.01
d=0.318 p<0.01
d=0.357 p<0.01
d=0.179 p<0.1
d=0.236 p<0.01

Homogeneidad de
Varianza (Levene)
0.1925
0.0340
0.0130
0.0000
0.0000
0.0000
0.0000
0.0000
0.0000

Evaluacin de cultivos duales

El anlisis de varianza (Kruskal-Wallis) mostr diferencias significativas (P<0.001)
en lo que se refiere a control del crecimiento de todos los patgenos en general. A
partir de estos resultados, se realiz una comparacin mltiple, encontrndose
diferencias en la inhibicin de los patgenos entre las diferentes cepas de
Trichoderma spp. evaluadas. El anlisis se realiz por medio del Software Statistix
8.0.
Inhibicin de Botrytis cinerea
A partir del anlisis de varianza (K-W=25.014; p<0.01) para B. cinerea, se
encontraron diferencias significativas en la inhibicin ejercida por las cepas de
Trichoderma evaluadas. Para B. cinerea, se encontr que las cepas con mayor
antagonismo y por lo tanto las que permitieron un menor crecimiento del patgeno,
fueron TrmV-01 seguido por 19-TSM-3A, representando una inhibicin de 42.77%
y 37.77% respectivamente. Un segundo grupo de cepas mostraron una inhibicin
intermedia de B. cinerea, entre los que se encuentran 47-PDA-3A, T. viride y
Agroguard con un 33.33%, 27.77% y 21.11% de inhibicin respectivamente,
entre las cuales no se presentaron diferencias significativas.
El producto Trichoplant mostr la menor inhibicin del patgeno con 2.77%. En
la figura 55a, se puede observar la tendencia en el crecimiento de B. cinerea al

89

enfrentarla contra las seis cepas de Trichoderma spp., el cual se increment hasta
el segundo da de evaluacin, da en el que el crecimiento se detuvo siendo
constante hasta el ltimo da de evaluacin. En la figura 55b se muestran los
porcentajes de inhibicin promedio de cada una de las cepas de Trichoderma spp.
evaluadas.

Crecimiento (cm)

4.5
4

19-TSM-3A

3.5

Trichoplant

47-PDA-3A

2.5

Agroguard

T-viride
TrmV-01

1.5

Testigo

1
0.5
0
2

10

Das

(a)

(b)

Figura 55. (a) Crecimiento radial a travs del tiempo de B. cinerea al enfrentarlo contra seis cepas
de Trichoderma spp. (b) Porcentaje de inhibicin del crecimiento de B. cinerea, al enfrentarla con
las seis cepas de Trichoderma spp.

Inhibicin de Colletotrichum spp. de mora

Para C. gloeosporioides y C. acutatum aislados de mora, a partir del anlisis de
varianza Kruskal-Wallis y la comparacin mltiple (K-W=71.44; p<0.001), se
encontr que existen diferencias significativas en el control por parte de las cepas
de Trichoderma evaluadas.
Para los aislamientos de C. gloesporioides (Cg1 y Cg2) y C. acutatum (Ca1 y
Ca2) de mora en general, se encontr que entre las cepas TrmV-01, Agroguard ,
T. viride, 19-TSM-3A y 47-PDA-3A, representando porcentajes de inhibicin del
69.30%, 68.75%, 66.8%,62.77% y 63.47% respectivamente, no se presentaron
diferencias significativas en cuanto a la inhibicin del crecimiento de los
patgenos, a diferencia de Trichoplant que mostr la menor inhibicin con
21.12%.
El anlisis se realiz en general, para los cuatro aislamientos de Colletotrichum de
mora el ltimo da de evaluacin, sin embargo, en las figura 56a-59a, se puede
observar la tendencia en el crecimiento de cada uno de los aislamientos (Cg1,
Cg2, Ca1 y Ca2), siendo exponencial hasta el segundo da de evaluacin, da en

90

el cual Trichoderma spp. llega hasta el patgeno, y es hasta este momento en que
permite que el patgeno crezca.
Para el aislamiento de C. gloeosporioides (Cg1) en particular, el tratamiento que
ms inhibi el crecimiento fue TrmV-01 con un 63.33%, seguido por Agroguard
con 62.22%, y el que menor inhibicin ejerci fue Trichoplant con 6.66% (Figura
56b).

4.5
4

19-TSM-3A

Crecimiento (cm)

3.5

Trichoplant

47-PDA-3A

2.5

Agroguard

T-viride

1.5

TrmV-01

Testigo

0.5
0
2

10 12

Das

(a)

(b)

Figura 56. (a) Crecimiento radial a travs del tiempo de C. gloeosporioides (Cg1) al enfrentarlo
contra seis cepas de Trichoderma spp. (b) Porcentaje de inhibicin del crecimiento de C.
gloeosporioides (Cg1), al enfrentarla con las seis cepas de Trichoderma spp.

Para el aislamiento de C. gloeosporioides (Cg2), el tratamiento ms efectivo en la

inhibicin del crecimiento fue TrmV-01 con un 58.88%, seguido por Agroguard
con 57.77%, y el que menor inhibicin ejerci fue Trichoplant con 2.2% (Figura
57b) siendo evidente que el tratamiento con Trichoplant permiti el mayor
crecimiento del hongo.

91

4
3.5
19-TSM-3A
Trichoplant
47-PDA-3A
Agroguard
T-viride
TrmV-01
Testigo

Crecimiento (cm)

3
2.5
2
1.5
1
0.5
0
2

10

Das

(a)

(b)

Figura 57 (a) Crecimiento radial de C. gloeosporioides (Cg2) al enfrentarlo contra seis cepas de
Trichoderma spp. (b) Porcentaje de inhibicin del crecimiento de C. gloeosporioides (Cg2), al
enfrentarla con las seis cepas de Trichoderma spp.

Para el aislamiento de C. acutatum (Ca1) en particular, las cepas ms efectivas

fueron Agroguard y 19-TSM-3A ambas con un 79.44% de inhibicin del
crecimiento del patgeno, seguido por T-viride, TrmV-01 y 47-PDA-3A con
78.88%, 78.33% y 77.77% respectivamente. La cepa menos efectiva fue
Trichoplant con 44.44 % de inhibicin (Figura 58b).

(a)

(b)

Figura 58. (a) Crecimiento radial a travs del tiempo de C. acutatum (Ca1) al enfrentarlo contra seis
cepas de Trichoderma spp. (b) Porcentaje de inhibicin del crecimiento de C. acutatum (Ca1), al
enfrentarla con las seis cepas de Trichoderma spp.

Para el aislamiento de C. acutatum (Ca2) en particular, la cepa ms efectiva fue

T-viride con 77.77% de inhibicin de crecimiento del patgeno, seguido de TrmV01, Agroguard, 19-TSM-3A y 47-PDA-3A con 76.66%, 75.55%, 74.44% y 73.88%

92

respectivamente. La cepa menos efectiva fue Trichoplant con 31.12 % de

inhibicin (Figura 59b).

3
19-TSM-3A

Crecimiento (cm)

2.5

Trichoplant

47-PDA-3A

1.5

Agroguard
T-viride

TrmV-01

0.5

Testigo

0
2

10 12

Das

(a)

(b)

Figura 59. (a) Crecimiento radial a travs del tiempo de uno de los aislamientos de C. acutatum
(Ca2) al enfrentarlo contra seis cepas de Trichoderma spp. (b) Porcentaje de inhibicin del
crecimiento de C. acutatum (Ca2), al enfrentarlo con las seis cepas de Trichoderma spp.

Inhibicin de Colletotrichum acutatum de lulo

Para los aislamientos de C. acutatum de lulo, se encontraron diferencias
significativas entre las cepas de Trichoderma spp. evaluadas, a partir del anlisis
de varianza y la comparacin mltiple (K-W=47.43; p<0.001). Para los
aislamientos de C. acutatum aislados de lulo, se encontr que en promedio las
cepas de Trichoderma spp. con mayor antagonismo fueron Agroguard , T. viride y
TrmV-01 entre los cuales no hubo diferencias significativas, representando una
inhibicin de 78.88%, 77.77% y 76.66% respectivamente, seguido por la cepa 47PDA-3A (63.46%) y 19-TSM-3A (62.77%) estos ltimos ejerciendo una inhibicin
intermedia de los patgenos. Trichoplant, al igual que con los otros patgenos,
mostr la menor inhibicin con un 44,44%. En las figuras 6a y 7a, se puede
observar el porcentaje de inhibicin por parte de cada una de las cepas de
Trichoderma spp. con C. acutatum (C1) y (C2).
Con los aislamientos de C. acutatum de lulo, se present mayor porcentaje de
inhibicin en general para todas las cepas de Trichoderma spp., debido a que el
crecimiento de este patgeno es ms lento en comparacin con el crecimiento de
los dems patgenos tratados. En general, se present incremento del crecimiento
de todos los patgenos hasta el segundo da de evaluacin y fue en este da
donde se detuvo el crecimiento (Figuras 60b y 61b).

93

Crecimiento (cm)

3.5
3

19-TSM-3A

2.5

Trichoplant
47-PDA-3A

Agroguard

1.5

T-viride

TrmV-01
Testigo

0.5
0
2

8 10 12 14
Das

(a)

(b)

Figura 60. Figura 6. (a) Porcentaje de inhibicin del crecimiento de C. acutatum (C1) aislado de
lulo, al enfrentarla con las seis cepas de Trichoderma spp. (b) Crecimiento radial a travs del
tiempo de C. acutatum (C1) aislado de lulo al enfrentarlo contra seis cepas de Trichoderma spp.

3
19-TSM-3A

Crecimiento (cm)

2.5

Trichoplant
47-PDA-3A

Agroguard

1.5

T-viride
TrmV-01

Testigo

0.5
0
2

8 10 12 14
Das

(a)

(b)

Figura 61. (a) Porcentaje de inhibicin del crecimiento de C. acutatum (C2) aislado de lulo, al
enfrentarla con las seis cepas de Trichoderma spp. (b) Crecimiento radial a travs del tiempo de C.
acutatum (C2) aislado de lulo al enfrentarlo contra seis cepas de Trichoderma spp.

Evaluacin de filtrados libres de Trichoderma spp.

Inhibicin de B. cinerea
Se encontraron diferencias significativas entre los porcentajes de inhibicin del
crecimiento de B. cinerea ejercidos por las diferentes cepas de Trichoderma spp.
Evaluadas. La cepa ms efectiva en el control de B. cinerea fue Trichoplant, que
inhibi en un 72.5% el crecimiento de ste. En un segundo lugar, el grupo
integrado por Trichotrpico, T. viride, Agroguard y TrmV-01, que present una
inhibicin intermedia con 59.8%, 56.9%, 56.6% y 49.66%, respectivamente.
Finalmente, la cepa menos efectiva fue 19-TSM-3A la cual inhibi un 39% el

94

crecimiento del patgeno, sin embargo este resultado es superior al testigo (Figura
62).

Figura 62 Porcentaje de inhibicin de Botrytis cinerea al dcimo da de evaluacin con las seis
cepas de Trichoderma spp. evaluadas en filtrados libres.

Inhibicin de Colletotrichum spp. de mora

Para los aislamientos de Colletotrichum de mora en general, se encontr que las
cepas ms eficientes en el control de los patgenos fueron Trichoplant,
Agroguard , con promedios de inhibicin de 37.5% y 36.2% respectivamente,
seguido por T.viride, Trichotrpico, TrmV-01, con promedios de 30.9%, 29.9% y
9.34% respectivamente. La cepa menos eficiente fue 19-TSM-3A, la cual en
algunos casos permiti mayor crecimiento que el testigo.
Para Cg1 en particular, se encontr que la cepa ms eficiente fue Trichoplant
con 56.4% de inhibicin, seguido por TrmV-01 con 9.7%. En general se observ
una baja eficiencia en la inhibicin del crecimiento con las cepas Agroguard
(3.6%), Trichotrpico (2.5%) y T. viride (2.8%) (Figura 63a). La cepa menos
eficiente fue 19-TSM-3A con 0.3% de inhibicin.
Para Cg2, se encontr que la mayor inhibicin se present con Trichoplant con
59.2%, seguido por Agroguard
la cual inhibi el 25% del crecimiento del
patgeno. Las cepas menos efectivas fueron Trichotrpico con 1.1%, T. viride
3.3%, TrmV-01 con 6.1% y 19-TSM-3A que no ejerci inhibicin (0%) (Figura 63b).

95

(a)

(b)

Figura 63. Porcentaje de inhibicin de Colletotrichum gloeosporioides Cg1(a) y Cg2 (b) al dcimo
da de evaluacin con las seis cepas de Trichoderma spp. evaluadas.

Inhibicin de Colletotrichum acutatum de lulo

Para los aislamientos de C. acutatum de lulo en general, se encontr que las
cepas de Trichoderma que ejercieron mayor inhibicin fueron Agroguard con
50.1%, Trichoplant con 47.32%, T-viride con 47.3%, entre las cuales no se
encontraron diferencias significativas en la inhibicin del crecimiento de los
patgenos, seguido por Trichotrpico con 45.5% y TrmV-01 con 18.5%. La cepa
menos eficiente fue 19-TSM-3A, la cual no present diferencias significativas con
el testigo, permitiendo en algunos casos un mayor crecimiento que en este.
Durante la evaluacin se observaron diferencias en la respuesta de los dos
aislamientos de C. acutatum a las cepas de Trichoderma evaluadas. Para C1 en
particular se encontr que las cepas que ejercieron mayor inhibicin fueron
Agroguard con 77.13%, seguido por T. viride con 73%, y Trichotrpico con
67.5%. Trichoplant ejerci inhibicin intermedia del patgeno con 35%, sin
embargo esta fue mayor que el testigo. Las cepas TrmV-01 y 19-TSM-3A (3% y
0% respectivamente) ejercieron una baja inhibicin del patgeno, siendo similar al
testigo (Figura 64a).
Para C2, se encontr un efecto contrario a C1, en donde Trichoplant fue el que
ejerci una mayor inhibicin en el crecimiento representando un 60%. En orden
de inhibicin, TrmV-01 fue el que ejerci una mayor inhibicin despus de
Trichoplant, con un 33.7%. Las cepas Trichotrpico, Agroguard y T. viride
ejercieron inhibiciones del 23.5%, 23.2% y 21.5% respectivamente, las cuales
aunque presentaron las ms bajas inhibiciones fueron diferentes al testigo. La
cepa menos eficiente fue 19-TSM-3A, la cual muy similar al testigo (Figura 64b).

96

(a)

(b)

Figura 64. Porcentaje de inhibicin de Colletotrichum acutatum, C1 (a) y C2 (b) de lulo al dcimo
da de evaluacin con las seis cepas de Trichoderma spp. evaluadas.

Evaluacin de Extractos vegetales

En general, se encontr que los diferentes extractos vegetales evaluados
redujeron la tasa de crecimiento de los patgenos en diferentes proporciones,
permitiendo en la mayora de los casos el desarrollo tardo o nulo del crecimiento
de los hongos.
Inhibicin de Botrytis cinerea
Se encontr que el tratamiento que inhibi completamente el crecimiento de B.
cinerea fue el extracto de T. patula el cual no present diferencias significativas
con Procloraz, representando inhibicin del 100%. Los tratamientos con Ecoswing
(71.3%), Lixiviado de raquis de pltano (LRP) (71.6%) y Fique (33%), ejercieron
inhibiciones ms bajas, pero significativamente mayores al testigo, siendo el
tratamiento con extracto de fique el menos eficiente (Figura 65). Es de resaltar,
que el efecto del LRP en los cuatro primeros das fue similar al de T. patula y
Procloraz, sin presentar diferencias significativas entre estos tratamientos; slo a
partir del quinto da de evaluacin se logr observar crecimiento del patgeno
sobre el medio que contena LRP, igualando el crecimiento con Ecoswing.

97

Figura 65. Porcentaje de inhibicin de Botrytis cinerea doce das despus de sembrado en medio
PDA modificado con extractos vegetales.

Inhibicin de Colletotrichum spp. de mora

Para los aislamientos de Colletotrichum de mora en general, se encontr que los
tratamientos ms efectivos en la inhibicin del crecimiento de los patgenos fueron
T. patula y Ecoswing, los cuales no presentaron diferencias significativas con
Procloraz, ihnibiendo completamente el crecimiento de los patgenos (100%)
(Figura 66). Por otro lado, el tratamiento con Fique (F. macrophylla) y el LRP,
fueron los tratamientos menos eficientes en la inhibicin de los patgenos con
42.4% para fique y 0% para LRP, es importante resaltar que aunque con el
extracto de fique no fue alta s se present inhibicin de los patgenos.

(a)

(b)

Figura 66. Porcentaje de inhibicin de Colletrotrichum gloeosporioides (a) Cg1, (b) Cg2, de mora,
14 das despus de sembrados en medio PDA modificado con extractos vegetales.

98

Para los aislamientos de C. acutatum en particular, se encontr que los

tratamientos ms efectivos fueron T. patula y Ecoswing, inhibiendo al 100% el
crecimiento de estos patgenos. El extracto de fique ejerci inhibicin intermedia
de 47.3% para Ca1 y 51.2% para Ca2, sin embargo fue superior al testigo PDA
(Figura 14).

(a)

(b)

Figura 67. Porcentaje de inhibicin de Colletotrichum acutatum (a) Ca1 y (b) Ca2, de mora, 14 das
despus de sembrados en medio PDA modificado con extractos vegetales.

Inhibicin de C. acutatum de lulo

Se encontr que para los aislamientos de C. acutatum de lulo, el tratamiento que
ms inhibi el crecimiento de los patgenos fue T. patula, presentando inhibicin
promedio del 100% siendo similar al tratamiento con Procloraz. En orden de
inhibicin, se encontr que el tratamiento con Ecoswing, fue el que mayor
inhibicin ejerci despus de T. patula, presentando inhibicin del 68.2% y 73.5%
para C1 y C2 respectivamente, sin embargo, no se presentan diferencias
significativas entre este y el extracto de fique, el cual present inhibicin del 55.7%
y 56.9 % para C1 y C2 respectivamente (Figura 15). Sin embargo, es importante
mencionar que durante los primeros diez das de evaluacin el crecimiento de los
patgenos en el tratamiento con Ecoswing fue nulo, siendo similar a Procloraz y
T. patula, slo inici el crecimiento a partir del quinto da de evaluacin, contrario
al tratamiento con F. macrophylla, el cual tuvo un crecimiento ms lento que el
testigo, pero constante desde el primer da de evaluacin. El tratamiento menos
efectivo fue el LRP, el cual present inhibicin nula, siendo similar al testigo PDA
(Figura 68).

99

(a)

(b)

Figura 68. Porcentaje de inhibicin de Colletotrichum acutatum (a) C1 y (b) C2, de lulo, 14 das
despus de sembrados en medio PDA modificado con extractos vegetales.

Prueba en Invernadero
Se encontr que el tratamiento que ms redujo el progreso de la enfermedad fue
TrmV-01 el cual present un comportamiento muy similar al testigo (agar),
Trichoplant y seguido por Procloraz. Las plantas tratadas con Ecoswing no
presentaron diferencias con las que fueron inoculadas nicamente con C.
gloeosporioides, siendo este el tratamiento menos efectivo en la reduccin del
progreso de la enfermedad (Figura 69).

Progreso de la enfermedad

C. gloeosporioides
Ecoswing
T. patula
Mirage
Trichoplant
TrmV-01
Testigo
Das de evaluacin

Figura 69.Progreso de la enfermedad de plantas de mora inoculadas con Colletotrichum

gloeosporioides, sometidas a los tratamientos ms efectivos determinados In Vitro para el control
de este patgeno.

100

2.1.6.5. Conclusiones
En general, todas las cepas de Trichoderma spp. evaluadas mostraron inhibicin
del crecimiento de los patgenos, tanto en cultivos duales como en los filtrados
libres, en algunos casos con inhibiciones superiores al 75%, que representan
porcentajes de inhibicin altos en miras de seleccionar las cepas evaluadas como
potenciales biocontroladores.
Las cepas Agroguard (T. harzianum) y TrmV-01 (T. koningiopsis), mostraron una
capacidad antagnica eficiente con todos los patgenos en general, en las
evaluaciones de cultivos duales, siendo la competencia por espacio-nutrientes y el
micoparasitismo los mecanismos a resaltar ejercidos por estas cepas.
Los mecanismos de accin que Trichoderma spp. ejerce, pueden operar de
manera simultnea o independiente dependiendo en muchos casos del patgeno
a controlar, y de la cepa de Trichoderma spp. con la que se est realizando el
control, por lo cual entender la existencia de esa relacin de especificidad entre
Patgeno-Trichoderma spp., puede llegar a determinar el xito en el control de los
patgenos.
En los ensayos In Vitro, T. patula fue el extracto vegetal que mostr mayor
inhibicin (100%) del crecimiento de C. gloeosporioides, C. acutatum y B. cinerea,
seguido de Ecoswing, y F. macrophylla; esto proporciona una alternativa en
miras de minimizar el uso de agroqumicos perjudiciales, no obstante, es
importante hacer ms investigaciones que proporcionen informacin acerca de los
componentes y el efecto que estos pueden tener sobre los cultivos, los
consumidores y el medio ambiente, para que puedan ser identificados como una
alternativa potencial viable en el reemplazo de los agroqumicos.
Los tratamientos evaluados, tanto biocontroladores como extractos vegetales,
proporcionan una alternativa para el manejo y control de los patgenos, mostrando
una alta especificidad, hacia algunos microorganismos, lo que puede ser la base
para incrementar y mejorar el manejo de las enfermedades.
La evaluacin de los tratamientos con el mtodo de inoculacin utilizado,
demuestra que Trichoderma spp. ejerce competencia sobre C. gloeosporioides al
ser colocados juntos en heridas hechas en el tallo de la planta, sin embargo, este
mismo mtodo no fue eficiente para las aplicaciones de los extractos vegetales,
por lo que se concluye que estos disminuyen su eficiencia cuando el hongo entra
en contacto directo con la herida facilitando el desarrollo de la enfermedad.
Se recomienda hacer evaluaciones en plantas inoculadas por el mtodo de
aspersin tanto para el patgeno, como para los tratamientos a evaluar
(antagonistas y extractos vegetales) y de esta manera determinar la efectividad de
estos tratamientos para futuras aplicaciones en campo.

101

Por otro lado, es importante hacer pruebas con diferentes concentraciones para
todos los tratamientos evaluados In Vitro y de esta forma determinar la dosis
mnima de inhibicin del patgeno para posteriores aplicaciones en plantas.
2.1.6.6. Bibliografa
LVAREZ, E., C.X. GRAJALES, J. VILLEGAS & J. LOKE. 2001. Control del Mildeo Polvoso
(Sphaeroteca pannosa var. rosae) en Rosa (Rosa sp.) usando un lixiviado de Compost del Raquis
de Pltano (Musa AAB). Asocolflores pp. 41-47.
HOWELL, C.R. 2003. Mechanisms employed by Trichoderma species in the biological control of
plant diseases: the history and evolution of current concepts. Plant Disease 87(01):4-10.
SUTTON, B.C. 1992. The genus Glomerella and its anamorph Colletotrichum. P1-26. En Bailey J.A
& Jeger M.J. (eds). Colletotrichum: Biology, Pathology and Control: CAB International, Wallingford,
England.
WHARTON, P.S. & D. URIBEUNDO. 2004. The biology of Colletotrichum acutatum. Anales del
Jardn Botnico de Madrid. 61(1):3-22.
YEDIDIA, I., N. BENHAMOU & I. CHET. 1999. Induction of defense responses in cucumber plants
(Cucumis sativus L.) by the biocontrol agent Trichoderma harzianum. App. Environ. Microbiol.
65:1061-1070.

2.1.7. Evaluacin in-vitro del efecto de

canela (Cinnamomum
zeylanicum
nees),
para
el
control de
antracnosis
(Colletotrichum gloeosporioides (penz) penz. & sacc.) en el
cultivo de mora (Rubus glaucus benth) 10
Objetivo del proyecto (3): Desarrollar y evaluar estrategias de biocontrol de las
plagas y enfermedades ms importantes.
2.1.7.1. Marco Referencial
Se evalu el efecto del extracto de canela (Cinnamomum zeylanicum Nees), sobre
la antracnosis (Colletotrichum gloeosporioides Penz), bajo condiciones In vitro,
observando el desarrollo y crecimiento micelial a travs del tiempo en cada uno de
los tratamientos. Este trabajo se desarroll tanto en las instalaciones de ICA
Manizales donde se hizo el aislamiento y cultivo del hongo C. gloeosporioides puro
a partir de tejidos afectados de mora y en el laboratorio de sanidad vegetal de
UNISARC, donde se desarroll la prueba in vitro. Se analizaron dos variables, la
primera fue la obtencin del cultivo monosprico de Colletotrichum gloeosporioides
para evaluar el crecimiento radial del hongo sometido a diferentes concentraciones
de extracto de canela y la segunda variable fue la determinacin de la capacidad
inhibitoria del extracto de canela en diferentes concentraciones sobre el hongo C.
gloeosporioides bajo pruebas in vitro. Esta investigacin corresponde a un estudio
10

Nathalia Acevedo Bernal, Jess Zuleta Ospina. Estudiante Dcimo Semestre de Agronoma con nfasis en
Agricultura Orgnica, UNISARC, Santa Rosa de Cabal, Risaralda, Colombia
2
Ingeniero Agrnomo y docente de UNISARC

102

exploratorio y descriptivo. El diseo experimental se instal completamente

aleatorizado, la unidad experimental fue conformada por cada una de las cajas
petri con el medio de cultivo, el tratamiento correspondiente segn el diseo
experimental y el inoculo de C. gloeosporioides. La descripcin de los tratamientos
evaluados correspondieron de la siguiente manera: tratamiento 1 (5 ppm),
tratamiento 2 (10 ppm), tratamiento 3 (20 ppm) y el tratamiento 4 (30 ppm) de
extracto de canela al 94% de pureza, un testigo qumico (score al 0.6 cc/l) y un
testigo absoluto donde se aplic agua destilada estril, se manejaron 10
repeticiones por tratamiento.
De acuerdo con los resultados el mximo desarrollo del cultivo de C.
gloeosporioides, en PDA (Papa Dextrosa Agar) se obtuvo sobre el tratamiento 6
(testigo), donde solo se aplic agua destilada estril. El comportamiento del
tratamiento 6 (testigo - agua destilada estril) dos das despus de la siembra del
patgeno (primer registro), present un crecimiento radial de 12.1 mm
correspondiente a un rea de (35.1 mm2), mientras que en los dems tratamientos
el desarrollo fue cero (0). El segundo registro se realiz cuatro das despus de la
siembra del inculo y se encontr que en todos los tratamientos se inici el
crecimiento de la colonia del hongo, siendo el de menor desarrollo el tratamiento 5
(score) 0.2 mm, seguido del tratamiento 1 (5 ppm de extracto de canela) 2.8 mm,
mientras el testigo avanz rpidamente colonizando gran parte del medio de
cultivo 28.6 mm.
En el registro realizado seis das despus de siembra del inculo, se pudo
observar que el tratamiento con Score inhibi el crecimiento de la colonia del
hongo a partir de los cuatro das y as se mantuvo durante todo el tiempo del
experimento. En trminos generales se encontr que el crecimiento de las
colonias solo se dio hasta la medicin 3, porque a partir del registro 4 el
crecimiento radial para todos los tratamientos (5 ppm, 10 ppm, 20 ppm, 30 ppm y
score), se mantuvo. En trminos generales se pudo concluir que el extracto de
canela posee un accin fungicida y Las concentraciones del extracto de canela
ms eficientes son las de los tratamientos 1 (5 ppm) y la del tratamiento 4 (30
ppm).
El desarrollo de la investigacin conduce a establecer una cultura en el manejo de
plagas y enfermedades en el cultivo de mora (Rubus glaucus Benth) bajo el
concepto de produccin limpia y buenas prcticas agrcolas; este estudio se
realiz con el fin de conocer la efectividad del extracto de canela (Cinnamomum
zeylanicum Nees) para el control de Colletotrichum gloeosporoides Penz. En el
cultivo de mora (Rubus glaucus Benth), cuyas pruebas preliminares de efectividad
se realizaron a nivel in-vitro. Teniendo en cuenta lo anterior y las necesidades de
los agricultores de obtener beneficios econmicos para el manejo de sus
cosechas, el presente estudio pretende desarrollar una serie de herramientas
basadas en el manejo integrado de enfermedades en el cultivo de la mora que
afectan el sistema de produccin, ya que este cultivo es viable econmicamente y
ambientalmente manejable. Los nuevos mercados exigen productos altamente
competitivos, lo que incluye manejar el cultivo bajo un modelo de produccin

103

limpia y buenas prcticas agrcolas. Por esta razn se plantea la alternativa de

utilizar extractos vegetales para facilitar el manejo de enfermedades en el cultivo
de mora y as se propiciar que el impacto sea menor en el medio ambiente.
El metabolito intermedio presente en el extracto de canela y aparentemente
fungisttico es el cinamaldehido, por esta razn se desarroll el presente estudio
para comparar su efectividad. Actualmente el cultivo de mora se ha convertido en
una de las propuestas productivas ms promisorias de la regin, conquistando
mercados que requieren de productos limpios y con niveles de residualidad de
agroqumicos bajos, ptimos para el consumo humano. Por tal razn se plante
esta investigacin basada en el uso de extracto de canela (Cinnamomum
zeylanicum Nees) como alternativa para el manejo de Colletotrichum
gloeosporioides Penz.
2.1.7.3. Metodologa
El aislamiento del patgeno y la obtencin del cultivo monosprico del hongo
Colletotrichum gloeosporioides Penz, se llev a cabo en el Instituto Colombiano
Agropecuario, ICA, de Manizales. La evaluacin in vitro del efecto de los diferentes
tratamientos sobre el hongo se desarroll en el Laboratorio de Sanidad Vegetal de
la Corporacin Universitaria Santa Rosa de Cabal, UNISARC, en el municipio de
Santa Rosa de Cabal. Los tratamientos evaluados correspondieron a diferentes
concentraciones de extracto de canela al 94% de pureza, un testigo qumico
utilizando el producto ms usado por los agricultores de la regin y un testigo
absoluto donde se aplic agua destilada estril
Aislamiento del Cultivo Puro: para aislar el patgeno se utilizaron muestras de
plantas de mora con la sintomatologa tpica de antracnosis Collectotrichum
gloeosporioides.
Preparacin del Medio de Cultivo y la Adicin de las Diferentes
Concentraciones del Extracto de Canela y el Score: el medio se prepar con
39 g de Papa Dextrosa Agar (PDA) disuelto en 1000 cc agua destilada estril bajo
punto de ebullicin, se llev al autoclave, luego en la cmara de flujo laminar se
revirti dicho medio con las concentraciones de cada tratamiento de canela y
score en las cajas petri con el fin de que no se contaminaran con factores
externos.
Prueba de Control In-Vitro: en cada caja petri con el medio de cultivo en la parte
central se sembr una porcin de 0.5 cc de dimetro de cultivo puro
Collectotrichum gloeosporoides Penz con la ayuda de un sacabocado,
posteriormente se sellaron las cajas con cristaflex y se colocaron en un lugar a
temperatura ambiente. Se observ el desarrollo del patgeno y el crecimiento
radial cada dos das por espacio de 12 das, se hicieron en total seis mediciones.
Sobre la base de las cajas petri se traz un plano cartesiano, con una escala en
milmetros, que permiti medir el crecimiento radial de la colonia del hongo C.
gloeosporoides.

104

Variables a Evaluar
Crecimiento radial en milmetros
Grado de inhibicin del crecimiento
Las variables se midieron determinando el crecimiento radial del hongo aplicando
la frmula de R2, y el efecto inhibitorio se tom de la sumatoria del crecimiento
radial con respecto al tratamiento testigo.
Anlisis de los Datos
Los datos fueron interpretados por medio del anlisis de varianza (ANAVA) bajo
las pruebas de diferenciacin de Duncan, al 5% de confianza. La observacin
directa fue interpretada a travs de la descripcin de los fenmenos.
2.1.7.4. Resultados y Discusin
El registro de los datos del crecimiento radial del hongo se hizo de manera
acumulada durante las seis mediciones realizadas, pero los datos analizados slo
se tomaron hasta la cuarta medicin debido a que en la quinta y sexta medicin
los registros fueron constantes con respecto a la medicin cuatro, como se
observa en la tabla 18. El mximo desarrollo del cultivo de C. gloeosporioides, en
PDA (Papa Dextrosa Agar) se obtuvo sobre el tratamiento 6 (testigo), donde solo
se aplic agua destilada estril.
Tabla 18. Crecimiento acumulativo del hongo C. gloeosporioides a travs del tiempo en mm
Registros
Crecimiento radial del hongo por tratamiento para
cada uno de los registros
Tratamientos
1

T1

2,8

3,6

T2

4,1

4,8

6,2

T3

5,6

5,6

6,3

T4

3,1

3,1

3,8

T5

0,2

0,2

0,2

T6

12,1

28,6

34,5

35,2

El comportamiento del tratamiento 6 (testigo - agua destilada estril) dos das

despus de la siembra del patgeno (primer registro), present un crecimiento
radial de 12.1 mm correspondiente a un rea de (35.1 mm 2), mientras que en los
dems tratamientos el desarrollo fue cero (0).

105

El segundo registro se realiz cuatro das despus de la siembra del inculo y se

encontr que en todos los tratamientos se inici el crecimiento de la colonia del
hongo, siendo el de menor desarrollo el tratamiento 5 (score) 0.2 mm, seguido del
tratamiento 1 (5 ppm de extracto de canela) 2.8 mm, mientras el testigo avanz
rpidamente colonizando gran parte del medio de cultivo 28.6 mm. En el registro 3
realizado seis das despus de siembra del inculo, se pudo observar que el
tratamiento 5 (score) inhibi el crecimiento de la colonia del hongo a partir de los
cuatro das y as se mantuvo durante todo el tiempo del experimento. En trminos
generales se encontr que el crecimiento de las colonias solo se dio hasta la
medicin 3, porque a partir del registro 4 el crecimiento radial para todos los
tratamientos (5 ppm, 10 ppm, 20 ppm, 30 ppm y score), se mantuvo.
Las mediciones se hicieron hasta el registro 6, teniendo en cuenta que los
registros 4, 5 y 6 fueron constantes, no habiendo variacin en el desarrollo de las
colonias, por lo cual se determin no continuar con la toma de registros, ya que el
hongo detuvo su crecimiento dentro del medio de cultivo; es de mencionar que el
tratamiento 5 (score) mostr un efecto inhibitorio donde la segunda medicin dos
das despus de la siembra del inoculo se observa que los tratamientos con
diferentes concentraciones de canela permitieron el crecimiento de C.
gloeosporoides hacia el da 8 despus de la siembra del inoculo cubriendo un rea
muy inferior presentada por el tratamiento 6, el cual creci durante los primeros 8
das. Como se observa en la tabla 19, las diferentes concentraciones del extracto
de canela al 94% de pureza, produjo un efecto inhibitorio total del micelio del
hongo en los primeros dos das de observacin. En la segunda toma de datos el
hongo comienza a colonizar la caja y detiene su crecimiento en la cuarta toma que
corresponde al octavo da. Se presentan datos significativos acerca del efecto
antifngico de la canela para controlar el hongo, puesto que el crecimiento con
respecto al testigo fue limitado. Los datos son acumulados para poder determinar
el crecimiento radial total del C. gloeosporioides, in vitro.
Grfico 1. Crecimiento radial de Colletotrichum gloeosporioides a travs del tiempo comparndolo
con el testigo.

40

Crecimiento (mm)

35
30
25

T6

20

T1

15

T2

10

T3

T4

T5

En el grafico 1 1 se puede
observar
el 4comportamiento
2
3
5
6 de los 7tratamientos con
respecto al testigo, tomando el testigoDatos
como mximo desarrollo del hongo. Los
tratamientos con las diferentes concentraciones de extracto de canela, muestran
que el mayor crecimiento radial se observ en los tratamientos 2 y 3 los cuales

106

fueron muy similares, pero hay que tener en cuenta que el tratamiento 2 creci
ms lento que el tratamiento 3 a travs del tiempo. La menor tasa de desarrollo de
la colonia del hongo se present con los tratamientos 1 y 4.
Tabla 19. Efecto del extracto de canela y score en la inhibicin del crecimiento radial del hongo C.
gloeosporioides.
Porcentaje (%) del efecto inhibitorio del extracto de
canela durante cada uno de los registros
Tratamientos
1
2
3
4
5
6
T1

100

90,2

91,3

89,8

89,8

89,8

T2

100

85,3

86

82,4

82,4

82,4

T3

100

80,4

83,7

82,1

82,1

82,1

T4

100

89,2

91

89,2

89,2

89,2

T5

100

99,3

99,4

99,4

99,4

99,4

Se observa el efecto inhibitorio de los tratamientos con diferentes concentraciones

de canela y score respecto al tratamiento testigo (agua destilada estril),
encontrndose que la mayor inhibicin se logr con el tratamiento 5 (0.6 cc /l
score) con el 99.4% de inhibicin, seguido del tratamiento 1 (5 ppm de extracto de
canela) con el 89.8% de efecto inhibitorio; el tratamiento 3 (20 ppm de extracto de
canela) fue el que menor efecto inhibitorio tuvo sobre Colletotrichum
gloeosporioides con el 82.1%.
En trminos generales todos los tratamientos tuvieron un efecto inhibitorio para
crecimiento
de C. gloeosporioides. Para el presente anlisis se tom
crecimiento del tratamiento 6 (testigo) como mximo desarrollo equivalente
100% y en cada registro se manejaron los datos acumulativos para estimar
porcentaje de inhibicin a la fecha y determinar el tratamiento ms eficiente.

el
el
al
el

Grfico 2. Efecto del extracto de canela en la inhibicin del crecimiento radial del hongo C.
gloeosporioides.
120

Inhibicion

100
80
60
40
T1

20

T2

T3
En el grafico
2 se observa que para los tratamientos con las
diferentes
0
T4
1
2
3
4 grado 5
6
concentraciones de
extracto
de canela,
de inhibicin
del crecimiento
Datos el
radial de las colonias del hongo dos das despus de siembra del inculo fue del
100%. En el segundo registro del crecimiento radial del inculo, que se hizo cuatro

107

das despus de la siembra del mismo, se observa mayor efecto inhibitorio del
crecimiento de las colonias en los tratamientos 1 y 4, mientras que los
tratamientos 2 y 3 disminuyeron su efecto inhibitorio, siendo de todas maneras alto
con respecto al tratamiento 6 (testigo).
Efecto muy similar se observa en la tercera medicin que se hizo a los seis das
despus de siembra, determinndose leve disminucin del efecto inhibitorio de los
tratamientos con diferentes concentraciones de extracto de canela, pero que an
se sigue considerando alto frente al tratamiento 6. Los registros 4, 5 y 6 presentan
valores iguales a los observados en el 3, lo cual da entender que hasta dicha
fecha el hongo proveniente de cultivo monosprico tuvo actividad, la cual pudo
haber sido restringida por el efecto de los tratamientos de canela y score o que el
hongo haya perdido la capacidad de infeccin dentro del medio de cultivo. En el
tratamiento 6 se encontr que la caja petri fue colonizada totalmente al da seis, lo
que coincidi con el detenimiento del desarrollo del hongo en los dems
tratamientos.

Crecimiento acumulativo en
(mm)

Grfico 3. Crecimiento radial acumulativo de los tratamientos a travs del tiempo.

40
35
30
25
20
15

T6

10

T1

T2

T3
1

Dato

T4
T5

En la grfico 3, se integraron los tratamientos para poder mostrar las diferencias

en cuanto a crecimiento acumulativo a travs del tiempo. El testigo es quien tiene
un crecimiento notable por encima de los dems tratamientos y por tal motivo en
la investigacin se toma como mximo desarrollo para poder comparar los dems
tratamientos y as determinar cul fue el crecimiento radial ms significativo y
tratamiento con el efecto inhibitorio ms eficiente.
2.1.7.5. Conclusiones
Los anteriores resultados permiten concluir que el extracto de canela posee una
accin fungicida para el desarrollo del hongo Colletotrichum gloeosporioides
causante de la antracnosis en mora evaluada In Vitro.
Las concentraciones del extracto de canela ms eficientes son las de los
tratamientos 1 (5 ppm) y la del tratamiento 4 (30 ppm). Por otro lado los
tratamientos 2 (10 ppm) y tratamiento 3 (20 ppm) arrojaron buenos resultados en
cuanto a inhibicin del crecimiento pero no tan eficaces como los anteriormente
mencionados.

108

El desarrollo de las colonias del hongo solo se dio hasta el da seis equivalente al
registro 3 en todos los tratamientos, encontrndose que los registros 4, 5 y 6
presentan valores iguales a los observados en el 3, lo cual da entender que hasta
dicha fecha el hongo proveniente de cultivo monosprico tuvo actividad, la cual
pudo haber sido restringida por el efecto de los tratamientos de canela y score o
que el hongo haya perdido la capacidad de infeccin dentro del medio de cultivo.
En el tratamiento 6 se encontr que la caja petri fue colonizada totalmente al da
seis, lo que coincidi con el detenimiento del desarrollo del hongo en los dems
tratamientos.
El extracto de canela comparado con un fungicida de sntesis qumica, llega a ser
una alternativa viable de manejo en un programa integrado de enfermedades en
este caso Colletotrichum gloeosporioides, posicionndose dentro de la normas de
produccin limpia amigables con el medio ambiente.
2.1.7.6. Recomendaciones
La investigacin debe continuar en campo con el fin de determinar el
comportamiento de los tratamientos bajo condiciones agroecolgicas.
Se deben hacer estudios en campo donde se evale el efecto inhibitorio curativo y
preventivo del extracto de canela en diferentes concentraciones, adems de las
propuestas en el presente trabajo.
Se recomienda conocer las especificaciones del extracto de canela en cuanto a
pureza y mtodo de obtencin para balancear la posologa del producto antes de
llevar a cabo aplicaciones en campo como alternativa de
manejo de C
gloeosporioides
En necesario conocer muy bien la sintomatologa tpica del hongo causante de la
antracnosis en mora.
La investigacin en nuevos productos que puedan servir para el manejo integrado
de C gloeosporioides debe partir de experiencias de productores o de centros de
investigacin que trabajan en orientacin de desarrollo de tcnicas agroecolgicas
de produccin.
2.1.7.7. Bibliografa
AGRIOS, George. 1996. Fitopatologa. 2 ed. Mxico: LIMUSA. 1995. p. 303-334.
CASTRO, D.; O.A., Mrquez; V.E., Restrepo y G.I., Vlez. 1995. Evaluacin del estado fitosanitario
del cultivo de la mora de castilla (Rubus glaucus Benth.) en el Oriente Antioqueo.
FUNDACIN DE FOMENTO AGROPECUARIO BUEN PASTOR - Universidad Catlica de Oriente,
Rionegro, Antioquia. 15p. (Serie de Investigaciones 7).

109
FRANCO, F y ZULETA, J 2006. Gua de Campo para el Manejo de Enfermedades en Mora.
Corporacin Universitaria Santa Rosa de Cabal UNISARC. Santa Rosa de Cabal. 20 p.
WILSON, C.L; Solar, Jm. ; El GHAOTH, A. and Wisniewsky, m.e. 1997. Rapid evaluation of
extracts and essential oils antifungal activity against Botrytis cinerea. En Plant Diseyse. Vol 81 (2)
(Febrero). P. 2004-210.

2.1.8. Seleccin de material gentico promisorio proveniente de

programas de mejoramiento, bancos de germoplasma
existentes o colectados en campos de agricultores 11.
Objetivo especfico (1): Con la participacin de agricultores, empresas
comercializadoras y procesadoras, seleccionar materiales lite de lulo y mora, con
criterios de adaptabilidad, resistencia a enfermedades, productividad y aceptacin
del mercado
Objetivo del proyecto (2): Caracterizar las colecciones de germoplasma, por
variabilidad gentica y resistencia a plagas y enfermedades de mayor importancia
2.1.8.1. Marco Referencial
La Corporacin Colombiana Agropecuaria, suministr 43 accesiones de la
coleccin de mora, incluida en el Sistema de Bancos de Germoplasma de la
Nacin Colombiana, para los procesos de investigacin del proyecto.
Adicionalmente el CIAT para los trabajos a realizar, exclusivamente en Colombia,
emple 5 clones derivados de hibridacin interespecfica, hecha por los
investigadores de Corpoica (Lobo, 2006). Se realiz un proceso de caracterizacin
y evaluacin morfolgicas de la coleccin, en el cual se encontr el 80% de
variantes morfolgicas de los atributos cualitativos incluidos en el listado de
descriptores y rearreglos de stos y de las variables cuantitativas entre
accesiones. Esto da valor de opcin y utilizacin al germoplasma en conservacin.
El cultivo de la mora an no ha alcanzado un nivel tecnolgico que permita
productividades y calidades ptimas. Entre los factores que reducen el rendimiento
estn las enfermedades que atacan el cultivo, de las cuales los patgenos con
mayor incidencia y que causan prdidas considerables son la Antracnosis
(Colletotrichum gloeosporioides), el Moho Gris (Botrytis cinerea), el Mildeo Velloso
(Peronospora spp) y el Mildeo Polvoso (Oidium sp) (Cadavid y Rivas, 1994; Castro
et al, 1995). Por ello, una alternativa es la bsqueda de materiales con alta
productividad, calidad adecuada de las bayas y resistencia a enfermedades.
El Sistema de Bancos de Germoplasma de la Nacin Colombiana, a cargo de
CORPOICA, posee la coleccin de Rubus, la cual incluye poblaciones cultivadas y
espontneas, colectadas en diversas zonas del pas y algunas introducciones de
otras reas del mundo. Esta se ha conformado para conservar la variabilidad del
gnero y promover su utilizacin, en sistemas productivos, mediante la realizacin
11

Lobo Mario. CORPOICA-Colo mb ia

110

de procesos de valor agregado de diversa ndole. A partir de dicha variabilidad y la

bsqueda de los atributos sealados, se podran obtener materiales para suplir las
falencias indicadas, como tambin para apoyar programas de hibridacin que
buscan combinacin de atributos deseados. Por ello, se apoy la investigacin
presente con suministro de materiales para la bsqueda de resistencia a
patgenos y, se realizaron procesos de valor evaluacin y caracterizacin con la
metapoblacin en conservacin, lo cual traslada los materiales de valor de
existencia a valores de opcin y utilizacin. Adems, lo anterior permite detectar la
ausencia de variabilidad requerida en sta, para el delineamiento de programas de
colecta cuyo norte es la bsqueda especfica de sta.
En Colombia, existen algunos estudios de caracterizacin de la diversidad
gentica de mora, tanto morfolgica (Zamorano 2004), como molecular usando
marcadores RAPDs (Marulanda y Mrquez 2001) y micro satlites aleatorios
RAMs (del ingls Ramdon Amplified Microsatellite) (Morillo et al 2005). Estos
estudios han buscado determinar la similitud entre accesiones evaluadas y origen
geogrfico de las mismas. Sin embargo, ninguno de estos trabajos ha estado
asociado con identificacin de fuentes de resistencia a la antracnosis y otras
enfermedades de importancia para la mora de Castilla. En Ecuador por su parte
estudios realizados por Romulerux (1996) sealan que existe gran variabilidad
gentica dentro del gnero Rubus, encontrndose 21 especies diferentes, algunos
de estas 7 especies de alta productividad y calidad del fruto.
Marulanda y Mrquez (2001) reportan niveles de similitud dentro de la especie R.
glaucus del orden del 85 a 100%, y una variabilidad gentica entre accesiones,
asociada con su origen geogrfico. Por su parte, los resultados de Morillo et al
(2005) permitieron identificar cuatro grupos genticos diferentes dentro de R.
glaucus, y uno para cada una de las otras dos especies, R. urticifolius y R.
robustus.
2.1.8.2. Metodologa
Los materiales se multiplicaron vegetativamente, en forma inicial, en el C.I. La
Selva a cargo de Corpoica y luego por la va de cultivo de tejidos en el laboratorio
de la Universidad Catlica de Oriente, Rionegro, Antioquia. Estos materiales se
entregaron al CIAT mediante una suscripcin de Acuerdos de Transferencia de
Materiales con fines de investigacin. Despus se multiplicaron en el laboratorio
de dicha entidad por la va de cultivo de tejidos.
Con apoyo del proyecto, se llev a cabo un estudio de caracterizacin y
evaluacin morfolgicas con accesiones de la coleccin de mora. Para ste se
emple una lista de descriptores morfolgicos, correspondientes a variables
cualitativas y cuantitativas, las cuales se registraron en 5 plantas por accesin. La
informacin, obtenida a partir de una tesis de grado profesional, se incorpor a
medios electrnicos; esto permite elaborar un catlogo, con las modas cualitativas,
para facilitar procesos de utilizacin de los materiales con atributos o combinacin
de atributos deseados. La caracterizacin morfolgica cualitativa, permiti

111

identificar que en la coleccin se encuentran el 80% de los estados de los

atributos de sta ndole, lo cual seala variabilidad aceptable en la metapoblacin
en conservacin. Los fenogramas cualitativo, cuantitativo y cualitativo-cuantitativo,
indicaron diversidad entre todas las accesiones, la presencia de rearreglos de
atributos de las dos categoras, dentro de stas. Lo anterior sirve para orientar
procesos de seleccin de materiales, bsqueda de estados de los descriptores no
presentes en el conjunto de demes de la coleccin y promocin de la utilizacin de
stos.
2.1.8.3. Resultados y Discusin
Germoplasma entregado para los procesos de investigacin
Se entregaron 43 accesiones de la coleccin de mora, 5 clones derivados de
hibridacin interespecfica.El apoyo de proyectos con materiales de los Bancos de
Germoplasma, transfiere las poblaciones en conservacin de valor de existencia a
valor de opcin y utilizacin. Esto permite a los bancos justificar su conformacin y
existencia y, aprovechar el capital biolgico del pas en procesos productivos.
Igualmente, la retroalimentacin al Sistema de Bancos, promueve el apoyo a stos
y brinda informacin sobre el potencial del material en conservacin para
promocin de su empleo en procesos de investigacin y fomento.
Procesos de valor agregado: Caracterizacin y evaluacin morfolgicas
En los materiales de la coleccin, se encontr el 80% de los estados incluidos en
la lista de descriptores, con polimorfismo interpoblacional en 15 de los 17
atributos estudiados. Las dos caractersticas, sin variabilidad fueron el color del
cliz y la forma de la base de la hoja. El fenograma cualitativo, obtenido con
variables, generalmente, de heredabilidad alta, seal la presencia de 3
agrupamientos grandes, con subgrupos en cada uno de ellos y una diferencia
mxima del 45% entre materiales, Figura 1, lo que indica rearreglos de los
atributos cualitativos entre poblaciones y potencial de encontrar combinaciones de
atributos deseados.

112

CUALITATIVO

UPGMA
152007042
152006501
152006005
152006015
152006006
152006003
152007065
152006511
152006014
152007067
152007040
152007036
152007035
152007031
152007017
152007029
152007023
152006512
152007075
152007051
152007038
152007024
152007021
152007016
152007001
152006510
152006509
152006507
152006505
152006503
152006502
152006011
152005018
152005015
152007045
152007030
152007020
152007015
152006018
152006017
152006016
152006010
152006008
152006007
152006001
152005021
152005020
152005019
152005017
152005016
152005014
152005013
152005012
152005011
152005010
152005009
152005008
152005007
152005006
152005002
152006504
152006012
152006009
152006004
152005005
152005004
152005003
152005001

0,4
0,5
0,6
0,7
0,8
0,9
1
Coeficiente General de Similaridad de Gower
Figura 1. Fenograma
de variables cualitativas,
accesiones de mora (Rubus sp)
Figura 1. Dendrograma
cualitativodedelas
la coleccin
pertenecientes al Banco de Germoplasma de la Nacin Colombiana, ubicado en el C.I. La selva
Colombiana de Mora
de Corpoica.

Por su parte, como puede apreciarse en la Figura 2, en la cual se presenta el

fenograma cuantitativo, todos los materiales difirieron el uno del otro, con
agrupamientos a diferente distancia y, con algunos conglomerados de demes con
similaridad importante. Esto seala que stos ltimos comparten, muy
posiblemente, adaptacin a nichos ecolgicos similares, si se considera, al
analizar la funcin productiva Genotipo + Ambiente + Genotipo X Ambiente- que
la evaluacin se llev a cabo en la misma localidad. Al respecto, los atributos
cuantitativos generalmente estn relacionados con valor reproductivo y, por ende,
con adaptacin. Por ello, materiales que forman conglomerados pueden evaluarse
en zonas en la cual se conoce la adaptacin de uno o varios de ellos, para buscar

113

alternativas nuevas de otros que poseen atributos cualitativos deseados por la

cadena produccin-consumo.
CUANTITATIVO

UPGMA
152007067
152006015
152006003
152007042
152006501
152006006
152006005
152006009
152006008
152006007
152006004
152006503
152006511
152007031
152007040
152007051
152007036
152007030
152007017
152006510
152007029
152007024
152007023
152007021
152007020
152007038
152007016
152007001
152006507
152006502
152007065
152007075
152007035
152006512
152007045
152006509
152007015
152006001
152005019
152005011
152006504
152006505
152006017
152006018
152005006
152006014
152005014
152005018
152005017
152006016
152006012
152006010
152005016
152006011
152005010
152005021
152005007
152005015
152005013
152005020
152005002
152005012
152005009
152005005
152005004
152005008
152005003
152005001

0,64

0,7

0,76

0,82

0,88

0,94

Coeficiente General de Similaridad de Gower

Figura 2. Fenograma
variables cuantitativas,
accesiones de mora (Rubus sp)
Figura 2. de
Dendrograma
cuantitativodedelas
la coleccin
pertenecientes al Banco de Germoplasma de la Nacin Colombiana, ubicado en el C.I. La selva
Colombiana de Mora
de Corpoica.

En la Figura 3, se incluye el fenograma cualitativo-cuantitativo, en el cual, al

combinar las caractersticas cualitativas y cuantitativas, se aprecia una dispersin
mayor que la obtenida con cada una de estas categoras, lo cual indica rearreglos
a nivel de los conglomerados y, seala potencial de la coleccin para la bsqueda
de materiales con combinacin de atributos especficos, o para la identificacin de
parentales para programas de hibridacin, para programas de mejoramiento
gentico.

114

CUALITATIVO CUANTITATIVO

UPGMA
152007042
152006501
152006006
152006005
152007067
152006015
152006003
152007065
152006511
152006014
152007040
152007036
152007029
152007023
152007017
152007030
152007020
152007045
152006512
152006503
152007035
152007031
152007075
152006509
152007051
152007021
152007024
152007038
152007016
152007001
152006510
152006505
152006507
152006502
152006009
152006008
152006004
152007015
152006007
152006001
152005015
152006011
152005018
152005011
152005014
152006018
152006017
152005006
152005013
152005017
152006010
152005016
152005010
152005021
152005007
152005019
152006016
152005012
152005009
152005008
152005020
152005002
152005003
152006012
152006504
152005005
152005004
152005001

0,52 0,6

0,68 0,76 0,84 0,92 1

Coeficiente General de Similaridad de Gower

Figura 3. Fenograma
variables cuantitativas
y cualitativas,
de las de
accesiones
de mora (Rubus
Figura de
3. Dendrograma
cualitativo
y cuantitativo
la
sp) pertenecientes
al
Banco
de
Germoplasma
de
la
Nacin
Colombiana,
ubicado
en el C.I. La
coleccin Colombiana de Mora
selva de Corpoica.

2.1.8.4. Conclusiones
El material suministrado al CIAT, por CORPOICA, apoy los objetivos de la
investigacin actual, a nivel de Colombia. Adicionalmente, la retroalimentacin
sobre los resultados obtenidos da valor de opcin y utilizacin al germoplasma en
conservacin, objetivo fundamental de las colecciones de variabilidad gentica.
La evaluacin de clones de lulo, derivados de hibridacin interespecfica,
desarrollados por Corpoica, complementan procesos de evaluacin de ellos y
apoyan su entrega como materiales mejorados.

115

Los procesos de caracterizacin y evaluacin morfolgicas, permitieron conocer la

variabilidad de sta ndole en la metapoblacin de la especie y taxones
relacionados y permiten promover su utilizacin, al igual que determinar
necesidades de bsqueda de variantes, de los atributos estudiados, no presentes
en el conjunto de demes en mantenimiento. En general, ste tiene una variabilidad
aceptable.
2.1.9. Anlisis de caractersticas fsicas, qumicas y organolpticas de
los frutos de lulo y mora y pruebas de aceptacin con la
industria y otros mercados (fresco, agroindustria y
exportacin)12.
Objetivo del proyecto (4): Evaluar el comportamiento, calidad y rentabilidad de
los clones lite seleccionados, bajo diferentes sistemas de produccin dirigida a
diferentes mercados.
2.1.9.1. Marco Referencial
A travs de los estudios de evaluacin de variables qumicas y organolpticas, se
pudo reconfirmar el hecho de que la mora andina Rubus glaucus, es cida, pese a
lo cual tiene aceptacin en la zona. Tambin se encontr variabilidad para los
grados Brix, indicador de azcares y por ende de sabor dulce, lo que permiti la
identificacin de accesiones con grados Brix superiores a 7, lmite fijado por las
procesadoras para la compra de mora, como materia prima. Los valores fluctuaron
a lo largo del tiempo de evaluacin, con estabilidad diferente a nivel de los demes
estudiados. En cuanto a acidez medida como pH, esta no vari mucho entre
materiales, con fluctuaciones mayores en algunos de ellos, a lo largo del tiempo
de estudio. La acidez medida como cido mlico, exhibi diferencias entre
materiales y a lo largo del ao; se har un anlisis de factores de clima con mayor
efecto en sta variable, conjuntamente con el planteado para los grados Brix. Para
los azcares totales y reductores, al igual que para los fenoles dimricos,
oligomricos y polimricos, se encontr variabilidad. Lo anterior, debidamente
interpretado con expertos en alimentos y antioxidantes, podra potenciar el uso de
la coleccin de mora, de la Nacin Colombiana.
La mora (Rubus glaucus), pertenece a un conjunto de especies que se encuentran
en la zona templada e igualmente en los Andes. Esta tiene potencial amplio en el
mercado nacional y en el internacional (Tafur, et al., 2006). Sin embargo, entre los
limitantes de la especie, a nivel nacional, se ha incluido el bajo contenido de
grados Brix (Franco et al., 2002), aspecto que ha impedido la competitividad de la
fruta colombiana para procesos de exportacin.
En la coleccin colombiana de la especie, a cargo de Corpoica, se dispone de
informacin acumulada, en diversos perodos de tiempo, del contenido de grados
Brix, registro que se ha tomado sistemticamente, en las accesiones, luego de que
12

Lobo Mario-CORPOICA-Cooombia

116

stas entran en produccin. Esto se hace, luego de que el material comienza la

produccin de bayas, despus de su establecimiento, a travs de acciones
peridicas de colecta de nuevos materiales. Zamorano et al (2007), reportaron, en
poblaciones de la fruta obtenidas en los departamentos del Cauca, Nario y el
Valle del Cauca, que algunos de ellas eran sobresalientes por el peso de las
bayas, el contenido de grados Brix y una menor densidad de espinas. Esto indica
las posibilidades de encontrar demes con un mayor contenido de azcares,
evaluado por los grados Brix. En las accesiones de la coleccin se han detectado
valores que superan los aceptables indicados por las procesadoras de la fruta en
el pas.
2.1.9.2. Metodologa
Con base en los materiales de mora, sembrados en el C.I La Selva,
pertenecientes al Banco de Germoplasma de la Nacin Colombiana, se llev a
cabo un proceso de determinacin en 71 accesiones del contenido de grados Brix
y la acidez, medida como pH. Las determinaciones se llevaron a cabo en frutos
con un estado de desarrollo 4, de acuerdo a la tabla colorimtrica desarrollada por
el INCONTEC, para dicha fruta. Los grados Brix se leyeron en un refractmetro
de mesa (Milton Roy, Serie 0714051) y el pH de los jugos con un potencimetro
Metrohn (Tipo 1.744.0010).
Se registr la acidez titulable, mediante titulacin potenciomtrica, a 68 demes con
el instrumento indicado en el acpite anterior y, el empleo de fenoftaleina
alcohlica, como indicador. Tambin se determin el contenido de azcares
reductores y totales por los mtodos DNS e hidrlisis con cido sulfrico
respectivamente; compuestos fenlicos por la metodologa de Folin Ciocalteu, a
travs de espectofotometra, con un equipo adquirido en el proyecto (Genesys 10
uv).
Complementariamente, se llevaron a cabo pruebas de palatabilidad de jugos, con
55 accesiones y de jalea con 3 poblaciones, a travs de pneles de degustacin
con probadores no entrenados.
2.1.9.3. Resultados y Discusin
En la Tabla 1, se incluye la informacin del promedio de grados Brix, obtenido en
61 accesiones, entre el 5 de diciembre de 2007 y el 25 de marzo de 2009 (475
das). Como puede apreciarse hay un conjunto de materiales que superan en
promedio, el valor mnimo requerido por las procesadoras del pas, 7 grados Brix,
con 5 accesiones (ILS 1961, ILS 1863, ILS 1884, ILS 2280, ILS 2281), con valores
iguales o superiores a 8. Como puede verse hay fluctuaciones en la variable, en
cada uno de los materiales, con obtencin de valores mximos en algunas
accesiones de 10 y mnimos de 4,4 grados Brix, y desviaciones estndar
variables, con base en las fluctuaciones obtenidas en las lecturas en cada una de
las poblaciones estudiadas.

117

La informacin registrada a lo largo del tiempo indica, de acuerdo con el

coeficiente de variacin de los valores promedios, dispersin amplia y por ende
interaccin con el ambiente. Por ello, se utilizar la informacin obtenida en cada
cosecha, para elucidar la los factores ambientales con mayor efecto en la
expresin del atributo, conjuntamente con la seleccin de aquellos con mayor
estabilidad y valores ms altos de la variable.
Tabla 1. Grados Brix obtenidos con 71 accesiones de mora, registrados en estado de madurez 4
a 5 de acuerdo con la Norma INCONTEC, desde el 5 de diciembre de 2007 hasta el 25 de marzo
de 2009. C.I. La Selva, Rionegro, Antioquia, Colombia.
GENOTIPO

PROMEDIO

VALOR VALOR DESVIACIN

MNIMO MXIMO ESTNDAR

COEFICIENTE
DE VARIACIN

ILS 550

7.16

5.00

9.00

1.02

14.21

ILS 1791

7.87

6.00

10.00

1.01

12.82

ILS 1794

7.00

4.40

9.00

1.16

16.52

ILS 1817

6.11

4.80

7.60

0.82

13.50

ILS 1857

8.11

4.80

9.40

0.84

10.42

ILS 1858

7.87

6.00

9.60

0.89

11.26

ILS 1861
ILS 1863

8.00
8.19

6.00
5.60

9.80
9.60

0.69
0.78

8.64
9.48

ILS 1865

7.00

6.60

7.40

0.32

4.52

ILS 1884

8.15

6.60

9.20

0.60

7.39

ILS 1949

7.26

6.00

8.60

0.84

11.55

ILS 1953

7.15

6.40

8.00

0.49

6.87

ILS 1957
ILS 1981

7.50
7.41

6.00
6.00

9.00
9.00

0.84
1.02

11.21
13.71

ILS 1990

7.49

5.80

8.80

0.77

10.25

ILS 2053

7.52

5.00

9.40

0.83

10.98

ILS 2063

7.60

6.40

8.60

0.60

7.83

ILS 2070

8.40

8.20

8.60

0.28

3.37

ILS 2137

7.48

6.00

9.20

0.91

12.19

ILS 2147

7.39

6.00

9.20

1.00

13.50

ILS 2157

7.79

6.00

9.00

0.91

11.63

ILS 2187
ILS 2268

7.31
6.96

5.00
5.40

9.40
8.20

0.92
0.67

12.52
9.59

ILS 2269

7.98

6.40

9.40

0.70

8.79

ILS 2270

7.84

5.60

10.00

0.94

12.00

ILS 2271

7.71

5.80

9.20

0.73

9.41

ILS 2272

7.34

5.60

9.40

0.84

11.48

ILS 2273
ILS 2274

6.64
7.49

5.00
5.80

8.00
9.40

0.82
0.81

12.31
10.84

ILS 2275

7.56

6.00

9.60

0.82

10.87

ILS 2276

6.67

5.20

8.00

0.68

10.24

ILS 2277

6.70

5.00

8.20

0.67

10.00

ILS 2278

7.09

5.80

8.60

0.73

10.26

ILS 2279

7.44

5.80

9.00

0.84

11.29

118
ILS 2280

8.41

5.00

9.60

1.11

13.18

ILS 2281

8.10

6.00

10.00

0.91

11.26

ILS 2282

6.80

4.80

8.20

0.64

9.35

ILS 2283

7.92

6.20

9.40

0.79

10.00

ILS 2284

7.05

4.40

9.00

0.91

12.85

ILS 2285
ILS 2286

7.12
7.58

5.40
6.00

9.00
9.40

0.76
0.75

10.71
9.87

ILS 2287

7.22

5.00

9.40

0.86

11.97

ILS 2288

6.80

5.40

8.40

0.78

11.54

ILS 2289

6.71

5.00

8.00

0.95

14.17

ILS 2324 C

6.54

4.40

8.80

0.78

11.95

ILS 2324 S
ILS 2353

6.69
7.76

5.00
6.40

8.20
8.80

0.76
0.77

11.42
9.89

ILS 2360

6.36

4.60

8.40

0.68

10.73

ILS 2361
ILS 2362

7.08
6.15

5.00
4.40

9.20
8.00

0.92
0.76

12.95
12.40

ILS 2364

6.44

5.20

7.40

0.55

8.56

ILS 2365

6.64

5.00

8.60

0.70

10.55

ILS 2366

7.73

5.00

9.40

0.95

12.26

ILS 2367

8.00

6.20

9.40

0.84

10.49

ILS 2368
ILS 2369

7.29
7.25

5.80
6.00

9.80
8.20

0.93
0.80

12.75
10.98

ILS 2370

7.13

4.20

8.40

0.82

11.56

ILS 2372

8.20

8.20

8.20

N-A

N-A

ILS 2373

7.24

5.40

8.60

0.81

11.17

ILS 2375

7.95

5.40

10.80

1.18

14.90

ILS 2376
ILS 2377

6.73
7.33

5.00
6.20

8.40
8.60

0.83
0.63

12.28
8.63

ILS 2429

7.55

6.80

8.60

0.62

8.16

ILS 2442
ILS 2443

7.02
7.50

5.20
5.40

9.00
9.00

0.95
0.88

13.55
11.77

ILS 2445

6.55

5.40

7.40

0.93

14.19

ILS 2447

7.06

6.00

8.00

0.66

9.35

ILS 3399

7.03

5.40

9.20

1.00

14.21

ILS 3400

7.38

5.00

9.20

0.85

11.51

ILS 3401
ILS 3402

7.31
7.18

4.80
5.00

9.00
9.20

1.00
0.94

13.74
13.12

PROMEDIO GENERAL

7.32

4.40

10.80

Los valores de pH de las 71 accesiones anteriores, se presentan en la Tabla 2. En

esta se puede apreciar que la variable es poco afectada por el ambiente y que las
diferencias entre accesiones son pequeas, con alguna respuesta diferencial al
perodo de cosecha, entre accesiones.

119

Tabla 2. Valores de pH, obtenidos con 71 accesiones de la Coleccin de la Nacin Colombiana de

mora, registrados en estado de madurez 4 a 5, de acuerdo con la Norma INCONTEC, desde el 5
diciembre de 2007 hasta el 25 de marzo de 2009, en el C.I. La Selva, Rionegro, Antioquia,
Colombia.

GENOTIPO

PROMEDIO

VALOR VALOR DESVIACIN

MNIMO MXIMO ESTNDAR

COEFICIENTE
DE
VARIACIN

ILS 550

2.52

2.29

2.76

0.15

6.07

ILS 1791
ILS 1794

2.52
2.51

2.27
2.26

2.81
2.73

0.11
0.15

4.29
5.88

ILS 1817

2.61

2.32

2.83

0.12

4.42

ILS 1857

2.43

2.26

2.62

0.09

3.79

ILS 1858

2.43

2.18

2.71

0.11

4.51

ILS 1861

2.48

2.15

2.73

0.12

4.64

ILS 1863
ILS 1865

2.49
2.67

2.33
2.36

2.65
3.11

0.08
0.31

3.07
11.66

ILS 1884

2.62

2.26

2.79

0.14

5.22

ILS 1949

2.45

2.34

2.57

0.08

3.30

ILS 1953

2.50

2.20

2.77

0.20

7.97

ILS 1957

2.55

2.34

2.79

0.12

4.63

ILS 1981

2.49

2.34

2.61

0.08

3.39

ILS 1990

2.48

2.28

2.72

0.13

5.33

ILS 2053

2.50

2.34

2.69

0.11

4.29

ILS 2063
ILS 2070

2.49
2.53

2.21
2.41

2.75
2.65

0.17
0.17

6.88
6.71

ILS 2137

2.49

2.26

2.71

0.13

5.35

ILS 2147

2.49

2.18

2.75

0.15

5.97

ILS 2157

2.48

2.28

2.65

0.11

4.42

ILS 2187

2.77

2.43

3.23

0.16

5.90

ILS 2268
ILS 2269

2.46
2.51

2.26
2.24

2.79
2.71

0.11
0.10

4.37
4.04

ILS 2270

2.50

2.25

2.81

0.12

4.86

ILS 2271

2.47

2.23

2.68

0.10

4.20

ILS 2272

2.52

2.26

2.77

0.11

4.37

ILS 2273

2.42

2.23

2.68

0.11

4.52

ILS 2274

2.51

2.17

2.83

0.14

5.41

ILS 2275

2.52

2.28

2.81

0.12

4.82

ILS 2276

2.40

2.15

2.65

0.10

4.32

ILS 2277
ILS 2278

2.56
2.50

2.32
2.27

2.77
2.69

0.11
0.10

4.31
4.13

ILS 2279

2.49

2.20

2.74

0.13

5.23

ILS 2280

2.50

2.36

2.73

0.11

4.23

ILS 2281

2.45

2.18

2.74

0.15

6.03

ILS 2282

2.42

2.25

2.70

0.11

4.61

ILS 2283

2.50

2.27

2.76

0.10

4.16

120
ILS 2284

2.44

2.21

2.74

0.11

4.40

ILS 2285

2.47

2.29

2.73

0.11

4.26

ILS 2286

2.48

2.21

2.71

0.10

4.16

ILS 2287

2.47

2.23

2.81

0.13

5.23

ILS 2288

2.49

2.28

2.72

0.10

4.04

ILS 2289
ILS 2324 C

2.98
2.54

2.60
2.36

3.26
2.76

0.25
0.11

8.34
4.19

ILS 2324 S

2.62

2.46

2.81

0.11

4.10

ILS 2353

2.58

2.39

2.93

0.18

6.78

ILS 2360

2.36

2.17

2.64

0.10

4.06

ILS 2361

2.46

2.32

2.78

0.12

4.76

ILS 2362
ILS 2364

2.40
2.36

2.20
2.12

2.71
2.59

0.12
0.09

5.17
3.91

ILS 2365

2.46

2.27

2.84

0.12

4.87

ILS 2366
ILS 2367

2.46
2.51

2.22
2.28

2.65
2.72

0.11
0.11

4.51
4.37

ILS 2368

2.46

2.19

2.77

0.12

4.79

ILS 2369

3.40

2.43

3.88

0.37

10.96

ILS 2370

2.55

2.37

2.82

0.11

4.28

ILS 2372

2.41

2.41

2.41

ILS 2373
ILS 2375

2.59
2.49

2.37
2.30

2.86
2.63

0.11
0.10

4.08
4.14

ILS 2376

2.45

2.21

2.81

0.14

5.62

ILS 2377

2.36

2.13

2.74

0.14

6.06

ILS 2429

2.44

2.22

2.68

0.11

4.60

ILS 2442

2.48

2.19

2.81

0.17

6.85

ILS 2443
ILS 2445

2.41
2.49

2.17
2.35

2.60
2.63

0.12
0.11

4.85
4.60

ILS 2447

2.55

2.34

2.77

0.10

4.09

ILS 3399
ILS 3400

2.46
2.58

2.24
2.17

2.72
2.91

0.11
0.14

4.49
5.26

ILS 3401

2.53

2.23

5.62

0.54

21.32

ILS 3402

2.41

2.17

2.67

0.12

4.98

PROMEDIO GENERAL

2.51

2.12

5.62

* Una lectura
En la Tabla 3, se incluye la acidez titulable, expresada como cido mlico. Como
puede apreciarse hay variaciones en el promedio obtenido en el perodo de tiempo
de registro de la informacin, cosechas a lo largo de 475 das, lo cual es vlido
tambin para los mximos y mnimos, con materiales con diferentes grados de
estabilidad en los valores, lo cual se refleja en la desviacin estndar y el
coeficiente de variacin de los valores promedios.
Al igual que en el caso de los grados Brix, se obtendrn modelos que permitan
inferir cul o cules de las variables climticas tienen mayor influencia sobre la
expresin de las acidez de las bayas, medida como cido mlico, lo que se

121

complementa, con la seleccin de materiales ms estables y con los valores

deseados para los dos atributos.
Tabla 3. Porcentaje de cido mlico, registrado en 68 accesiones de la Coleccin de la Nacin
Colombiana de mora, datos registrados en estado de madurez 4 de la norma INCONTEC, desde
el 6 de enero de 2009 hasta el 25 de marzo de 2009, en el C.I. La Selva, Rionegro, Antioquia,
Colombia.
VALOR VALOR
DESVIACIN COEFICIENTE
GENOTIPO
PROMEDIO
MNIMO MXIMO ESTNDAR
DE VARIACIN
ILS 550

3.82

2.95

4.56

0.67

17.54

ILS 1791

3.71

3.22

4.09

0.30

8.06

ILS 1794

3.69

3.15

4.42

0.48

13.14

ILS 1817

2.91

2.35

3.28

0.35

12.04

ILS 1857

4.22

3.15

5.03

0.71

16.76

ILS 1858

4.08

1.27

5.03

1.27

31.26

ILS 1861
ILS 1884

3.76
4.05

3.35
3.22

4.42
4.89

0.39
1.18

10.41
29.22

ILS 1949

4.42

3.48

5.49

1.01

22.88

ILS 1953

3.95

2.88

4.96

0.97

24.48

ILS 1957

4.06

3.35

4.42

0.41

10.09

ILS 1981

4.56

4.15

5.09

0.40

8.87

ILS 1990
ILS 2053

3.76
3.80

3.22
3.22

4.42
4.89

0.46
0.65

12.10
17.09

ILS 2063

3.71

2.95

4.02

0.38

10.16

ILS 2070

4.12

4.09

4.15

0.05

1.15

ILS 2137

4.41

3.48

5.56

0.83

18.87

ILS 2147

4.01

3.28

4.62

0.55

13.82

ILS 2157

4.01

3.89

4.09

0.07

1.83

ILS 2187

2.07

1.54

2.48

0.42

20.10

ILS 2268

3.30

2.61

4.42

0.53

16.00

ILS 2269
ILS 2270

3.84
3.90

3.55
3.05

4.42
4.62

0.35
0.47

9.04
12.05

ILS 2271

4.56

3.69

5.96

0.72

15.80

ILS 2272

3.70

3.15

4.49

0.48

12.95

ILS 2273

3.66

3.15

4.49

0.41

11.16

ILS 2274

3.76

3.15

4.42

0.53

14.12

ILS 2275
ILS 2276

4.03
4.01

3.48
2.88

4.82
5.09

0.50
0.67

12.32
16.81

ILS 2277

3.09

2.75

3.69

0.31

9.93

ILS 2278

3.97

2.68

5.70

0.79

19.97

ILS 2279

3.72

2.48

5.03

0.83

22.44

ILS 2280

3.79

3.69

3.89

0.14

3.75

ILS 2281

4.47

3.28

7.30

1.35

30.10

ILS 2282

4.08

3.62

5.06

0.42

10.36

ILS 2283

3.56

2.01

4.76

0.82

23.06

ILS 2284
ILS 2285

3.63
3.81

2.81
3.35

4.62
4.49

0.57
0.46

15.72
12.03

122
ILS 2286

3.72

3.02

4.36

0.55

14.69

ILS 2287

4.31

3.42

5.83

1.01

23.47

ILS 2288

3.38

2.95

3.75

0.25

7.27

ILS 2289

1.89

1.61

2.28

0.28

14.71

ILS 2324 S

2.81

2.55

3.08

0.27

9.52

ILS 2324 C
ILS 2353

3.12
2.22

2.21
1.68

3.95
3.08

0.57
0.49

18.20
21.89

ILS 2360

3.92

2.95

4.49

0.57

14.62

ILS 2361

4.10

3.62

4.62

0.34

8.30

ILS 2362

3.63

2.41

4.22

0.54

14.86

ILS 2364

4.13

3.35

5.16

0.58

14.09

ILS 2365
ILS 2366

3.58
3.91

2.48
3.48

4.76
4.29

0.76
0.32

21.32
8.27

ILS 2367

4.00

3.42

5.23

0.64

15.94

ILS 2368
ILS 2369

3.92
1.64

2.81
1.14

5.83
3.62

0.89
0.82

22.59
49.97

ILS 2370

2.68

2.28

3.08

0.29

10.75

ILS 2373

2.97

2.21

4.36

0.68

22.77

ILS 2375

3.75

3.15

4.29

0.57

15.26

ILS 2376

4.13

2.68

6.83

1.42

34.46

ILS 2377
ILS 2429

2.55
7.24

2.14
7.24

2.85
7.24

0.26
*

10.01
*

ILS 2442

3.66

2.95

4.09

0.49

13.48

ILS 2443

4.38

3.75

7.04

0.97

22.15

ILS 2445

3.42

2.61

4.15

0.72

21.18

ILS 2447

3.51

2.75

5.16

1.01

28.86

ILS 3399
ILS 3400

3.10
3.01

2.01
2.58

3.89
3.48

0.98
0.26

31.45
8.81

ILS 3401

3.55

3.15

3.95

0.40

11.32

ILS 3402

3.82

3.82

3.82

PROMEDIO GENERAL

3.70

1.14

7.30

* Una lectura
En la Tabla 4, se presentan los valores obtenidos con 39 accesiones de la
coleccin para azcares reductores y totales y; fenoles de las formas dimrica,
oligomrica y polimrica, realizados una cosecha. Como puede apreciarse, en una
primera lectura se detectaron diferencias significativas, entre las poblaciones
estudiadas, para todas las variables.
Los resultados obtenidos se discutirn con expertos en alimentos y
procesamiento, al igual que en tema de antioxidantes, relacionados, estos ltimos,
con el tema de los fenoles.

123
Tabla 4. Contenido de azcares y fenoles, en 39 accesiones de mora, Rubus sp, pertenecientes al
Banco de Germoplasma de la Nacin Colombiana, ubicado en el C.I La Selva de Corpoica.
Accesin*

ILS
ILS
ILS
ILS
ILS
ILS
ILS

2281
2271
2278
2278
2270
2282
2288

3,427 c
2,951 d
2,319 ghij
1,518 mnopq
5.047 a
1,708 klmno
1,043 st

4,030 c
3,950 cd
3,750 efg
3,280 jk
5,475 a
3,805 def
2,585 pq

Fenoles
Forma
Dimrica
%
0,092 sr
0,122 jk
0,136 h
0,111n
0,189 abc
0,188 bc
0113 n

ILS
ILS
ILS
ILS
ILS

2286
2273
2287
2269
2275

2,781 def
2,027 ijk
1,739 klmn
2,964 d
0,922 tuv

3,505 hi
3,300 jk
3,065 l
3,735 fg
2,640 opq

0,087 ut
0,194 a
0,185 c
0,089 t
0,083 v

ILS 2277
ILS
ILS
ILS
ILS
ILS
ILS
ILS
ILS
ILS
ILS
ILS
ILS
ILS
ILS
ILS
ILS
ILS
ILS
ILS
ILS
ILS
ILS
ILS
ILS
ILS

1817
2360
2362
2364
2187
3399
2370
2377
2366
2361
2365
3400
1814
1953
1957
1990
2053
2137
2147
2157
2443
2447
2343
550
2324

ILS 2289

Azcares
reductores
%

Azcares
totales
%

Fenoles Forma
oligomrica
%

Fenoles Forma
polimrica
%

0,117 pqr
0,116 qr
0,131 jk
0,123 mn
0,144 ef
0,150 d
0,108 t

0,076 v
0,098 o
0,107 m
0,080 u
0,130 h
0,123 i
0,105 n

0,118 opqr
0,132 j
0,148 ed
0,115 qr
0,12 mno

0,090 a
0,113 l
0,134 g
0,86 sr
0,092 q

1,084 rst

2,280 r

0,122 jk

0,133 ij

0,86 sr

1,966 jkl
1,472 nopq
1,309 qrs
0,975 tu
2,387 fghi
1,418 opq
2,614 defg
2,964 d
2,212 hij
1,433 nopq
0,712 v
2,396 fghi
1,253 qrs
2,162 hij
1,320 pqr
2,809 de
2,419 efgh
0,768 uv
1,805 klm
1,253 qrs
1,623 lmnop
2,167 hij
3.922 b
3,631 bc
1,691 klmno

3,295 jk
2,800 mn
2,565 q
2,580 q
4,495 b
2,725 nop
3,660 fgh
4,415 b
3,610 gh
3,250 k
1,995 s
3,415 ij
3,900 cde
3,340 jk
2,735 no
3,560 hi
3,735 fg
1,720 t
2,845 mn
3,060 l
2,765 no
3,725 fg
4,365 b
4,340 b
2,925 lm

0,093 sr
0,085 uv
0,121 jkl
0114 mn
0,191ab
0,136 h
0,143 f
0,097 pq
0,077 w
0,095 qr
0,123 ijk
0,150 e
0,141 fg
0,137 gh
0,107 o
0,111 n
0,172 d
0.090 st
0,126 i
0,118 lm
0,100 p
0113 n
0,085 uv
0,125 ij
0,126 i

0,111 st
0,095 v
0,117 opqr
0,127 jk
0,197 a
0,109 t
0,169 b
0,082 w
0,101 u
0,116 qr
0,127 kl
0,139 gh
0,117 pqr
0,095 v
0,125 lm
0,114 rs
0,142 fg
0,095 v
0,108 t
0,102 u
0,119 nopq
0,121 nop
0,103 u
0,136 hi
0.109 t

0,106 mn
0,082 t
0,096 p
0,138 f
0,197 a
0,136 f
0,150 e
0,116
0,087 r
0,076 v
0,124 i
0,161 c
0,154 d
0,068 w
0,108 m
0,085 s
0,169 b
0,100 o
0,084 s
0,115 kl
0,098 o
0,115 k
0,091 q
0,118 j
0,129 h

0,923 tuv

3,810 def

0,120 kl

0,162 c

0,134 g

*Entre promedios marcados con diferente letra en cada columna, hay diferencias altamente
significativas (prueba de Student con 95% confiabilidad).

