FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
Patologa Clnica
MVZ. Vernica Guillermina Carren Fernndez
EMVZ. Rubn Samir Bazn Aguirre
6A
Practica 1
06 de Abril de 2016
FROTIS
Rubn Samir Bazn Aguirre
Veterinaria y Zootecnia
Facultad de Medicina
Es una extensin de sangre realizada sobre un portaobjeto y a partir de la cual se
observa al microscopio las caractersticas de las clulas sanguneas. Este es un
anlisis rutinario que acompaa a todo hemograma, ya sea en forma manual o
automatizada.
Material y equipo
-2 Porta objetos
-Tinciones para hematologa (tincin de Giemsa)
-Guantes
-Toalla de papel
- Tubo capilar
-Tubo vacutainer tapa morada (EDTA) con muestra de sangre
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Procedimiento
1. Se toma una pequea cantidad de sangre con un capilar directamente del
tubo vacutainer con EDTA que contiene la muestra completa, asegurndose
de llenar el capilar partes, previo al llenado del capilar se homogeniza la
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sangre
2.
en
el
tubo
vacutainer.
Una vez tomada la muestra se coloca una gota de sangre sobre un porta
objetos el cual debe de estar sobre una superficie plana para dar el soporte
necesario.
3. Despus se procede a la extensin de la gota de sangre previamente
depositada sobre el porta objetos, estos e realiza a travs del uso de otro
porta objetos secundario colocndolo sobre la gota de sangre en un ngulo
de 45.
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4. Hay que esperar para que la gota de sangre se extienda a lo ancho del
porta objetos secundario, para posteriormente realizar la extensin a lo
largo del porta objetos primario a travs de un movimiento rectilneo y
conciso.
5. Una vez realizada la accin anterior queda sobre el porta objetos primario la
extensin de sangre a lo largo y ancho del mismo. Posterior a esto se seca
al aire libre por unos segundos y se rotula con datos para la identificacin,
esto se puede realizar en la zona de la cabeza del extendido.
Procedimiento completo
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Tras realizar la extensin, se obtienen tres partes de la muestra:
- Cabeza (con demasiados eritrocitos).
- Cuerpo (zona ptima para la observacin, existe un reparto equilibrado de
clulas).
- Cola (eritrocitos en escaso nmero)
-Tras el secado del frotis, se sumerge el porta objetos en una solucin fijadora dos
veces durante 10 segundos. Posteriormente lo dejamos reposar unos segundos
para teir.
-Teimos la muestra con el colorante Giemsa. Donde el hemocolorante 1 es
eosina en la cual se sumerge el porta objetos ya con el fijador de 2 a 10 veces por
3 o 4 segundos hasta que este adquiera la tincin. Posterior a el uso de la eosina
se procede a sumergir el porta objetos en el hemocolorante 2 que es azul de
metileno, en este se sumerge 2 veces durante 10 segundos aproximadamente.
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- Quitamos el exceso de tincin con agua corriente y con pequeas gotas,
evitando el chorro directo.
Al microscopio las partes cidas del frotis (por ejemplo el ADN del ncleo) se
teirn de un color azulado (azul de metileno) mientras que las bsicas (por
ejemplo el citoplasma) se teirn de un color rosado (eosina).
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