INTRODUCCIN

Las protenas forman, despus del agua, la parte ms importante de los

tejidos y humores de animales y figuran en el organismo de alrededor 16
por ciento. Tambin, aunque en menor proporcin, se encuentran en los
tejidos vegetales. La importancia siempre se le asigna en la constitucin
del protoplasma celular, motivo del nombre protenas o prtidos, del
griego proteios que significan lo primero o lo fundamental. (Celsi &
Lacobucci, 1964)
Las protenas son molculas compuestas de una o ms cadenas de
aminocidos. Las protenas desempean muchas funciones; esta
diversidad de funciones es posible debido a la variedad de estructuras
protenicas. Las enzimas son protenas importantes que dirigen casi
todas las reacciones qumicas que se llevan a cabo dentro de las clulas.
Dado que cada enzima ayuda solo en una o en unas cuantas reacciones
especficas, casi todas las clulas contienen cientos de enzimas distintas.
Otros tipos de protenas utilizan se para fines estructurales como la
elastina, que confiere la elasticidad de la piel; la queratina, que es la
principal protena del pelo, de los cuernos de los animales y de las unas;
y la seda de las telaraas y los capullos de la polillas de la seda. Hay
tambin protenas que se usan para almacenar energa y materiales (la
albmina de la clara de huevo, la casena de la leche), para transporte
/hemoglobina, portadora de oxgeno en la sangra) y para movimiento
celular (protenas contrctiles en los msculos). Algunas hormonas
(insulina, reguladora de azcares en la sangre) anticuerpos (que ayudan
a combatir enfermedades e infecciones) y muchos venenos (como el de
la serpiente cascabel) tambin son protenas. Al igual que los lpidos y
los polisacridos, las protenas se forman como resultado de la sntesis
por deshidratacin. El nitrgeno del grupo amino (-NH2) de un
aminocido se una al grupo carboxilo de otro aminocido, con un enlace
covalente sencillo liberando una molcula de agua. Este enlace se llama
enlace peptdico y la cadena resultante de dos aminocidos es un
pptido. (Molculas biolgicas, 2003)

OBJETIVOS

Observar la desnaturalizacin de una protena

Identificar la presencia de protenas en una muestra
Observar reacciones enzimticas

MATERIALES
-

1 huevo
Semillas fresas de frijol
Goteros

1 papa
1 botella pequea de agua oxigenada
Pequeos trozos de carne e hgado
Mondadientes
Tubos de ensayo
Vasos precipitados de 500ml
Gradilla
Solucin de almidn al 1%
Cocina
Pipetas de 10 y 5 ml
Lugol
Pinzas de madera
Acetona
Sulfato de cobre al 1%
Solucin de albmina
Agua destilada
cido Ntrico concentrado
Hidrxido de sodio al 40%
cido sulfhdrico al 75%
Solucin de NaCl al 20 %
Placas de porcelana

MTODOS
1. Desnaturalizacin de protenas

Procedimiento
Enumerar seis tubos de ensayo (del 1 al 6).
Colocar adecuadamente en cada uno de los tubos de
ensayo, colocados en una gradilla, 1 ml de solucin de
albmina.
Realizar en cada uno lo siguiente y anotar si ocurri o no
desnaturalizacin.
- Tubo 1: Aadir 2 ml de albmina y someter a
bao mara por 3 minutos.
- Tubo 2: Aadir 1 ml de acetona.
- Tubo 3: Aadir 1 ml de cido sulfhdrico al 75%.
- Tubo 4: Aadir 1 ml de Cloruro de sodio al 20%.
- Tubo 5: Aadir 1 ml de cido ntrico concentrado.
- Tubo 6: Ser el control (solo albmina)

2. Determinacin de presencia de protenas (Reaccin de

Biuret)

Procedimiento
Colocar en un tubo de ensayo 1 ml de solucin de
albmina al 1%, agregar 1 ml de solucin de NaOH al
40% y mezclar.
Aadir 2 gotas de Sulfato de cobre al 1%. La reaccin es
positiva si observamos un color violeta en la mezcla.
Hacer blanco negativo o control repitiendo el
experimento y sustituir la albmina por agua destilada.