En la Tabla 5, se aprecian los valores modales de la calificacin de apariencia,

aroma, sabor, dulce y acidez, obtenidos con jugos de 51 accesiones de la
coleccin de mora. En general hubo aceptacin por los materiales, con algunas
excepciones; la evaluacin se realiz con repeticiones en el tiempo. En la Tabla 7,
se describen los resultados obtenidos con una prueba de degustacin con 3
materiales. Los resultados obtenidos con la evaluacin de los jugos, realizados en

124

forma repetida con los probadores, son un indicativo de la aceptacin de la fruta

para la finalidad indicada y sirven, como factor adicional, para la seleccin de los
materiales de la coleccin, conjuntamente con otros atributos cualitativos y
cuantitativos deseables. Lo obtenido con la prueba de palatabilidad de la jalea de
mora, requiere completarse con el resto de acciones, con evaluaciones repetidas
en el tiempo. Esto no ha continuado por un soqueo sanitario hecho con las plantas
de la coleccin, las cuales han rebrotado y se encuentran en fase vegetativa
algunas y otras en inicio de la etapa reproductiva.
Tabla 5. Calificativos modales obtenidos en pruebas de palatabilidad de jugo de mora, de 51
genotipos de mora evaluados, durante los aos 2008 y 2009, en el C.I La Selva, Rionegro,
Antioquia.
GENOTIPO

DULCE

ACIDEZ

Le gust mucho

APARIENCIA

Le gust
moderadamente

Le gust mucho

Poco dulce

Poco cido

Le desagrad
mucho

No le gust ni le
desagrad

Le desagrad
ligeramente

Poco dulce

Poco cido

Le gust mucho

Le gust mucho

Le gust mucho

Poco dulce

Poco cido

Le gust mucho

Le gust mucho

Le gust mucho

Medianamente Medianamente
dulce
cido

Le gust mucho

Le gust
moderadamente

Le gust mucho

Poco dulce

Le desagrad
ligeramente

No le gust ni le
desagrad

Le gust
moderadamente

Medianamente Medianamente
dulce
cido

Le gust mucho

Le gust
ligeramente

Le gust
ligeramente

Dulce

Poco cido

Le gust mucho

Le gust
ligeramente

Le gust
moderadamente

Poco dulce

Poco cido

Le gust mucho

Le gust
moderadamente

Le gust mucho

Dulce

Poco cido

Le gust
moderadamente

Le gust mucho

Le gust mucho

Dulce

Poco cido

Le gust mucho

Le gust
moderadamente

Le gust mucho

Poco dulce

Medianamente
cido

Le gust mucho

Le gust mucho

Le gust mucho

Medianamente Poco cido

dulce

Le gust
moderadamente

Le gust mucho

Le gust mucho

Medianamente Poco cido

dulce

Le gust mucho

Le gust mucho

Le gust mucho

Medianamente Medianamente
dulce
cido

ILS 2271

Le gust mucho

Le gust mucho

Le gust mucho

Dulce

Le gust mucho

Le gust mucho

ILS 2272

Le gust
moderadamente

Medianamente Medianamente
dulce
cido

Le gust
moderadamente

Le gust mucho

Poco dulce

Poco cido

ILS 2273

Le gust
moderadamente
No le gust ni le
desagrad

Le gust mucho

Le gust
moderadamente

Dulce

ILS 2274

Medianamente
cido

Le gust mucho

No le gust ni le
desagrad

Le gust mucho

Dulce

Poco cido

ILS 1791
ILS 1817
ILS 1857

AROMA

SABOR

ILS 1858
ILS 1861
ILS 1863
ILS 1981
ILS 2053
ILS 2063
ILS 2147
ILS 2187
ILS 2268
ILS 2269
ILS 2270

ILS 2275

cido

Poco cido

125
ILS 2276

Le gust mucho

Le gust mucho

Le gust mucho

Dulce

Poco cido

ILS 2276

Le gust mucho

Le gust mucho

Le gust mucho

Poco dulce

Poco cido

Le gust mucho

Le gust
ligeramente

Le gust mucho

Dulce

Poco cido

Le gust mucho

Le gust
moderadamente

Le gust mucho

Medianamente Medianamente
dulce
cido

ILS 2279

Gust mucho

Le gust mucho

Le gust mucho

Dulce

Poco cido

ILS 2280

Le gust mucho
Le gust mucho

Le gust mucho
Le gust mucho

Poco dulce
Poco dulce

ILS 2281

Le gust mucho
Le gust
moderadamente

cido
Medianamente
cido

ILS 2282

Le gust mucho

Le gust mucho

Le gust mucho

Dulce

Poco cido

Le desagrad
mucho

No le gust ni le
desagrad

Le gust mucho

ILS 2283

Medianamente Medianamente
dulce
cido

Le gust mucho

Le gust mucho

Le gust mucho

Poco dulce

Poco cido

Le gust mucho

Le gust mucho

Le gust mucho

Dulce

Poco cido

Le gust mucho

Le gust
moderadamente

Le gust mucho

Poco dulce

Poco cido

Le gust
moderadamente

Le gust mucho

Le gust mucho

Medianamente Poco cido

dulce

Le gust mucho

Le gust mucho

Le gust
moderadamente

Poco dulce

ILS 2277
ILS 2278

ILS 2284
ILS 2285
ILS 2286
ILS 2287
ILS 2288

Poco cido

Le gust mucho

Le gust mucho

Le gust mucho

ILS 2360
ILS 2361

Medianamente Poco cido

dulce

Le gust mucho

Le gust mucho

Le gust mucho

Dulce

Poco cido

Le gust
moderadamente

Le gust
moderadamente

Le gust mucho

Poco dulce

ILS 2362

Medianamente
cido

Le gust mucho

Le gust mucho

Le gust mucho

Le gust mucho
Le gust mucho

Le gust
ligeramente
Le gust mucho

Le gust
moderadamente
Le gust mucho

Medianamente Medianamente
dulce
cido
Dulce
Poco cido
Dulce

Poco cido

Le gust mucho

Le gust mucho

Le gust mucho

Poco dulce

Poco cido

Le gust mucho

Le gust mucho

Le gust mucho

Poco dulce

No le gust ni le
desagrad

Le gust mucho

Dulce

ILS 2369

Le desagrad
extremadamente

Medianamente
cido
Poco cido

ILS 2370

Le gust mucho

Le gust mucho

Le gust mucho

Dulce

Poco cido

Le gust mucho

Le gust mucho

Dulce

Poco cido

ILS 2373

Le gust
moderadamente

No le gust ni le
desagrad

Le gust
moderadamente

Poco dulce

ILS 2376

No le gust ni le
desagrad

Medianamente
cido

Le gust mucho

No le gust ni le
desagrad

Le gust
ligeramente

Dulce

Poco cido

Le gust mucho

Le gust
moderadamente

Le gust mucho

Dulce

Poco cido

Le gust mucho

Le gust mucho

Le gust mucho

Poco dulce

Poco cido

Le gust
moderadamente
Le desagrad
ligeramente
Le gust mucho

Le gust mucho

Le gust mucho

Dulce

Poco cido

Le desagrad
ligeramente
Le gust mucho

Le gust mucho

Dulce

Poco cido

Le gust mucho

Dulce

Poco cido

ILS 2364
ILS 2365
ILS 2366
ILS 2367
ILS 2368

ILS 2377
ILS 2447
ILS 3399
ILS 3400
ILS 3401
ILS 3402

126
Tabla 6. Modas obtenidas en una prueba de palatabilidad de jalea de mora. C.I La Selva,
Rionegro, Antioquia.
GENOTIPO

CONSISTENCIA AROMA

SABOR

DULCE

ACIDEZ

Le gust
mucho

Poco dulce

No cida

No le gust ni le desagrad Le gust

mucho

Poco dulce

No cida

Le gust mucho

Poco dulce

No cida

Le gust mucho

ILS 2271
ILS 2278
ILS 2287

Blanda
Slida
Slida

Le gust
mucho

2.1.9.4. Conclusiones
En la coleccin de mora hay materiales con un contenido de grados Brix superior a
7, lmite inferior fijado, por las procesadoras, para la compra de la fruta con destino
a elaboracin de productos.
Los grados Brix varan, en forma diferencial, en cada material a lo largo del
tiempo, esto permitir realizar la seleccin de materiales con mayor estabilidad.
El resultado anterior indica un efecto de factores de clima sobre la variable, por
ello se debe elucidar cul o cules de stos inciden en la baja de los grados Brix,
para disear prcticas que puedan mitigar el efecto.
La acidez medida como pH, no exhibi diferencias considerables entre materiales,
pero si en el mismo material a lo largo del tiempo, con diferencias en la fluctuacin
entre las accesiones estudiadas.
La acidez, medida como cido mlico, exhibi un patrn similar entre materiales y
a lo largo de las evaluaciones, por lo cual es conveniente seleccionar materiales
con la menor acidez y determinar el efecto de componentes del clima en las
oscilaciones en la expresin del atributo a nivel de los materiales.
Se detect tambin polimorfismo entre poblaciones para el contenido de azcares
totales y reductores y para las formas dimrica, oligomrica y polimrica de
fenoles. Esto debe analizarse con expertos en nutricin y antioxidantes, para
conocer el potencial de los demes estudiados, en este sentido.
2.1.10. Anlisis de la diversidad genetica de la mora cultivada (Rubus
glaucus benth) y especies emparentadas en zonas productivas
del ecuador mediante marcadores moleculares 13
Objetivo del Proyecto (2): Caracterizar las colecciones de germoplasma, por
variabilidad gentica y resistencia a plagas y enfermedades de mayor importancia
13

Garrido P1., Vsquez W2. y Morillo E1

INIAP. Departamento Nacional de Biotecnologa. EESC, Quito, Pichincha, Ecuador. Mail: biotec@rdyec.com
2
INIAP. Programa Nacional de Fruticultura. Granja Experimental. Tumbaco, Pichincha Ecuador. w ilovasquez@yahoo.com:
1

127

2.1.10.1. Marco Referencial

A pesar de la importancia local y regional de la mora de castilla (Rubus glaucus),
estudios relacionados al conocimiento de la base gentica del cultivo en el
Ecuador es limitada. Este estudio analiz la diversidad gentica de 108
accesiones de mora cultivada y especies emparentadas, provenientes de las
provincias de Cotopaxi, Tungurahua, Bolvar, y Loja, incluyendo muestras de
accesiones colombianas conservadas por el INIAP. Se utilizaron 107 primers
RAPDs y 72 primers ISSRs para realizar un sondeo de la diversidad e identificar
marcadores tiles para la identificacion de polimorfismos gentico. Sin embargo
los resultados obtenidos con estos marcadores sugieren una reducida base
gentica de R. glaucus, identificndose solamente un primer ISSR polimrfico. El
empleo de marcadores AFLPs, mediante el mtodo M13-tailing en un
secuenciador LI-COR 4300S, permiti caracterizar de manera ms fina la
diversidad de R. glaucus. Inicialmente se probaron 32 combinaciones AFLPs, de
las cuales se seleccionaron cinco combinaciones polimrficas.
Del total de muestras analizadas, (21 de Rubus glaucus, 1 variedad brazos, 1
variedad Olallie y 6 especies silvestres emparentadas) los AFLPs corroboran la
reducida base gentica de R. glaucus, detectndose sin embargo, la existencia de
una estructura gentica entre el material cultivado con la conformacin robusta de
dos grupos de accesiones, uno de los cuales est formado nicamente por
materiales ecuatorianos, mientras que el segundo, incluye a tres accesiones
colombianas y a las variedades sin espinas recientemente promocionadas. Los
anlisis estadsticos realizados (bootstrap, PCO y AMOVA) corroboran la robustez
de esta diferenciacin gentica. Este resultado es importante en materia de
mejoramiento gentico de la mora. A corto plazo ser importante disponer de la
informacin morfoagronmica de los materiales y de realizar anlisis moleculares
complementarios que permitan determinar el origen de esta divergencia gentica.
2.1.10.2. Metodologa
Se colectaron 108 accesiones muestreadas en las provincias de Pichincha,
Cotopaxi, Tungurahua, Bolvar y Loja, de las cuales 78 se encontraron en estado
cultivado y 30 en estado silvestre. Las plantas cultivadas se identificaron a priori
como Rubus glaucus mientras que entre las plantas silvestres se identificaron
como R. urticifolious, R. niveus, R. robustus, R. roseous, R. compactus, R.
acanthophyllos, R. coriaceus, R laegardii, R. nubigenus, R. loxensis. El nmero de
plantas muestreadas corresponden a: 41 en Tungurahua, 19 en Bolvar, 10 en
Cotopaxi, 7 en Loja y 31 accesiones provenientes de la coleccin del programa de
Fruticultura-Granja Experimental Tumbaco del INIAP, de origen colombiano y
Pichincha. La variabilidad de la mora cultivada incluye 32 accesiones de la
variedad negra fruto grande, 6 de fruto rojo grande, 2 de fruto rojo pequeo, 1 de
fruto negro pequea, adems se identificaron 19 accesiones de planta pequea y
8 accesiones que no poseen espinas. Estos materiales son actualmente
conservados ex situ por el programa de Fruticultura del INIAP.

128

Sondeo de la diversidad con marcadores RAPDs e ISSRs

Para la extraccin de ADN genmico se utiliz el protocolo de Khanuja et al.
(1999), que result el ms efectivo que se realiza a partir de muestras foliares
deshidratadas con silicagel. Se evaluaron 107 primers RAPDs y 72 primers ISSRs
en 16 muestras de ADN de 5 variedades de R. glaucus y especies emparentadas.
Los primeros seleccionados fueron con base al nivel de informacin y calidad de
amplificacin para el genotipaje de 10 muestras disponibles. El coctel de
amplificacin utilizado fue similar para ambos tipos de marcadores, con la nica
variante del primer respectivo [0.2 uM]. Las reacciones de amplificacin fueron
efectuadas en un volumen final de 6.9 ul, con 5 [ng/ l] de ADN genmico, primer
[1,0 M], buffer de reaccin 5X, dNTPs [2.5 mM], y 5 unidades de Taq
polimerasa. Los productos de amplificacin se analizaron por electroforesis en
geles de agarosa al 2% en tampn TAE 1X con bromuro de etidio. La
electroforesis se realiz por 3 horas a 120 V. El peso molecular de los
polimorfismos se estim tomando como referencia el marcador 1Kb DNA Ladder
(10381-010 INVITROGEN) y el programa LENGHT-III (Templeton y Lawrence,
1988).
Genotipaje con marcadores AFLPs
Debido a la alta calidad y cantidad de ADN que se requiere para una adecuada
digestin, la extraccin de ADN se realiz utilizando un mtodo comercial de
columnas (PureLink Plant Total DNA Purification Kit, INVITROGEN Cat. No.), Se
utiliz una variante del protocolo original de AFLP basada en el mtodo M13Tailing (Myburg & Remington 1999) y aplicada al secuenciador LI-COR 4300S
con el kit comercial IRDye Fluorescent AFLP kit for large Plant Genome Analysis
(LI-COR, Cat. No. ). Los productos de la digestin se reconocieron en geles de
agarosa al 2% para la verificacin de que existi una restriccin total de cada
muestra de ADN. Se probaron 32 combinaciones de primers con ADN de cuatro
variedades de R. glaucus, y posteriormente las combinaciones de AFLPs
seleccionadas, para estose utilizo el genotipaje de 21 muestras de R. glaucus. Las
imgenes del gel se gener por el LI-COR y que fueron leidas en el asistente de
lectura SAGA MX - AFLP (IR2; LI-COR Biosciences).
Anlisis estadstico
Las tres metodologas antes descritas son de tipo dominante y se analizan como
datos binarios, es decir ausencia o presencia de polimorfismos entre muestras. En
la lectura se evit el registro de datos dudosos o ambiguos, considerndose un
polimorfismo a una banda presente en al menos dos muestras de ADN de
accesiones distintas. La base de datos binarios se import al programa, NTSYS
ver. 2.20 (Rohlf, 2002) para el clculo de una matriz de similitud gentica con el
coeficiente de Jaccard. Sobre la matriz obtenida se aplic la tcnica de
agrupamiento o Cluster Analysis, empleando el mtodo UPGMA. Con el mismo
paquete estadstico se realiz un anlisis de Coordenadas Principales (PCO) el

129

cual proyecta a las muestras en funcin de porcentajes de varianza explicados por

cada coordenada o eje en un plano bi o tridimensional (x, y o z). Se realiz
adems un Anlisis Molecular de Varianza (AMOVA) con el macro para EXCEL
GenALEx ver. 6 (Peakall y Smousse, 2001), que calcula el parmetro PhiPt
(muestra la proporcin de la varianza entre las poblaciones, relativa a la variacin
total) y las distancias genticas de Nei entre grupos predefinidos. Finalmente se
realiz un anlisis de remuestreos bootstrap el cual estima la robustez
estadstica del o los agrupamientos obtenidos, empleando el programa PAUP v.
4.0 (Swofford, 2000). Esto se realiz con 1000 rplicas usando la opcin Mean
Character Difference y el mtodo UPGMA.
2.1.10.3. Resultados y discusin
Diversidad gentica de R. glaucus y especies emparentadas revelada por
marcadores RAPDs e ISSRs
Los 107 primers RAPDs probados no revelaron la presencia de polimorfismo en R.
glaucus sino solamente a nivel interespecfico con las especies emparentadas
(Fig. 70). Similares resultados se obtuvieron con los 72 primers ISSRs probados a
excepcin del primer ISSR-872 que revel alta informacin por la cantidad de
polimorfismo detectado en R. glaucus, siendo por lo tanto el que se utiliza para
caracterizar las 93 accesiones disponibles (R. glaucus y especies emparentadas)
(Fig.71). La amplificacin de las bandas tuvieron un rango entre 360pb a
3030pb.Se determin un total de 16 fragmentos ISSR, de las cuales 13 resultaron
polimrficas en el material analizado. De estas, 9 resultaron polimrficas en las
muestras de R. glaucus. Con esta informacin se determinaron duplicados
obtenindose 52 % de clones de un total de 68 muestras de R. glaucus
analizadas.

Figura 70.Patrones de amplificacin con el primer OPAM 18, en tres muestra de R. glaucus y
tres R. spp.

130

Figura 71.Patrones de amplificacin obtenidos con el primer ISSR-872 en 18 muestras de R.

glaucus y especies emparentadas.
Con flechas se indican algunos de los polimorfismos
detectados y evaluados.

Estructura gentica revelada por los marcadores AFLPs

Del screening o sondeo realizado (Fig. 72) se seleccionaron cinco combinaciones
AFLPs (E-ACG/M-CTG, E-ACC/M-CTT, E-AGC/M-CTC, E-AAC/M-CAT y EACC/M-CTC) para la caracterizacin de material de R. glaucus, se seleccion 21
accesiones con la informacin proveda por el primer ISSR-872. A estas se
adicionaron muestras de la variedad brazos (1), Ollalie (1) y especies
emparentadas (6). El genotipaje de las 29 muestras con las cinco combinaciones
de AFLPs seleccionadas, se registr un total de 203 polimorfismos cuyo peso
molecular oscil entre 100 a 350pb, resultando en promedio 77% de polimorfismo.
Patrones de amplificacin obtenidos con la combinacin E-ACG/M-CTG se
muestran en la figura 73.

Figura 72.Patrones de amplificacin AFLP en 800 en obtenidos de un screening con 4 muestras de

R.glaucus con las combinaciones: E-ACG /M-CAC, M-CAA, M-CTC, M-CTT, M-CTA, MCTG.

Figura 73. Reaccin revelada por AFLP, con la combinacin E-ACG/ M-CTG marcada en 800nm.

131

Estructura gentica de R. glaucus

El dendograma del polimorfismo AFLP e ISSR (Figura 74), muestra la
conformacin de dos grupos identificados con las letras A y B a un nivel de
disimilitud gentica del 0.39. El grupo A incluye a las accesiones cultivadas, es
decir R. glaucus, mientras que el grupo B comprende a las especies silvestres
emparentadas e incluyen tambin a la variedad brazos. El grupo A, presenta dos
subgrupos identificados como C1 y C2, a una distancia de disimilitud de 0.50. El
subgrupo C1 incluye a tres accesiones colombianas y a las accesiones sin
espinas, mientras que el subgrupo C2 est conformado por accesiones
ecuatorianas. La robustez del subgrupo C2 se ve sustentada por un valor
bootstrap de 91. De la misma manera el PCO (Fig. 75) muestra la estructuracin
gentica en dos subgrupos dentro de R. glaucus, esto apoya los resultados
obtenidos en el anlisis de agrupamiento UPGMA y ayuda a diferenciar
claramente los grupos C1, C2 y W.
La Figura 75, representa la dispersin de 29 accesiones de Rubus en funcin de
los dos primeros ejes de coordenadas que extraen el 28% de la varianza total
observada. El primer eje de varianza distingue en los dos polos de la coordenada
al subgrupo C1 de R. glaucus perteneciente al grupo de silvestres, mientras que el
subgrupo C2 de R. glaucus se ve diferenciado por la segunda coordenada que
extrae 12% de la de varianza total. Las distancias genticas de Nei que se
observan entre los dos subgrupos de R. glaucus y las especies silvestres, esto
confirma la mayor diferenciacin del subgrupo C1 respecto al grupo de silvestres
que el subgrupo C2, siendo este ltimo ms afn con el grupo B.
Por otro lado, el AMOVA realizado para los tres grupos del Clster anlisis
determina un valor de PT de 0,35 (p = 0,001), resultado que indica que el 35%
de la variacin gentica contribuye a la diferenciacin entre grupos (C1, C2 y B),
mientras que el 65% de variacin restante se distribuye dentro de cada grupo.
Estos resultados sugieren una alta diferenciacin gentica entre los dos subgrupos
de R. glaucus y el grupo de especies silvestres emparentadas.

Figura 74. rbol UPGMA con base en 13 polimorfismos ISSR y 152 AFLPs, de 29 entradas del
gnero Rubus.

132

Figura 75. Diagrama de PCO que muestra la distribucin en el plano definido por las dos primeras
coordenadas que extraen un 27% de la variacin gentica observada con marcadores AFLPs.

De un total de 189 primers aleatorios probados (107 RAPDs y 72 ISSR) en 13

muestras de ADN extrados de diferentes accesiones o morfotipos de R. glaucus,
no se detectaron polimorfismos excepto con el primer ISSR-872. Este resultado
corrobora la limitada base gentica de la mora de castilla en el presente estudio.
Este resultado podra explicarse por el rgimen reproductivo del cultivo de mora,
descrito como apomctica facultativa; rgimen en el cual las plantas provenientes
de semilla botnica son producidas asexualmente por pseudogamia, que tienen
baja diversidad gentica (Kollmann et al., 2000), adems de la reproduccin
asexual o vegetativa empleado por los agricultores tradicionales (Marulanda y
Mrquez, 2001).
La utilizacin de marcadores altamente resolutivos como los AFLPs (Cenis, 2005)
en genotipos estrechamente relacionados s, permiti identificar dos grupos bien
conformados genticamente en R. glaucus , esto fue corroborado por los anlisis
estadsticos realizados. Esta estructura podra tener su origen en la introgresin
gentica, producto de la recombinacin sexual, donde incluso los bajos niveles de
germinacin? pueden ser suficiente para mantener la variabilidad gentica en una
poblacin predominantemente apomctica (Kollmann et al., 2000). Tambin podra
estar relacionado con el nivel de ploidia de la especie, ya que el gnero Rubus
posee una amplia plasticidad de formas de reproduccin, las cuales estn ligadas
directamente con el nivel de ploidia de la especie: plantas diplodes poseen
reproduccin sexual mientras que especies poliploides
son apomcticas,
seudgamas y autofrtiles (Antonius y Nybon., 1995).
Con la informacin actual no es posible determinar con certeza el origen de esta
divergencia en R. glaucus, siendo necesarios
necesario un anlisis
complementario de ADN cloroplstico, conteo de cromosomas y caracterizacin
fenotpica, que aportaran al esclarecimiento de su origen y las implicaciones
directas en materia de fitomejoramiento de la mora de castilla, que permitan la
seleccin de progenitores altamente diferenciados.

133

2.1.10.4. Conclusiones
El anlisis molecular determina que en Ecuador se cultivara nicamente la
especie Rubus glaucus, Las especies silvestres con posible potencial
agronmico, no sustantivamente representadas en este estudio, no estn
cultivadas por los agricultores.
Las tcnicas de RAPDs, no revelo polimorfismos a nivel intraespecfico en R.
glaucus, aunque si a nivel interespecfico. Con los ISSRs se identific un primer
altamente informativo (Primer 872) para la deteccin de duplicados. En cambio
los AFLPs fueron ms resolutivos en la deteccin de diversidad, revelando
diferencias entre todas las 21 muestras de R. glaucus analizadas
Los RAPDs e ISSR muestran que Rubus glaucus presenta una baja variabilidad
gentica en Ecuador. Se determin un 52% de duplicados en el material
estudiado.
Los AFLPs e ISSR revelaron la existencia de dos grupos genticamente bien
conformados en R. glaucus, uno de los cuales est formado por materiales
ecuatorianos, mientras que el segundo grupo incluye a tres accesiones
colombianas y a las accesiones sin espinas recientemente identificadas.
El origen de la estructura gentica en R. glaucus es desconocido, se
recomienda complementar este estudio con el conteo de cromosomas, Anlisis
de cloroplstico y caracterizacin morfoagronmica.
2.1.10.5. Bibliografa
Antonius, K., y Nybom, H. (1995).Discrimination between sexual recombination and
apomixidautomixis in a Rubus plant breeding programme. Department of Plant BiologylPlant
Breeding, University of Helsinki, Finland. Balsgrd-Departrment of Horticultural Plant Breeding,
Swedish University of Agricultural Sciences, Hereditas 123: 205-213.
Khanuja, S., Shasany, A., Darokar, M & Kumar, S. 1999. Rapid Isolation of DNA from Dry and
Fresh Samples of Plants Producing Large Amounts of Secundary Metabolites Essential Oils. Plant
Molecular Biology Reporter 17: 1-7.
Lobo, M. & Medina, C. (2000). Lulo (Solanum quitoense Lam). En: Caracterizaao de Frutas
Nativas da America Latina. Serie Frutas Nativas. Ediao comemorativa do 30 aniversario da
Sociedade Brasileira de Fruticultura. p. 1-43.
Templeton A & Lawrence J (1988). FRAG-LENGHT III: Algorithm for the calculation of molecular
weights. Software distributed by the authors.
Waugh, R., Van de Ven, Phillips, M., Powell, W. (1990). Chloroplast DNA diversity in the genus
Rubus (Rosaceae) revealed by Southern hybridization. Plant Systematics and Evolution 172: 65
75.

134

2.1.11. Desarrollo de un programa de manejo integrado de botritis

(Botrytis cinerea) en mora de castilla (Rubus glaucus b.), en
Bolvar y Tungurahua 14.
Objetivo del Proyecto (3): Desarrollar y evaluar estrategias de biocontrol de las
plagas y enfermedades ms importantes.
2.1.11.1. Objetivos
Objetivo general
Sincronizar el uso de fungicidas con el manejo agronmico, manejo sanitario para
interferir de manera estratgica en el desarrollo epidemiolgico de la enfermedad,
lo que permitir realizar un control ms racional de B. cinerea.
Objetivos especficos
Establecer el desarrollo epidemiolgico de la enfermedad en funcin de
desarrollo fenolgico de la planta.
Evaluar el efecto in vitro sobre el desarrollo micelial de Botrytis cinerea de
fungicidas que se comercializan en Ecuador.
Evaluar en campo la eficacia de los fungicidas que ms retardan el desarrollo
micelial del patgeno.
Evaluar diferentes estrategias sincronizadas de manejo entre el uso de
fungicidas, desarrollo epidemiolgico, manejo agronmico y sanitario del cultivo.
Validar un programa de manejo integrado de Botrytis cinerea en mora en
Chillanes y Pillaro.
2.1.11.2. Marco Referencial
La mora de castilla (Rubus glaucus BENTH) es una fruta de consumo diario de las
familias ecuatorianas, por lo que la demanda es alta (2 kilos/familia/semana),
especialmente en la regin costa. El rea de cultivo en el pas es 5.247 ha (INEC
2003). Los rendimientos obtenidos manejndola tcnicamente de acuerdo a sus
estados fenolgicos llega a 12-15 Kg/planta por ao, mientras que los agricultores
obtienen promedios de 5 Kg/planta por ao, considerando 1666 plantas por
hectrea con una densidad de plantacin de 2m x 3 m. El desconocimiento en
cuanto a manejo o tcnicas de cultivo impide que se obtenga producciones
representativas del potencial de la fruta. La principal razn de los bajos niveles de
rendimiento es el ataque de enfermedades, lo que adems est directamente
14

Villares M.1 , Martnez A.1 , Ochoa J.2 , Asaquibay C.2 , Gallegos P.2 , Vsquez W.3
Programa de Fruticultura Zona Centro del INIAP
2
Departamento de Proteccin Vegetal del INIAP
3
Programa Nacional de Fruticultura del INIAP
1

135

asociado con la mala nutricin de la planta y mal manejo de podas. La

enfermedades ms importantes del cultivo de mora son la botritis causada por
Botrytis cinerea, mildeo causada por Peronospora sp, oidio causado por Oidium
sp., muerte descendente causado por Verticillium, sp. Botritis y mildeo son
importantes en zonas hmedas o altas (en Tungurahua desde los 2700 a 3500
m.s.n.m), mientras que oidio es importante en zonas secas o bajas (en
Tungurahua desde los 2400 a 2700 m.s.n.m).
En la provincia Bolvar, el cultivo de mora se encuentra seriamente afectado por la
pudricin del fruto (Botrytis cinrea) que reduce significativamente el rendimiento
de la fruta e incluso en meses de invierno como enero, febrero y marzo en varias
zonas de Chillanes los productores no obtienen produccin. Las condiciones
extremas de precipitacin (1200 mm al ao) y humedad (75%) favorece a la rpida
proliferacin de la enfermedad haciendo an ms difcil el control. El agricultor
realiza el control de enfermedades utilizando protocolos de aplicacin de
pesticidas recomendados por casas comerciales, sin un anlisis previo. Como
consecuencia, el control de las enfermedades usando estos protocolos no es
siempre satisfactorio. Adems la manipulacin de los pesticidas no es siempre la
adecuada y por ser la mora de castilla una fruta de produccin permanente el
tiempo que transcurre entre la fumigacin y la cosecha no es el recomendado
provocando la contaminacin de quienes consumen la fruta.
El INIAP a travs del Programa de Fruticultura con apoyo del departamento de
Proteccin Vegetal ha venido desarrollando componentes tecnolgicos para el
manejo de la mora de castilla en cuanto a nutricin, manejo de plagas y
enfermedades con enfoque a obtener frutos libres de residuos de pesticidas. Se
hace necesario integrar estos componentes en estrategias de manejo de fcil
adopcin por parte del productor que no funcionen como recetas sino ms bien
como medidas de prevencin y control de plagas y enfermedades en la mora en el
momento oportuno optimizando recursos y disminuyendo la utilizacin de
pesticidas sintticos o sustituyndolos por productos biolgicos o de certificacin
orgnica si la situacin lo amerita.
2.1.11.3. Metodologa
FASE 1. Desarrollo epidemiolgico de la enfermedad
Se realiz un seguimiento de los sntomas en las diferentes fases fenolgicas de
un ciclo productivo de mora de castilla, para establecer con claridad el progreso de
la epidemia y definir las fases fenolgicas ms sensibles para realizar una mejor
intervencin de control y manejo agronmico. Se seleccionaron 5 plantas en una
plantacin, a la que se realiz una poda fuerte para obtener nuevos brotes, en los
que se realiz el seguimiento de la fenologa y la enfermedad sin la aplicacin de
fungicidas.

136

FASE 2. Evaluacin in vitro de la eficiencia de fungicidas para el control de

Botritis sp.
En laboratorio se evaluaron 30 fungicidas utilizados para el control de Botrytis, 11
protestantes, 17 sistmicos y 2 ecolgicos; el ensayo se realiz en los laboratorios
del Departamento Nacional de Proteccin Vegetal (DNPV) de la Estacin
Experimental Santa Catalina (EESC) del INIAP. Para evaluar los fungicidas, se
tomaron muestras de plantas de mora afectadas con Botrytis sp. de tres sitios
seleccionados, Chillanes, Tumbaco y Pllaro y se aislaron en medio PDA. Se
trabaj con tres dosis para cada tipo de fungicida. Para el anlisis de los
resultados se us la variable EC50 la cual fue calculada para cada fungicida y
cada aislamiento. Utilizando la EC50 se realiz un cuadro comparativo que
permiti obtener los seis mejores fungicidas para la evaluacin en campo.
FASE 3. Evaluacin de fungicidas y efecto de podas fitosanitarias para el
control de Botryitis cinerea.
La evaluacin de los fungicidas eficientes para el control de botrytis en campo se
realiz en dos localidades, la una ubicada en la provincia Bolvar, cantn
Chillanes, comunidad Jashi con una altitud de 2260 m.s.n.m, temperatura media
anual de 15C y precipitacin media de 750 a 1000 mm y la otra localidad
localizada en la provincia Tungurahua, cantn Pllaro, parroquia San Miguelito con
una temperatura media anal de 15C y la precipitacin media de 680 mm. En
campo se evaluaron dos factores, los fungicidas que resultaron mejores en el
experimento de sensibilidad en interaccin con dos tipos de poda; en virtud de la
importancia de esta prctica para el manejo de la enfermedad. Los tipos de poda
evaluados fueron: poda fuerte o INIAP, que se realiz una sola vez por ciclo
productivo y consiste en cortar ramas primarias, secundarias, terciarias, en mal
estado y las que ya han producido, cortando a dos yemas las ramas secundarias y
terciarias de buen estado, tambin despuntando los chupones que son ramas
infrtiles y emiten ramas productivas; en lo posible tratando de dejar de 6 a 9 tallos
principales por planta. La poda de mantenimiento o del Agricultor que se realiz
mensualmente durante el estudio, que consiste en cortar todas las ramas con
problemas fitosanitarios y ramas entrecruzadas, as como las que ya han
producido.

137
Tabla 20. Fungicidas eficientes para el control In vitro de B. cinerea y estrategias de aplicacin
para las parcelas con poda alternativa (INIAP).
Tratami
entos

Poda
(semana 0)

Formacin de
Yema apical
(semana 5-6)

Flor abierta
(semana 7-8)

Inicio
desarrollo
fruto (semana
10)

T1

Caldo bordels

Sistmico

CB

Sistmico

T2

Caldo bordels

Procloraz

Caldo bordels

Procloraz

T3

Caldo bordels

Cyproconazol

Caldo bordels

Cyproconazol

T4

Caldo bordels

Iprodione

Caldo bordels

Iprodione

T5

Caldo bordeles

Himexazole

Caldo bordels

Himexazole

T6

Bacillus spp

Bacillus spp

Bacillus spp

Bacillus spp

Inicio
madurez
fruto
(semana
12-13)
biolgico
Bacillus
spp
Bacillus
spp
Bacillus
spp
Bacillus
spp
Bacillus
spp

En la tabla 20 se presentan los fungicidas que se aplicaron en las parcelas de

poda fuerte (INIAP) y en la tabla 21 los fungicidas que se aplicaron en las parcelas
de poda del agricultor y la estrategia de aplicacin respectiva segn el estado
fenolgico del cultivo.
Tabla 21. Fungicidas eficientes para el control invitro de B. cinerea y estrategias de aplicacin para
parcelas con poda del agricultor.
Tratamie
nto
T7
T8
T9
T10
T11
T12

Poda (0)

Semana 5-6

Semana 7-8

Semana 10

Caldo
bordels
Caldo
bordels
Caldo
bordels
Caldo
bordels

Sistmico

Caldo Bordels

Sistmico

Procloraz

Caldo bordels

Procloraz

Cyproconazole

Caldo bordels

Cyproconazol

Difenocnazol

Caldo bordels

Iprodione

Caldo
bordeles
Bacillus spp

Iprodione

Caldo bordels

Difenoconazol

Bacillus spp

Bacillus spp

Bacillus spp

Semana
12-13
Biolgico
Bacillus
spp
Bacillus
spp
Bacillus
spp
Bacillus
spp
Bacillus
spp

Con la interaccin de fungicidas y podas se formaron 10 tratamientos que fueron

dispuestos en un diseo de bloques completos al azar con tres repeticiones. En
este experimento se incluy un testigo satlite T11 (Poda y manejo del agricultor)
y T12 Poda fuerte para seguimiento de desarrollo epidemiolgico de la
enfermedad.
Se etiquetaron y se realizaron las aplicaciones correspondientes de los
tratamientos. En lo referente a la frecuencia de poda alternativa, terminado el ciclo

138

de produccin de verano se volvi a realizar otra poda de este nivel para empezar
el ciclo de produccin de invierno. La fertilizacin se realiz basada en las
necesidades del cultivo aplicando un nivel de 360-60-300 kg/ha/ ciclo. Adems de
las podas se realiz la limpieza del huerto que consiste en recolectar permanente
el material podado y malezas en el rea de goteo. En la localidad de Chillanes se
realizaron 3 evaluaciones, dos en temporada de verano y una en temporada de
invierno, mientras que en la localidad de Pllaro se evalu en 2 ocasiones, pero no
se procesaron los datos de la primera evaluacin en esta localidad, en vista que
por condiciones adversas del clima (granizada) las plantas se afectaron y se
declar como parcela perdida.
Anlisis Estadstico
La unidad experimental estuvo constituida por 3 plantas de mora de castilla en
estado productivo, con competencia completa, sembrada a una distancia de 2 m
entre plantas y 2,5 m entre hileras. De cada unidad experimental se evalu la
planta central. En sta se seleccionaron tres ramas (secundarias y/o terciarias)
donde se tomaron los datos. Los datos se registraron cada vez que se aplic el
fungicida.
Anlisis de Varianza (ADEVA) al 5%
Prueba de Tukey al 5% para comparar los promedios de los tratamientos.
Anlisis de correlacin y regresin lineal.
Variables
Las variables agronmicas fueron: longitud de rama, nmero de yemas por rama,
nmero de flores abiertas, nmero de tallos, nmero de centros de produccin,
nmero de brotes vegetativos nuevos por planta, nmero de hojas, presin de
pulpa, grados brix, rendimiento. Las variables fitopatolgicas fueron: nmero de
frutos sanos, nmero de frutos con Botrytis sp., lo que permiti obtener la
incidencia de Botritis, empleando la siguiente formula: Incidencia = (Frutos
enfermos/total de frutos por repeticin) * 100, nmero de das tiles en
postcosecha, incidencia de otras pudriciones, incidencia de Oidium sp.
RESULTADOS DE LA FASE 3
A continuacin se presentan los resultados de las evaluaciones de las variables en
campo que segn el anlisis de varianza
resultaron estadsticamente
significativas, permitiendo determinar los fungicidas ms eficientes en campo para
el manejo de Botrytis en mora de castilla.
LOCALIDAD CHILLANES
Como resultado del anlisis de correlacin y regresin lineal de las variables
independientes que tuvieron una relacin o asociacin significativa con el
rendimiento de mora de castilla (Kg/Planta) durante la primera evaluacin de

139

verano en la localidad de Jashi, Chillanes 2008, se calcularon correlaciones

altamente significativas para nmero de centros de produccin sanos versus el
rendimiento (Kg/planta), de mora de castilla con 0,514, siendo este el valor ms
alto; de igual manera la variable independiente que increment el rendimiento en
forma significativa fue el nmero de centros de produccin sanos, es decir valores
ms elevados de esta variable signific un mayor rendimiento de mora de castilla,
as mismo, el nmero de centros de produccin enfermos disminuyeron el
rendimiento; con estas consideraciones se analiz la varianza, tukey al 5% e
incidencia de la enfermedad de esta variable.
Con la prueba Tukey al 5% para tratamientos se determin que el mayor nmero
de centros de produccin sanos se encontr en T6 (Poda de mantenimiento +
Procloraz) con un promedio de 112,6 centros de produccin seguida de T1 (Poda
fuerte + Procloraz) con 106,2 centros, mientras que el menor nmero de centros
de produccin se registr en T7 (Poda de mantenimiento + Cyproconazol) con
47,66 centros de produccin sanos.
La incidencia de botrytis en centros de produccin de plantas de mora de castilla
en la primera evaluacin de verano en Chillanes (Grfico 4), fue ligera, las plantas
que presentaron mayor porcentaje de incidencia de botrytis en centros de
produccin fueron las de T11 (Testigo satlite) con poda y manejo del productor
con el 8,49% de incidencia, seguida estrechamente por T8 (Poda de
mantenimiento + Difenoconazol) con el 8,48% de incidencia; el tratamiento en el
que se registr menor porcentaje de incidencia de Botrytis fue T3 (Poda fuerte +
Aprisione) con el 0,87%.
Grfico 4. Incidencia de Botrytis en centros de produccin de mora de castilla (Rubus glaucus) en
la evaluacin de verano en Chillanes, 2008.

PORCENTAJE DE INCIDENCIA

INCIDENCIA DE Botrytis EN CENTROS DE PRODUCCIN DE

MORA DE CASTILLA (Rubus glaucus) EN LA EVALUACIN DE
VERANO EN CHILLANES, 2008
10,00
7,88

8,00

8,48

8,49

T8

T11

6,39

6,00
4,00
2,00

0,87

1,13

T3

T2

1,57

2,05

2,63

4,00

4,09

T12

T4

3,27

0,00
T5

T1

T10

T6

T7

T9

TRATAMIENTOS

En cuanto al rendimiento, no hay diferencias estadsticas entre el factor A, podas,

pero matemticamente se obtuvo mayores rendimientos con la poda de
mantenimiento (4,93 Kg/planta), esto se debe a que el tamao de las plantas fue

140

mayor en este bloque. En lo referente al factor B, fungicidas no hay diferencias

estadsticas para rendimientos pero matemticamente se obtuvo mayores
rendimientos en los tratamientos que se aplic Bacillus spp. En la interaccin de
los factores podas por fungicidas no se encontr diferencias estadsticamente,
pero matemticamente se obtuvo mayores rendimientos en las plantas donde se
aplic la poda fuerte ms el fungicida Bacillus spp (T5), seguida de las plantas
donde se aplic la poda de mantenimiento ms el fungicida procloraz (T6).
Incidencia de Botrytis en mora de castilla en poca de invierno en Chillanes
En anlisis de la variable nmero de centros de produccin con la prueba Tukey al
5% para tratamientos determin que el mayor nmero de centros de produccin
sanos (90,67) corresponde a T1 (Poda fuerte + procloraz), y el menor nmero de
centros de produccin de mora de castilla sanos en poca de invierno en
promedio es de 9,3 correspondiente a T2 (Poda fuerte + Cyproconazol). Mientras
que el mayor nmero de centros de produccin enfermos es de 56,67 en
promedio, que corresponde a T9 (Poda de mantenimiento + Bacillus spp.), y el
menor nmero de centros de produccin enfermos corresponde a T11 (Testigo
satlite) con 22 centros en promedio seguido de T10 (Poda de mantenimiento +
Aprisione) con 26,33 centros en promedio.
Segn la prueba de Tukey al 5%, se determin que el mayor nmero de frutos
sanos corresponde a plantas de T12 con 15,67 en promedio, seguida de T5 (Poda
fuerte + Bacillus spp.) con 11 frutos sanos en promedio, y el tratamiento que
presenta el menor nmero de frutos sanos es T7 (Poda de mantenimiento +
Cyproconazol) con un promedio de 3 frutos. Y el mayor nmero de frutos enfermos
en invierno es de 8 que corresponde a T5 (Poda fuerte + Bacillus spp.), seguida
de T2 (Poda fuerte + Cyproconazol) con 7,3 frutos enfermos en promedio por
rama; y, el menor nmero de frutos enfermos se encontr en T6 (Poda de
mantenimiento + Procloraz) con 1,3 frutos enfermos.
Los frutos de mora de castilla durante la evaluacin de invierno presentaron una
incidencia de botrytis desde regular a mediano, siendo la de menor incidencia T6
(Poda de mantenimiento + Procloraz) con 25% , segn la escala corresponde a
una calificacin de regular; el mayor porcentaje de incidencia se registr en T7
(Poda de mantenimiento + Cyproconazol) con el 52,63%, seguida de T2 (Poda
fuerte + Cyproconazol) con 51,16% que corresponden a una calificacin de
mediana incidencia de la enfermedad (Grfico 5).

141
Grfico 5. Incidencia de Botrytis en frutos de mora de castilla (Rubus glaucus) en la evaluacin de
invierno en Chillanes, 2009.

PORCENTAJE DE INCIDENCIA

INCIDENCIA DE Botrytis EN FRUTOS DE MORA DE CASTILLA

(Rubus glaucus) EN LA EVALUACIN DE INVIERNO EN
CHILLANES, 2009
60,00
50,00

40,00
30,00

25,00

28,78

28,95

T12

T4

31,43

33,33

33,33

35,30

T10

T9

T8

T1

36,74

T11

42,11

42,31

T5

T3

51,16

52,63

T2

T7

20,00

10,00
0,00
T6

TRATAMIENTOS

En lo referente a rendimiento, no se determin diferencias estadsticas entre el

factor podas, pero matemticamente se obtuvo mayores rendimientos (1,99
Kg/planta) con la poda de mantenimiento. Respecto al factor fungicidas no se
determinaron diferencias estadsticas para la variable rendimiento, pero
matemticamente se obtuvo mayores rendimientos con el fungicida Difenoconazol
con 4,29 Kg/planta seguida de Bacillus spp con 2,21 Kg/planta.
LOCALIDAD PILLARO
Incidencia de Botrytis en frutos de mora de castilla en Pillaro, provincia
Tungurahua.
Con la prueba de Tukey al 5% para tratamientos en la evaluacin de fungicidas
eficientes para el control de Botrytis en mora de castilla en Pllaro, se determin
que el mayor nmero de frutos sanos corresponde a plantas de T10 (Poda de
mantenimiento + Iprodione) con 17,33 en promedio, y el tratamiento que presenta
el menor nmero de frutos sanos es 6,67 que corresponde a T12, seguida de T3
(Poda fuerte + Iprodione) con un promedio de 7 frutos. Y el mayor nmero de
frutos enfermos en Pllaro es de 7,33 que corresponde a T12, seguida de T8
(Poda de mantenimiento + Difenoconazol), con 7 frutos enfermos en promedio por
rama; y, el menor nmero de frutos enfermos se encontr en T1 (Poda fuerte +
Procloraz) con 0,67 frutos enfermos.
Los frutos de las ramas muestra evaluados presentaron una incidencia de botrytis
de ligera a mediana, el menor porcentaje se registr en T1 (Poda fuerte +
Procloraz) con 5,13%, la mayor incidencia de la enfermedad se registr en plantas
del seguimiento epidemiolgico con 52,38%, le sigue plantas de T8 (Poda de
mantenimiento + Difenoconazol) con 43,75%. (Grfico 6)

142
Grfico 6. Incidencia de Botrytis en frutos de mora de castilla (Rubus glaucus) en la evaluacin en
Pllaro 2009.

INCIDENCIA DE Botrytis EN FRUTOS DE MORA DE CASTILLA

(Rubus glaucus) EN LA EVALUACIN EN PLLARO, 2009
PORCENTAJE DE INCIDENCIA

60,00

52,38

50,00
39,47

40,00

35,00

30,00
18,75

20,00

10,00

41,67

43,75

21,05

24,53

14,29
8,88

10,42

T2

T11

5,13

0,00
T1

T7

T10

T4

T6

T9

T5

T3

T8

T12

TRATAMIENTOS

Con respecto al rendimiento, en lo referente al factor Podas segn el anlisis de

varianza no se determin diferencias estadsticamente significativas, sin embargo
matemticamente se obtuvo mejores rendimientos con la poda de mantenimiento
con 3,20 Kg/planta. Para fungicidas no se encontraron diferencias
estadsticamente significativas, pero matemticamente se registr mayores
rendimientos en plantas donde se aplic el fungicida Cyproconazol con 3,5
Kg/planta. Con la prueba Tukey al 5% para los tratamientos en estudio se
determin que el mayor rendimiento es 5,64 Kg/planta que corresponde T5 (Poda
fuerte + Bacillus spp.) y el rendimiento ms bajo es de 0,9 Kg/planta que
corresponde a T9 (Poda de mantenimiento + Bacillus spp.)
2.1.11.4. Conclusiones
Segn los anlisis de varianza, tukey, regresin y correlacin realizados en el
presente estudio se llega a las siguientes conclusiones:
En la primera evaluacin de verano en la localidad de Jashi, Chillanes el
fungicida ms eficiente para el control de Botrytis en campo fue Procloraz,
tomando en cuenta la variable centros de produccin sanos, que ms
contribuy al incremento del rendimiento, en tratamientos que se aplic este
fungicida se obtuvo mayor nmero de centros de produccin sanos (109).
En la primera evaluacin de verano en Jashi, Chillanes se obtuvo mayores
rendimientos con la poda de mantenimiento (4,93 Kg/planta)
La poda con la que se obtuvo mayores rendimientos durante la evaluacin de
invierno en Jashi fue la poda de mantenimiento (1,99 Kg/planta).
El fungicida ms eficiente para el manejo de botrytis en campo durante la poca
de invierno es Difenoconazol obtenindose mayores rendimientos con este
fungicida (2,52 Kg/ha).

143

En la segunda evaluacin de verano se obtuvo mayores rendimientos con la

poda de mantenimiento (9,1 Kg/planta) y con el fungicida difenoconazol (12,52
Kg/planta).
En Jashi durante la evaluacin en verano se obtuvo un rendimiento promedio
de 7,25 Kg/planta, mientras que en invierno el rendimiento fue de 1,77
Kg/planta, registrando un 75,6% menos de rendimiento en poca lluviosa.
En la evaluacin en la localidad de San Miguelito, Pllaro la poda que registra
mayores rendimientos es la poda de mantenimiento con 3,20 Kg/planta, el
fungicida ms eficiente para el control de Botrytis en campo fue Procloraz, en
vista que los tratamientos en los cuales se aplic este fungicida registra mayor
nmero de yemas, flores, frutos y centros de produccin sanos, puesto que
estas variables
incrementan significativamente el rendimiento segn el
coeficiente de regresin.
En Pllaro el fungicida con el que se obtiene mayores rendimientos es
Cyproconazol, pero no se considera efectivo para el manejo de botrytis en
campo puesto que en los anlisis estadsticos no presenta resultados
importantes en cuanto a la sanidad de yemas, flores, centros de produccin y
frutos, adems altera el crecimiento vegetativo de las ramas, hojas y frutos.
El segundo fungicida en orden de importancia efectivo en campo en Pillaro fue
Iprodione presentando rendimientos de 3,29 Kg/planta y registr mayor nmero
de yemas y flores sanas.
2.1.11.5. Recomendaciones
Considerando las condiciones climticas en la localidad del cantn Chillanes se
recomienda realizar podas de mantenimiento en poca de verano y una poda
fuerte en poca de invierno.
Con base a los resultados de la evaluacin de los fungicidas en campo se
recomienda disear estrategias de manejo para poca de invierno y para poca
de verano para la localidad de Chillanes.
En poca de verano en la localidad de Chillanes se recomienda incluir los
fungicidas Iprodione y Procloraz en la estrategia de control de botrytis.
En poca de invierno en la localidad de Chillanes se recomienda incluir los
fungicidas Difenoconazol y Procloraz en la estrategia de control de botrytis.
Para la zona de Pillaro se recomienda incluir en los controles de Botrytis los
fungicidas Procloraz e Iprodione.
Realizar aislamientos de Botrytis en las localidades en estudio para determinar
su especie.
FASE 4. Validacin de un programa de manejo integrado de Botrytis cinrea
en Mora de Castilla (Rubus glaucus B.) en Bolvar y Tungurahua.
La fase de validacin del programa de manejo integrado de Botrytis en mora de
castilla se realiz en la Provincia Bolvar, Cantn Chillanes, Recinto Perezan.

144

Los tratamientos de la presente investigacin constituyen dos Estrategias de

Manejo para Botrytis en mora de castilla. La Estrategia de Manejo Convencional
para B. cinerea en mora de castilla que consiste en la utilizacin de los mejores
fungicidas eficientes para el control de B. cinerea, evaluados en la fase 3,
combinando con del manejo agronmico del cultivo favorable para la produccin
limpia de mora de castilla; y la Estrategia de Manejo Orgnico para B cinerea en
mora de castilla que consiste en la utilizacin de fungicidas orgnicos, adems del
manejo agronmico del cultivo complementando con productos orgnicos tanto al
follaje como al suelo. Se evalu como testigo el manejo que realiza el productor de
mora de castilla.
La unidad experimental estuvo constituida por 20 plantas de mora de castilla en
estado productivo, con competencia completa, sembrada a una distancia de 2 m
entre plantas y 2,5 m entre hileras. De cada unidad experimental se evalu 3
plantas centrales. En esta se seleccionaron dos ramas (secundarias y/o terciarias)
donde se tomaron los datos, mismos que se registraron cada 15 das. Adems de
las podas se realiz la limpieza del huerto que consiste en recolectar permanente
el material podado y malezas en el rea de goteo. El manejo se complement con
la aplicacin de caldo bordeles, trichoderma o insecticidas al suelo segn la
necesidad, en caso de presencia de Verticillium en las plantas de mora dentro del
estudio.
RESULTADOS FASE 4
Incidencia de Botrytis en frutos de mora de castilla
Los frutos durante la evaluacin de estrategias de manejo de botrytis en mora de
castilla presentaron una incidencia ligera de la enfermedad, T1 Estrategias de
manejo limpio present un 0,3% de incidencia, T2 Estrategias de manejo orgnico
present 6,13% de incidencia y el testigo 6,22%.
Grfico 7.

INCIDENCIA DE BOTRYTIS EN FRUTOS (%)

INCIDENCIA DE BOTRYTIS EN FRUTOS DE MORA DE CASTILLA (Rubus

glaucus B.) EN LA VALIDACIN DE ESTRATEGIAS DE MANEJO INTEGRADO
DE BOTRYTIS EN CHILLANES, 2010.
7,00
6,13

6,22

T2

T3

6,00
5,00
4,00
3,00
2,00
1,00

0,30

0,00
T1

TRATAMIENTOS

145

Incidencia de otras enfermedades

En poca lluviosa los diferentes estados fenolgicos de la mora de castilla fueron
atacados por Mildeo velloso provocado por Peronospora sp. Se encontraron
sntomas de mildeo en yemas, flores y frutos de mora de castilla disminuyendo el
rendimiento y la calidad de la fruta.
Los frutos de mora durante la evaluacin de estrategias de manejo de botrytis
presentaron una incidencia regular de mildeo, evidencindose un mayor
porcentaje en T1, manejo limpio con 37,24%; T2 manejo orgnico present un
29,45 % de incidencia de mildeo y en el testigo se encontr un 26, 32% de
incidencia de mildeo en frutos de mora de castilla.
Grfico 8.

Incidencia de Peronospora en Frutos (%)

INCIDENCIA DE MILDIU EN FRUTOS DE MORA DE CASTILLA (Rubus

glaucus B.) EN LA VALIDACIN DE ESTRATEGIAS DE MANEJO INTEGRADO
DE BOTRYTIS EN CHILLANES, 2010.
40,00

37,24

35,00
29,45

30,00

26,32

25,00
20,00
15,00
10,00
5,00
0,00
T1

T2

T3

TRATAMIENTOS

Conclusiones
La estrategia de manejo que se implemente en el huerto de mora depende de
las condiciones en que se encuentre, tomando en cuenta la zona de cultivo y la
poca, donde influye temperatura, humedad y precipitacin.
Con la estrategia de manejo limpio se obtuvo menor incidencia de frutos con
botrytis en el rea de estudio.
En la zona de Chillanes con el manejo adecuado del cultivo se puede prolongar
el tiempo de produccin de la fruta hasta el mes de febrero.
En condiciones de humedad si no se toma las medidas de control oportunas y
adecuadas; yemas, flores y frutos en desarrollo son atacados por peronospora
sp, cuyos sntomas en yemas y flores son la necrosis y en frutos la deformidad,
mientras que sntomas y signos de botrytis se evidencian en frutos que inician
maduracin y en postcosecha.
La nutricin, poda y limpieza del huerto son factores importantes para disminuir
la incidencia de botrytis y mildeo en la mora de castilla.

146

Recomendaciones
En la zona de Chillanes se recomienda realizar una poda fuerte en poca de
invierno para iniciar el ciclo de produccin uniforme lo que permita mantener
mayor control en el manejo de enfermedades. Luego realizar podas de
mantenimiento de forma permanente para evitar los focos de infeccin.
En vista que el ataque de mildeo se produce en el estado de yema se
recomienda en esta poca aplicar el fungicida adecuado, como fosfanato de
potasio o si el ataque es severo fungicida sistmico a base de cymoxanil y
propamocarb.
El control para botrytis inicia cuando la mayora de ramas productivas presentan
frutos en desarrollo, en este caso se puede aplicar procloraz, iprodione o
difenoconazol, despus de tres semanas rotar con caldo bordels o fungicidas
biolgicos como Bacillus spp. o Trichoderma spp. Se puede repetir la aplicacin
del fungicida sistmico cuidando de no exceder de dos aplicaciones por ciclo
productivo para evitar que el patgeno adquiera resistencia.
Es indispensable dar una adecuada nutricin edfica a la planta en funcin de
los requerimientos del cultivo de 360-60-300 en forma fraccionada y va foliar
con los micro elementos quelatados de Boro, Hierro, Zinc y Calcio segn los
estados fenolgicos.
Es recomendable impedir que el inoculo de Botrytis permanezca en el huerto
manteniendo la sanidad, para lo que se debe eliminar las malas hierbas y los
restos de la poda.
2.2.

RESULTADOS EN LULO

2.2.1. Caracterizacin molecular con marcadores

accesiones de lulo provenientes de ecuador 15

RAMS

de

Objetivo del proyecto (2): Caracterizar las colecciones de germoplasma, por

variabilidad gentica y resistencia a plagas y enfermedades de mayor importancia
2.2.1.1. Marco referencial
Entre los marcadores moleculares conocidos, los RAMs (Random Amplified
Microsatellite o Microsatlites Amplificados al Azar) muestran la base misma de la
variacin de los individuos, permiten seleccionar regiones concretas dentro de la
molcula de ADN para estudios determinados, el nmero de polimorfismos
detectables es tericamente ilimitado y permiten analizar tanto la informacin que
se expresa como la que no lo hace (Henrquez, 2000), por lo tanto son tiles para
medir la diversidad gentica en plantas y animales. La diversidad
gentica mantiene un reservorio de condiciones de variacin de respuesta al
15

Ovalle Tatiana, Alvarez Elizabeth, Meja Juan Fernando, Gonzlez Alonso. Programa Frutas
Tropicales, Centro Internacional de Agricultura Tropical.

147

medio ambiente, que permite la adaptacin y la supervivencia. Ante ello, la

importancia de conocer y caracterizar a los individuos de una especie. Este trabajo
tuvo como objetivo caracterizar molecularmente accesiones de Lulo (Solanum
quitoense) provenientes de Ecuador, utilizando la tcnica basada en microsatlites
denominada RAMs.
2.2.1.2. Metodologa
Cuantificacin ADN
Se utiliz el ADN de 51 accesiones de Lulo provenientes de Ecuador. El ADN se
re suspendi en TE 1mM y se visualiz en geles de agarosa al 0.8%, teidos con
Sybr Safe, para constatar su calidad. La cuantificacin se realiz en Nano drop
2000c, todas las muestras se llevaron a una dilucin de 5 ng/l. Para evaluar la
diversidad gentica se utilizaron ocho cebadores tipo RAMs sintetizados por
Technologies Inc reportados como polimrficos para este tipo de estudios en
Rubus spp, (Morillo et al, 2005), Psidium guajava (Sanabria et al, 2006), Physalis
(Bonilla & Espinosa, 2003) (Tabla 22).
Tabla 22. Cebadores utilizados en la tcnica RAMs

Las siguientes designaciones se usaron para los sitios degenerados: H (A T

C); B (G T C); V (G A C) y D (G A T).
Amplificacin ADN
Para la reaccin de amplificacin con microsatlites RAMs se prepar el cctel en
un tubo estril de microcentrfuga (1.5 ml) para un volumen final de 12.5 l. La
mezcla de reaccin se prepar con Go Taq Green Master Mix 2X la cual contiene
buffer, MgCl2 3mM, DNTPs 400M c/u , Taq Polimerasa 1 U/ l, cebador 10 M y
ADN genmico 5 ng/l. La amplificacin se llev a cabo en un termociclador (PTC 100 Programmable Termal Controller de M. J Research Inc). Los programas para
la amplificacin variaron dependiendo del cebador. En cada grupo de muestras
para amplificacin se incluy un control negativo para detectar posible
contaminacin (Hantula et al., 1997). El producto amplificado se observ mediante
electroforesis en geles de agarosa al 1.8% a 80 voltios durante 3 a 6 horas
dependiendo del cebador, visualizndose con luz ultravioleta en un
transiluminador, y posteriormente se fotografi.

148

Anlisis Estadstico
Se gener una matriz binaria que represent la ausencia de banda como cero (0)
y la presencia como uno (1). Se calcul el ndice de similaridad de DICE y se
realiz el anlisis de clster por el mtodo UPGMA el cual gener un dendograma
utilizando el paquete estadstico NTSYS pc versin 2.1. La representacin
multidimensional de los individuos se realiz con un anlisis de correspondencia
mltiple generado mediante el programa estadstico SAS.
2.2.1.3. Resultados y Discusin
La visualizacin del ADN de las 51 accesiones mostr 44 ADNs con
concentraciones mayores a 10 ng/l. (figura 76)

Figura 76. ADNs de lulo provenientes de Ecuador

Un total de 49 individuos fueron caracterizados con los ocho primers. Se gener

una matriz binaria con 9408 entradas, de las cuales 1919 fueron bandas presentes
y 7489 ausentes. El nmero de bandas por cebador vari de 15 para CCA hasta
33 para CGA (Tabla 23). Las bandas amplificadas tuvieron pesos moleculares
ente 300 y 1600 pb (Figura 77).

149

M 2
6 8 9 11 12 14 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 27 29 30 31
32 33 35 36 37 39 40 M
M

74

42

75

45 49 56 57

76

77

78 B

58

60

61

63

64

66 67

68

69 70

71

72

73

Figura 77. Patrones de bandas en Lulo generados por el cebador RAMs CCA. M: marcador de
peso Hyper Ladder II, B: Control Negativo.
Tabla 23. Bandas totales con cada uno de los cebadores.

Cebador

N de
bandas
Totales

CA
CCA
ACA
CT
TG
GT
CGA
AG

24
15
24
15
19
31
33
31

N
bandas
con freq.
>=10%
17
12
24
14
15
27
26
26

% de
bandas
Frecuentes

% de
bandas
Escasas

71
80
100
93
79
87
79
84

30
20
0
7
21
13
21
16

El anlisis de la matriz binaria dio como mostr dos cebadores con caractersticas
importantes en la caracterizacin de materiales de lulo; el primero de ellos es el
CA que present un total de 24 bandas donde el 30 % de estas son bandas
escasas, que permiten encontrar regiones genticas poco comunes y as
diferenciar dos genotipos. El segundo cebador es el ACA con 24 bandas y un
100% de bandas frecuentes, el cual es til para determinar qu tan similar es una
poblacin.

150

Grupos

0.10

1
4
21
22
25
27
28
29
46
48
47
7
8
9
13
23
26
34
49
33
35
39
45
3
6
37
38
2
43
11
19
16
12
18
20
36
40
42
44
41
10
14
17
15
5
24
30
31
32
0.20

0.30

0.40

0.50

0.60

0.70

0
.
0
.

1
.D
i

0.80

Coefficient

Figura 78. Dendograma de la estructura gentica de 49 accesiones de Lulo basado en el

Coeficiente de Similitud de DICE, calculado a partir de los datos combinados de ocho primers
Microsatlites RAMs.

El anlisis mediante el coeficiente DICE, a un nivel de similitud de 0.34 estableci

6 grupos bien definidos (A,B,C,D,E y F) y un ltimo grupo (G*), muestra 4
individuos no relacionados (fig. 78). El dendograma de la estructura gentica
establece una alta variabilidad en las accesiones de lulo presentes en el estudio y
sugiere 49 haplotipos (individuos con estructura gnetica idntica que presentan
por lo menos una banda de diferencia frente a otro individuo, al utilizar tcnicas
moleculares). El anlisis de correspondencia mltiple con RSQ del 83.2% separ
las accesiones de Lulo en siete grupos (tabla 24) y permiti obtener la
representacin multidimensional de los individuos. (Figura 79 y 80).
Tabla 24. Accesiones de Lulo pertenecientes a cada uno de los grupos.

Grupo
1
2
3
4
5
6
7

Accesiones
46,48,25,33,39,49,4,27,29,28,47,22,26,34,21
10,15,14,41,44,5,40,17
2,20,43,16,18,11,19
37,38,3
36,9,1
6
13

151

Figura 79. Representacin bidimensional de las accesiones de Lulo generado a partir del ACM.

Figura 80. Representacin tridimensional de las accesiones de Lulo generado a partir del ACM.

Para interpretar estos resultados se sugiere agregar datos morfo agronmicos y

de distribucin geogrfica, que permita establecer alguna relacin funcional entre
los grupos formados que se muestran en el dendograma y en el Anlisis de
correspondencia Mltiple. De esta manera los grupos genticos obtenidos pueden
ser ajustados, como en el caso de los grupos 6 y 7 y su relacin con el 2 y 5
respectivamente (Fig. 79).

152

2.2.1.4. Conclusiones
De los resultados obtenidos en el estudio se concluye que el anlisis
intraespecfico con marcadores RAMs (Microsatlites Amplificados al Azar)
permiti detectar la variabilidad gentica entre las accesiones de lulo (Solanum
quitoense X S ?). Se determin que los cebadores ACA y CA producen un alto
poliformismo y resultaron tiles en el establecimiento de las relaciones entre las
accesiones. Por lo tanto, los RAMS es una herramienta til a la hora de evaluar la
diversidad gentica en poblaciones naturales.
2.2.1.5. Bibliografa
Bonilla B., M.l; Espinosa P, K. 2003 Coleccin, caracterizacin fenotpica y molecular de
poblaciones de uchuva Physalis peruviana L. Trabajo de grado Ing Agr. Universidad Nacional de
Colombia, Sede Palmira.
Hantula, J.; Dusabenyagasani, M.; Hamelin, R. C. 1997. Random Amplifield Microsatellites (RAMS)
a novel method for characterizing genetic variation within fungi. Eur. J. For. Path. 26 : 159 166.
Henrquez N. M A. 2000. Diversidad gentica de Phaeoisariopsis griseola (Sacc) Ferraris,
utilizando marcadores moleculares. Trabajo de grado Ing Agr. Universidad Nacional de Colombia,
Sede Palmira. 101 p.
Morillo, A. et al. Caracterizacin molecular con microsatlites aleatorios RAMs de la coleccin de
mora, Rubus spp., de la Universidad Nacional de Colombia, sede Palmira. Acta Agronmica,
Colombia. Vol. 54, No. 2 (2005); p. 15-24
Sanabria, h. et al. Caracterizacin molecular con marcadores RAM de rboles nativos de Psidium
guajava (guayaba) en el valle del Cauca. Acta Agronmica. Vol. 55, No 1(ene-mar.2006)

2.2.2. Caracterizacin
agro-morfolgicamente
de
clones
y
segregantes de 39 cruzamientos interespecficos de naranjilla
para identificar materiales promisorios con caractersticas de
resistencia y/o tolerancia a plagas y enfermedades, alta
productividad y buena calidad del fruto. san francisco - la clica
- pichincha, 20081617
Objetivo del proyecto (2): Caracterizar las colecciones de germoplasma, por
variabilidad gentica y resistencia a plagas y enfermedades de mayor
importancia.
Objetivo del proyecto (4): Evaluar el comportamiento, calidad y rentabilidad de
los clones lites seleccionados, bajo diferentes sistemas de produccin dirigida a
diferentes mercados.

17

Pal Gmez, Pablo Viteri, Juan Len, Wilson Vsquez Resumen de Tesis de Grado previo a la obtencin del Ttulo de
Ingeniero Agropecuario.

153

2.2.2.1. Objetivos
Objetivo General
Identificar materiales de los cruzamientos interespecficos con caractersticas
de resistencia y tolerancia a (Fusarium oxysporum) y Nemtodos
(Meloidogyne incognita), productividad y buena calidad del fruto.
Objetivos Especficos
Describir agro-morfolgicamente 147 clones y segregantes de 39
cruzamientos interespecficos de naranjilla en el noroccidente de Pichincha,
sector de San Francisco.
Realizar el anlisis de los frutos en los clones y segregantes de los 39
cruzamientos interespecficos de naranjilla para determinar la calidad de la
fruta.
Seleccionar materiales promisorios con base a resistencia y/o tolerancia a
(Fusarium oxysporum), Nemtodos (Meloidogyne incognita), Antracnosis del
fruto (Colletotrichum gloeosporioides), lancha negra (Phytophthora infestans),
Barrenador del fruto (Neoleucinodes elegantalis) y Barrenador del Tallo
(Faustinus apicalis) principalmente, con alta productividad y calidad del fruto.
2.2.2.2. Marco Referencial
La naranjilla (Solanum quitoense Lam.) en la actualidad constituye un cultivo de
consumo popular y de gran importancia econmica, transformndose en la
segunda especie ms cultivada despus del banano en el Ecuador, a pesar de
que no ha alcanzado su potencial desarrollo tecnolgico (INEC, 1992).
Naranjilla, Lulo o lulum para los incas, es una planta originaria de los bosques
hmedos de los Andes de Amrica del Sur especficamente Colombia, Ecuador y
Per de regiones frescas y sombreadas (CORPOICA, 2002). Este cultivo tiene
gran potencial econmico por sus rentabilidades altas y aceptacin en el mercado.
Segn Fiallos (2000), si el cultivo tuviera un manejo adecuado y tecnificado podra
llegar a generar una rentabilidad alta (164 %), mientras que Revelo (2003) estima
una rentabilidad de 124%. Para Castaeda (1995), el producto tiene una excelente
aceptacin en los mercados extranjeros, ya que los consumidores extranjeros
prefieren diversificar su consumo de frutas tradicionales a exticas (naranjilla,
babaco, pia, etc.); adems, segn Villachica (1996), existe gran aceptacin de los
turistas que prueban la naranjilla, brindando oportunidades para la exportacin de
jugos, concentrados, congelados, etc. Por ltimo, el gran nmero de emigrantes
de los pases productores de naranjilla, representan una estupenda demanda
internacional, la cual facilitara la introduccin del producto en el mercado
extranjero.
Una de las causas para la disminucin de la produccin, segn Revelo (2003), es
la susceptibilidad del cultivo a plagas y enfermedades, tales como gusano del fruto

154

(Neoleucinodes elegantalis), barrenador de la raz (Faustinus apicalis) y del tallo

(Alcidion sp.), lancha (Phytophthora sp.), marchitez vascular (Fusarium sp.),
nemtodos (Meloidogyne sp.), los cuales an no han sido controlados.
Otra problemtica del cultivo, segn Soria (1996), es el uso indiscriminado de
pesticidas, la falta de tecnologa en control de malezas y en el manejo del cultivo,
incrementado los costos y bajando la rentabilidad. Toda esta problemtica, obliga
al agricultor a utilizar terrenos de montaa virgen, para as disminuir la
problemtica de plagas y enfermedades e incrementar la produccin, generando
un problema de deforestacin y de rpida erosin del suelo, lo cual no es
sustentable para las zonas en las que se desarrolla la naranjilla (Revelo, 2003).
El desarrollo de hbridos interespecficos como Puyo y Palora (S. sessiliflorum x S.
quitoense) han permitido la continuidad del cultivo (Heiser, 1993), aunque se ha
desmejorado la calidad de la fruta. Actualmente el hbrido Puyo es cultivado en el
60% de la superficie de naranjilla en la Amazona y es el de mayor distribucin y
consumo (ECORAE, 2001; Fiallos, 2000), lamentablemente para mejorar el
tamao de los frutos se realizan aplicaciones de 2-4D, producto hormonal
perjudicial para la salud debido a la produccin de toxinas cancergenas (Revelo, y
Sandoval, 2003; Soria, 1996; Lucio, y Espn, 1997). Trabajos recientes realizados
por Ochoa y Gallardo (2005) y observaciones de campo en huertos de Saloya
(INIAP, 2006), demuestran adems la prdida de resistencia de este hbrido a
Fusarium oxysporum.
2.2.2.3. Metodologa
La fase de campo se realiz en la localidad de San Francisco, Parroquia La Clica
del Cantn Pedro Vicente Maldonado de la Provincia de Pichincha. Sitio que de
acuerdo a la ubicacin satelital, est ubicado a una altitud de 815 m.s.n.m a una
latitud 0 9 29 N y una Longitud de 78 97 14 W. Tiene una precipitacin
promedio anual de 2 500 mm, una temperatura promedio anual de 21, 5 C, una
humedad relativa de 90 % ubicado en un zona ecolgica Bosque Hmedo
Montano Bajo (bhMB), (Caadas, 1992). Una caracterstica importante del suelo
es que predomina la textura franca con un contenido de materia orgnica del 6.3%
y con un pH cido de 5.3 (Segn anlisis de suelo realizado el 29/08/2007- INIAP).
Se evaluaron segregantes de 39 cruzamientos.
En la caracterizacin Agro-morfolgica se emple el Anlisis Multivariado pues
con la informacin que se gener de la caracterizacin y evaluacin de las
colecciones, se implement mtodos de investigacin cuantitativa mediante
estadsticas tiles bajo el sistema de Anlisis Estadstico con el software
Statistical Packet for Social Science, (SPSS), el cual ayuda a medir la
variabilidad gentica o conocer que tan variables son las accesiones a travs de la
similitud o diferenciacin de los rasgos que caracterizaron a cada una de ellas.
(IICA, 2006). Estas tcnicas estadsticas multivariadas son herramientas muy
tiles debido a que nos ayuda a caracterizar las accesiones, debido a que
permiten describir o agrupar el conjunto de cruzamientos, tomando en cuenta
simultneamente varias caractersticas, sin dejar de considerar la relacin que

155

existir entre todos los caracteres en estudio. Para esto se hizo un anlisis
estadstico descriptivo, en el cual se involucran medidas de tendencia central
como media aritmtica, desviacin tpica y coeficiente de variacin.
Adems se requiri:
Matriz de Similitud (Distancia de Gower). (GOWER, 1967).
Anlisis de agrupamiento (Mtodo de Ward). (WARD, J. 1963).
Determinacin de variables discriminantes entre grupos (ENGELS, J. 1983).
Las variables evaluadas fueron: Inicio de la floracin (Das); Primer cuajado de
frutos (Das); Madurez fisiolgica del fruto (Das); Altura de la planta (metros);
Dimetro del tallo (centmetros); Presencia de espinas en el tallo (Si/No); Tamao
de las espinas en el tallo (milmetros); Nmero de espinas en el tallo (nmero);
Tamao de la hoja (centmetros); Presencia de espinas en la hoja (Si/No); Color
de la hoja; Presencia de flores con pistilo corto y flores con pistilo largo (Si/No);
Nmero de inflorescencias/rama/planta (nmero); Nmero de flores por
inflorescencia (nmero); Nmero de frutos cuajados por inflorescencia (numero);
Fructificacin (%); Nmero de frutos cados por inflorescencia (nmero); Forma del
fruto; Peso de frutos cosechados (g); Rendimiento promedio por planta (kg/plt.);
Tamao del fruto (mm); categora del fruto; Color de la pulpa; Porcentaje de
slidos solubles (SS); Resistencia de pulpa al penetrmetro (kgf/cm2);
Palatabilidad; Color del jugo; Incidencia de la marchites vascular (Fusarium
oxysporum); Presencia de Barrenador del fruto (Neoleucinodes elegantalis);
Incidencia y Severidad de nematodos (Meloidogyne incognita); Poblacin de
Nematodos (Meloidogyne incognita)
2.2.2.4. Resultados y discusin
Caracterizacin Agro-morfolgica de la Coleccin
Los resultados obtenidos del anlisis estadstico de los descriptores agronmicos
y morfolgicos evaluados en la coleccin de naranjilla del Programa de
Fruticultura-INIAP, se detallan a continuacin:
Agrupamiento de la Coleccin
La consecuencia del Agrupamiento Jerrquico de Ward (1963) obtenido a partir de
la matriz de distancia formada por el algoritmo de Gower (1967) (Anexo A)
muestra las relaciones entre los pares gnicos de los materiales evaluados, ellas
contienen distancias que son muy prximas o similares entre las accesiones que
van a ser representados por el Dendograma en la Coleccin de Naranjilla (S.
quitoense Lam.) del INIAP, Programa de Fruticultura, en donde se identific tres
conglomerados o grupos en 58 materiales que corresponden al 100% de los
materiales evaluados en la coleccin, obtenindose en el Grupo # 1, con 38

156

materiales, el Grupo # 2 con 19 materiales y el Grupo # 3 conformado por 1

material.
En el cuadro 1 observamos la formacin de tres grupos, los cuales en el grupo # 2
y # 3, tenemos la formacin de subgrupos que se relacionan entre los materiales
lo cual nos indica que cada uno de estos, tiene caractersticas agronmicas o
morfolgicas muy similares ya que son fruto de cruzamientos con especies de la
seccin Lasiocarpa.
Cuadro 1. Materiales pertenecientes a los grupos formados del anlisis jerrquico de ward, en la
caracterizacin agro-morfolgic a de clones y segregantes de cruzamientos interespecficos de
naranjilla, 2009.

Cdigo

Cruzamientos

GTP1

S.quitoense x S vestissimum

GTP11

4n Puyo x 4n Palora DC P1-1

GTP16

S quitoense var.Baeza

GTP17

S.quitoense var. Dulce x S.vestissimum

GTP2

S.quitoense x S hyporhodium

GTP20

(S.quitoense x S.hyporhodium) S.quitoense var.Dulce

GTP21

S.quitoense x S.hyporhodium) x S.quitoense

GTP23

(S.quitoense x S.hyporhodium) x S.quitoense var.dulce (estaca)

GTP24

Desconocido (PGV-24)

GTP25

S.quitoense x S.hyporhodium (estaca)

GTP28

S.quitoense x S.hyporhodium x S.quitoense var.dulce (estaca)

GTP29

S.quitoense x S.vestissimum (estaca)

GTP3

S. quitoense var.Peluda x S.vestissimum

GTP30

S.quitoense var.Peluda x S.quitoense var.Dulce x S.vestissimum

GTP31

S.quitoense x S.hyporhodium (estaca)

GTP32

S.hyporhodium x S.quitoense var.Dulce

GTP36

S. quitoense var.Baeza x S.quitoense x S.vestissimum

GTP38

S.quitoense x S.hyporhodium F1 x S.quitoense F1

GTP5

(S.quitoense x S.hyporhodium) S.quitoense var.dulce

GTP9

S.vestissimum x S.quitoense F1)x S.quitoense BF1

GTP40P1F12

(S.quitoense x S.hyporhodium) x S.quitoense var.Dulce

GTP41P2F1

(S.quitoense x S.hyporhodium)

GTP41P3F1

(S.quitoense x S.hyporhodium)

GTP41P4F1

(S.quitoense x S.hyporhodium)

GTP41P5F1

(S.quitoense x S.hyporhodium)

GTP41P6F1

(S.quitoense x S.hyporhodium)

GTP41P7F1

(S.quitoense x S.hyporhodium)

Grupos
Morfolgicos

Grupo 1

157
GTP42P1F2

S.quitoense var. Dulce x S.vestisssimum

GTP42P1F3

S.quitoense var. Dulce x S.vestisssimum

GTP42P2F2

S.quitoense var. Dulce x S.vestisssimum

GTP42P3F2

S.quitoense var. Dulce x S.vestisssimum

GTP42P4F2

S.quitoense var. Dulce x S.vestisssimum

GTP42P5F2

S.quitoense var. Dulce x S.vestisssimum

GTP43P1F4

S.quitoense x S.vestissimum

GTP43P4F4

S.quitoense x S.vestissimum

GTP43P5F4

S.quitoense x S.vestissimum

GTP45P2F6

S.quitoense var.Peluda

GTP45P4F6

S.quitoense var.Peluda

GTP14

S.vestissimum x S.quitoense F1) (S.quitoense F1)

GTP15

(S.quitoense x S.hyporhodium) x S.quitoense

GTP18

S.quitoense var.Dulce x S.vestissimum (estaca)

GTP26

S.vestissimum x S.quitoense F1 x S.quitoense FB1

GTP33

S.vestissimum x S.quitoense F1)x S.quitoense BF1

GTP37

4n Palora x 4n Puyo (E x P)

GTP39

S.quitoense x S.vestissimum (semilla)

GTP6

(S.vestissimum x S.quitoense F1) (S.quitoense F1B1)

GTP7

(S.quitoense x S.hyporhodium) x S.quitoense

GTP40P2F12

(S.quitoense x S.hyporhodium) x S.quitoense var.Dulce

GTP40P4F12

(S.quitoense x S.hyporhodium) x S.quitoense var.Dulce

GTP40P5F12

(S.quitoense x S.hyporhodium) x S.quitoense var.Dulce

GTP41P1F1

(S.quitoense x S.hyporhodium)

GTP42P3F3

S.quitoense var. Dulce x S.vestisssimum

GTP43P2F4

S.quitoense x S.vestissimum

GTP43P3F4

S.quitoense x S.vestissimum

GTP45P1F6

S.quitoense var.Peluda

GTP46P1F8

S.quitoense var.Baeza

GTP46P2F8

S.quitoense var.Baeza

GTP22

4n Puyo x 4n Palora

Grupo 2

Grupo 3

En el Cuadro 1, tenemos los 58 materiales que fueron evaluados de toda la

coleccin que se plant en campo, cada uno pertenece al grupo morfolgico de
acuerdo las caractersticas que fueron muy similares dentro de ellos.
Valores Discriminantes en los Caracteres
Los parmetros estadsticos usados para la seleccin de los descriptores
discriminantes cualitativos y cuantitativos se detallan a continuacin.

158

Caracteres Cuantitativos
Cuadro 2. Parmetros usados para la estimacin del valor discriminante en caracteres cuantitativos
de la caracterizacin agro-morfolgica de clones y segregantes de cruzamientos interespecficos
de naranjilla, 2009.

Caracteres

Pi

Cram ers V

Inicio de Floracin

81,66 **

1,19

0,84

Cuajado de frutos

101,05 **

1,32

0,94

Madurez Fisiolgica

111,42 **

1,39

0,98

Altura Planta

97,68 **

1,29

0,92

Dimetro tallo

109,13 *

1,37

0,97

Flor masculina

23,61 ns

0,64

0,45

Flor femenina

23,26 ns

0,63

0,45

Nmero de Inflorescencias

21,28 ns

0,6

0,43

Flores/inflorescencias

77,81 **

1,16

0,82

Frutos/inflorescencias

11,05 ns

0,44

0,31

% Fructificacin

98,45 **

1,3

0,92

Frutos Cados

9,64 ns

0,41

0,99

Frutos Cosechados

10,37 ns

1,37

0,97

Peso del Fruto

92,34 **

1,26

0,89

Dimetro de fruta

97,84 **

1,3

0,92

Resistencia Penetrmetro

39,95 *

0,83

0,59

Grados Brix

45,51 *

0,92

0,65

Rendimiento/planta

106,48 **

1,36

0,96

Incidencia Fusarium

61,8 *

1,03

0,73

Incremento Nematodos

10,01 ns

0,42

0,29

Incidencia del Perforador

35,52 *
Carcter de mayor valor discriminante
** Altamente significativo al 1% de probabilidad
* Significativo al 5% de probabilidad
ns No significativo

0,78

0,55

En el Cuadro 2, se detallan los resultados de la prueba de X para determinar cul

de los descriptores es el ms discriminante, consiguiendo as, nueve caracteres
altamente significativos al 1 %, cinco significativos al 5 % y siete caracteres no
significativos, adems se obtuvo el coeficiente de asociacin (Pi) y Cramer`s (V)
de los caracteres cuantitativos.
Se establecieron nueve caracteres discriminantes por ser altamente significativos
segn la prueba de Chi cuadrado y son: Inicio de Floracin (81.66 das), Madurez
Fisiolgica del Fruto (101.05 das), Cuajado de Frutos (111.42 das), Altura de
planta (97.68 m), Flores por Inflorescencia (77.80 flores), Porcentaje de
Fructificacin (98.45 %), Peso del Fruto (92.34 g), Dimetro del Fruto (97.84 mm),

159

Rendimiento por Planta (106.48 kg/plt), confirmando que estos descriptores son
convenientes para la caracterizacin morfolgica de germoplasma de naranjilla.
Segn la prueba de Cramers los descriptores de mayor valor fueron: Nmero de
frutos cados (0.99), Madurez Fisiolgica del fruto (0.98), Dimetro del tallo (0.97),
Frutos cosechados (0.97), Rendimiento/planta (0.96) y Cuajado de frutos (0.94) los
que establecen una alta contribucin para separar grupos genticos. Se evaluaron
21 caracteres cuantitativos, los mismos que no presentaron discriminancia alguna
para separar los grupos.
Cabe mencionar que para el descriptor Rendimiento/planta, los datos se tomaron
durante todo el tiempo cosecha mientras la coleccin estuvo en buen estado y
tuvo un periodo de nueve meses de donde se pudo obtener la informacin
necesaria para la caracterizacin.
Caracteres Cualitativos
Cuadro 3. Frecuencia relativa del anlisis de agrupamiento jerrquico de ward segn los caracteres
cualitativos de alto poder discriminante en la caracterizacin agro-morfolgica de clones y
segregantes de cruzamientos interespecficos de naranjilla, 2009.
Grupos Jerrquicos
Caracteres Cualitativos

Grupo 1
N

Grupo 2

Grupo 3
%

Total

Presencia de
espinas

no

19

52,78

16

44,44

2,78

100,00

si

19

86,36

13,64

0,00

100,00

Espinas en
Haz

no

21

55,26

16

42,11

2,63

100,00

si

17

85

15

0,00

100,00

Espinas en
Envs

no

22

57,89

15

39,47

2,63

100,00

si

16

80,00

20

0,00

100,00

Espinas en
Nervadura

no

21

56,76

15

40,54

2,70

100,00

si

17

80,95

19,05

0,00

100,00

Verde Claro

25

78,13

21,88

0,00

100,00

Verde Oscuro

13

50,00

12

46,15

3,85

100,00

Color de
Nervadura

Verde Claro

40,00

40

20,00

100,00

Violeta

36

69,23

16

30,77

0,00

100,00

Forma del

Esfrico

19

55,88

14

41,18

2,94

100,00

6.92

5,23

3,02

3,65

Color de Hoja

5,54

13,38

4,21

160
Fruto

Ovalado

14

87,50

12,50

0,00

100,00

Color de la
Pulpa

Verde Oscuro

18

100,00

0,00

0,00

100,00

Verde Claro

19,05

17

80,95

0,00

100,00

Aroma del
Jugo

Excelente

19

63,33

10

33,33

3,33

100,00

Muy Bueno

18

66,67

33,33

0,00

100,00

Dulce

12

63,16

36,84

0,00

100,00

Agridulce

50,00

50,00

0,00

100,00

Agrio

100,00

0,00

0,00

100,00

Sabor del
Jugo

Tamao del
Fruto

Mayor 6.5

0,00

0,00

100,00

100,00

6 - 6.4

25

67,57

12

32,43

0,00

100,00

Menor 6.5

13

65,00

35,00

0,00

100,00

24,25

1,18

2,44

20,14

En los diez caracteres cualitativos discriminantes evaluados (Cuadro 3), resultaron

altamente significativos segn la prueba de X pues expresa la variabilidad dentro
de cada grupo. Los descriptores cualitativos estn constituidos por varios estados
que expresan la variabilidad de la coleccin esta relacin de los agrupamientos
con los estados de los caracteres de mayor poder discriminante permite
comprender con facilidad la naturaleza de los materiales dentro de cada
agrupamiento. Los descriptores como la presencia de espinas en el tallo,
presencia de espinas en el haz de la hoja, presencia de espinas en el envs de la
hoja, espinas en la nervadura pueden ser una caracterstica de inters debido a
las dificultades para la cosecha. Es en este sentido que se deben hacer trabajos
para que esto no sea un problema para el agricultor.
El color de la hoja, el color de la nervadura y la forma del fruto presentan un alto
valor en el X (5.54, 13.38 y 4.21 respectivamente) debido a que cada material
proviene de materiales silvestres, estos poseen un color caracterstico que los
diferencia del resto y es por eso que hay marcados contrastes entre ellos. Para el
color de la pulpa, presencia de aroma y el sabor de la fruta son caractersticas de
importancia por el valor comercial y que son parte del establecimiento de
parmetros en la calidad para el consumidor local e internacional, en el caso
particular del color de la pulpa observamos que el X es alto y esto responde a que
como dijimos anteriormente, estos provienen de cruzamientos con materiales
silvestres que tienen marcada variabilidad en el color de la pulpa que
genticamente vienen predispuestos a mostrar una variacin en el color a esto hay
que aadir la presencia de factores externos como del medio ambiente en donde
algunos seres vivos juegan un papel importante en la hibridacin natural que
ocurre en la naturaleza diariamente.

161

Con el anlisis de los descriptores cualitativos ms discriminantes, a continuacin

se realiza una relacin en cada uno en los tres Grupos formados.
a) Presencia de Espinas en el Tallo

Grfico 9. Porcentajes de la presencia o ausencia de espinas en el tallo en la caracterizacin agromorfolgica de clones y segregantes de cruzamientos interespecficos de naranjilla, 2009.

Del total de materiales evaluados sin espinas el Grupo 1 tiene 52.78 %, para el
Grupo 2 con un 44.44 % y el Grupo 3 con 2.78 %. De los materiales con espinas,
el Grupo 1 present el 86.36 % y en el grupo 2 con el 13.64 %. (Grfico 9).
b) Espinas en el Haz de la Hoja

Grfico 10. Porcentajes de la presencia o ausencia de espinas en el haz de la hoja en la

caracterizacin agro-morfolgica de clones y segregantes de cruzamientos interespecficos de
naranjilla, 2009.

Del total de materiales evaluados sin espinas en el haz de la hoja, el Grupo 1 tiene
55,26 %, para el Grupo 2 con un 42.11 % y el Grupo 3 con 2.63 %. De los
materiales con espinas, el Grupo 1 present el 85.00 % y en el grupo 2 con el
15.00 %. (Grfico 10).

162
c) Espinas en el Envs de la Hoja

Grfico 11. Porcentajes de la presencia o ausencia de espinas en el envs de la hoja en la

caracterizacin agro-morfolgic a de clones y segregantes de cruzamientos interespecficos de
naranjilla, 2009.

Del total de materiales evaluados sin espinas en el envs de la hoja, el Grupo 1

tiene 57.89 %, para el Grupo 2 con un 39.47 % y el Grupo 3 con 2.63 %. De los
materiales con espinas, el Grupo 1 present el 80.00 % y en el grupo 2 con el
20.00 %. (Grfico 11).
d) Espinas en la Nervadura en la Hoja

Grfico 12. Porcentajes de la presencia o ausencia de espinas en la nervadura de la hoja en la

caracterizacin agro-morfolgic a de clones y segregantes de cruzamientos interespecficos de
naranjilla, 2009.

Del total de materiales evaluados sin espinas en la nervadura de la hoja, el Grupo

1 tiene 56.76 %, para el Grupo 2 con un 40.54 % y el Grupo 3 con 2.70 %. De los
materiales con espinas, el Grupo 1 present el 80.95 % y en el grupo 2 con el
19.05 %. (Grfico 12). Segn Vivar (1968), la ausencia o presencia de espinas en
las diferentes estructuras de la naranjilla es de carcter hereditario de acuerdo con
los materiales que se hayan hecho los retrocruzamientos, la presencia de espinas

163

se muestra como dominante a comparacin de la ausencia, se considera

tentativamente que el carcter espinas es de herencia simples o de herencia
monognica.
e) Color de la Hoja

Grfico 13. Porcentajes del color en la hoja para la caracterizacin agro-morfolgica de clones y
segregantes de cruzamientos interespecficos de naranjilla, 2009.

Del total de materiales evaluados el color verde claro en la hoja, el Grupo 1 tiene
78.13 %, para el Grupo 2 con un 21.88 %. De los materiales con un color verde
oscuro en la hoja, el Grupo 1 present el 50.00 %, el grupo 2 con el 46.15 % y el
Grupo 3 con el 3.85 %. (Grfico 13).
f)

Color de la Nervadura de la Hoja

Grfico 14. Porcentajes del color de la nervadura de la hoja para la caracterizacin agromorfolgica de clones y segregantes de cruzamientos interespecficos de naranjilla, 2009.

Del total de materiales evaluados el color verde claro en la nervadura de la hoja, el

Grupo 1 tiene 40.00 %, el Grupo 2 con un 40.00 % y el Grupo 3 con el 20.00 %.

164

De los materiales con el color Violeta en la nervadura de la hoja, el Grupo 1

present el 68.23 % y el grupo 2 con el 30.77 %. (Grfico 14). El color de las hojas
y las nervaduras son un carcter que muestra la diferencia entre los materiales
as, el hibrido Puyo presenta hojas y nervadura de color verde claro a diferencia de
la naranjilla de jugo o Baeza que tiene un color verde oscuro intenso y con el color
de la nervadura violeta hace que en varios materiales se presentes estas
diferencias debido a la proveniencia segn sus progenitores.
g) Forma del Fruto

Grfico 15. Porcentajes de la Forma del Fruto para la caracterizacin agro-morfolgica de clones y
segregantes de cruzamientos interespecficos de naranjilla, 2009.

Del total de materiales evaluados la forma de la fruta esfrica, el Grupo 1 tiene

55.88 %, para el Grupo 2 con un 41.18 % y en el Grupo 3 con un 2.94 %. De los
materiales con la forma ovalada del fruto, el Grupo 1 present el 87.50 % y el
Grupo 2 con el 12.50 %. (Grfico 15). La variabilidad gentica de la seccin
Lasiocarpa, nos muestra la diversidad en sus frutos, el hibrido puyo muestra un
fruto de forma redonda, a comparacin de la Baeza que es un poco achatada en
sus polos es por eso que hay materiales que tienen caractersticas intermedias por
la variabilidad.

165
h) Color de la Pulpa del Fruto

Grfico 16. Porcentajes del color de la pulpa del fruto para la caracterizacin agro-morfolgica de
clones y segregantes de cruzamientos interespecficos de naranjilla, 2009.

Del total de materiales evaluados del color de la pulpa verde, el Grupo 1 tiene el
100.00 %. De los materiales con un color de la pulpa verde claro, el Grupo 1
present el 19.05 % y el Grupo 2 con el 80.95 %. Para el caso del Grupo 3, el
color de la pulpa de este material es muy caracterstico ya que se diferencia de los
dems grupos, su color es anaranjado gracias a uno de sus progenitores (variedad
Palora) se ha mantenido como dominante en esta caracterstica. (Grfico 16).
i)

Aroma del Jugo

Grfico 17. Porcentajes de aroma del jugo en el Fruto para la caracterizacin agro-morfolgica de
clones y segregantes de cruzamientos interespecficos de naranjilla, 2009.

Del total de materiales evaluados en la presencia de aroma del jugo excelente, el

Grupo 1 tiene 63.33 %, para el Grupo 2 con un 33.33 % y en el Grupo 3 con un
3.33 %. De los materiales con el aroma del fruto muy bueno, el Grupo 1 present
el 66.67 % y el Grupo 2 con el 3.33 %. En el Grupo 3, el aroma del jugo fue regular

166

debido a que an conserva la caracterstica de sus progenitores que en cuanto al

aroma del fruto sigue siendo regular o malo. (Grfico 17).
j)

Sabor del Jugo

Grfico 18. Porcentajes del sabor del Fruto para la caracterizacin agro-morfolgica de clones y
segregantes de cruzamientos interespecficos de naranjilla, 2009.

Del total de materiales evaluados sabor del jugo dulce del fruto, el Grupo 1 tiene
63.16 % y para el Grupo 2 con un 36.84 %. De los materiales con sabor agridulce,
el Grupo 1 present el 50.00 % y el Grupo 2 con el otro 50.00 %. Para el sabor
agrio del jugo, el Grupo 1 tiene el 87.90 % y el Grupo 2 con el 12.10 %. En el caso
del Grupo 3, este no pertenece a ninguna de las alternativas propuestas ya que su
sabor caracterstico debido a sus parentales es el sabor amargo. (Grfico 18).
Cuadro 4. Parmetros para la evaluacin de la variabilidad gentica en las variables cuantitativas
para la caracterizacin agro-morfolgica de clones y segregantes de cruzamientos interespecficos
de naranjilla, 2009.

Carcter

Mnim o

Mxim o

Prom edio

Desviacin
Estndar

Inicio de Floracin (das)

103

298

203,59

37,97

Madurez Fisiolgica (das)

136

318

229,43

39,74

Cuajado de frutos (das)

179

337

257,36

39,10

Altura Planta (m)

1,01

2,48

1,87

0,24

Dimetro tallo (mm)

2,5

7,8

4,35

1,05

Flor masculina

11

5,52

2,10

Flor femenina

12

5,59

2,70

Nmero de Inflorescencias

20

14,95

2,61

Flores/inflorescencias

26

13,72

3,68

Frutos/inflorescencias

11

5,84

2,32

% Fructificacin

15

87,5

44,57

18,57

167

Frutos Cados

1,40

1,04

Frutos Cosechados

335

88,60

77,53

Dimetro de fruta (mm)

27,9

64

51,73

7,06

Resistencia Penetrmetro (kg/lb)

1,9

10

5,20

2,63

Slidos solubles (grados brix)

6,8

17

12,03

1,81

Rendimiento/planta (kg/plt)

0,03

25,13

6,06

5,42

Incidencia Fusarium (%)

3,00

2,21

Incremento Poblacin Nematodos

3,2

0,47

0,62

Incidencia del Perforador (%)

94,7

53,41

22,49

En el Cuadro 4, se presenta el promedio de la desviacin estndar que al evaluar

21 caracteres cuantitativos, se obtuvo datos menores, entre menor sea ms
similares sern los genotipos en los grupos correspondientes del conjunto de
caracteres, es por eso que los datos obtenidos son muy homogneos. La
desviacin estndar promedio para las variables cuantitativas fue de 13.54, el
nmero de frutos cosechados tuvo la ms alta variacin con 39.74 y un promedio
de 88.60 frutos y la Altura de planta con la menor varianza de 0,24 con un
promedio de 1,87 m.
Anlisis Cannico
Se muestra la ubicacin espacial de las entradas basadas en ecuaciones
construidas a partir del coeficiente de Gower en el anlisis discriminante cannico
y las distancias de Mahalanobis
Figura 81. Anlisis cannico

Anlisis Cannico

Ubicacin espacial basadas en ecuaciones a partir del

algoritmo de Gower en el anlisis discriminante y las
muestra
el 50%
de la variabilidad gentica y separa
distancias de Mahalanobis.

La variable CAN 1
al Grupo 1
del Grupo 2, a una distancia de 11,683 mientras que la variable CAN 2 representa
el 50% de la variabilidad restante separando a los grupos Grupo 1 y Grupo 3 a una
distancia de 16,304 siendo los grupos ms alejados. Se observa tambin que el

168

Grupo 2 y Grupo 3 son los ms relacionados pues muestran una distancia de

9,595.
Anlisis de los Agrupamientos
El anlisis de agrupamiento Jerrquico de Ward form tres grupos de entradas
cada uno con sus respectivos Morfotipos que a continuacin, las caractersticas se
detallan en cada grupo formado.
GRUPO 1
Se obtuvieron 38 entradas en este grupo en donde se identificaron siete
morfotipos las cuales provienen de la parroquia de Nanegalito, en la zona de La
Armenia, Provincia de Pichincha y sus caractersticas son (Cuadro 5):
Cuadro 5. Caractersticas agro - morfolgicas del grupo 1 en la caracterizacin agro-morfolgica de
clones y segregantes de cruzamientos interespecficos de naranjilla, 2009.

GRUPO 1
Descriptor Cuantitativo

Descriptor Cualitativo

Min

Mx

Inicio de Floracin (das)

103

281

199,87

Presencia de espinas Tallo

SI

Cuajado de Frutos (das)

136

311

225,5

Espinas en Haz

NO

Madures Fisiolgica Fruto (das)

192

333

255,71

Espinas Envs

SI

Altura de planta (metros)

1,45

2,25

1,87

Espinas en Nervadura

SI

26

14,26

Color de Hoja

17,6

87,5

46

Peso de Frutos (g)

30

130

Dimetros de frutos (mm)

36
0,03

Flores x Inflorescencia (flores)

Porcentaje de Fructificacin (%)

Rendimiento planta (kg/plt)

Verde Claro

Color de Nervadura

Violeta

74,83

Forma del Fruto

Ovalado

64

51,61

Color de la Pulpa

Verde
Oscuro

25,1

6,35

Aroma de Jugo

Muy Bueno

Sabor del Jugo

Agrio

169

GRUPO 2
Las 19 entradas ubicadas en este Grupo, igualmente pertenecen al mismo sitio de
La Armenia, Provincia de Pichincha, la misma que se observan sus caractersticas
principales fueron (Cuadro 6):
Cuadro 6. Caractersticas agro - morfolgicas del grupo 2 en la caracterizacin agro-morfolgica de
clones y segregantes de cruzamientos interespecficos de naranjilla, 2009.

GRUPO 2
Descriptor Cuantitativo

Descriptor Cualitativo

Min

Mx

Inicio de Floracin (das)

120

298

211,68

Presencia de espinas Tallo

NO

Cuajado de Frutos (das)

145

318

238,53

Espinas en Haz

NO

Madures Fisiolgica Fruto (das)

179

337

206,47

Espinas Envs

NO

Altura de planta (metros)

1,01

2,48

1,85

Espinas en Nervadura

NO

19

12,32

26,7

80

43,28

Color de Nervadura

50

112

75,83

Forma del Fruto

Esfrico

Dimetros de frutos (mm)

27,9

60,5

51,43

Color de la Pulpa

Verde Claro

Rendimiento planta (kg/plt)

0,32

20,5

5,28

Aroma de Jugo

Bueno

Sabor del Jugo

Agridulce

Flores x Inflorescencia (flores)

Porcentaje de Fructificacin (%)
Peso de Frutos (g)

Color de Hoja Verde Oscuro

Verde Claro

GRUPO 3
En este grupo solo se encontr un solo material y sus caractersticas ms
relevantes segn nuestro anlisis, entradas de las cuales provienen asimismo de
la parroquia de Nanegalito, exactamente en La Armenia, Provincia de Pichincha
con sus caractersticas principales fueron (Cuadro 7).

170
Cuadro 7. Caractersticas agro - morfolgicas del grupo 3 en la caracterizacin agro-morfolgica de
clones y segregantes de cruzamientos interespecficos de naranjilla, 2009.

GRUPO 3
Descriptor Cuantitativo

Descriptor Cualitativo

Inicio de Floracin (das)

191

Presencia de espinas Tallo

NO

Madures Fisiolgica Fruto (Das)

206

Espinas en Haz

NO

Cuajado de Frutos (Das)

261

Espinas Envs

NO

Altura de planta (metros)

1,9

Espinas en Nervadura

Flores x Inflorescencia (Flores)

20,0

Color de Hoja

Porcentaje de Fructificacin (%)

65,0

Color de Nervadura

Peso de Frutos (g)

145,8

Forma del Fruto

Esfrico

Dimetro de frutos (mm)

62,2

Color de la Pulpa

Verde Anaranjado

Rendimiento por planta (kg/plt)

9,5

Aroma de Jugo

Regular

Sabor del Jugo

Amargo

NO
Verde Amarillento
Verde Claro

Anlisis de los Datos

Del anlisis de agrupamiento jerrquico de Ward, tenemos comparaciones entre
algunos caracteres que nos muestran las diferencias entre los grupos.
Cuadro 8. Comparaciones entre el inicio de floracin, cuajado de fruto y madurez fisiolgica de
frutos en la caracterizacin agro-morfolgica de clones y segregantes de cruzamientos
interespecficos de naranjilla, 2009.
Grupos Morfolgicos

Grupo 1

Mad_Fis_frut

38

38

38

Promedio

199,87

225,5

255,71

Mnimo

103

136

192

Mximo

281

311

333

38,25

38,43

37,83

Poblacin

19

19

19

Promedio

211,68

238,53

260,47

Mnimo

120

145

179

Mximo

298

318

337

38,10

42,61

43,41

Desviacin
estndar

Grupo 3

Cuaj_frut

Poblacin

Desviacin
estndar

Grupo 2

Inic_florac

Poblacin

Promedio

191

206

261

Mnimo

191

206

261

Mximo

191

206

261

171
Desviacin
estndar

En el Cuadro 8, se observa que en el Grupo 1 tenemos al inicio de floracin con

199.87 das, el cuajado de frutos de 225.5 das y la madures fisiolgica del fruto
con 255.71 das con una desviacin estndar promedio de 38.17. En el Grupo 2
tenemos que el inicio de floracin con 211.68 das, el cuajado de frutos de 238.53
das y la madures fisiolgica del fruto con 260.47 das con una desviacin
estndar promedio de 41.37
Para el Grupo 3 se presenta con un solo material con un inicio de floracin con
199.87 das, el cuajado de frutos de 225.5 das y la madures fisiolgica del fruto
con 255.71 das. Adems se observa que el Grupo 1 tiene menos das al Inicio de
floracin (199.87 das), Cuajado de frutos (225.5 das) y Madurez fisiolgica de
frutos (255.71 das), con coeficientes de variacin de 38.25%; 38.43% y 37.83%
respectivamente, estos datos indica que los materiales que pertenecen a este
grupo tienen mejor disposicin en campo que los otros dos grupos restantes,
teniendo as materiales que se pueden utilizar para reducir el nmero de das en la
produccin de fruta por planta, mucho antes que los hbridos que se comercializan
en los mercados actualmente.
Cuadro 9. Relaciones entre el largo y ancho de la hoja con el rendimiento por planta en la
caracterizacin agro-morfolgica de clones y segregantes de cruzamientos interespecficos de
naranjilla, 2009.

Grupos Morfolgicos

Grupo 1

Rend/plt (kg/plt)

38,00

38,00

38,00

Promedio

31,21

29,16

6,35

.00

.00

0.03

62.00

56.00

25.13

151,00

139,00

579,18

Poblacin

19,00

19,00

19,00

Promedio

20,13

18,85

5,28

.00

.00

0.32

44.56

44.21

20.50

156,70

150,46

476,56

Poblacin

1,00

1,00

1,00

Promedio

47,00

44,15

9,50

Mnimo

47.00

44.15

9.50

Mximo

47.00

44.15

9.50

Mnimo

Desviacin
estndar

Mnimo
Mximo
Desviacin
estndar

Grupo 3

Ancho hoja
(cm )

Poblacin

Mximo

Grupo 2

Largo hoja
(cm )

Desviacin
estndar

172

En el Cuadro 9, tenemos que el Grupo 1 presenta un largo y ancho de la hoja de

31.21 cm y 29.16 cm respectivamente con un rendimiento por planta de 6.35 kg.,
con una desviacin estndar de 145; el Grupo 2 hay un largo y ancho de la hoja
de 20.13 cm y 18.85 cm respectivamente y un rendimiento por planta de 5.28 kg.,
la desviacin estndar fue de 153.58 y el Grupo 3 nos muestra un largo de la hoja
de 47.00 cm, un ancho de la hoja de 44.15 cm., rendimiento de 9.5 kg/plt.
Se observa adems que el grupo 3 presenta mejores resultados as tenemos:
El largo de la hoja (47.00 cm) y ancho de la hoja (44.15 cm) est relacionada
directamente con el aumento en el rendimiento por planta (9.5 kg/plt); el grupo 3
presenta rendimientos mejores en comparacin al Grupo 1 (6,35 kg/plt) y el Grupo
2 (5.28 kg/plt)., la forma de reproduccin asexual o reproduccin por estaca,
acelera los procesos fisiolgicos de crecimiento o aumento de tamao de sus
estructuras, lo que provoca un rpido desarrollo de las clulas en este caso en
clulas de la hoja haciendo que los nutrientes, la cantidad de agua y luz sean
absorbidos de mejor forma por la planta gracias a una amplia superficie de la hoja,
vindose as reflejada en los altos niveles de produccin de fruta, estos adems
los incrementos en los tamaos de hojas tienen relacin en algunos casos con el
manejo agronmico, los factores climticos y variabilidad gentica de la planta.
(Vivar, H., 1968)
Cuadro 10. Relacin entre el nmero de flores por inflorescencia con el porcentaje de fructificacin
en la caracterizacin agro-morfolgica de clones y segregantes de cruzamientos interespecficos
de naranjilla, 2009.

Grupos Morfolgicos

Grupo 1

Frut_cosech
(n)

38

38

38

Promedio

14,26

46

90,55

Mnimo

17,6

Mximo

26

87,5

330

3,57

19,3

81,82

Poblacin

19

19

19

Promedio

12,32

43,28

84,32

Mnimo

26,7

Mximo

19

80

335

3,45

16,48

72,4

Poblacin

Promedio

20

65

96

Mnimo

20

65

96

Desviacin
estndar

Grupo 3

Fructific
(%)

Poblacin

Desviacin
estndar

Grupo 2

Flor/inflor (n)

173
Mximo

20

Desviacin
estndar

65

96

En la Cuadro 10, se muestra en el Grupo 1 tiene el nmero de inflorescencias de

14.26, el porcentaje de fructificacin de 46.00 % y los frutos cosechados de 90.55
con desviaciones estndares de 14.26 %, 46.00 % y 90.55 % respectivamente, en
el grupo 2, el nmero de inflorescencias con 12.32, el porcentaje de fructificacin
de 43.28 % y los frutos cosechados de 84.32 con desviaciones estndares de 3.45
%, 16.48 % y 72.40 % respectivamente y el nmero de inflorescencias de 20.00, el
porcentaje de fructificacin de 65.00 % y los frutos cosechados de 96 para el
grupo 3, este presenta mejores resultados en relacin a los otros dos grupos; lo
que indica que el manejo agronmico tiene que estar dirigido a mantener las flores
con un cuidado especial en la planta, esto favorece al incremento de la produccin
aumentando la rentabilidad de los productores durante el periodo de cosecha
obteniendo as ms ganancias.
Cuadro 11. Relacin entre el dimetro del fruto con el peso del fruto en la caracterizacin agromorfolgica de clones y segregantes de cruzamientos interespecficos de naranjilla, 2009.
Grupos
Dim_frut Peso_frut
Morfolgicos
(mm)
(g)
Poblacin
38,00
38,00
Promedio

51,61

74,83

36,00

30,00

64,00

130,00

Desviacin
estndar

6,68

23,96

Poblacin

19,00

19,00

Promedio

51,43

75,83

Mnimo

27,90

50,00

Mximo

Grupo 1 Mnimo
Mximo

Grupo 2

60,50

112,00

Desviacin
estndar

7,74

17,08

Poblacin

1,00

1,00

Promedio

62,00

145,00

62,00

145,00

62,00

145,00

Grupo 3 Mnimo
Mximo
Desviacin
estndar

En el Cuadro 11, el grupo 1 present un dimetro del fruto de 51.61 mm., un 74.83
g de peso de la fruta; el grupo 2 mostr un dimetro de 51.43 mm y un peso de
fruta de 75.83 g. en el grupo 3 obtuvo en el dimetro 62.00 mm y un peso de la
fruta de 145 g., estos ltimos son resultados excelentes en comparacin a los

174

otros materiales. La relacin del tamao de la fruta con el peso se da con base la
variabilidad gentica de los materiales estudiados, en algunos de ellos a pesar de
que su tamao es grande, la cantidad de jugo, peso de las semillas y la cantidad
de agua en la fruta, juega un papel relevante para que el peso sea bajo o alto.
Cuadro 12. Incidencia de Fusarium oxysporum en la caracterizacin agro-morfolgica de clones y
segregantes de cruzamientos interespecficos de naranjilla, 2009.
Incidencia de Fusarium spp.
Grupos Morfolgicos

Total
0%

Poblacin
Grupo 1

% del Total

20%

40%

19

50,00

2,60

Poblacin

60%

80%

100%

38

7,90

21,10

18,40

100,00%

19

5,30

5,30

31,60

100,00%

11

Grupo 2
% del Total

57,90

Poblacin
Grupo 3

% del Total

1
-

100

1
-

100,00%

En el Cuadro 12, se observa la Incidencia de Fusarium oxysporum, en el Grupo 1,

los 19 materiales presentaron susceptibilidad del 0 % que corresponde al 50 %, un
material present susceptibilidad del 20 % que es el 2.60 %, 3 materiales
presentaron susceptibilidad del 60 % correspondiente al 7.90 %, 8 materiales con
susceptibilidad del 80 % correspondiente al 21.10 % y 7 materiales presentaron la
susceptibilidad del 100 % que es el 18.40 % de los 38 materiales pertenecientes a
este grupo; para el Grupo 2, los 11 materiales presentaron una susceptibili dad del
0 % con que corresponde el 57.90 %, un material muestra susceptibilidad del 60 %
que corresponde al 5.30 %, un solo material presenta susceptibilidad del 80 % que
es el 5.30 % y 6 materiales con susceptibilidad del 100 % correspondientes al
31.60 % de los 19 materiales pertenecientes a este grupo. En el grupo 3, el nico
material de este grupo present una susceptibilidad del 40 %.
Cuadro 13. Respuesta del rendimiento en relacin a la presencia de plantas muertas con el
incremento de la poblacin nematodos (meloidogyne incognita) en la caracterizacin agromorfolgica de clones y segregantes de cruzamientos interespecficos de naranjilla, 2009.

Grupos Morfolgicos

Plantas
Atacadas
SI

Poblacin

Grupo 1

Incr_Poblacin
(larvas /g de raz)

NO
1

37

Rendim iento
por Planta
(kg/plt)

38,00

38,00

Promedio

0,47

6,35

Mnimo

0,00

0,03

Mximo

1,80

25,13

Desviacin
estndar

0,54

5,79

175

Poblacin

Grupo 2

19,00

19,00

Promedio

0,48

5,28

Mnimo

0,00

0,32

Mximo

3,20

20,50

Desviacin
estndar

0,78

4,77

1,00

1,00

Promedio

0,00

9,50

Mnimo

0,00

9,50

Mximo

0,00

9,50

Poblacin

Grupo 3

16

Desviacin
estndar

En el Cuadro 13, se observa que el grupo 1 tiene el ataque de nematodos

(Meloidogyne incognita) en solo material, con un incremento en la poblacin de
nematodos de 0.47 larvas / g de raz y un rendimiento de 6.35 kg/plt. Para el grupo
2 hay la presencia del ataque de nematodos en 3 plantas con el incremento de
poblacin de 0.48 larvas / g de raz y con 5.28 kg/plt. En el grupo 3 solo un
material fue atacado por esta plaga, con un incremento de la poblacin de 1.00
larvas / g de raz, con un rendimiento de 9.5 kg/plt.
Identificacin de los materiales promisorios
La evaluacin Agro morfolgica de 41 materiales en estudio, nos permiti
identificar posibles materiales promisorios dentro de la coleccin de Naranjilla (S.
quitoense Lam.) del Programa de Fruticultura - INIAP, Ecuador en el 2008.
En la seleccin de los materiales promisorios se tom atencin a los descriptores
de rendimiento relacionados con la susceptibilidad al ataque de Fusarium
oxysporum y la tolerancia a la presencia de Nematodos (Meloidogyne incognita),
adems caractersticas como son: Forma, peso, dimetro, aroma, sabor, color de
la pulpa del fruto que son demandadas en el mercado nacional e internacional.
Como materiales promisorios se ha identificado las siguientes cruzamientos: en el
Grupo 1: GTP 30 (Solanum quitoense var. Peluda x [Solanum quitoense var. Dulce
x Solanun vestisssimum]), GTP 36 (Solanum quitoense var. Baeza x [Solanum
quitoense x Solanum vestissimum]). Con un rendimiento de 25.3 kg/plt y 21.9 kg/
plt respectivamente, adems GTP 42 y GTP 43.

176

Grupo 1
Grupos
Morfolgicos
GTP1
GTP11
GTP16
GTP17
GTP2
GTP20
GTP21
GTP23
GTP24
GTP25
GTP28
GTP29
GTP3
GTP30
GTP31
GTP32
GTP36
GTP38
GTP40P1F12
GTP41P2F1
GTP41P3F1
GTP41P4F1
GTP41P5F1
GTP41P6F1
GTP41P7F1
GTP42P1F2
GTP42P1F3
GTP42P2F2
GTP42P3F2
GTP42P4F2
GTP42P5F2
GTP43P1F4
GTP43P4F4
GTP43P5F4
GTP45P2F6
GTP45P4F6
GTP5
GTP9

Rend
kg/plt

Color de la Pulpa

4,3
3,57
10,6
4,1
10,3
18,4
4,05
0,03
14,6
3,4
1,92
0,53
5,1
25,13
11,7
11,6
21,9
6,9
4,5
7,2
0,8
8,1
4,3
4,2
4,4
0,78
5,4
1,7
7,5
6,7
3,1
1,6
2,92
9,11
4,7
1,6
1,5
3,14

Verde Oscuro
Verde Oscuro
Verde Amarillento
Verde Amarillento
Verde Oscuro
Verde Amarillento
Verde Oscuro
Verde Oscuro
Verde Oscuro
Verde Claro
Verde Oscuro
Verde Oscuro
Verde Amarillento
Verde Oscuro
Verde Amarillento
Verde Claro
Verde Claro
Verde Oscuro
Verde Claro
Verde Oscuro
Verde Oscuro
Verde Oscuro
Verde Claro
Verde Oscuro
Verde Oscuro
Verde Claro
Verde Amarillento
Verde Amarillento
Verde Amarillento
Verde Claro
Verde Oscuro
Verde Claro
Verde Oscuro
Verde Oscuro
Verde Oscuro
Verde Claro
Verde Claro
Verde Oscuro

Dimetro
del Fruto
(mm)
51,62
52,38
64,28
44,12
63,87
52,16
61,52
50,45
57,45
41,83
40,25
61,24
49,25
42,32
48,28
59,24
50,15
54,56
54,25
50,24
59,8
46,4
36,51
42,3
46
51,05
50,42
55,7
52,09
50,3
44,9
52,76
51,4
57,46
51,34
55,8
58,5
59,51

Reaccin de Incidencia
Fusarium (Calificacin)

Reaccin de incremento de
Nematodos (Calificacin)

Susceptible Alta
Susceptible Alta
Susceptible Media alta
Susceptible Alta
Susceptible Muy alta
Susceptible Media alta
Susceptible Alta
Susceptible Alta
Susceptible Baja
Susceptible Muy alta
Resistente
Susceptible Alta
Susceptible Media alta
Resistente
Susceptible Alta
Susceptible Alta
Resistente
Susceptible Muy alta
Susceptible Muy alta
Susceptible Muy alta
Susceptible Muy alta
Resistente
Resistente
Resistente
Resistente
Resistente
Resistente
Resistente
Resistente
Resistente
Resistente
Resistente
Resistente
Resistente
Resistente
Resistente
Susceptible Muy alta
Resistente

Hospedante deficiente
Hospedante
No hospedante
No hospedante
No hospedante
Hospedante eficiente
No hospedante
No hospedante
Hospedante eficiente
No hospedante
Hospedante eficiente
Hospedante
Hospedante eficiente
No hospedante
No hospedante
No hospedante
Hospedante
Hospedante
Hospedante
No hospedante
Hospedante
Hospedante
Hospedante
Hospedante eficiente
Hospedante deficiente
No hospedante
Hospedante deficiente
Hospedante eficiente
Hospedante
Hospedante deficiente
Hospedante
Hospedante deficiente
Hospedante
Hospedante deficiente
No hospedante
Hospedante deficiente
No hospedante
No hospedante

En el Grupo 2: GTP 39 Solanum quitoense x Solanum vestissimum (semilla) y

GTP 46 con 9.8 y 5.29 kg/plt respectivamente.

177

Grupo 2
Grupos
Morfolgicos
GTP6
GTP7
GTP14
GTP15
GTP18
GTP26
GTP33
GTP37
GTP39
GTP40P2F12
GTP40P4F12
GTP40P5F12
GTP41P1F1
GTP42P3F3
GTP43P2F4
GTP43P3F4
GTP45P1F6
GTP46P1F8
GTP46P2F8

Rend
Color de la Pulpa
kg/plt
0,89
7,8
3,4
0,32
11,2
2,5
5,75
4,5
9,8
3,1
4
2,2
1,98
4,2
20,5
8,4
0,9
3,7
5,23

Verde Claro
Verde Oscuro
Verde Amarillento
Verde Amarillento
Verde Amarillento
Verde Amarillento
Verde Claro
Verde Claro
Verde Oscuro
Verde Claro
Verde Claro
Verde Claro
Verde Claro
Verde Claro
Verde Oscuro
Verde Claro
Verde Amarillento
Verde Amarillento
Verde Amarillento

Dimetro
del Fruto
(mm)
50,21
56,12
55,64
46,76
59,31
54,32
51,39
58,46
58,12
53,34
49,5
56,87
60,5
49,65
39,5
48,25
57,5
49,63
47,9

Reaccin de Incidencia
Fusarium
(Calificacin)
Susceptible Muy alta
Susceptible Muy alta
Susceptible Media alta
Susceptible Muy alta
Susceptible Muy alta
Susceptible Alta
Resistente
Susceptible Muy alta
Resistente
Resistente
Resistente
Resistente
Resistente
Resistente
Resistente
Resistente
Susceptible Muy alta
Resistente
Resistente

Reaccin de incremento de
Nematodos (Calificacin)
No hospedante
Hospedante
Hospedante eficiente
Hospedante muy eficiente
No hospedante
Hospedante
Hospedante deficiente
No hospedante
No hospedante
Hospedante deficiente
No hospedante
Hospedante
Hospedante eficiente
Hospedante
Hospedante muy eficiente
Hospedante
No hospedante
No hospedante
No hospedante

Los trabajos realizados por el Programa

de Fruticultura del INIAP en cuanto a
Grupo 3
realizar trabajos
continuos
a
partir
de
esta
tesis
en El de
TriunfoReaccin
Provincia
de Pastaza
Grupos
Dimetro
Reaccin
de incremento
Rend
Color de la
Morfolgico
del
Fruto
Incidencia
Fusarium
de
Nematodos
y el Chaco s Provincia
Napo, trabajan
en investigaciones
evaluando
resistencia a
kg/plt de Pulpa
(mm)
(Calificacin)
(Calificacin)
plagas en
las
estas
colecciones
de
cruzamientos
nter
especficos
de
Naranjilla y
GTP22
9,5
Anaranjado
62,88
Susceptible Media
Hospedante
especies afines y los cuales buscan entregar materiales resistentes o tolerantes a
plagas, alta productividad y calidad del fruto, por lo que es importante continuar,
profundizando el conocimiento en esta rea de estudio hasta llegar a seleccionar y
recomendar a los productores nuevos materiales mejorados de naranjilla para el
mercado local y por qu no, para el internacional tambin.
Con estos materiales se ha empezado la propagacin con la obtencin de baretas
para la reproduccin asexual de la Naranjilla, en la injertacin y finalmente en la
obtencin de plantas que son vendidas al pblico en general.
2.2.2.5. Conclusiones
Se logr establecer la variabilidad gentica en la coleccin de naranjilla mediante
la distancia de Gower y el anlisis multivariado jerrquico de Ward (1963)
formndose Tres conglomerados o Grupos de materiales adems, doce
morfotipos entre los cruzamientos dentro de la coleccin.
De los 21 descriptores cuantitativos evaluados, nueve caracteres resultaron ser
discriminantes por su alta significancia segn la prueba Ji , para considerarse en
evaluaciones futuras. Doce caracteres cualitativos fueron discriminantes ya que
presentaron alta significancia segn la prueba Ji, variables que deben ser
consideradas para futuras investigaciones.
En cuanto a la resistencia, se ha observado que en los diferentes grupos existen
mayor cantidad de segregantes con resistencia en plantas de semilla al contrario
de las plantas que provienen de estaca, con este mtodo de propagacin se

178

puede ampliar el nmero de plantas con alta resistencia y as tener mayor

cantidad de segregantes con caractersticas deseables de resistencia.
En cuanto al anlisis de la calidad de los frutos, tenemos materiales con tamaos
de fruta diferentes, variabilidad en sabores, aromas para todos los gustos,
variabilidad que ayud a seleccionar materiales que pueden tener potencial en el
mercado o tambin pueden servir para transferir sus genes a materiales que
carecen de ciertas caractersticas.
Con base al anlisis de las diferentes variables como resistencia, calidad de fruta y
rendimientos los mejores materiales dentro de los cruzamientos interespecficos
son: (GTP 30, GTP 36, GTP 42P3F2, GTP 43P5F4, GTP 39, GTP 46P2F8)
2.2.2.6. Recomendaciones
Para investigaciones de este tipo se debe tomar muy en cuenta las variables
cuantitativas y cualitativas que resultaron tener un alto valor discriminante.
Una vez seleccionados los materiales, multiplicarlos para establecer huertos en
diferentes localidades y con un mayor nmero de plantas para una seleccin
participativa con productores de las zonas naranjilleras del pas con la finalidad de
determinar nuevos clones que podran difundirse de manera comercial.
Con el Departamento de Biotecnologa, hacer multiplicaciones clonales para una
reproduccin masiva de los materiales seleccionados (GTP 30, GTP 36, GTP
42P3F2, GTP 43P5F4, GTP 39, GTP 46P2F8, para ensayos en diferentes reas
donde se cultiva la naranjilla, para observar los comportamientos que podran ser
diferentes al lugar de origen de la evaluacin.
Con las semillas de los frutos de los materiales seleccionados (GTP 30, GTP 36,
GTP 42P3F2, GTP 43P5F4, GTP 39, GTP 46P2F8), continuar las evaluaciones
con nuevos segregantes que podran reunir caractersticas deseables de
resistencia, altos rendimientos y calidad de la fruta.
Iniciar con base a la caracterizacin de los materiales, planes de hibridacin para
incorporar genes deseables a ciertos materiales que presentan buenas
caractersticas pero que es necesario mejorarlos en algunos aspectos como
mejorar el tamao de la fruta, corregir el color de la pulpa, aadir aroma al jugo,
resistente a la marchitez vascular y nematodos, etc.
2.2.2.7. Bibliografa
CHILUIZA, A. y HERRERA, J., 2008. Evaluacin agronmica y resistencia a nematodos
(Meloidogyne incognita) y al hongo (Fusarium oxysporium) de dos variedades de naranjilla injertas
en siete accesiones de la seccin Lasiocarpa en el noroccidente de Pichincha. Quito s/p.
CORPOICA. 2002. El cultivo del lulo. 1era. Edicin. Editor, Corporacin Colombiana de
Investigacin Agropecuaria CORPOICA. Manizales. p. 83-91.

179
ECORAE-INIAP-OEA, 2001. Compendio de Recomendaciones Tecnolgicas para los Principales
Cultivos de la Amazona Ecuatoriana. Quito, pp. 53-61.
REVELO, J; SANDOVAL, P., 2003. Factores que afectan la produccin y productividad de la
naranjilla (Solanum quitoense Lam) en la regin amaznica del Ecuador; Quito-Ecuador. pp. 108.
SORIA, N., 1996. Progreso en el Mejoramiento Gentico de Naranjilla en Ecuador; Programa
Cooperativo de Investigacin y Transferencia de Tecnologa Agropecuaria Subregin Andina; Quito
Ecuador; pp. 30-42.

2.2.3. Identificacin molecular y caracterizacin gentica y patolgica

de Colletotrichum sp. aislados de naranjilla (Solanum quitoense
lam), tomate de rbol (Solanum betaceum) y chirimoya (Annona
cherimola mill) provenientes de zonas productoras en
ecuador18.
Objetivo del proyecto (3): Desarrollar y evaluar estrategias de biocontrol de las
plagas y enfermedades ms importantes
2.2.3.1. Objetivos
Objetivo General
Identificar molecularmente y caracterizar gentica y patolgicamente aislados de
Colletotrichum sp. procedentes de naranjilla (Solanum quitoense Lam), tomate de
rbol (Solanum betaceum) y chirimoya (Annona cherimola Mill) provenientes de
zonas productoras en Ecuador.
Objetivos Especficos
Identificar las especies de Colletotrichum presentes en los tres cultivos
mediante caractersticas morfolgicas y tcnicas de marcadores moleculares
Determinar la variabilidad gentica dentro de las especies identificadas de
Colletotrichum y asociar con la epidemia de la enfermedad.
2.2.3.2. Marco Referencial
La antracnosis es una enfermedad que afecta a varios cultivos de importancia
econmica, es causada por especies de hongos del gnero Colletotrichum (Bailey
y Jeger, 1992; Prez, 1993). La antracnosis puede ser considerada la enfermedad
ms cosmopolita del mundo, presentando una mayor severidad en regiones
tropicales y subtropicales. Los sntomas son muy diversos y varan segn el
husped e incluso de acuerdo al rgano o tejido afectado teniendo un efecto
devastador a nivel de inflorescencias y frutos (Bailey y Jeger, 1992; Prez, 1993).
Su distribucin es mundial y actualmente el taxn se considera constituido por 39
18

Egdo. Diego Crdenas, Ph. D. Eduardo Morillo, Ph. D. Wilson Vsquez, Ing. Jos Ochoa.

180

especies entre los que se encuentran especies tanto saprofticas como parsitas
(Sutton, 1992).
La identificacin taxonmica clsica de especies dentro del gnero Colletotrichum
est usualmente basada en ms de una caracterstica, como su apariencia fsica
en el medio de cultivo, la morfologa del patgeno y/o en la patogenicidad.
(Freeman, 2000)
Muchas especies de Colletotrichum infectan simultneamente al mismo
hospedero (Freeman, 2000), y una misma especie ms de un hospedero. Se ha
reportado por ejemplo que C. gloeosporioides, C. capsici, y C. coccodes causan
antracnosis en pimiento en Florida. (Roberts et al, 2001). Este tipo de
identificacin en especies de Colletotrichum es en la mayora de casos subjetiva y
se basa muchas veces en los criterios del autor. Esta subjetividad se debe
principalmente a que en la clasificacin se usan muchos criterios entre ellos
morfolgicos in vitro o de patogenicidad de hospederos, que son
significativamente afectados por el ambiente, lo que dificulta su correcta
identificacin (Sutton, 1992; Cannon et al., 2000)
Las especies patognicas causan serias prdidas en un amplio nmero de plantas
cultivadas entre las que se cuentan cereales, pastos, frutales, leguminosas y
cultivos perennes en regiones tropicales y subtropicales. (Rodrguez, 2007). En
cultivos como la chirimoya (Annona cherimola Mill) que por sus excelentes
caractersticas organolpticas se considera la mejor fruta
dentro de las
anonceas, (Nakasone y Paull, 1998) las enfermedades causadas por patgenos,
particularmente por Colletotrichum spp pueden causar prdidas importantes. En
Mxico se ha asociado a C. gloeosporioides con la antracnosis del fruto de
chirimoya, con incidencia del 50 al 70%, reduciendo la calidad comercial del
producto (Nava-Daz et al., 2000). La naranjilla, cuyo origen est entre Ecuador y
Colombia, donde es altamente cultivada (Heiser, 1985), tambin es afectada por la
antracnosis, especialmente a los frutos, donde se manifiesta como una mancha
negra que va aumentando hasta cubrirlos completamente. La antracnosis tambin
afecta al tomate de rbol causando prdidas de hasta un 90%, incrementando
significativamente los costos de produccin (Girard, 1977). En este cultivo los
sntomas y los principales daos tambin se presentan en los frutos. Estas
manchas reducen la calidad de presentacin del fruto, por lo tanto su valor
comercial en el mercado es inferior. Sin embargo, tambin se han observado
ataques severos del hongo en ramas, las mismas que se secan. (Feicn et al,
1999)
Por la alta diversidad del gnero Colletotrichum la identificacin de especies ha
sido problemtica, por lo que se requiere la identificacin precisa y el
comportamiento epidemiolgico del patgeno para disear eficientemente
medidas de control. En este caso las herramientas moleculares ayudan a superar
dicha complicacin taxonmica y permite caracterizar la diversidad interespecfica
e intraespecfica de este grupo complejo de especies (Guerber et al, 2003). Los
marcadores moleculares de ADN son muy estables y por lo tanto tiles en la

181

identificacin de especies y poblaciones (Lewin, 2004). Los patrones obtenidos

con marcadores como RAPDs y/o AFLPs pueden determinar la relacin entre
aislamientos al ser analizados con paquetes bioinformticos que comparan los
patrones y producen dendogramas indicando los grados de relacin entre y
dentro de poblaciones (Bridge et al, 1998). Esta metodologa permite agrupar e
identificar las diferentes especies de Colletotrichum, lo cual es de vital importancia
para estudiar su etiologa, epidemiologa, y para establecer estrategias de control
(Freeman et al., 1998; Adaskaveg y Fster, 2000.
Existen algunos estudios con marcadores moleculares reportados para el gnero
Colletotrichum. Entre estos tenemos los realizados por Rodrguez (2007) quien
corrobor la alta variabilidad fenotpica de especies de Colletotrichum asociados al
cultivo de caf en la regin central cafetera de Colombia al determinar la
variabilidad gentica de las especies de Colletotrichum y su aplicacin en el
diagnstico de la enfermedad de cerezas del caf, mediante la utilizacin de la
tcnica de PCR y la utilizacin de marcadores moleculares ITS. Tambin Vliz
(2005), realiz la caracterizacin molecular de poblaciones de Colletotrichum
relacionados a plantaciones de lupino en Chile, este estudio tuvo como objetivo la
determinacin de la especie de Colletotrichum que se encuentra atacando a este
cultivo y la variabilidad gentica que presenta el hongo, en esta investigacin el
autor utiliz marcadores ITS-RFLPs y RAPDs, para la obtencin de sus
resultados. En frutales andinos, el estudio realizado por Marulanda, M., et al
(2007) sobre la antracnosis, en cultivos de mora (Rubus glaucus) en Colombia, se
hace uso de marcadores moleculares, en la determinacin del agente causal de la
antracnosis. El estudio realizado por Saldarriaga, A, et al (2008), mediante la
utilizacin de marcadores moleculares ITS, se identific a Colletotrichum
acutatum, como el agente causal de la antracnosis en tomate de rbol.
2.2.3.3. Metodologa
Coleccin de muestras de Colletotrichum sp: Se colectaron un total de 50
muestras de los tejidos enfermos de las plantas en estudio, 20 de cada cultivo en
las principales zonas productoras del pas, a excepcin del cultivo de chirimoya
que fueron 10 muestras, para un posterior aislamiento del patgeno. Para la
colecta de muestras se tomaron en cuenta datos pasaporte. Se observaron las
plantas que presentaron los sntomas de la enfermedad, en frutos se procedi a su
recoleccin en bolsas plsticas, en caso de tallos, estos se envolvieron en papel
hmedo y se transportaron en fundas plsticas al igual que hojas y peciolos.
Aislamiento del patgeno: El hongo se aisl de una mancha individual de fruto,
hoja o tallo. Las muestras se lavaron con agua y jabn, eliminando desechos no
deseados, se extrajeron pedazos de aproximadamente 0.2 cm 2 de tejido afectado
por el patgeno, los mismos que se desinfectaron con una solucin de hipoclorito
de sodio al 2%, por dos minutos. Luego se lavaron tres veces con agua destilada
esterilizada (ADE), para luego depositar cinco pedazos en forma equidistante en
las cajas petri con medio de cultivo Papa Dextrosa Agar (PDA), para incubar el
patgeno a 25C por 7 das y luego purificarlo. (Reyes, C., Morales, L., 2007)

182

Purificacin del hongo: Se realiz un cultivo puro de Colletotrichum sp, que

provino de un cultivo monosprico, del cual se realizaron subcultivos del micelio.
En forma radial, con un sacabocados se tomaron discos de micelio de 6 mm de
dimetro, los que se depositaron en el parte central de la caja petri conteniendo
medio PDA.
Conservacin del hongo: El hongo se conserv en papel filtro estril, para esto
en una caja petri con medio de cultivo PDA, se colocaron pedazos de 1 cm2 de
papel filtro estril, para luego colocar sobre ellos un raspado del hongo, las cajas
se llevaron a incubacin por 10 das a 25C. Luego se tom cada uno de los
papeles filtro con micelio del hongo y se los coloc en sobres estriles, los mismos
que fueron almacenados a 4C (Aricapa, M., Correa, F. 1994).
Caracterizacin morfolgica: Se incub el patgeno a 25C, en medio PDA
(Papa Dextrosa Agar) para analizar las variables morfolgicas en estudio: color de
la colonia, presencia de microesclerocios y sectores, tipo de micelio, calidad de
esporulacin, velocidad de crecimiento.
Pruebas de patogenicidad: Las pruebas de patogenicidad se realizarn en
plantas y frutos de tomate rbol y naranjilla, los datos obtenidos se extrapolarn a
chirimoya.
Las pruebas se realizarn en plantas de tomate de rbol y naranjilla. El inculo
para las pruebas ser obtenido de los aislamientos de Colletotrichum ya
purificados y previamente seleccionados por el anlisis molecular, seleccin
basada en la variabilidad gentica que presenten los aislamientos, y ser
preparado sumergiendo segmentos de medio de cultivo con micelio en agua estril
para posteriormente ajustar la concentracin mediante una cmara de New
Vahuer, a 1x105 esporas/ml. (Viera, 2002).
Cuando las plantas lleguen a los 20 cm, se colocarn en un ambiente hmedo
(cmara de humidificacin) por dos horas, posteriormente se inocularn utilizando
un microaspersor y una bomba de vaco a una dosis de 1ml por planta. Se
realizarn humidificaciones diariamente por el lapso de 4 horas, hasta observar
sntomas de la enfermedad.
En frutos de tomate de rbol y naranjilla, se realizarn pequeos orificios con una
aguja estril y se colocar sobre el orificio una gota (10 ul) del mismo inoculo
preparado para las plantas. Los frutos sern colocados en cmaras hmedas y
sern incubados a 25C.
Extraccin de ADN: Para la extraccin de ADN se multiplicar el hongo, de un
cultivo monosprico se tom con un sacabocados discos de 6mm de dimetro y se
los deposit en 3 cajas Petri con PDA, se las incub por 7 das a 25C, despus
de los cuales se realiz un raspado de la superficie, extrayendo todo el micelio y
las esporas, este material se coloc en tubos eppendorf. Los tubos fueron puestos

183

a -4C durante toda la noche, para luego ser liofilizados durante 48 72 horas.
Para la extraccin de ADN se utiliz el protocolo de Colombo modificad por Piedra.
Identificacin gentica: Los aislados del hongo fueron identificados
taxonmicamente utilizando la tcnica de PCR mediante la amplificacin con
primers universales de la regin conservada del ADN ribosmico (ADNr) y el cual
involucra el uso de primers ITS (White et al, 1990), ITS1 5 TCC GTA GGT GAA
CCT GCG G 3, ITS4 5 TCC CTT TCA ACA ATT TCA CG 3, los cuales fueron
combinados de la siguiente manera: ITS1-ITS2, ITS1-ITS4.
Adems,
se
utilizaron
los
primers
especficos
CgInt
5
GGCCTCCCGCCTCCGGGCGG 3 y CaInt2 5 GGGGAAGCCTCTCGCGG 3,
combinados con la secuencia-ITS 4 de la regin conservada del gen 25/28S del
ADNr (Afanador et al 2006; Brown et al 1996).
Se utiliz el protocolo de amplificacin descrito por lvarez et al (2005), para cada
etapa de PCR se utiliz: Buffer Taq 10 X a una concentracin final de 1 X (100mM
de tris HCl, pH 8.2, 5mM MgCl2 y 500mM KCl) 0.2 mM de cada uno de los
dNTPs, 0.5mM de cada primer, 1.5mM de MgCl2 2ng/ul de ADN, agua HPLC
filtrada (0.22um) autoclavada y 0.0375 U/ul de Taq polimerasa. Las condiciones
de amplificacin consistieron en 40 ciclos con una desnaturalizacin a 94 C por
30 s (120s para la inicial), 55 C por 30s de apareamiento y una extensin de 120s
a 72 C (240s para la final), utilizando un termociclador (PTC 100 MJ Research,
Inc., Watertown, MA). Para detectar diferencias interespecficas entre los
aislamientos se utiliz el anlisis de polimorfismo de fragmentos de restriccin
combinado con la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR-RFLP) para lo cual
se utiliz la enzima de restriccin Rsa I siguiendo la metodologa descrita por
lvarez et al (2005). La visualizacin de fragmentos se realiz en geles de
agarosa 2% junto con un marcador de talla (100 bp) teidos con bromuro de etidio
15 ppm.
Diversidad poblacional: Una vez identificados taxonmicamente los aislamientos
la variabilidad intraespecfica se analiz por marcadores RAPDs, utilizando los
RAPD-operon, OPAM 12, OPAM 14, OPS 08, OPS 09, OPS 12, OPS 15, OPS 16,
OPS 18.
2.2.3.4. Resultados y discusin
Coleccin y aislamiento de muestras de Colletotrichum sp.: Se aislaron un
total de 50 muestras, 20 muestras provenientes de plantas de naranjilla infectadas,
20 de tomate de rbol y 10 de chirimoya, de distintas provincias del Ecuador,
como se detalla a continuacin:

184

Aislam iento
(Naranjilla)

rgano
Afectado

Provincia de
Procedencia

Aislam iento
(T. rbol)

rgano
Afectado

Provincia de
Procedencia

C 1

HOJA

PICHINCHA

CA 1

FRUTO

PICHINCHA

C 2

FRUTO

PICHINCHA

CA 3

FRUTO

PICHINCHA

C 3

FRUTO

PICHINCHA

CA 4

FRUTO

PICHINCHA

C 5

FLOR

PASTAZA

CA 5

HOJA

PICHINCHA

C 6

FRUTO

PASTAZA

CA 8

HOJA

TUNGURAHUA

C 8

HOJA

PASTAZA

CA 9

FRUTO

TUNGURAHUA

C 9

FRUTO

PASTAZA

CA 10

FRUTO

TUNGURAHUA

C 11

FLOR

PICHINCHA

CA 11

FRUTO

TUNGURAHUA

C 13

HOJA

CARCHI

CA 13

HOJA

TUNGURAHUA

C 17

HOJA

PICHINCHA

CA 17

HOJA

PICHINCHA

C 19

FRUTO

PASTAZA

CA 19

FRUTO

AZUAY

C 20

FRUTO

PASTAZA

CA 22

FRUTO

AZUAY

C 21

FRUTO

PASTAZA

CA 23

FRUTO

LOJA

C 22

FLOR

CARCHI

CA 24

FRUTO

AZUAY

C 23

FRUTO

CARCHI

CA 25

FRUTO

AZUAY

C 25

HOJA

CARCHI

CA 26

FRUTO

AZUAY

CA 27

FRUTO

AZUAY

CA 28

FRUTO

AZUAY

CA 29

FRUTO

AZUAY

Aislam iento
(Chirim oya)

rgano
Afectado

Provincia de
Procedencia

CC 2

HOJA

PICHINCHA

CC 4

FRUTO

PICHINCHA

CC 7

TALLO

LOJA

CC 8

FRUTO

AZUAY

CC 9

HOJA

AZUAY

CC 10

FRUTO

AZUAY

CC 11

FRUTO

AZUAY

CC 12

FRUTO

AZUAY

CC 13

FRUTO

AZUAY

CC 14

FRUTO

IMBABURA

Caracterizacin morfolgica: Morfolgicamente, mediante las variables

evaluadas se pudo ubicar a todas las muestras aisladas dentro del gnero
Colletotrichum, sin embargo la asignacin de la especie resulto complicada.

185

Figura 1. Muestra de las diferentes cepas de Colletotrichum sp. aisladas

Pruebas de patogenicidad: Hasta el momento se ha estandarizado el proceso de

inoculacin para el estudio de la patogenicidad, en espera del anlisis de los datos
obtenidos de la caracterizacin molecular, para proseguir con el ensayo, llegando
a determinar que la concentracin de esporas para la inoculacin es de 1 x 105
esporas/ml, obteniendo de esta manera infeccin en plantas y frutos, en plantas
sin herida y en frutos con una pequea herida.
Extraccin de ADN: Mediante la metodologa utilizada se obtuvo una cantidad de
ADN de 60 ng/ul en promedio, lo cual permiti realizar los ensayos posteriores sin
ningn tipo de problema.
Identificacin gentica: Mediante la utilizacin de la combinacin de los primers
universales ITS1-ITS4 y la enzima de restriccin Rsa I, se lleg a determinar la
presencia de dos especies del gnero Colletotrichum, la especie C. acutatum y la
especie C. gloeosporioides. Lo cual fue confirmado con la utilizacin de los
primers especie-especficos, CaInt y CgInt.
Figura 2. Electroforesis Primers CaInt-ITS4 1) Marcador 100bp, 2) al 26) ADN extrado de
aislamientos de Colletotrichum sp. y la combinacin CaInt-ITS4

186

Diversidad poblacional: Despus de determinar las especies del gnero

Colletotrichum presentes en las diferentes zonas productoras del Ecuador, se
realiz un estudio con 8 primers RAPD-operon: OPAM 12, OPAM 14, OPS 08,
OPS 09, OPS 12, OPS 15, OPS 16, OPS 18, obtenindose una gran variabilidad
intraespecfica.
-0.52

Figura 3. A) Electroforesis RAPD-operon OPS15 1) marcador 100bp 2) al 20) ADN de

Colletotrichum acutatum. T. rbol; 21) a 26) ADN de Colletotrichum acutatum. Naranjilla. B)
Electroforesis RAPD-operon OPS15 1) marcador 100bp 2) al 12) ADN de Colletotrichum acutatum.
Naranjilla; 13) a 22) ADN de Colletotrichum acutatum. Chirimoya; 23 y 24) Control positivo, 25)
Control negativo.

2.2.3.5. Conclusiones
De los 50 aislamientos de Colletotrichum sp., que formaron parte de este
estudio, se determin que 45 pertenecen a la especie acutatum.
De los 5 aislamientos que no correspondieron a la especie C. acutatum, se
pudo determinaran que pertenecen a la especie C. gloeosporioides, puesto
que al realizar la digestin del producto de amplificacin con los primers
universales dio como resultado las bandas esperadas (reportadas), que a su

187

vez son iguales a las bandas obtenidas por la digestin del ADN del control
positivo para la especie.
De la caracterizacin morfolgica se puede concluir que los aislamientos son
muy difciles de caracterizar con base a las variables planteadas, pues no es
posible asignar con certeza la especie a la cual pertenece el aislamiento solo
con este criterio.
La especie del gnero Colletotrichum sp., ms difundida dentro de los cultivos
de naranjilla en el Ecuador es la especie acutatum.
La especie gloeosporioides dentro del estudio tiene una incidencia del 20% en
los cultivos de naranjilla en las diferentes zonas del Ecuador.
2.2.3.6. Bibliografa
ADASKAVEG, J.; FSTER H. 2000. Occurrence and management of anthracnose epidemics
caused by Colletotrichum species on tree fruit crops in California. In: Colletotrichum. host specificity,
pathology, and host-pathogen interaction. Prusky, D., S. Freeman, and M. Dickman (eds). American
Phytopathological Society Press. St. Paul, Minnesota. USA. pp: 317-336.
AFANADOR, L.; MINZ, D.; MAYMON, M.; FREEMAN, S. 2003. Characterization of Colletotrichum
isolates from tamarillo, passiflora and mango in Colombia, and identification of a unique species
from de genus. Phytopathology 93(5):579587.
BAILEY, J.; JEGER M. 1992. Colletotrichum biology, pathology and control. London. England.
Redwood Press. 388 p.
HEISER, C. 1985. Ethnobotany of the naranjilla (Solanum quitoense) and its relatives. Economic
Botany 39:4-11.
WHITE, T.; BRUNS, T.; LEE, S.; TAYLOR, J. 1990. Amplification and direct sequencing of fungal
ribosomal RNA genes for phylogenetics. In: Innis, M. A., Gelfand, D. H., Sninsky, J. J. and White, T.
J. (eds) PCR Protocols: a Guide to Methods and Applications. London, UK. Academic Press p.
315-322.

2.2.4. Manejo de la nutricin del cultivo de naranjilla (Solanum

quitoense lam.) en las zonas de produccin de la regin
amaznica y noroccidente de Pichincha 19.
Objetivo del proyecto (4): Evaluar el comportamiento, calidad y rentabilidad de
los clones lite seleccionados, bajo diferentes sistemas de produccin dirigida a
diferentes mercados.
2.2.4.1. Objetivos
Objetivo General
Generar una recomendacin de fertilizacin preliminar para el cultivo de Naranjilla
(Solanum quitoense Lam.) en el primer ao de cultivo.
19

Resumen de tesis previo a la obtencin del ttulo de Ingeniero Agrnomo.

Flix Bastidas19, Franklin Valverde19, Pablo Viteri3, Juan Len3

188

Objetivos Especficos
Determinar los nutrimentos limitantes del rendimiento para el cultivo de
naranjilla en zonas de El Triunfo y El Chaco en la regin Amaznica y Saloya
en el noroccidente de Pichincha.
Determinar niveles preliminares de contenido de nutrientes en el tejido vegetal
para el diagnstico del estado nutricional del cultivo de naranjilla.
Documentar los sntomas visuales de deficiencias nutrimentales en el cultivo de
naranjilla.
Realizar anlisis econmico, aplicando la metodologa de presupuesto parcial.
2.2.4.2. Marco Referencial
La naranjilla (Solanum quitoense Lam) es una fruta muy popular a nivel nacional e
internacional por la exquisitez de su jugo, el fruto es de sabor agridulce, aromtico
y refrescante. Se lo utiliza en la elaboracin de jugos, mermeladas, cocteles,
jaleas, adems de ser rica en vitamina A, C, B1, B2 y alta concentracin de
protenas y minerales (CORPOICA, 2002).
El cultivo de naranjilla en dcadas anteriores alcanz un notable desarrollo,
convirtindose en la base de la economa de algunos pueblos del oriente
ecuatoriano; pero como se puede observar, en los ltimos aos hay una
disminucin de la productividad, siendo las principales causas: plagas,
enfermedades, y sobretodo un manejo inadecuado de la nutricin del cultivo
(Revelo y Sandoval, 2003). La naranjilla es un cultivo exigente en nutrimentos,
progresa como cultivo pionero, utiliza
la reserva mineral del suelo virgen,
hacindolo rentable, a tal punto de constituirse como principal agente de desbroce
de la vegetacin protectora y degeneracin del ecosistema. Puesto que el bosque
virgen almacena en el horizonte superficial orgnico la mayor parte de los
nutrientes aprovechables, los mismos que desaparecen en el primer ao del
cultivo (Valarezo y Samaniego, 1982).
Segn encuesta realizada por Revelo y Sandoval, (2003) mencionan que en la
regin amaznica, el 66 % de los agricultores no usan fertilizante, siendo este
grupo el que practica el sistema de cultivo pionero, en el cual no se aplica
fertilizantes ni materia orgnica porque los suelos que usan son nuevos, que
provienen de bosque virgen o secundario. Segn Len (1986) citado por Revelo y
Sandoval (2003) recomienda aplicar en el primer ao 150g de Nitrgeno, 120g de
Fosforo, 160g de Potasio, por planta/ao de elemento puro o nutriente. Para el
segundo ao recomienda aplicar 120g de Nitrgeno, 160g de Fosforo, 130g de
Potasio, por planta/ao de elemento puro o nutriente.
En el Ecuador la mayora de productores utilizan el cultivo de naranjilla como un
cultivo de iniciacin (antes de establecer otro cultivo o pastizales) ocasionando
deforestacin en bosques primarios, lo que significa una atractiva rentabilidad

189

inicial del cultivo. Al paso de los aos por la extraccin de nutrientes de estos
suelos y la falta de incorporacin de fertilizantes los rendimientos decrecen, los
costos de produccin se incrementan y por ende la rentabilidad del cultivo pierde
su atractivo. Lo que conlleva a la utilizacin de nuevas reas vrgenes con la
consecuente destruccin de la selva primaria, cuya vegetacin protectora no
debera ser alterada.
El Manejo de nutrientes por sitio especifico, es una metodologa que busca
entregar nutrientes a la planta como y cuando los necesita. Esta forma de manejo
permite ajustar dinmicamente el uso de fertilizantes para llenar afectivamente el
dficit que ocurre entre la necesidad total de nutrientes para obtener rendimientos
altos y el aporte de nutrientes provenientes del suelo, dficit que debe ser
compensado con la aplicacin de fertilizantes. Con esta forma de manejo se busca
aplicar los nutrientes en dosis ptimas y en el momento adecuado para obtener
altos rendimientos y alta eficiencia de uso de los nutrientes por el cultivo y de esta
manera contribuir a la sostenibilidad del sistema de produccin.
2.2.4.3. Metodologa
La presente investigacin se llev a cabo en dos localidades: en Saloya, Parroquia
Saloya, Cantn Los Bancos, provincia de Pichincha, a una altitud de 1225 m,
ubicada en el Km 89 en la va Quito Los Bancos. La localizacin geogrfica es:
Longitud 78 50 46.8 W y Latitud 0 50 46.8 S. La otra localidad est ubicada
en El Triunfo, parroquia El Triunfo, cantn Pastaza, Provincia Pastaza, localizada
en el Km 25 en la va Puyo- Arajuno, a 1060 m de altitud. La localizacin
geogrfica es: Longitud 77 47 26.3 W y latitud 1 25 53.3 S. La precipitacin
anual en los Bancos es de 2000 - 3000 mm y en El Triunfo de 3500 4500 mm.
El suelo de Saloya est clasificado como un CRIANDEPS y el del Triunfo como un
HIDRANDEPS; el rgimen de humedad para las dos localidades es de hmedo a
muy hmedo (Meja, 1986). Los dos suelos presentan las siguientes
caractersticas qumicas: altos en nitrgeno, medios en fsforo y azufre y bajos en
potasio, calcio y magnesio, el pH es cido (menor a 4.8). El contenido de materia
orgnica es alto; as en Saloya es de 26.6% y en El Triunfo 23.3%; textura: franco
arenoso y franco, respectivamente.
Como material experimental se utiliz plantas de naranjilla variedad comn agria,
injertas sobre patrn hirtum 119 (Solanum hirtum) resistente al ataque de
nematodos (Meloidogyne incognita) y del hongo (Fusarium oxisporum).
El estudio se realiz en el primer ao de cultivo, con la metodologa de Manejo de
nutrientes por sitio especifico, mediante la tcnica de parcelas de omisin con
diferentes tratamientos; los mismos incluyen parcelas de omisin, para determinar
el suplemento de nutrientes nativos del suelo (N, P, K, Ca, S y Mg), una parcela
donde tendr una fertilizacin completa u ptima (+N, +P, +K, +Ca, +S, +Mg) y
una parcela completa (+N, +P, +K, +Ca, +S, +Mg) ms Cal agrcola (CaCO3) como

190

encalado. En el (Cuadro 1), se describen las parcelas de omisin, completa y

encalado.
Cuadro 1. Tratamientos y dosis de nutrientes
pastaza 2008.
Tratam ientos
N
1
2
3
4
5
6
7
8

para naranjilla en las provincias de pichincha y

Cantidad de nutrientes (Kg/ha/ao)

Nutrientes
-N
-P
-K
-Ca
-S
-Mg
Completo
Completo + cal*

N
0
150
150
150
150
150
150
150

P2O5
150
0
150
150
150
150
150
150

K2O
200
200
0
200
200
200
200
200

Ca
100
100
100
0
100
100
100
100

S
30
30
30
30
0
30
30
30

Mg
60
60
60
60
60
0
60
60

* + 3 TM/ha/ao de Cal agrcola (CaCO3)

Los fertilizantes utilizados fueron: Urea, Nitrato de calcio, Sperfosfato triple,

Fosfato diamnico, Muriato de potasio, Sulpomag, Oxido de magnesio, Azufre de
mina, Cal Agrcola. En cada localidad se utiliz el Diseo de bloques completos al
azar con cuatro repeticiones. La distancia de plantacin fue de 2 m x 2 m y la
parcela neta const de 6 plantas. Las variables en estudio fueron: Altura de planta,
anlisis foliar, das a la cosecha, rendimiento y extraccin de nutrientes por la
cosecha.
2.2.4.4. Resultados y discusin
Rendimiento
El anlisis de variancia para rendimiento de naranjilla, Cuadro 2, indica diferencias
significativas al 1% para tratamientos en las dos localidades en estudio.
Cuadro 2. Anlisis de varianza para rendimiento total de naranjilla en las localidades de saloya y
el triunfo, 2008.
Fuentes de variacin
Total
Repeticiones
Tratamientos
Error Experimental
C. V. (%)
NS = No significativo

G. de L.
31
3
7
21

* = Significativo al 5%

Cuadrados Medios por localidades

Saloya
0,65 ns
1057,7 **
0,21
1,07

El Triunfo
0,89 ns
882,93 **
0,46
1,91

** = Significativo al 1%

En el Cuadro 3, se observa que la prueba de Tukey al 5% para rendimiento de

naranjilla, presenta seis rangos bien definidos, los mismos que coinciden en las
dos localidades. Estos resultados demuestran que la respuesta del cultivo de
naranjilla en Saloya y El Triunfo, estadsticamente tienen el mismo
comportamiento; por tanto, la discusin de los resultados es igual para las dos
localidades.

191
Cuadro 3. Rendimientos promedios de naranjilla y prueba de tukey para tratamientos en las
localidades saloya y el triunfo, 2008.
No.
1
2
3
4
5
6
7
8

Tratamientos
Nutrientes
-N
-P
-K
-Ca
-S
-Mg
Completo
Completo + cal*

Rendimiento/Localidades (t/ha)
Saloya
El Triunfo
10.7 e
9.1
e
7.5
f
5.1
f
16.0 d
12.5
d
21.3 c
17.4
c
24.2 b
20.8
b
15.7 d
12.4
d
21.6
c
17.8
c
27.4
a
23.7
a

El rendimiento mximo en las dos localidades (Cuadro 3), se obtuvo con la

aplicacin de nitrgeno, fsforo, potasio, calcio, magnesio, azufre y ms cal (T8) y
segn la Prueba de Tukey se ubican en el primer rango (a), al comparar con el
tratamiento completo (T7) y el T8 son estadsticamente diferentes, observndose
el efecto positivo del encalado sobre el rendimiento de naranjilla. Al adicionar cal
agrcola incrementamos el pH de los suelos y reducimos la toxicidad del aluminio
(Al3+), permitiendo una mejor absorcin de nutrimentos por parte del cultivo de
naranjilla, dando como resultado plantas vigorosas, con buen crecimiento y
excelentes rendimientos, llegando a producir el T8 como mejor tratamiento 27,4
Tm/ha y el T2 como peor tratamiento 7,5 Tm/ha en la localidad de Saloya, con
una reduccin en el rendimiento del 72,5 % al no adicionar fsforo ni cal agrcola
como encalado; en la localidad de El Triunfo el mejor tratamiento T8 alcanzo
rendimientos de 23,7 Tm/ha y el peor tratamiento T2 alcanzo rendimientos de
5,08 Tm/ha, dando as un detrimento en el rendimiento del 78,56 % por falta de P
y cal.
En un segundo rango se ubic el tratamiento sin azufre (T5), superando al
tratamiento completo (T7), los resultados obtenidos en las dos localidades (Cuadro
3 y Figura 1) demuestran un efecto depresivo del azufre, sobre el rendimiento de
fruta de naranjilla; por lo tanto, no es necesario fertilizar con azufre en naranjilla,
an en suelos que presenten contenidos bajos de este elemento.
En el mismo cuadro 3, se observa en el tercer rango el tratamiento completo con
aplicaciones de nitrgeno, fsforo, potasio, calcio azufre y magnesio (T7), siendo
superado por el tratamiento sin azufre (T5) y el completo + cal (T8). Al comparar el
tratamiento completo (T7) frente a la omisin de los nutrimentos en estudio, se
observa que el principal nutrimento que est limitando la produccin de naranjilla
en las dos localidades es el fsforo (T2), ubicndose en el ltimo rango (f) con los
menores rendimientos de naranjilla (Cuadro 3 y Figura 1). Segn los resultados
del anlisis de suelo de las dos localidades, el contenido de fsforo es medio; sin
embargo, la respuesta del cultivo de naranjilla a la aplicacin de fsforo es alta,
demostrando que el requerimiento de este nutrimento por el cultivo es alto. El
Fsforo como el nitrgeno son importantes como parte estructural de muchos
compuestos, principalmente cidos nucleicos y fosfolpidos, adems el fsforo
desempea una funcin indispensable en el metabolismo energtico (Bidwell,
1993).

192

El segundo nutrimento que limita la produccin de naranjilla es el nitrgeno,

ubicndose el tratamiento N (T1) en el quinto rango (e), el contenido inicial de
nitrgeno y matera orgnica en los dos suelos es alto; sin embargo, debido a las
precipitaciones continuas en las zonas de produccin de naranjilla, el nitrgeno se
pierde rpidamente por lixiviacin, siendo necesario aplicaciones peridicas de
este elemento, para evitar la aparicin de sntomas visuales de deficiencia. El
Nitrgeno tiene un lugar especial en la nutricin no solo debido a su elevado
requerimiento por las plantas sino porque est casi completamente ausente de la
roca madre de la cual se forman los suelos, ya que la presencia de nitrgeno es
totalmente el resultado de la accin biolgica, abono artificial o fertilizante natural
(resultado de las descargas elctricas atmosfricas) (Bidwell, 1993).