3. Reconocimiento de la Enzima Catalasa

Procedimiento
Enumerar 4 tubos de ensayo (del 1 al 4).
Colocar en cada uno el mismo peso de hgado, carne,
papa picada y frijol.
Aadir, a cada tubo de ensayo, agua oxigenada,
Observar la actividad enzimtica.

4. Reaccin Amiloltica

Procedimiento
Utilizar 4 pozos de la porcelana
Designar una letra a cada pozo (A, B, C, D)
Colocar en cada pozo
- Pozo A: 4 gotas de lugol.
- Pozo B: 15 gotas de almidn + 2 gotas de lugol.
- Pozo C: 15 gotas de almidn + 10 gotas de saliva;
despus de 10 minutos, 2 gotas de lugol.
- Pozo D: 10 gotas de saliva + 10 gotas de cido
sulfhdrico; despus de 10 minutos, 10 gotas e
almidn; luego de 7 minutos, 2 gotas de lugol.

Resultados y discusin
1) Determinacin de protenas.
2) Determinacin de presencia de protenas (Reaccin de
Biuret)
3) Reconocimiento de la Enzima Catalasa.
La catalasa es una enzima fundamental en los peroxisomas, que son
organelos que se encuentran en todas las clulas eucariotas (Becker,
2007). Esta enzima representa el 40% del contenido proteico del
peroxisoma en algunas clulas como las hepticas (Paniagua, 2007). Su
presencia es vital para todos los seres eucariotas ya que mantiene el
equilibrio dentro del peroxisoma, constantemente degradando el perxido
de hidrgeno producido por las enzimas oxidasas dentro del mismo
peroxisoma. El perxido de hidrogeno es sumamente txico para nuestro
organismo, es por esto que todo peroxisoma est dotado de mucha
catalasa, para siempre estar preparado para degenerar este compuesto
(Sprage, 2001). Adems de descomponer al perxido de hidrgeno en
agua y oxgeno molecular.

2 H 2 O2 2 H 2 O+O2

La catalasa puede actuar en modo per oxidante utilizando diferentes

compuestos como donadores de electrones, tales como metanol, etanol,
cido frmico, formaldehido, nitrilos y fenoles. Como todos estos
compuestos son nocivos para las clulas, su detoxificacin por la catalasa es
una funcin vital en los peroxisomas ( R H 2

es el sustrato oxidable).

R H 2+ H 2 O2 R+2 H 2 O

Colocamos en distintos tubos de ensayo aproximadamente la misma

cantidad de hgado, carne, papa y frijol. A la vez les aadimos la
misma cantidad de perxido de hidrgeno y observamos la reaccin
en cada tubo. La actividad se considera mejor respecto a la cantidad
de espuma y la velocidad con la que se genera en cada caso. Los
resultados fueron ordenados en la siguiente tabla.

Actividad
Muy buena actividad
Buena actividad
Poca actividad
Muy poca actividad

Muestra
Hgado
Trozo de carne
Frijol
Papa

(de izquierda a derecha son: frejol, papa, hgado y carne)

La espuma observada es producto de la descomposicion del perxido
de hidrgeno en agua (lquida) y oxgeno molecular (gaseoso) por
accin de la catalasa.