Figura 1. Efecto de la omisin de nutrientes en el rendimiento de naranjilla al primer ao de

evaluacin en saloya y el triunfo, 2008.

A continuacin se encuentran en el cuarto rango (d) el potasio y magnesio como

nutrimentos que limitan la produccin de naranjilla (Cuadro 3 y Figura 1); el
contenido inicial en el suelo es bajo y la aplicacin de estos nutrimentos
contribuyen en la actividad enzimtica, el crecimiento de races y parte area de la
planta, resistencia a enfermedades, incrementan el rendimiento y mejoran la
calidad de la fruta. El calcio no influy en el rendimiento de naranjilla en ninguna
de las localidades y el tratamiento sin calcio (T4) se ubica en el mismo rango (c)
del tratamiento completo (T7)
Estos resultados demuestran que el elemento limitante de la produccin es el
fsforo, luego el nitrgeno, finalmente el magnesio y potasio; los dems elementos
no influyen significativamente en el rendimiento de naranjilla. Como enmienda
para corregir la acidez intercambiable de suelos con pH cido es necesario aplicar
cal agrcola o cal dolomita.
Distribucin de los nutrientes en las plantas de naranjilla
En la fruta se acumula el 61% del fsforo, 60% de potasio, el 42% de nitrgeno, el
41% de azufre, el 25% de magnesio y el 16% de calcio, del total de nutrimentos
absorbidos por la planta de naranjilla; la diferencia se distribuye en las hojas, tallos

193

y races, regresando gran parte de estos nutrimentos al suelo, mediante las podas
de las plantas.
Sntomas visuales de deficiencias para macro nutrientes
Los sntomas de deficiencias de los diferentes nutrimentos (N, P, K, Ca, Mg) que
se apreciaron durante las fases fenolgicas del cultivo de naranjilla durante el
primer ao en las dos localidades se describen a continuacin:
La deficiencia de Nitrgeno (N), se mostr con una clorosis de las hojas maduras
(bajeras), tornndose amarillentas para luego desprenderse. La clorosis se
extendi de hojas maduras a hojas jvenes, pero en menor intensidad, lo que
indica la translocacin del nitrgeno desde las hojas maduras a los puntos de
crecimiento donde existe mayor demanda de este nutrimento. Otro sntoma fue un
pobre crecimiento de la planta, con hojas pequeas y una escasa ramificacin.
La deficiencia de Fsforo (P), se present con plantas achaparradas, un color
verde intenso con cierto brillo en hojas jvenes, las nervaduras se tornaron de
coloracin prpura ms de lo normal, hojas abarquilladas hacia el haz y una pobre
floracin. Adems una leve clorosis en hojas maduras lo que indica la alta
movilidad del nutrimento en la planta y la translocacin hacia las zonas de mayor
demanda.
La deficiencia de Potasio (K), se manifest con una particular clorosis moteada y
necrosis paralela a las nervaduras en hojas maduras, lo que confirma adems la
movilidad de este nutrimento.
La deficiencia de Calcio (Ca), se mostr con una clorosis de los mrgenes de
hojas jvenes, lo cual indica la inmovilidad de este nutrimento, adems de ser un
elemento que raramente muestra su deficiencia en condiciones naturales.
La deficiencia de Azufre (S) en el cultivo de naranjilla cuando se omiti este
nutrimento, fue una clorosis en los puntos de crecimiento, contrariamente a lo que
ocurre con el nitrgeno, siendo el azufre un nutrimento inmvil dentro de la
planta.
La deficiencia de Magnesio (Mg), es muy comn en suelos cidos, en nuestro
caso se present con sntomas caractersticos como clorosis entre las nervaduras
(clorosis intervenal) acompaada de algunos pigmentos anaranjados; puesto que
el magnesio es muy soluble y de rpido transporte por toda la planta, los sntomas
de su deficiencia generalmente aparecen primero en las hojas maduras.
Anlisis Econmico
Con este anlisis, el cual toma nicamente los costos que varan en cada
tratamiento, los cuales en esta investigacin fueron: los insumos de campo y la
mano de obra utilizados en este cultivo en funcin de rendimiento, se determin

194

que el tratamiento con el beneficio neto ms elevado en las dos localidades fue el
T8 : Opt + Encalado, con un beneficio neto de $ 16412,6 en la (L1-Saloya) y $
13786,4 en la (L2-El Triunfo); el tratamiento con el beneficio neto ms bajo en las
dos localidades fue el T2: NKCaSMg, con un beneficio neto de $4053,6 en la
(L1) y $ 2295,1 en la (L2), todo esto proyectado por hectrea; esta diferencia
entre localidades se debe a que el rendimiento total en la (L1) fue 14 % ms que
en la (L2).
2.2.4.5. Conclusiones
Una vez realizados los anlisis estadsticos se lleg a las siguientes conclusiones:
Los nutrimentos limitantes en el desarrollo y produccin del cultivo de naranjilla
en la zonas en estudio en orden de importancia son: el Fsforo, Nitrgeno,
Magnesio y Potasio, el Calcio no presento ningn efecto en el rendimiento, el
azufre tendi a disminuir significativamente el rendimiento.
Los rendimientos obtenidos en la localidad de El Triunfo-Pastaza, fueron
ligeramente inferiores al rendimiento de Saloya-Pichincha, lo cual se atribuye al
efecto de altas precipitaciones que promueven la perdida de nutrientes en el
suelo y por ende un menor aprovechamiento por parte del cultivo de naranjilla.
El cultivo de naranjilla responde positivamente a la fertilizacin qumica, este
efecto se ve reflejado en la sintomatologa de deficiencias que presentaron los
tratamientos de omisin y en los anlisis foliares.
Los rendimientos se incrementaron con una fertilizacin completa frente a los
tratamientos de omisin, a excepcin del tratamiento de omisin de azufre
(T5), cuyo rendimiento supero al tratamiento con fertilizacin completa (T7);
en el tratamiento de fertilizacin completa ms cal agrcola (T8), los
rendimientos superaron a todos los tratamientos; por lo tanto la aplicacin de
cal agrcola en las zonas de estudio influyo notablemente en el rendimiento.
Con esta investigacin se determin el aporte de nutrientes por fuentes
nativas del suelo para el cultivo de naranjilla en las zonas en estudio; tambin
se determin en el tratamiento de omisin de azufre (T5) que el aporte por
fuentes nativas de este nutriente en el cultivo de naranjilla es suficiente para
obtener altos rendimientos.
Al realizar los anlisis de suelo al final del primer ao se determin que la
aplicacin de fertilizantes qumicos increment el contenido nutricional en cada
tratamiento, a excepcin de los elementos omitidos se puede ver que existi un
desgaste ya que hubo un aporte y una buena extraccin por el cultivo de
naranjilla.
2.2.4.6. Recomendaciones
En las zonas de produccin de naranjilla fertilizar con Nitrgeno, fsforo y potasio;
para corregir la acidez intercambiable del suelo aplicar cal dolomita como
enmienda y fuente de magnesio.

195

Continuar con el trabajo de investigacin sobre manejo de nutrientes por sitio

especfico en el cultivo de naranjilla durante el segundo ao para obtener ms
informacin acerca de la demanda real de nutrientes por parte del cultivo durante
su ciclo de produccin y as determinar dosis de fertilizacin.
Realizar trabajos de investigacin sobre niveles de encalado en las zonas de
produccin de naranjilla en la regin Amaznica y noroccidente de Pichincha.
La recomendacin de fertilizacin para el primer ao del cultivo de naranjilla, en
suelos con caractersticas similares es de 150 150 200 60 kg/ha/ao de N P2O5 - K2O y Mg, respectivamente.
2.2.4.7. Bibliografia
ALZATE, B. 1982. El cultivo del lulo (Solanum quitoense. Lam) en Colombia. En Memorias de la
Primera Conferencia Internacional de Naranjilla. Pp.48. Quito- Ecuador.
BIDWELL, R. 1993. El Suelo y la Nutricin Mineral. pp. 267-292. Mxico, D. F.
CAADAS, L. 1993. El mapa Bioclimtico y ecolgico del Ecuador. pp. 34-55 MAG-PRONAREG.
Quito-Ecuador.
CORPOICA.
2002. El cultivo del lulo. 1era. Edicin. Editor, Corporacin Colombiana de
Investigacin Agropecuaria CORPOICA. pp. 83-91. Manizales Colombia.
CONNOR, O; et al. 1993. Qumica del Suelo. pp. 233-255. Mxico, D.F.

2.2.5. Evaluacin de sustratos en el desarrollo de larvas de

Neoleucinodes elegantalis (G.). Tumbaco Pichincha20.
Objetivo del Proyecto (3): Desarrollar y evaluar estrategias de biocontrol de las
plagas y enfermedades ms importantes.
2.2.5.1. Objetivos
Objetivo general
Evaluar el efecto de once sustratos en el desarrollo de larvas de
Neoleucinodes elegantalis (G.) en condiciones de laboratorio.
Objetivo especfico

20

Seleccionar el sustrato adecuado para el desarrollo de larvas de N.

elegantalis.

Evelyn Viteri, Dr. Wilson Vsquez, Ing. Pablo Viteri Tcnicos Programa Nacional de Fruticultura, Dr.
Saulo de Jess Soria

196

2.2.5.2. Marco Referencial

La naranjilla (Solanum quitoense Lam) es un fruto de amplia aceptacin en el
mercado nacional e internacional, por su aroma, sabor, valor nutritivo, la calidad
de su jugo y uso en la agroindustria (Angulo, 2006).
Entre las principales plagas del cultivo se encuentra el Barrenador del fruto
(Neoleucinodes elegantalis), que es de gran importancia porque causa prdidas
de hasta el 80 % de la produccin (Gallegos et al, 2006). Su control se ha limitado
en gran medida a la aplicacin de plaguicidas como carbofurn, metamidofos y
monocrotofos, mismos que son utilizados en altas dosis lo que puede afectar la
salud humana y el medio ambiente (Revelo y Sandoval, 2003).
Con el objetivo de integrar el control biolgico a las medidas de control de N.
elegantalis, Sosa (2009) identific enemigos naturales, entre los cuales se
registraron: Beauveria sp., Aspergillus sp., Paecilomyces sp, Bacillus cereus,
Paenibacillus polymyxa, los virus NeelV1 y NeelV2, los parasitoides: Copidosoma
sp. (Encyrtidae: Encyrtinae), Meteorus sp. (Braconidae: Meteorinae), y Lymeon sp.
(Ichneumonidae: Cryptinae).
El establecimiento de la cra de N. elegantalis en laboratorio es necesario para la
ejecucin de pruebas de patogenicidad, determinacin de virulencia, y agresividad
de los entomopatgenos identificados, as tambin para la posterior propagacin
de enemigos naturales y su liberacin en campo, como parte de las estrategias de
manejo integrado de la plaga.
2.2.5.3. Metodologa
El ensayo tuvo lugar en las instalaciones del laboratorio del Programa de
Fruticultura del Instituto Nacional Autnomo de Investigaciones Agropecuarias a
2348 m.s.n.m. Las condiciones ambientales de la sala de cra de N. elegantalis
fueron controladas y mantenidas a 20 2C y 80 10 % HR con la ayuda de
cuatro humidificadores y un calefactor.
Los tratamientos evaluados fueron: (s1) germen de trigo, levadura de cerveza,
frjol, naranjilla, cido ascrbico, agar, agua y antimicrobiales; (s2): germen de
trigo, levadura de cerveza, frjol, naranjilla, cido ascrbico, agar, agua,
antimicrobiables e infusin de flores de naranjilla; (s3): levadura de cerveza,
naranjilla, cido ascrbico, agar, agua y antimicrobiales; (s4): levadura de cerveza,
naranjilla, cido ascrbico, agar, agua, antimicrobiales e infusin de flores; (s5):
levadura de cerveza, berenjena, cido ascrbico, agar, agua y antimicrobiales;
(s6): levadura de cerveza, berenjena, cido ascrbico, agar, agua, antimicrobiales
e infusin de flores; (s7): germen de trigo, levadura de cerveza, naranjilla,
zanahoria, casena, agar, agua y antimicrobiales; (s8): germen de trigo, levadura
de cerveza, naranjilla, zanahoria, casena, agar, agua, antimicrobiales e infusin
de flores de naranjilla; (s9): germen de trigo, levadura de cerveza, berenjena,
zanahoria, casena, agar, agua, antimicrobiales; (s10): germen de trigo, levadura

197

de cerveza, berenjena, zanahoria, casena, agar, agua, antimicrobiales e infusin

de flores; (s11) fruto de berenjena (Solanum melongena).
Se utiliz un Diseo Completo al Azar con once tratamientos, distribuidos en seis
observaciones. La unidad experimental estuvo constituida por un frasco de vidrio
de 2.5 cm de dimetro y 8 cm de altura, con 20 g de sustrato. Debido a sus
caractersticas de agresividad, se efectu el repique de las larvas transcurridos
quince das de desarrollo, las cuales fueron confinadas en cinco recipientes
plsticos de 10 cm de dimetro y 5 cm de altura, con ventilacin en la cubierta,
conteniendo 3 g de sustrato, a razn de dos individuos por recipiente. El
tratamiento con berenjena, consisti en un fruto de aproximadamente 200 g, sobre
el cual se colocaron diez larvas de primer instar de N. elegantalis; el fruto se
confin en un recipiente plstico de dimensiones: 20 cm de largo, 20 cm de ancho
y 12 cm de alto.
Las variables evaluadas fueron: porcentaje de larvas recuperadas, peso de pupas
macho y hembra, porcentaje de emergencia de adultos macho y hembra, das a la
emergencia de adultos macho y hembra.
2.2.5.4. Resultados y discusin
Porcentaje de larvas recuperadas
En el anlisis de variancia, Cuadro 1, se detect alta significancia estadstica para
sustratos. El promedio general fue de 13.06 % de larvas recuperadas. El CV fue
de 9.78 %, un valor excelente que valida los resultados. Tukey al 5 %, Cuadro 2,
detect cuatro rangos de significacin, encabezado por el sustrato s 11 con el 81.67
% de larvas recuperadas, mientras que el ltimo rango comprendieron los
sustratos s2, s3, s4, s5 y s6, en los cuales no hubo sobrevivencia.
Cuadro 1. Adeva de porcentaje de larvas recuperadas en la evaluacin de sustratos en el
desarrollo de larvas de neoleucinodes elegantalis. Tumbaco, pichincha. 2010.

Fuentes de Variacin

GL

CM

Total

61

Sustratos

10

3383.44**

EExp.

51

1.63

Promedio:
CV:

13.06 %
9.78 %

198
Cuadro 2. Tukey al 5 % para el porcentaje de larvas recuperadas en la evaluacin de sustratos en
el desarrollo de larvas de neoleucinodes elegantalis. Tumbaco, pichincha. 2010.
Sustrato

Porcentaje de larvas
recuperadas

Rangos de
Significacin

s 11

81.67

s7

20.00

s1

10.00

s8

10.00

s9

10.00

s 10

10.00

s2

s3

s4

s5

s6

a
b

Beck y Chippendale (1968), manifiestan que el sustrato debe proveer de incitantes

fsicos y qumicos que promuevan la alimentacin y, de estimulantes de la
ingestin de cantidades suficientes de alimento por el insecto, que satisfagan sus
necesidades metablicas, similar a la especificidad del hospedero natural.
Por tanto los resultados son analizados en este orden: presencia de incitantes
fsicos, qumicos y, presencia de estimulantes de alimentacin de larvas de N.
elegantalis en los sustratos. La alimentacin de larvas confinadas en los sustratos
s3, s4, s5 y s6 fue limitada, entre otras caractersticas, por el bajo contenido de
agua (60.58%), mientras que el porcentaje de agua fue mayor en los sustratos s 1
(76.94%), s7, s8, s9 y s10 (80.45%), por lo que adquirieron una consistencia blanda,
lo que posibilit la formacin de galeras, como sucede en hospederos naturales.
El contenido de agua en los sustratos determin su consistencia y por tanto su
aceptacin por larvas de N. elegantalis, es decir respondieron al incitante de
naturaleza fsica. El contenido satisfactorio de agua en los sustratos de desarrollo
concuerda con lo manifestado por Beck y Chippendale (1968), entre el 65 y 85%.
Beck y Chippendale (1968) manifiestan que especies con gran especificidad
requieren de la presencia de incitantes qumicos de la planta hospedera
incorporados en el sustrato para dar inicio a su alimentacin.
El porcentaje de larvas recuperadas en el sustrato s 11 fue mayor al resto de
sustratos porque berenjena es su hospedero natural y las condiciones ambientales
se mantuvieron constantes.
La naranjilla incorporada en los sustratos s 1, s2, s3, s4, s7 y s8 pudo haber actuado
como incitante de la alimentacin de larvas, as como berenjena en los sustratos
s5, s6, s9 y s10, lo que sugiere que N. elegantalis requiere de incitantes qumicos de
la planta hospedera en el sustrato para dar inicio a su alimentacin, as como de
incitantes fsicos.

199

Sin embargo, la infusin de flores de naranjilla incorporada en los sustratos s2, s4,
y s6 ces la alimentacin de larvas en relacin a s 1, s3, y s5, respectivamente.
Mientras que en los sustratos s 8 y s10 no ejerci ningn efecto. Este fenmeno
sugiere que los voltiles de flores de naranjilla pudieron necesitar de procesos
diferentes de extraccin como destilacin enfleurage, que permitan el mejor
aprovechamiento de los aceites esenciales y su efecto incitante sobre N.
elegantalis.
La alimentacin de larvas en los sustratos s 3, s4, s5, s6 fue incitada por la
presencia de su hospedero natural incorporado en el sustrato, sin embargo, la
carencia de germen de trigo result en la mortalidad total de las larvas en estado
inmaduro, no as en los sustratos s 1, s7, s8, s9, y s10, conformados por germen de
trigo. Larvas de N. elegantalis pudieron haber sintetizado cidos grasos a partir de
protenas y carbohidratos (Parra, 1991), sin embargo los sustratos s 3, s4, s5, s6
tambin carecieron de fuentes importantes de carbohidratos y protena: germen de
trigo y frjol, respectivamente. La levadura de cerveza como nico aporte de
energa y protena no logr satisfacer las necesidades nutritivas de las larvas.
Peso de pupas macho
En el anlisis de variancia se detect alta significacin estadstica para sustratos.
El promedio general fue de 30.17 mg/pupa. El CV fue de 5.18 %, un valor
excelente. Tukey al 5 %, Cuadro 3, detect cuatro rangos de significacin,
encabezado por el sustrato s11 con un peso de 40.63 mg, y el ltimo rango
comprendieron los sustratos s9 y s10 con 20.0 y 18.0 mg, respectivamente.
Pupas macho provenientes de s 11 alcanzaron el mayor peso, el fruto de berenjena
por ser hospedero natural de N. elegantalis, proporcion los incitantes y nutrientes
necesarios para el ptimo desarrollo larval.
El mayor peso pupal alcanzado en sustratos elaborados fue de 35.50 mg,
correspondiente a s1, las pupas se mostraron vigorosas y sanas, sin
deformaciones similares a s11. Lo cual sugiere que los nutrientes contenidos en s 1
actuaron como estimulantes de la ingestin activa por larvas de N. elegantalis en
relacin al resto de sustratos elaborados. El sustrato s 1 se caracteriz por tener
alto contenido proteico provisto por el germen de trigo, levadura de cerveza y
frjol, en conjunto, los cuales aportaron en los procesos metablicos de larvas y
pupas (Parra, 1991).

200
Cuadro 3. Tukey al 5 % para peso de pupas macho en la evaluacin de sustratos en el desarrollo
de larvas de n. Elegantalis (g.). Tumbaco-pichincha. 2010.
Rangos de
significacin

Sustratos

Peso (m g)

s 11

40.63

s1

35.50

s7

27.83

s8

26.50

s9

20.00

s 10

18.00

a
b

Pupas provenientes de los sustratos s 7, s8, s9 y s10, que carecieron completamente

de cido ascrbico, mostraron deformidad y mal desarrollo, mientras que el
proceso de metamorfosis en s1 fue completo y las pupas se mostraron sanas, lo
cual sugiere que el cido ascrbico interviene en procesos de metamorfosis de N.
elegantalis.
Peso de pupas hembra
En el anlisis de variancia se detect alta significancia estadstica para sustratos.
El promedio general fue de 32.47 mg/pupa. El CV fue de 3.82 %, un valor
excelente para este tipo de ensayos.
Tukey al 5 %, Cuadro 4, detect cinco rangos de significacin, encabezado por el
sustrato s11 con 43.57 mg y en ltimo rango los sustratos s 9 y s10 con un peso de
21.00 y 19.00 mg, respectivamente. El mayor peso alcanzado se registr en pupas
procedentes de berenjena, s11, por ser su hospedero natural.
El mayor peso entre los sustratos elaborados se obtuvo en s 1, por contener el
aporte proteico del grano de frjol a diferencia del resto de sustratos, lo que
permiti el cumplimiento de procesos metablicos de larvas y pupas como lo
seal Parra (1991). Pupas procedentes de s 7, s8, s9, y s10 que carecieron de
cido ascrbico, mostraron deformidad y mal desarrollo, mientras que pupas
procedentes de s1 se observaron sanas y sin deformaciones.
Cuadro 4. Tukey al 5 % para peso de pupas hembra en la evaluacin de sustratos en el desarrollo
de larvas de n. Elegantalis (g.). Tumbaco-pichincha. 2010.
Sustratos

Peso (m g)

Rango de significacin

s 11

43.57

s1

36.75

s7

28.00

s8

24.50

s9

21.00

s 10

19.00

a
b
c
d

201

Porcentaje de emergencia de adultos macho

En el anlisis de variancia se detect alta significancia estadstica para sustratos.
El promedio general fue de 61.59 % de emergencia. El CV fue de 10.64 %, valor
excelente. Tukey al 5 %, Cuadro 5, detecta dos rangos de significacin,
encabezados por los sustratos s1, s7 y s11, con un porcentaje de emergencia del
100.0, 100.0 y 92.50%. Las condiciones de temperatura y humedad mantenidas
en la sala de cra aceleraron la descomposicin de los frutos de berenjena, s 11, lo
cual provoc la contaminacin del 7.5 % de prepupas, mientras que prepupas
procedentes de sustratos elaborados no fueron expuestas a tal condicin por
desarrollarse en sustratos esterilizados y con presencia de elementos
antimicrobiales, con lo cual se genera material biolgico ptimo para la realizacin
de ensayos de carcter microbiolgico y entomolgico.
Cuadro 5. Tukey al 5 % para porcentaje de emergencia de adultos macho en la evaluacin de
sustratos en el desarrollo de larvas de n. Elegantalis (g.). Tumbaco-pichincha. 2010.
Rangos de
significacin

Sustratos

% Em ergencia

s1

100.00

s7

100.00

s 11

92.50

s8

0.0

s9

0.0

s 10

0.0

La carencia de cido ascrbico en el sustrato s 7 result en la totalidad de adultos

con alas y abdomen deformados, en los tratamientos s 8, s9, s10 se observaron
adultos deformes dentro de la exuvia pupal que no emergieron.
Porcentaje de emergencia de adultos hembra
En el anlisis de variancia se detect alta significancia estadstica para
sustratos. El promedio general fue de 65.67 % de emergencia. El CV fue
10.58%, valor excelente. Tukey al 5 %, Cuadro 6, detect dos rangos
significacin, encabezado por los sustratos s 1, s7 y s11, con un porcentaje
emergencia del 100.0, 100.0, y 85.55%.

los
de
de
de

Cuadro 6. Tukey al 5 % para porcentaje de emergencia de adultos hembra en la evaluacin de

sustratos en el desarrollo de larvas de N. elegantalis (G.). Tumbaco-Pichincha. 2010.
Rangos de
significacin

Sustratos

% Em ergencia

s1

100.00

s7

100.00

s 11

85.55

s8

0.0

s9

0.0

s 10

0.0

202

La ocurrencia de la descomposicin acelerada de frutos de berenjena contamin

el 14.45 % de prepupas, lo cual repercuti en el porcentaje de emergencia.
Hembras procedentes de s1 se mostraron vigorosas y sanas, sin presencia de
malformaciones en alas abdomen, lo cual indica que la composicin de s 1 pudo
satisfacer las necesidades nutricionales de N. elegantalis.
La totalidad de adultos procedentes de s 7 mostraron alas y abdomen
malformados, lo cual pone de manifiesto que el cido ascrbico es esencial en el
desarrollo de N. elegantalis.
Das a la emergencia de adultos macho
En el anlisis de variancia se detect alta significancia estadstica para sustratos.
El promedio general fue de 18.79 das a la emergencia. El CV fue de 4.30 %,
valor excelente. Tukey al 5 %, Cuadro 7, detect dos rangos de significacin,
encabezado por los sustratos s11 y s1, con 16.33 y 17.50 das, respectivamente.
Cuadro 7. Tukey al 5 % para das a la emergencia de adultos macho en la evaluacin de sustratos
en el desarrollo de larvas de N. elegantalis (G.). Tumbaco-Pichincha. 2010.
Sustratos

Das a la em ergencia

Rangos de significacin

s 11

16.33

s1

17.50

s7

21.67

El perodo de emergencia de adultos procedentes de s 1 no difiri de s11, por tanto

se deduce que la cronologa de desarrollo pupal no se vio afectada en individuos
desarrollados en s1, sino que fue similar a la del hospedero natural.
La emergencia de los adultos de s7 se vio prolongada, lo cual sugiere que la
ausencia de cido ascrbico en el sustrato repercuti en el desarrollo del adulto.
Das a la emergencia de adultos hembra
En el anlisis de variancia se detect alta significancia estadstica para sustratos.
El promedio general fue de 17.21 das. El CV fue de 4.53 %, valor excelente.
Tukey al 5 %, Cuadro 8, detect dos rangos de significacin, encabezado por los
sustratos s11 y s1, con 15.67 y 17.00 das, respectivamente.
La cronologa de emergencia de hembras procedentes de s 1 fue similar a la de
individuos procedentes del hospedero natural, lo que sugiere que los procesos
metablicos de s1 fueron normales.

203
Cuadro 8. Tukey al 5 % para das a la emergencia de adultos hembra en la evaluacin de sustratos
en el desarrollo de larvas de n. Elegantalis (g.). Tumbaco-pichincha. 2010.
Sustratos

Das a la em ergencia

Rangos de significacin

s 11

15.67

s1

17.00

s7

19.75

El perodo a la emergencia se vio prolongado en adultos procedentes de s7, lo cual

sugiere que la carencia de cido ascrbico repercuti en el desarrollo de los
adultos hembra.
2.2.5.5. Conclusiones
En la evaluacin de once sustratos sobre el desarrollo de larvas de N.
elegantalis, se evidenciaron respuestas diferentes del insecto en la aceptacin
de los sustratos, lo cual se reflej en el porcentaje de larvas recuperadas, peso
de pupas, das a la emergencia de adultos, porcentaje de emergencia y
malformaciones, debido a las caractersticas incitantes y estimulantes propias
de cada sustrato.
Los sustratos s11 y s1 fueron los mejores sustratos para el desarrollo de larvas
de N. elegantalis, lo cual se evidenci en las variables evaluadas. El sustrato
s11, por ser hospedero natural del insecto, registr el mayor porcentaje de larvas
recuperadas, mayor peso pupal, menor perodo a la emergencia de adultos, y
ausencia de adultos malformados. El sustrato elaborado s 1 gener individuos
con caractersticas similares a los procedentes del hospedero natural, el cual
registr el mayor porcentaje de emergencia de adultos sanos, sin
malformaciones. Por lo cual, los sustratos s 11 y s1 se constituyeron en los
ptimos para el establecimiento de la cra de N. elegantalis en condiciones de
laboratorio.
2.2.5.6. Recomendaciones
Identificar bioqumicamente los elementos incitantes presentes en los
hospederos naturales de N. elegantalis, y su uso en los sustratos de desarrollo
larval.
Se recomienda integrar dos mdulos de cra de N. elegantalis: (1) sobre
berenjena con el objetivo de mantener el pie de cra, por su viabilidad y, (2)
sobre el sustrato elaborado s 1 por generarse material biolgico sano, vigoroso y
libre de contaminantes requerido para la realizacin de ensayos microbiolgicos
y entomolgicos.

204

2.2.5.7. Bibliografa
Angulo, R. 2006. Lulo: El cultivo. Bogot, CO, Colciencias.100 p.
Gallegos, P; Asaquibay C; Arroyo, M. 2006. Control del barrenador del fruto de la naranjilla
(Neoleucinodes elegantalis) mediante productos de baja toxicidad. In INIAP. ed. Informe Anual del
Departamento de Proteccin Vegetal. Quito, EC. p. 5-10.
Parra, J.R. 1991. Consumo e utilizao de alimentos por insetos. In Panizzi, AR; Parra, JR. eds.
Ecologa nutricional de insetos e suas implicaones no manejo de pragas. So Paulo, BR. P. 9-65.
Revelo, J; Sandoval, P. 2003. Factores que afectan la produccin y productividad de la naranjilla
(Solanum quitoense) en la regin amaznica del Ecuador: Proyecto Manejo Integrado de Plagas
para el Mejoramiento de la Produccin Sostenible de Frutas en la Zona Andina. Quito, EC, INIAP.
117 p.
Sosa, C. 2009. Prospeccin e identificacin de enemigos naturales del barrenador del fruto
Neoleucinodes elegantalis y evaluacin de la incidencia de las principales plagas en el cultivo de
naranjilla (Solanum quitoense) en las zonas productoras. Tesis Ing. Agr. Quito, EC, Universidad
Central del Ecuador, Facultad de Ciencias Agrcolas. 86 p.

2.2.6. Patogenicidad de Fusarium oxysporum f.sp. quitoense en la

Seccin Lasiocarpa21.
Objetivo Del Proyecto (2): Caracterizar las colecciones de germoplasma, por
variabilidad gentica y resistencia a plagas y enfermedades de mayor importancia
2.2.6.1. Marco Referencial
Considerando que la naranjilla se cultiva en ecosistemas muy frgiles, como la
selva amaznica, donde el uso de productos qumicos no es la mejor opcin
dentro de un enfoque moderno de defensa del medio ambiente, la desinfeccin de
semilla y el uso de patrones resistentes son a corto plazo las alternativas de
control de F. oxysporum, pero estas prcticas necesitan procesos de adopcin,
los cuales son a veces difciles de implementar. Por estas razones la resistencia
de la Seccin Lasiocarpa del INIAP, se encontr que todas las accesiones de S.
quitoense fueron susceptibles al patgeno, mientras que
la
mayora
de
accesiones de S. pectinatum, S. stramonifolium, S, hirtum, S pseudolulo, S,
tequlense, S. sessiliflorum y el hbrido INIAP Palora presentaron resistencia. En
este estudio el hbrido Puyo present sntomas tardos y la colonizacin vascular
de F. oxysporum fue menor que las de las accesiones de S. quitoense.
En un estudio de la reaccin a F. oxysporum f. sp. quitoense de una coleccin,
mientras que el hbrido INIAP-Palora fue completamente resistente (Gallardo,
2005). Al momento en el hbrido Puyo se han presentado epidemias severas y en
el hbrido INIAP-Palora se ha observado sntomas de la enfermedad, por lo que
21

Luca Manangn, Jos Ochoa

205

parece que nuevas poblaciones de F. oxysporum f.sp. quitoense han evolucionado

y se hace necesario actualizar el estudio de patogenicidad de la enfermedad
involucrando un mayor nmero de aislamientos del patgeno, teniendo en cuenta
el lugar y el hospedero de donde procedan.
La resistencia gentica es la estrategia ms conveniente de manejo de la MVN, su
durabilidad depende de la capacidad de adaptacin del patgeno por el desarrollo
de nuevas razas, al momento los niveles de resistencia del hbrido Puyo no son
suficientes y ya se observan sntomas de la MVN en el hbrido INIAP-Palora. Esto
significa que la poblacin del patgeno ha evolucionado.
La presente investigacin busc contribuir al entendimiento del potencial evolutivo
en la poblacin de F. oxysporum f.sp. quitoense agente causal de la Marchitez
Vascular de la Naranjilla, con el fin de optimizar la utilizacin prctica de la
resistencia presente en la Seccin Lasiocarpa.
2.2.6.2. Metodologa
Antes de iniciar el ensayo, se parti de unas pruebas preliminares que consistieron
en la inoculacin de los aislamientos del hongo F. oxysporum en plantas de
naranjilla susceptibles al patgeno para confirmar la virulencia de los distintos
aislamientos que actualmente se conservan en arena.
Las semillas de las plantas de la seccin Lasiocarpa se desinfectaron con
hipoclorito de sodio al 1% durante 3 minutos y luego fueron lavadas con agua
estril por tres ocasiones, posteriormente se trataron con cido giberlico a 1250
ppm, por un da para estimular la germinacin, inmediatamente despus se
colocaron en cajas de Petri con papel absorbente estril y se ubicaron en una
estufa a una temperatura de 23C. Tan pronto las plntulas alcanzaron dos
centmetros, fueron llevadas a fundas con sustrato estril para su crecimiento.
Cuando las plantas obtuvieron 10 cm. de altura fueron transplantas a camas, las
cuales contenan sustrato previamente esterilizado e inoculado con clamidsporas
de cada uno de los aislamientos de F. oxysporum f. sp quitoense a una dosis de
5000 unidades formadoras de colonia (UFC)/ gramo. Posteriormente se evalu las
dos variables diariamente
Los hbridos se propagaron por va asexual seleccionando la parte apical de
plantas sanas, vigorosas y de preferencia de ramas de 2 o ms aos con 3 a 4
yemas laterales. Las estacas se cortaron en pedazos de 30 cm de largo. La
siembra de las estacas se realiz en fundas plsticas con 500 gramos de sustrato
compuesto de humus de lombriz, tierra negra y pomina; en proporcin 2:2:1. La
porcin basal de cada estaca se enterr oblicuamente hasta 10 centmetros de
profundidad. Tres meses despus de la siembra, se procedi a la inoculacin de
cada uno de los aislamientos de F. oxysporum f. sp quitoense a una dosis de 5000
unidades formadoras de colonia (UFC)/g

206

El sustrato se inocul de acuerdo al mtodo desarrollado por Larkin (1993) y

adaptado al cultivo de naranjilla por Gallardo (2005). En el medio lquido papadextrosa (PD) se sembr un segmento de micelio de un cultivo monosprico del
hongo de 5 das de edad, luego el medio con el inoculante permaneci en
agitacin constante por 15 das. El micelio desarrollado se homogeniz en una
licuadora durante 10 segundos y con el uso de una jeringuilla se inocul 50 cc de
suspensin en 1000 gramos de arena fina estril, contenida en una funda plstica.
La arena inoculada permaneci en el invernadero a 23C y 70% de HR por cuatro
semanas, hasta que se seque. Este proceso, permiti la formacin de
clamidsporas; cuya concentracin se defini sembrando en PDA diferentes
diluciones peso / volumen del inoculante.
El riego se realiz pasando un da utilizando 100 cc de agua por planta, el ltimo
mes de evaluacin el riego fue diario. Se aplicaron fertilizaciones cada 15 das
antes de la inoculacin utilizando nitrofoska azul (12-12-17-2+ME) a una dosis de
1 g por planta.
Se utiliz Buprofezin a 2.5 cc/l agua para mantener baja la incidencia de mosca
blanca en la investigacin.
2.2.6.3. Resultados y discusin
Debido a la muerte de las estacas de los hbridos Puyo e INIAP-Palora, por
ausencia de prendimiento, estos materiales no fueron tomados en cuenta en este
estudio.
A consecuencia de la gran variabilidad y a la eliminacin de diferentes unidades
experimentales se vio conveniente hacer la discusin en trminos generales
estableciendo Cuadros por categoras y utilizando una estadstica no paramtrica
para cada una de las especies de la seccin Lasiocarpa y para los aislamientos de
F. oxysporum.
La infeccin causada por F. oxysporum es uno de los problemas vasculares ms
graves que tiene esta especie frutcola, en razn de que presenta sntomas que al
inicio pueden verificarse como marchitez regresiva y con el tiempo causa la
muerte de la planta. Al realizar un corte transversal en el tallo se observa el xilema
decolorido.
Anlisis de resistencia a F. oxysporum
S. quitoense
Al aplicar la prueba de Kruskall Wallis para accesiones de S. quitoense, se
observa que las accesiones fueron estadsticamente iguales para la variable
periodo de establecimiento de la enfermedad a nivel 3. El promedio de das ms
alto para estas accesiones le correspondi a la accesin 229 con 101, 63 das y la
accesin que tard menos tiempo fue la 109 con 95,15 das posteriores a la
inoculacin.

207

En los resultados de aplicacin de la prueba de Kruskall Wallis para accesiones de

S. quitoense, se observan diferencias significativas para la variable nivel 3 de
colonizacin vascular. Las accesiones 94, 211 y 229 de S. quitoense presentaron
un nivel igual de colonizacin; en cambio, la accesin 105 manifest un nivel de
3,03 y la accesin 109 un nivel de 3,4; sin embargo, todas las accesiones fueron
susceptibles a los aislamientos de F. oxysporum. Es importante mencionar que las
accesiones 94, 105 y 109 no fueron afectadas por el aislamiento 12 de F.
oxysporum (aislamiento de Hbrido Palora.
S. sessiliflorum.
En los resultados del anlisis, mediante la prueba de Kruskall Wallis para
accesiones de S. sessiliflorum, se observa la reaccin de resistencia o
incompatibilidad al nivel de colonizacin 0, 1 y 2 (sin evidencia de dao, lesiones
corticales de la raz y decoloracin leve del sistema vascular limitada a la raz,
respectivamente) que presentaron las accesiones 47, 53, 210 y 296 de S.
sessiliflorum a la inoculacin de 15 aislamientos de F. oxysporum, la accesin 128
present reaccin de susceptibilidad al nivel de colonizacin 3 (Decoloracin leve
del sistema vascular en gran parte de la planta) para uno de los aislamientos,
esta reaccin correspondi al aislamiento 10.
S. hirtum
En los resultados de los anlisis, mediante la prueba de Kruskall Wallis para
accesiones de S. hirtum, se observ la reaccin de resistencia o incompatibilidad,
nivel de colonizacin 0, 1 y 2 (sin evidencia de dao, lesiones corticales de la raz
y decoloracin leve del sistema vascular limitada a la raz, respectivamente) que
presentaron las accesiones 2, 83, 253 de S. hirtum a la inoculacin de 15
aislamientos de F. oxysporum, la accesin 124 exhibi reaccin de susceptibilidad,
nivel de colonizacin 3 (Decoloracin leve del sistema vascular en gran parte de la
planta) para uno de los aislamientos, esta reaccin correspondi al aislamiento
14. La accesin ms resistente al patgeno fue la accesin 83 de S. hirtum
S. tequilense
En los resultados de los anlisis, mediante la prueba de Kruskall Wallis para
accesiones de S. tequilense, se observa la reaccin de resistencia o
incompatibilidad, nivel de colonizacin 0, 1 y 2 (sin evidencia de dao, lesiones
corticales de la raz y decoloracin leve del sistema vascular limitada a la raz,
respectivamente) que presentaron las accesiones 285 y 286 de S. tequilense a la
inoculacin de 15 aislamientos de F. oxysporum, la accesin 1 present reaccin
de susceptibilidad al nivel de colonizacin 3 (Decoloracin leve del sistema
vascular en gran parte de la planta) para uno de los aislamientos, esta reaccin
correspondi al aislamiento 1. La accesin 62 tambin present reaccin de
susceptibilidad al nivel de colonizacin 3 (Decoloracin leve del sistema vascular
en gran parte de la planta) para dos de los aislamientos, estas reacciones
correspondieron a los aislamientos 12 y 14.

208

S. pectinatum
En los resultados de los anlisis, mediante la prueba de Kruskall Wallis para
accesiones de S. pectinatum, se observa la reaccin de resistencia o
incompatibilidad al nivel de colonizacin 0, 1 y 2 (sin evidencia de dao, lesiones
corticales de la raz y decoloracin leve del sistema vascular limitada a la raz,
respectivamente) que presentaron las accesiones 57, 209 y 295 de S. pectinatum
a la inoculacin de 15 aislamientos de F. oxysporum, la accesin 500 present
reaccin de susceptibilidad al nivel de colonizacin 3 (Decoloracin leve del
sistema vascular en gran parte de la planta) para uno de los aislamientos, esta
reaccin correspondi al aislamiento 14.
S. pseudolulo
En los resultados de los anlisis, mediante la prueba de Kruskall Wallis para
accesiones de S. pseudolulo, se observa la reaccin de resistencia o
incompatibilidad, nivel de colonizacin 0,1 y 2 (sin evidencia de dao, lesiones
corticales de la raz y decoloracin leve del sistema vascular limitada a la raz,
respectivamente) que presentaron las accesiones 117, 297, 298 y 308 de S.
pseudolulo a la inoculacin de 15 aislamientos de F. oxysporum, la accesin 221
manifest reaccin de susceptibilidad, nivel de colonizacin 3 (Decoloracin leve
del sistema vascular en gran parte de la planta) para cuatro de los aislamientos,
estas reacciones correspondieron a los aislamientos 4, 11, 14 y 15. La accesin
272 present reaccin de susceptibilidad (nivel de colonizacin 3), para uno de los
aislamientos, esta reaccin correspondi al aislamiento 11.
S. hyporhodium y S. stramonifolium
Se observa la reaccin de resistencia o incompatibilidad al nivel de colonizacin 0,
1 y 2 (sin evidencia de dao, lesiones corticales de la raz y decoloracin leve del
sistema vascular limitada a la raz, respectivamente) que presentan las accesiones
268 de S. hyporrhodium y la accesin 8 de S. stramonifolium a la inoculacin de15
aislamientos de F. oxysporum, la accesin
2.2.6.4. Resultados y discusin
De manera general se puede apreciar la reaccin de resistencia o incompatibilidad
y de susceptibilidad o compatibilidad de los aislamientos de F. oxysporum
evaluados en este estudio.
Para las reacciones de incompatibilidad se consideraron aquellas que presentaron
nivel de colonizacin 0 (sin evidencia de dao), nivel de colonizacin 1(lesiones
corticales de la raz) y nivel de colonizacin 2 (decoloracin leve del sistema
vascular limitada a la raz); mientras que las reacciones de compatibilidad fueron
aquellas que presentaron nivel de colonizacin 3 (decoloracin leve del sistema
vascular en gran parte de la planta) y nivel de colonizacin 4 (decoloracin de
moderada a severa del sistema vascular de toda la planta) Figura 5.

209

Las accesiones correspondientes a S. quitoense manifestaron niveles de

colonizacin 3 y 4 que corresponde a un proceso de compatibilidad con F.
oxysporum; en contraste, se aprecia que las otras accesiones manifestaron
niveles de colonizacin 0, 1 y 2 que en la prctica corresponde a niveles de
incompatibilidad entre las accesiones y el agente causal.
Anlisis de patogenicidad
Aislamientos de F. oxysporum
En los resultados de los anlisis, mediante la prueba de Kruskall Wallis para 15
aislamientos de F. oxysporum, no se observan diferencias significativas para la
variable periodo de establecimiento de la enfermedad; sin embargo, se puede
mencionar de manera general que las accesiones de S. quitoense presentaron
nivel 3 de sintomatologa entre 90 y 100 das luego de la inoculacin; con relacin
a esta variable cabe sealar que Bez (2003), para el nivel de infeccin 3
determin que los das promedios comprendidos entre la inoculacin y
aparecimiento de sntomas fueron 26,3 y 46 que contrastan con los alcanzados en
esta investigacin, lamentablemente no se conoce el aislamiento utilizado en la
investigacin de Baz; pero, es importante resaltar que la metodologa de
inoculacin fue similar en ambos casos, muy probablemente la diferencia puede
deberse a la capacidad infectiva de los aislamientos y el material de las
accesiones.
En los resultados de los anlisis, mediante la prueba de Kruskall y Wallis para 15
aislamientos de F. oxysporum, no se observan diferencias significativas para la
variable nivel de colonizacin vascular.
En la Figura 5 se presenta la reaccin de resistencia (-) o incompatibilidad y de
susceptibilidad (+) o compatibilidad de los aislamientos evaluados en este estudio.
Para las reacciones de incompatibilidad se consideraron aquellas que presentaron
colonizacin vascular de 0, 1 y 2 (sin evidencia de dao, lesiones corticales de la
raz y decoloracin leve del sistema vascular limitada a la raz, respectivamente)
mientras que las reacciones de compatibilidad fueron aquellas que presentaron
niveles de colonizacin vascular de 3 y 4 (decoloracin leve del sistema vascular
en gran parte de la planta y decoloracin de moderada a severa del sistema
vascular de toda la planta, respectivamente); cabe resaltar que la decoloracin
que se observ en el sistema vascular es el resultado de la formacin de
pigmentos melanoides en los tejidos vasculares de acuerdo a Sarasola y Roca
(1975).

210

-1.92
Dim2

1.89

0.47

Dim3

3.31

-0.95

Figura 5. Nivel de colonizacin vascular causadas por varios aislamientos de F. oxysporum.

EESC. Cutuglahua Pichincha. 2009.

De acuerdo a este criterio todos los aislamientos de F. oxysporum f. sp. quitoense

a excepcin del aislamiento 12 fueron patognicos en todas las accesiones de
naranjilla (ya que produjeron colonizacin vascular en todas las accesiones de S.
quitoense. Gallardo (2005), no observ diferencias de patogenicidad entre los
cuatro aislamientos de F. oxysporum que utiliz en su investigacin. Se debe
enfatizar que el aislamiento 12 fue obtenido del Hbrido Palora que no present
compatibilidad con las accesiones 94, 105 y 109 de S. quitoense. Los aislamientos
1, 4, 10, 11 y 14 produjeron adems colonizacin vascular en ciertas accesiones
de otras especies diferentes a S. quitoense, y aunque la compatibilidad est
asociada con el nivel de colonizacin vascular 3, que a veces son difciles de
discriminar del nivel 2, estos aislamientos pueden considerarse ms patognicos
que los dems aislamientos. El aislamiento 14 fue el ms patognico ya que
coloniz a accesiones de S. hirtum, S. tequilense, S. pectinatum y S. pseudolulo.
El aislamiento 11, fue tambin patognico en dos accesiones de S. pseudolulo y
se puede considerar muy patognico en esta especie. Los aislamientos 4 y 15
tambin fueron patognicos en S. pseudolulo.
2.2.6.5. Conclusiones
Todos los aislamientos de F. oxysporum f. sp. quitoense a excepcin del
aislamiento 12 son patognicos en todas las accesiones de naranjilla.
La patogenicidad de los aislamientos de F. oxysporum f. sp. quitoense a
excepcin del aislamiento 12 no est aparentemente asociada ni con el origen
del hospedante, ni con el origen geogrfico. Es decir que el aislamiento no es
ms patognico si viene de naranjilla comn o del hibrido Puyo, o si el
aislamiento viene de alguna regin en especial.

211

La falta de variabilidad del patgeno se puede deber a que no se han

expuesto fuentes de resistencia al mismo, ya que el patgeno es virulento a
todas las variedades de naranjilla comn y al hibrido Puyo, los que no tienen
fuentes de resistencia. Adicionalmente el patgeno tiene reproduccin asexual
y al ser un patgeno de suelo, la variacin producida por mutaciones tiene
pocas probabilidades de detectarse.
La presencia de esta poblacin homognea de F. oxysporum f. sp. quitoense
en todo el pas se debe a la transmisin del patgeno por semilla. A travs de
la semilla, el agricultor inconscientemente ha trasmitido el patgeno a todas
las reas del cultivo de naranjilla en el pas.
Algunas de las accesiones de S. sessiliflorum, S. tequilense, S. hirtum,
S.pectinatum y S. pseudolulo, desarrollaron sntomas de la MVN y presentaron
colonizacin vascular de F. oxysporum.
Todas las accesiones de S. quitoense desarrollaron sntomas de la MVN y
presentaron colonizacin vascular en la evaluacin de los aislamientos de F.
oxysporum, a excepcin de las accesiones 94, 105 y 109 que no desarrollaron
sntomas de la MVN ni presentaron colonizacin vascular para el aislamiento
12.
La accesin 221 de S. pseudolulo present nivel 3 de colonizacin en los
aislamientos 4, 11, 14 y 15, siendo esta la nica accesin de S. pseudolulo
afectada por 4 aislamientos.
La accesin 8 de S. stramonifolium y la accesin 268 de S. hyporhodium
presentaron resistencia (nivel 0 y 1) a los 15 aislamientos de F. oxysporum.
El aislamiento 12, es diferente a todos los aislamientos antes analizados, es
solo patognico en las accesiones 211 y 229 de S. quitoense. Este
aislamiento es por lo tanto poco patognico ya que no es capaz de infectar
accesiones de S. quitoense, que regularmente son susceptibles, parece
pertenecer a una poblacin diferente de F. oxysporum. Es probable entonces
que este aislamiento haya evolucionado para infectar especialmente el hibrido
INIAP-Palora.
2.2.6.6. Recomendaciones
Evaluar los aislamientos ms patognicos en nuevas pruebas de inoculacin
del hongo F. oxysporum para comprobar su patogenicidad
Evaluar el aislamiento procedente del Hbrido INIAP-Palora, debido a que
parece ser menos patognico para naranjilla comn
Utilizar las accesiones resistentes a F. oxysporum, que pueden cruzarse con
naranjilla comn para desarrollar variedades de naranjilla resistentes a F.
oxysporum.
Evaluar la compatibilidad de las accesiones resistentes de S. hirtum, S.
pectinatum, S. pseudolulo, S. stramonifolium y S. sessiliflorum para ser
utilizadas como patrones en naranjilla comn.

212

2.2.7. Evaluacin
agronmica
y
resistencia
a
nemtodos
(Meloidogyne incgnita) y al hongo (Fusarium oxysporum) de
dos variedades de naranjilla injertas en siete accesiones de la
Seccin L asiocarpa noroccidente pichincha22.
Objetivo Del Proyecto (2): Caracterizar las colecciones de germoplasma, por
variabilidad gentica y resistencia a plagas y enfermedades de mayor importancia
2.2.7.1. Objetivos
Objetivo General
Evaluar y seleccionar con base al comportamiento agronmico y la calidad del
fruto de la naranjilla comn (S. qutense Lam) y del hbrido Puyo, injertados en
siete patrones de solanceas con resistencia tolerancia a nemtodos
(Meloidogyne incgnita) y marchitez vascular (Fusarium oxysporum) en el
Noroccidente de Pichincha.
Objetivos Especficos
Evaluar el grado de afinidad y compatibilidad de los cultivares de naranjilla
Comn e hbrido Puyo injertados en siete porta injertos provenientes de
semilla sexual y asexual (estaca).
Seleccionar los porta injertos que presenten tolerancia-resistencia a
Meloidogyne incgnita y Fusarium oxysporum.
Evaluar el comportamiento agronmico de plantas de naranjilla de los
cultivares Comn e hbrido Puyo.
Realizar el anlisis econmico de presupuesto parcial.
2.2.7.2. Marco Referencial
Las principales enfermedades del cultivo de naranjilla son: Marchitez vascular,
Fusariosis o Mal seco (Fusarium oxysporum), Antracnosis o Pudricin del
fruto (Colletrotrichum gloeosporoides),Lancha o Tizn tardo (Phytophthora
infestans), Marchitez bacterial, Marchitamientoo Dormidera (Pseudomonas
solanacearum). Entre las principales plagas se encuentran: Nemtodos
(Meloidogyne incognita), Gusano del fruto, Perforador del cuello o Barrenador
del tallo. (CELLERI, A. 1954,INIAP 1982, JIJN, R. 1982, SILVA, J. 1986, SORIA,
J. 1989, MAG 1994, INIAP 1995, FIALLOS, J. 2000). Ochoa, J., et. al., 2000, la
Marchitez vascular (Fusarium oxysporum) en naranjilla, fue reportada por
primera vez en el valle de Pastaza. En la actualidad la incidencia se ha dispersado
a consecuencia de la siembra de estacas provenientes de plantas enfermas
(SILVA, J. 1986).
Fusarium es un hongo que se encuentra ampliamente distribuido en los suelos
agrcolas del Ecuador. Este patgeno es muy destructivo ya que produce
22

Amanda Chiluisa, Jenny Herrera, Wilson Vsquez, Pablo Viteri, Juan Len

213

marchitamiento, empardecimiento de las hojas y los vstagos suculentos de la

planta. Fusarium inicialmente afecta el interior del tallo produciendo reas de color
caf, cuyo corte transversal deja ver una decoloracin negra en el sistema
vascular en forma de anillo y cuando el patgeno ha invadido todos los vasos
conductores, se produce una marchitez generalizada, que produce la muerte lenta
y descendente de la planta.
Segn Revelo (1991), los nematodos fitoparasitarios no causan sntomas
inmediatos en la parte superior de la planta y pueden permanecer por varios aos
en el suelo sin que se detecte su presencia. El primer sntoma es un crecimiento
retardado de la planta. Se puede presentar una reduccin en el crecimiento de las
races. Las plantas atacadas pierden su color natural, presentan clorosis que
usualmente es asociada con una deficiencia de nutrientes, se ven achaparradas
enfermas y se marchitan fcilmente durante las horas ms calurosas y secas del
da. Las plantas pierden la capacidad de absorber agua y nutrientes del suelo.
Meloidogyne incognita, presentan numerosas agallas que favorecen la entrada de
otros patgenos, como hongos y bacterias, ocasionando pudricin de races y
debilidad de la planta.
Estudios realizados por Morales y Maya (1982) sealan que el problema en
naranjilla es an mayor ya que encontraron una interaccin entre Meloidogyne
incognita y Fusarium oxysporum. Esto concuerda con lo sealado por Agrios
(1995), quien menciona que algunos nemtodos del suelo generalmente
incrementan la incidencia de la marchites, debido posiblemente a la presencia de
un mayor nmero de puntos efectivos de penetracin del hongo, causando
prdidas econmicas a los agricultores (CORPOICA. 2002). La alta susceptibilidad
de la naranjilla a nemtodos, reduce la vida til de la planta de 5 aos a 1 o 2 aos
dependiendo de la severidad del ataque, situacin que obliga a los agricultores a
buscar terrenos nuevos, talando el bosque para luego abandonarlos (SORIA, J.
1989). Debido a que es un cultivo muy susceptible a plagas y enfermedades los
agricultores recurren al uso excesivo de fungicidas, nematicidas e insecticidas que
provocan alta toxicidad en el fruto (CORPOICA. 2002). Esto evidencia la falta de
capacitacin de los agricultores sobre manejo racional de los mismos, situacin
que ocasionan incremento de los costos de produccin y contaminacin del
ambiente (suelo, agua) y afecta a la salud de productores y consumidores
principalmente. (REVELO, J; SANDOVAL, P. 2003)
Con el fin de contribuir al mejoramiento del cultivo naranjilla, investigaciones
realizadas por HEISER (1972 y 1989), RON (2003), MONTALEZA y TROYA,
(2003), confirman la existencia de accesiones de la seccin Lasiocarpa e incluso
cruzamientos de especies entre S. vestissimun y S. hyporhodium con S.
quitoense, que toleran/resisten a Meloidogyne y Fusarium, mismos que pueden
ser utilizados como portainjertos de naranjilla, esta sera una alternativa para
combatir los problemas fitosanitarios en mencin; por lo tanto, es necesario
evaluar en campo de agricultores, la resistencia o tolerancia de estos materiales
silvestres y la compatibilidad como portainjertos de la naranjilla Comn y del

214

hbrido Puyo. Esto permitir dar una solucin sostenible a estos dos problemas
fitosanitarios en beneficio de productores, consumidores y ambiente.
El presente estudio permitir evaluar la afinidad, compatibilidad, comportamiento
agronmico y resistencia/tolerancia a la marchitez y nemtodos de dos cultivares
de naranjilla (Comn e Hibrido puyo) injertadas en varios patrones de Solanceas;
y con base al anlisis econmico, seleccionar los ms eficientes, para uso
comercial.
2.2.7.3. Metodologa
La fase de invernadero se realiz en la Granja Experimental Tumbaco del INIAP,
ubicada a una altitud de 2384 m, una temperatura promedio anual de 15.7 C,
precipitacin promedio anual de 867.3 mm y 73% de humedad relativa. Est
clasificada en la zona ecolgica Bosque seco montano bajo (bsMB), la plantacin
definitiva se realizo en San Miguel de Saloya-Los Bancos en la provincia de
Pichincha, con una23: altitud de 1 200 msnm., precipitacin promedio anual de
2000 mm., temperatura promedio anual de 21.5 C., humedad relativa de 90 %,
adems a una zona agroecolgica de bosque hmedo Montano Bajo (bhMB)
(Caadas, 1983).
El anlisis estadstico se realiz con base al Diseo de Bloques Completos al Azar
con cuatro repeticiones en arreglo factorial 7x2+2. La unidad experimental estuvo
formada por seis plantas por lo que se estn evaluando 384 plantas. La distancia
de plantacin entre plantas e hileras fue de 2 m.
Cuadro 1. Descripcin de los tratamientos.
Tratam ientos
t1
t2
t3
t4
t5

Codificacin
C1p1
C1p2
C1p3
C1p4
C1p5

t6
t7
t8
t9
t10
t11
t12

c1p6
c1p7
c2p1
c2p2
c2p3
c2p4
c2p5

t13
t14
t15
t16

c2p6
c2p7
c1
c2

23

INAMHI-2005.

DESCRIPCIN
Solanum quitoense cultivar Comn en Solanum pseudolulo
Solanum quitoense cultivar Comn en Solanum hirtum
Solanum quitoense cultivar Comn en Solanum hispidum
Solanum quitoense cultivar Comn en Solanum quitoense x Solanum vestissimun
Solanum quitoense cultivar Comn en Solanum quitoense x Solanum hyporhodium
Solanum quitoense cultivar Comn en Solanum quitoense x Solanum hyporhodium) x
Solanum quitoense cultivar dulce
Solanum quitoense cultivar Comn en Solanum pectinatum
hbrido Puyo en Solanum pseudolulo
hbrido Puyo en Solanum hirtum
hbrido Puyo en Solanum quitoense dulce x Solanum hispidum
hbrido Puyo en Solanum quitoense x Solanum vestissimun
hbrido Puyo en Solanum quitoense x Solanum hyporhodium
hbrido Puyo en Solanum quitoense x Solanum hyporhodium) x Solanum quitoense
cultivar dulce
hbrido Puyo en Solanum pectinatum
Solanum quitoense cultivar Comn sin injertar ( testigo)
hbrido Puyo sin injertar ( testigo)

215

Las variables que se evaluaron en la fase invernadero y campo fueron: Peso y

nmero de semillas por fruto. Inicio de germinacin de la semilla (das).
Germinacin (%).Das a la injertacin. Estacas prendidas (%).Afinidad de los
injertos (%).Altura de planta (cm.). Dimetro del tallo del patrn y del injerto (cm),
Nmero de flores por inflorescencia. Inicio de la floracin (das). Floracin (das).
Inicio del cuajado del fruto (das). Frutos cuajados %. Cosecha (das). Tamao del
fruto. Rendimiento por planta (kg/24 m2.) y (kg/ha). Compatibilidad de los injertos.
Sobrevivencia (%).Incidencia de la marchitez vascular. Incremento de la poblacin
de nemtodos
En la fase invernadero y campo del ensayo se realizaron las labores de manejo
planificadas como: preparacin del terreno, riegos, deshierbas, fertilizaciones,
controles fitosanitarios, podas, tutoreo de plantas.
2.2.7.4. Resultados y discusin
FASE DE INVERNADERO.
En esta fase se utilizaron materiales provenientes de semilla (S. pseudolulo, S.
hirtum, S. pectinatum, S. hispidum, Cultivar Comn) y de estaca (S. quitoense x
S. hyporhodium, S. quitoense x S. vestissimun, (S. quitoense x S. hyporhodium) x
S. quitoense dulce, Hbrido Puyo.
En el Peso y nmero de semillas por fruto el mayor peso alcanzo el cultivar
Comn presento con un peso de fruto con 36g y con un nmero de semillas de
1618.
En das y porcentaje de germinacin se obtuvo que la naranjilla Comn es la que
ms tardo en germinar con 17,25 das a la germinacin pero es la que mayor
porcentaje se obtuvo con 95.94% de plntulas germinadas y el patrn S.
hispidum (t4) es el que germino un poco presento 10,50 das a la germinacin con
un porcentaje de 79.69% de plntulas germinadas
En cuanto a los materiales reproducidos de forma asexual se obtuvo que el t2 (S.
qutense x S. hyporhodium) es el que mayor enraizamiento (58 75%) tiene a los 30
das y que alcanzo un 97.50% a los 60 das. Por otra parte (S. qutense x S
hyporhodium) x S. qutense cultivar dulce (t3), S. qutense dulce x S. vestissimun
(t1) tienen los menores porcentajes de enraizamiento a los 30 das, sin embargo
esta diferencia estadstica a los 60 das desaparece, en otras palabras todos los
tratamientos son estadsticamente iguales pese a existir una diferencia aritmtica
entre los tratamientos.
Das a la injertacin entre variedades y patrones se obtuvo un promedio general
de 133.89 das.
En cuanto a afinidad de loa injertos se obtuvo que el hibrido Puyo es el que mayor
afinidad tiene (90.89 %) con relacin a la naranjilla Comn con 88.39 %. Por otra

216

parte el hbrido Puyo (t8) injertada en el patrn S. pseudolulo y en S. hirtum (t9)

alcanzaron un porcentaje de afinidad mayor (100 %) con respecto al hbrido Puyo
(t12) injertada en el patrn S. quitoense x S. hyphorodium) que tiene el menor
porcentaje de afinidad con 73.75%
FASE DE CAMPO
ALTURA DE PLANTA.
Se obtuvo se obtuvo que la naranjilla comn injerta en los patrones S. hispidum
(t3), S. speudolulo (t1) y S. hirtum (t2) son los tratamientos que se destacaron con
alturas entre 1.27 a 1.40 a los 150 das.
DIMETRO DEL TALLO DEL PATRN E INJERTO.
Presento que el hibrido puyo y la naranjilla Comn injertas en el patrn hispidum
se obtuvo los mayores dimetros con 4.53 y 4.37.Por otra parte en el Dimetro del
tallo del injerto se obtuvo que la naranjilla Comn injerta en el patrn Solanum
pectinatum y Solanum speudolulo. Presentaron los mayores dimetros con 4.43 y
4.37
NMERO DE FLORES POR INFLORESCENCIA, INICIO, PLENA FLORACIN,
INICIO CUAJADO (DAS).
Se obtuvo que el tratamiento t1, t2 y t7 con 14.05, 13.69 y 13.63 flores
respectivamente. El inicio de floracin y plena floracin e inicio del cuajado se
destac la naranjilla comn injerta en S. pseudolulo (t1) con 89.79 das al inicio,
plena 102.23 y al cuajado 106.13 y la naranjilla comn (t15 testigo) 87.52, 98.37 y
102.05.Por otra parte se aprecia que los tratamientos que tardaron en florecer
fueron el hbrido Puyo injerta en S. quitoense x S. hyphorodium (t12) con 125.60
das y hbrido Puyo (t16 testigo) con 113.48.
El adelanto en la floracin, determina una cosecha precoz. En la investigacin la
naranjilla Comn (testigo) injerta en patrones producidos por semilla aceleraron la
floracin alrededor de 38 das, con respecto al hbrido Puyo (testigo) e injerta en
patrones producidos por semilla y estaca.
Para plena floracin transcurren 10 das ms tarde del inicio de la floracin
alcanzo la floracin la naranjilla comn y plantas injertas el hbrido Puyo 15 das
ms tarde del inicio de floracin, testigo e injertado en patrones producidos por
semilla y estaca.
NMERO Y PORCENTAJE DE FRUTOS CUAJADOS.
Se obtuvo que la naranjilla Comn injerta en el patrn (S. qutense x S.
hyporhodium) x S. qutense cultivar dulce (t6) presento un nmero de 5.93 frutos
con un porcentaje de 49.64 %.

217

DAS A LA COSECHA DESDE EL TRANSPLANTE E INICIO DE FLORACIN

HASTA LA PRIMERA COSECHA.
La naranjilla Comn injerta en el patrn S. pseudolulo fue precoz con 241.67 das,
al considerar el periodo desde el trasplante a la primera cosecha
El tiempo que transcurre desde el trasplante a la cosecha la naranjilla Comn
injerto y testigo es de 8.80 meses. El tiempo que transcurre desde el trasplante a
la primera cosecha en el hbrido Puyo injerto y testigo es de 7.91 meses. Mientras
que entre especies no presentaron diferencia significativa.
El tiempo que transcurre desde el inicio de floracin hasta la cosecha en la
naranjilla Comn injertado y testigo es de 4.24 meses, en el hbrido Puyo injerto y
testigo es prcticamente similar (4.07 meses).
TAMAO DEL FRUTO.
De acuerdo a la escala planteada se clasifico los frutos en categoras en donde la
primera categora estn los frutos que alcanzaron un dimetros mayores o iguales
a 61 mm, la segunda categora de 60-55 mm, tercera categora de 54-51mm y
cuarta y quinta categora de 46 -41mm igual o mayor de donde se obtuvo que los
frutos de los tratamientos alcanzaron porcentajes bajos dentro de la primera y
segunda categora.
Por otra parte la naranjilla Comn injerta en los patrones S. pectinatum (t7), S.
hirtum (t2), y S. hispidum (t3) con 38.46, 35. 62 y 32.00% respectivamente, se
ubic dentro de la tercera categora, el hbrido Puyo injerta en los patrones S.
speudolulo (t8), S. pectinatum (t14) y S. hispidum (t10) con 68. 43, 61. 17 y 59. 94
%respectivamente, se ubic dentro de la cuarta y quinta categora. La naranjilla
Comn (testigo), fue el tratamiento que alcanz el porcentaje ms alto de frutos
cados.
RENDIMIENTO kg/24m2, Y kg/ha.
La naranjilla Comn injerta en el patrn S. hirtum (t2) tanto por parcela como por
hectrea presento el mayor rendimiento con 47.30 kg/24m2, y 19710 kg/ha
mientras que el hbrido Puyo injertado en el patrn S. quitoense x S. hyphorodium
(t12) tubo el menor rendimiento 3.33 kg/24m2 y 1387.08 kg/ha.
COMPATIBILIDAD DE LOS INJERTOS.
Esto se determin por observacin directa de acuerdo a las caractersticas
agronmicas que present cada tratamiento (crecimiento, desarrollo y
productividad). La naranjilla Comn injerta en el patrn S. speudolulo y S. hirtum
obtuvieron una alta compatibilidad de 94.40 y 92.16% respectivamente.

218

PORCENTAJE DE SOBREVIVENCIA.
Se obtuvo que el mayor porcentaje presento la naranjilla Comn injerta en los
patrones S. hirtum y S. speudolulo con 87.50 y 83.33. Por otra parte la naranjilla
Comn injerta en S. quitoense x S. hyphorodium) x S. quitoense cultivar dulce (t6)
present el menor porcentaje con el 0%.
PORCENTAJE DE INCIDENCIA DE LA MARCHITEZ VASCULAR (Fusarium
oxysporum).
Se obtuvo que la naranjilla Comn (t15) e hbrido Puyo (t16) presentaron el mayor
porcentaje de incidencia, alcanzando un 100% y 83.33% respectivamente. Esto
afecto durante la fase de campo las plantas fueron afectadas en el crecimiento y
desarrollo y acelerando la senescencia de la planta, afectado el rendimiento.
INCREMENTO DE LA POBLACIN DE
incongnita).

NEMATODOS (Meloidogyne

En el incremento de nemtodos se obtuvo que la naranjilla Comn injerta en el

patrn S. hispidum (t3) con 5.97 veces. Mientras que el hbrido Puyo injerta en el
patrn S. pectinatum (t14) con apenas 0.18 veces.
De acuerdo a los criterios de Cook se calific el ndice del incremento del
nematodo del nudo de la raz (Meloidogyne incongnita), se obtuvo la naranjilla
Comn injerta en el patrn S. pseudolulo (t1) con un ndice de incremento de
nematodo de 0.33 veces y un rendimiento de 37.63Kg/24m 2, es uno de los de
mayor resistencia (t2), con un ndice de incremento de nematodo de 0.37 veces
con un rendimiento de 47.30Kg/24m2, y la naranjilla Comn injerta en el patrn S.
pectinatum (t7) con un ndice de incremento de nematodo de 0.25 veces con un
rendimiento de 42.51Kg/24m2 y obteniendo una calificacin de RT (Resistente
tolerante), por otro lado se observ que hbrido Puyo injerta en el patrn S.
hispidum (t10) con un ndice de incremento de 1.72 veces con un rendimiento de
9.59 Kg/24m2 obtuvo una calificacin de SNT(Susceptible no tolerante).
Con respecto a los testigos, la naranjilla Comn (t15) present un ndice de
incremento de 0.65 veces con un rendimiento de 19.90Kg/24m2 obteniendo una
calificacin de RT (Resistente tolerante), hbrido Puyo (t16) present un ndice de
incremento de 1.19 veces con un rendimiento de 9.71Kg/24m 2 obteniendo una
calificacin de ST (Susceptible tolerante).
El incremento en la poblacin del nematodo del nudo de la raz, incide
notablemente en la reduccin del rendimiento, apariencia de la planta, y en su
longevidad. Con la tcnica de la injertacin, se pretende reducir el ataque de
nematodos, como se observ en la races de los patrones S. speudolulo, S.
hirtum que fueron resistentes lo que
redujo la poblacin del nematodo
manteniendo las caractersticas antes mencionadas intactas.

219

ANLISIS ECONMICO/24m2.
El anlisis econmico a travs del presupuesto parcial basado en el mtodo de
Perrn publicado por el CIMMYT (2001), para un perodo de cosecha de tres
meses se observa que la naranjilla Comn injerta en el patrn Solanum hirtum (t2),
presenta el mejor beneficio econmico neto.
En el anlisis por parcela experimental (constituida por 408 plantas) se obtuvo un
beneficio neto de 505.48 dlares. Seguido de naranjilla Comn injerta en el patrn
Solanum pectinatum (t7) se obtuvo un benfico neto de 409.66 dlares a pesar de
que en este tratamiento las caractersticas agronmicas no fueron notorias.
Entre los testigos naranjilla Comn e hbrido Puyo, el beneficio econmico neto es
de 370.08 y 99.62 dlares respectivamente, esto se atribuye a que la mano de
obra para injertacin no es necesaria y las semillas que se obtiene de uno a tres
frutos es suficiente para una hectrea.
ANLISIS ECONMICO/ha.
Se observa que la naranjilla comn injerta en el patrn Solanum hirtum (t2),
presenta el mejor beneficio econmico neto. En el anlisis constituido por 2500
plantas se obtuvo un beneficio neto de 78095,00 dlares. Seguido de naranjilla
comn injerta en el patrn Solanum pectinatum (t7) se obtuvo un benfico neto de
69763,51dlares a pesar de que en este tratamiento las caractersticas
agronmicas no fueron notorias.
El beneficio econmico neto de la naranjilla Comn e hbrido Puyo, es de
34338,21y 16036,67 dlares respectivamente, esto se atribuye a que la mano de
obra para injertacin no es necesaria y el material (semillas) que se obtiene de
uno a tres frutos es suficiente para una hectrea.
2.2.7.5. Conclusiones
De los resultados obtenidos a nivel de invernadero, el hbrido Puyo injerta en
Solanum pseudolulo y Solanum hirtum presentaron el 100% de afinidad;
mientras que la naranjilla comn injerta en Solanum pectinatum present una
afinidad de 98.75%, en otra palabras, la injertacin entre las dos especies
vegetales presentaron soldadura consistente.
Los patrones producidos de semilla fueron los que presentaron mejores
caractersticas de afinidad con respecto a los patrones producidos por estaca.
Los materiales comerciales de naranjilla injertos en siete patrones de
solanceas del grupo Lasiocarpa presentaron una respuesta variable en
crecimiento, desarrollo, afinidad y rendimiento.
La naranjilla Comn injerta en Solanum pseudolulo y Solanum hirtum
presentaron el mejor comportamiento agronmico y el mayor grado de

220

compatibilidad, pues su vigor y rendimiento fue superior a los otros

tratamientos, con 15679.6 y 19710 kg/ha en tres meses de cosecha.
De acuerdo al ndice de incremento del nematodo Meloidogyne incognita, se
concluye que la naranjilla Comn injerta en Solanum pseudolulo y Solanum
hirtum, presentaron los ndices ms bajos de incremento de la poblacin de
nematodos (0.33 y 0.37 veces) siendo calificados como resistentes tolerantes
al ataque. Mientras que para el resto de tratamientos el ndice de incremento
de la poblacin de nematodos fueron altos y variados con rendimientos bajos
por lo que fueron calificados como susceptibles no tolerantes y resistentes no
tolerantes. Sin embargo la naranjilla Comn injerta en S. hispidum es
considerado tolerante, por no haber sido afectado el rendimiento.
La alta incidencia de Fusarium oxysporum, en la naranjilla Comn e hbrido
Puyo (100 y 83.3% respectivamente) se les puede calificar como variedades
susceptibles lo que afecto el rendimiento y calidad del fruto.
Del anlisis econmico realizado, se concluye que la naranjilla Comn injerta
en patrones provenientes de semilla botnica, Solanum pseudolulo y Solanum
pectinatum presentaron el mayor beneficio neto (505.5 y 409.7 dlares
respectivamente) en tres meses de cosecha en una superficie de 24 m 2.
2.2.7.6. Recomendaciones
Utilizar plantas de naranjilla injertas en patrones producidos por semilla
Solanum pseudolulo, Solanum hirtum y Solanum pectinatum, por las mejores
caractersticas agronmicas, afinidad, compatibilidad, y por la resistencia
demostrada frente al ataque de Fusarium oxysporum y Meloidogyne incognita.
Utilizar los cultivares seleccionados con el objeto de elevar la longevidad,
potencial productivo y mejorar la resistencia al perforador del fruto. Para su
posterior recomendacin a los agricultores.
Proceder a transferir y capacitar a los productores, tcnicos y estudiantes con
las tecnologas desarrolladas para mejorar la productividad y calidad de la
naranjilla en el Ecuador, preservado el ambiente y la salud humana.
2.2.7.7. Bibliografa
CELLERI, A. 1954. Curso de Botnica Sistemtica Guayaquil. p. 476-481.
CORPOICA. 2002. El cultivo del lulo. 1era. Edicin. Editor, Corporacin Colombiana de
Investigacin Agropecuaria CORPOICA. Manizales. p. 83-91.
HEISER, C.
2000.
Interespecific hybridization and improvement of the naranjilla (Solanum
quitoense). Fifth International Solanaceae Conference. In publish.
MORALES, G; MAYA, I. 1982. Identificacin de enfermedades que afectan al cultivo de naranjilla
(Solanum quitoense L.), en las provincias de Tungurahua y Pastaza. Rumipamba. sp.
SILVA, J. 1986. Identificacin y Determinacin de resistencia de 22 introducciones
de naranjilla
distribuidas en 10 especies al nemtodo Meloidogyne sp. Tesis. Ing. Agr. Quito: Universida d
Central del Ecuador, Facultad de Ciencias Agrcolas. p. 5-80.

221

2.2.8. Evaluacin y seleccin de reguladores de crecimiento que influyan

en el tamao del fruto de naranjilla hbrido puyo, que tenga baja
residualidad, y que puedan reemplazar al 2-4D.24
2.2.8.1. Marco Referencial
Con el fin de incrementar el tamao del fruto, los agricultores realizan aplicaciones
de 2-4D, producto considerado como herbicida hormonal, que afecta la fisiologa
de las plantas provocando la sobreproduccin de clulas, causando
malformaciones en los diferentes rganos de la planta. La aceleracin incontrolada
del crecimiento agota las reservas alimenticias y determina la ruptura de los tejidos
vasculares hasta causar la muerte de la planta. Tambin, el 2-4D afecta la salud
humana debido a los altos residuos detectados en la fruta. Con estos
antecedentes se procedi a realizar un estudio con el objetivo de 1) evaluar y
seleccionar productos qumicos alternativos con diferentes dosis, que permitan
mejorar el crecimiento de los frutos de naranjilla del hbrido Puyo y 2) realizar el
anlisis de costos de los tratamientos en estudio.
La presente investigacin se realiz en San Miguel de los Bancos, provincia de
Pichincha, localizada a 1100 m de altitud. Se utilizaron plantas de naranjilla hbrido
Puyo (Solanum quitoense x Solanum sessiliflorum) injertas en Cujaco (Solanum
hispidum).
El estudio no detecto diferencias estadsticas entre tratamientos para el nmero de
flores por inflorescencia. Sin embargo, se detectaron diferencias entre
tratamientos para el nmero de frutos por inflorescencia y el tamao del fruto. Con
la informacin obtenida hasta el momento se puede indicar que los mejores
tratamientos para incrementar el tamao del fruto son T19, T20 y T21,
correspondiente a Maxigrowexcel en dosis de 250, 500 y 750 cc / 200 l de agua.
Este puede ser un producto que puede reemplazar al 2-4D.
El cultivo de naranjilla comn (Solanum quitoense), fue la base de la economa
de muchos pueblos del Oriente ecuatoriano, pero a partir de los aos setenta, se
reduce la produccin y productividad, debido al ataque de plagas, y susceptibilidad
de las variedades cultivadas, que fueron reemplazadas con hbridos de menor
calidad del fruto (5 y 3)
Actualmente el 50 % del rea cultivada de naranjilla a nivel nacional corresponde
al hbrido Puyo, el cual presenta frutos pequeos, debido a que Solanum
sessiliflorum empleado como progenitor tiene esta caracterstica. Con el fin de
mejorar el tamao del fruto, para hacerlo comercial, los agricultores realizan
aplicaciones del herbicida 2-4D (2).

24

Pablo Viteri D Juan Len F. Wilson Vsquez C Diego Guitarra

222

El 2-4D pertenece al grupo de los herbicidas hormonales, ya que afecta la

fisiologa de las plantas en la misma forma que las auxinas naturales, provocando
la sobreproduccin de clulas en los tejidos generadores del crecimiento de la
planta, lo cual causa malformaciones en los diferentes rganos de sta. La
aceleracin incontrolada del crecimiento agota las reservas alimenticias y
determina la ruptura de los tejidos vasculares hasta causar la muerte de la planta.
De acuerdo a la informacin obtenida en el Taller de manejo integrado de la
naranjilla realizado por INIAP a finales del 2005, los productores del hbrido P uyo
en la regin oriental, realizan entre 4 a 6 aplicaciones de 2-4D, en dosis que van
desde 20 - 100 gotas por bomba de 20 litros durante el ciclo del cultivo, teniendo
un efecto en el raleo de flores y engrosamiento de frutos; adems produce la
deformacin de hojas y reduce la longevidad de la planta. estudios realizados por
Lucio y Espn (4) determinaron altos niveles de residualidad de este producto en
los frutos de naranjilla.
La dioxina es el producto que se forma de la degradacin del 2-4D. Todos los
estudios realizados con animales han revelado que la dioxina es cancergena y de
efecto residual a largo plazo. Los investigadores estn tratando de determinar si
este residuo est asociado con el bajo coeficiente intelectual, problemas
reproductivos y deficiencias del sistema inmunolgico de los humanos.
En vista del uso generalizado del 2-4D para mejorar el tamao de los frutos del
hbrido Puyo y los efectos negativos para la salud humana por los residuos de
ste, se plante esta investigacin con los siguientes objetivos: 1) evaluar y
seleccionar productos qumicos alternativos que mejoren el crecimiento de los
frutos de naranjilla del hbrido Puyo en tres dosis, 2) realizar el anlisis de costos
de los tratamientos en estudio.
2.2.8.2. Metodologa
La presente investigacin se la realiz en San Miguel de los Bancos en la
hacienda de la familia Bastidas-Herrera, localizada a 1100 m.s.n.m. Las
caractersticas climticas de la zona son: precipitacin promedio anual de 2500
mm, temperatura promedio anual de 21.5 C y 90% de humedad relativa, adems
pertenece a la zona agroecolgica bosque hmedo Montano Bajo (1)
Para el estudio se utilizaron plantas de Naranjilla hbrido Puyo (Solanum quitoense
x Solanum sessiliflorum) injertas en Cujaco (Solanum hispidum). Se emple un
Diseo de Bloques Completos al Azar con tres repeticiones. La unidad
experimental estuvo formada por tres plantas de Naranjilla, siendo evaluadas un
total de 270 plantas. La distancia de siembra entre plantas e hileras fue de 2 x 2
m.

223
Cuadro 1. Tratamientos evaluados en el estudio
Tratamientos
T1
T2
T3
T4
T5
T6
T7
T8
T9
T10
T11
T12
T13
T14
T15
T16
T17
T18
T19
T20
T21
T22
T23
T24
T25
T26
T27
T28
T29
T30

Producto y dosis
ANA 5ppm
ANA 12.5 ppm
ANA 20ppm
AIA 5 ppm
AIA 10ppm
AIA 15 ppm,
Cytoquin 250cc/200 l
Cytoquin 500cc/200 l
Cytoquin 750cc/200 l
Ac. Giberelico 10% 5g/100 l
Ac. Giberelico 10% 10g/100 l
Ac. Giberelico 10% 5g/100 l
Etherel 150 ppm
Etherel 375 ppm
Etherel 600 ppm
Miros 3c/100 l
Miros 5cc/100 l
Miros 8cc/100 l
Maxigrow Excel 250 cc / 200 l
Maxigrow Excel 500 cc / 200 l
Maxigrow Excel 750 cc / 200 l
Ergostim 150 cc/200 l
Ergostim 200cc /200 l
Ergostim 300 cc /200 l
Raleo Quimico (Carbaril 800 ppm)
Raleo Quimico (Carbaril 1400 ppm)
Raleo Quimico (Carbaril 2000 ppm)
Raleo Manual
Testigo Agricultor (2-4D, 20 gotas)
Testigo absoluto

Las variables consideradas fueron: das a la floracin, nmero de flores por

inflorescencia, nmero de frutos cuajados por inflorescencia, porcentaje de
fructificacin, das a la cosecha, nmero y dimetro de los frutos cosechados,
peso de frutos, rendimientos, grados brix y anlisis econmico. Durante la fase de
campo del ensayo se realizaron labores del manejo del cultivo de acuerdo a las
necesidades como fue preparacin del terreno, fertilizaciones, controles
fitosanitarios, podas, y la cosecha del fruto que incluy la seleccin y clasificacin
por categoras.
2.2.8.3. Resultados y Discusin
A continuacin se presentan los resultados obtenidos en las diferentes variables
evaluadas a nivel de campo.
Nmero de flores por inflorescencia
El nmero de flores por inflorescencia, 20 das despus de la primera aplicacin
de los tratamientos, no causo efectos en esta variable ya que no se detectaron
diferencias estadsticas para tratamientos ni dosis. El nmero promedio de flores
por inflorescencia entre tratamientos fue de 8.4, con un rango de 7 a 8.9.
Nmero de frutos por inflorescencia
El ADEVA (Cuadro 2) para el nmero de frutos por inflorescencia evaluado a los
20 d despus de la aplicacin de los tratamientos, detecto diferencias estadsticas
entre tratamientos, entre productos qumicos, as como en la interaccin productos

224

por dosis. El Coeficiente de Variacin es 12.6%, el promedio general de frutos por

inflorescencia es de 5.5.
F de V
Total
Tratamientos
Productos
Dosis
PxD
Fact vs Testigos
Repeticiones
E.Exper

GL
80
26.00
7.00
2.00
14.00
2.00
2
52.00

SC
81.68
54.78
16.01
1.35
27.42
32.59
1.71
25.19

CM
2.11**
2.29**
0.68ns
1.96**
16.29**
0.86ns
0.48

Cuadro 2. Andeva para el nmero de frutos/inflorescencia a los 20 das de aplicado los tratamientos (frutos
promedio por inflorescencia 5.54 y cv (%) 12.56)

Defoliacin de las plantas de naranjilla por efecto de la aplicacin de los

tratamientos
El anlisis de varianza para medir el efecto de la defoliacin (Cuadro 4) a causa
de la aplicacin de los agroqumicos, detect diferencias estadsticas entre
tratamientos, productos, as como en la interaccin productos con dosis y con los
testigos. El Coeficiente de Variacin fue de 13.2%, el promedio general de
defoliacin de las plantas con base a la escala arbitraria (1= no defoliacin y 5
defoliacin total de la planta) fue de 2.3
La defoliacin de las plantas por efecto de la aplicacin de los productos qumicos
(Cuadro 5) mostr que el testigo absoluto (T30) no presento plantas defoliadas,
como se esperaba; mientras que los tratamientos T8, T12 y T29 fueron los que
mayor afectaron a la planta debido a la alta defoliacin presentada con 3.8, 3.9 y
4.2 respectivamente. La alta incidencia de los productos en la defoliacin de las
plantas afecto tambin en el rendimiento.
Cuadro 3. Promedios y prueba de tukey (5%) del nmero de frutos por inflorescencia de los 30
tratamientos en estudio, a los 20 d de aplicado los tratamientos
Tratam iento
T26
T24
T6
T23
T9
T28
T3
T2
T16
T27
T25
T19
T29
T22
T11
T17
T10
T5
T8

Prom edio
4.15
4.33
4.63
4.63
4.74
4.78
4.91
4.93
4.94
5.22
5.30
5.30
5.37
5.44
5.48
5.57
5.72
5.78
5.96

Rangos
c
c
c
c
c
c
c
c
c
c
c
c
c
c
c
c
c
c
c

b
b
b
b
b
b
b
b
b
b
b
b
b
b
b
b
b
b

A
A
A
A
A
A
a
a
a
a

225
T18
T4
T1
T21
T7
T20
T30
T12

c
c
c
c

6.04
6.19
6.28
6.33
6.41
6.44
7.19
7.59

a
a
a
a
a
a
a
a

b
b
b
b
b
b

Cuadro 4. Anlisis de varianza de la defoliacin (escala arbitraria 1= sin defoliacin y 5

completamente defoliada) de las plantas despus de la aplicacin de los tratamientos (defoliacin
promedio 2.3 y cv (%) 13.2)
F de V

GL

SC

Total

80.00

79.03

Tratamientos

26.00

73.49

2.83**

Productos

7.00

3.84

0.55**

dosis

2.00

1.62

0.81**

PxD

14.00

46.38

3.31**

2.00

15.99

7.99**

0.54

0.27ns

52.00

5.00

0.10

Fact vs Testigos
Repeticiones
E.E.

CM

Cuadro 5. Promedios (escala) y prueba de tukey (5%) para defoliacin de las plantas de naranjilla
por efecto de los 30 tratamientos en estudio
Tratam ientos

Prom edio

T30

1.39

Rangos

T6

1.61

T25

1.67

T10

1.78

T2

1.94

T23

2.00

T28

2.00

T3

2.11

T9

2.11

T11

2.11

T17

2.28

T1

2.39

T5

2.44

T22

2.44

T16

2.50

T7

2.56

f g

T4

2.61

f g

T26

2.67

f g

T19

2.72

f g

T18

3.11

f g

T24

3.33

f g

226
T21

3.50

T27

3.56

T8

3.78

T12

3.89

T29

4.22

j
j

Dimetro del fruto

A los 45 das de haber aplicado los tratamientos se procedi a evaluar el dimetro
de los frutos de naranjilla. El ADEVA (Cuadro 6) detecto diferencias estadsticas
entre los tratamientos y dosis. Tambin existieron deferencias estadsticas en las
interacciones entre productos y dosis y entre los factores y los testigos. En el
cuadro 7, se observa 7 rangos de significacin. Los frutos provenientes de los
tratamientos T 19, T29, T20 y T21, son los de mayor tamao, ya que produjeron
frutos con dimetro mayor a los 50 mm a los 45 d despus de aplicar los
tratamientos: por su parte el tratamiento T28 produce frutos con dimetro menor a
la mitad de los anteriores. El T30 (testigo absoluto) estuvo dentro de los frutos
ms pequeos. Esto sugiere que existe la posibilidad de encontrar productos
qumicos que puedan remplazar al 2-4D, y que a su vez tienen menor fitotocixidad.
La aplicacin de productos qumicos que reemplacen al 2-4D para mejorar el
tamao del fruto de naranjilla, se puede considerar una tecnologa a corto plazo.
Sin embargo, se est trabajando a travs del mejoramiento gentico para
conseguir frutos grandes sin necesidad de aplicar agroqumicos y que tengan
calidad del fruto que rena los requerimientos del mercado, y de esta manera
proteger la salud de productores, consumidores y tambin ayudar a preservar el
ambiente.
Cuadro 6. Anlisis de varianza del dimetro (mm) de los frutos de naranjilla, 45 das despus de la
aplicacin de los tratamientos (promedio general 33 mm y cv 8.3%)
F de V

GL

SC

Total

CM

89.00

16354.82

Tratamientos

29.00

15900.27

548.29**

Productos

8.00

14004.88

1750.61**
44.36**

dosis
PxD
Factor vs Test
Repeticiones
E.E.

2.00

88.73

16.00

271.45

16.97*

2.00

28117.14

14058.57**

16.93

8.47ns

58.00

437.62

7.55

Cuadro 7. Promedios y prueba de tukey (5%) del dimetro (mm) de los frutos de naranjilla 45 das
despus de aplicar los tratamientos en estudio
Tratam ientos
T28
T5
T27
T6

Prom edio
25.74
27.34
27.35
27.61

Rangos
g
g
g
g

f
f
f

227
T30
T26
T25
T23
T18
T24
T7
T4
T10
T17
T11
T9
T8
T16
T2
T12
T3
T22
T1
T21
T20
T29
T19

29.23
30.22
30.35
30.44
32.95
33.73
34.35
34.77
35.94
36.21
36.72
37.06
37.49
37.93
38.43
38.90
39.32
39.36
39.58
50.68
50.69
54.03
55.28

g
g
g
g
g
g
g

f
f
f
f
f
f
f
f
f

e
e
e
e
e
e
e
e
e
e

d
d
d
d
d
d
d
d
d
d
d
d
d
d

c
c
c
c
c
c
c
c
c
c
c
c
c
c
c

b
b
b
b
b
b
b
b
b
b
b
b
b
b
b
a
a
a
a

2.2.8.4. Conclusiones
De los resultados obtenidos en campo, la Naranjilla (Solanum quitoense) Hbrido
Puyo, presento respuestas variables al efecto de los tratamientos evaluados, en
cuanto a crecimiento, desarrollo y produccin.
El patrn que se utiliz para injertar la naranjilla fue muy tolerante a nemtodos, y
Fusarium oxysporum, no as al ataque del barrenador del tallo.
Se detectaron diferencias en el nmero de flores por inflorescencia, a los 20 das
despus de la aplicacin de los tratamientos. Se tuvo un promedio de 8.4 flores
por inflorescencia
Los tratamientos t13, t14, t15, provocaron una cada total de las flores, a partir de
la segunda aplicacin (15 das despus de la primera) por lo cual no se pudo
continuar con su anlisis.
Se detect diferencias estadsticas entre productos y entre las dosis evaluadas a
los 20 das de la aplicacin.
De la informacin obtenida hasta el momento, se aprecia que los tratamiento T19,
T20 y T21 son los que presentan una mejor apariencia en el fruto, el cual va ha ser
verificado con otros anlisis agronmicos y de laboratorio.
2.2.8.5. Bibliografa
CAADAS, L. 1993. El mapa Bioclimtico y ecolgico del Ecuador.
__________. Quito, MAG-PRONAREG

228

HEISER, C.
2000.
Interespecific hybridization and improvement of the naranjilla (Solanum
quitoense). Fifth International Solanaceae Conference.
__________. 1993. The naranjilla (Solanum quitoense) the cocona (Solanum sessiliflorum) and
their hybrid. Gene Conservation and Explotation. Eds.
Gustafson J.P. et. al. Plenum press.
New York. pp. 29-34.
LUCIO, C. ESPN, M. 1997. Niveles residuales de plaguicidas en frutas Andinas Tomate de rbol
(Cyphomandra betacea) y naranjilla (Solanum
quitoense). Instituto Nacional de Investigaciones
Agropecuarias. PROCIANDINO. Quito. s.p.
REVELO, J; SANDOVAL, P. 2003. Factores que afectan la produccin y productividad de la
naranjilla (Solanum quitoense Lam) en la regin amaznica del Ecuador. Quito-Ecuador. p. 108

2.2.9. Evaluacin de reguladores orgnicos de crecimiento para el

engrose del fruto de naranjilla (Solanum quitoense. hbrido
puyo). San Miguel de los Bancos- pichincha25.
Objetivo del proyecto (4): Evaluar el comportamiento, calidad y rentabilidad de
los clones lite seleccionados, bajo diferentes sistemas de produccin dirigida a
diferentes mercados
2.2.9.1. Objetivos
Objetivo General
Evaluar los reguladores orgnicos de crecimiento para el engrose del fruto de
Naranjilla (Solanum quitoense. Hbrido Puyo), que tengan baja residualidad y
que puedan reemplazar el 2,4-D.
Objetivos Especficos
Determinar el regulador orgnico de crecimiento ms eficiente para el engrose
del fruto de naranjilla.
Determinar la dosis adecuada de los reguladores orgnicos de crecimiento para
el engrose del fruto de naranjilla.
Establecer el nmero de aplicaciones para el adecuado engrose del fruto de
naranjilla.
Realizar el anlisis econmico de los tratamientos en estudio.
2.2.9.2. Marco Referencial
La naranjilla es planta originaria de las estribaciones de los Andes del Ecuador y
Colombia, perteneciente a la familia Solancea. Posee una fruta de gran demanda

25

J. Navarrete; P. Viteri; J. Len; W. Vsquez.

229

a nivel nacional e internacional debido a su sabor agridulce, aromtico y

refrescante.
Es muy susceptible al ataque de enfermedades y plagas, lo que asociado a un
bajo rendimiento, ha reducido drsticamente la superficie cultivada. En 1990 se
identific un hbrido natural denominado Puyo que result tolerante a las
enfermedades y alivi parcialmente los problemas. Posee fruto de tamao
pequeo, por lo que se realizan aplicaciones de 2,4-D (Dacocida) para
incrementar tamao.Por su modo de accin, al 2,4-D, se le incluye dentro de los
herbicidas hormonales pues acta de modo parecido a la hormona natural
auxina, o cido indol-3-actico (AIA).
La liberacin de alguna cantidad de dioxinas durante la produccin de 2,4-D es
inevitable. La dioxina es un compuesto orgnico incoloro e inodoro y
extremadamente estable en la naturaleza; estudios han revelado que es
cancergena. Otros efectos que frecuentemente se mencionan incluyen
desrdenes del comportamiento y el aprendizaje, respuesta inmune deprimida,
bajo nivel de testosterona y espermatozoides, diabetes, y endometriosis.
Existe alta oferta de reguladores de crecimiento naturales y sintticos para mejorar
el tamao de la fruta, estos generalmente contienen hormonas como auxinas,
citoquininas y giberelinas. La presente investigacin, permitir evaluar reguladores
orgnicos de crecimiento que poseen pequeas cantidades de hormonas y
presentan porcentajes bajos de residualidad.
2.2.9.3. Metodologa
Ubicacin del ensayo
El ensayo se realiz en Pichincha, cantn San Miguel de los Bancos, parroquia
San Miguel de los Bancos, comunidad Nuevo Mundo, a una altura de 827 msnm.
Se utilizaron plantas de naranjilla del Hbrido Puyo, injertadas en patrn resistente
a Fusarium y nemtodos.
Factores en estudio
Productos (P). Los productos a utilizarse son Agromil Plus, Crezymax, Rooting,
Maxigrow-Excel y Dacocida.
Dosis (D). Las dosis a utilizarse son la dosis recomendada por la casa comercial y
otra dosis que es 50% ms que la dosis recomendada.
Nmero de aplicaciones (A). Las aplicaciones a realizarse se las dividi en dos
tipos: dos aplicaciones y tres aplicaciones en el ciclo de produccin.

230

Unidad experimental.
La unidad experimental estar conformada por tres inflorescencias de una misma
planta que estn en estado de floracin (50% de flores abiertas
aproximadamente), a este grupo de inflorescencias se les realizar tres
aplicaciones (tratamientos pares). Para los tratamientos que poseen dos
aplicaciones, se seleccionarn 20 das despus tres inflorescencias que posean el
50% de flores abiertas, esto en la misma planta; de tal forma, que en una sola
planta se tenga dos unidades experimentales en la que realizarn aplicaciones del
mismo producto, misma dosis, pero diferente nmero de aplicaciones.
Anlisis estadstico.
Diseo Experimental. Diseo de Bloques Completos al Azar (D.B.C.A.) en
arreglo grupal con un total de 19 tratamientos con cinco repeticiones.
Variables y mtodos de evaluacin:
Nmero de flores por inflorescencia. En una planta, se seleccionaron al azar
tres inflorescencias que posean el 50% de flores abiertas.
Porcentaje de fructificacin. Se obtuvo el porcentaje de frutos cuajados por
inflorescencia y se obtendr el promedio por planta y por tratamiento.
Das a la Cosecha. En las Inflorescencias seleccionadas, se determinaron los
das que transcurrieron desde la plena floracin hasta que los primeros frutos
tengan 70% color amarillo y 30% color verde y se realice la cosecha.
Nmero de Frutos cosechados. De todas las inflorescencias seleccionadas, se
contabiliz el nmero de frutos cosechados.
Dimetro de los frutos cosechados. De lo frutos cosechados se midi el
dimetro ecuatorial de los mismos.
Rendimiento. Con base a ndices de nmero de flores por rama y ramas por
planta, se estim un rendimiento aproximado de cada tratamiento. Esta variable se
expresar en kilogramos por planta y en TM/ha.
Calidad. Se seleccionaron en el momento de la cosecha al azar cinco frutos por
tratamiento.
Evaluacin de la residualidad. Se enviaron muestras de los frutos de los
tratamientos que presente significacin estadstica al laboratorio.
Dao provocado por los productos. Luego de la aplicacin de los productos, se
describieron los daos causados a los diferentes rganos de la planta, adems se
considerar el porcentaje de dao.

231

Anlisis econmico. Se realizar el anlisis de Presupuesto parcial de acuerdo al

CIMMYT (1988).
2.2.9.4. Resultados y Discusin
El tratamiento con mejor cuajamiento de frutos fue el t10 (Rooting con tres
aplicaciones y dosis de 1,5 ml/l) con 18,6 frutos por planta; mientras que el
tratamiento con menor nmero de frutos fue el t18 (Dacocida con tres aplicaciones
y dosis de 1 gota/litro) con 10 frutos por planta.
El producto con mejor cuajamiento de frutos fue el Rooting con 16,67 frutos por
planta; el producto con menor nmero de frutos fue el Dacocida con 10,67 frutos
por planta.
El nmero de aplicaciones con mejor cuajamiento de frutos fue con DOS
aplicaciones con 14,44 frutos por planta; el menor nmero de frutos fue con TRES
aplicaciones con 14,24 frutos por planta.
La dosis con mejor cuajamiento de frutos fue la dosis con ms 50% de lo
recomendado con 14,89 frutos por planta; mientras que la dosis con nmero
menor de frutos fue la dosis recomendada con 14,71 frutos por planta.
El tratamiento que posee frutos de mayor dimetro fue el t18 (Dacocida con tres
aplicaciones y dosis de 1 gota/litro) con frutos de 53,93 mm. de dimetro; el
tratamiento con menor dimetro de frutos fue el t19 (Testigo absoluto, sin
aplicacin) con frutos de 36,57 mm. El producto que promovi frutos de mayor
dimetro fue el Dacocida con frutos de 51,31 mm. de dimetro; el menor dimetro
fue obtenido con el Crezymax, frutos de 43,40 mm. de dimetro.
El nmero de aplicaciones que dio frutos de mayor dimetro fue TRES
aplicaciones con frutos de 47,29 mm. de dimetro; con DOS aplicaciones se
obtuvieron frutos de 45,20 mm. de dimetro.
La dosis que produjo frutos de mayor dimetro la dosis 50% ms de lo
recomendado con frutos de 46,36 mm. de dimetro; y de menor dimetro la dosis
recomendada con 44,89 mm.
El tratamiento con mejor rendimiento fue el t16 (Maxigrow Excel + Citokin con tres
aplicaciones y a dosis de 3,75ml/l y 1 ml/l respectivamente) con 0,870 kg/planta
(2,18 TM/ha por cosecha); mientras que el tratamiento con menor rendimiento fue
el t19 (Testigo absoluto, sin aplicacin) con 0,284 kg/planta (0,71 TM/ha por
cosecha). El producto con mejor rendimiento fue el Maxigrow con 0,715 kg/planta
(1,79 TM/ha por cosecha); el producto con menor rendimiento fue el Crezymax
con 0,610 kg/planta (1,53 TM/ha por cosecha).
El nmero de aplicaciones con mejor rendimiento fue con dos aplicaciones con
0,690 kg/planta (1,73 TM/ha por cosecha); el menor es con TRES aplicaciones

232

con 0,671 kg/planta (1,68 TM/ha por cosecha). La dosis con mejor rendimiento fue
la dosis con ms 50% de lo recomendado con 0,692 kg/planta (1,73 TM/ha por
cosecha); mientras que la dosis menor rendimiento es la dosis recomendada con
0,672 kg/planta (1,68 TM/ha por cosecha).
El tratamiento que posee frutos de mejor calidad fue el t14 (Maxigrow Excel con
tres aplicaciones y a dosis de 2,5 ml/l) con frutos de 9,06 Brix; el tratamiento con
menor calidad fue el t19 (Testigo absoluto, sin aplicacin) con frutos con frutos de
7,16 Brix.
El producto que promovi frutos de mejor calidad fue el Dacocida con frutos de
8,72 Brix; la menor calidad fue obtenida con el Rooting con frutos de 7,95 Brix. El
nmero de aplicaciones que dio frutos mejor calidad fue TRES aplicaciones con
frutos de 8,59 Brix; con DOS aplicaciones se obtuvieron frutos de 8,04 Brix.
La dosis que produjo frutos de mejor calidad fue la dosis 50% ms de lo
recomendado con frutos de 8,45 Brix; y de menor calidad la dosis recomendada
con 8,23 Brix
Anlisis econmico.
Grfico 1. Utilidad neta de la produccin en un ao de una hectrea de naranjilla Hbrido Puyo
(Solanum sessiliflorum x S. quitoense). San Miguel de los Bancos, Pichincha. 2010.

ANLISIS ECONMICO

UTILIDAD NETA (USD)

2000
1500
1000

ROOTING

AGROMIL

MAXIGROW

DACOCIDA

CREZYMAX

500
0
-500
-1000

TESTIGO
ABSOLUTO

-1500
PRODUCTOS

2.2.9.5. Conclusiones
Utilizar Maxigrow Excel en una dosis de 3,75 ml/l junto a 1 ml/l de citokin en el
cultivo de naranjilla (Solanum quitoense var. Hbrido Puyo) en tres aplicaciones
(en flor, cuajado y engrose) incrementar el porcentaje de fructificacin as como
el tamao y peso del fruto, con el respectivo aumento del rendimiento.

233

La dosis de reguladores orgnicos de crecimiento que tiene mejor efecto en el

tamao del fruto fue la dosis de 50% ms de lo recomendado por la casa
comercial.
En general, los reguladores de crecimiento obtienen un buen desempeo con
DOS aplicaciones (flor y cuajado del fruto).
El producto que tiene mejor rendimiento econmico fue el Maxigrow Excel.
2.2.9.6. Bibliografa
ASOCAE. Nauraleza educativa. 2010. Botnica, Taxonoma vegetal. Espaa. Asociacin Espaola
para la Cultura, el Arte y la Educacin. Consultado 1 junio 2010. Disponible en
ttp://www.natureduca.com/botan_indice_clasif1.php#inicio
BEAULIEU, R; y otros. 1973. Reguladores de crecimiento. Traducido por Rosendo Castells.
Barcelona, Espaa. 245 p.
CUEVA, G. 2003. Determinacin de residuos del pesticida 2,4-Diclorofenoxi-actico (2,4-D) en
naranjilla (Solanum quitoense) por cromatografa de gases. Tesis Licenciatura en Ciencias
Qumicas especialidad Qumica Analtica. Pontificia Universidad Catlica del Ecuador. 65 p.
GARCS, J. 1992. El cultivo del lulo. Publicacin tcnica N 12. Medelln, Colombia. Secretara de
Agricultura de Antioquia.
WEAVER, R. 1976. Reguladores del crecimiento de las plantas en la agricultura. Primera edicin.
Mxico, Editorial Trillas. 622 p.

2.2.10. Prospeccin de enemigos naturales del barrenador del fruto

(Neoleucinodes elegantalis (guene)) de la naranjilla (Solanum
quitoense) y evaluacin de la incidencia de las plagas en su
cultivo26.
Objetivo del Proyecto (3): Desarrollar y evaluar estrategias de biocontrol de las
plagas y enfermedades ms importantes.
2.2.10.1. Objetivos
Determinar la presencia de enemigos naturales del barrenador del fruto (N.
elegantalis) en naranjilla (S. quitoense).
Establecer la incidencia de las principales plagas que atacan al cultivo.
Identificar los enemigos naturales (entomopatgenos y parasitoides), ms
importantes de N. elegantalis, en las principales zonas productoras del pas.
Reconocer el grado de importancia de los diferentes insectos plaga que
afectan al cultivo de naranjilla en las principales zonas productoras del pas.

26

Cristina Sosa; Patricio Gallegos, William Viera

234

2.2.10.2. Marco Referencial

La Naranjilla (Solanum quitoense) es un cultivo importante en las estribaciones
oriental y occidental de los Andes del Ecuador (13). El Barrenador del fruto
(Neoleucinodes elegantalis) es el insecto plaga ms significativo en este cultivo y
el que causa mayores prdidas econmicas, llegando a afectar al 90 % de la
produccin (6 14), encontrndose en todos los lugares donde se cultiva, por tanto
los pequeos agricultores requieren de mtodos de control para reducir el dao
causado por la plaga. La fruta de acuerdo a estudios realizados, presenta residuos
txicos no admisibles, adems se debe indicar el riesgo de contaminacin que
representa para los agricultores al momento de aplicar pesticidas a la planta, para
el medio ambiente y para los consumidores. Es muy valiosa una prospeccin o
bsqueda de enemigos benficos para aprovechar el control que realizan en
condiciones naturales. Sin embargo hasta ahora no se ha realizado una
exploracin sistemtica de los enemigos naturales de N. elegantalis. Por otra parte
la naranjilla es atacada por diferentes plagas en las distintas partes de la planta,
insectos que varan dependiendo de la zona, por ello es importante tambin
determinar cules son los de mayor relevancia y que grado de incidencia tienen en
el cultivo, para trabajos futuros sobre su control.
2.2.10.3. Metodologa
En el primer estudio se realizaron recolecciones en localidades de las provincias
de Pichincha, Tungurahua, Pastaza y Napo, se realizaron cuatro muestreos
dirigidos. A las plantas de naranjilla seleccionadas se les tom cinco flores, todos
los frutos afectados y hojarasca de ramas bajeras o del suelo (39). Los muestreos
se tomaron durante ocho meses, de Diciembre a Julio.
En laboratorio se analizaron flores, frutos y hojarasca en bsqueda de huevos,
larvas y pupas de N. elegantalis, respectivamente. La mayora de especmenes
encontrados no presentaron sintomatologa al momento de su examinacin. Se
determin que los especmenes estaban afectados por hongos principalmente por
la formacin de micelio, con bacterias cuando despeda un olor ftido, con virus
cuando se observ cuerpos endurecidos, cambios de color repentino, color
lechoso; con parasitoides: abultaciones en el insecto. Los hongos fueron aislados
y sembrados en el medio de cultivo PDA (Papa Dextrosa Agar), se los purific y
finalmente se los identific con la ayuda del manual de BARNNET. Las bacterias
fueron aisladas y sembradas en el medio de cultivo agar nutritivo 69; igualmente
se realizaron purificaciones hasta obtener cultivos puros. El estudio de bacterias
se dirigi a la familia Bacillaceae, por ser una familia con amplias posibilidades de
usarse en control biolgico. Se las ti y se seleccionaron las gram positivas,
luego se observ al microscopio y nuevamente se tomaron solo las que tenan
forma de bacilos, finalmente se hizo una prueba de formacin de endsporas. Con
las cepas seleccionadas se procedi a la identificacin de especie, se us la
galera api 50CH y el software api web. En los virus se usaron geles de
poliacrilamida para determinar su presencia y el peso molecular de la cpside. Se
realiz tambin estudios del cido nucleco viral siendo: extraccin, electroforesis

235

en gel de agarosa y una amplificacin del ADN mediante el mtodo del crculo
rodante. Los parasitoides se observaron en cmaras de cra y cuando emergieron
se los mont o se los conserv en alcohol. Las variables fueron: porcentaje de
parasitismo para parasitoides y porcentaje de infeccin para hongos, bacterias y
virus.
En el segundo estudio se muestre en localidades representativas de las
principales zonas productoras de naranjilla en el Ecuador. Se hicieron dos
muestreos dirigidos secuenciales. Se usaron diferentes variables para la
determinacin de la incidencia de los diferentes insectos a evaluar y fueron:
porcentaje de frutos daados para Barrenador del fruto (N. elegantalis),
porcentaje de plantas daadas para Barrenador del tallo, porcentaje de ramas
daadas para Barrenador de las ramas, porcentaje de flores daadas para
Perforador de las flores, porcentaje de brotes afectados para fidos, porcentaje
de rea defoliada para defoliadores.
En los dos estudios se us un anlisis estadstico no paramtrico mediante la
distribucin de frecuencia, tanto por ciento, promedio, cuadros comparativos y
grficos.
2.2.10.4. Resultados y Discusin
ESTUDIO 1: PROSPECCIN DE ENEMIGOS NATURALES (HONGOS,
BACTERIAS, VIRUS, PARASITOIDES) DEL BARRENADOR DE LA NARANJILLA
(Neoleucinodes elegantalis) EN LAS PRINCIPALES ZONAS PRODUCTORAS
DEL PAS27.
En la prospeccin que se llev a cabo se encontr todos los estados del
barrenador del fruto; sin embargo, el estado larval fue en el que se recolect el
mayor nmero de especmenes. Dado que las larvas son las que provocan el dao
visible, y el muestreo fue dirigido a plantas sintomticas, el mayor nmero de
especmenes recolectados fue en este estado. En los pocos huevos recolectados
no se encontr parasitoides, ni entomopatgenos. El nmero de pupas halladas
fue reducido, sin embargo, en estas se encontraron parasitoides.
Anlisis general del ataque de enemigos naturales por estado
Larvas
Se observa que un 10.19 % de las larvas recolectadas en campo fueron afectadas
por diferentes enemigos naturales como hongos, bacterias, virus y parasitoides. Si
se compara este porcentaje de ataque larval con otras prospecciones se observa
que es relativamente bajo ya que en estudios
realizados por 47 en bsqueda de enemigos naturales de N. elegantalis se
encontraron solo parasitoides que alcanzaron un porcentaje de control natural de
hasta 22 %; sin embargo, se debe mencionar que es importante el hallazgo de
27

Sosa Maria Cristina

236

estos benficos a pesar del manejo tradicional que este cultivo que usa una gran
cantidad de agroqumicos, y se abre la puerta para emplear nuevas estrategias
basadas en el control biolgico, o a su vez potencializar el control natural existente
en campo, mediante tcnicas como recuperacin de parasitoides, o mediante el
incremento y liberacin de microorganismos.
Los virus son los enemigos naturales que mostraron un mayor ataque al estado
larvario con un 7.47 % en relacin al total de larvas recolectadas en campo; lo cual
constituy 73.33 % del total de larvas afectadas por enemigos naturales. La
transmisin de los virus se puede dar por parasitoides, adultos contaminados,
predadores, agua, lluvia o transmisin transovariana (dentro del vulo), y
transovignica (cuando la superficie de la oviposicin est contaminada) (4). Sin
embargo, la forma ms comn de transmisin es a travs del consumo del
alimento contaminado y es probablemente as que se contaminaron varias de las
larvas infectadas por virus. Las diferentes formas de transmisin del virus pueden
ser razones para que haya existido un ataque viral elevado, comparado con los
otros controladores.
Los hongos constituyen el enemigo natural que afect en menor grado al estado
larval, con un 0.57 % respecto del total de larvas recolectadas, y un 5.56 % en
relacin al ataque total de enemigos naturales en este estado. Su baja presencia
podra estar relacionada a que los hongos generalmente atacan cuando
encuentran insectos expuestos, y como se mencion la larva se encuentra dentro
del fruto, de tal modo que su ocurrencia tiene pocas probabilidades de darse.
Las bacterias presentan un 0.79 % de ataque en relacin a las 883 larvas
recolectadas, y un 7.78 % respecto del total de especmenes larvales atacados por
enemigos naturales.
Los parasitoides presentan un 1.36 % de control en relacin a las 883 larvas
recolectadas, lo que representa un 13.33 % en relacin al ataque total de
enemigos naturales.
Es de vital importancia para el empleo de estos organismos como agentes de
control biolgico realizar investigaciones sobre la biologa y comportamiento de
cada uno, as como comprobar que los biocontroladores encontrados son inocuos
a la fauna benfica presente en el cultivo de naranjilla.
Pupas
Los parasitoides son los nicos enemigos naturales que atacan a las pupas de N.
elegantalis. Entre tanto podemos ver que los parasitoides constituyen en
condiciones de campo la principal estrategia de control natural de pupas del
barrenador.

237

Anlisis por enemigo natural

Hongos
Se procesaron los especmenes que presentaron sintomatologa causada por un
hongo entomopatgeno. No obstante un gran nmero de los hongos aislados
resultaron ser saprofticos. Los hongos encontrados fueron: Fusarium sp. y
Phialophora sp. Adems, en algunos aislamientos se tuvieron problemas con
contaminantes como: Penicilliium sp. y Rizophus sp. Se observa que el hongo
Beauveria sp. presenta un porcentaje de infeccin de 0.23 % respecto a las 883
larvas recolectadas; y un 40.00% en relacin al nmero total de larvas afectadas
por hongos. Beauveria sp. es un entomopatgeno con una amplia patogenicidad;
as se lo ha encontrado en ms de 200 especies de insectos de diferentes
rdenes. Cabe recalcar que en la Coleccin de Hongos Entomopatgenos del
Departamento de Agricultura de Estados Unidos se report su presencia
infectando a larvas de Galleria mellonella que es una especie de la misma familia
que N. elegantalis; lo cual da una perspectiva de la viabilidad del uso de este
hongo entomopatgeno para el control del Barredor del fruto de la naranjilla.
Beauveria sp. se ha encontrado en anteriores estudios de prospecciones de
hongos entomopatgenos en Gusano blanco (Premnotripex vorax) en el cultivo
de papa en las provincias de Pichincha, Cotopaxi, Chimborazo y Carchi (9); en el
Aguacuro del maz (Macrodactylus pulchripes) en San Jos de Minas Pichincha
(40); y en Cosmopolites sordidus y Metamasius hemipterus en Galpagos (46) en
investigaciones realizadas por INIAP. En estos insectos plaga se prob su
patogenicidad y viabilidad para usarse en condiciones de campo. Los resultados
obtenidos dan expectativas alentadoras para usarlo como un biocontrolador de N.
elegantalis.
Aspergillus sp. present un porcentaje de infeccin de 0.23 % en relacin al total
de larvas colectadas y un 40.00 % respecto al nmero total de larvas afectadas
por hongos. Este organismo generalmente se encuentra como patgeno
secundario en un proceso de infeccin, ya que su ocurrencia en la mayora de los
casos se ha reportado en insectos moribundos ya colonizados por otros patgenos
o sometidos a diferentes tipos de estrs en condiciones de laboratorio y campo.
Sin embargo en diferentes estudios, se ha usado a esta especie para controlar
larvas de lepidpteros y saltamontes; y se ha encontrado que los insectos mueren
antes de empupar (4). Por ello, es importante probar la patogenicidad que podra
presentar este organismo.
Verticillium sp. alcanz un porcentaje de infeccin de 0.11 % del total de larvas
colectadas, constituyendo el 20.00 % en relacin al nmero de larvas atacadas por
hongos. Este organismo se ha usado generalmente para el control de fidos,
obtenindose resultados exitosos. Sin embargo, a pesar de haber sido reportado
atacando a larvas Tecia solanivora (Lepidptera) (34), existe poca informacin de
Verticillium sp. como controlador de insectos correspondientes al orden
taxonmico mencionado. Todos los hongos citados con excepcin de una cepa de

238

Beauveria sp. encontrada en Ro Negro, Tungurahua (TBRN); se hallaron en la

localidad San Antonio, Pichincha (PMSA); mostrndose sta como una rea
potencial para la bsqueda de hongos entomopatgenos.
Bacterias
Se proces en cmara hmeda muchos especmenes con sintomatologa de una
posible bacteria, obtenindose varios aislamientos; luego se los purific
estrindolos hasta obtener cultivos puros y se hicieron las diferentes pruebas para
encontrar bacterias de la familia Bacillaceae. Se procesaron 49 posibles bacterias
segn la metodologa citada para la determinacin de esta familia, de donde se
seleccionaron seis cepas pertenecientes a la familia Bacillaceae. Todos los
especmenes que mostraron un ataque de bacterias fueron larvas.
La bacteria que present el mayor porcentaje de infeccin en larvas fue Bacillus
cereus, con un 0.68 % de infeccin de 883 larvas colectadas y un 85.71 % en
relacin al nmero total de larvas atacadas por bacterias. Este entomopatgeno
afecta a algunas especies de lepidpteros (4) y en el presente estudio es
predominante en relacin al total de especmenes afectados por bacterias. De los
seis especmenes larvales atacados por Bacillus cereus, cinco fueron encontrados
en la localidad San Antonio, Pichincha (PMSA). Notndose a esta rea como
importante al presentar un control bacteriano natural.
Paenibacillus polymyxa, present un porcentaje de infeccin de 0.11 % de las 883
larvas colectadas y un 14.29 % en relacin a las 7 larvas afectadas por bacterias.
sta bacteria se la ha usado por mucho tiempo como un biopotencializador de la
rizsfera del suelo para la fijacin de nitrgeno; y como antagnico de ciertos
hongos, tambin se la ha reportado en asociacin con nemtodos
entomopatgenos, pero muy poco es lo que se ha dicho de su patogenicidad a
insectos (5), sin embargo es interesante la presencia de sta bacteria, ya que, al
ser un tanto desconocida en este mbito nos abre la puerta para descubrir su
eficiencia como controlador de insectos. Las bacterias por su alta tasa de
reproduccin y no tanta exigencia en relacin a condiciones climticas como los
hongos, se los ve como agentes potenciales para el control de plagas, en este
caso de N. elegantalis.
Todos los especmenes afectados por virus se presentaron en el estado larval, a
pesar de que la mayora de stos fueron procesados en el laboratorio en estado
de pupa se considera que el ataque fue larval porque ste fue el estado en el que
se las recolect en campo. Antes de establecer la presencia de stos virus en
larvas de N. elegantalis, se constat que los patrones proteicos encontrados no
estaban presenten en larvas sanas; por tanto, se atribuy la presencia de los dos
virus hallados en los especmenes larvales analizados.
Se observa al primer virus NeelV1 con una sola protena mayor de un peso
molecular de 83.35 1.61 kDa present en un 5.55 % de infeccin en 883 larvas
colectadas siendo ste predominante con 74.24 % en relacin al total de larvas

239

afectadas con virus. Este enemigo natural es el que present el porcentaje ms

alto de ataque a N. elegantalis, mostrndose con altas posibilidades de usarse
como un posible biocontrolador de este insecto. Cabe recalcar que ste virus se
present en casi el cien por ciento de las localidades muestreadas, siendo ms
frecuente en la localidad San Antonio, Pichincha (PMSA).
El segundo virus NeelV2 con dos protenas mayores con un peso molecular de
86.83 1.55 y 77.53 2.59 kDa se present en un 1.93 % de las 883 larvas
colectadas y en 25.76 % en relacin a las 66 larvas afectadas por virus. La
distribucin geogrfica al igual que el otro virus es amplia hallndose en las
provincias de Pichincha, Tungurahua, Pastaza y Napo, su presencia ms
frecuente se muestra en la localidad San Antonio, Pichincha (PMSA).
Electroforesis de la protena viral (determinacin del peso molecular)
Se determin la presencia de dos virus: el primero (NeelV1) presenta una protena
de 83.35 1.61 kDa y el segundo (NeelV2) presenta dos protenas virales de
86.83 1.55, 77.53 2.59 kDa corridos en el gel SDS PAGE. Los dos virus
presentes podran corresponder a un mismo virus; esta hiptesis se plantea ya
que los pesos moleculares de los dos virus fueron similares y podra ser que por
condiciones de almacenamiento y degradacin ciertas protenas virales se
destruyeron parcialmente, generando un patrn proteico levemente distinto.
Centrifugacin sobre Gradientes de densidad de iodixanol
Despus de centrifugada la muestra se observaron diferentes bandas, distinguidas
por su peso molecular; entre las cuales se pudo distinguir el virus por ciertas
caractersticas tpicas que indican su presencia. Se comprob que se trataba del
virus, extrayendo la capa y pasndola en geles de poliacrilamida y se comprob la
presencia del patrn proteico atribuido al virus.
Electroforesis en gel de agarosa del cido nucleco viral
El virus NeelV1 es un virus de ADN lineal simple y cadena circular, con un peso
molecular de 4.2 kb o 4200 bpd. Se comprob su presencia al usar el kit TempliPhi
(Amersham Biosciences) y realizar un corte con la enzima de restriccin EcoRV.
El virus encontrado no se lo pudo ubicar dentro de ninguna familia conocida por
las caractersticas que presenta; sin embargo un virus de ADN de simple cadena
circular similar se ha encontrado atacando a Tecia solanivora (Lepidptera).
Parasitoides
Los parasitoides Meteorus sp., Lymeon sp., y un Ichneumonidae presentaron un
4.76 % de parasitismo cada uno con respecto a 21 pupas recolectadas y un 33.33
% en relacin al nmero total de pupas afectadas por parasitoides.

240

Todos los parasitoides que emergieron de pupas se encontraron en una misma

localidad, San Francisco, Pichincha (PPVSF). De un total de cinco pupas
recogidas en esta localidad, tres resultaron parasitadas, notndose un alto
parasitismo de pupas en esta zona.
Debe recalcarse que esta zona maneja una aplicacin de agroqumicos
controlada, por ello se presume que se pudo hallar parasitoides. El manejo
convencional basado en altas aplicaciones de agroqumicos no permiti encontrar
enemigos naturales como parasitoides que se ven expuestos directamente a
aplicaciones de plaguicidas.
Copidosoma sp. fue el nico parasitoide que emergi de larvas y present un
porcentaje de parasitismo de 1.36 %, de 883 larvas colectadas. Este Encyrtidae es
una especie que parasita los huevos, pero los sntomas y signos del parasitismo
se manifestaron en estado de larva, comnmente conocida como momia (47).
Parasitoides de pupa
Meteorus sp. (Braconidae, Meteorinae)
Este insecto mostr un porcentaje de parasitismo de 4.76 % de las 21 pupas
colectadas. Meteorus sp., es un endoparsito comn de larvas de
macrolepidpteros, Adems, como en algunas especies de la familia Noctuidae
present superparasitismo en la que existen algunos agujeros de salida de los
diferentes especmenes de este parasitoide que emergieron de la pupa de N.
elegantalis.
Lymeon sp. ( Ichneumonidae, Cryptinae)
Esta avispa mostr un porcentaje de parasitismo de 4.76 % de las 21 pupas
colectadas, y se trata de un hymenptero que empez su emergencia en estado
de prepupa de N. elegantalis.
Ichneumonidae
Esta avispa, al igual que las anteriores, present un porcentaje de parasitismo de
4.76 %, es un macrohymenptero que emergi en estado de adulto de la pupa de
N. elegantalis.
Parasitoide de larvas
Copidosoma sp. (Encyrtidae) Se lo hall en las localidades de Ro Negro,
Tungurahua (TBRN) y Pindo Mirador, Pastaza (PMPM). Este insecto presenta
poliembriona; es decir que de un solo huevo se pueden originar de 100 a 200
individuos de Copidosoma sp. Esta caracterstica hace a este parasitoide muy
interesante, ya que de cada huevo depositado por una avispa hay el 50 % de
posibilidades de encontrar hembras, por tanto, por cada huevo habran de 50 a
100 nuevas avispas de Copidosoma sp.; hembras que ejercern control natural

241

sobre N. elegantalis (47). Esta avispa presenta una alta especificidad, ya que en
pruebas realizadas por VIFARA (47), no se pudo criar a este parasitoide al no ser
posible la multiplicacin en laboratorio de N. elegantalis. Se probaron otros
hospederos que tambin son parasitados por diferentes especies de Copidosoma
sp.; pero no se tuvo xito. Al ser difcil la cra de este parasitoide en laboratorio
una alternativa es la recuperacin de parasitoides mediante muestreos en zonas
identificadas como potenciales y la recuperacin de los mismos para su liberacin
en campo.
Sintomatologa de las larvas
A pesar de que la emergencia de Copidosoma sp. se da cuando el husped
alcanza su estado larvario, el parasitismo se inicia en los huevos. Las larvas de
N.elegantalis de los ltimos instares (cuarto o quinto) tuvieron un tamao ms
grande al que habitualmente alcanzan en su ltimo instar larvario. Al poco tiempo,
la piel de la larva de N. elegantalis se torn transparente y se observaron
formaciones como arroces a travs de la piel del husped, que corresponden a
cada individuo de Copidosoma sp.
Anlisis por localidades
Anlisis del ataque en larvas
En la localidad San Antonio, Pichincha (PMSA), se present la mayor cantidad de
enemigos naturales con un 3.17 % del porcentaje total de ataque de hongos,
bacterias, virus y ausencia de parasitoides. En esta zona tambin se observ que
el valor ms alto de control de larvas de N. elegantalis, fue ocasionado por los
virus con un 2.15 % de porcentaje de infeccin. La zona de Ro Negro,
Tungurahua (TBRN), present ataque de todos los enemigos naturales (hongos,
bacterias, virus y parasitoides) a pesar de que los porcentajes de infeccin de los
hongos y bacterias fueron muy bajos, 0.11 %. Es importante recalcar que en esta
zona existe una amplia diversidad y potencialidad de biocontroladores.
Localidades como Saloya, Pichincha (PBSal) y El Esfuerzo 1, Pastaza (PPEE), no
presentaron control de enemigos naturales. Esta ausencia total debe estar
relacionada con el manejo convencional, basado en frecuentes aplicaciones de
agroqumicos que combaten o frenan la accin de estos controladores biolgicos.
Los virus como se cit anteriormente, presentaron una amplia distribucin
geogrfica, ya que se presentaron en la mayora de las reas muestreadas; as se
presentaron en las localidades: San Antonio, Pichincha; Marinitas, Pichincha; San
Francisco 1, Pichincha; Ro Negro, Tungurahua; Pindo Mirador, Pastaza; San
Juan de Piata, Pastaza; San Francisco 2, Pastaza y Mondayacu, Napo.
En las localidades Ro Negro, Tungurahua (TBRN) y Pindo Mirador, Pastaza
(PMPM) se encontr al parasitoide Copidosoma sp. Segn estudios realizados en
Colombia (31, 47), la produccin en laboratorio de este parasitoide no es viable,

242

por tanto se plantea como alternativa la potencializacin del mismo, recuperndolo

de larvas de N. elegantalis afectadas en campo; y as permitir el incremento de su
poblacin.
Anlisis del ataque en pupas
La localidad San Francisco 1, Pichincha (PPVSF) es la nica rea donde se
observ ataque de parasitoides a pupas. En esta localidad se present el 14.29 %
de parasitismo en pupas de N. elegantalis; por tanto, es una zona potencial para
futuros estudios de parasitismo de este insecto plaga; como tambin podra ser
para la potencializacin de los mismos. El manejo del cultivo en esta rea consiste
del uso de diferentes herramientas de control integrado de plagas y
enfermedades; por esta razn se presume existe una alta biodiversidad de
parasitoides.
ESTUDIO 2: EVALUACIN DE LA INCIDENCIA DE PLAGAS EN EL CULTIVO
DE NARANJILLA EN LAS PRINCIPALES ZONAS PRODUCTORAS DEL PAS.
Los sitios donde se realiz la evaluacin fueron zonas representativas. Tambin
se recolectaron otros insectos que al momento de la realizacin de este estudio,
se encontraron causando dao al cultivo de naranjilla, siendo estos los siguientes:
Barrenadores de tallo y ramas: se evidenci la presencia de larvas de
lepidpteros, barrenando tallos y ramas de naranjilla.
Perforador de la flor: se colect a un posible Colaspis sp. Coleptero
(determinado por comparaciones con la coleccin del INIAP), en la localidad San
Antonio, Pichincha (PMSA).
Defoliadores: en la localidad San Antonio, Pichincha (PMSA), se recolect a un
posible Epilachna sp. Se determin sta especie por comparacin con la coleccin
del INIAP, donde se reporta que este insecto se encontr en el cultivo de
naranjilla.
Tambin se recolect a un coleptero que por comparaciones con la coleccin de
INIAP tiene similitudes a Pantomorus sp. y a Naupactus sp. Este insecto defoliador
tambin se encontr en la localidad San Antonio, Pichincha (PMSA).
Segn bibliografa se ha encontrado a las especies de fidos Aphis sp. y Mizuz sp.
atacando al cultivo de naranjilla, sin embargo en el estudio solo se constat que
pertenecen a la familia Aphididae.
Es de mucha importancia que se hagan recolecciones peridicas de los insectos
plaga del cultivo de naranjilla, ya que por el manejo excesivo de agroqumicos,
posiblemente muchos insectos que hoy no constituyen un problema en el futuro se
podran convertir en plagas.

243

Anlisis por localidades

San Antonio (PMSA)
El Barrenador del tallo present mayor incidencia en esta zona, con un
porcentaje de plantas daadas del 25 %. La presencia de este insecto en la cuarta
parte de las plantas, hace que se lo considere como un insecto que puede causar
graves daos. Los fidos presentaron la menor incidencia alcanzando un valor
de 2.08 % de brotes afectados. El perforador de las flores obtuvo un 17.13 % de
inflorescencias daadas y el Barrenador del fruto N. elegantalis, present un
15.42 % de frutos daados, valores que se los considera de importancia en este
cultivo. Los Defoliadores presentaron una baja incidencia con un porcentaje de
defoliacin de 1 al 5 %, no siendo un dao representativo en la naranjilla.
Marianitas (PQMar)
En esta localidad, el Barrenador del fruto N. elegantalis alcanz una mayor
incidencia, con un porcentaje de frutos daados del 27.33 %; mientras que los
fidos no se presentaron en esta rea. La ausencia total de fidos puede estar
relacionada con las condiciones climticas de esta zona que es muy hmeda. El
Barrenadores del tallo alcanz un 16.67 % de plantas daadas, observando que
su presencia podra llegar a ser un problema en ste cultivo. El Barrenador de las
ramas alcanz un 4.17 % de ramas daadas y el Perforador de las flores logr
un 6.25 % de inflorescencias daadas; valores que muestran que la incidencia de
estas plagas se present en menor grado. Cabe mencionar que los Defoliadores
con un porcentaje de dao que va desde 1 a 5 % no constituyen un problema
como insecto plaga.
Saloya (PBSal)
Se observa que el insecto plaga de mayor incidencia fue el Barrenador del fruto
N. elegantalis alcanzando un 2.5 % de frutos daados; mientras que los insectos
plaga Barrenador del tallo, Barrenador de las ramas, Perforador del fruto y
fidos, no se presentaron en esta localidad. A pesar de que hay presencia de N.
elegantalis, ste insecto no fue de importancia ya que el dao que causa en el
cultivo es mnimo. De igual forma, los defoliadores presentaron un porcentaje de
incidencia de 1 a 5 %, que no es de importancia en el cultivo. Esta localidad
present muy baja incidencia de insectos plaga debido principalmente al uso
intensivo de agroqumicos.
San Francisco 1 (PPVSF)
El insecto plaga que present mayor incidencia fue el Barrenador del fruto
N.elegantalis alcanzando un 14.29 % de frutos daados; mientras que el
Barrenador del tallo, Perforador de las flores y fidos no se presentaron en la
zona. El Barrenador de las ramas lleg a una incidencia de 9.26 % de ramas
afectadas. Los Defoliadores se presentaron con un porcentaje de dao 1 a 5 %

244

de rea defoliada, siendo ste no significativo, ni de importancia econmica en el

cultivo.
Ro Negro (TBRN)
Se observa que el Barrenador de las ramas constituy el insecto plaga que
alcanz la mayor incidencia con un 25 % de ramas daadas; mientras que, los
fidos presentaron el menor porcentaje de dao, llegando a un 3.27 % de brotes
afectados. Sin embargo, se puede notar que los insectos plaga Perforador de las
flores y Defoliadores mostraron porcentajes de dao bajos que llegaron a 4.00 y
de 1 a 5 % respectivamente; siendo stos no significativos en el cultivo de
naranjilla. Mientras que, el Barrenador del fruto N. elegantalis alcanz una
incidencia de 13.42 % de frutos daados y el Barrenador del tallo logr una
presencia de 10% de ramas daadas.
El Esfuerzo 1 (PPEE)
El Perforador de las flores exhibi el porcentaje ms alto de dao alcanzando un
33.22 % de inflorescencias daadas, mientras que el Barrenador del fruto
N.elegantalis no se present en sta zona. La ausencia de dao puede deberse al
control qumico que se realiza. El insecto plaga Barrenador del tallo, logr una
incidencia de 16.67 % de plantas daadas que se lo considera importante;
mientras que el Barrenador de las ramas alcanz un 6.67 % de ramas daadas.
La presencia de los insectos plaga: fidos con un 2.78 % de brotes afectados y
Defoliadores con un porcentaje de defoliacin de 1 a 5 % no representan
problemas de importancia en esta zona.
San Francisco (PSCSF)
El Barrenador el fruto (N. elegantalis) present la incidencia ms alta, llegando a
un 36.95 % de frutos daados. Cabe recalcar que en esta zona de estudio, se
observ su valor ms alto; por tanto, este insecto fue un grave problema en el
rea.
La presencia del Perforador de las flores tambin fue alta alcanzando un 21.79 %
de inflorescencias afectadas. Es de importancia mencionar la presencia del
Barrenador del tallo que alcanz un 33.33 % de plantas daadas, afectando casi
a la tercera parte de las plantas. Los Defoliadores presentaron una baja
incidencia, con un porcentaje de defoliacin de 1 a 5 %, que es un valor bajo y no
transcendental en el cultivo. Mientras que el Barrenador de las ramas y los
fidos no se presentaron en esta zona.
Anlisis general
El Barrenador del fruto (Neoleucinodes elegantalis) fue el insecto plaga ms
importante en el cultivo de naranjilla, ya que se present en casi todas las
localidades muestreadas, alcanzando su valor ms alto en la localidad San

245

Francisco 2, Pichincha. Cabe mencionar que los datos se registraron en fincas

donde se aplica control para esta plaga.
El Barrenador del tallo, Barrenador de las ramas y Perforador de las flores, se
presentaron con menor incidencia, sin embargo en ciertos lugares su presencia
fue importante. El Barrenador del tallo alcanz un 33.33 % de plantas daadas
en la localidad San Francisco 2, Pastaza; el Barrenador de las ramas logr un 25
% de plantas daadas en la localidad Ro Negro, Tungurahua.
El Perforador de las flores alcanz un 33.22% de ramas daadas en la localidad
El Esfuerzo 1, Pastaza.
Los fidos y Defoliadores no constituyeron problemas como insectos plaga
para el cultivo de naranjilla en las localidades muestreadas; ya que los fidos
alcanzaron como valor ms alto de presencia un 3.27 % de brotes daados;
mientras que los Defoliadores en todas las localidades muestreadas presentaron
un porcentaje de rea defoliada de 1 a 5 % que no es significativo.
2.2.10.5. Conclusiones
PRIMER ESTUDIO
Se identificaron enemigos naturales en las provincias de Pichincha, Tungurahua,
Pastaza y Napo atacando a larvas del Barrenador del fruto (Neoleucinodes
elegantalis). Entre ellos constan los hongos Beauveria sp. Aspergillus sp. y
Verticillium sp, las bacterias Bacillus cereus y Paenibacillus polymyxa, dos virus de
ADN de simple cadena circular y el parasitoide Copidosoma sp. (Encyrtidae).
En el estado de pupa emergieron como enemigos naturales slo parasitoides,
todos estos se ubicaron nicamente en la localidad de San Francisco 1, Pichincha.
Los parasitoides fueron: Meteorus sp. (Braconidae, Meteorinae), Lymeon sp.,
(Ichneumoniae, Cryptinae) y un Ichneumnido (sin identificar).
Los hongos Beauveria sp., Aspergillus sp. y Verticillium sp. mostraron un
porcentaje de infeccin natural al estado larval de 0.68 %; siendo Beauveria sp. al
que se lo podra considerar promisorio por sus caractersticas para usarlo como
biocontrolador. Todos estos hongos fueron hallados en la localidad San Antonio,
Pichincha.
Las bacterias Bacillus cereus y Paenibacillus polymyxa presentaron un porcentaje
de infeccin al estado larval de 0.79 %, siendo B. cereus la ms comn y la que
mostr caractersticas alentadoras para su posible uso como organismo de control
biolgico. Todas estas bacterias fueron encontradas en la localidad San Antonio,
Pichincha.
Los enemigos naturales que exhibieron el valor ms alto de ataque a larvas del
Barrenador del fruto (Neoleucinodes elegantalis) fueron los virus, con un 7.47 %

246

de infeccin natural. Se presentaron en las localidades San Antonio, Pichincha;

Marinitas, Pichincha; San Francisco 1, Pichincha; Ro Negro, Tungurahua; Pindo
Mirador, Pastaza; San Juan de Piata, Pastaza; San Francisco 2, Pastaza y
Mondayacu, Napo.
Los parasitoides constituyen la nica medida de control biolgico que se pudiese
aplicar para el control de pupas de N. elegantalis, teniendo en cuenta que su
presencia est muy relacionada con el tipo de manejo del cultivo.
El parasitoide ovo larval Copidosoma sp. mostr un porcentaje de ataque de
1.36 %; se present en las localidades Ro Negro, Tungurahua y Pindo Mirador,
Pastaza, podra ser un enemigo natural con amplias posibilidades de control de N.
elegantalis.
SEGUNDO ESTUDIO
El Barrenador del fruto (Neoleucinodes elegantalis) fue el insecto plaga que
mostr los mayores valores de incidencia en las principales zonas productoras del
pas, su presencia tpica en el cultivo de naranjilla.
La localidad San Antonio, Pichincha fue el rea donde se presentaron los valores
ms altos de incidencia de los diferentes insectos plaga evaluados en
comparacin con las dems zonas productoras de naranjilla.
Existen reas como la localidad Saloya, Pichincha en donde la presencia de
insectos plaga fue casi nula, por el manejo del cultivo basado en altas aplicaciones
de agroqumicos.
La presencia de Barrenadores del tallo y ramas, Perforador de las flores, fue
importante en las localidades San Francisco 2, Pastaza; Ro Negro, Tungurahua;
El Esfuerzo 1, Pastaza respectivamente; sin embargo su presencia fue
relativamente baja en general en las provincias de Pichincha, Tungurahua,
Pastaza y Napo.
La presencia de fidos y defoliadores no fue significativa en el cultivo de naranjilla
en las localidades muestreadas en las provincias de Pichincha, Tungurahua,
Pastaza y Napo.
2.2.10.6. Recomendaciones
PRIMER ESTUDIO
Realizar pruebas de patogenicidad y/o parasitismo en laboratorio y campo de los
diferentes enemigos naturales encontrados, para determinar su importancia y
eficiencia en el control del Barrenador del fruto (Neoleucinodes elegantalis).

247

Probar la efectividad en el control de larvas de primer instar del Barrenador del

fruto (Neoleucinodes elegantalis), en condiciones de laboratorio y campo, con
estudios de agresividad y virulencia usando los hongos y bacterias halladas.
Desarrollar un programa de control biolgico mediante el incremento de inculo de
los dos virus encontrados NeelV1 y NeelV2 usando especmenes larvales de
(Neoleucinodes elegantalis) o en caso de no ser posible su cra, probarlo en larvas
de Galleria mellonella.
Realizar estudios para la potencializacin del parasitoide Copidosoma sp.en
campo, ya que presenta una alta capacidad de reproduccin debido a su
caracterstica de generar huevos poliembrinicos.
SEGUNDO ESTUDIO
Determinar estrategias de control del Barrenador del fruto (Neoleucinodes
elegantalis) en las diferentes localidades estudiadas, tomando en cuenta el grado
de incidencia que presenta.
Realizar un estudio del dao y la correlacin con el rendimiento de la naranjilla, de
los insectos plaga encontrados en la localidad San Antonio, Pichincha; por ser la
localidad con la ms alta presencia de estos insectos.
2.2.10.7. Bibliografa
ANGULO, R. 2006. Lulo: El cultivo. Bogot, CO. Colciencias. Universidad de Bogot Jorge Tadeo
Lozano, CIAT p 3 40.
ARAUJO DA SILVA, K. 2003. Application of a novel Paenibacillusspecific PCR-DGGE method and
sequence analysis to assess the diversity of Paenibacillus spp. in the maize rhizospher. Ro de
Janeiro, BR. Journal of Micorbiological methods no (54). Consultado 01 feb 2009 p 213 23.
Disponible en http://www.sciencedirect.com/science?_ob=ArticleURL&_udi=B6T30.
ASOHOFRUCOL (Asociacin hortofrutcola de Colombia); CORPOICA (Corporacin Colombi ana
de investigacin Agropecuaria). 2002. El cultivo de lulo: Manual Tcnico. Manizales, CO. FNFH. p 1
9; 12; 42 56.
FIALLOS, J. 2000. Naranjilla INIAP Palora. Hbrido intraespecfico de alto rendimiento. Palora,
EC. INIAP. Boletn divulgativo no (276). p 1-11.
ZEDDAM, J. 2008. An isometric virus of the potato tuber moth Tecia solanivora (Povolny)
(Lepidoptera: Gelechiidae) has a tri-segmented RNA genome. Quito, EC. Journal of Invertebrate
Pathology xxx. Consultado 1 feb 2009. Disponible en www.elsevier.com/ locate/yj ipa.

248

2.2.11. Especies del nematodo del nudo de la raz (Meloidogyne sp.)

asociadas a la naranjilla (Solanum quitoense lam) en ecuador28.
Objetivo del Proyecto (3): Desarrollar y evaluar estrategias de biocontrol de las
plagas y enfermedades ms importantes.
2.2.11.1. Objetivos
Objetivo General
Conocer la variabilidad de Meloidogyne spp., a nivel de especies para orientar un
programa de mejoramiento de variedades de naranjilla resistentes y de
identificacin de porta injertos resistentes en solanceas relacionadas.
Objetivo Especfico
Verificar la variabilidad de Meloidogyne a nivel de especies en las principales
zonas naranjilleras de la regin amaznica.

2.2.11.2. Marco Referencial

REVELO, J. 2010. Especies del nematodo del nudo de la raz (Meloidogyne sp.)
asociadas a la naranjilla (Solanum quitoense Lam) en Ecuador.
En Ecuador la naranjilla constituye un rubro importante por su contribucin a la
alimentacin y como fuente de trabajo e ingresos. Uno de los factores biticos que
limita su cultivo es el nematodo del nudo de la raz Meloidogyne sp.; parasita a las
variedades de naranjilla comn (agria, Baeza dulce y espinosa) causando de 70 a
100% de prdidas. Considerando que el uso de variedades resistentes es el
mtodo ms rentable, de fcil utilizacin y que no afecta el ambiente, la salud del
agricultor y de los consumidores, se desarroll este trabajo que tuvo como objetivo
conocer la o las especies de Meloidogyne de mayor distribucin en las zonas
naranjilleras de la regin amaznica de Ecuador, para orientar un programa de
desarrollo de variedades resistentes y de identificacin de portainjertos resistentes
en solanceas relacionadas.
Para alcanzar el objetivo propuesto, del 24 de septiembre al 19 de noviembre del
2008, se obtuvieron 19 muestras de races de naranjilla y de otros cultivos, en
campos de las principales provincias naranjileras de Tungurahua (cantn Baos,
parroquia Rio Negro) y Pastaza y Napo de la regin amaznica. Para determinar
la especie de Meloidogyne se utiliz la tcnica de la configuracin de la zona
perineal (genitales), para lo cual de las agallas se extrajeron hembras adultas y se
les realiz cortes perineales, los cuales se montaron en placas semipermanentes y
se observaron con ayuda de un microscopio (100x). La configuracin de la zona
28

Revelo Jorge

249

perineal de los especmenes, se compar con la clave pictrica reportada por

Eisenback et al. (1983) para las especies ms importantes del gnero
Meloidogyne. Este trabajo se realiz en el laboratorio de Nematologa del
Departamento de Proteccin Vegetal de la E. E. Santa Catalina del INIAP.
Las caractersticas de los patrones perineales encontradas en hembras adultas de
Meloidogyne extradas de agallas de las races de las variedades de naranjilla
comn, Puyo, Palora y espinosa, correspondieron a Meloidogyne incognita con
una frecuencia de 42 % (8 campos infestados de 19 muestreados). Las especies
Meloidogyne javanica y Meloidogyne arenaria se determinaron en hembras
adultas extradas de agalla de las races de tomate de rbol y papa china.
Los resultados obtenidos permiten alcanzar el objetivo planteado y aceptar la
hiptesis de que la especie de Meloidogyne ms prevalente y de mayor
distribucin en las zonas naranjilleras de las provincias de Tungurahua y Pastaza,
es Meloidogyne incognita, especie hacia la cual el programa de mejoramiento
gentico de la naranjilla debe ser orientado, sin olvidar la importancia que tiene
tambin el hongo Fusarium oxysporum.
Palabras claves: Meloidogye, identificacin de especies, naranjilla, Solanum
quitoense Lam, variedades comn, Palora, Puyo y espinosa.
En Ecuador la naranjilla constituye un rubro importante por su contribucin a la
alimentacin y como fuente de trabajo e ingresos. Este frutal, en los ltimos aos,
ha alcanzado una considerable demanda por la industria y el mercado nacional e
internacional, por su aroma, sabor y contenido nutritivo (Revelo y Sandoval, 2003;
Andrade, 2005; Revelo, et al., 2010).
Uno de los factores biticos que afecta el rendimiento de este frutal es el dao a la
raz causado por el nematodo Meloidogyne incognita Raza 1 (Eguiguren, 1982). A
las variedades de naranjilla comn (agria, Baeza dulce y espinosa) les causa de
70 a 100% de prdidas (INIAP, 1995). Segn Soria (1989) en los aos 70s este
nematodo fue el causante de la crisis ms aguda del cultivo de naranjilla, poca en
la que casi llega a desaparecer debido al aumento inusitado de su poblacin.
Este parsito, en la parte area de las plantas, produce sntomas de reduccin de
crecimiento y sntomas similares a la falta de nutrientes y agua (clorosis y
marchitez), a causa de las agallas que forma en la raz y que obstaculizan la
absorcin de agua y de nutrientes (Taylor y Sasser, 1983). Reduce
significativamente los rendimientos y la vida til de la planta al causarle la muerte
prematura entre el perodo de floracin y el inicio de la fructificacin (Castaeda,
1992).
Los hbridos Puyo e INIAP Palora presentan tolerancia y resistencia a este
nematodo; sin embargo, la primera produce frutos pequeos, problema que los
agricultores solucionan aplicando 2,4 D, una hormona (herbicida) que induce el
crecimiento de los mismos pero por su residualidad, la calidad de los mismos es
afectada; en cambio, la segunda variedad produce frutos grandes sin aplicacin de

250

la hormona, pero de calidad inferior a la naranjilla comn (Fiallos, 2000). Es por

esto que muchos agricultores prefieren cultivar las variedades tradicionales (agria,
Baeza dulce y espinosa) porque obtienen un precio tres veces mayor que los
hbridos, aunque para ello talan el bosque primario causando deforestacin.
El mtodo ms rentable, de fcil utilizacin y que no afecta al ambiente y la salud
del agricultor y de los consumidores, es el uso de variedades resistentes, que, al
evitar el uso de nematicidas, reducen los costos de produccin y la contaminacin
del ambiente.
Si bien el empleo de variedades resistentes constituye la base de la estructura de
programas de manejo integrado de plagas y enfermedades, en el caso del cultivo
de naranjilla, se considera un error depender nicamente de una variedad
resistente como el hbrido Palora para estructurar un programa de manejo, porque
a corto plazo su resistencia ser vencida como sucedi con el hbrido Puyo que
actualmente presenta alta susceptibilidad a Meloidogyne incognita.
Para orientar un programa de mejoramiento gentico para el desarrollo de
variedades resistentes o tolerantes a Meloidogyne e identificacin de porta
injertos resistentes en solanceas relacionadas, es necesario conocer la especie
de mayor frecuencia y distribucin.
Con este fin se realiz el presente estudio cuyo objetivo fue determinar la especie
de Meloidogyne de mayor frecuencia, para orientar correctamente el programa de
mejoramiento gentico de la naranjilla.
HIPTESIS: La especie de Meloidogyne ms prevalente y de mayor distribucin
en las zonas naranjilleras de la regin amaznica, es Meloidogyne incognita
2.2.11.3. Metodologa
Para alcanzar el objetivo propuesto, del 24 de septiembre al 19 de noviembre del
2008, se obtuvieron 19 muestras de races de naranjilla y de otros cultivos, en
campos de las principales provincias naranjileras de la regin amaznica que se
consignan en el Cuadro 1.
Para determinar la especie de Meloidogyne se utiliz la tcnica de la configuracin
de la zona perineal (genitales), para lo cual se extrajeron hembras adultas de las
agallas de las races. A las hembras se les realiz cortes perineales, los cuales se
montaron en placas semipermanentes y se observaron con ayuda de un
microscopio (100x). La configuracin de la zona perineal de los especmenes, se
compar con la clave pictrica reportada por Eisenback et al. (1983) para las
especies ms importantes del gnero Meloidogyne y, por similitud, se estableci la
especie. Este trabajo se realiz en el laboratorio de Nematologa del
Departamento de Proteccin Vegetal de la E. E. Santa Catalina del INIAP.

251

2.2.11.4. Resultados y Discusin

Especies de Meloidogyne
Las caractersticas de los patrones perineales encontradas en las hembras adultas
de Meloidogyne estudiadas y que fueron comparadas con la clave pictrica de
Eisenback et al. (1983), permiti definir claramente las siguientes especies: Un
grupo numeroso de hembras adultas de Meloidogyne sp., mostraron una
configuracin perineal de arco dorsal alto y cuadrado (Figura 3) que coincide con
la configuracin perineal de la especie Meloidogyne incognita descrita por
Eisenback et al. (1983) (figura 4). Pocas hembras de Meloidogyne presentaron
una configuracin perineal de arco dorsal bajo a redondeado, con lneas laterales
bien visibles que separan las estras dorsales de las ventrales (Figura 5), patrn
que coincide con la configuracin perineal de la especie Meloidogyne galvnica
descrita por Eisenback et al. (1983) (figura 6). Pocas hembras presentaron una
configuracin perineal de arco dorsal con hombreras, formadas por ondulaciones
pronunciadas de las estras dorsales, cerca de las lneas laterales que son
visibles, de donde las estras se bifurcan (Figura 7). Este patrn coincide con la
especie Meloidogyne arenaria descrita por Eisenback et al. (1983) (figura 8).

Figura 3. Configuracin perineal de M.

incognita (100 x)

Figura 4. Configuracin perineal de M.

incognita (Eisenback et al., 1983)

Figura

Configuracin perineal de M.
javanica

5.

Figura 6. Configuracin perineal de M.

javanica (Eisenback et al., 1983 )

252

Figura 7. Configuracin perineal de M.

Arenaria

Figura 8. Configuracin perineal de M.

arenaria (Einsenback, et al., 1983)

Incidencia y distribucin de las especies de Meloidogyne

En plantaciones de naranjilla de la provincia de Tungurahua se determin la
presencia de M. incognita en 4 campos (50 %) de 8 muestreados (Cuadro 2). En
dos campos ubicados en la parroquia Rio Negro, se determin tambin a las
especies M. javanica y M. arenaria en tomate de rbol y papa china,
respectivamente; este ltimo campo corresponda a un huerto familiar con varios
cultivos. El resto de campos provenan de bosque secundario (realce), potrero de
10 a 20 aos y descanso (Cuadro 1).
En cambio en las muestras de 4 plantaciones de naranjilla de la provincia de
Napo, no se detect la presencia de este nematodo, es decir los campos no
estaban infestados (Cuadro 2). Este hecho se aduce a que los campos
muestreados a lo largo de la va Hollin Loreto, corresponden a una zona donde el
cultivo de naranjilla fue recin introducido con la apertura de la va, y a que los
campos utilizados provienen de bosque secundario de 10 a 20 aos (Cuadro 1)
Por su parte, en las muestras tomadas en plantaciones de naranjilla de la
provincia de Pastaza, se determin la presencia de M. incognita en 4 campos
(42 %) de 7 muestreados (Cuadro 2). Los campos de las plantaciones
muestreadas provienen de potrero, descanso 10 aos y bosque secundario 10
aos (Cuadro 1).
Al analizar en conjunto los resultados de las 19 muestras, M. incognita presenta
una incidencia de 42 % (8 campos) y una distribucin significativa en los campos
de las provincias de Tungurahua y Pastaza (Cuadros 1 y 2) consideradas como
las ms productoras de este frutal. Estos resultados coinciden con los reportados
por INIAP (1995, 1982) que indica que la especie Meloidogyne incognita es la de
mayor distribucin en las zonas naranjilleras de la regin amaznica.
Adems, de acuerdo con los datos consignados en el Cuadro 3, el orden de
preferencia de los agricultores por las variedades es: Palora (30 %), comn (26
%), Puyo (22 %) y espinosa (22 %), presentando la variedad comn la mayor

253

superficie cultivada por su calidad. De las 4 variedades, Palora es resistente, de

ah su mayor preferencia, sin embargo, todas son parasitadas por M. incognita.
En el mismo Cuadro 3, es importante destacar que cualquiera sea la variedad que
los agricultores prefieran, stos utilizan terrenos provenientes de bosque de realce
de 10 a 20 aos, potreros de 10 a 20 aos y terrenos de descanso, para evitar el
dao del nematodo, propsito que es alcanzado por el 58 % de agricultores al
considerar que Meloidogyne incognita est presente en el 42 % de los campos
muestreados (Cuadros 1).
Los resultados obtenidos permiten alcanzar el objetivo planteado y aceptar la
hiptesis de que la especie de Meloidogyne ms prevalente y de mayor
distribucin en las zonas naranjilleras de la regin amaznica, es Meloidogyne
incognita, especie hacia la cual el programa de mejoramiento gentico de la
naranjilla debe ser orientado, sin olvidar la importancia que tiene tambin el hongo
Fusarium oxysporum.
Cuadro 1. Incidencia de especies de Meloidogyne en las zonas del cultivo de naranjilla de la regin
amaznica. 2009.
Provincias

Meloidogyne
incognita
4
4
50

Meloidogyne
javanica
1
4

Meloidogyne
arenaria
1
4

Tungurahua
(8 muestras)

Campos infestados
Campos libres
Incidencia (%)

Napo
(4 muestras)

Campos infestados
Campos libres
Incidencia (%)

0
4
0

0
4

0
4

Pastaza
(7 muestras)

Campos infestados
Campos libres
Incidencia (%)

4
3
57

0
3

0
3

Campos infestados
Campos libres

8
11

Incidencia (%)

42

Tungurahua
Napo
Pastaza
(19 muestras)

Cuadro 2. Frecuencia de cultivo de las variedades de naranjilla, superficie sembrada, tipo de

terreno utilizado y especies de Meloidogyne identificadas. 2009.

Frecuencia
(%)

rea
sembrada
(ha)

Comn

26

5,4

Palora

30

4,7

Puyo

22

4,1

Variedades

Tipo de terreno
utilizado
Bosque realce 20 aos
Potreo 10 aos
Bosque realce 10 aos
Potrero 20 aos
Bosque realce 10 a 20
aos

Especies de Meloidogyne
(%)
M. incognita

M. javnica

M. arenaria

86

100

100

254

Espinosa

22

4,7

Descanso
Bosque realce 10 a 20
aos
Descanso 10 aos
Potrero 10 a 20 aos

100

2.2.11.5. Bibliografa
ANDRADE, R. 2005. Caracterizacin de las condiciones agro-socioeconmicas de las familias
productoras de naranjilla (Solanum quitoense) en la regin amaznica del Ecuador. Tesis de
Economista. Universidad Catlica del Ecuador. Facultad de Economa. Quito. 155 p.
EGUIGUREN, R. 1982 Prospeccin, bsqueda de resistencia a nematodos asociados con el
cultivo de naranjilla. En Memorias de la Primera Conferencia Internacional de Naranjil la. INIAP.
Quito. pp. 103-108.
EISENBACK, J.; HIRSCHMANN, H.; SASSER, J.; TRIANTAPHYLLOU, A. 1983. Gua para la
identificacin de las cuatro especies ms comunes del nematodo agallador (Meloidogyne
especies), con una clave pictrica. Traducida del Ingles por Carlos Sosa-Moss. INTERNATIONAL
MELOIDOGYNE PROYECT. Raleigh, North Carolina, USA. 48 p.
REVELO, J.; VITERI, P.; VSQUEZ, W.; VALVERDE, F.; LEN, J.; GALLEGOS, P. 2010. Manual
del Cultivo Ecolgico de la Naranjilla. Manual Tcnico No. 77. INIAP y SENACYT. Quito, Ecuador.
126 p.
TAYLOR, J; SASSER, J. 1983. Biologa, identificacin y control de los nematodos del nudo de raz
(especies de Meloidogyne). Trad. del ingls por el Centro Internacional de la Papa. Universidad
Carolina del Norte. Raling. 111p.

2.2.12. Determinacin de las caractersticas fisicoqumicas y estudio

de los ndices de calidad en el comportamiento postcosecha de
los materiales seleccionados en clones lite provenientes de
cruzamientos de naranjilla29
Objetivo Del Proyecto (4): Evaluar el comportamiento, calidad y rentabilidad de
los clones lite seleccionados, bajo diferentes sistemas de produccin dirigida a
diferentes mercados
2.2.12.1. Objetivos
Objetivo General
Determinar los ndices de calidad en el comportamiento postcosecha de clones
lite de naranjilla.

29

Priscila Lpez, Beatriz Brito y Wilson Vsquez

255

Objetivos Especficos
Realizar el anlisis fsico-qumico y sensorial de trece clones lite de naranjilla,
provenientes del Programa de Fruticultura del INIAP, y seleccionar los
materiales que renan las mejores caractersticas de calidad.
Determinar el estado ptimo de cosecha para mantener la calidad de los clones
lite seleccionados, con base al comportamiento durante el almacenamiento al
ambiente y en frigo-conservacin.
Caracterizar qumica y nutricionalmente los mejores materiales y establecer
una tabla de color descriptiva para cada clon seleccionado.
2.2.12.2. Marco Referencial
La presente investigacin es el complemento a una serie de estudios agronmicos
realizados por el Programa de Fruticultura encaminados al mejoramiento de la
productividad y calidad de la fruta en funcin de la demanda. Resultado de estas
investigaciones se seleccion trece materiales promisorios. El estudio permiti
evaluar las caractersticas de los trece clones seleccionados en campo y del
testigo, con el fin de incorporar estas variables en el proceso de seleccin de
nuevos clones, considerando a todos los eslabones de la cadena productiva.
Dada la alta perecibilidad de la naranjilla, se estableci el punto ptimo de corte
debido a que el estado de madurez a la cosecha es uno de los principales factores
que determinan la calidad de la fruta y su valor nutritivo. El estado de madurez
tambin incide en la deshidratacin, las pudriciones, transporte y almacenamiento;
afectando la vida del producto y con ello los ingresos de los productores. Se utiliz
la fruta cosechada de los lotes de investigacin que mantiene el Programa de
Fruticultura en la provincia de Pichincha y Pastaza, se seleccionaron los clones de
naranjilla, que presentaron las mejores caractersticas fsicas, qumicas y
sensoriales, en los cuales se realiz
el estudio de la conservacin,
establecindose el momento adecuado de la cosecha y el tiempo de vida til,
teniendo como testigo a la variedad de jugo INIAP Quitoense 2009.
2.2.12.3. Metodologa
Materia prima
Frutos de 13 clones lite de naranjilla y el testigo, los que fueron cosechados en
tres estados de madurez: 100 %, 75 % y 50 % de viraje de color de cubrimiento de
verde a amarillo-naranjado. Las frutas se obtuvieron de las huertas que mantiene
el Programa de Fruticultura del INIAP en el Triunfo, provincia de Pastaza.
Equipos y accesorios
Se utilizaron los siguiente equipos y accesorios: balanza semi analtica, cuarto de
congelacin y conservacin, calibrador digital, penetrmetro manual de 014 kgf,
refractmetro manual de 0 a 32 Brix, pH metro, licuadora, higrotermgrafo digital,

256

liofilizador, medidor de color, reflectmetro, material de vidrio, soporte universal,

gavetas, tinas, mesa de corte de acero inoxidable, materiales de limpieza y aseo.
Factores de estudio fase I y fase II
En la Fase I, corresponden los trece clones de naranjilla y el testigo, que se
consideran los tratamientos, presentados en el cuadro 1. En la Fase II, los
tratamientos resultan de la combinacin de los factores descritos con sus
respectivos niveles, los cuales se detallan en los cuadros 2, 3 y 4, tanto para el
almacenamiento al ambiente natural, como el ambiente controlado.
Cuadro 1. Tratamientos en estudio. Fase I
Cdigo

CRUZAMIENTOS DE NARANJILLA

T1

Solanum quitoense x Solanum vestissimum.

T2

Solanum quitoense x Solanum vestissimum (semilla).

T3

Solanum quitoense variedad dulce x S. vestissimum (semilla).

T4

Solanum hyporhodium x Solanum quitoense variedad dulce.

T5

Solanum quitoense variedad dulce x Solanum hyporhodium.

T6

Solanum. quitoense variedad peluda x (Solanum quitoense variedad dulce x Solanum vestissimum).

T7

(Solanum vestissimum x Solanum quitoense F1)x Solanum quitoense F1.

T8

Solanum quitoense variedad baeza x (Solanum quitoense variedad dulce x Solanum vestissimum).

T9

(Solanum vestissimum x Solanum quitoense variedad dulce F1)x Solanum quitoense variedad dulce F1.

T10

(Solanum quitoense x Solanum hyporhodium) x Solanum quitoense variedad dulce.

T11

Solanum quitoense variedad baeza.

T12

Solanum quitoense variedad peluda.

T13

Hbrido Puyo.