 El hgado se encarga de emulsificar grasas y de detoxificar

constantemente nuestro organismo, por ende es razonable que
haya sido la muestra con mayor actividad, la catalasa abunda
en sus clulas y stas son aptas para degradar el perxido de
hidrgeno que se les aplica con mucha efectividad y rapidez.
La carne tiene muchas protenas cuyos aminocidos deben ser
seguramente reciclados con ayuda de las oxidasas presentes
en el peroxisoma, como resultado, las oxidasas generan mucho
perxido de hidrgeno y para mantenerse estable debe
presentar abundante catalasa, es por ende que tuvo la
segunda mejor actividad frente al perxido de hidrgeno.
El frijol es una semilla, contien su reserva de grasas necesarias
para su germinacin en su endospermo, en las clulas
colindantes debe tener peroxisomas, listos para cuando la
semilla se encuentre en las condiciones ideales y empiece a
metabolizar sus reservas. Estos peroxisomas que luego
actuaran como peroxisomas debieron ser los responsables de
la dbil pero existente actividad en la reaccin.
Finalmente la papa es casi puro almidn y no tiene la
necesidad de tener peroxisomas, por esto su reaccin fue
practicamente nula frente al perxido de hidrgeno.

4) Reaccin Amiloltica
-

Pozo A: Solo tenemos lugol, por lo que es nuestro control, el

cual nos permitir comparar lo que suceda en las dems
muestras.

(2 gotas de lugol)
-

Pozo B: Al reaccionar el almidn con el lugol observamos que

ste ltimo se torna de color azul violcea, debido a que la
estructura qumica del almidn permite que el yodo (lugol) se
introduzca en l. Esta reaccin se produce ya que el yodo
ocupa espacios vacos en las hlices de la cadena de unidades

de glucosa, formando un compuesto de inclusin que altera las

propiedades fsicas del polisacrido, especialmente la
absorcin lumnica. Esta unin del yodo a la cadena es
reversible, por lo que la coloracin desaparee en caliente y
vuelve a aparecer por enfriamiento (Almidn, 1964)

(15 gotas de almidn + 2 gotas de lugol)

-

Pozo C:

Al mezclar la saliva con el almidn observamos que

se forma una solucin espesa; pero lo que en realidad sucede
es que la saliva segrega amilasa, la cual hidroliza al almidn,
reducindolo hasta glucosa. Pasados los 10 minutos agregamos
2 gotas de lugol y a continuacin la mezcla se torna de color
amarillo-anaranjado ya que al solo haber glucosa el lugol no lo
reconoce. (Medina, 1969)
Almidn + Amilasa

Maltosa + glucosa

(15 gotas de almidn + 10 gotas de saliva + 2 gotas de lugol)

-

Pozo D:

Agregamos la saliva al pozo y el cido sulfhdrico, lo

mezclamos. Pasados los 10 minutos aadimos las 10 gotas de
almidn y obtenemos una solucin viscosa. Luego de 7 minutos

sumamos a esta mezcolanza 2 gotas de lugol y finalmente

obtenemos una solucin color azul muy oscuro.
Esto sucede debido a que la saliva contiene la enzima ptialina
que al ser estar en contacto con el cido es desactivada o
carece de funcin enzimtica por lo que ya no acta
hidrolizando el almidn. En ese sentido el lugol s reacciona con
el almidn, puesto que no ha sufrido hidrlisis. (Reacciones
enzimticas, 2006)

(10 gotas de saliva + 10 gotas de cido sulfhdrico + 10 gotas

de almidn + 2 gotas de lugol)

CONCLUSIONES

Referencias Bibliogrficas

Almidn. (1964). En S. A. Celsi, & A. D. Iacobucci, Qumica

elemental moderna orgnica (pg. 204). Buenos Aires:
Kapelusz Moreno 372.

Becker, W. (2007). El mundo de la celula. Pearson.

Celsi, S. A., & Lacobucci, A. D. (1964). Importancia biolgica de

las protenas. En Quimica elemental moderna orgnica (pg.
204). Buenos Aires: Kapelusz Moreno 372.

Medina, J. M. (1969). Bioqumica I - Laboratorio.

Molculas biolgicas. (2003). En T. Audesirk, G. Audesirk, & B.

E. Byers, La vida en la Tierra (pg. 45 y 46). Mxico: Prentice
Hall.

Paniagua, R. (2007). Citologia e histiologia vegetal y animal.

Mc. Graw Hill.

(2006). Reacciones enzimticas. Bogot.

Sprage, N. (2001). Biologia Celular y Molecular. El ateneo.