TESTIGO (T)

Solanum quitoense Lam. INIAP Quitoense 2009

Cuadro 2. Factor a: niveles para los ecotipos seleccionados. Fase II

ECOTIPOS
Solanum quitoense x Solanum vestissimum. (semilla)
Solanum quitoense variedad dulce x Solanum hyporhodium
Solanum quitoense variedad Baeza x
(Solanum quitoense variedad Dulce x Solanum vestissimum)
Testigo: Solanum quitoense Lam

CDIGO
N2
N5
N8
N

Cuadro 3. Factor b: perodos de almacenamiento. Fase II

AMBIENTE NATURAL
PERODOS (das)
CDIGO
0
A1
5
A2
10
A3
15
A4
20
A5
25
A6
30
A7

AMBIENTE CONTROLADO
PERODOS (das)
CDIGO
0
F1
10
F2
20
F3
30
F4
35
F5
40
F6
45
F7

257
Cuadro 4. Factor c: estados de madurez de la fruta. Fase II
ESTADOS DE MADUREZ
50 % viraje de color: verde a amarillo - anaranjado
75 % viraje de color: verde a amarillo - anaranjado

CDIGO
E1
E2

Diseo experimental
Para la Fase I, se aplic el Diseo Completamente al Azar (DCA) en los catorce
tratamientos, que corresponden al total, en los cuales se analiz las propiedades
fsicas en 20 repeticiones y propiedades fsicas y qumicas en tres repeticiones.
Para la Fase II, en los dos tipos de almacenamientos se emple el Diseo de
Bloques Completamente al Azar (BCA) con arreglo factorial A x B x C. El factor A,
son los ecotipos, con 4 niveles. El factor B, con 7 niveles son los perodos de
almacenamiento. El factor C, son los estados de madurez con 2 niveles.
Resultando 56 tratamientos, con tres repeticiones, para cada tipo de
almacenamiento.
Anlisis estadstico
El esquema de anlisis de varianza utilizado en la fase I, y II para los dos tipos de
almacenamiento, se presentan en el Cuadro 5 y 6.
Cuadro 5. Esquema del anlisis de varianza fase I
FUENTES DE
VARIACIN
TOTAL
Tratamientos
Error Experimental

P. FSICAS
G. L.
279
13
266

P. FISICO QUMICAS
G. L.
41
13
28

Tanto para la Fase I y II, se calcul el coeficiente de variacin CV (%) y se realiz

pruebas de significacin de Tukey al 5 %, para tratamientos. Adems en la fase I,
se evalu las caractersticas organolpticas mediante un diseo de bloques
completamente al azar BCA y la prueba de Tukey al 5 %. Se utiliz el paquete
estadstico Statgraphics Plus, versin 4.0.
Cuadro 6. Esquema del anlisis de varianza fase II
FUENTES DE VARIACIN
TOTAL
Tratam ientos
Repeticiones
Ecotipos (T)
Perodos de Almacenamiento (A)
Estados de m adurez (E)
Interacciones
NxA
NxE
AxE
NxAxE
Error Experim ental

GRADOS DE LIBERTAD
(N x A x E x r) -1

167

t-1
r-1
n-1
A-1
E-1

55
2
3
6
1

(N -1) (A -1)
(N-1)(E-1)
(A -1) (E -1)
(N -1) (A -1) (E -1)
Diferencia

18
3
6
18
110

258

Manejo especfico del experimento

Los clones seleccionados y el testigo se cosecharon en la localidad del Puyo, se
transport a la Unidad de Procesamiento de Frutas del Departamento de Nutricin
y Calidad de la Estacin Experimental Santa Catalina del INIAP, en donde se
realiz las operaciones adecuadas de postcosecha como son: seleccin, limpieza,
desinfeccin, secado y clasificacin, Para la fase I, se cosech fruta en su
madurez comestible (100% maduro), mientras que para la fase II, se cosech en
los estados de madurez correspondientes al grado 3 y 4, es decir 50 % y 75 % de
viraje de verde a amarillo-naranja, respectivamente. Se cortaron los frutos sanos,
con 2 cm de pednculo y sin quitar el cliz, para luego ser transportadas al
laboratorio.
Procedimiento
En la fase I, para realizar la seleccin de los materiales con mejores
caractersticas de calidad, se realiz la caracterizacin fsica en la fruta entera que
comprende las determinaciones de peso, relacin de longitud y dimetro, firmeza
de la pulpa, y rendimientos. Las determinaciones fsico-qumicas realizadas en la
pulpa de la fruta fueron slidos solubles, pH, acidez titulable, consistencia, color,
pardeamiento de la pulpa y vitamina C. En el anlisis sensorial se evalu los
atributos de color, sabor, aroma y dulzor, mediante una prueba del nivel de
aceptabilidad de las pulpas de naranjilla, comparndolo con el testigo de la
variedad de jugo INIAP Quitoense 2009. El panel de catacin estuvo conformado
por 25 panelistas no entrenados de ambos sexos.
Para determinar la madurez ptima y la calidad de la fruta, al finalizar el tiempo de
cada perodo de almacenamiento, tanto al ambiente como en condiciones
controladas, se realiz evaluaciones fsicas las cuales fueron prdida de peso,
descripcin visual de la fruta y firmeza de la pulpa. Las evaluaciones fsicoqumicas con la pulpa de la fruta consistieron en slidos solubles, pH, acidez
titulable, color, pardeamiento de la pulpa, vitamina C y relacin de madurez. El
almacenamiento al ambiente natural se realiz a temperatura y humedad relativa
promedio de 17 C y 59 % de humedad relativa, el almacenamiento al ambiente
controlado, se realiz en un cuarto fro, con las condiciones de temperatura de 8
C 2 y humedad relativa del 80 %.
Anlisis qumico y nutricional y tabla de color descriptiva de los clones
seleccionados
Se realiz la caracterizacin qumica y nutricional de los clones lite,
seleccionados para la conservacin, se utiliz la fruta fresca recin cosechada en
su estado de madurez organolptico, en las que se realiz anlisis de pH, acidez
titulable, slidos solubles, humedad, cenizas, fibra, extracto etreo, protena,
carbohidratos totales, macro y micro elementos minerales, vitamina A, vitamina C,
azcares totales, azcares reductores, polifenoles totales y carotenoides totales.
Adems se estableci una tabla de color descriptiva en los diferentes estados de

259

madurez de la fruta, que incluye fotografas en los estados de madurez de 0%,

25%, 50%, 75% y 100% de viraje de color verde a amarillo anaranjado, en
donde se seala algunos parmetros de calidad.
2.2.12.4. Resultados y discusin
Seleccin por calidad de los mejores clones lite de naranjilla. fase I
La seleccin de los clones lite de naranjilla se realiz de acuerdo a los resultados
obtenidos en la caracterizacin fsica, qumica y sensorial. Segn MAG IICA, en
el 2001, seala que entre las principales caractersticas y las condiciones de
calidad, para la exportacin de la naranjilla, son que la fruta debe tener una
apariencia sana, fresca, consistencia firme y color intenso, cumplir con las
medidas entre 5 y 6 cm de dimetro, pesos entre 90 y 140 g.
En la caracterizacin fsica de los tratamientos, los clones 2, 5 y 8, reunieron los
requisitos de calidad que se mencionan para la exportacin, adems de mostrar
caractersticas parecidas al testigo que corresponde a la variedad mejorada de
jugo INIAP Quitoense 2009. Estos clones presentaron valores altos de peso, largo,
dimetro, relacin L/D apropiada, rendimiento en pulpa, por lo que se ubicaron en
los primeros grupos estadsticos en la prueba de Tukey al 5 %. Con relacin a la
firmeza y la consistencia de la pulpa, los resultados sealan que tienen valores
bajos de firmeza y altos de consistencia (ms lquida) en comparacin con el
testigo.
Al analizar el color, los tres clones demuestran una luminosidad intermedia,
espacio de color ( Hue) entre amarillo y rojo, cromaticidad o intensidad del color
cercanas a las del testigo, el ndice de oscurecimiento para el clon 8, se situ en
los primeros rangos estadsticos, tanto a los 0 como a los 60 minutos, los clones 2
y el clon 5, se comportaron de la misma manera pero al cabo de una hora de
evaluacin. Los clones 2, 5 y 8 presentaron un bajo incremento en el ndice de
oscurecimiento, de la misma manera que el testigo y frente a los dems clones en
estudio.
Los resultados de la caracterizacin qumica expresada mediante el contenido de
slidos solubles y pH, indican que los clones 2, 5 y 8 presentan valores ptimos,
incluso superiores a los del testigo, mientras que para la acidez tiene valores
bajos, similares a los del testigo, comprobndose mediante la prueba de Tukey al
5 % al conformar los primeros rangos estadsticos. As mismo, estos clones
reflejan resultados adecuados en la relacin de sabor, obtenida de la divisin entre
los slidos solubles y la acidez de la fruta, resultados que se presentan en el
grfico 1.
Respecto al anlisis sensorial los clones seleccionados, coinciden con la seleccin
realizada en la caracterizacin fsica y qumica. Con el fin de distinguir los clones
que tuvieron mayor aceptabilidad, se efectu una sumatoria de las calificaciones
de los degustadores para los cuatro atributos, los clones 2, 5 y 8 que fueron

260

seleccionados, adems del testigo, que tienen las ms altas puntuaciones, como
se observa en el grfico 1.
Grfico 1. Relacin de sabor y aceptabilidad referente a la calificacin total obtenida en el anlisis
sensorial para los clones lite y el testigo

Conservacin en ambiente natural. Fase II

El anlisis de varianza detect que existen diferencias altamente significativas
para tratamientos, repeticiones, factor N (clones), factor A (perodos de
almacenamiento) y factor E (estados de madurez), con excepcin de los slidos
solubles y pH, que para el factor E resultaron ser no significativas. Las
interacciones, clones por perodos de almacenamiento, y clones por estados de
madurez, presentaron diferencias altamente significativas en todas las variables.
La interaccin perodos de almacenamientos por estados de madurez, seala alta
significacin estadstica para las variables prdida de peso, firmeza, slidos
solubles, pH y acidez; mientras que para la relacin de sabor y vitamina C, no
existe significacin.
La interaccin clones por perodos de almacenamiento por estados de madurez,
demostr diferencias altamente significativas en todas la variables, por lo que se
realiz la prueba de Tukey al 5% nicamente para esta interaccin, debido a que a
conjuga los tres factores en estudio, siendo de mayor importancia para esta
investigacin. Los coeficientes de variacin se encuentran en el rango normal
definido para el anlisis de laboratorio que es hasta el 12%, habindose reportado
el ms alto de 9,06 para la firmeza, debido a que durante el almacenamiento se
produce un ablandamiento de los tejidos no uniforme en la fruta, parte de la
superficie se encuentra en contacto con otros frutos, existiendo presin y por ende
la tendencia a suavizarse, mientras que la parte sin contacto no se ve afectada.
Cuadro 7. Anlisis de varianza de los ndices de madurez
ambiente natural
F de V
Total

Tratamientos

Repeticiones

GL

Prdida
Peso

ft

Firmeza

Slidos
Solubles

evaluados en el almacenamiento al

pH

Acidez
titulable

Relacin
sabor

Vitamina
C

167 0.05 0.01

SC

16878,22

749,81

416,26

5,75

29,62

413,25

2051,36

SC

16841,71

743,44

406,89

4,97

28,57

405,04

2028,16

55

CM

306,21

13,52

7,40

0,09

0,52

7,36

36,88

fc

927,92**

225,28**

92,48**

9,04**

51,95**

105,21**

175,60**

SC

0,42

0,01

0,24

0,05

0,03

0,27

0,40

1,46 1,69
3,08

4,8

261

N: Clones

A: Perodos
de
Almacen.

2,69 3,96

2,18 2,97

CM

0,21

0,01

0,12

0,02

0,01

0,13

0,20

fc

0,64ns

0,13ns

1,42ns

3,44ns

1,61ns

1,84ns

0,96ns

SC

3135,09

36,86

305,44

1,87

14,53

210,66

829,09

CM

1045,03

12,29

101,81

0,62

4,84

70,22

276,36

fc

3184,42**

SC

12252,21

633,29

6,74

0,15

1,68

15,34

39,16

CM

2042,03

105,55

1,12

0,03

0,28

2,56

6,53

6222,5** 1827,23**

fc
E: Estados
de
Madurez

NA: Clones x
P. de
Almacen.

18

NE: Clones x
E. de
Madurez

AE: P. de
Almacen. x
E. de
Madurez

NAE: Clones
x P. de
Almacen
x E.
deMadurez

18

Error
Experimental

110

3,93 6,88

1,71 2,11

2,69 3,96

2,18 2,97

1,71 2,11

212,69** 1225,55** 94,48** 522,13**

971,87** 1332,78**

13,52**

3,9**

30,11**

35,39**

31,47**

SC

8,60

11,50

0,01

0,00

1,65

10,04

244,49

CM

8,60

11,50

0,01

0,00

1,65

10,04

244,49

ns

ns

177,65**

fc

26,21**

199,14**

SC

1163,00

34,18

0,18

44,79

0,09

2,31

8,30

138,96** 1179,09**
154,22

CM

64,61

1,90

2,49

0,13

0,46

8,57

18,91

fc

196,88**

32,88**

29,95** 19,52**

49,71**

118,58**

91,18**

340,34

SC

23,34

6,83

2,75

0,32

0,49

5,46

307,41

CM

7,78

2,28

0,92

0,11

0,16

1,82

102,47

fc

23,71**

39,42**

11,04**

16,3**

17,5**

25,19**

494,17**

SC

74,57

7,19

11,53

0,07

0,37

0,93

97,63

CM

12,43

1,20

1,92

0,01

0,06

0,15

16,27

fc

37,87**

20,74**

23,14**

1,85**

6,61**

2,13ns

78,47ns

SC

184,90

13,59

35,63

0,25

1,55

8,39

170,04

CM

10,27

0,75

1,98

0,01

0,09

0,47

9,45

fc

31,3**

13,07**

23,83**

2,13**

9,29**

6,45**

45,56**

SC

36,10

6,35

9,14

0,72

1,02

7,95

22,81

CM

0,33

0,06

0,08

0,01

0,01

0,07

0,21

4,18

9,06

2,36

2,46

4,09

4,98

3,49

Coeficiente de variacin (%)

**: Altamente significativo *: Significativo

NS: No significativo

Prdida de peso y firmeza de la pulpa

La temperatura y la humedad relativa, influyeron en la deshidratacin de la fruta,
adems de que la fruta cumple con su funcin fisiolgica de la transpiracin,
causas que constituyen la prdida de peso, esta observacin se detect en todos
los clones seleccionados, presentndose tendencia lineal, lo que permiti
establecer ecuaciones en los dos estados de madurez, siendo importante para
predecir las prdidas de peso al cabo de cualquier tiempo con el fin de ayudar a
programar el almacenamiento y actividades tanto de postcosecha como de
industrializacin. Los comportamientos de los clones lite seleccionados, se
pueden apreciar en el grfico 2.

262
Grfico 2. Prdida de peso de los clones lite seleccionados y el testigo durante la conservacin al
ambiente natural

Respecto a la firmeza de la fruta, durante el almacenamiento se presentaron

cambios estructurales, los cuales provocan el ablandamiento de los tejidos, este
proceso forma parte del envejecimiento, que en determinado tiempo colapsan y
mueren finalmente con la senescencia del fruto. Este comportamiento se observa
en el grfico 3, en donde la firmeza de todos los clones lite seleccionados y el
testigo, para los dos estados de madurez, disminuyen con el tiempo de
conservacin. La tendencia lineal, permiti describir su comportamiento a travs
de ecuaciones, las cuales sirven para predecir el comportamiento de la fruta en
distintos perodos de conservacin.
Grfico 3. Variacin de la firmeza de los clones lite seleccionados y el testigo, durante la
conservacin al ambiente natural

Daos visuales
Este ndice de madurez es subjetivo, debido a que utiliza los rganos de los
sentidos, en este caso la vista, por lo tanto sus resultados son propensos a variar
considerando el criterio del analista, sin embargo los tres tipos de daos
encontrados se relacionan con el manejo agronmico del cultivo que incide en la
calidad poscosecha de la fruta.
El dao poscosecha identificado con mayor intensidad durante este
almacenamiento fue la deshidratacin de la naranjilla, aunque a medida que pas
el tiempo de almacenamiento tambin se hicieron presentes otros tipos de daos
que desencadenaron en la pudricin de la fruta. Los resultados sealan que con el
pasar del tiempo de almacenamiento los daos aumentan dentro de la escala de
intensidad sugerida, as como el porcentaje de daos se incrementa con el grado
de madurez, siendo mayor para la fruta con el viraje de color de 75%.

263

Slidos solubles, pH y acidez

Con respecto al pH, al analizar el comportamiento de los clones lite en cada
estado de madurez, se observa que en existe un leve incremento y una tendencia
a permanecer constante esto demuestra que durante el almacenamiento la
influencia de la temperatura y la humedad relativa del ambiente sobre el pH es
mnima.
Los slidos solubles como se muestra en el grfico 4, se observa que su contenido
aumenta durante el almacenamiento, los mximos valores durante los perodos de
almacenamiento, coinciden con los das los cuales las naranjillas presentan su
mayor tiempo de vida til y por ende su mayor desarrollo de madurez, luego de
este perodo se registra una leve declinacin, hasta el final del almacenamiento,
sin embargo en el caso en el que el que se sigue apreciando un aumento, se debe
no solo al aumento de los azcares de la fruta, sino tambin a los pigmentos
propios de la fruta, los cuales de la misma manera se acrecientan con la
deshidratacin de la fruta.
Grfico 4. Contenido de slidos solubles de los clones lite y el testigo durante la conservacin al
ambiente natural

En forma general, la acidez disminuye o tiende a mantenerse, para la mayora de

los clones lite en estudio, a medida que transcurre el tiempo de almacenamiento,
resultado que concuerda con el contenido de slidos solubles, al presentar un
aumento, sin embargo en el clon elite 8, se aprecia que existe un incremento de la
acidez en los primeros perodos de almacenamiento, esto se debe a que este clon
siga desarrollando su sabor caracterstico, observacin importante que establece
la aceptacin o rechazo de la fruta por parte del consumidor. El ascenso de la
acidez en los ltimos perodos de almacenamiento es consecuencia de las
fermentaciones, procesos que se presentan cuando la fruta ha llegado a la
senescencia. Es necesario recalcar que los resultados de las variaciones de la
acidez se relacionan con la vida til de cada clon lite en estudio.
Relacin de sabor y vitamina C
En general los frutos con 50% de madurez, presentan tendencia a aumentar o a
conservar la relacin de sabor, con el pasar el tiempo de almacenamiento, esta
tendencia se observ para todos los clones a excepcin del clon lite 8, el cual
presenta descenso hasta los 10 das de almacenamiento, luego del cual aumenta

264

ligeramente hasta mostrarse casi constante. Las naranjillas con 75% de madurez,
mostraron de igual manera un comportamiento similar a las de 50%, pero cabe
sealar que los valores de la relacin de sabor fueron mayores respecto del otro
estado de madurez, se observa una diferencia acentuada para el clon lite 8 ya
que la relacin de sabor empieza a bajar hasta los 10 das de almacenada la fruta
para luego permanecer constante, esta disminucin de la relacin de sabor puede
deberse por efecto mismo de la maduracin de la fruta, caracterstica especial de
este clon lite.
El comportamiento de los clones lite respecto de la vitamina C, refleja que
disminuye o permanece constante con el pasar el tiempo de almacenamiento
como se observa en el grfico 5, sin embargo el clon lite 8 y el testigo,
presentaron un ligero aumento en ciertos perodos de almacenamiento, los cuales
coinciden con el tiempo de vida til de la fruta.
Grfico 5. Vitamina C, de los clones lite en estudio, durante la conservacin al ambiente

Color y pardeamiento de la pulpa

Referente a los componentes del color en todos los clones lite, para los dos
estados de madurez, sometidos al almacenamiento, se observ que la
luminosidad disminuye a medida que transcurren los das de almacenamiento,
debido a que las pulpas se vuelven opacas. Para los parmetros a (rojo = a +,
verde = a-) y b (amarillo = b+, azul = b-), se obtuvo una relacin inversamente
proporcional, es decir, mientras el color verde disminuye, el color amarillo aumenta
conforme pasan los perodos de almacenamiento, resultado que coincide con el
ngulo Hue, que se aprecia que aumenta, aunque sigue estando en el espacio de
color entre verde y amarillo, se aprecia que con el pasar del tiempo de
almacenamiento, la tonalidad amarilla aumenta. los valores de cromaticidad,
revelan que se sitan entre, 20 y 30, sin embargo a medida que trascurre el
tiempo de almacenamiento esta aumenta, lo que indica que la intensidad del color
de la pulpa se acenta volvindose cada vez ms pura, mientras que el
pardeamiento de la pulpa, se registr a medida que avanza el proceso de
almacenamiento, siendo en algunos clones mayor el ndice de oscurecimiento en
los primeros perodos de almacenamiento, debido a que la fruta no ha completado
su proceso de maduracin.

265

Conservacin al ambiente controlado

A travs del almacenamiento de la fruta bajo condiciones de 8 C y 2 C y 80 %
de humedad relativa, se logr disminuir la intensidad respiratoria, la transpiracin
de la fruta que consiste en las prdidas de agua, los procesos de maduracin a
travs de la produccin de etileno, as como inhibir el crecimiento de
microorganismos. En el cuadro 6, se muestran los resultados de los anlisis de
varianza obtenidos de las variables evaluadas durante el almacenamiento al
ambiente controlado.
El anlisis de varianza, en todas las variables detect diferencias altamente
significativas para tratamientos, mientras que para las repeticiones result ser no
significativo. Referente al factor clones existe diferencias altamente significativas
en todas las variables analizadas. Para el factor perodos de almacenamiento se
encontr diferencias altamente significativas para todas las variables a excepcin
de los slidos solubles que fue no significativa. En el factor estados de madurez se
present diferencias altamente significativas en casi todas las variables, sin
embargo en las evaluaciones de pH y la relacin de sabor se aprecia diferencias
significativas.
En cuanto a las interacciones de acuerdo al diseo factorial aplicado como son:
clones por perodos de almacenamiento, clones por estados de madurez, perodos
de almacenamiento por estados de madurez y la interaccin clones por perodos
de almacenamiento y por estados de madurez, se identificaron que existe
diferencias altamente significativas, en todas las evaluaciones realizadas.
Cuadro 8. Anlisis de varianza de los ndices de madurez evaluados durante el almacenamiento
controlado
F de V
Total

Tratam ientos

Repeticiones

N: Ecotipos

A: Perodos de
Alm acenamiento

E: Estados de
Madurez

167 0.05 0.01 SC

Prdida
Peso
10049,22

SC

10020,88

800,88

291,11

10,42

63,60

1331,20

1621,21

1,46 1,69 CM

182,20

14,56

5,29

0,19

1,16

119,39

29,48

fc

728,79**

145,61**

44,11** 18,95**

115,64**

1193,9**

184,23**

SC

0,40

0,45

0,03

0,66

0,16

Gl

55

ft

3,08

4,8

812,05

Slidos
Solubles
304,52

11,07

Firm eza

0,09

pH

0,03

Acidez Relacin Vitam ina

Titul.
Sabor
C
64,29
1343,01
1639,21

CM

0,20

0,23

0,05

0,02

0,01

0,33

0,08

fc

0,79ns

2,33ns

0,38ns

2,97ns

2,13ns

3,28ns

0,5ns

SC

1018,72

60,69

190,55

8,23

56,89

1267,19

779,71

2,69 3,96 CM

339,57

20,23

63,52

2,74

18,96

422,40

259,90

fc

1336,47**

207,99**

525,08** 483,5** 3106,01** 4168,92**

1603,4**

SC

8404,61

634,20

0,75

0,42

0,94

4,38

25,98

2,18 2,97 CM

1400,77

105,70

0,13

0,07

0,16

0,73

4,33

fc

5513,07**

1086,68**

1,04ns

12,26**

25,6**

7,2**

26,72**

SC

35,55

39,38

3,50

0,04

0,15

0,57

185,83

3,93 6,88 CM

35,55

39,38

3,50

0,04

0,15

0,57

185,83

fc

139,91**

404,88**

28,91**

6,61*

24,18**

5,67*

1146,42**

266

NA: Ecotipos x
P. de
Alm acenamiento

NE: Ecotipos x
E. de Madurez

AE: Perodos de
Alm acenamiento
x E. de Madurez

SC
18

NAE: Ecotipos x
P. de
Alm acenamiento
x E. deMadurez

18

Error
Experim ental

110

20,78

70,25

1,09

3,09

24,25

167,89

3,90

0,06

0,17

1,35

9,33

32,26** 10,65**

28,14**

13,3**

57,54**

1,71 2,11 CM

17,98

1,15

fc

70,76**

11,87**

SC

30,78

12,53

2,97

0,11

0,28

4,52

120,27

2,69 3,96 CM

10,26

4,18

0,99

0,04

0,09

1,51

40,09

fc

40,38**

42,95**

8,18**

6,37**

15,3**

14,88**

247,32**

SC

80,58

12,57

1,90

0,08

0,14

1,53

118,04

2,18 2,97 CM

13,43

2,09

0,32

0,01

0,02

0,25

19,67

fc

52,86**

21,53**

2,62*

2,46*

3,77**

2,51*

121,37**

SC

127,03

20,73

21,19

0,45

2,11

28,76

223,49

1,71 2,11 CM

7,06

1,15

1,18

0,03

0,12

1,60

12,42

fc

27,78**

11,84**

9,73**

4,45**

19,16**

15,77**

76,60**

SC

27,95

10,70

13,31

0,62

0,67

11,15

17,83

CM

0,25

0,10

0,12

0,01

0,01

0,10

0,16

10,06

2,91

2,19

3,55

5,14

3,24

Coeficiente de variacin (%)

**: Altamente significativo

323,61

*: Significativo

4,19

NS: No significativo

Prdida de peso y firmeza

Las prdidas de peso para la conservacin al ambiente controlado, result ser
menor que para el almacenamiento al ambiente natural, en todos los clones lite y
el testigo, observndose la accin beneficiosa de la temperatura como de la
humedad relativa en la conservacin de peso del fruto, no obstante se present
una tendencia lineal al aumentar en forma gradual las prdidas durante todo el
almacenamiento, lo que permiti establecer ecuaciones que sirven para
pronosticar las prdidas en determinado tiempo, esto se observa visiblemente en
el testigo con 75% de madurez, en donde a los 10 das al ambiente natural las
prdidas se registran en 4.27%, mientras que en el ambiente controlado obtuvo
prdidas del 2.91% del peso inicial. En el grfico 6, se presenta el comportamiento
en los dos estados de madurez de los clones lite y el testigo, bajo las condiciones
controladas.
Grfico 6. Prdida de peso de los clones lite seleccionados y el testigo durante la conservacin en
ambiente controlado

La firmeza presenta cambios similares respecto a las prdidas de peso, as se

observa que aunque la firmeza decrece a medida que trascurre el tiempo, la
resistencia a la penetracin es mayor durante el ambiente controlado que para la
conservacin al ambiente controlado, ya que existe menor deshidratacin en la
fruta y consecuentemente los tejidos duran ms firmes por ms tiempo. Como se

267

observa en el grfico 7, gracias a la tendencia lineal se logr establecer las

ecuaciones de comportamiento para cada estado de madurez, en los clones
sometidos almacenamiento.
Grfico 7. Variacin de la firmeza del clon lite 2, durante la conservacin en ambiente controlado

Daos visuales
Como en el almacenamiento al ambiente, se observa que en la medida que
aumenta el grado de madurez se incrementa el porcentaje de daos, sin embargo
se observa que los daos se reducen notablemente en el almacenamiento al
ambiente controlado, lo que hace que la fruta dure ms tiempo en buenas
condiciones, tambin en este almacenamiento, el tipo de dao con mayor
repercusin fue la deshidratacin.
Slidos solubles, pH y acidez
Los slidos solubles para el caso del almacenamiento al ambiente controlado, se
aprecia que existe el mismo comportamiento con respecto al ambiente natural, as
los rangos en que se presentan los valores de lo slidos solubles, son casi
similares, en ciertos perodos de almacenamiento, demostrando que las
condiciones de temperatura en los dos almacenamientos tienen poca influencia en
esta variable. Como se observa en el grfico 8, los slidos solubles ascienden y se
mantienen casi constantes durante algunos perodos, para luego declinar hasta el
final del almacenamiento como en el caso del clon 2 y el testigo.
Sin embargo en el clon lite y el testigo, los slidos siguen aumentando hasta el
final del almacenamiento, producto de la degradacin de carbohidratos de
cadenas largas como substancias pcticas y hemicelulosa, las cuales debilitan las
paredes celulares, que se traduce en el deterioro de la fruta. Los valores mximos
de slidos solubles, coinciden con el tiempo mximo que la fruta puede durar tanto
para el consumo en fresco como con fines agroindustriales, notndose que los
slidos solubles con madurez de 75% es mayor para la fruta con 50%.

268
Grfico 8. Evolucin de los slidos solubles de los clones lite y el testigo durante la conservacin
en ambiente controlado

La acidez de la fruta en los clones 2 y el testigo disminuyen, y se mantienen

constantes en ciertos perodos de almacenamiento para luego incrementar el
contenido de cido ctrico, esto es visible especialmente en la fruta con madurez
de 50%. Caso contrario sucede con las frutas del clon 5 y 8, en las cuales tienden
a aumentar durante todo el proceso, para desarrollar su sabor cido, caracterstico
de las naranjillas. Estas variaciones se relacionan con el contenido de slidos
solubles en la fruta, al mostrarse inversamente proporcional y con el registro de
daos visuales. Los comportamientos de la acidez para los clones almacenados
en los dos estados de madurez, en este almacenamiento se sealan en el grfico
9.
Grfico 9. Variacin de la acidez, de los clones lite y el testigo durante la conservacin en
ambiente controlado

Respecto al pH, al analizar lo valores de cada clon lite en los dos estados de
madurez, no se observa variacin significativa, ni un comportamiento definido, as
se observa un leve incremento o disminucin a medida que pasa el tiempo de
almacenamiento, sin embargo estos resultados se concatenan con el contenido de
cido ctrico en la pulpa, as si el pH disminuye, se concentra ms la acidez, o
viceversa, si el pH sube se presenta menos cantidad de cido ctrico en la pulpa.
Relacin de sabor y Vitamina C
La relacin de sabor o madurez, no es definida para cada clon, as el clon lite 2 y
el testigo, presenta un aumento de la relacin de sabor conforme transcurre el
tiempo, accin ms prolongada para este almacenamiento con respecto al
ambiente natural al observar los valores, mientras que los clones 5 y 8, en cambio
presenta diminucin, desde el inicio del almacenamiento, comportamiento que se

269

relaciona con el sabor cido de la fruta. La vitamina C, en los clones lite

estudiados en los dos estados de madurez, reporta tendencia equilibrada durante
el almacenamiento, como se observa en el grfico 10, sin embargo tambin se
observa aumento en algunos perodos de almacenamiento, debido a la
maduracin de la fruta, mientras que en otros clones como el testigo y el clon lite
5, en la madurez de 50 %, es visible la disminucin, debido a la degradacin del
cido ascrbico.
Grfico 10. Vitamina C, de los clones lite y el testigo durante la conservacin en ambiente
controlado

Color y pardeamiento de la pulpa: Respecto a la luminosidad de la pulpa, a

pesar de que se presenta un decrecimiento, se aprecia que es menor con respecto
al ambiente natural. En cuanto al parmetro a (rojo = a+, verde = a-), se observa
que en los perodos de almacenamiento intermedios, tiende a bajar, lo que
significa que el color verde disminuye, mientras que b (amarillo = b +, azul = b-),
aumenta, es decir que le color amarillo aumenta, este cambio es ms notable en la
conservacin al ambiente controlado que para el ambiente natural, y por lo tanto lo
es para el espacio de color determinado mediante el ngulo Hue, en donde este
es menor para el almacenamiento al ambiente natural y mayor en condiciones
controladas, sin embargo permanece en el espacio de color entre amarillo y verde.
Referente a la cromaticidad, se observa que es mayor para el almacenamiento al
ambiente natural, que en el controlado, resultado que coincide con la luminosidad,
ya que las pulpas ms opacas son ms intensas en color que las ms claras. El
pardeamiento de la pulpa, establecido a travs del ndice de oscurecimiento,
aumenta a medida que pasa el tiempo de almacenamiento, sin embargo se
observa que es mayor para el ambiente natural, lo cual demuestra que las
condiciones ambientales de 17 C y 59 % de humedad relativa influyen en el
pardeamiento de la pulpa.
Caracterizacin qumica y nutricional de los clones lite seleccionados y el
testigo.
Cuadro 9. Caracterizacin qumica y nutricional de tres clones lite seleccionados y el testigo, la
variedad iniap quitoense 2009.
ANLISIS
pH*
Ac. titulable (% c. ctrico)*
Slidos solubles (Brix)*
Hum edad (%)
Cenizas (%)

CLON
T2
3,32 0,12
2,40 0,25
9,11 1,22
89,87 0,53
7,55 0,04

CLON
T5
2,96 0,02
2,51 0,20
12,73 0,12
89,28 0,47
5,40 0,16

CLON
T8
2,93 0,05
2,62 0,08
12,60 0,72
89,43 0,30
5,15 0,01

Variedad INIAP
Quitoense-2009
2,93 0,05
2,62 0,08
12,60 0,72
90,46 0,08
6,20 0,03

270
Extracto etreo (%)
Protena (%)
Fibra (%)
Carbohidratos totales (%)
Azcares totales (%)
Azcares reductores (%)
Vitam ina C (m g/100g)*
Polifenoles totales (m g/g)
Carotenoides totales ( g/g)

Minerales
(ug/g)

1,10 0,01
10,15 0,19
11,23 0,01
69,98 0,21
26,22 0,16
14,51 0,05
15,33
13,41 0,38
36,44 0,32

0,49 0,05
8,25 0,06
6,78 0,02
79,09 0,14
39,93 0,26
11,84 0,03
17,33
11,84 0,03
17,55 0,31

0,73 0,04
8,51 0,08
5,17 0,01
80,45 0,05
26,52 0,36
16,19 0,06
16,67
16,19 0,06
10,33 0,13

1,11 0,01
6,66 0,04
4,86 0,03
81,18 0,06
48,39 0,81
25,17 0,01
53,33
8,45 0,06
13,27 0,14

Calcio
Magnesio
Fsforo

900
2000
800

700
1700
700

800
1500
800

500
1300
1000

Potasio

37700

26500

24600

32400

Sodio

500

400

200

500

Hierro
Zinc
Manganeso

25
13
4

6
12
4

5
12
4

11
16
3

Cobre

3
4
1
Base fresca, desviacin estndar, n = 3 repeticiones

En el cuadro 9, se sealan los resultados de la caracterizacin qumica y

nutricional de los clones lite seleccionados de naranjilla que fueron sometidos a
los dos tipos de almacenamiento. Los valores se presentan en base seca para
comparar los valores entre los cuatro clones lite, con excepcin de pH, la acidez
titulable y los slidos solubles.
De acuerdo al anlisis nutricional, se observa que la humedad entre los tres clones
lite y el testigo, no tienen mucha variacin ya que todos poseen valores muy
similares, sin embargo el valor ms alto lo posee la variedad INIAP Quitoense
2009.
Respecto a la protena los valores ms altos se registraron para os clones T2 y
testigo con valores de 10,15% y 6,66%, valores que tienden a ser mayores segn
los reportados por Galvis y Herrera en el 2003, en los cuales se reporta 0,6%.
El contenido de minerales fue mayor en el clon lite 2, excepto en el fsforo y
cobre. Cabe recalcar que el potasio, es el mineral ms representativo en todos los
cuatro clones elite analizados debido a que puede cubrir los requerimientos
diarios, ya que segn Fox 1989, reportado por Coello, 2008, los requerimientos
diarios de potasio en la dieta humana son de 2 000 a 6 000 mg.da -1.
De acuerdo al extracto etreo, se encontr que la variedad INIAP Quitoense 2009
y el clon lite 2, poseen el mayor contenido de grasa, con valores de 1,11% y
1,10% respectivamente, pese a que estos valores son bajos, esos resultan ser
mayores para los reportados por Corpoica en el 2002, en donde indican un valor
de 0,17%.
En el caso de los carotenoides totales, precursor de la vitamina A, se observa
notablemente que el clon lite 2, es superior con un valor de 36,44 g/g respecto a
los dems clones lite en estudio.

271

Tabla de color descriptiva

Las tablas de color son importantes para los productores, ya que a travs de ellas,
podrn conocer el ndice ptimo de cosecha, el tiempo de vida poscosecha y la
calidad de la fruta en cada estado de madurez, para los tres clones lite y el
testigo de naranjilla seleccionados.
Mediante la tabla de color se encontr un aumento de los slidos solubles, en
todos los clones lite seleccionados desde el grado 0, cuando la fruta se
encuentra madura fisiolgicamente, hasta el grado 4, en donde la fruta se
encuentra madura organolpticamente, as mismo se observa que la acidez,
expresada como porcentaje de cido ctrico, aumenta debido al desarrollo del
sabor cido, caracterstico de la naranjilla. Respecto al pH, se encontr que este
tambin disminuye conforme desarrolla la maduracin de la fruta.
A continuacin se presenta las tablas de color de los clones lite seleccionados y
el testigo, en donde se sealan los ndices de calidad ms relevantes como son:
los slidos solubles, acidez y pH, para cada grado de madurez, en donde se
detalla los cambios de color de la fruta al exterior exteriormente conforme se
incrementa la madurez.

272
TABLA DE COLOR DE NARANJILLA
Cruzamiento
Solanum quitoense variedad Baeza x (Solanum quitoense variedad dulce
x Solanum vestissimum)

DESCRIPCIN DE LA TABLA DE COLOR

La fruta es completa
GRADOS DE MADUREZ
0
verde oscura
PARMETROS
25% de color amarillo
0
1
2
3
4
1
naranja
Slidos solubles
50 % de color amarillo
9,73 10,20 13,00 13,08 13,77 2
(Brix)
naranja
75% de color amarillo
pH (adimensional)
3,54 3,36 3,27 3,17 2,99 3
naranja
-1
Acidez (g.100g a.
100% de color amarillo
2,41 2,53 2,57 2,60 2,66 4
ctrico)
naranja
TABLA DE COLOR DE NARANJILLA
Variedad INIAP Quitoense 2009 (Solanum quitoense Lam.)

1
2
3
4
DESCRIPCIN DE LA TABLA DE COLOR
La fruta es completa
GRADOS DE MADUREZ
0
verde oscura
PARMETROS
25% de color amarillo
0
1
2
3
4
1
naranja
Slidos solubles
50 % de color amarillo
7,87 7,93 10,22 10,65 10,85 2
(Brix)
naranja
75% de color amarillo
pH (adimensional)
3,72 3,64 3,08 3,02 2,72 3
naranja
-1
Acidez (g.100g a.
100% de color amarillo
1,75 1,84 2,40 2,51 2,56 4
ctrico)
naranja

2.2.12.5. Conclusiones
Se realiz el anlisis fsico-qumico de trece clones lite y el testigo, la variedad
INIAP Quitoense 2009, de donde se seleccion a los mejores clones lite de
naranjilla, a travs de caractersticas similares que present el testigo descritas
en el acpite de seleccin de la Fase I, resultando ser los clones T2, T5 y T8.

273

El comportamiento del clon lite T2, correspondiente al cruzamiento Solanum

quitoense x Solanum vestissimum en los estados de madurez de 50% y 75%,
alcanz condiciones ptimas de calidad hasta los 10 das y aceptables para el
procesamiento hasta los 15 das, durante el almacenamiento al ambiente
natural, mientras que para el almacenamiento bajo condiciones controladas,
hasta los 20 das. .
Bajo condiciones de ambiente natural, se encontr que el clon lite T5, que
corresponde al cruce Solanum quitoense variedad dulce x Solanum
hyporhodium, cosechado en 50% de madurez logra mantener apreciables
caractersticas de calidad hasta los 10 das de almacenamiento y aceptables
para procesamiento hasta los 20 das de almacenamiento, mientras que la
fruta cosechada con 75% de madurez hasta los 15 das de almacenamiento.
En cuanto al almacenamiento bajo condiciones controladas, tuvo una duracin
hasta los 20 das de almacenamiento.
El clon lite T8 correspondiente al clon lite Solanum quitoense variedad
Baeza x (Solanum quitoense variedad dulce x Solanum vestissimum),
cosechado en 50 y 75% de madurez presentaron caractersticas de calidad
hasta los 10 das de almacenamiento bajo condiciones del ambiente natural,
mientras que para el ambiente controlado hasta los 20 das de almacenada la
fruta.
El testigo durante el almacenamiento al ambiente, cosechado a 50% de
madurez, tuvo una duracin con caractersticas ptimas hasta los 15 das,
mientras que cosechada con 75% de madurez, mantuvo condiciones de
calidad hasta los 20 das. Para el almacenamiento al ambiente controlado,
present caractersticas de calidad hasta los 20 das en los dos estados de
madurez.
Se elabor la tabla de color con los contenidos de slidos solubles, acidez y
pH, con la descripcin de cada grado de madurez. Estas tablas son una
herramienta de trabajo para el productor ecuatoriano, con el fin de dar pautas
respecto a la calidad de la fruta en los diferentes estados de madurez, que le
servirn de ayuda para programar las actividades de cosecha y
comercializacin de la fruta.
Segn el anlisis nutricional, el clon lite 2, que corresponde al cruzamiento
Solanum quitoense x Solanum vestissimum en la madurez comestible,
present el mayor contenido de cenizas con 7,55%, extracto etreo 1,10 %,
protena 10,15 %, fibra 11,23 %, humedad 89,87 %, Ca 900 ug/g, Mg 2000
ug/g, P 800 ug/g, K 37700 ug/g, Na 500 ug/g, Mn 4 ug/g.
De acuerdo al estudio de la caracterizacin fsica, se tom en cuenta las
especificaciones de la fruta para la exportacin como el peso y las medidas del
dimetro, los clones que reunieron estas caractersticas fueron el T2, T5 y T8,
los cuales presentan caractersticas a las del testigo, variedad INIAP Quitoense
2009. Estos clones presentaron valores altos de peso, largo, dimetro, relacin
L/D apropiada, rendimiento en pulpa, por lo que se ubicaron en los primeros
grupos estadsticos en la prueba de Tukey. Referente a la firmeza y la
consistencia, los resultados sealan que tienen valores bajos de firmeza y
consistencia ms lquida en comparacin al testigo.

274

Respecto a la caracterizacin fsico-qumica los clones elites T2, T5 y T8,

presentaron valores ptimos de slidos solubles y acidez, datos comprobados
mediante la prueba de Tukey al 5%, al situarse en los primeros rangos
estadsticos, que se relaciona con los datos de la relacin de sabor.
Referente al color, los clones lites T2, T5 y T8, resultaron tener bajos
incrementos del ndice de oscurecimiento, as como tambin presentaron
condiciones adecuadas de luminosidad, espacio de color ( Hue) y
cromaticidad.
Acorde al anlisis sensorial, mediante la prueba de aceptacin proporcionada
por los catadores los clones lite T2, T5 y T8, coincidieron con las ms altas
puntuaciones para la prueba de aceptabilidad y mejores caractersticas en
cuanto a la calidad fsica y qumica.
Durante el almacenamiento al ambiente natural a 17 C y 59 % de humedad
relativa, la firmeza es inversamente proporcional con respecto a los estado de
madurez y al tiempo de almacenamiento, es decir baja la firmeza conforme
aumenta la madurez de la fruta y los das de almacenamiento. En los 10 das
de almacenamiento se registra que la firmeza disminuye a la mitad, el clon lite
T8, es el que result ser el ms firme luego del testigo en los estado de
madurez.
En los dos tipos de almacenamientos los slidos solubles aumentan con el
proceso de maduracin de los dos estados de madurez, mientras que la acidez
indica tendencia decreciente, proceso debido a la degradacin de los cidos
orgnicos; por lo que la curva de la relacin de sabor aumenta.
La prdida de peso es menor cuando se almacena en condiciones de
refrigeracin, esto es a 8 C y 90% de humedad relativa, permitiendo conservar
la calidad del fruto por un perodo mayor respecto al almacenamiento en
condiciones ambientales.
2.2.13. Evaluacin agronmica de materiales de lulo Solanum sp,
frutal de alto potencial para zonas tropicales 30.
Objetivo del Proyecto (1): Con la participacin de agricultores, empresas
comercializadoras y procesadoras seleccionar materiales lite de lulo y mora, con
criterios de adaptabilidad, resistencia a enfermedades, productividad y aceptacin
del mercado
Objetivo del proyecto (4): Evaluar el comportamiento, calidad y rentabilidad de
los clones lite seleccionados, bajo diferentes sistemas de produccin dirigida a
diferentes mercados

30

Muoz, L.A. Investigador CIAT, Programa de Frutas Tropicales.

275

2.2.13.1. Objetivos
Objetivo General
Identificar materiales aptos para mercado o para iniciar procesos de mejoramiento
a partir de la evaluacin de caracteres agronmicos y de calidad de fruta.
Objetivos Especficos
Realizar una evaluacin agronmica de materiales de lulo en dos
localidades con el fin de identificar genotipos y caracteres agronmicos de
inters para el mejoramiento gentico de este frutal.
Ajustar metodologas para orientar la seleccin y evaluacin de materiales
de lulo.
2.2.13.2. Marco Referencial
El cultivo de lulo Solanum quitoense es de ciclo corto, genera ingresos semanales,
factor que estabiliza la economa familiar. Es un frutal con mercados importantes
en Colombia y Ecuador, y de inters para mercados internacionales. En Colombia
es un factor esencial en la economa familiar campesina, constituye la principal
fuente de ingresos para cerca de 12.000 familias en Colombia y otras 19.000 en
Ecuador (Fontagro 2006). Este cultivo es generador de empleo y desarrollo
industrial para jugos y pulpas, pero es evidente el dficit en la oferta del producto.
La atencin del sector industrial est focalizada en el lulo la Selva nico cultivar
reconocido en el pas, por otro lado la produccin nacional para mercado fresco
est determinada por el lulo Castilla; este material tiene caractersticas
organolpticas muy apetecidas pero altamente variable en calidad, principalmente
debido a la falta de tecnologas como variedades y a un manejo agronmico
aceptable y sostenible.
Aunque se han realizado esfuerzos por colectar y caracterizar materiales no se ha
realizado una bsqueda de materiales con diversos intereses desde comerciales
hasta la identificacin de materiales con potencial para ser incluidos en programas
de mejoramiento. En sntesis, el mejoramiento gentico del lulo, buscando
resistencia a enfermedades, calidad de fruta y otros atributos agronmicos genera
una oportunidad de contribuir al desarrollo del cultivo de lulo en Colombia y en
otros pases productores (Estrada 1992). Este trabajo identific materiales
sobresalientes por caractersticas de inters comercial o de mejoramiento y
desarroll herramientas de evaluacin de los mismos, las cuales permiten acortar
la brecha tecnolgica.
2.2.13.3. Metodologa
El material vegetal utilizado correspondi a las 32 accesiones colectadas por
CIAT, con la participacin de productores, en los departamentos del Cauca, Valle
del Cauca, Caldas y Risaralda (tabla 1), 4 materiales del banco Nacional de

276

Semillas, 5 hbridos interespecficos en proceso de evaluacin por parte de

Corpoica (tabla 2) y como materiales comerciales de referencia, el hbrido La
Selva liberado por Corpoica y el material Larga Vida desarrollado por el seor
Marcelino Bolaos.
Tabla 1. Listado de materiales evaluados.
Cdigo

Productor

WM-E1
DP-E1
DP-E2
PH-E1
PH-SI
VM-E1
VM-E2
SS-E1
SS-E2

Wilson Moriones

JY-E1

Jos Lisandro Yonda

Lugar de origen

Tipo de material

Diomar Patio
Pedro Herrera

Pescador - Cauca
Castilla

Vitelio Menza
Saul Salazar

Orlando y Jos Valverde

OJV-E1
EC 28
EC 39
ER 10
ER 19
Material original de CEFA, siembra y seleccin
SEC 27
de individuos por Lentini Z, et al.
SEC 31
SER 15
SER 7
SER 9
YD - S1
Yolanda Diaz Baena
YD - E2
YD - E3

Tierradentro - Cauca

Desconocido (Corpoica
sugiere que pueden ser
Dapa - Valle del Cauca
segregantes
de
"la
Selva")

Tulu - Valle del Cauca

JS - E1
JS - E2

Jorge Solarte
Darien Valle del Cauca

JS - E3
LH-E1

Luis Henrriquez

FG-E1

Fersan Garca

AG - E1

Abelardo Gutierrez
Santa Rosa de Cabal Risaralda

AG - E2
OR -E1

Olga Rendn Grisales

OR -E2
120043
120044 Semilla Sexual del Banco Nacional de Semillas
en Corpoica
120052
120055
Jalisco
Hbridos Corpoica la Selva
La Selva

MB-E1

Castilla

Marcelino Bolaos

Valle del Cauca

Nario
Cauca
Huila
Corpoica
Ginebra - Valle del
Cauca

Castilla

Hibridos

Castilla

277
Tabla 2. Parentales de los clones derivados de hibridacin interespecfica, S. hirtum X S.
quitoense.
Genotipo

Padres
ILS 3260

PL 8
ILS 3223
ILS 3262
PL 11
ILS 3234
ILS 3222
PL 19
ILS 3234
ILS 3216
PL 24
ILS 3234
ILS 3260
PL 35
ILS 3223

Especie

Origen del Material

S quitoense

Aguas Claras Timba Cauca 3 08 76 42 1850 msnm

S hirtum

Rionegro Santander la Suiza.

S quitoense

Valle 63 Timbita Cauca 3 07 7639 2100 msnm

S hirtum

S quitoense

Aguas calientes, Santander. (hbrido espontneo con S.

quitoense )
Cauca Vereda Juntas, Popayn. Latitud 2,30 long 77,06 1860
msnm S. quitoense .
Aguas calientes, Santander. (hbrido espontneo con S.
quitoense )
San Antonio Sibundoy, Putumayo. Latitud 1,11 long 76,55
2110 msnm.
Aguas Calientes, Santander (hbrido espontneo con S.
quitoense )
Aguas Claras Timba, Cauca 1850 msnm S. Q

S hirtum

Rionegro Santander la Suiza.

S quitoense
S hirtum
S quitoense
S hirtum

Estos materiales fueron introducidos a condiciones in vitro y propagados siguiendo

el protocolo adaptado por (Lentini et al 2005). Estas plantas fueron establecidas en
dos parcelas para evaluacin, una en Cauca municipio de Popayn y otra en
Risaralda municipio de Santa Rosa de Cabal figura 1A, B y C. El CIAT codific los
materiales de acuerdo con el nombre del productor, la presencia de espinas o no y
un nmero si fueron una o ms selecciones por productor.
En el departamento del Cauca la parcela se estableci en el Parque Temtico
Industrial de la Universidad de Cauca, en la vereda La Rejoya", ubicada, a 7
kilmetros nor-occidente de la ciudad de Popayn con coordenadas geogrficas 2
29 55,6 Latitud Norte, 76 34 58,1 Longitud Oeste; a una altura de 1800 metros
sobre el nivel del mar, temperatura promedia de 18C y precipitacin promedio
anual de 1750mm, (Vivas y Morales, 2005). Se utiliz un diseo experimental de
bloques completos al azar con cuatro repeticiones (Figura 1).
En Risaralda la parcela se estableci en la granja La Mara, propiedad de la
Universidad de Santa Rosa de Cabal, localizada en la vereda el Manzanillo
municipio de Santa Rosa de Cabal. Las coordenadas geogrficas del rea de
estudio corresponden a: latitud N 4 53' 45,6 y longitud W 75 37' 59.3; pertenece
a la micro cuenca del ro San Eugenio. Las condiciones meteorolgicas de la zona
de estudio son: 1600 m.s.n.m, temperatura media de 19,5C, precipitacin de
2.308 mm/anuales, humedad relativa de 80,73 %, brillo solar de 3,85 horas luz da.
El diseo experimental fue de bloques completos al azar, con 4 repeticiones, la
unidad experimental estuvo compuesta por 5 plantas, cada bloque cont con un
rea de 974.6 m, las plantas se sembraron en tringulo con distancias de 3 m
entre plantas y 3 m entre surcos (Figura 2). En las dos localidades se realiz un

278

levantamiento topogrfico con curvas a nivel, informacin con la cual se

elaboraron planos de campo y se organizaron los bloques del diseo experimental.

Figura 1. Diseo de la parcela en Popayn.

Figura 2. Diseo de la parcela en Santa Rosa de Cabal.

Se evaluaron los materiales en cinco aspectos bsicos:

1.
2.
3.
4.

Evaluacin de crecimiento y fenologa

Evaluacin de rendimiento y calidad de fruto.
Evaluacin de incidencia de tres enfermedades.
Evaluacin participativa con productores sobre
agronmico.
5. Evaluacin de aceptacin por la industria.
6. Evaluacin de crecimiento y fenologa

el

comportamiento

279

Para la evaluacin de Incidencia de las principales enfermedades en las dos

localidades, se aplic un plan de manejo limpio del cultivo. Se registr
fotogrficamente la sintomatologa observada. Para una adecuada identificacin
de patgenos en campo, se realiz una comparacin con registros bibliogrficos
sobre sntomas, signos, y forma de distribucin en el cultivo, adems del
acompaamiento de patlogos expertos como Germn Llano del CIAT. Se calcul
el porcentaje de incidencia para Phytophthora, Cladosporium y Colletotrichum sp.
Evaluacin participativa con productores
Se adapt la metodologa de identificacin de criterios, calificaciones y razones 31,
para identificar las caractersticas observadas por los productores al momento de
seleccionar materiales en campo, cuantificar esta caracterstica y documentar la
razn por la cual es un carcter importante para ellos.
Se seleccionaron las cadenas de lulo en Beln de Umbra (Risaralda) (produccin
industrial) y Pitalito (Huila) (mercado fresco). (Tabla 3).
Eslabn de la cadena
Produccin
Servicios de apoyo

Oferentes de
tecnologa
Instituciones y
ONGs

Tabla 3. Eslabones y actores a consultar.

Actor
Lderes de Productores de la Asociacin,
Productores innovadores.
Asistentes tcnicos, Casas comerciales
proveedoras de insumos, Transportadores,
viveristas y Comercializadores
ICA, Sena, Universidad Santa Rosa de Cabal.
Representantes de la Alcalda, Centro Provincial
del Sur del Huila Agrosur. Pitalito Huila

Participantes
30
11

3
11

Para el anlisis se realiz una tabla de frecuencias y un anlisis de regresin

logstica, finalmente se realiz una clasificacin por los dos principales criterios de
seleccin.
Evaluacin de aceptacin por la industria.
Se realiz con las empresas: Productora de Jugos S.A. en Tulu Valle del Cauca y
Casa Luker en Manizales Caldas, y en sus laboratorios se evaluaron los
materiales bajo sus estndares de calidad y aceptacin de fruta (figura 3).

31

Metodologa CIAT (Hernndez 2009)

280

Figura 3. Encuentro con los actores de las cadenas para definicin de criterios de evaluacin.

2.2.13.4. Resultados y Discusin

Posterior a la propagacin in vitro y a la aclimatizacin realizada en CIAT, las
plantas fueron llevadas a las dos localidades, fueron mantenidas en vivero hasta el
momento de la siembra. En este periodo los materiales presentaron diferencias a
la presin por enfermedades, los clones ms afectados fueron: DP-E1, PH-S1,
WM-E1, SER-7, OJV-E1. Estos materiales fueron llevados nuevamente, para
establecer los ensayos en campo y lograr informacin sobre las caractersticas de
frutos y otros aspectos agronmicos.
En las dos localidades, se encontraron diferencias significativas para altura de
planta entre materiales, estas pueden estar causadas por variabilidad gentica,
efecto ambiental y la interaccin genotipo por ambiente Para cada localidad se
identificaron los materiales que presentaron mayor y menor crecimiento: FGE1 y
PHE1 en Santa Rosa, SEC31 y ORE1 en Popayn.
En las dos localidades los materiales 120053 y el JS-E3, presentaron porte alto,
DPE2, EC39, ER10, ER19, PHE1, PHS1, PL24 Y VME1 presentaron porte bajo.
Los materiales restantes presentaron un porte diferente. Es interesante notar que
los hbridos PL11 y 35 as como los materiales SEC y SER aparentemente
hbridos, presentan porte bajo en Santa Rosa y porte alto en Popayn.
Con relacin a la duracin de las etapas de desarrollo a inicio de floracin, cuajado
y cosecha, se obtuvo lo siguiente del promedio de materiales: En Popayn das a
floracin fue 90, a cuajado 164 y a cosecha 280 das, mientras que en Santa
Rosa das a floracin fue de 63, a Cuajado 139 e inicio de cosecha 239 das. Lo
cual pone en evidencia que los planes de manejo de enfermedades y de
fertilizacin deben ajustarse a los periodos de tiempo en cada localidad.
En las dos localidades se encontraron diferencias significativas entre materiales
para los das a cada fase de desarrollo. As en Santa Rosa, el material SER-9 que
aparentemente corresponde a un derivado de la selva (Corpoica), present el
menor tiempo a floracin con 31 das, mientras los materiales castilla ER-10 y VM-

281

E1 presentaron el mayor tiempo a inicio de floracin, con ms de 82 das. Los

hbridos PL11 y PL24 presentaron el menor tiempo para inicio de cosecha con
menos de 146 das, mientras que los materiales castilla PH-E1 y SS-E2 iniciaron
cosecha luego de los 318 das de siembra, 5.7 meses de diferencia.
La figura 4, presenta grupos de materiales con caractersticas de precocidad en
floracin y cosecha como los materiales SER9, SEC31 Y SSE2 entre otros, en
Popayn y materiales tardos para la misma localidad AGE1, ORE1, 120043, 44,
52 y 55. En Santa Rosa (figura 5) no se encontr correlacin entre das a floracin
y das a cosecha, sin embargo se identificaron materiales precoces como PL11 y
SEC27 y tardos como VME2 y ER10.

Figura 4. Clasificacin de materiales segn das a floracin y das a cosecha en Popayn

Figura 5. Clasificacin de materiales segn das a floracin y das a cosecha en Santa Rosa de
Cabal

282

En las dos localidades los materiales SER9 y SSE1 presentaron el menor tiempo
con menos de 53 das, mientras que el material AGE1 en Popayn tard cerca de
138 das. Los das a inicio de cosecha, vari desde 108 das hasta 244 en
Popayn y de 97 hasta 266 en Santa Rosa. Para esta caracterstica no se
observan grupos de materiales por tipo Castilla o hbridos.
El tamao y peso del fruto son las caractersticas ms relevantes para todos los
actores de la cadena del lulo y en general, el peso del fruto de los materiales
evaluados, est constituido en un 58% por pulpa y un 42% por cscara y semillas,
(Figura 6). El mejoramiento debe buscar el aumento en la relacin pulpa /
desecho, para que los materiales sean aceptados por los diferentes mercados.

Figura 6. Participacin general de los componentes del peso en un fruto de lulo.

Los materiales YD-E3 y JS-E1 presentaron el mayor peso promedio, con ms de

120 gr/fruto y 6.2 cm de dimetro, mientras los materiales: SER-7, PL-35, PL-8 y
PL-11, presentaron el menor peso promedio con menos de 25 gr/fruto y 4.0 cm de
dimetro.
Segn los productores slo los materiales que estn por encima de 100 gr/fruto
son aceptados por el mercado de consumo fresco, en nuestro caso siete
materiales cumplen esta condicin, incluido el material MGB1, que corresponde
con el material comercial Larga vida desarrollado por el seor Marcelino Bolaos.
Para la industria frutos con ms de 50 gr/fruto son aceptados. Del grupo de
materiales evaluados veinticinco cumplen con esta caracterstica, Sin embargo
deben cumplir con otras caractersticas de calidad.
Se encontr una relacin directa entre peso y tamao de fruta, R 2 0,94,
Igualmente existe una correlacin positiva del peso del fruto con cada uno de sus
componentes (peso de cascara, pulpa y semillas), con R2 superiores a 0.75. Los 4
materiales con mayor peso presentan en promedio un 18,5% de cscara y los
materiales PH-SI, SS-E2 y SER-7 presentan ms del 30% de cscara, resultando
en una caracterstica poco deseada para la industria pero muy interesante para los
comercializadores que buscan una mayor resistencia a manipulacin.

283

As que para la seleccin de materiales, que podran tener un mercado especfico,

por ejemplo se podra pensar entonces que los PL por tener resistencia a
enfermedades y buen porcentaje de pulpa seran de inters para la industria, pero
el color de la pulpa no es el adecuado, sera ms interesante mejorar el SER7 por
tamao de fruto, sabiendo es este material present una tolerancia media a las
enfermedades o sera un aspecto ms controlable, con manejo agronmico, que el
color de la pulpa o el tamao del fruto (Figura 7).

Corte trasversal de fruto SER7

Corte trasversal de fruto JSE1
Figura 7. Tamao de fruto y proporcin de pulpa - corte transversal de frutos.

Los hbridos PL-8, PL-11 Y PL35, presentaron el mayor rendimiento en kg/parcela,

los materiales que presentaron menor rendimiento fueron ORE1, JSE1 y el testigo
comercial MBG1. Es importante anotar que los materiales hbridos iniciaron
produccin dos a tres meses antes y permanecieron con una carga ptima hasta
despus de 18 meses de cosecha, (Figura 8).
Con el rendimiento de algunos hbridos de Corpoica y Materiales como el SEC31,
adems de su alto % de pulpa y caractersticas de tolerancia a enfermedades,
hacen de estos materiales muy interesantes para sistemas de produccin de fruta
para industria, debido a que estas caractersticas aumentaran la rentabilidad del
productor con un producto de bajo costo como la requiere la industria. Sera
necesario replantear los requerimientos de la industria en cuanto a tamao y
seguramente hacer ajustes en maquinaria para que sean capaces de procesar
esta fruta.

284

Figura 8. Rendimiento de materiales en Santa Rosa.

El pH de los materiales evaluados vari de 2.46 para el ORE2 a 3.58 para el PL24.
Los grados Brix variaron desde 5.6 para el VME2 a 12.9 para el PL11. Los
materiales hbridos PL mostraron los valores de oBrix ms altos, superiores a 10.7,
excepto el PL-8, junto con los materiales aparentemente hbridos SER-9, SEC-27
y SEC-31. Los materiales con ms bajo oBrix fueron: VM-E2 Y EC-39.
Los materiales con valores superiores a 9.0 oBrix y con color de pulpa verde,
seran aceptados por la industria en este caso el SEC31 y SER15 cumplen estos
requisitos, dentro de los materiales con color de pulpa Verde-Amarillo y oBrix
superiores a 9.0, se encuentra PHE1 y EC28 tipo Castilla y los SEC27 y SER9
aparentemente hbridos.
Los atributos deseables en el fruto, no estn estrictamente ligados a un solo
carcter, y se debe tener en cuenta la combinacin de los mismos para lograr
aceptacin en diferentes mercados.
Incidencia de las principales enfermedades
En Popayn por las condiciones climticas y el manejo adoptado en el primer lote,
se observ una incidencia del 70% de Phytohpthora (figura 9 y 10), en los
primeros meses del cultivo, mientras que en Santa Rosa slo apareci en los
meses marzo y abril en el material PL11 y en mayo para los materiales DP-E2,
SER-9 y PL-8.
En Popayn la enfermedad se present de forma general al tener 19 oC y 75%
HR. En Santa Rosa la incidencia de este patgeno se present cuando se dio alta
precipitacin luego de un periodo seco. En Santa Rosa se pas de 200 a 400 mm
de lluvia en los meses que se present la enfermedad.

285

Figura 9. Sntomas de Phytopthora en tallo

Figura 10. Cicatrizacin con pasta de

cobre.

En Popayn, sobre el lote que present alta incidencia de gota, se pudo evaluar el
grado de severidad sobre diferentes tejidos de la planta, siendo los tallos
principales, hojas y frutos los ms afectados (Figura 11). En Popayn una vez
realizados los correctivos al plan de manejo, aplicando un mtodo temprano de
monitoreo de la enfermedad y aplicando a tiempo prcticas preventivas, esta
enfermedad dej de ser limitante en esta localidad. Agricultores expertos,
comentan que esta enfermedad es controlable siempre que se conozcan los
fenmenos climticos que la pueden desencadenar, los sntomas inciales y las
prcticas preventivas adecuadas.

Figura 11. Severidad evaluada sobre diferentes tejidos en Popayn.

Se encontraron diferencias significativas entre materiales, para la incidencia de

Cladosporium. En general, los hbridos PL fueron los materiales con menor
incidencia durante toda la evaluacin, en las dos localidades con menos del 25%,
valor que est por debajo del umbral de dao econmico (Zuleta, 2006). Los
materiales que presentaron una mayor incidencia fueron diferentes para las dos
localidades: OR-E1 y 2, 120043 y 55 y FGE1 y MB-G1 en Santa Rosa con 100% y
PH-E1, SEC-31, SER-15 y SS-E1 en Popayn con menos del 70% (Figura 12).

286

Figura 12. Incidencia de Cladosporium sp., en las dos localidades.

Con relacin a Antracnosis (Colletotrichum sp), se observ una clara

diferenciacin en materiales con alta incidencia en hojas, tallos y frutos, mientras
otros slo presentan la enfermedad en tallos y hojas. A la derecha en la figura 13,
se observan seis materiales que no presentaron esta enfermedad durante todo el
tiempo ni en ninguna de las partes evaluadas, resulta interesante que entre estos
materiales encontremos tres hbridos (PL 11,19 y 24) y tres materiales tipo castilla
(JYE1, SSE2 y JSE2).

Figura 13, Incidencia de Colletotrichum sp en frutos, tallos y hojas.

Evaluacin participativa de materiales en campo

Se identific los criterios de seleccin, de materiales de lulo, para los diferentes
actores de la cadena (Tablas 4 y 5). La metodologa aumenta las probabilidades
de adopcin de los materiales ya que est enfocada a suplir las necesidades
puntuales de todos los beneficiarios a lo largo de la cadena (Figuras 14 y 15).
Uno de los aspectos clave en el proceso de seleccin de materiales despus que
se ha levantado la informacin de los actores de la cadena, es el acceso a la

287

informacin de determinados caracteres en los bancos de germoplasma, para los

materiales all conservados. Si no se cuenta con esta informacin, el banco no
estar cumpliendo su funcin de servir de fuente de material para fines
comerciales o de procesos de mejoramiento con una orientacin al mercado.
Con base en encuestas abiertas y el nmero de veces que los criterios fueron
mencionados, se obtuvo un listado frecuencias de los criterios, la cual sirve de
derrotero para procesos de mejoramiento y seleccin, (Figura 16). Con esta
informacin se podrn elaborar libros de campo para la evaluacin posterior de
materiales de lulo en procesos de evaluacin participativa.
Fue claro que los productores tienen muchos criterios > 30 pero aceptan que los
materiales no cumplan con todos ellos, por su parte los comercializadores y la
industria no tienen ms de 5 criterios, pero se deben cumplir todos para aceptar el
material.

Figura 14. Mtodo de lluvia de

ideas para la obtencin de
criterios.

Figura 15. Descripcin del formato de evaluacin en

campo de materiales al grupo de productores

288
CRITERIO
NMERO
%
Susceptible a plagas y enf
62
16.4%
Tamao de fruto
57
15.0%
Arquitectura de planta
46
12.1%
Carga
31
8.2%
Porte de planta
27
7.1%
Cuajamiento
23
6.1%
Sabor
20
5.3%
Grosor de tallo
20
5.3%
Espinas en tallo
12
3.2%
Area foliar
11
2.9%
Color de fruto
10
2.6%
Desarrollo planta
6
1.6%
Color de pulpa
6
1.6%
Aroma
6
1.6%
Pistilo
5
1.3%
Cantidad de semilla
5
1.3%
Floracin
4
1.1%
Dulzura
4
1.1%
Tricomas en fruto
3
0.8%
Ramas productivas
3
0.8%
Vigor
2
0.5%
Rajamiento de fruto
2
0.5%
Numero de ramas
2
0.5%
Espesor de cascara
2
0.5%
Caida de fruto
2
0.5%
Pedunculo
1
0.3%
Nmero de ramas
1
0.3%
Numero de chupones
1
0.3%
Largo de entrenudos
1
0.3%
Desprendimiento de tricomas
1
0.3%
Color de hojas
1
0.3%
Caida de hojas
1
0.3%
Altura de planta
1
0.3%
Gran Total
379 100.0%

Figura 16. Listado de criterios mencionados por productores

Se pidi a 16 productores que realizaran un orden de preferencia para diez de los

criterios identificados, con el fin de confirmar cuales son los ms determinantes a
la hora de seleccionar materiales. Con base en un anlisis de regresin logstica
(Hernndez 2009), se identific que los criterios con ms probabilidad de quedar
en los primeros lugares del ordenamiento son: Tamao del fruto, resistente a
machorreo, altura de la mesa y cuajamiento, pero slo el ltimo es confirmado
gracias al estadstico de prueba Chi cuadrado (Figura 17).
Este resultado verifica las frecuencias en cuanto al tamao de fruto, arquitectura
de planta y de alguna manera la resistencia a enfermedades, que en este caso se
hizo nfasis en machorreo por presentar alta incidencia en la poca de la
evaluacin; en este ejercicio los productores prefirieron dejar por fuera la
caracterstica de resistencia a enfermedades pues consideraron que es algo que
pueden corregir con manejo pero las otras caractersticas no, se acept para fines
del ejercicio a pesar de tener claro que el carcter de tolerancia o resistencia a
enfermedades podra encontrarse definido genticamente.

289

Creterio

Parmetro estimado
b (intercepto)
Flores pistilo largo
-0.035714286
Cuajamiento
0.212053571
Grosor de tallo
-0.357142857
Ramas productivas
-0.151785714
Tamao de fruto
0.236607143
Tolerante a Machoreo
0.220982143
Espinas en planta
-0.256696429
Altura de la mesa
0.120535714

Error estndar
Sb
0.0549
0.0279
0.1235
0.0903
0.1244
0.0236
0.2238
0.0655

Wald
Chi-Square
0.6508
7.5872
2.8924
1.6813
1.9019
9.3779
1.1469
1.8390

Chi
Square
0.4198
0.0059
0.0890
0.1948
0.1679
0.0022
0.2842
0.1751

La significancia de las diferencias estadsticas

est basada en una aceptacin hasta del 15%
Intercepto negativo
No difiere
Intercepto positivo
** Difiere estadsticamente
Intercepto negativo
** Difiere estadsticamente
Intercepto negativo
No difiere
Intercepto positivo
No difiere
Intercepto positivo
** Difiere estadsticamente
Intercepto negativo
No difiere
Intercepto positivo
No difiere

Figura 17. Regresin logstica para diez criterios ordenados por productores.

Una pendiente alta con un intercepto positivo indica un mayor grado de aceptacin
del criterio, en los primeros puestos del ordenamiento, pero si es el intercepto es
negativo indica un rechazo en los primeros puestos, el estadstico Chi cuadrado
nos indica la certeza de la aceptacin o rechazo de los criterios en las primeras
posiciones. Diferentes grupos de productores evaluaron los materiales en campo
usando algunos de los criterios definidos: susceptibilidad a plagas y
enfermedades, tamao de fruto, arquitectura de planta, caractersticas de fruta,
produccin, cuajamiento y floracin. Usando estos criterios, cada material fue
clasificado como Bueno, Regular o Malo. No todos los materiales fueron
calificados para todos los criterios. Es necesario tener en cuenta que para los
productores de esta zona el mercado es fruta para industria y as lo calificaron, sin
embargo algunos comentaron sobre materiales aptos para mercado fresco (Tabla
6).

Flores pistilo largo

290

Tabla 6. Materiales y caractersticas calificados como bueno por productores.

Cdigo
Criterio
Calificacin
Razn
Material
(Bueno)
EC-39
Tamao de fruta
grande >4,0 cm y/o
Pocos frutos conforman un kg,
90
gr.
asegurando un buen % de
ER-19
cuajamiento se obtiene una alta
WM-E1
produccin.
SEC-31
Caractersticas de
Fruto muy aromtico y
Tendra buena aceptacin por la
fruta:
de buen sabor.
industria
Cscara delgada y con
poca semilla
WM-E1
Arquitectura de
Formacin adecuada,
Facilita las labores y resiste a
planta.
tallo grueso
rajamiento

Por el contrario materiales que definitivamente no cumplen los criterios de los

productores se presentan en la tabla 7
Tabla 7. Materiales y caractersticas calificados como malo por productores.
Cdigo
Caracterstica calificada
Calificacin
Razn
Material
como Malo
(malo)
SER-15
Tamao de fruta
Pequeo < 3.0 cm,
No es aceptado por la
industria.
SER-7
ER-10
Arquitectura de planta
Pocas ramas
Dificulta las labores
productivas, con tuna,
culturales.
mala formacin
SS-E2
Resistencia a plagas y
Susceptible a caros y
Incrementa costos de
enfermedades
antracnosis
produccin
VM-E2

En general los materiales evaluados fueron calificados como buenos por el

tamao de fruto y como malos por si no poseen resistencia a enfermedades y
plagas. Para los restantes criterios los grupos presentaron diferencia de opinin.
Se correlacionaron estos dos criterios tamao de fruto y resistencia a plagas y
enfermedades, por los mismos grupos de bueno, regular y malos, y se encontr
que los materiales ER19 y SEC31 se encuentran en el cuadrante Bueno x Bueno
y que los materiales PL8, PL19, PL35 en el cuadrante Bueno X Regular, siendo
estos cinco materiales los ms interesantes para los productores. Los materiales
SER7 y SER15 fueron calificados como malos para las mismas caractersticas,
(Figura 18).
Lamentablemente esta evaluacin se realiz para el lote 1 de Santa Rosa de
Cabal, 24 materiales y no sobre todos, pero se cuenta con la metodologa para ser
aplicada a otros materiales y en otras localidades.

291

Figura 18. Correlacin entre tamao de fruto y resistencia a enfermedades en la evaluacin

participativa.

Aceptacin de materiales por parte de la industria

Luego de los anlisis se obtuvo una descripcin para cada material por parte de
Sandra Garca, analista de calidad de fruta, de la empresa Productora de Jugos;
estas observaciones son tenidas en cuenta para la compra de fruta por parte de la
empresa (Tabla 8). El material PH-S1, fue el nico que pas los estndares de la
empresa. Posteriormente para otros materiales como el PL8 y SEC-31 se
realizaron anlisis por parte de la industria Casa Luker, expresando que podran
tener un gran impacto como mezcla ya que el primero aporta grados Brix y el
segundo Color de pulpa verde esmeralda (comunicacin personal Mauricio
Salazar).

292
Tabla 8. Resultados de anlisis de materiales en Productora de Jugos S.A.
DP - E1

JY - E1

PH - S1

Problema de antracnosis, bajo contenido de semilla, sabor no caracterstico de la fruta. Cumple

parmetro fisicoqumico como la variedad utilizada por PROJUGOS, pero no sensorial
Presenta caractersticas no propias del lulo industrial que procesa PROJUGOS
Cumple parmetro de brix pero no la acidez , no la parte sensorial de la variedad utilizada por
PROJUGOS.
Semilla grande
Cumple parmetro fisicoqumico como la variedad utilizada por PROJUGOS, sensorialmente similar al
lulo Selva

PL 11

Fruta y semilla pequeas

Cumple parmetro fisicoqumico como la variedad utilizada por PROJUGOS, pero no sensorial

PL 19

Alta presencia de pelusa, sabor cido muy astringente.

Cumple parmetro fisicoqumico como la variedad utilizada por PROJUGOS, pero no sensorial

PL 24

Consistencia ideal para pelado

Cumple parmetro de brix pero no la acidez , no la parte sensorial de la variedad utilizada por
PROJUGOS.

PL 35

Menor presencia de pelusa, cscara de color amarillo naranja uniforme, cscara muy aferrada a la
pulpa. Mucho desprendimiento de semilla. Una unidad con antracnosis, otra sobremadura. Alto
contenido de semilla. Cumple parmetro fisicoqumico como la variedad utilizada por PROJUGOS,
pero no sensorial

PL 8

Cscara muy aferrada a la pulpa, color amarillo naranja, semilla grande, no caracterstico pero
agradable.
Cumple parmetro fisicoqumico como la variedad utilizada por PROJUGOS, pero no sensorial

SEC 27

Unidad con pasador, indicios de fermentacin, sabor qumico residual, no se realiza rendimiento.
Cumple parmetro fisicoqumico como la variedad utilizada por PROJUGOS, pero no sensorial.

SER 9

Cscara ms suelta a la pulpa color amarillo naranja

Cumple parmetro fisicoqumico como la variedad utilizada por PROJUGOS, pero no sensorial

SS - E1

Problema de antracnosis, bajo contenido de semilla

Cumple parmetro de brix pero no la acidez , no la parte sensorial de la variedad utilizada por
PROJUGOS.

VM - E1

Semilla grande
Cumple parmetro fisicoqumico como la variedad utilizada por PROJUGOS, pero no sensorial

WM - E1

Presencia de antracnosis, sabor astringente. Cumple parmetro fisicoqumico como la variedad

utilizada por PROJUGOS, pero no sensorial

2.2.13.5. Conclusiones
Se identificaron materiales que cuentan con caractersticas de inters
superiores a las referencias comerciales, para mejoramiento y produccin
para mercados de fruta fresca y procesados.
Se observaron diferencias entre materiales frente a caractersticas
especficas, de resistencia a enfermedades, produccin o calidad de fruta.
Tres clones (PL9, PL24 y PL11) mostraron resistencia alta tanto a
Colletotrichum spp., como a Phytophthora infestans.
Con la informacin colectada se determin, que el ciclo productivo del lulo
en las dos condiciones est entre los 16 a 20 meses. Existen materiales
como los PL que en condiciones de Santa Rosa siguen en un buen nivel de
produccin luego de los 20 meses de siembra.

293

Es posible encontrar fuentes para mejoramiento a partir de la diversidad de

materiales existente en campo.
La metodologa desarrollada y las caractersticas que mostraron diferencias
son una herramienta clave para el futuro proceso de mejoramiento.
2.2.13.6. Recomendaciones
Con base en los trabajos realizados se logr ajustar metodologas para posteriores
evaluaciones de materiales en campo, en aspectos como: desarrollo de planta,
arquitectura, fenologa y tiempo a etapas crticas, as como aspectos de
rendimiento y calidad, definiendo variables crticas y de inters para los diferentes
actores.
Parte de las metodologas son los formatos para toma de informacin cuantitativa
y cualitativa proveniente de las evaluaciones participativas, procedimientos de
anlisis de informacin e identificacin de materiales superiores y de inters.
Como se mencion en varios apartes son muchos los criterios de seleccin y su
importancia depender de la ptica de cada actor en la cadena, quien busca
resolver sus necesidades sentidas inmediatas, sin tener muchas veces en cuenta
las necesidades de los otros eslabones. Es menester de los nuevos investigadores
y mejoradores conciliar todos los puntos de vista y ofrecer soluciones acordes a
todos ellos y con una respuesta clara al mercado.
Con esta informacin y con los resultados de las evaluaciones y se conformaron
tres grupos de materiales que presentan caractersticas de inters, en varios
casos tenemos caractersticas que podran mostrar avance de forma conjunta y
otras que claramente son opuestas, como la resistencia a enfermedades y las
caractersticas de calidad del fruto.
2.2.13.7. Bibliografa
lvarez, E., Meja de los ros, JF; Huertas, CA; Varn De Agudelo, F. 2003. Deteccin y
caracterizacin molecular de un fitoplasma, asociado con el "machorreo" del lulo (Solanum
quitoense Lam.) en Colombia. Fitopatologa Colombiana. 2003. 27(2):71-76.
Bermeo, A. 2005. Caracterizacin de la variabilidad morfolgica y algunos atributos qumicos de los
frutos en una coleccin de lulo (Solanum quitoense Lam) y especies relacionadas de la Seccin
Lasiocarpa. Tesis de Grado Universidad Nacional de Colombia, Medelln. En edicin.
Bohs, L. 2004. A chloroplast ADN phylogeny of Solanum Section Lasiocarpa. Systematic Botany.
29(1):177-187.
Gordillo, O.A. Y J.A. Rengifo. 2003 Caracterizacin fenotpica de cultivares de lulo. Tesis Ingeniero
Agrnomo. Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad Nacional de Colombia, Palmira. 127
p.
Heiser, C.B.; Anderson, G. 1999. New Solanums. In: Perspectives on New Crops and New Uses.
(Janick, J.; edit). ASHS Press. Alexandria, Virginia, USA. P. 379-384.

294
Hernndez L.A. 2009, curso sobre evaluacin participativa de tecnologa (EPT) con productores,
CIAT.
Whalen, M.D.; Costich, D.; Heiser, C.B. 1981. Taxonomy of section Lasiocarpa. Gentes Herbarium.
12:41-129.
Yuri J.A., Lepe, V. y Vsquez J.L., 2008, Intensificacin de la carga vs calidad de fruta, Pomaceas,
vol 8 no.4.

2.2.14. Metodologa in vitro para la evaluacin de germoplasma de lulo

Solanum spp. bajo la presin de toxinas de Colletotrichum
acutatum32
Objetivo Del Proyecto (2): Caracterizar las colecciones de germoplasma, por
variabilidad gentica y resistencia a plagas y enfermedades de mayor importancia.
2.2.14.1. Objetivo
Desarrollar una metodologa que permita la evaluacin de germoplasma de lulo
para buscar tolerancia a Colletotrichum spp
2.2.14.2. Marco Referencial
El Lulo Solanum quitoense Lam. es una especie vegetal que en los ltimos aos
ha cobrado importancia y es utilizado tanto para consumo directo como materia
prima a nivel agroindustrial para la elaboracin de mermeladas, dulces y bebidas.
Actualmente este cultivo ha aumentado su rea de produccin en Colombia
(FNFH et al. 2006), en esta medida tambin se ha elevado el uso de insumos
agroqumicos que no solo incrementan los costos de produccin sino que residuos
de este tipo tienen un efecto deletreo sobre la salud humana y el ambiente; este
consumo de agroqumicos se hace para contrarrestar los efectos que causan
ciertas enfermedades y plagas al cultivo. En esta medida los mejoradores han
buscado en especies cercanas la posibilidad de encontrar genes de resistencia a
estos problemas fitosanitarios y tambin con ayuda de la biotecnologa se
proponen nuevas herramientas que pueden representar un gran avance en la
seleccin de materiales tolerantes que permitan al productor hacer un uso ms
eficiente de los recursos y garantizar la sostenibilidad en el tiempo de la
produccin de lulo.
La enfermedad producida por este hongo Colletotrichum acutatum, conocida como
antracnosis la cual su manejo representa entre el 5% y 16% de los costos de
produccin, est presente en las zonas productoras de Lulo de los departamentos
de Caldas, Cauca, Antioquia, Boyac entre otros, aunque con menos severidad
que la Gota. La antracnosis representa un riesgo creciente y puede llegar a
ocasionar grandes prdidas, tanto a nivel de cultivo como de poscosecha
(Tamayo, 2002). Por lo tanto, es necesaria la identificacin de fuentes de
resistencia en germoplasma que ofrezcan una alternativa de bajo costo para
minimizar las prdidas causadas por esta enfermedad
32

Pedro Pablo Parra Giraldo, Alonso Gonzlez y Rodrigo Hoyos Snchez.

295

2.2.14.3. Metodologa
Efecto del filtrado crudo de Colletotrichum acutatum sobre hojas de vitro
plantas
Para determinar los sntomas causados sobre el tejido foliar y la termo estabilidad
del filtrado crudo obtenido de la incubacin en medio lquido Murashige and Skoog
durante una semana del aislamiento LM-41C, ste se autoclav por 20 minutos,
120 C y 20 psi de presin. A cada hoja de vitro plantas del clon EC-28 se le caus
una herida de 1 mm de dimetro y se adicionaron 10 micro litros de filtrado crudo.
Los tratamientos consistieron en la adicin de filtrado crudo autoclavado y no
autoclavado y los controles en la adicin de agua destilada estril y medio de
cultivo sin inocular, posteriormente el tejido foliar se dispuso en cmara hmeda
en cajas petri y fueron selladas con pelcula plstica vinilpel y dispuestas en el
cuarto de crecimiento, el comportamiento de tejido foliar fue reportado 0, 24, 48
horas y 10 das despus de la adicin del filtrado crudo.
Efecto del filtrado crudo sobre vitro plantas desarrolladas de tres materiales
de lulo con diferentes grados de tolerancia a la antracnosis.
Se sembraron pices de 1,5 cm de longitud de los materiales EC-39, EC-28 y PL19, individualmente en frascos de 135 c.c., con 20 ml de medio de cultivo de lulo.
Los frascos se mantuvieron en cuarto de crecimiento a 282oC, con un fotoperiodo
12/12-h (da/noche), durante cuatro semanas, pasado este tiempo se adicion
directamente sobre la superficie del medio de cultivo 1 ml de filtrado crudo
autoclavado y no autoclavado obtenido a partir del aislamiento LM-41C incubado
una semana. Los controles consistieron en plantas que continuaron su desarrollo
normal durante el ensayo en medio de cultivo A Lulo. Cuatro semanas despus de
la adicin de filtrados crudos se realiz la evaluacin. Fueron evaluadas tres
plantas por tratamiento.
Materiales de lulo PL-24, PL-19, PL-11, EC-28 y EC-39 sembrados en medio
de cultivo con adicin de 3% de filtrado crudo de un aislamiento de alta
patogenicidad de Colletotrichum acutatum
Se obtuvo por medio de la incubacin en medio lquido Murashige and Skoog
durante una semana de un aislamiento de alta patogenicidad para S. quitoense
filtrado crudo estril donde estn contenidas las toxinas del hongo. Se prepararon
medios de cultivo para lulo con la adicin del 3% de filtrado crudo. Se sembraron
en este medio, pices de 1,5 cm de longitud de cinco materiales los cuales fueron
evaluados cuatro semanas despus de siembra a los cuales se les evalu,
numero de hojas, rea foliar y desarrollo de races. El anlisis estadstico
correspondi a un diseo completamente al azar con arreglo factorial.

296

2.2.14.4. Resultados y Discusin

Efecto del filtrado crudo de Colletotrichum acutatum sobre hojas de vitro
plantas
Las hojas de vitro plantas del clon EC-28 presentaron sntomas de necrosis 24
horas despus de la adicin del filtrado crudo autoclavado y no autoclavado, las
hojas de ambos tratamientos presentaron manchas, puntos necrticos y halo
clortico en la zona adyacente a la herida y en el rea por donde se esparci el
filtrado crudo. Los tratamientos control que correspondieron a la adicin de agua
doblemente deionizada estril y medio de cultivo MS (Murashige and Skoog) sin
inocular no presentaron sntomas similares a los anteriormente mencionados, se
present una oxidacin en las clulas adyacentes a la herida por motivo de la
exposicin de las clulas al ambiente. Se observ que las hojas de vitro plantas
del clon EC-28 presentaron sntomas similares cuando se les adicion filtrado
crudo de una semana de incubacin del aislamiento LM-41C autoclavado y no
autoclavado. Imagen 1. Estos resultados concuerdan con los obtenidos por
Jayashinge (2000) reporta que despus de someter a una temperatura de 100 C
la actividad el filtrado crudo no fue afectada, cuando se adicion a hojas de Hevea
brasilensis y Polyalthia sp. Pero la esterilizacin a 15 libras de presin por 15
minutos redujo levemente la toxicidad de las toxinas aunque no las destruy; por
tanto las toxinas de C. acutatum pueden ser consideradas termoestables. Sin
embargo Sharma et al. 1969 citados por Jayashinge, 2000 reportaron que los
filtrados crudos de C. gloesporioides agente causal de la muerte descendente en
ctricos es termolbil sugiriendo que los agentes fitotxicos que esta especie
produce son diferentes a los reportados para la especie C. acutatum.

297

Imagen 1. Ensayo de termo estabilidad del filtrado crudo desde el momento de adicin de toxinas
de Colletrotrichum acutatum contenidas en filtrado crudo de una semana de incubacin del
aislamiento LM-41C de alta patogenicidad A. Control agua B. Control Mursashige and Skoog sin
inocular C. Adicin de filtrado crudo autoclavado D. Adicin de filtrado crudo no autoclavado.

Efecto del filtrado crudo sobre vitro plantas desarrolladas de tres materiales
de lulo con diferentes grados de tolerancia a la antracnosis.
Cuatro semanas despus de la adicin del filtrado crudo en los materiales castilla
EC-28 y EC-39 se present una inhibicin en el crecimiento, clorosis y necrosis en
las hojas ms jvenes y en el meristemo apical, necrosis, disminucin del

298

crecimiento y cantidad de las races, el material PL-19 considerado tolerante no

present este tipo de sntomas a nivel foliar aunque se present necrosis en las
races en menor proporcin, la cantidad y longitud de estas disminuy respecto al
control. Imagen 2. Las vitro plantas a las cuales no se les adicion filtrado crudo,
no presentaron ninguno de los sntomas anteriormente descritos. El
comportamiento de los materiales segn esta metodologa de adicin de los
filtrados crudos indic que el hbrido interespecifico PL-19 considerado como
tolerante present un mejor desarrollo que los materiales castilla EC-39 y EC-28
considerados susceptibles.

Imagen 2: Adicin de filtrado crudo no autoclavado(izquierda) y no autoclavado (derecha) de una

semana de incubacin del aislamiento de alta patogenicidad LM-41C a vitro plantas de cuatro
semanas de desarrollo de los materiales A. PL-19, B. EC-28 y C. EC-39.

En las vitro plantas sometidas a filtrado crudo autoclavado se present este mismo
comportamiento, donde los materiales castillas presentaron una mayor afectacin
por parte de las toxinas contenidas en el filtrado crudo en comparacin con el
hbrido interespecfico PL-19 donde no fueron visibles a nivel foliar estos sntomas.
Imagen 2, Estos resultados soportan ensayos anteriores presentados en este
trabajo donde se sugiere la termo estabilidad de las toxinas de Colletotrichum
acutatum del aislamiento LM-41C y concuerdan con los resultados obtenidos por
Jayashinge, 2000. Estas condiciones de esterilizacin fueron similares a las que
fue sometido el filtrado crudo para el presente ensayo 105C, 20 minutos y 20 lbs.
de presin, bajo estas condiciones los filtrados crudos no disminuyeron su
actividad toxica sobre los materiales de lulo.
Materiales de lulo PL-24, PL-19, PL-11, EC-28 y EC-39 sembrados en medio
de cultivo con adicin de 3% de filtrado crudo de una cepa de alta
patogenicidad de Colletotrichum acutatum
Se encontraron diferencias significativas entre los materiales de lulo evaluados
para las variables Numero de hojas, rea foliar y peso seco de races, los pices
sembrados en medio de cultivo sin la adicin de filtrado crudo, tratamientos control
fueron estadsticamente diferentes a los pices sembrados en medio de cultivo
con la adicin del 3% de filtrado crudo del aislamiento LM-41C de alta
patogenicidad.
Los resultados muestran que los materiales hbridos PL-24, PL-19. PL-11
considerados como tolerantes presentan porcentajes de inhibicin menores que
los observados en los materiales castilla EC-28 y EC-39 en cuanto al desarrollo de

299

rea foliar, mientras que en el desarrollo de races no se evidencia este mismo

comportamiento, siendo el rea foliar quien mejor explica la capacidad de los
pices de desarrollarse en presencia de toxinas segn su grado de tolerancia.
60

50

50
40

% Inhibicion

% Inhibicion

40
30

20

30

20

10

10

0
FC PL-24

FC PL-19

FC PL-11

FC EC-28

FC EC-39

FC PL-24

FC PL-19

FC PL-11

FC EC-28

FC EC-39

Figura 1: Porcentaje de inhibicin del desarrollo de vitro plantas de los clones PL-24, PL-19, Pl-11,
EC-28 y EC-39 sembrados en medio de cultivo A con dilucin 3% e incubado durante una semana
en medio lquido del aislamiento LM-41C de Colletotrichum acutatum A. Porcentaje de inhibicin
del desarrollo de tejido foliar B. Porcentaje de inhibicin del desarrollo de races.

Los porcentajes de inhibicin observados para el material PL-24 fueron 4% y 20,4

%, el PL-19 present una inhibicin de 23,4% y 33,8%, PL-11 de 18,8% y 33,4%,
mientras que los materiales castilla EC-28 y EC-39 presentaron una inhibicin de
46,4% y 54,8% y 42% y 37,4% en las variables rea foliar y peso seco de races
respectivamente. Como se puede observar en la figura 1.
2.2.14.5. Conclusiones

El protocolo establecido permite obtener filtrados crudos estriles que

inducen sntomas sobre hojas y pices desarrollados in vitro para la
evaluacin de germoplasma de lulo con posible tolerancia a Antracnosis.
La adicin de filtrados crudos sobre tejido foliar y medio de cultivo a plantas
desarrolladas inducen sntomas visibles pero difcilmente cuantificables El
sub cultivo de pices en medio A, con diluciones de filtrado crudo, permiti
cuantificar la disminucin en el desarrollo de los explantes.
Los materiales hbridos interespecificos presentan menor porcentaje de
inhibicin cuando son sembrados en medio de cultivo con una dilucin de
3% de filtrado crudo de un aislamiento de alta patogenicidad para S.
quitoense
Los resultados obtenidos en esta investigacin concuerdan con los
resultados obtenidos en las evaluaciones realizadas en campo y sobre fruto
en condiciones de laboratorio.

300

2.2.14.6. Recomendaciones

Es necesario realizar una caracterizacin de las toxinas presentes en el

filtrado crudo
La cuantificacin es un paso de gran importancia para establecer dosis que
permitan diferenciar entre materiales, basndose en la concentracin real
de la toxina.
2.2.14.7. Bibliografa

SVABOVA, L. 2005. In vitro selection for improved plant resistance to toxin-producing pathogens.
En: J. Phytopathology. 153, 52-64
SCHELMZ, E.A. Engelberth, J., Alborn H.T. 2003. Simultaneous analysis of phytohormones,
phytotoxins and volatile organic compounds in plants. PNAS 100: 10552-10557.
SLAVOV, S. 2005. Phytotoxins and in vitro screening for improved disease resistant plant.
Agrobioinstitute, Sofa, Bulgaria. En: Biotechnol. And Biotechnol. Eq. 19/2005. pp. 48-55.
PATIO, C. 2009. Produccion in vitro de pectinasas por Colletotrichum acutatum. Acata
Agronmica. Revista de la facultad de ciencias agropecuarias. Universidad Nacional de Colombia.
Vol. 59. Nro.1 80-90.
MARTNEZ, D., A. GIRALDO. & R. A. HOYOS. 1999. Efecto de las toxinas de Colletotrichum
gloeosporioides sobre tejido foliar y la formacin de callos a partir de suspensiones celulares de
tomate de rbol Cyphomandra betaceae. En: Ascolfi informa. Vol: 25 Issue:5,47-48.

2.2.15. Caracterizacin morfoagronmica de 24 materiales de lulo

Solanum quitoense Lam y Solanum quitoense * Solanum
hirtum, en el departamento de Risaralda 33.
Objetivo del proyecto (2): Caracterizar las colecciones de germoplasma, por
variabilidad gentica y resistencia a plagas y enfermedades de mayor
importancia.
2.2.15.1. Objetivos
Contribuir a la caracterizacin morfoagronmica de lulo Solanum quitoense
Lam y Solanum quitoense * Solanum hirtum, en el departamento de Risaralda.
Describir las caractersticas morfoagronmicas de 24 materiales de lulo.
Evaluar la contribucin de las caractersticas morfoagronmicas en la
variabilidad fenotpica de los materiales.
33

Carlos Felipe Botero, estudiante de pregrado de agronoma de unisarc, Jess Zuleta Ospina ingeniero
agrnomo y dicente de unisarc.

301

2.2.15.2. Metodologa
El estudio se realiz en la granja La Mara de UNISARC, en la vereda El
Manzanillo, municipio de Santa Rosa de Cabal Risaralda, latitud N 4 55' y
longitud oeste 75 38', a 1600 msnm, temperatura media 19,46C, precipitacin
2308 mm/ao, humedad relativa 80.73%, brillo solar 3,85 horas luz da, suelos
ondulados a quebrados, serie Chinchin. (Ramrez, 2004).
PRIMERA FASE
Materiales de lulo
24 materiales de lulo, diez tipo castilla, nueve de origen desconocido y cinco
hbridos interespecficos. En la tabla 1 se observa, cdigo del material,
procedencia y tipo de material.
Tabla 1. Relacin de los 24 materiales de lulo evaluados en el Eje Cafetero.
Procedencia
Tipo de material
Clon
Pescador Cauca
Castilla
Vm - E1
CEFA
Desconocido
EC 39
Pescador Cauca
Castilla
Wm - E1
Desconocido
SER 9
CEFA
Tierradentro Cauca
Castilla
SS - E1
CEFA
Desconocido
SER 15
CEFA
Desconocido
EC -28
CEFA
Desconocido
ER 10
Rionegro Antioqua
Hbrido interespecfico
PL 8
CEFA
Desconocido
ER 19
CEFA
Desconocido
SEC 27
Rionegro Antioqua
Hbrido interespecfico
PL 24
Pescador Cauca
Castilla
DP - E2
Tierradentro Cauca
Castilla
JY -E1
Pescador Cauca
Castilla
PH SI
Desconocido
SEC 31
CEFA
Castilla
SS -E2
Tierradentro Cauca
Rionegro Antioqua
Hbrido interespecfico
PL 35
Castilla
Vm - E2
Pescador Cauca
Castilla
OJV - E1
Tierradentro Cauca
Rionegro Antioqua
Hbrido interespecfico
PL 19
Castilla
PH -E1
Pescador Cauca

302

PL 11

Rionegro Antioqua

SER 7

CEFA

Hbrido interespecfico
Desconocido
Fuente: CIAT, 2010

Diseo Experimental.
El diseo experimental fue en Bloques Completos al Azar con 24 tratamientos y
cuatro repeticiones. Cada tratamiento correspondi a un material de lulo. La
unidad experimental estuvo conformada por cinco plantas. En el sistema de
bloqueo se tuvo en cuenta el gradiente de pendiente del terreno.
La distancia de siembra fue de 3*3 m al tringulo. El rea de la unidad
experimental fue de 39 m2.
Para efecto de registro de la informacin se tomaron datos de las tres plantas
centrales de cada unidad experimental.
Variables
Altura de la planta. La altura se midi quincenalmente tomando como
referencia la base del tallo y la altura mxima de la copa de la planta.
Descriptores morfolgicos
Emisin de nmero de hojas.
Porcentaje volcamiento: se contaron con las plantas que sufran volcamiento
% V= No total de plantas/No de plantas volcadas*100.
Altura de mesa productiva:
Anlisis estadstico.
Altura de la planta. Para el anlisis de esta variable se utiliz el paquete
estadstico SAS 9.1 para realizar el anlisis de varianza y la prueba de
comparacin entre medias mediante el estadstico de Duncan.
Tasa de crecimiento. Se utiliz el modelo de regresin lineal del paquete SAS
9.1, relacionando los valores solo hasta el momento donde hubo crecimiento
positivo.
Descriptores morfoagronmicos. Estas caractersticas fueron analizadas
mediante el paquete estadstico SAS 9.1 para obtener el anlisis de varianza,
la prueba de comparacin de medias y agrupacin de materiales por
caractersticas mediante la aplicacin proc clster

303

2.2.15.3. Resultados y Discusin

Los materiales con mejor tasa de crecimiento bajo las condiciones del Eje
Cafetero fueron EC28, EC39, SEC31, WME1, PL24 y OJVE1 y los materiales con
mejor altura en la mesa productiva fueron WME1, JYE1, SER7 y ER10.
2.2.16. Caracterizacin morfoagronmica de 15 materiales de lulo
Solanum quitoense Lam y Solanum quitoense * Solanum
hirtum, en el departamento de Risaralda 34.
Objetivo del Proyecto (2): Caracterizar las colecciones de germoplasma, por
variabilidad gentica y resistencia a plagas y enfermedades de mayor importancia
2.2.16.1. Objetivos
Contribuir a la caracterizacin morfoagronmica de lulo Solanum quitoense
Lam y Solanum quitoense * Solanum hirtum, en el departamento de Risaralda.
Describir las caractersticas morfoagronmicas de 15 materiales de lulo.
Evaluar la contribucin de las caractersticas morfoagronmicas en la
variabilidad fenotpica de los materiales.
Determinar el tiempo de desarrollo del fruto en 15 materiales de lulo.
2.2.16.2. Marco Referencial
En Santa Rosa de Cabal Risaralda, se evaluaron 15 materiales de lulo, en
Bloques Completos al Azar, cuatro repeticiones y registros a travs del tiempo. Se
midi altura, tasa de crecimiento y 48 descriptores morfolgicos, se determin la
fenologa del fruto. Se analiz como parcelas divididas, los materiales fueron la
parcela principal y los tiempos de evaluacin las subparcelas. Altura, altura de
mesa productiva, nmero de racimos, nmero de espinas en tallo, haz y envs de
hojas; nmero de tricomas en tallo, haz y envs, spalo, ptalos, longitud de
espinas en haz y envs, peciolo, limbo
y frutos, presentaron diferencias
significativas entre materiales. Se identificaron materiales con caractersticas
deseadas por los agricultores. Se determin que la variabilidad fenotpica de los
materiales est asociada a caracteres de rusticidad lo que corrobora que es un
cultivo en va de domesticacin. Para la duracin de los estados de fenologa del
fruto no se encontraron diferencias significativas.
Palabras clave: mesa productiva, tricomas, espinas, Solanum quitoense, haz,
envs, limbo.
34

Jess Zuleta Ospina, Profesor Facultad de Ciencias Agrcolas UNISARC, Adrian Mauricio Valencia
Franco, estudiante de pregrado de Agronoma de UNISARC, Alonso Gonzlez Meja Lder Frutas Tropicales
CIAT , Jaime Eduardo Muoz Florez, Profesor Asociado Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira.

304

2.2.16.3. Metodologa
El estudio se realiz en la granja La Mara en la vereda El manzanillo, municipio
de Santa Rosa de Cabal Risaralda, latitud N 4 55' y longitud oeste 75 38', a 1600
msnm, temperatura media 19,46C, precipitacin 2308 mm/ao, humedad relativa
80.73%, brillo solar 3,85 horas luz da, suelos ondulados a quebrados, serie
Chinchin. (Ramrez, 2004).
MATERIALES DE LULO
15 materiales de lulo provenientes de los departamentos del Valle del Cauca,
Risaralda y de la coleccin del Banco Nacional de Semillas. Diez materiales fueron
propagados in vitro y cinco semilla sexual. . En la tabla 1 se observa procedencia,
cdigo del material, forma de propagacin. Todos los materiales son tipo castilla.
Tabla 7. Relacin de los 15 materiales de lulo evaluados en el Eje Cafetero.
Procedencia

Darien
Cauca

Valle del

Productor
Fersain Garca
Luis Henriquez
Jorge Solarte

Tulu Valle del

Yolanda Daz Baena
Cauca
Ginebra Valle del
Marcelino Bolaos
Cauca
Abelardo Gutirrez
Santa Rosa de Cabal
Risaralda
Olga Rendn
Cauca
Banco Nacional de
Huila
Semillas en Corpoica
Nario
Valle del Cauca
Fuente: CIAT, 2010

Cdigo
material
FGE1
LHE1
JSE3
JSE2
JSE1
YDE3
YDS1

del Forma
propagacin
In vitro
In vitro
In vitro
In vitro
In vitro
In vitro
In vitro

MBG1

Sexual

AGE1
ORE1
ORE2
120052
120055
120044
120043

In vitro
In vitro
In vitro
Sexual
Sexual
Sexual
Sexual

de

2.2.16.4. Metodologa
Diseo Experimental.
El diseo experimental fue en Bloques Completos al Azar con 15 tratamientos y
cuatro repeticiones. Cada tratamiento correspondi a un material de lulo. La
unidad experimental estuvo conformada por cinco plantas. En el sistema de
bloqueo se tuvo en cuenta el gradiente de pendiente del terreno.
La distancia de siembra fue de 3*3 m al tringulo. El rea de la unidad
experimental fue de 39 m2.

305

Para efecto de registro de la informacin se tomaron datos de las tres plantas

centrales de cada unidad experimental.
Variables
Altura de la planta. La altura se midi quincenalmente tomando como
referencia la base del tallo y la altura mxima de la copa de la planta.
Tasa de crecimiento: se tomaron para cada material modelos de regresin
para discutir el comportamiento de la variable a travs del tiempo, se utiliz el
programa Curve Expert y se estimaron los parmetros y el coeficiente de
determinacin R2
Descriptores morfolgicos
Dimetro del tallo: se midi con un calibrador a 5 cm de la base del tallo, en
cm
Porcentaje volcamiento: se contaron con las plantas que presentaron
volcamiento y se aplic la frmula % V= (No total de plantas/No de plantas
volcadas)*100.
Numero de ramas estructurales: nmero de ramas dominantes.
Vigor de la planta: para su evaluacin se propuso una escala de estimacin
del vigor de excelente, sobresaliente, aceptable, deficiente e insuficiente
Posicin de ramas estructurales y estrato: se determin por la posicin de
las ramas en ortotrpicas, plagiotrpicas y semi orto o semi palgio.
Altura de la mesa productiva: se midi desde la base del tallo hasta el punto
donde se bifurcan las ramas estructurales, en cm
Longitud espinas: se midi por medio de un calibrador en cmm
Numero de nervaduras laterales: se cont el nmero de nervaduras en la
hoja cuatro.
Estras en el tallo: se determin observando si el tallo presenta estras 0.
Ausencia; 1 dbil; 2. Medio; 3 abundante.
Numero de racimos por rama: se registr una de las ramas estructurales de
la planta
Espinas en tallo y hoja por cm2: se cont la cantidad de espinas en tallo y
hoja en un recuadro de 2*2 cm2.
Forma espinas tallo y hoja: se determin de acuerdo a su forma
Longitud de espinas tallo. Se midi por medio del calibrador en mm
Numero de tricomas cm2 en tallo, hoja y flor
Numero de espinas hoja en haz y envs: se cont la cantidad de espinas en
ambos lados de la hoja
Longitud espinas hojas haz y envs: por medio de un calibrador se midi la
longitud de las espinas en haz y envs de la hoja en mm
Longitud del limbo, del peciolo y ancho de hoja: se determin por medio de
un flexmetro, registrada en la hoja cuatro en cm

306

Longitud del spalo y ptalo: la medicin se realiz por medio del calibrador
en mm
Numero de flores por racimo: se cont la cantidad de flores tiene un racimo
que se seleccion en campo
Dimetro de la cicatriz pedicular: se midi por medio del calibrador en mm
Fenologa del fruto
La fenologa del fruto se determin seleccionando un racimo floral por planta, se
llev un registro de campo y se apoy en registro fotogrfico, cada racimo fue
marcado con una cinta, se registr tres veces por semana y se determin el
tiempo de duracin de cada una de las etapas de la flor empezando por botn
floral, apertura de flor, cuajamiento, formacin del fruto, madurez fisiolgica y
madurez de cosecha.
Agrupacin de materiales por caractersticas morfoagronmicas. Se
utiliz el proc clster de SAS versin 9.1 con las variables anteriormente
descritas
Anlisis Estadstico.

Altura de la planta. Para el anlisis de esta variable se utiliz el paquete

estadstico SAS 9.1 para realizar el anlisis de varianza y la prueba de
comparacin entre medias mediante el estadstico de Duncan.

Tasa de crecimiento. Se utiliz el modelo de regresin lineal del paquete

SAS 9.1, relacionando los valores solo hasta el momento donde hubo crecimiento
positivo.
Descriptores morfoagronmicos. El anlisis de varianza se hizo mediante el
paquete estadstico SAS 9.1, la comparacin de medias mediante la prueba de
rango mltiple de Duncan y la agrupacin de los materiales por caractersticas
morfoagronmicas mediante le pro clster.
Fenologa del fruto. El anlisis de varianza se hizo mediante el paquete
estadstico SAS 9.1, la comparacin de medias mediante la prueba de rango
mltiple de Duncan.
La variabilidad fenotpica de los materiales est dada por caracteres asociados a
rusticidad. Los materiales que presentan mayor nmero de caractersticas
deseadas por los productores son: JSE2, YDSI, AGE1, ORE2, 120052, 120055 y
120044.

307

2.2.17. Respuesta diferencial a la incidencia de los principales

problemas fitosanitarios en 24 materiales de lulo Solanum
quitoense Lam, S. quitoense * s. hirtum bajo condiciones
agroclimticas de Risaralda 35.
Objetivo Del Proyecto (2): Caracterizar las colecciones de germoplasma, por
variabilidad gentica y resistencia a plagas y enfermedades de mayor importancia
2.2.17.1. Objetivos
Evaluar la respuesta diferencial a la incidencia de los principales problemas
fitosanitarios en 24 materiales de lulo Solanum quitoense lam, S. quitoense *
S. hirtum bajo condiciones agroclimticas de Risaralda.
Identificar materiales de lulo que presentan bajos ndices de plagas y
enfermedades como resultado de la baja presencia de estos.
Relacionar el comportamiento de las plagas y enfermedades de mayor
incidencia en lulo con las condiciones climticas registradas durante el
desarrollo del ensayo.
Determinar la variabilidad fenotpica de los materiales de lulo respecto al
comportamiento de las plagas y enfermedades.
2.2.17.2. Marco Referencial
El lulo Solanum quitoense se siembra en Colombia en 14 departamentos, 149
municipios y 1719 veredas (DANE, 2004) y genera ingresos a cerca de 6500
familias de economa campesina (Muoz, 2010). Los principales problemas
fitosanitarios que afectan el lulo en la zona de estudio son gota Phytophthora
infestans, antracnosis Colletotrichum gloeosporioides y C. acutatum y pasador del
fruto Neoleucinodes elegantalis (Bernal, 2000 y Zuleta, 2006). En el eje cafetero
en Santa Rosa de Cabal, se evaluaron 24 materiales de lulo en un diseo
experimental de Bloques Completos al Azar con 24 tratamientos y cuatro
repeticiones, cada tratamiento correspondi a un material de lulo, la unidad
experimental estuvo conformada por cinco plantas y la distancia de siembra fue de
3 m al tringulo.
Para determinar la incidencia de plagas y enfermedades se realizaron 29
evaluaciones entre los 51 y 282 das despus de siembra. Los materiales con
menor incidencia a Cladosporium sp fueron: PL8, PL 35, PL 24 y PL 19, a
Fusarium sp WME1, PL8, PL 24 y PL 11, a caros PL8, PL 35, PL 19 y SSE1, a
35

Diana Milena Gonzlez Valencia estudiante de pregrado de Agronoma de UNISARC, Jess Zuleta
Ospina Ingeniero Agrnomo y docente de UNISARC, Alonso Gonzlez Meja, Lder Frutas Tropicales
CIAT, Jaime Eduardo Muoz Florez, Profesor Asociado Universidad Nacional de Colombia, Sede Palmira.

308

trips PL 24, PL 35, SER 7, SER 9 y PHSI, a complejo crisomlido SER 15, PL 35,
SEC 31, SER 7 y PL 24, y a pasador de fruto PL 8, PL 19, PL 11, PL 24, SER 7,
SER 9 y SER 15. Los materiales de menor ndice de plaga fueron: PL 8, PL 11, PL
19, PL 24, PL 35, SER 9 y SER 15, loa los de menor ndice de enfermedad PL 8,
PL 11, PL 24, PL 35, WM E1, VM E1 y ER 10.
La agrupacin por caractersticas fitosanitarias gener tres grupos as: grupo 1,
identificado por ndice de plaga alto, alta incidencia de caros, crisomlidos,
gusano enrollador, chiza y pasador de fruto y baja incidencia a gusano bombillo.
En el grupo 2 estn los materiales con alta incidencia a caros y Cladosporium sp
y el grupo 3 los materiales presentan baja incidencia a Meloidogyne spp y
Cladosporium sp.
2.2.17.3. Metodologa
La localizacin, materiales de lulo y diseo experimental es igual para los tres
temas de estudio en cada una de las fases de evaluacin.
Variables.
Incidencia de plagas y enfermedades. Se realizaron 29 registros
consecutivos entre el 26 de octubre de 2007 y mayo 30 de 2008. Previo a las
evaluaciones se hizo trabajo de entrenamiento sobre el reconocimiento de los
problemas fitosanitarios y su respectivo monitoreo. Los registros se hicieron en
las tres plantas centrales de cada unidad experimental, para facilitar el registro
de la informacin, la evaluacin siempre se hizo sobre un cuadrante de la
planta y se observ el rea foliar y radicular.
Para el registro de la incidencia se utiliz la siguiente frmula:

Incidencia( I )

N de plantas enfermas
*100%
N Total de plantas

Tiempo de aparicin de plagas y enfermedades con relacin al desarrollo

del cultivo (dds): se marc la fecha inicial de aparicin de los problemas
fitosanitarios.
ndice de plaga e ndice de enfermedad: a cada variable fitosanitaria se le
asign un valor representativo de acuerdo a la importancia que sta representa
para el cultivo en la zona de estudio, dicho valor se afect por el porcentaje de
incidencia de cada variable y la sumatoria de los productos origin el ndice de
plaga y/o de enfermedad.

309

Tabla 5. Valores asignados para variables asociadas a plagas de acuerdo al

impacto que ocasiona en la zona de estudio.

Plagas

Acaro

Trips

Gusano
enrollador

Chiza

Complejo
crisomlidos Afidos

Gusano Pasador
bombillo de fruto Grillo

FP

0,2

0,1

0,05

0,1

0,1

0,1

0,1

0,3

0,05

Tabla 6. Valores asignados para variables asociadas a enfermedades de

acuerdo al impacto que ocasiona en la zona de estudio.
Mancha
Antracnosis
Antracnosis Mancha
Enfermedad Nematodos clortica Gota fruto
Fusarium Bacteriosis Alternaria tallo
algodonosa
FP

0,3

0,2

0,1

0,3

0,4

0,2

0,05

0,2

0,1

Agrupamiento por comportamiento fitosanitario: se utiliz el proc cluster de

SAS versin 9.1 con las variables seleccionadas por coeficiente de variacin y
correlacin de Pearson.
Anlisis de varianza para la variable incidencia de plagas y enfermedades
Como se utiliz un diseo en Bloques Completos al Azar y se realizaron
evaluaciones sobre la misma unidad experimental a travs del tiempo, el modelo
de anlisis se asocia al diseo en parcelas divididas (Gmez et al, 1984). La
parcela principal son los materiales de lulo y las subparcelas los tiempos de
evaluacin. Se tendr un error de muestreo asociado a la variacin entre plantas.
Para comparar promedios se utiliz la prueba de rango mltiple de Duncan.
2.2.17.4. Resultados y Discusin
Hay materiales de inters por su comportamiento frente a las principales plagas y
enfermedades que se presentan en el eje cafetero. Los materiales de menor
ndice de enfermedad son PL24, PL8, PL11, WME1, VME1, PL35 y ER10,
mientras que los materiales de menor ndice de plaga son PL8, PL35, PL19,
PL24, PL11, SER 15 y SER 9, como se puede observar los materiales Pls son los
mejores en cuanto al comportamiento sanitarios bajo condiciones del Eje Cafetero.

310

2.2.18. Respuesta a la incidencia, severidad e infestacin de los

principales problemas fitosanitarios en 15 materiales de lulo
Solanum quitoense Lam, bajo condiciones agroclimticas de
Risaralda36.
Objetivo Del Proyecto (2): Caracterizar las colecciones de germoplasma, por
variabilidad gentica y resistencia a plagas y enfermedades de mayor importancia
2.2.18.1. Objetivos
Evaluar la respuesta diferencial a la incidencia, severidad e infestacin de
los principales problemas fitosanitarios en 15 materiales de lulo Solanum
quitoense Lam, tipo castilla, bajo condiciones agroclimticas de Risaralda.
Identificar materiales de lulo que presentan bajos ndices de plagas y
enfermedades.
Relacionar el comportamiento de las plagas y enfermedades de mayor
incidencia en lulo con las condiciones climticas registradas durante el
desarrollo del ensayo.
Determinar la variabilidad fenotpica de los materiales de lulo respecto al
comportamiento de las plagas y enfermedades.
2.2.18.2. Metodologa
El estudio se realiz en la Facultad de Ciencias Agrcolas en el programa de
Agronoma en la Corporacin Universitaria Santa Rosa de Cabal en la granja La
Mara, localizada en la vereda El manzanillo, municipio de Santa Rosa de Cabal
Risaralda, a 1600 msnm, temperatura media 19,46C, precipitacin 2308 mm/ao,
humedad relativa 80.73 % y brillo solar 3,85 horas luz da, suelos ondulados a
quebrados, serie Chinchin. (Ramrez, 2004). El trabajo inici en agosto de 2008 y
se tomaron registros hasta febrero de 2010.
Se evaluaron 15 materiales de lulo provenientes de los departamentos del Valle
del Cauca, Risaralda y de la coleccin del Banco Nacional de Semillas. Diez
materiales fueron propagados in vitro y cinco semilla sexual. En la tabla 1 se
observa procedencia, cdigo del material, forma de propagacin. Todos los
materiales son tipo castilla.

36

Andrs Leonardo Franco Arias estudiante de pregrado de Agronoma de UNISARC.

311

Tabla 8. Relacin de los 15 materiales de lulo evaluados en el Eje Cafetero.

Procedencia

Darien
Cauca

Productor

Valle del

Fersain Garca
Luis Henrquez
Jorge Solarte

Tulu Valle del

Yolanda Daz Baena
Cauca
Ginebra Valle del
Marcelino Bolaos
Cauca
Abelardo Gutirrez
Santa Rosa de Cabal
Risaralda
Olga Rendn
Cauca
Banco Nacional de
Huila
Semillas en Corpoica
Nario
Valle del Cauca
Fuente: CIAT, 2010

Cdigo
material
FGE1
LHE1
JSE3
JSE2
JSE1
YDE3
YDS1

del Forma
propagacin
In vitro
In vitro
In vitro
In vitro
In vitro
In vitro
In vitro

MBG1

Sexual

AGE1
ORE1
ORE2
120052
120055
120044
120043

In vitro
In vitro
In vitro
Sexual
Sexual
Sexual
Sexual

de

El diseo experimental fue en Bloques Completos al Azar con 15 tratamientos y

cuatro repeticiones. Cada tratamiento correspondi a un material de lulo. La
unidad experimental estuvo conformada por cinco plantas, para el sistema de
bloqueo se tuvo en cuenta el gradiente de pendiente del terreno. La distancia de
siembra fue de 3*3 m al tringulo. El rea de la unidad experimental fue de 39 m 2.
Para efecto de registro de la informacin se tomaron datos de las tres plantas
centrales de cada unidad experimental.
Se realizaron dos registros de incidencia de plagas y enfermedades uno en mayo
y otro en junio de 2009, en las mismas fechas se registraron los niveles de
infestacin y severidad para plagas y enfermedades respectivamente. Previo a las
evaluaciones se hizo trabajo de entrenamiento sobre el reconocimiento de los
problemas fitosanitarios y su respectivo monitoreo. Los registros se hicieron en las
tres plantas centrales de cada unidad experimental, para facilitar el registro de la
informacin, la evaluacin siempre se hizo sobre un cuadrante de la planta y se
evalu el rea foliar y radicular.
Para el registro de la incidencia se utiliz la siguiente frmula:

Incidencia( I )

N de plantas enfermas
* 100%
N Total de plantas

Para determinar la severidad de las principales enfermedades que se presentaron

se hizo comparacin del porcentaje de rea de tejido afectado con los diagramas
de severidad y los daos fueron descritos de acuerdo a las escalas de severidad
previamente establecidas y/o propuestas por los autores. Los criterios que se

312

establecieron para la evaluacin de las enfermedades mediante escalas o

diagramas visuales de acuerdo con el grado de infeccin, tuvieron en cuenta el
tipo de patgeno, los sntomas que causa, la presencia de signos o estructuras, el
rgano de la planta que afecta y la variacin en la expresin de la enfermedad a
travs del tiempo y las condiciones climticas
Para el registro de los niveles de severidad se utiliz la siguiente frmula:

Los niveles de infestacin se registraron

ndice de plaga e ndice de enfermedad: a cada variable fitosanitaria se le
asign un valor representativo de acuerdo a la importancia que sta representa
para el cultivo en la zona de estudio, dicho valor se afect por el porcentaje de
incidencia de cada variable y la sumatoria de los productos origin el ndice de
plaga y/o de enfermedad.
Tabla 9. Valores asignados para variables asociadas a plagas de acuerdo al impacto que
ocasiona en la zona de estudio.

Plagas

Acaro

Trips

Gusano
enrollador

Chiza

Complejo
crisomlidos

Afidos

FP

0,2

0,1

0,05

0,1

0,1

0,1

Gusano Pasador
bombillo de fruto
0,1

0,3

Grillo
0,05

Tabla 10. Valores asignados para variables asociadas a enfermedades de acuerdo al impacto
que ocasiona en la zona de estudio.

Mancha
Antracnosis
Antracnosis
Mancha
Enfermedad Nematodos clortica Gota
fruto
Fusarium Bacteriosis Alternaria
tallo
algodonosa
FP

0,3

0,2

0,1

0,3

0,4

0,2

0,05

0,2

Agrupamiento por comportamiento fitosanitario: se utiliz el proc clster de

SAS versin 9.1 con las variables seleccionadas por coeficiente de variacin y
correlacin de Pearson.
Anlisis de varianza para la variable incidencia de plagas y enfermedades
Como se utiliz un diseo en Bloques Completos al Azar y se realizaron
evaluaciones sobre la misma unidad experimental a travs del tiempo, el modelo
de anlisis se asocia al diseo en parcelas divididas (Gmez et al, 1984). La
parcela principal son los materiales de lulo y las subparcelas los tiempos de
evaluacin. Se tendr un error de muestreo asociado a la variacin entre plantas.
Para comparar promedios se utiliz la prueba de rango mltiple de Duncan.

0,1

313

2.2.18.3. Resultados y Discusin

Los materiales tipo castilla de menor ndice de plaga fueron 120043, JSE1, los
materiales de menor incidencia a nematodos fueron ORE2, 120055 Y AGE1 y los
materiales de menor incidencia a pasador de fruto Neoluecinodes elegantalis
fueron 120055, LHE1, ORE1, YDE3 Y 120043.
2.2.18.4. Conclusiones y Recomendaciones
Se destacan dentro de los resultados logrados del proyecto el haber
desarrollado criterios pertinentes para la seleccin de materiales lite de mora
y lulo mediante investigacin participativa.
La integracin cientfica y tecnolgica entre diferentes actores relacionados con
la academia, la investigacin, la produccin, transformacin y comercializacin.
La identificacin de materiales superiores en aspectos de calidad, rendimiento,
comportamiento fitosanitario y caractersticas deseadas morfoagronmicas,
permite a los productores hacer una eleccin apropiada de materiales lite de
lulo.
Por la importancia de los resultados se recomienda efectuar jornadas de
socializacin que permitan una adecuada apropiacin de los mismos.
2.2.19. Evaluacin de rendimiento y calidad en 24 materiales de lulo
Solanum quitoense y S. quitoense * S hirtum en el
departamento de Risaralda 37.
Objetivo del proyecto (4): Evaluar el comportamiento, calidad y rentabilidad de
los clones lite seleccionados, bajo diferentes sistemas de produccin dirigida a
diferentes mercados
2.2.19.1. Objetivos
Evaluar rendimiento y calidad en materiales de lulo en el departamento de
Risaralda.
Determinar las diferentes caractersticas organolpticas de los clones a
evaluar.
Cuantificar las variables de rendimiento.
37

Diana Carolina Agudelo Marn estudiante de pregrado de Agronoma de UNISARC, Jess Zuleta Ospina
Ingeniero Agrnomo y dicente de UNISARC.

314

Determinar las variables de calidad

2.2.19.2. Metodologa
Los materiales y mtodos son los mismos de los trabajos de la primera fase
Variables a evaluar
Variables de rendimiento
Las variables de rendimiento sern registradas semanalmente en formatos
prediseados que faciliten la captura de informacin y la alimentacin de la base
de datos, la parcela til son 5 plantas y las experimentales son 3 para esta
evaluacin las 2 de los lados se deja como efecto de borde.
Estas variables se medirn desde inicio de floracin hasta cosecha, y se tomara
informacin de los siguientes aspectos:
Mtodos para evaluar las variables de rendimiento
Nmero de racimos por planta: esta variable se medir semanalmente, para
facilitar el registro, la planta ser dividida en cuatro cuadrantes que definirn la
posicin a evaluar en la parcela til de cada una de las unidades experimentales
de tal manera que para la parcela 1 las posiciones a evaluar sern A, B y C y para
la parcela 2 las posiciones a evaluar sern la D, A y B y as sucesivamente.
Formato nmero 1.
Variables de calidad:
Esta variable ser medida a partir del inicio de cosecha, donde se evaluaran en
campo o en laboratorio las siguientes caractersticas:
Mtodos para evaluar las variables fsico-qumicas:
Mtodos para evaluar las variables fsico-qumicas:
Apariencia y color de la fruta: esta variable medir caractersticas fsicas como:
fruto fresco, fruto entero, fruto sano libre de ataque de insectos (pasador del fruto,
caros) y enfermedades (antracnosis) que demeriten la calidad interna del fruto,
forma caracterstica del fruto, coloracin homognea de acuerdo a la tabla de
color, consistencia firme, fisuras, deformaciones, sobre maduro, libre de daos
mecnicos, humedecimientos externos anormales, olores extraos.
Dimetro del fruto: la muestra estar conformada por 6 frutos por parcela que
sern recolectados en grado 3 y 4, a cada fruto de se le medir el dimetro en la
zona ecuatorial y se sacar el promedio, la medicin se realizar con un
calibrador.

315

Determinacin del peso del fruto: de cada parcela se pesarn 6 frutos en grado
3 y 4, y se obtendr el peso promedio de cada una de ellas. Esta medicin se har
para cada una de las repeticiones en los cuatro bloques del ensayo.
PF = PP/TF
PF: peso del fruto
PP: peso promedio de cada parcela
TF: total de frutos cosechados
Determinacin del color del fruto: se recolectarn frutos en diferentes estados
de madurez y se compararn con la tabla Munsell para establecer colores
definidos y posteriormente los grados de madurez. Por cada clon se elaborar una
tabla de colores, teniendo en cuenta la siguiente tabla:
Tabla 8. Tabla de color
COLOR
COLOR 0
COLOR 1
COLOR 2
COLOR 3
COLOR 4
COLOR 5

Fruto
Fruto
Fruto
Fruto
Fruto
Fruto

DESCRIPCIN
verde oscuro, maduro fisiolgicamente
con un 12 % de madurez, expresado en la corteza
con un 25 % de madurez, expresado en la corteza
con un 50 % de madurez, expresado en la corteza
con un 75 % de madurez, expresado en la corteza
con un 100% de madurez, expresado en la corteza del mismo

Determinacin de la consistencia: esta prueba se realiza con la muestra con la

que se elabora la tabla de color, que indica el grado de madurez. Con una navaja
se extrae la corteza de la zona media y de menor coloracin de cada lulo (cortes
de 2 cm de dimetro). Con la mano izquierda se apoya el lulo sobre la mesa de
trabajo y con la mano derecha se toma el penetrmetro ponindolo en cero. Se
coloca el penetrmetro en el centro del rea descubierta (pulpa). Con el
penetrmetro hace presin uniforme sobre el lulo hasta que entre la punta.
Efectu la medida (lea la presin). Se repite la operacin en los dems grados de
madurez. Promedia los resultados obtenidos con los diferentes grados de
madurez y elabora una grfica con los datos de grados de madurez en el eje de
las X y presin en el eje de las Y.
El penetrmetro es marca Bertuzzy. Ref: FT 327 que mide la fuerza de
penetracin de la corteza en Kgf o lbf.
Forma del fruto: se har una descripcin visual de la forma del fruto y podrn ser
redondos, ovalados, achatados, otro. Esta evaluacin se har sobre la muestra de
6 frutos por parcela en grado de madurez 3 y 4.
Aroma: este es otro concepto sensorial cualitativo, se clasificara mediante la
escala aromtica que maneja la Productora de Jugos S.A: muy aromtico,
aromtico, poco aromtico, dbil. Esta variable se realiza mediante el panel de
degustacin. Para la realizacin de dicha prueba, se requiere de frutos en grado
de madurez 4, a los que se les har un corte transversal. El aroma de cada fruto
ser analizado y concertado por el grupo de trabajo.

316

Espesor cascara (mm): a frutos en estado de madurez 3 y 4 se les hace un corte

transversal y con un calibrador se le mide el espesor de la cscara a cada uno de
los frutos y al final se saca un promedio.
Dimetro ocupado de la semilla: a frutos en estado de madurez 3 y 4 se les
mide el dimetro que ocupa la semilla en la pulpa y al final se saca un promedio.
Sabor del fruto: concepto sensorial cualitativo dado por el analista, se clasifica en
muy cido, acido, balanceado, no caracterstico, residual qumico. Esta variable se
realiza mediante el panel de degustacin conformado por equipo de trabajo de
laboratorio. A cada uno de los miembros del equipo se le entregar una porcin
del 25 % de un futo en grado de madurez 4 para que sea degustado y emita su
concepto segn la escala.
Instrucciones para la degustacin
1.
2.
3.
4.

La apariencia y el olor deben ser evaluados primero que el sabor.

No fumar en el transcurso del test.
Lavar la boca y tomar agua antes de probar la muestra
Tomar cantidades de la muestra suficientes para retenerla en la boca hasta
percibir la caracterizacin analizada.
5. Tragar la muestra
6. Registrar las observaciones
7. En caso de estar evaluando ms de una muestra, esperar hasta que todo el
sabor haya desaparecido. Para esto consumir un poco de pan y luego enjuagar
la boca.
Determinacin del sabor del jugo: Pruebe la muestra de jugo e indique en la
escala de abajo cuanto le gusto o disgusto el jugo tomado.
( ) Le gusto extremadamente
( ) Le gust mucho
( ) Le gusto moderadamente
( ) Le gusto ligeramente
( ) No le gusto ni le desagrado
( ) Le desagrado ligeramente
( ) Le desagrado moderadamente
( ) Le desagrado mucho
( ) Le desagrado extremadamente
Describa lo que ms le gusto y lo menos le gusto usted de la muestra .
Lo que ms le gusto
Lo que menos le gusto
Determinacin del color de la pulpa: a frutos en grados de madurez 3 y 4 se les
har corte transversal y la pulpa que se encuentra ubicada entre el rea de la
semilla y la cscara se le compara el color con la tabla Munsell y se determina el
cdigo del color.

317

Peso cascara: a frutos en grados de madurez 3 y 4 se les separar

cuidadosamente la cscara de la pulpa del fruto y se har la relacin en trminos
de porcentaje.
% PC = PC * 100/ PF
% PC: porcentaje peso de la cscara
PC: peso de la cscara
PF: peso del fruto
Peso pulpa + semilla: es el peso del fruto menos el peso de la cscara
% PPS= PPS*100/PF
PPS = PF PC
PPS: peso de la pulpa ms la semilla
PF: peso del fruto
PC: peso de la cscara
Peso de semillas: 6 frutos sin corteza son sometidos a licuado, sin adicin de
agua durante 3 minutos, luego se cuela y se recoge el jugo el que se requiere para
adelantar otras pruebas de calidad, la semilla que queda en el cedazo se somete
nuevamente a licuado con adicin de 200 cc de agua durante 1 minutos, luego se
lava y se cuela nuevamente, posteriormente se pasa por un lienzo al que se le
ejerce presin para tratar de sacarle la mayor cantidad de humedad y se pesa.
%PS = PS * 100/ PF
PS: peso de la semilla
PF: peso del fruto
Peso de la pulpa: es el resultado del pesaje de la pulpa ms la semilla menos el
peso de la semilla de 6 frutos por parcela en grado de madurez 3 y 4.
%PP= PP * 100 / PF
PP: peso de la pulpa = PPS PS
PF: peso del fruto
Esta variable tambin se denomina % de rendimiento
Color de la pulpa: a la pulpa de cada una de las muestras por parcela se le
comparar el color con la tabla Munsell y se determinar el cdigo del mismo.
Oxidacin y cambios de color: a cada una de las muestras de los jugos se le
observarn los cambios de color al cabo de 30 minutos despus de elaborados los
mismos y se comparar con la tabla de color Munsell.
Grados brix: esta medicin corresponde a la determinacin del contenido de
slidos solubles totales, esta prueba se determina por el mtodo refracto mtrico y
se expresa en grados brix. La lectura se debe corregir mediante la siguiente
ecuacin:
SST corr = 0.194 * A + SST
En donde:

318

A : % de cido ctrico
SST: slidos solubles totales en grados brix
Acidez titulable: se determina por el mtodo de titulacin potenciomtrica. Se
expresa como porcentaje de cido ctrico y se calcula mediante la siguiente
ecuacin:
% c ctrico = (V1 * N / V2) K * 100
En donde:
V1: volumen de NaOH consumido (ml)
V2: volumen de la muestra
K: peso equivalente del cido ctrico (0.064 g/meq)
N: normalidad del NaOH (0.1 meq/ml)
En un frasco volumtrico se colocan 5 ml de jugo, se adicionan 100 ml de agua
destilada y dos gotas de fenolftalena al 1 % por medio de bureta. Luego se
descarga NaOH 0.1 N utilizando una bureta y se deben anotar los ml consumidos.
Ratio: es la relacin de grados brix/acidez, el rango es de 4 5.
pH: este se toma por medio de un peachimetro y el rango es de 2,8 3,5. Para
estos anlisis se utilizara el siguiente formato: cada que se haga una medicin
este debe ser calibrado con la solucin indicadora.
Se toma jugo de cada uno de los lulos de la tabla de color, se enjuaga el electrodo
ya calibrado con agua destilada, luego se sumerge el electrodo en la pulpa sin
mezclar, despus de un tiempo de estabilizacin se realiza la medicin del pH.
Por ltimo se realiza una grfica indicando en el eje de las X el estado de madurez
y en el eje de la Y el valor obtenido de pH. Es recomendable hacer varias
mediciones durante el desarrollo del proyecto.
Senescencia o prdidas por almacenamiento: a 4 frutos en estado de madurez
3 y 4 se les determina el peso y se dejan en un lugar fresco y sombreado a
condiciones ambientales por espacio de 8 das. Los frutos deben ser marcados
para tener en cuenta el peso especfico de cada uno de ellos en las mediciones
que cada dos das se realicen. Es importante hacer anotaciones sobre el deterioro
del fruto como prdida de turgencia, pudriciones, colonizacin de microorganismos
de poscosecha. Es importante tener registro fotogrfico en cada una de las
observaciones.
2.2.19.3. Resultados y Discusin
Los materiales hbridos interespecficos son los que presentan las mejores
caractersticas organo sensoriales para propsitos agrindustriales, mientras que
los tipo castilla tienen buenas caractersticas para mercado en fresco. Los
materiales hbridos SEC31, PL11, PL19 y EC 28 presentan los valores ms altos
en grados brix, conversin de pulpa y rendimiento.

319

2.2.20. Evaluacin de variables de rendimiento y calidad en 15

materiales de lulo Solanum quitoense lam en el departamento
de Risaralda38.
Objetivo del proyecto (4): Evaluar el comportamiento, calidad y rentabilidad de
los clones lite seleccionados, bajo diferentes sistemas de produccin dirigida a
diferentes mercados
2.2.20.1. Marco Referencial
Bajo condiciones agroecolgicas del Eje Cafetero, especficamente en el municipio
de Santa Rosa de Cabal a 1600 msnm, con humedad relativa de 80.73%,
precipitacin de 2308 mm/ao, temperatura de 19.46C y brillo solar de 3.82 horas
luz da, segn Ramrez (2004), se evaluaron 15 materiales de lulo tipo castilla,
provenientes de cinco eco regiones productoras de lulo del pas correspondiente a
los departamentos de Cauca, Huila, Nario, Valle del Cauca y Risaralda. La
evaluacin de los materiales se hizo usando un diseo experimental en bloques
completos al azar, con cuatro repeticiones y 15 tratamientos, cada tratamiento
correspondi a un material de lulo, la unidad experimental estuvo conformada por
5 plantas, la distancia de siembra que se utiliz fue de 3 m entre plantas y 3 m
entre surcos al tringulo.
Se analiz como parcelas divididas, los materiales fueron la parcela principal y los
tiempos de evaluacin las subparcelas, rendimiento, caractersticas fsicas y
qumicas del fruto, presentaron diferencias significativas entre materiales. Se
identificaron materiales con altos rendimientos la cual es una caracterstica
deseada por los agricultores.
2.2.21. Evaluacin del contenido de materia seca y nutrientes en cada
etapa de desarrollo de lulo hibrido la selva clon p 32 (Solanum
quitoense lam x Solanum hirtum) en el municipio santa rosa de
cabal, Risaralda39.
Objetivo del proyecto (4): Evaluar el comportamiento, calidad y rentabilidad de
los clones lite seleccionados, bajo diferentes sistemas de produccin dirigida a
diferentes mercados

38

Jess Zuleta Ospina 1 , Cristian David Santacoloma Munera2 , Alonso Gonzlez Meja 3 , Jaime Eduardo
Muoz Florez4 (1 Profesor Facultad de Ciencias Agrcolas UNISARC proyectosunisarc@gmail.com,
2
Estudiante de Agronoma Facultad de Ciencias Agrarias UNISARC, 3 Lder Frutas Tropicales CIAT,
4
Profesor Asociado Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira jemunozf@palmira.unal.edu.co.)
39
Nicols Alzate Ocampo, Jefferson Flrez Meja, Victor Hugo Ramirez Builes y Jess Zuleta Ospina

320

2.2.21.1. Marco Terico

Con el fin de contribuir al conocimiento del crecimiento y la extraccin de
nutrimentos por lulo hibrido la selva clon P 32 (Solanum quitoense lam x Solanum
hirtum), se realiz durante 11 meses una investigacin en el municipio Santa Rosa
de Cabal, Risaralda. La investigacin se realiz en diferentes etapas de desarrollo
de lulo hasta los 303 das despus de siembra. Los resultados indican que el
potencial de acumulacin de materia seca por la planta son: En la etapa uno 27.13
g, en la etapa dos 85.8 gr, y en la etapa tres: 2364.8 g, lo que indica un contenido
de agua de aproximadamente el 80%. La extraccin de los nutrimentos por tanto,
presenta una dinmica particular, lo que permite determinar las necesidades de la
planta en cada etapa de crecimiento. Esta es la primera vez que se presenta
resultados sobre la dinmica de crecimiento y distribucin de la materia seca,
enlazados con la extraccin de nutrimentos en lulo en la zona cafetera. Los
resultados obtenidos permitirn determinar la mxima eficiencia en el uso de los
fertilizantes, que se traduzcan en un menor impacto sobre el medio ambiente y
una mejor relacin costo-beneficio para el agricultor.
El suministro de las cantidades y nutrientes necesarios del cultivo de acuerdo con
su etapa fenolgica, en la dosis correcta y en el momento preciso aumenta la
productividad, produce mejores rendimientos, y reduce el uso indiscriminado de
fertilizantes, razn por la cual el presente estudio est enfocado en obtener
informacin sobre la extraccin nutricional de lulo la selva en cada una de la
etapas fenolgicas, conociendo la concentracin precisa de nutrimentos en los
tejidos vegetales, y los nutrientes presentes en el suelo para saber qu cantidad
de estos nutrientes se encuentra utilizando la planta, y as brindar herramientas a
los agricultores en cuanto a nutricin se refiere, sobre dosis y momento de
aplicacin, para as aumentar los niveles de produccin actualmente registrados,
y disminuir el uso indiscriminado de fertilizantes.
El anlisis qumico de las hojas y otros rganos vegetales, llamado en general
anlisis foliar o diagnstico foliar, es hoy un mtodo prctico para estimar el
estado nutricional y el requerimiento de sustancias nutritivas. La informacin que
proporciona el anlisis foliar complementa a la contenida en el anlisis de suelo,
integrando el conjunto de factores que influyen en la asimilacin de los nutrientes,
aporta las normas de fertilizacin, principalmente de microelementos, cuya
disponibilidad en el suelo resulta difcil de determinar, confirmando las alteraciones
nutricionales diagnosticadas visualmente, detecta los desequilibrios nutricionales
que, sin tener una sintomatologa especfica se traducen en una reduccin
progresiva del vigor o la produccin, y da a conocer hasta qu punto los
nutrientes, presentes en el suelo o aportados mediante fertilizacin, son utilizados
por la planta, para validar y corregir el plan de fertilizacin.
En la actualidad en la zona cafetera los programas de fertilizacin para lulo se
basan en experiencias, y conocimientos empricos. Risaralda empieza con su
grano de arena para la contribucin de la produccin nacional iniciando con sus
aportes investigativos.

321

2.2.21.2. Metodologa
La investigacin se realiz en La granja el Jazmn, ubicada en la vereda Guacas,
municipio de Santa Rosa de cabal, ubicada en la cordillera central vertiente
occidental entre lat. N 0 55 y long W 75 38 a una altura de 1.650 m.s.n.m., con
una precipitacin promedio anual de 2.305 m.m., con una temperatura media de
19.5 C, y 80.63% de humedad relativa; bajo condiciones normales (50% de
probabilidad) (citados por Ramrez (2002).
Caractersticas generales del suelo en la zona
Santa Rosa de Cabal se encuentra dentro de la clasificacin de los suelos
derivados de cenizas volcnicas, dentro de los andisoles segn la taxonoma de
USDA (Soil Survey Staff, 1994), implica que el suelo tenga menos de 25% de
carbono orgnico que adems, cumpla tres requisitos de propiedades ndicas,
como resultado de la presencia de cantidades significativas de complejos Alhumus, alfana, imogolita y ferhidrita. Estas propiedades son:(1) densidad
aparente menor de 0.9 g/cm3, (2) retencin de fosfatos mayor de 85%, y (3)
aluminio ms hierro extrados con oxalato cido de amonio mayor del 2%, esta
unidad cumple dos de los requisitos de las propiedades ndicas y son por lo tanto
andisoles tpicos. Es importante conocer el contenido elemental presente en el
suelo en el momento de realizar el anlisis foliar para saber la cantidad de
nutrimentos que ha tomado la planta dependiendo de la etapa fenolgica en que
se encuentre, adems del manejo que se le d al cultivo. (Henao T., M. C. 1997)
(Tabla 1).
Anlisis de suelos:
La muestra de suelos se tom del rea posible de nutricin de la planta (antes del
establecimiento del cultivo), que posteriormente iba a ser ocupada por la copa
productiva de la misma, a una profundidad de 20 cm y una distancia de 60 cm del
sitio con respecto al tallo.
Recoleccin y seleccin de semilla:
La semilla fue obtenida de la finca Bombay, vereda el Higuern en Palestina
Caldas, la cual es reconocida por la gran demanda que tiene de semilla en la
zona, se trabaj con el clon P32 material que hace parte de Lulo la selva y que
est integrado por HFG y HO.

322
Tabla 1: Caractersticas generales de la zona
Localizacin geogrfica

Condiciones climticas
Precipitacin promedio anual de 2.305 m.m.,
Santa Rosa de cabal, se encuentra ubicada en con una temperatura media de 19.5 C, brillo
la cordillera central vertiente occidental entre solar promedio diario de 3.4 horas y 80.63% de
lat. N 0 55 y long W 75 38 a una altura de humedad relativa; bajo condiciones normales
1.650 m.s.n.m.
(50% de probabilidad)( citados por Ramrez
(2002).
Caractersticas generales del suelo
El suelo contiene menos de 25% de carbono orgnico, densidad aparente menor de 0.9 g/cm3,
retencin de fosfatos mayor de 85%, y aluminio ms hierro extrados con oxalato cido de amonio
mayor del 2%, esta unidad cumple dos de los requisitos de las propiedades ndicas y son por lo
tanto Andisoles tpicos.

Manejo Agronmico:
La investigacin tuvo un manej estndar de acuerdo al utilizado en la zona, en
cuanto a preparacin del terreno, fertilizacin, manejo de plagas y enfermedades,
manejo de arvenses, cosecha, para lo cual algunas de las decisiones de manejo
se tomaron basados en la respuesta del cultivo frente a las condiciones edficas y
climticas que se presentaron durante el desarrollo de la investigacin en la zona
de estudio.
Registros Climticos:
Se tomaron datos climticos mensuales como temperatura (mxima, mnima y
media), precipitacin, humedad relativa, y radiacin solar de la estacin climtica
El Jazmn, ubicada UNISARC, entre la fecha de Mayo del 2008 a Marzo del 2009,
para realizar el correspondiente anlisis climtico, con el propsito de evaluar la
disponibilidad de agua en cada etapa del cultivo de lulo la selva, de acuerdo a la
cantidad de agua acumulada en el suelo (aporte de lluvia) y de la extraccin que
hacen las plantas a travs de la evapotranspiracin, se decidi hacer un balance
hdrico. El balance hdrico fue realizado basado en la metodologa de ThorehmWaite y Mather, en la cual se calculan valores de evapotranspiracin a travs de
temperatura y humedad relativa diaria para la zona (Ramrez, B., V., 2004.).
Evapotranspiracin.
La evapotranspiracin potencial fue calculada a travs de la siguiente frmula:
=1,21^n*(1-0,01*HR)+(0,21*T media)-1,8 donde:
n =(7,45* T media)/(234,7+ T media),
HR suma de cada uno de los valores registrados a las 7:00 am, 1:00 pm y
7:00 /3
T media= T mxima + T mnima / 2
TT (Tiempo Trmico)= (T mxima + T mnima / 2) Tb (10C).

323

TTA (Tiempo Trmico Acumulado)= suma de la temperatura trmica diaria

acumulada, metodologa de Garca y Lpez modificada por Jaramillo. (citado
por Ramrez, B., V., 2004.).
Con base en lo anterior se calcul el ndice de humedad del suelo para esta
localidad y consiste en la relacin de la evapotranspiracin real y la potencial
(ETR/ETP); los valores varan de cero a uno (0-1), en donde 0 es un suelo con alta
deficiente hdrica y 1 un suelo con buena disponibilidad de agua. La
evapotranspiracin potencial se considera como la mxima cantidad de vapor de
agua que puede ser perdida por una superficie totalmente cubierta de vegetacin y
con suministro ilimitado de agua, y depende exclusivamente de las condiciones
meteorolgicas predominantes en cada zona. La evapotranspiracin real se define
como la cantidad de agua que sale hacia la atmosfera dependiendo del tipo de
vegetacin, condiciones edficas del lugar y la etapa de desarrollo del cultivo
(Ramrez, B., V.H; Gmez, M., O.F, 2005).
Manejo del cultivo
Antes de realizar el establecimiento del cultivo se realiz la toma de muestra del
suelo para conocer el contenido elemental de este en ese momento, despus de
haber realizado este procedimiento las plantas se establecieron en el sitio
definitivo sabiendo que los colinos tenan una altura de 15 cm, (Figura 1: vivero).
La distancia de siembra fue de 3m x 4m para una densidad de siembra de 833
plantas por hectrea.
Despus de haber realizado el trasplante en los diferentes sitios se hizo dos podas
de formacin una al primer mes de siembra y la otra al tercer mes que consisti en
eliminar los chupones ubicados por debajo de la formacin de la mesa de
produccin, (primera horqueta) para estimular el desarrollo de la planta y el
crecimiento de ramas. Figura 2.
El manejo de plagas y enfermedades se realiz de acuerdo a la determinacin de
umbral de accin, integrando las diferentes alternativas de control cultural,
biolgico, microbiolgico, fitoqumico, etolgico y qumico, en este se tuvo en
cuenta el uso de productos permitidos, pertenecientes a las categoras
toxicolgicas 3A y 3B, descartando el uso grupos qumicos como, carbamatos,
organoclorados, rganofosforados, piretroides y pirazoles.
Fertilizacin del cultivo: La fertilizacin se efectu con base en el manejo vigente
de la zona a una distancia de la planta de 20 cm, con una fertilizacin homognea.
Tutorado y amarre: se estableci al tercer mes de siembra el tutorado de la
plantacin, que consiste en el amarre vertical de las plantas por medio del amarre
de los tallos con una fibra de polipropileno calibre 12.000 que se sostiene de un
alambre galvanizado nmero 14, este va dirigido por tocones de guadua de 1.8 m
de largo, ubicados a 3m uno de otro, los cuales cruzan cada surco de la
plantacin, esto para evitar el volcamiento de las plantas, ya que estas tienen un

324

tallo voluble y altura que no se puede sostener por s mismo. En el lote se realiz
la diferenciacin de las etapas vegetativas y reproductivas en que se encontraban
las plantas para su correspondiente anlisis as:
V1: Propgulo: se tomaron las muestras de raz, tallo, y hojas, cuando el 51% de
las plantas alcanz 15 cm de altura.
R2: Inicio de floracin: se tomaron las muestras de raz, tallo, hojas, y flores
cuando el 51% de las plntulas florecieron
R2: Llenado de frutos: se tomaron las muestras de Raz, tallo, hojas, flores y
frutos cuando en el 51% de las plntulas haba un fruto con madures fisiolgica.
Despus de esta caracterizacin se procedi a elegir las mejores de acuerdo a
las siguientes caractersticas: (Tabla2).
Tabla 2: Fases y etapas de desarrollo a tener en cuenta para el muestreo y
anlisis de tejido vegetal:

Despus de esta caracterizacin se procedi a elegir las plantas de acuerdo a su

contenido de materia seca: en la etapa uno con un peso en base seca de 27.13 g,
y en fresco de 350 g, en la etapa dos 85.8 gr en seco y 568.5 en fresco, en la
etapa tres: 2364.8 g y en fresco 4081 g respectivamente, de esta planta se
tomaron cada una de las partes o muestras de la planta (raz, tallo, hojas, flores
o frutos) segn lo indic su etapa fenolgica; adems el muestreo por planta fue
destructivo.
Segn Angulo 2006, propone hacer muestreo en las etapas de vivero, inicio de
floracin, inicio de cosecha, pico de cosecha, y finalizando cosecha. Zuleta y

325

Baeza 2008 (Tabla 2) proponen analizar las mismas etapas en cada rgano de la
planta segn condiciones edficas y climticas de la zona.
Se envi 1 muestra por etapa de desarrollo (el cual contena las partes
anteriormente mencionadas segn su etapa fenolgica) para un total de 12
muestras en todo el proceso del proyecto. Los anlisis de cada etapa de desarrollo
fueron realizados de la siguiente manera:
El contenido de materia seca y nutrientes, se evalu tomando muestras completas
de los diferentes rganos de la planta (raz, tallo, hojas, flores, y frutos), en
diferentes etapas (Figura 1).
Determinacin de los niveles de vigor

Etapas y rganos a analizar en cada uno de los

muestreos

Figura 1: Determinacin de los niveles de vigor y etapas y rganos a analizar en cada uno de los
muestreos

VARIABLES A EVALUAR
Materia seca:
El secado de la muestra fue hecho en el laboratorio de Cenicaf, donde se utiliz
la siguiente metodologa: La muestra se sec a 65C durante 48 horas y luego se
moli para las otras determinaciones. Los anlisis se realizaron sobre la muestra
seca a 105C y los resultados se expresaron en base seca, restando el 100% del
total de la muestra entre la divisin del peso seco y el fresco, (% Humedad=
100%-(Peso seco/ peso fresco)).

326

Contenido de nutrimentos por unidad de biomasa:

El contenido elemental de la planta se realiz en el laboratorio de la siguiente
manera:
Preparacin de las muestras para el anlisis
Las muestras se limpiaron con un con atomizador y agua destilada; este lavado
fue necesario en el caso de material vegetativo rastrero u otro material que puede
estar en contacto con el suelo o salpicado por ste. (Carrillo, I. F. et al 1994).
No es recomendado tomar las muestras de rboles con deficiencias, ni con
crecimiento anormal, ni hojas quemadas, ni afectadas por insectos, ni escogidas
arbitrariamente. Deben ser al azar. Las muestras fueron tomadas de 8 a 11 a.m.
No debe ser en da con lluvia ni das con mucho sol.
Tomada la muestra debe identificarse y guardarse en una bolsa plstica limpia.
Evitar la contaminacin con polvo, agroqumicos y otros.
El envo al Laboratorio para su correspondiente anlisis debe ser lo ms pronto
posible. En caso de tener demoras ser preferible un presecado al sol o en horno
a baja temperatura (menos de 90C). Si se guarda la muestra hmeda, es mejor
desechar este muestreo y realizar otro nuevamente. (Carrillo, I. F. et al 1994).
Se secaron las muestras a 65C durante 48 horas. Cuando son quebradizas ya
estn secas.
Las hojas secas se muelen en un molino tipo Wiley con malla No. 20 de acero
inoxidable, o molino Cyclotec marca Tecator 1093 con malla de 0,5mm.
El material molido se empaca hermticamente en frascos de vidrio o de plstico,
se identifica y se guarda. (Carrillo, I. F. Et al 1994).
La determinacin de Nitrgeno se hace por el mtodo de semimicro-Kjeldahl. Las
determinaciones de Cl-1 y SO=4 por combustin en la bomba de Parr.
Las determinaciones de P, K, Ca, Mg, B, Fe, Mn, Zn, Cu y Al se realizan por va
seca despus de incinerar la muestra en una mufla a 475C. Las cenizas se
disuelven en una solucin cida en la cual se hacen las determinaciones por
colorimetra, absorcin atmica, emisin de llama o espectroscopia de plasma.
La solucin cida contiene los elementos minerales que se encuentran en la
muestra de hojas y la tcnica que se seleccione para su determinacin no debe
influir en los resultados. Por tal razn, colorimtrica o espectrofotomtricamente
los niveles encontrados deben ser equivalentes y comparables. (Carrillo, I. F. Et al
1994).

327

Correlacin entre la biomasa-nutrientes, y variables climticas:

Este se realiz de acuerdo a los resultados que present cada uno de los anlisis
enviados al laboratorio (anlisis de suelos y foliares), los cuales determinaron el
contenido elemental de cada muestra, en cada etapa de desarrollo y presentes en
el suelo.
En el momento de obtener cada uno de los anlisis realizados por el laboratorio de
Cenicaf, estos contienen informacin acerca de: fecha de muestreo, cultivo,
zona, peso seco, peso fresco, cantidad de nutrientes contenidos por rgano de la
planta, con esta informacin procedemos a determinar el contenido nutrientes por
rgano dividiendo el contenido de peso seco entre el fresco y ese resultado se le
resta al 100%, (total de la muestra).
Se multiplica el peso seco por el contenido que arroja el anlisis por elemento y se
divide entre 100 para as determinar la cantidad de gramos encontrados por parte
de la planta. Se realiza una tabla de datos mostrando la cantidad de producto
aplicado, y sus caractersticas (Dosificacin. porcentaje del elemento aplicado),
para conocer la cantidad elemental que absorbi la planta y la existente en el
suelo, relacionando este muestreo con el anlisis de suelos. Despus de conocer
estos resultados se procede a determinar la cantidad de elementos que consume
el cultivo.
TOMA DE LAS MUESTRAS:
Desde el momento de la siembra hasta su primer anlisis transcurri 1 mes, lo que
comprende la fase 1 de la investigacin, donde se realizaron los muestreos
destructivos de las 5 plantas correspondientes, para evaluar; la segunda fase de la
investigacin, se realiz a los 3 meses del primer anlisis, extrayendo el
equivalente a 5 plantas para su correspondiente muestreo y la tercera fase, se
realiz al quinto mes del primer anlisis contemplando cada uno de los
procedimientos necesarios para realizar los anlisis, mencionados anteriormente
extrayendo la misma cantidad de plantas (Tabla 2). Despus de haber realizado
los anteriores pasos, una cantidad de la de la planta es pesada e introducida a un
horno, con las especificaciones anteriormente descritas, para determinar su
porcentaje de materia seca.
Las condiciones climticas que se describen en la tabla 3, son condiciones de
ecofisiologa del cultivo (datos en los cuales UNISARC y Corpoica reportan la
misma informacin), acompaado de condiciones que se registraron desde la
siembra hasta el inicio de madures fisiolgica; como se puede observar durante
el desarrollo del cultivo se presentaron unas condiciones climticas, muy similares,
en cuanto a temperatura, humedad relativa, y altitud, entre las observadas y la
ecofisiologa del cultivo exceptuando la precipitacin ya que como se puede
observar se presenta un exceso hdrico de 1000 mm.

328
Tabla 3: Resumen de condiciones de ecofisiologa para el cultivo y condiciones climticas que se
presentaron durante el estudio.

Comportamiento de las variables climticas en el tiempo

En la figura 3 se presenta el comportamiento de la precipitacin, durante los 11
meses de duracin del proyecto, como se puede observar los meses de mayor
precipitacin noviembre y diciembre con 548 y 579 mm respectivamente, los de
menor precipitacin fueron los meses de septiembre de 2008 con 218 mm y
febrero de 2009 con 189 mm (los meses de mayo y marzo son meses en los
cuales se inici con toma de datos a partir del 9 del primer mes y el del segundo
mes termino el da 7 de este). La precipitacin acumulada durante los 11 meses
de estudio fue de 3348 mm, la precipitacin en condiciones normales en la zona
es de 2305 mm anuales (Ramrez, 2004), la diferencia fue de 1043 mm, esto
debido a que en esta poca ocurri el fenmeno La nia ms fuerte de los
ltimos 50 aos. Adems se observa la precipitacin diaria acumulada de cada
uno de los muestreos realizados durante este estudio: 1er muestreo: 941mm, 2do
muestreo: 1401 y el total de los 11 meses de muestreo, se destaca los 3348
milmetros registrados durante este tiempo (Figura 3). No se observa dficit
Hdrico alguno debido a la gran cantidad de lluvia presente en el periodo del
muestreo, el movimiento del agua en las plantas est regido por gradientes de
potencial hdrico. La integracin del concepto de potencial hdrico con las vas de
flujo correspondientes ha originado el concepto del continuo suelo-plantaatmosfera, que constituye un modelo til y unificado del flujo de agua desde el
suelo hasta la atmosfera (Figura 3).
Se asume que un valor inferior de I.H.S. de 0.6 como crtico, se asocia con
deficiencias hdricas para la planta, lo cual induce respuestas fisiolgicas
determinantes en el crecimiento y redistribucin de los nutrientes asimilados.
(Figura 3). En los meses de Junio, Julio y Agosto se presentaron los valores ms
bajos del ndice de humedad de suelo que llegaron a 0.8 aproximadamente al
contrario de los otros meses que la humedad se mantuvo por encima de 0.9, se
puede observar que no se presentaron deficiencias hdricas durante el estudio,
Ramrez en el 2004 reporta que para el cultivo de lulo, con suelo franco el valor

329

de lluvia critico en la etapa vegetativa es de 50mm mensuales para que el suelo

tenga un I.H.S. critico de 0.6, y para su etapa reproductiva de 90mm mensuales,
estos valores fueron sobrepasados durante el estudio. En cuanto al tiempo
trmico, la cantidad de temperatura acumulada para alcanzar un desarrollo con las
caractersticas de cada planta de estudio del primer muestreo fue de: 630.6 C,
Para el segundo muestreo: 1682.9 y desde siembra hasta el inicio de madures
fisiolgica fue de 2953,35C.
Comportamiento de la precipitacin durante el
desarrollo del estudio.

Balance hdrico.

Precipitacin acumulada

ndice De Humedad Del Suelo (I.H.S.).

Tiempo trmico acumulado

Figura 3: Comportamiento de la precipitacin durante el desarrollo del estudio, balance hdrico,
precipitacin acumulada, ndice de humedad del suelo, y tiempo trmico acumulado.

330

El conjunto de la oferta ambiental determina la forma como se acumula y

distribuye la materia seca, lo cual tiene incidencia directa sobre la absorcin y
distribucin de los nutrimentos:
ACUMULACIN Y DISTRIBUCIN DE LA MATERIA SECA:
La curva que describe el crecimiento de lulo la selva en trminos del incremento
en la materia seca total de la planta a travs del tiempo, sigue un modelo
exponencial, (Figura 4), el cual posee una etapa inicial de crecimiento lento,
seguida de una etapa de crecimiento acelerado, teniendo en cuenta el contenido
de agua de la planta en ese momento, ya que este es un componente mayoritario
en las plantas (aproximadamente entre un 80-90% del proceso fresco en plantas
herbceas) que afecta directa o indirectamente, a la mayora de los procesos
fisiolgicos. (Figura 4).
Acumulacin de la materia seca.

Peso fresco planta completa

Figura 4: Acumulacin de materia seca y peso fresco de la planta.

ABSORCIN DE NUTRIMENTOS:
En la zona de estudio el suelo present caractersticas fsico-qumicas de: textura
franca, pH: 5.2, N: 0.4%, contenido de materia orgnica: 10.8%, K: 0.11
meq/100g, Ca: 0.8 meq/100g, Mg: 0.2 meq/100g, P: 29 mg/kg, Fe: 180 mg/kg, Mn:
78 mg/kg, Zn: 7 mg/kg, Cu: 9 mg/kg, B: 0.04 mg/kg. Se debe tener en cuenta
adems de la informacin del anlisis de suelos la cantidad de nutrientes
aplicados por etapa de desarrollo (Figura 2) y la cantidad nutrimentos que fue
absorbido por la planta. De acuerdo a los resultados la cantidad de nutrientes
presentes en el suelo en el caso de N fue mayor lo aplicado que lo absorbido por
la planta, al igual que P, Zn, Cu, y B, en cuanto a K, Ca, Mg, Fe, y Mn las
cantidades aplicadas son insuficientes para lo absorbido por la planta (Tabla 4).

331
Tabla 4: Cantidad de nutrientes por hectrea presentes en la zona de estudio, con relacin a la
cantidad total de nutrientes aplicados durante las 3 etapas de desarrollo vs los encontrados en los
muestreos de plantas:

Elemento.
Nitrgeno total
P2O5
K2O
CaO
MgO
Hierro
Cobre
Zinc
Boro
Manganeso

Cantidad kg/ ha.

162
66.4
194
540
71,7
324
16.2
12.6
0.072
140

Cantidad aplicada
kg/ ha.
43,68452
30,96245415
4,603332278
7,406895428
2,178095422
0,020692931
0,4137414
1,360779464
0,547069732
0,013788066

Cantidad
absorbida por la
planta kg/ha.
37.6
3.7
45.6
32.2
4.7
0.16
0.028
0.08
0.03
0.03

Eficiencia.
%
86
11
100
100
100
100
6
5
5
100

La acumulacin de N, P, K, Ca, Mg, Fe, Mn, Zn, Cu y B, en la primera etapa de

crecimiento (fase lenta) que coincide con la etapa de crecimiento vegetativo inicial:
(Figura 5): Se puede observar que los elementos que en mayores cantidades toma
la planta para su fase vegetativa son el K, N y Ca, y en el caso de los elementos
menores se encuentra el Fe en cantidades ms elevadas frente a los otros
nutrimentos.
En la etapa de floracin se observa que la absorcin de N, K y Ca aument
considerablemente continuando con la tendencia del primer muestreo, y aument
el consumo de Mg. (Figura 5).
Generalmente la planta en la zona presenta deficiencias de Mg, en los anlisis
desarrollados durante el estudio (se puede observar que el consumo de Calcio
por la planta es elevado, mientras que el de Magnesio es reducido Figura 4 y 5), la
relacin que existe entre estos dos elementos, es directamente proporcional ya
que: El Magnesio se satura slo del 5-20% de la CIC comparado con el Ca que se
satura del 60-80% de la CIC en los suelos neutros. Para una buena nutricin se
necesita una relacin de Ca/Mg de 3/1 a 6/1 de la CIC respectivamente).
Al inicio de cosecha, que corresponde al tercer anlisis la planta continua con la
absorcin en grandes cantidades de N, K y Ca, disminuyendo el consumo de P y
Mg, y en cuanto a elementos menores aumenta el consumo de Fe y el de Zn.
(Figura 5).
La cantidad de elementos absorbidos en mayores cantidades a los 303 das
despus de siembra, como se mencion anteriormente son el Nitrgeno con 37.6
Kg/Ha, Potasio=45.6 Kg/Ha, Calcio=32.2 Kg/Ha despus el Magnesio con 4.7
Kg/Ha y el Fosforo con 3.7 Kg/Ha (Figura 4 y 5).
En cuanto a elementos menores tenemos el valor ms alto de absorcin con l:
Hierro: 0.16 Kg/Ha, en cantidades menores el Manganeso:0.03 Kg/Ha, Zinc: 0.08
Kg/Ha, Cobre:0.028 Kg/Ha, y Boro con 0.03 Kg/Ha (Figura 4 y 5), donde se puede
observar que al da 63 se refiere a etapa de vivero: primer etapa, el da 173 a

332

inicio de floracin: segunda etapa, y el da 303 a inicio de madurez fisiolgica

tercer etapa.
Absorcin de nutrientes por cada parte de la planta. Primer muestreo (vivero).

Absorcin de nutrientes por cada parte de la planta. Segundo muestreo

(Inicio de floracin).

Absorcin de nutrientes por cada parte de la planta. Tercer muestreo (Inicio

de madurez fisiolgica).

Figura 5: Absorcin de nutrientes por cada parte de la planta primer muestreo (vivero), segundo
muestreo (Inicio de floracin), tercer muestreo (Inicio de madurez fisiolgica).

En cuanto al consumo diario por cada planta del cultivo tenemos: Nitrgeno es de
0.188 gr/planta, de Fosforo 0.018 gr/planta, Potasio 0.225 gr/planta, Calcio 0.161
gr/planta y Magnesio 0.023 gr/planta, Hierro: 0.972 mg/planta, Manganeso: 0.999
mg/planta, Zinc: 0.912 mg/planta, Cobre: 0.914 mg/planta, Boro: 0.846 mg/planta
(Figura 6).

333

Figura 6: Absorcin diaria de cada planta por elemento.

2.2.21.3. Conclusiones
Lulo la selva es una planta que absorbe grandes cantidades de Potasio, Calcio
y Nitrgeno, y que va aumentando su consumo con el paso del tiempo, por
ende en el programa de fertilizacin a implementar se debe aplicar la cantidad
necesarias por la planta de estos elementos para aumentar su productividad,
sin olvidar que antes de iniciar con cualquier programa de establecimiento del
cultivo de lulo, se debe observar que el lote a sembrar tenga los niveles
ptimos de nutrientes, ya que este es el punto ms importante en cuanto al
programa de fertilizacin, para evitar intoxicacin en las plantas por la
aplicacin exagerada de fertilizantes y las deficiencias nutricionales.
Generalmente la planta en la zona presenta deficiencias de Mg, en los anlisis
desarrollados durante el estudio se puede observar que el consumo de Calcio
por la planta es elevado, mientras que el de Magnesio es reducido,

334

probablemente el lulo tiene mayor afinidad por la absorcin de Calcio y menor

por la de Magnesio debido a que es evidente la absorcin de la planta
referente a estos dos nutrimentos. Existe alta susceptibilidad de la planta a las
deficiencias de magnesio (la relacin que existe entre estos dos elementos, es
directamente proporcional; para una buena nutricin se necesita una relacin
de Ca/Mg de 1/1 a 6/1 de la CIC respectivamente).
El exceso hdrico que se presento pudo limitar seriamente el potencial
productivo al favorecer el incremento de enfermedades, influyendo tambin en
prdidas de nutrientes por escorrenta y lixiviacin.
De acuerdo a los resultados la cantidad de nutrientes en el caso de N fue
mayor lo aplicado que lo requerido por la planta, al igual que P, Zn, Cu, y B; en
cuanto a K, Ca, Mg, Fe, y Mn las cantidades aplicadas son insuficientes para lo
absorbido por la planta, por ende la planta debe tomarlo del suelo (Tabla 4).
2.2.21.4. Recomendaciones
Se recomienda la realizacin de ms investigaciones sobre el desarrollo
vegetativo y productivo de lulo hibrido la selva (Solanum quitoense lam x
Solanum hirtum) en las condiciones ambientales regionales, que conlleven a
aumentar la produccin para la zona.
Evaluar zonas poco representativas de la zona central cafetera que tengan
condiciones edafoclimticas, semejantes a las regiones productivas de este
cultivo.
Igualmente se recomienda, la contextualizacin del desarrollo de produccin en
la cadena productiva para esta especie de acuerdo al escenario productivo
mundial.
Continuar con las dos siguientes etapas, para el desarrollo del proyecto.
Antes de iniciar con el establecimiento del cultivo de lulo tener en cuenta la
cantidad de nutrientes que contiene el suelo.
Para realizar el establecimiento del cultivo se debe verificar que el suelo tenga
las condiciones necesarias para su establecimiento de acuerdo a la fertilidad
del suelo, y demanda ambiental, en el caso de no presentarse estas
condiciones se debe realizar un plan de fertilizacin basado en la cantidad
exacta de nutrientes que requiere el cultivo por etapa de desarrollo (Tabla 4).
Para suplir la necesidad de P en lulo la selva se recomienda aplicar un
fertilizante foliar, con las especificaciones que requiere el cultivo segn su
etapa de desarrollo (Tabla 4 y Figura 5 y 6).
Con base a los requerimientos nutricionales del cultivo en cada una de las
etapas de desarrollo, se propone un plan de fertilizacin mensual para esta
zona, (Tabla 5).

335

Tabla 5: Plan nutricional de lulo la selva clon p 32 (Solanum quitoense Lam x Solanum hirtum)
propuesto para la zona cafetera por planta.

2.2.21.5. Bibliografa
Ramrez, B., V.H; Gmez, M., O.F, 2005. Variaciones en el ndice de humedad del suelo debido al
fenmeno de El Nio y La Nia (ENSO) en el Departamento de Risaralda (Colombia).
Investigaciones de Unisarc. Volumen 3 No. 1: Pg. 8-15.
Henao T., M. C. 1997. Caracterizacin de algunos suelos derivados de cenizas volcnicas de la
zona cafetera centra de Colombia P 57-77.
Carrillo, I. F. Et al 1994. Manual de laboratorio para anlisis foliares. P 52.
Potash & Phosphate Institute of Canada (PPIC), Manual Internacional de Suelos 1994.
Zuleta, O- J. 2006. Produccin limpia de lulo. Corporacin Universitaria Santa Rosa de Cabal.

2.2.22. Evaluacin del efecto de metabolitos intermedios a partir de

extractos vegetales sobre antracnosis (Colletotrichum spp) en el
cultivo de lulo la selva (Solanum quitoense x Solanum hirtum) 40
Objetivo del proyecto (3): Desarrollar y evaluar estrategias de biocontrol de las
plagas y enfermedades ms importantes
2.2.22.1. Marco referencial
La antracnosis (Colletotrichum spp) es un problema limitante en el cultivo de lulo,
que puede afectar hasta el 70% de la produccin cuando las condiciones de clima
son favorables y las prcticas de manejo son inadecuadas, por eso es importante
40

Leidy Milena Romero Diaz

Juan Pablo Valencia Carvajal
Jess Zuleta Ospina I.A

336

desarrollar nuevas alternativas de manejo de la enfermedad. El proyecto evalu el

efecto de metabolitos intermedios a partir de extractos vegetales
sobre
antracnosis en plantas de lulo La Selva (Solanum quitoense x Solanum hirtum) y
los productos fueron: un fungicida (QBL-FUN) y el regulador fisiolgico (QBLQUANTUM), relacionando la severidad de la enfermedad con respecto a las
condiciones climticas (humedad relativa, temperatura y precipitacin). El estudio
se desarroll durante los meses de junio a diciembre de 2007 en el municipio de
Palestina Caldas, sus objetivos fueron evaluar el efecto de los tratamientos sobre
el comportamiento de la enfermedad con respecto a las condiciones climticas
dadas durante el desarrollo del proyecto y el rendimiento de la produccin en cada
uno de los tratamientos. Se utiliz un diseo en bloques completos al azar con
cinco tratamientos y cuatro repeticiones. Los tratamientos fueron: T1 Testigo
(score); T2 Testigo + FUN; T3 FUN; T4 FUN + QUANTUM y T5 Testigo +
QUANTUM. Los resultados encontrados no generaron diferencias significativas
entre ninguno de los tratamientos con respecto a la severidad de la enfermedad y
los rendimientos entre los tratamientos; las opciones tecnolgicas evaluadas se
compararon con molculas qumicas especficas para antracnosis. El anlisis
anterior permite decir que el T2 fue levemente superior al tratamiento testigo, que
representa el manejo tradicional de antracnosis. En el tratamiento T5 la presencia
de la enfermedad no afect los rendimientos, sino que la planta soport el ataque
y present uno de los mejores rendimientos. El uso de QBL-fun y QBL-quantum
genera una alternativa viable para el problema de antracnosis.
El lulo Solanum quitoense, es una fruta que ha tenido gran demanda y aceptacin
en el pas; por esta razn es necesario desarrollar opciones tecnolgicas que
permitan mejorar los rendimientos de lulo y bajar los costos de produccin,
hacindolo as rentable para el agricultor, amigable con el ambiente y a su vez
ofrecer un producto de buena calidad al consumidor. Sin embargo, este cultivo es
afectado por problemas causados por fitopatgenos en el cual se destaca
Colletotrichum spp hongo que ocasiona la antracnosis, enfermedad comn y
destructiva.
La antracnosis (Colletotrichum spp) es uno de los problemas ms limitantes del
cultivo de lulo en la zona cafetera, que puede llegar a afectar hasta el 70% de la
produccin cuando las condiciones de clima y las prcticas de manejo son
inadecuadas, por eso es importante desarrollar nuevas tcnicas de manejo de la
enfermedad. Es un patgeno que se ha convertido en un factor limitante para la
produccin de lulo, cada vez con mayor severidad, para ello es necesario buscar
nuevos mtodos y herramientas para el control de patgenos como la antracnosis,
realizando una investigacin de tipo explicativa del efecto de un fungicida (QBLFUN) y un producto regulador fisiolgico (QBL-QUANTUM), sobre la enfermedad
producida por el hongo Colletotrichum spp. en plantas de lulo La Selva (Solanum
quitoense x Solanum hirtum).
Teniendo en cuenta la tendencia de los mercados, especialmente los de
exportacin y conociendo que el lulo es una fruta en proceso de posicionami ento
en mercados especializados que requieren de productos inocuos, esta

337

investigacin contribuye al manejo agronmico en el marco de una agricultura

limpia y competente, por eso se busca evaluar el efecto de metabolitos
intermedios a partir de extractos vegetales sobre antracnosis (Colletotrichum spp)
en el cultivo de lulo La Selva (Solanum quitoense x Solanum hirtum) para
determinar la severidad de la enfermedad con respecto a las condiciones
climticas (humedad relativa, temperatura y precipitacin), evaluar el efecto de los
tratamientos sobre el comportamiento de la enfermedad a travs del tiempo
durante el desarrollo del proyecto y el rendimiento de la produccin en cada uno
de los tratamientos.
Este trabajo se realiza como propuesta tecnolgica eficaz e inocua para el manejo
de antracnosis en la produccin de lulo La Selva.
El estudio fue realizado en la finca Bombay en el municipio de Palestina Caldas,
las condiciones climticas durante el ensayo fueron: una precipitacin de 2640 mm
entre Mayo del 2006 y Abril del 2007 (Registro pluviomtrico de la finca Bombay),
temperatura de 20.9C, humedad relativa de 69.4%, brillo solar de 1679 horas/ao
(Estacin meteorolgica Naranjal, vereda Naranjal, municipio de Chinchin
Caldas, CENICAFE, 2007), msnm de 1350 m, el terreno circundante es onduladomontaoso, pendiente de 41%, textura franco-arenosa, pH de 4.8, y la estructura
del suelo es granular (BIOTEC, UNISARC, 2007). La vocacin agrcola de la zona
de estudio es cafetera, sus cultivos anteriores fueron caf y pltano, en la
actualidad esta zona est siendo utilizada para la produccin de lulo La Selva con
un tipo de tecnologa bajo parmetros de produccin limpia.
Los factores ambientales juegan un papel preponderante en el desarrollo de la
epidemia. La duracin de una lmina de agua tiene una influencia directa sobre la
germinacin, infeccin y crecimiento de Colletotrichum sp en los cultivos
tropicales. Una alta humedad relativa influencia la esporulacin, permite la
germinacin. Despus de haber germinado, producen un apresorio y una clavija
de penetracin y se introducen directamente en los tejidos de su hospedero. La
infeccin puede ocurrir en la ausencia de una superficie hmeda. La lluvia es uno
de los factores que influencian fuertemente la dispersin del patgeno.
(http://www.biblioteca.senavirtual. edu.co.2007)
2.2.22.2. Metodologa
El presente trabajo se realiz en un cultivo de lulo La Selva en la finca Bombay
vereda el Higuern en el municipio de Palestina Caldas. Esta finca tiene un rea
de 9 hectreas, est ubicada a 1320 msnm, temperatura de 18C, humedad
relativa de 85%, una latitud de 4 54 54 N, una longitud 753748 w. La
informacin climtica se obtuvo de la estacin meteorolgica Naranjal ubicada en
la vereda Naranjal, del municipio de Chinchin Caldas, 2007, propiedad de la
Federacin Nacional de Cafeteros de Colombia.
Plantas de lulo la selva, QBL-FUN, QBL-QUANTUN, Score, Inex A, tijera
podadora, navaja, bistur, GPS, bolsas plsticas, canastillas, aspersora,

338

computador, libreta de campo, Cosmoaguas, Cosmo flux 411 f, lupa, cmara

digital, test para anlisis de pH y dureza del agua, pluvimetro y plstico.
Se realiz una investigacin de tipo explicativa del efecto de diferentes metabolitos
intermedios (un fungicida (QBL-FUN) y un producto regulador fisiolgico (QBLQUANTUM)) sobre la enfermedad de antracnosis producida por el hongo
Colletotrichum sp en plantas de lulo La Selva (Solanum quitoense x Solanum
hirtum).
El diseo experimental fue en bloques completos al azar con cinco tratamientos y
4 repeticiones, la poblacin total del experimento fue de 200 plantas y cada
unidad experimental const de 10 plantas. El rea de cada parcela fue de 37.5
m, el de los bloques de 187.5 m y el rea del experimento de 750 m, a una
distancia de 2.5 m entre surcos y 2.5 m entre plantas en el sistema de tringulo.
Los tratamientos utilizados en el proyecto fueron los siguientes: (ver tabla 1).
Tabla 1. Descripcin de los tratamientos utilizados en el proyecto
Tratamient
o
1
2
3

Dosis

Producto

0.2 l/ha
0.2 l /ha + 2 l/ha
2 l/ha

2 l/ha +0.5 l/ha

0.2 l /ha + 0.5 l/ ha

Testigo (score)
Testigo + FUN
FUN
FUN +
QUANTUM
Testigo +
QUANTUM

Los tratamientos propuestos fueron el resultado de la aplicacin de las dosis

comerciales recomendadas por los fabricantes de los productos y algunas mezclas
de productos buscando la interaccin y el efecto sobre la enfermedad de la
propuesta orgnica y qumica.
Los procedimientos realizados fueron los siguientes:
Instalacin del ensayo: el presente trabajo se instal en un cultivo comercial de
lulo La Selva con 5 meses de edad y que se encontraba en la fase de desarrollo II
que va de inicio de floracin a inicio de cosecha, en el momento el cultivo estaba
en llenado de fruto y con presencia de la enfermedad (antracnosis) causada por
Colletotrichum spp.
Utilizando el diseo experimental descrito anteriormente, cada parcela se identific
con su respectivo tratamiento y repeticin (figura 1). Se hicieron dos aplicaciones
continuas de cada uno de los tratamientos con un intervalo de 15 das y a partir de
stas, dos aplicaciones con intervalo de un mes.

339

Figura 1. Identificacin de las unidades experimentales

Variables a evaluar
Severidad vs condiciones climticas: humedad relativa, temperatura y
precipitacin. Se realizaron evaluaciones quincenales de severidad de la
enfermedad, informacin que fue registrada en un formato (ver tabla 2).
La metodologa empleada consisti en la relacin entre la severidad con las
condiciones climticas de la zona de estudio, tomando como base los datos
reportados por la estacin meteorolgica Naranjal.
Comportamiento de la enfermedad: en cada uno de los tratamientos a travs
del tiempo y durante el desarrollo del proyecto se procedi a hacer una evaluacin
fitosanitaria quincenalmente, para establecer el comportamiento de los diferentes
tratamientos, contando el nmero de frutos de la posicin a evaluar en la planta, la
severidad de acuerdo al diagrama estndar del grado de severidad de antracnosis.
Despus de evaluadas todas las plantas se midi el porcentaje de severidad por
tratamiento, aplicndose la frmula anteriormente descrita. La informacin
obtenida se registr en el siguiente formato (Tabla 2).
Tabla 2. Formato de registro de informacin sobre la severidad de Colletotrichum
gloeosporioides en el cultivo de lulo La Selva
Parcela

Tratam iento

Plantas
evaluadas

Posicin
evaluada

No. De
racim os

Frutos
totales

Frutos
evaluados

Severidad

Anlisis de la informacin: los datos fueron sometidos a un anlisis de varianza

y las comparaciones se hicieron mediante la prueba de Tukey. La informacin se
corri en el programa S.A.S y los resultados fueron comparados entre los
tratamientos y estudios previos sobre manejo de antracnosis con tecnologas
limpias.
Determinacin de la lnea base: La metodologa descrita de toma y registro de
levantamiento de informacin fitosanitaria se aplic para establecer la lnea base
contando el nmero de frutos de la posicin a evaluar, de all se sac el 10% de

340

stos y se registr la incidencia y severidad, despus de realizada la evaluacin se

procedi a calcular el porcentaje de incidencia y severidad.
VARIABLES EVALUADAS
Incidencia y severidad de la enfermedad con respecto a las condiciones
climticas: la variable incidencia slo se registr para efecto del levantamiento de
la lnea base, mientras que la severidad fue registrada quincenalmente durante el
desarrollo del proyecto.
La evaluacin de la severidad parti de lo encontrado en la lnea base que
correspondi a la primera evaluacin y es el indicador de la situacin existente
antes de empezar a aplicar cada uno de los tratamientos
Se realiz una correlacin entre la severidad y los factores climticos tales como
temperatura, humedad relativa y precipitacin (tabla 3).
El hongo es favorecido por elevada humedad relativa (ms de 82%), alta
precipitacin y temperaturas oscilantes entre 22 y 32 grados centgrados.
(Redondo, 2003).
De los tres elementos del clima correlacionados con la severidad, la precipitacin
fue la que mayor correlacin present en todos los tratamientos y la temperatura
fue la que menor correlacin present (Tabla 3).
Se puede observar que tanto la humedad relativa como la precipitacin fueron
directamente proporcional a la severidad, por el contrario la severidad se comport
de manera inversa frente a la temperatura siendo los tratamientos 3 y 4 los que
tuvieron mayor correlacin con la precipitacin lo cual indica que aunque el
anlisis estadstico no mostr diferencia significativa entre los tratamientos
evaluados, en los tratamientos 3 y 4 la accin de los productos QBL-FUN y QBLQUANTUM se pudo ver afectada por altas precipitaciones.
Se puede concluir que es una alternativa innovadora para el manejo de
antracnosis (Colletotrichum spp) en lulo La Selva (Solanum hirtum por Solanum
quitoense), buscando inocuidad alimentaria del producto sin comprometer los
rendimientos del cultivo, como se puede observar que todos los tratamientos
incluyendo el testigo comercial se comportaron con una supresin igual al no
encontrar diferencias estadsticas significativas. Por lo anterior se concluye que el
uso de metabolitos intermedios son alternativas viables para facilitar el manejo de
la enfermedad en una agricultura limpia.
El anlisis de varianza indica que no hay diferencia estadstica entre los
tratamientos ni entre los bloques.
El soporte de salida del software estadstico SAS se hizo una transformacin de
los datos, se sac su raz cuadrada, pero los resultados no cambiaron.

341

Se concluye que segn este anlisis no existe evidencia estadstica que exista
efecto de los tratamientos sobre la variable produccin.
Tabla 3. Correlacin entre severidad y factores climticos
Severidad

TRATAMIENTOS

Temperatura

Humedad
Relativa (%)

Precipitacin
(mm)

Tratamiento 1 (Testigo (score))

-0,85100579

0,83503367

0,73930083

Tratamiento 2 (Testigo + FUN)

-0,86346958

0,75383155

0,80980892

Tratamiento 3 (FUN)

-0,72009829

0,50122331

0,78814739

Tratamiento 4 (FUN + QUANTUM)

-0,70286212

0,51962224

0,91082165

-0,844962

0,77821445

0,6632279

Tratamiento 5 (Testigo+QUANTUM)

Grafica 1. Rendimiento durante el ciclo de produccin de lulo La Selva

Kg/Ha en 5 tratatamientos durante el ciclo de producin

de lulo la selva
44000
42000
40000
38000
36000
34000
32000
30000

C
om

er
c

ia
l

Kg/ha

El anlisis que se hace muestra las variantes en rendimiento con relacin a tres
supuestos as:
a)

Incremento o decremento de la produccin con relacin al tratamiento testigo:

el tratamiento 2 (Testigo + QBL fun) y el tratamiento 4 (Testigo + quantum)
muestran que sus rendimientos estuvieron por debajo de lo reportado por el
tratamiento testigo (score), siendo insignificante para T2 y significativo para el
T4, mientras que el comportamiento de los tratamientos T3 (QBL Fun) y T5
(Testigo + quantum) en cuanto al rendimiento fue levemente superior, sin
ninguna significancia.

b)

Incremento de la produccin con relacin al tratamiento de ms bajo

rendimiento: el ms bajo rendimiento se obtuvo con el tratamiento 4 y el
reporte de los T1, T3 y T5 fueron 11.61, 16.43 y 15.96 respectivamente son
significativamente importantes.

342

c)

Incremento o decremento de la produccin con relacin a una parcela

comercial: los resultados obtenidos en este anlisis es muy similar a lo
expresado con relacin rendimiento obtenido en el T4

Teniendo en cuenta que no hubo diferencias significativas del rendimiento entre

los tratamientos, el anlisis anterior permite decir que los T3 y T5 fueron
levemente superiores por encima del tratamiento testigo, el cual representa el
manejo que los productores le hacen tradicionalmente a antracnosis en el cultivo
de lulo en la zona de estudio.
El uso de QBL fun y QBL quantum genera una alternativa de manejo viable para el
problema de antracnosis ya que para el caso de T5 donde la enfermedad present
la severidad ms baja, tambin coincide con los mejores rendimientos, algo muy
similar pas con el tratamiento T3, a diferencia que la presencia de la enfermedad
no afect los rendimientos, sino que la planta soport el ataque y present el
segundo mejor rendimiento.
Se puede decir que el efecto sinrgico entre el Qbl Quatun y la molcula qumica
se potencializaron, lo que vio reflejado en que fuera el tratamiento de ms baja
severidad de la enfermedad y ms altos rendimientos.
2.2.22.3. Conclusiones
Todos los tratamientos controlan problemas de Colletotrichum sp en lulo La Selva,
lo cual es muy interesante si se tiene en cuenta que el tratamiento 1 es control
qumico y que no existe un testigo absoluto, lo cual indica que el QBL-FUN y el
QBL-QUANTUM son productos para tener en cuenta dentro de un manejo
integrado de hongos fitopatgenos.
QBL FUN Y QBL QUANTUM se convierten en una gran opcin para estructurar
nuevos paquetes tecnolgicos con nfasis en produccin limpia.
Este trabajo es muestra que el uso de extractos vegetales como QBL FUN Y QBL
QUANTUM son una buena opcin para el tratamiento de problemas fitosanitarios
como es la antracnosis (Colletotrichum sp) corroborando el trabajo realizado por
Veloza et al, publicado en el IV Seminario Nacional de Frutales de Clima Fro
Moderado 2002 donde hicieron un estudio sobre el manejo biolgico mediante el
uso de extractos de plantas para el control de la pudricin del fruto (Botrytis
cinerea) en mora (Rubus glaucus).
Las condiciones climticas que se presentaron durante el estudio, pudieron haber
afectado los resultados de la investigacin.
2.2.22.4. Bibliografa
Antracnosis. 2007. http://www.biblioteca.senavirtual.edu.co

343
BIOTEC, Corporacin para el Desarrollo de la Biotecnologa y UNISARC, Corporacin Universitaria
de Santa Rosa de Cabal. Monitoreo y registro de condiciones edafoclimticas en fincas de
productores e implementacin de calendarios agrcolas para fortalecer la agricultura especfica por
sitio en lulo y mora. 2007
REDONDO, A. 2003. Tecnologas sostenibles para el manejo de la antracnosis (Colletotrichum
gloeosporioides (penz.) penz. & sacc) en papaya (Carica papaya) y mango (Mangifera indica).
Boletn
tcnico
N
8.
Valledupar.
http://www.agronet.gov.co/www/docs_si2/Manejo%20de%20la%20
antracnosis%20en%20mango.pdf .2007.
VELOZA. 2002. Manejo biolgico mediante el uso de extractos de plantas de la pudricin del fruto
(Botrytis cinerea) en la mora (Rubs glaucus) en condiciones de laboratorio. IV Seminario Nacional
de Frutales de Clima Fro Moderado. 2002.
ZULETA, J. Ramrez, V y Betancourt, M. Antracnosis o pudricin seca del fruto. Cartilla produccin
limpia de lulo. Pg 39. Diciembre 2003.

2.3.

RESULTADOS TRANSVERSLAES

2.3.1. IMPLEMENTACIN DE UN LABORATORIO DE PRODUCCIN

DE PLANTAS IN VITRO DE LULO A BAJO COSTO CON
PRODUCTORES.
Objetivo del proyecto (5): Fortalecer la capacidad de agricultores y tcnicos en
el manejo integrado de los cultivos de mora y lulo y desarrollar capacidades de
innovacin en los actores de las cadenas productivas.
Se implement en el municipio de Beln de Umbra, departamento de Risaralda
(Colombia), un laboratorio de produccin de plantas in vitro de lulo a bajo costo
con el objetivo de capacitar y empoderar a pequeos agricultores en esta tcnica
para que ellos sean sus propios proveedores del material de siembra para
establecer sus cultivos. En este sentido, se realizaron visitas a cada una de las
asociaciones que mostraron inters, con el fin de seleccionar los grupos de
productores para implementar el laboratorio. Despus de evaluar la capacidad
organizativa y compromiso de sus asociados, se seleccionaron ASLUBEL en
Beln de Umbra y ASOLULOS en Santa Rosa de Cabal.
En los laboratorios de CIAT se ajust el protocolo de propagacin para que
pudieran ser aplicados en condiciones rurales a menor costo, se capacit personal
de la organizacin para que fueran ellos los que generaran la produccin masiva y
se hizo seguimiento a sus actividades. Con la estrategia implementada en este
proyecto se logr disminuir los costos de inversin en equipos equivalente a un
83%, pasando de $25.850.000 (pesos) a $4.350.000. De igual forma se redujo el
costo de infraestructura locativa, pues la Alcalda otorg en comodato el local para
el laboratorio. Fue necesario invertir $2.000.000, en adecuaciones elctricas e
hidrulicas. Esto permanecer vlido siempre y cuando la Alcalda contine
apoyando a la asociacin de productores.

344

Se construy una Cmara de flujo laminar, partiendo del diseo que CIAT ha
usado en la implementacin de laboratorios rurales de cultivo de tejidos (Roosevelt
Escobar y su equipo). El costo de esta cmara de flujo laminar fue $980.000
pesos, mientras que el costo de una cmara comercial es de $4.000.000 (pesos) o
ms. Esto representa una reduccin en costos del 75%.
El crecimiento proyectado de la demanda industrial de lulo, y el surgimiento de
hbridos interespecficos para el consumo en fresco, pronostican una demanda
alta de material de siembra propagado clonalmente. La oferta de materi al de
siembra actual es reducida, indicando que la viabilidad del laboratorio aqu
fortalecido puede estar asegurada. Obviamente, muchos factores fuera del control
de los investigadores influyen en la viabilidad comercial de este negocio. No
obstante, con la tecnologa actual implementada en el proyecto se da inicio a una
actividad que tiene el potencial para crecer en el futuro cercano.
El laboratorio establecido en Beln de Umbra es una alternativa de bajo costo. El
aporte en Infraestructura ofrecido por la Alcalda Local ha permitido el desarrollo
del laboratorio en condiciones apropiadas y tcnicamente viables. El laboratorio se
encuentra en produccin; sin embargo an quedan varios aspectos por ajustar y
mejorar, lo cual se lograr con el acompaamiento por parte del CIAT, u otra
entidad, hasta lograr una mayor autonoma en la produccin.
Los detalles del establecimiento del laboratorio se muestran en el Anexo 2
Implementacin de un laboratorio de produccin de plantas in vitro de lulo a bajo
costo con productores.
2.3.2. SOCIALIZACIN DEL PROYECTO Y FORTALECIMIENTO DE
CAPACIDADES
Objetivo del proyecto (1): Con la participacin de los agricultores, empresas
comercializadoras y procesadoras seleccionar materiales lite de lulo y mora, con
criterios de adaptabilidad, resistencia a enfermedades, productividad y aceptacin
del mercado.
Objetivo del Proyecto (5): Fortalecer la capacidad de agricultores y tcnicos en
el manejo integrado de los cultivos de mora y lulo y desarrollar capacidades de
innovacin en los actores de las cadenas productivas
Con los resultados de este proyecto se fortalecieron las capacidades del recurso
humano involucrado, mediante la generacin y divulgacin del conocimiento
cientfico, tecnolgico y de innovacin. Se logr la apropiacin de algunas
tecnologas generadas que permitirn mejorar los sistemas productivos de mora y
lulo, y en consecuencia la calidad de vida de los actores involucrados en estas
cadenas.

345

Se realizaron 33 eventos de capacitacin y divulgacin de los resultados en los

cuales participaron alrededor de 1713 personas. Se cuenta con guas
metodolgicas para la produccin limpia de lulo y mora. Se desarrollaron 36
trabajos de investigacin como tesis de pregrado, maestra y doctorado, 20
publicaciones entre artculos cientficos (Algunos se encuentran en proceso de
publicacin), cartillas, guas y pster.
Algunas metodologas generadas fueron: umbrales de accin, caracterizacin
organolptica con fines de mercado agroindustrial, escalas y grficos de severidad
para las principales enfermedades de lulo, mtodos de propagacin vegetativa de
mora de castilla, Caracterizacin de la resistencia de especies silvestres de
solanceas a nematodos y fusarium, mtodos de injertacin, afinidad y
compatibilidad de naranjilla de jugo injertada en portainjertos silvestres,
caracterizacin de resistencia en campo de naranjilla de jugo injerta en patrones
silvestres, seleccin de una nueva variedad de naranjilla de jugo, caracterizacin
fisicoqumica de materiales promisorios de naranjilla y manejo de nutrientes por
sitio especfico en naranjilla, entre otros (Anexo 3. Estadsticas eventos y talleres
Fontagro mora lulo).
2.3.3. SISTEMAS DE INNOVACIN FUNCIONALES PARA LAS
CADENAS DE LULO Y MORA DE COLOMBIA Y ECUADOR
ESTABLECIDOS, CONSOLIDADOS Y FORTALECIDOS
Objetivo del proyecto (6): Establecer y fortalecer sistemas de innovacin para el
desarrollo de los cultivos de mora y lulo en Colombia y Ecuador.
La implementacin de sistemas de innovacin funcionales para las cadenas de
lulo y mora de Colombia y Ecuador, se realiz utilizando las metodologas de
Gestores de Innovacin en la Agroindustria Rural GIAR, (Conocimiento del
Mercado, la Brjula para la Innovacin), la cual se enfoca en mejorar procesos de
innovacin dentro de las cadenas productivas con la participacin de
representantes de los actores involucrados. La otra metodologa usada fue Diseo
de Estrategias para Aumentar la Competitividad de Cadenas Productivas con
Productores de Pequea Escala que tiene como objetivo construir de forma
participativa con los diferentes actores de la cadena un plan de accin estratgico
para aumentar la competitividad.
La primera metodologa sirvi como base para constituir un grupo representativo
de los actores por cadena productiva seleccionada, los cuales estuvieran
interesados en participar del proceso y tener iniciativa por aprender cosas nuevas.
Esto les permiti adquirir conceptos bsicos sobre cadenas de valor, as como
habilidades para implementar procesos de innovacin. La segunda fue la
herramienta que permiti realizar un proceso estructurado de planificacin dentro
de la cadena donde la participacin activa la lider el grupo representativo
seleccionado de la cadena.

346

En Colombia se trabaj con los productores de lulo de la asociacin ASLUBEL en

Beln de Umbra (Risaralda) y la asociacin APROMORA en la vereda
Montecristo (Pitalito, Huila). Se inici con la identificacin de los principales
problemas en las cadena productivas, los cuales fueron a) dbil gestin
empresarial, b) poca productividad y c) malas prcticas en poscosecha). Una vez
identificadas estas limitantes se sigui con los procesos de la metodologa para
lograr la implementacin del sistema. El xito se bas en el conocimiento previo
del socio local sobre la metodologa, el apoyo durante el proceso por parte del
socio local a los beneficiarios, el inters por aprender y aplicar los conocimientos
en su vida cotidiana por parte de los usuarios, el aporte en especie por parte de
los beneficiarios y la apropiacin total de la metodologa por parte del grupo GIAR.
En Ecuador se trabaj con las siguientes asociaciones de productores: ASOFRUT,
YANAHURCO, EL BELN, LA AMISTAD, AGROVIDA, SANTA LUCA y como
empresa transformadora con PLANHOFA. Los problemas identificados fueron: a)
altos costos de produccin, b) bajo acceso a capital, c) dbil calidad en el servicio
de asistencia tcnica, d) inestabilidad de los precios de venta en el mercado y e)
no existe una organizacin empresarial de productores de mora. Una vez
identificadas estas limitantes se sigui con los procesos de la metodologa para
lograr la implementacin del sistema. El xito se bas en el conocimiento previo
del socio local sobre la metodologa, el apoyo durante el proceso por parte del
INIAP a los beneficiarios, el acompaamiento de personal del ministerio de
agricultura y otras instituciones pblicas, y la apropiacin de productores lderes y
comercializadores locales.
Esta experiencia caus gran impacto porque pudo generar en poco tiempo (2
aos) procesos de autogestin, de co-innovacin entre los actores y toma de
decisiones por parte de las asociaciones tanto en Colombia como en Ecuador. Los
detalles del proceso se muestran en el Anexo 4 Gestores de Innovacin en la
Agroindustria Rural-GIAR.
2.3.4. LNEA BASE LEVANTADA PARA LOS CULTIVOS DE MORA Y
LULO EN COLOMBIA Y ECUADOR
Se levantaron las lneas base en Colombia y Ecuador para los cultivos de mora y
lulo, con el objetivo de conocer el diagnstico situacional de los mismos. Esto
permiti al final del proyecto comparar los impactos generados por las nuevas
tecnologas. (Anexo 5: Lnea base de la mora de castilla en Ecuador y Anexo 6:
Lnea base mora lulo en Colombia).

347

2.3.5. ANLISIS ECONMICO PARA LOS CULTIVOS DE MORA Y

LULO
2.3.5.1. Anlisis econmico del cultivo de naranjilla (Solanum
quitoense lam.)
Anlisis econmico de alternativas de manejo integrado
Se hizo con el objetivo de seleccionar con base al mejoramiento de la
productividad y calidad de la fruta. Los resultados mostraron que con la
introduccin de las nuevas tecnologas se registr la mayor productividad en el T5:
Injerto S. arboreum (variedad silvestre de la zona), que present resistencia a
enfermedades como Fusarium oxysporum y nematodos del gnero Meloidogyne
incgnita. Se registraron los mayores rendimientos, con un manejo rotativo en las
aplicaciones para el control de lancha (Phytophthora infestans), podas
fitosanitarias y las aplicaciones rotativas de productos de baja toxicidad, para el
control de perforador del fruto aplicando Bacillus thurigensis, y Abamectina cada
15 das, obteniendo as una productividad de 18010,0 Kilos por/ha.
Se determin que el tratamiento T1 (Solanum hirtum,+ control completo) y T5
(Solanum arboreum + control completo) obtuvieron mayores beneficios netos y
tasas de retorno marginal superiores al tratamiento T9 testigo del agricultor, en el
que se emplearon varios productos altamente txicos y residuales para el control
de plagas, lo que tambin es importante considerar, ya que afectan de manera
importante la salud de productores y consumidores y deterioran la flora y fauna
amaznicos. (Anexo 7. Anlisis Econmico Cultivo de Naranjilla, Ecuador).
Manejo de la nutricin del cultivo de naranjilla (Solanum quitoense
lam.) en las zonas de produccin de la regin amaznica y
noroccidente de Pichincha 41.
Con este anlisis, el cual toma nicamente los costos que varan en cada
tratamiento, los cuales en esta investigacin fueron: los insumos de campo y la
mano de obra utilizados en este cultivo en funcin de rendimiento, se determin
que el tratamiento con el beneficio neto ms elevado en las dos localidades fue el
T8 : Completo + Encalado, con un beneficio neto de $16412,6 dlares en la (L1Saloya) y $13786,4 dlares en la (L2-El Triunfo); el tratamiento con el beneficio
neto ms bajo en las dos localidades fue el T2: NKCaSMg, con un beneficio neto
de $4053,6 dlares en la (L1) y $2295,1 dlares en la (L2), todo esto proyectado
por hectrea; esta diferencia entre localidades se debe a que el rendimiento total
en la (L1) fue 14 % ms que en la (L2).

41

Resumen de tesis previo a la obtencin del ttulo de Ingeniero Agrnomo.

Flix Bastidas41, Franklin Valverde41, Pablo Viteri3, Juan Len3

348

Evaluacin agronmica y resistencia a nemtodos (Meloidogyne

incgnita) y al hongo (Fusarium oxysporum) de dos variedades de
naranjilla injertas en siete accesiones de la Seccin Lasiocarpa
noroccidente pichincha42.
Se observa que la naranjilla comn injerta en el patrn Solanum hirtum (t2),
presenta el mejor beneficio econmico neto. En el anlisis constituido por 2500
plantas se obtuvo un beneficio neto de 78095,00 dlares. Seguido de naranjilla
comn injerta en el patrn Solanum pectinatum (t7) se obtuvo un benfico neto de
69763,51dlares a pesar de que en este tratamiento las caractersticas
agronmicas no fueron notorias.
Del anlisis econmico realizado, se concluye que la naranjilla Comn injerta en
patrones provenientes de semilla botnica, Solanum pseudolulo y Solanum
pectinatum presentaron el mayor beneficio neto (505.5 y 409.7 dlares
respectivamente) en tres meses de cosecha en una superficie de 24 m 2.
El beneficio econmico neto de la naranjilla Comn e hbrido Puyo, es de
34338,21y 16036,67 dlares respectivamente, esto se atribuye a que la mano de
obra para injertacin no es necesaria y el material (semillas) que se obtiene de
uno a tres frutos es suficiente para una hectrea.
El anlisis econmico a travs del presupuesto parcial basado en el mtodo de
Perrn publicado por el CIMMYT (2001), para un perodo de cosecha de tres
meses se observa que la naranjilla Comn injerta en el patrn Solanum hirtum (t2),
presenta el mejor beneficio econmico neto.
En el anlisis por parcela experimental (constituida por 408 plantas) se obtuvo un
beneficio neto de 505.48 dlares. Seguido de naranjilla Comn injerta en el patrn
Solanum pectinatum (t7) se obtuvo un beneficio neto de 409.66 dlares a pesar de
que en este tratamiento las caractersticas agronmicas no fueron notorias.
Entre los testigos naranjilla Comn e hbrido Puyo, el beneficio econmico neto es
de 370.08 y 99.62 dlares respectivamente, esto se atribuye a que la mano de
obra para injertacin no es necesaria y las semillas que se obtiene de uno a tres
frutos es suficiente para una hectrea.
Evaluacin de reguladores orgnicos de crecimiento para el engrose
del fruto de naranjilla (Solanum quitoense. hbrido puyo). San Miguel
de los bancos- pichincha43.
El tratamiento con mejor rendimiento fue el t16 (Maxigrow Excel + Citokin con tres
aplicaciones y a dosis de 3,75ml/l y 1 ml/l respectivamente) con 0,870 kg/planta
42
43

Amanda Chiluisa, Jenny Herrera, Wilson Vsquez, Pablo Viteri, Juan Len
J. Navarrete; P. Viteri; J. Len; W. Vsquez.

349

(2,18 TM/ha por cosecha); mientras que el tratamiento con menor rendimiento fue
el t19 (Testigo absoluto, sin aplicacin) con 0,284 kg/planta (0,71 TM/ha por
cosecha). El producto con mejor rendimiento fue el Maxigrow con 0,715 kg/planta
(1,79 TM/ha por cosecha); el producto con menor rendimiento fue el Crezymax
con 0,610 kg/planta (1,53 TM/ha por cosecha). Anlisis econmico del cultivo
de lulo (Solanum quitoense lam.) en Colombia
Este anlisis se hizo con el objetivo de evaluar el comportamiento, calidad y
rentabilidad de los clones lite seleccionados, bajo diferentes sistemas de
produccin dirigida a diferentes mercados. Se compararon los costos de
produccin del sistema convencional de produccin de lulo realizado por los
productores con los costos de las nuevas tecnologas. Esta prueba se hizo
utilizando opciones tecnolgicas con diferentes materiales lite de lulo. Los costos
de produccin por Ha para la tecnologa convencional fueron de $20.390375
millones de pesos y los ingresos de $49.036250 millones de pesos. Los costos de
produccin con las nuevas tecnologas fueron de $22.247275 millones de pesos y
los ingresos de $72.112500 millones de pesos. Con esto se concluye que el
productor con los materiales lite de lulo reduce el costo de produccin por kilo de
$520 pesos a $386 pesos por kilo. (Anexo 8. Anlisis econmico cultivo de lulo
en Colombia)
2.3.5.2. Anlisis econmico del cultivo de mora (Rubus glaucus
Benth)
18710050

RELACIN COSTO-BENEFICIO DEL MANEJO DE PRODUCCIN DE MATERIAL

VEGETATIVO DE MORA CON PRODUCTOS QUMICOS Y BIOLGICOS

TRATAMIENTO

BIOLGICO
QUIMICO

DOSIS
g
cc/Lt
8
5

No. APLIC.

3
3

COSTO/PRODUCTO
$/g o cc
100
10.200

No.Jornales
/m 2
0.04
0.04

COSTO
TOTAL $
5750
13.000

Rend.
Plantas/
m2
28
20

Costo total: costos fijos ms variables

No plantas por m2: 28
Rendimiento: una planta por estaca
Manejo qumico: Hormonas y Tiabendazol
BIOLGICO: Mezcla de Trichoderma, Metarhizium, Beauveria y Paecilomyces
Costos por hectrea con una densidad de 1.111 plantas de Mora/Ha

COSTO/
BENEFICIO
0.20
0.65

350

RELACIN COSTO-BENEFICIO DEL MANEJO DE Eurhizococcus colombiensis con

PRODUCTOS QUMICOS Y BIOLGICOS
PRODUCTO

DOSIS

No.APLIC./Ao

COSTO/PRODUCTO
$/Kg o Lt

No.Jornal
es/APLIC.

Carbofuran
GRANULADO
Clorpirifos +
Adherente
Biolgico

10
g/planta
5 cc 1cc

11.000

0.18 g

32.000
30.000
80.000

COSTO
TOTAL AO
$
975.000

Rend./
Ton/Ha/
ao
7

COSTO/
BENEFICIO
1.11

984.000
60.000
960.000

1.10

11

1.74

El agricultor utiliza Carbofuran o Clorpirifos, el rendimiento por Ha es de 7 Ton por

Ha con Control Qumico y con biolgico es de 11 Ton por Ha.
Los costos de produccin por hectrea para el cultivo de la mora son de
$19.130.050 millones de pesos y los ingresos de $ 21.750.000 millones de pesos
con la tecnologa tradicional, con ganancias de $2,619.950 por Ha. Con la
tecnologa desarrollada en el proyecto los costos de produccin fueron de
$18,710050 y los ingresos de $24,500.000, teniendo ganancias de $5,789.950.
Anexo 9. (Anlisis Econmico Cultivo de Mora, Colombia y Anexo 10. Tecnologa
Cultivo de Mora, Colombia).
3. ANLISIS PROSPECTIVO
Los resultados obtenidos con el desarrollo del proyecto generaron impactos a nivel
local, subregional y regional. En Colombia y Ecuador, se logr evaluar y
caracterizar el recurso gentico de mora y lulo existente en los bancos de
germoplasma y en los campos de agricultores. Esto permiti seleccionar
materiales con caractersticas lite de acuerdo a los parmetros del mercado, as
como por su resistencia a plagas y enfermedades. Se validaron nuevas
tecnologas de manejo limpio y esquema de multiplicacin masivo de material de
siembra, que contribuyeron al incremento de la produccin de los cultivos y
mejoramiento de la competitividad y la seguridad alimentaria de los agricultores.
De esta forma se caracterizaron 71 accesiones de mora y 43 de lulo en Colombia,
as como 108 accesiones de mora y 100 hbridos interespecficos de lulo en
Ecuador. Se realiz la caracterizacin molecular de 36 materiales de lulo
colectados en Colombia y 51 accesiones en Ecuador. En ambos pases se
encontraron materiales con caractersticas superiores a las comerciales; en mora
se destacaron 14 accesiones en Ecuador y 9 en Colombia. Del germoplasma de
lulo; se seleccionaron 9 materiales en Colombia con potencial para programas de
mejoramiento o produccin comercial y 9 materiales en Ecuador provenientes de
cruzamientos interespecficos.
Los resultados del anlisis de la diversidad gentica de la mora corroboran la
reducida base gentica de R. glaucus, detectndose sin embargo, la existencia de

351

una estructura gentica entre el material cultivado con la conformacin robusta de

dos grupos de accesiones, uno de los cuales est formado nicamente por
materiales ecuatorianos, mientras que el segundo, incluye a tres accesiones
colombianas y a las variedades sin espinas recientemente promocionadas. Este
resultado es importante en materia de mejoramiento gentico de la mora. A corto
plazo ser importante disponer de la informacin morfoagronmica de los
materiales y de realizar anlisis moleculares complementarios que permitan
determinar el origen de esta divergencia gentica.
Se realiz la caracterizacin molecular de 36 materiales de lulo colectados en
Colombia y 51 accesiones colectadas en Ecuador. As mismo, se caracterizaron
39 materiales de lulo (25 tipo castilla, nueve provenientes de selecciones
individuales de materiales segregantes de lulo la Selva y cinco hbridos
interespecficos); en tres reas de inters para productores, comercializadores y
transformadores. La respuesta diferencial de estos materiales de lulo frente a
problemas fitosanitarios propios de zonas productoras con alta nubosidad, alta
humedad relativa y alta precipitacin, permite que los materiales de mejor
comportamiento frente a estas condiciones, puedan ser elegidos por los
agricultores para comercializacin y otros materiales sean seleccionados por
programas de mejoramiento para generar variedades con mejores caractersticas
de resistencia a enfermedades y calidad de fruta.
La determinacin de caractersticas fsico qumicas y sensoriales en lulo permiti
identificar clones con caracteres deseados para la agroindustria como son grados
brix, aroma, sabor, color de la pulpa y conversin de fruto a pulpa, lo cual
permitira acceder a nuevos mercados nacionales e internacionales que
demandan altos estndares de calidad en estos aspectos. De igual manera la
identificacin de materiales con color del fruto, lenta senescencia, resistencia al
manipuleo, acidez y pulpas verdes posicionaran mejor el mercado en fresco de
esta fruta.
Se observaron diferencias entre materiales frente a caractersticas especficas, de
resistencia a enfermedades, produccin o calidad de fruta. Tres clones (PL9, PL24
y PL11) mostraron resistencia alta tanto a Colletotrichum spp., como a
Phytophthora infestans. Por otro lado con la informacin colectada se determin,
que el ciclo productivo del lulo en las dos condiciones evaluadas est entre los 16
a 20 meses, no obstante existen materiales como los PL que en condiciones de
Santa Rosa de Cabal (Colombia) que siguen en un buen nivel de produccin luego
de los 20 meses de siembra.
En este sentido, la metodologa desarrollada y la diversidad de materiales
existente en campo, son una herramienta clave para el futuro proceso de
mejoramiento, ya que se identificaron materiales que cuentan con caractersticas
de inters superiores a las referencias comerciales, tanto para mercados de fruta
fresca como procesados. Estos resultados incrementan el conocimiento sobre el
acervo gentico de la especie de Solanum sp para Colombia y Ecuador.

352

Por otro lado, se liber la variedad de Naranjilla de jugo INIAPQuitoense 2009,

tolerante a nemtodos y Fusarium. Esta variedad representa una verdadera
innovacin tecnolgica al ser la primera variedad de naranjilla que se comercializa
injertada sobre patrones con tolerancia a enfermedades y plagas. Esta tolerancia
permite reducir el uso de pesticidas, mejorar la salud de los productores,
consumidores y del suelo.
En el cultivo de mora de castilla, se logr solucionar tres problemas especficos
que son la produccin masiva de plntulas de mora; control de la perla de la tierra
e identificacin del modo reproductivo. El sistema de produccin de estacas
enraizadas con Trichoderma permiti obtener buenas cantidades de plntulas
libres de plagas y enfermedades, este sistema se implement con la asociacin de
agricultores ASOFAMORA de Ginebra Valle del Cauca (Colombia). Esta
metodologa tiene como ventajas con relacin a la que usan los agricultores de la
zona: producir plantas sanas (libres de plagas y enfermedades) y evitar la
propagacin de la perla de tierra (Eurhizoccocus colombianus) principal plaga de
la zona y causa del abandono de los cultivos. Por otro lado, se encontr que las
cepas de M. anisopliae aislado de adultos y ninfas de E. colombianus result ser el
ms patognico. Por lo tanto se convierte en una alternativa de manejo limpio ya
que el nico control disponible era el qumico, pero inefectivo por la presencia de
la cera que recubre los estados ninfales adheridos a la raz y la profundidad a la
cual se encuentra la plaga (10-30 cm).
Se identific el modo reproductivo de ocho ecotipos de mora de castilla
pertenecientes a la coleccin de la Universidad Nacional de Colombia, sede
Palmira. La apomixis facultativa con tendencia a la sexualidad fue encontrada en
todos los ecotipos. Este es el primer reporte de apomixis en las moras de castilla
Colombianas y deber ser tenido en cuenta para iniciar programas de mejoramiento
gentico ya que las ventajas que ofrece la apomixis facultativa son muchas. Se
destacan la fijacin inmediata de caracteres deseables en genotipos superiores,
no se necesita control riguroso de la polinizacin y permite la clonacin de hbridos
superiores. Esto se traduce en reduccin de costos de produccin de cultivares,
reduccin mnima del aislamiento fsico para conservar lneas homocigotas y para
los agricultores principalmente de pases en desarrollo permite sostener altos
rendimientos por tiempo indefinido, usando parte de las semillas cosechadas sin
prdidas en la produccin debidas a la segregacin.
Con la caracterizacin molecular de patgenos como Colletotrichum sp.; se
contribuye a una mayor comprensin de la enfermedad, proporcionando
herramientas tiles para posteriores estudios relacionados con el diseo de
alternativas tecnolgicas para el manejo integrado de la antracnosis en mora. De
esta forma se contribuye significativamente a mejorar el estado fitosanitario del
cultivo. Las poblaciones colombianas de Colletotrichum spp.; agente causante de
la antracnosis en mora de castilla, estn conformadas en su mayora por las
especies C. gloeosporioides y C.acutatum y en un grado no significativo por la
especie C. boninense. Los aislamientos identificados como C. gloeosporioides
presentan niveles de patogenicidad alta, intermedia y baja; mientras que los de la

353

especie C. acutatum tienden a presentar niveles de patogenicidad baja a muy

baja. La identificacin preliminar de cinco genotipos de Rubus spp.; como
resistentes a la antracnosis, constituye un paso importante en la identificacin a
futuro de posibles genes de resistencia a esta enfermedad, los cuales podran ser
incorporados en un programa de mejoramiento gentico de Rubus glaucus.
En cuanto a la evaluacin de alternativas de control biolgico de Colletotrichum, se
encontr que todas las cepas de Trichoderma spp.; evaluadas mostraron
inhibicin del crecimiento de los patgenos, en los ensayos In Vitro, Tagetes
patula fue el extracto vegetal que mostr mayor inhibicin (100%) del crecimiento
de C. gloeosporioides, C. acutatum y B. cinerea, seguido de Ecoswing (extracto
de swinglea). Esto proporciona una alternativa en miras de minimizar el uso de
agroqumicos perjudiciales. Los tratamientos evaluados, tanto biocontroladores
como extractos vegetales, proporcionan una alternativa para el manejo y control
de los patgenos, mostrando una alta especificidad, hacia algunos
microorganismos, lo que puede ser la base para incrementar y mejorar el manejo
de las enfermedadades.
Los resultados presentados aqu constituyen una fuente importante de informacin
para la toma de decisiones, acerca del manejo y control de la antracnosis de la
mora de Castilla en zonas productoras de Colombia y como modelo para trabajar
en otros frutales.
En Ecuador se identific molecular y genticamente las especies de
Colletotrichum sp., en naranjilla (Solanum quitoense), encontrndose que el 90%
de los aislamientos evaluados pertenecen a la especie C. acutatum., y un 10% a la
especie C. gloeosporioides. La especie gloeosporioides dentro del estudio tiene
una incidencia del 20% en los cultivos de naranjilla en las diferentes zonas del
Ecuador.
De acuerdo al ndice de incremento del nemtodo Meloidogyne incognita, se
concluye que la naranjilla comn injerta en Solanum pseudolulo y Solanum
hirtum, presentaron los ndices ms bajos de incremento de la poblacin de
nematodos siendo calificados como resistentes tolerantes al ataque. Sin embargo
la naranjilla Comn injerta en S. hispidum es considerado tolerante, por no haber
sido afectado el rendimiento.
La alta incidencia de Fusarium oxysporum, en la naranjilla comn e hbrido Puyo
(100 y 83.3% respectivamente) se les puede calificar como variedades
susceptibles lo que afect el rendimiento y calidad del fruto. De los resultados
obtenidos a nivel de invernadero, el hbrido Puyo injerta en Solanum pseudolulo y
Solanum hirtum presentaron el 100% de afinidad; mientras que la naranjilla
comn injerta en Solanum pectinatum present una afinidad de 98.75%, en otra
palabras, la injertacin entre las dos especies vegetales presentaron soldadura
consistente.

354

Los patrones producidos de semilla fueron los que presentaron mejores

caractersticas de afinidad con respecto a los patrones producidos por estaca. La
naranjilla Comn injerta en Solanum pseudolulo y Solanum hirtum presentaron el
mejor comportamiento agronmico y el mayor grado de compatibilidad, pues su
vigor y rendimiento fue superior a los otros tratamientos, con 15679.6 y 19710
kg/ha en tres meses de cosecha.
De acuerdo al ndice de incremento del nematodo Meloidogyne incognita, se
concluye que la naranjilla Comn injerta en Solanum pseudolulo y Solanum
hirtum, presentaron los ndices ms bajos de incremento de la poblacin de
nematodos (0.33 y 0.37 veces) siendo calificados como resistentes tolerantes al
ataque. Mientras que para el resto de tratamientos el ndice de incremento de la
poblacin de nematodos fueron altos y variados con rendimientos bajos por lo que
fueron calificados como susceptibles no tolerantes y resistentes no tolerantes. Sin
embargo la naranjilla Comn injerta en S. hispidum es considerado tolerante, por
no haber sido afectado el rendimiento.
Con estos resultados se recomienda utilizar plantas de naranjilla injertas en
patrones producidos por semilla Solanum pseudolulo, Solanum hirtum y Solanum
pectinatum, por las mejores caractersticas agronmicas, afinidad, compatibilidad,
y por la resistencia demostrada frente al ataque de Fusarium oxysporum y
Meloidogyne incognita.
Se identificaron como enemigos naturales del Barrenador del fruto
(Neoleucinodes elegantalis), los hongos Beauveria sp., Aspergillus sp., y
Verticillium sp, las bacterias Bacillus cereus y Paenibacillus polymyxa, dos virus de
ADN de simple cadena circular y el parasitoide Copidosoma sp. (Encyrtidae,
Encyrtinae). Los hongos Beauveria sp., Aspergillus sp., y Verticillium sp.,
mostraron un porcentaje de infeccin natural al estado larval de 0.68 %; siendo
Beauveria sp., al que se lo podra considerar promisorio por sus caractersticas
para usarlo como biocontrolador. Las bacterias Bacillus cereus y Paenibacillus
polymyxa presentaron un porcentaje de infeccin al estado larval de 0.79 %,
siendo B. cereus la ms comn y la que mostr caractersticas alentadoras para
su posible uso como organismo de control biolgico.
Los enemigos naturales que exhibieron el valor ms alto de ataque a larvas del
Barrenador del fruto (Neoleucinodes elegantalis) fueron los virus, con un 7.47 %
de infeccin natural. Los parasitoides constituyen la nica medida de control
biolgico que se pudiese aplicar para el control de pupas de N. elegantalis,
teniendo en cuenta que su presencia est muy relacionada con el tipo de manejo
del cultivo. El parasitoide ovo larval Copidosoma sp., mostr un porcentaje de
ataque de 1.36 %; podra ser un enemigo natural con amplias posibilidades de
control de N. elegantalis.
El crecimiento proyectado de la demanda industrial de lulo, y el surgimiento de
hbridos interespecficos para el consumo en fresco, pronostican una demanda
alta de material de siembra propagado clonalmente. La oferta de material de

355

siembra actual es reducida, indicando que la viabilidad del laboratorio aqu

fortalecido puede estar asegurada. Obviamente, muchos factores fuera del control
de los investigadores influyen en la viabilidad comercial de este negocio. No
obstante, con la tecnologa actual implementada en el proyecto se da inicio a una
actividad que tiene el potencial para crecer en el futuro cercano.
Se desarrollaron sistemas de propagacin in vitro de lulo a bajo costo,
implementando un laboratorio de propagacin de materiales con la organizacin
de productores ASLUBEL, en el municipio de Beln de Umbra, departamento de
Risaralda (Colombia). Se consigui el apalancamiento con otras instituciones para
continuar con el trabajo. Este resultado se ha producido como co-financiacin de
los proyectos aprobados por el Ministerio de Agricultura de Colombia y con el cual
se estableci dinamismo y sinergia con el proyecto financiado por Fontagro. Con
esta estrategia se logr disminuir los costos de inversin en equipos equivalente a
83%, pasando de $25.850.000 (millones de pesos) a $4.350.000 (millones de
pesos).
Cabe resaltar que el proyecto se implement a travs de alianzas estratgicas
entre centros avanzados de investigacin agrcola internacional y nacional de
Colombia y Ecuador; Universidades y asociaciones de productores. Este esquema
operativo usado ofrece no slo soluciones tecnolgicas sino tambin el
establecimiento y consolidacin de sistemas de innovacin agroindustrial
funcionales que contribuyen a la sostenibilidad de los procesos de innovacin
promovidos e iniciados durante la ejecucin del proyecto.
Con el objetivo de continuar fortaleciendo los resultados obtenidos en el proyecto
se recomienda:
Continuar con la caracterizacin de otros materiales de mora y lulo
comerciales y silvestres existentes en Colombia y Ecuador, en aspectos
fitosanitarios, calidad y rendimiento de la fruta y arquitectura de la planta.
Realizar pruebas de comportamiento de los materiales bajo condiciones
ambientales de cada una de las zonas productoras de ambos pases.
Desarrollar nuevas pruebas de biocontrol para los principales problemas
fitosanitarios que afectan el cultivo de lulo en cada una de las zonas
productoras de ambos pases.
Iniciar la seleccin de materiales de lulo con caractersticas requeridas para
ser utilizados como patrones y de igual manera seleccionar copas con
caracteres de inters para mercado agroindustrial y fresco.
Iniciar trabajos de resistencia varietal en materiales comerciales y silvestres
con relacin a las principales plagas y enfermedades de lulo.

356

4. PUBLICACIONES Y OTROS PRODUCTOS

ARTCULOS CIENTFICOS
Arenas, A., lvarez, E., Afanador, L., Meja J.F., Gonzlez, A. 2007. Especies de
Colletotrichum asociadas con la antracnosis de la mora de castilla (Rubus glaucus
Benth) en el Valle del Cauca. Fitopatologa Colombiana 31(1):7-14.
Arenas, A., lvarez, E., Gonzlez, e., Meja, J.F. 2007. Caracterizacin molecular
y patognica de aislamientos de Colletotrichum spp. Asociados a la antracnosis de
cultivos de mora del Valle del Cauca. Memorias XXVIII Congreso de la
Asociacin colombiana de Fitopatologa y ciencias afines ASCOLFI. 073.
Arango, L.M., lvarez, E., Llano, G.A., Gonzlez, A., Torres, C. 2009. Evaluacin
de alternativas de control in vitro de Colletotrichum gloeosporioides, Colletotrichum
acutatum y Botrytis cinerea mediante el uso de Trichoderma spp. y extractos
Vegetales. Memorias XXIX Congreso de la Asociacin Colombiana de
Fitopatologia y Ciencias Afines ASCOLFI 132.
Afanador K, Luca., lvarez Elizabeth y Gonzlez Alonso. 2009. Patogenicidad de
especies de Colletotrichum causantes de la antracnosis de la mora de castilla en
Colombia e identificacin preliminar de fuentes de resistencia en germoplasma de
Rubus spp. Artculo cientfico en Memorias XXIX Congreso de la Asociacin
Colombiana de Fitopatologa y Ciencias Afines ASCOLFI 132
Afanador, L., lvarez, E. Gonzlez, A. Meja J.F. 2009. Especies de
Colletotrichum causantes de la antracnosis de mora de castilla (Rubus glaucus
Benth) en Colombia. Memorias XXIX Congreso de la Asociacin Colombiana de
Fitopatologia y ciencias afines ASCOLFI 115.
Muoz, L.A., Gonzlez, A., lvarez E., Llano Germn, Buitrago, M. E., et al. 2010.
Lulo con valor agregado: alternativas para el pequeo agricultor. In Ciencia y
Tecnologa para la competitividad del Sector Agropecuario 2002-2010. Ministerio
de Agricultura y Desarrollo Rural. Direccin de Desarrollo Tecnolgico y
Proteccin Sanitaria. Colombia. P 110-111.
Montes, C., Muoz, L.A., Tern, V.F., Prado, F.A. y Quionez, M.A. 2010.
Evaluacin de patgenos en clones de lulo (Solanum quitoense Lam.). In Acta
Agronmica, Universidad Nacional de Colombia, Sede Palmira. Vol 59(2) AbrilJunio 2010. P144-154.
ARTICULOS POR PUBLICAR
Lobo Mario, Clara Ins Medina, Juan Diego Murillo. 2010. Caracterizacin y
evaluacin morfolgica y qumica de la coleccin de mora. CORPOICA CI La
Selva. Colombia

357

Acevedo Bernal, Natalia. 2010. Evaluacin in-vitro del efecto de

canela
(Cinnamomum zeylanicum nees), para el control de antracnosis (Colletotrichum
gloeosporioides penz. & sacc.) en el cultivo de mora (Rubus glaucus benth).
Universidad Santa Rosa de Cabal. Colombia.
Romero Daz, Leidy Milena y Valencia Carvajal Juan Pablo. 2010. Evaluacin del
efecto de metabolitos intermedios a partir de extractos vegetales sobre antracnosis
(Colletotrichum spp) en el cultivo de lulo la selva (Solanum quitoense x Solanum
hirtum). Universidad Santa Rosa de Cabal. Colombia.
Marmolejo Cortes, Diego Fernando; Vsquez Amariles, Herney Daro; Muoz
Jaime Eduardo. 2010. Tratamientos de escarificacin de semillas de mora.
Universidad Nacional de Colombia-Sede Palmira. Palmira, Colombia.
Marmolejo Cortes, Diego Fernando; Vsquez Amariles, Herney Daro; Muoz
Jaime Eduardo. 2010. Variabilidad gentica en medios hermanos de ecotipos de
mora de castilla. Universidad Nacional de Colombia-Sede Palmira. Palmira,
Colombia. Universidad Nacional de Colombia-Sede Palmira. Palmira, Colombia.
TESIS DE GRADO
Arango, Lina. 2009. Evaluacin de alternativas de control in vitro de Colletotrichum
gloeosporioides, Colletotrichum acutatum y Botrytis cinerea mediante el uso de
Trichoderma spp., y extractos Vegetales. Tesis de grado. Universidad del Valle.
Cali, Colombia. 101p. Anexo 11.
Arenas, Adriana. 2007. Caracterizacin molecular y patognica de aislamientos
de Colletotrichum spp. asociados a la antracnosis de mora en el Valle del Cauca.
Tesis de grado. Universidad del Valle, Facultad de Ciencias. Cali, Colombia. 89p.
Anexo 12.
Afanador Kafuri, Luca. 2010. Antracnosis de la mora de la castilla (Rubus glaucus
BENTH) identificacin de fuentes de resistencia y variabilidad en especies y razas
del patgeno. Tesis de PhD. Universidad Nacional sede Medelln.
Muoz, Luis Armando. 2010. Evaluacin agronmica de materiales de lulo
Solanum sp, frutal de alto potencial para zonas tropicales. Tesis de Maestra.
Universidad Nacional de Colombia-Sede Palmira. Palmira, Colombia. 73p. Anexo
13.
Parra Giraldo, Pedro Pablo. 2010. Metodologa in vitro para la evaluacin de
germoplasma de lulo Solanum spp. bajo la presin de toxinas de Colletothrichum
acutatum. Tesis de grado Ingeniera Agronmica. Universidad Nacional de
Colombia-Sede Medelln. Facultad de Ciencias Agropecuarias.
Gonzlez Valencia, Diana Milena. 2010. Respuesta diferencial a la incidencia de
los principales problemas fitosanitarios en 24 materiales de lulo. Tesis de grado.

358

Ingeniero Agrnomo. Universidad de Santa Rosa de Cabal. Facultad de Ciencias

Agrcolas. Programa de Agronoma. Santa Rosa de Cabal, Risaralda, Colombia.
91p.
Agudelo, Diana Carolina. 2010 Marn Evaluacion de variables de rendimiento y
calidad en 24 materiales de lulo Solanum spp en el departamento de Risaralda.
Tesis de grado. Ingeniero Agrnomo. Universidad de Santa Rosa de Cabal.
Facultad de Ciencias Agrcolas. Programa de Agronoma. Santa Rosa de Cabal,
Risaralda, Colombia. 82p.
Franco Arias, Andrs Leonardo. Respuesta diferencial a la incidencia y severidad
y/o de infestacin de 15 materiales de lulo Solanum quitoense Lam. en el
departamento de Risaralda. Tesis de grado. Ingeniero Agrnomo. Universidad de
Santa Rosa de Cabal. Facultad de Ciencias Agrcolas. Programa de Agronoma.
Santa Rosa de Cabal, Risaralda, Colombia. 75p.
Santacoloma Mnera, Cristian David. 2010. Evaluacion de variables de
rendimiento y calidad en 39 materiales de lulo Solanum quitoense Lam en el
departamento de Risaralda. Tesis de grado Ingeniero Agrnomo. Universidad de
Santa Rosa de Cabal. Facultad de Ciencias Agrcolas. Programa de Agronoma.
Santa Rosa de Cabal, Risaralda, Colombia. 74p.
Valencia, Adrian Mauricio. Descripcin morfolgica y determinacin de tiempos
fenolgicos, cualificacin del vigor en 24 materiales de lulo Solanum quitoense
Lam. en el departamento de Risaralda. Tesis de grado. Ingeniero Agrnomo.
Universidad de Santa Rosa de Cabal. Facultad de Ciencias Agrcolas. Programa
de Agronoma. Santa Rosa de Cabal, Risaralda, Colombia. 79p.
Acevedo Bernal, Natalia. 2008. Evaluacin in-vitro del efecto de
canela
(Cinnamomum zeylanicum nees), para el control de antracnosis (Colletotrichum
gloeosporoides (penz) penz. & sacc.) en el cultivo de mora (Rubus glaucus
benth). Tesis de grado. Ingeniero Agrnomo. Universidad de Santa Rosa de
Cabal. Facultad de Ciencias Agrcolas. Programa de Agronoma. Santa Rosa de
Cabal, Risaralda, Colombia. 87p.
Romero Daz, Leidy Milena y Valencia Carvajal, Juan Pablo. 2009. Evaluacion del
efecto de metabolitos intermedios a partir de extractos vegetales sobre antracnosis
(Colletotrichum spp) en el cultivo de lulo la selva (Solanum quitoense x Solanum
hirtum). Tesis de grado. Ingeniero Agrnomo. Universidad de Santa Rosa de
Cabal. Facultad de Ciencias Agrcolas. Programa de Agronoma. Santa Rosa de
Cabal, Risaralda, Colombia. 89p.
Alzate Ocampo, Nicols; Flrez Meja, Jefferson y Vaca, Jos Vicente. 2010.
Evaluacin del contenido de materia seca y nutrientes en cada etapa de desarrollo
de lulo hibrido la selva clon p 32 Solanum quitoense Lam x Solanum hirtum en el
municipio de Santa Rosa de Cabal, Risaralda. Tesis de grado. Ingeniero

359

Agrnomo. Universidad de Santa Rosa de Cabal. Facultad de Ciencias Agrcolas.

Programa de Agronoma. Santa Rosa de Cabal, Risaralda, Colombia. 68p.
Marmolejo Corts, Diego Fernando. 2011. Evaluacin de apomixis en
germoplasma mejorado de mora de castilla. Tesis MSc. Facultad de Ciencias
Agrarias, nfasis Fitomejoramiento. Universidad Nacional de Colombia sede
Palmira. Palmira, Colombia. 83 p.
Murillo, Juan Diego. 2009. Caracterizacin qumica y morfolgica del banco de
germoplasma de Rubus sp. del C.I "La Selva" de Corpoica. Tesis de pregrado.
Universidad Nacional de Colombia-Sede Medelln. Facultad de Ciencias
Agropecuarias. Medelln. Colombia. 95p.
Zapata, Pedro A. 2010. Establecimiento de un protocolo para la multiplicacin
vegetativa de plntulas inoculadas con hongos biocontroladores como valor
agregado y como estrategia preventiva para el manejo integrado de plagas y
enfermedades en campo. Trabajo de la especializacin en Frutales Tropicales.
Universidad Nacional de Colombia sede Palmira. Palmira, Colombia.
Ayala, Flix Germn; Jcome Rosendo y Vsquez Wilson. 2008. Actualizacin y
complementacin de la lnea base de la mora, establecimiento de un sistema de
seguimiento y evaluacin participativo. Ecuador.
Chiluisa, Amanda y Herrera, Jenny 2008. Evaluacin agronmica y resistencia a
nemtodos (Meloidogyne incognita) y al hongo (Fusarium oxysporum) de dos
variedades de naranjilla injertas en siete accesiones de la seccin Lasio-carpa
noroccidente Pichincha. Tesis de pregrado. Ingeniera Agrnoma. Universidad
Tcnica de Cotopaxi. Facultad de Agronoma. Ecuador.
Gmez Vaca, ngel Pal. 2009. Caracterizacin Agro-Morfolgica de clones y
segregantes de 39 cruzamientos interespecficos de naranjilla para identificar
materiales promisorios con caractersticas de resistencia y/o tolerancia a plagas y
enfermedades, alta productividad y buena calidad del fruto. San Francisco- La
Cecilia-Pichincha. Tesis de pregrado. Ingeniero Agrnomo. Universidad Estatal de
Bolvar. Facultad de Ciencias Agrarias Recursos Naturales y del Ambiente.
Bolvar, Ecuador.
Guitarra, Diego. 2008. Evaluacin y seleccin de reguladores de crecimiento que
influyan en el tamao del fruto de naranjilla hbrido puyo, que tenga baja
residualidad, y que puedan reemplazar al 2-4D. Tesis de pregrado. Ingeniero
Agrnomo. Universidad Central de Ecuador. Facultad de Ciencias Agrcolas.
Quito, Ecuador.
Sosa Sosa, Mara Cristina. 2009. Prospeccin de enemigos naturales del
barrenador del fruto (Neoleucinodes elegantalis (Guens)) de la naranjilla
(Solanum quitoense) y evaluacin de la incidencia de las plagas en su cultivo.

360

Tesis de pregrado. Ingeniera Agrnoma. Universidad Central de Ecuador. Facultad

de Ciencias Agrcolas. Quito Ecuador.
Lpez, Priscila 2010. Determinacin de las caractersticas fisicoqumicas y
estudios de los ndices de calidad en el comportamiento postcosecha de los
materiales seleccionados en clones lite provenientes de cruzamientos de
naranjilla. Tesis de pregrado. Ingeniera Agroindustrial. Universidad Tcnica del
Norte. Facultad de Ingeniera en Ciencias Agropecuarias y ambientales (FICAYA).
Ibarra. Ecuador.
Bastidas, Flix y Valverde, Franklin. 2010. Manejo de la nutricin del cultivo de
naranjilla (Solanum quitoense lam.) en las zonas de produccin de la regin
amaznica y noroccidente de Pichincha. Tesis de pregrado. Ingeniero Agrnomo.
Universidad Estatal de Bolvar. Facultad de Ciencias Agrarias Recursos Naturales
y del Ambiente. Bolvar, Ecuador.
Navarrete, Jos Luis. 2010. Evaluacin de reguladores orgnicos de
para el engrose del fruto de naranjilla (Solanum quitoense. hbrido
Miguel de los Bancos-Pichincha. Tesis de pregrado. Ingeniero
Universidad Central de Ecuador. Facultad de Ciencias Agrcolas. Quito

crecimiento
puyo). San
Agrnomo.
Ecuador.

Viteri Nolivos, Evelyn Andrea. 2010. Evaluacin de sustratos en el desarrollo de

Neoleucinodes elegantalis (G). Tumbaco, Pichincha. Tesis de pregrado. Ingeniera
Agrnoma. Universidad Central de Ecuador. Facultad de Ciencias Agrcolas.
Quito, Ecuador.
Crdenas, Diego. 2010. Identificacin molecular y caracterizacin gentica y
patolgica de Colletotrichum sp. aislados de naranjilla (Solanum quitoense Lam)
Tomate de rbol (Solanum bateceum) y Chirimoya (Annona cherimola Mill)
provenientes de zonas productoras del Ecuador. Tesis de pregrado. Ciudad.
Ecuador.
Garrido Haro, Patricia de los ngeles. 2009. Anlisis de la diversidad gentica de
la mora cultivada (Rubus glaucus benth) y especies emparentadas en zonas
productivas del Ecuador mediante marcadores moleculares. Tesis de pregrado.
Manangn, Luca. 2010. Patogenicidad de Fusarium oxysporum f.sp. quitoense en
la seccin Lasiocarpa. Tesis de pregrado. Ingeniera Agropecuaria. Instituto
Agropecuario Superior Andino. Facultad de Ciencias Agropecuarias. Ciudad.
Ecuador.
Calderon, Rodrigo. 2010. Caracterizacion agromorfolgica y seleccin de naranjilla
(Solanum quitoense Lam.) con resistencia y/o tolerancia a Fusaium oxysporum y
Meloidogyne incognita, con buen rendimiento y calidad en el Noroccidente de
Pichincha. Tesis de pregrado. Ecuador.

361

Cajamarca, Marco Vinicio. 2010. Validacin de componentes tecnolgicos para el

manejo integrado de plagas en el cultivo de naranjilla (Solanum quitoense Lam.)
en el Cantn Archidona, Provincia del Napo. Tesis de pregrado. Ecuador.
Viteri, Pablo. Injertacin de naranjilla en solanceas silvestres, una alternativa para
el manejo de Fusarium y nematodos. Tesis de maestra. Ecuador.
Brito, Beatriz y Montalvo, Daniela. 2010. Determinacin de las caractersticas
fisicoqumicas y estudio de los ndices de calidad en el comportamiento
postcosecha de los materiales seleccionados en clones lite provenientes de
cruzamientos de naranjilla en el Ecuador. Tesis de pregrado. Ecuador.
TRABAJOS DE INVESTIGACIN EN PROCESO DE FINALIZACIN
Perenguez, Eduard. 2010. Reconocimiento y evaluacin de Enemigos naturales
asociados a Eurizococcus colombianus en tres departamentos. Universidad
Nacional de Colombia sede Palmira. Tesis de pregrado. Ingeniera Agronmica.
Facultad de Ciencias Agrarias. Universidad Nacional de Colombia-sede Palmira.
Palmira, Colombia.
Botero, Carlos Felipe. 2010. Descripcin morfolgica y determinacin de tiempos
fenolgicos, cualificacin del vigor en 15 materiales de lulo Solanum quitoense
Lam. en el departamento de Risaralda. Tesis de pregrado. Facultad de Ciencias
Agrcolas. Programa de Agronoma. Santa Rosa de Cabal, Risaralda, Colombia.
(Trabajo en proceso).
Zuleta Barco, Carolina. 2010. Descripcin morfolgica y determinacin de tiempos
fenolgicos en 42 materiales de lulo Solanum sp en el departamento de Risaralda.
Tesis de pregrado. Facultad de Ciencias Agrcolas. Programa de Agronoma.
Santa Rosa de Cabal, Risaralda, Colombia. (Trabajo en proceso de publicacin).
Zuleta Ospina, Jess. 2010. Caracterizacin morfoagronmica de germoplasma
de lulo Solanum quitoense Lam y Solanum quitoense x Solanum hirtum y
evaluacin de la resistencia al pasador del fruto Neoleucinodes elegantalis
Guene. Tesis de maestra. Facultad de Ciencias Agrcolas. Programa de
Agronoma. Santa Rosa de Cabal, Risaralda, Colombia. (Trabajo en proceso).
MANUALES-CARTILLAS-PSTER
Revelo M., Jorge; Viteri D., Pablo; Vsquez C., Wilson; Valverde, Franklin M.;
Len, Juan F.; Gallegos, Patricio. 2010. Manual del cultivo ecolgico de la
naranjilla. INIAP, Estacin Experimental Santa Catalina, Quito, EC. 120 p. (Manual
Tcnico No.77) (SB 379 .N3 .R3).
Garrido P 1., Vsquez W2. y Morillo E 1 1 INIAP. Departamento Nacional de
Biotecnologa. EESC, Quito, Pichincha, Ecuador. Programa Nacional de
Fruticultura. Granja Experimental. Tumbaco, Pichincha Ecuador. Anlisis de la

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diversidad gentica de la mora cultivada (Rubus glaucus benth) y especies

emparentadas en zonas productivas del ecuador mediante marcadores
moleculares.
INIAP. 2009. Boletn divulgativo No. 354. INIAP QUITOENSE-2009. Naranjilla de
jugo (Solanum quitoense Lam.) injerta en patrones de solanceas silvestres
resistentes a Fusarium oxysporum y a Meloidogyne incognita. Pablo Viteri Daz,
Wilson Vsquez, Juan Len F, William Viera, Manuel Posso M, Milton Hinojosa A,
Jorge Revelo, Jose Ochoa. Programa Nacional de Fruticultura Granja
Experimental Tumbaco. Estacin experimental Santa Catalina. Junio 2009. Quito
Ecuador.
Parra, Pedro Pablo; Muoz Luis Armando; Buitrago Maria Eugenia; Alvarez
Elizabeth y Gonzlez Alonso. 2010. Pster metodologa in vitro para la evaluacin
de germoplasma de lulo Solanum sp., bajo la presin de toxinas de
Colletothrichum acutatum.
Perenguez, Eduard. 2010. Pster Reconocimiento y evaluacin de Enemigos
naturales asociados a Eurizococcus colombianus en tres departamentos.
Universidad Nacional de Colombia sede Palmira. Pster in el congreso de la
Sociedad Colombiana de Entomologa (SOCOLEM), realizado en la Universidad
Javeriana del 31 de Julio a Agosto 2 de 2010. Bogot, Colombia.
Rodrguez, F. 2010. Manual: Estrategia de competitividad de la cadena de la mora.
Grupo GIAR y CIAT.
5. EJECUCIN DEL PRESUPUESTO
Se anexa la ejecucin presupuestaria
6. AGRADECIMIENTOS
Los autores agradecen a FONTAGRO por el apoyo econmico y el programa de
frutales tropicales del CIAT, los integrantes laboratorio de Biologa Molecular y el
personal del Laboratorio Bioecolgicos, Palmira.