CESAR LARA COLLI

INTEGRANTES:

PRCTICA N 4: AISLAMIENTO Y PURIFICACION DE MICROORGANISMOS

Aislamiento Es la separacin de un determinado microorganismo del resto de

microorganismos que le acompaan. El mtodo ms usual es la siembra por estra sobre
un medio de cultivo slido adecuado dispuesto en una placa de Petri.

Para ello se toma una pequea cantidad de muestra con un asa de platino y se reparte
sobre la superficie del medio de cultivo. Sobre el medio quedan separadas e inmovilizadas
las clulas bacterianas. Tras la incubacin en condiciones adecuadas, cada clula viable
origina una colonia visible resultado de sucesivas divisiones celulares. Cada colonia
bacteriana tiene unas caractersticas determinadas en cuanto a su forma, borde, elevacin,
tamao , consistencia, etc.. Los tipos de bacterias presentes en la muestra original son
visible como tipos diferentes de colonias. A partir de colonias separadas suficientemente
es posible obtener un cultivo puro de cada uno de los tipos de bacterias presentes en la
muestra original.

Un cultivo puro o axnico consiste en una sola especie microbiana, proveniente de una
sola clula. Los cultivos axnicos son muy raros en la naturaleza. En los medios
naturalespor ejemplo en el suelo, agua, cuerpo humano- existen cultivos mixtos. En un
cultivo mixto, viven muchas y diferentes especies de forma conjunta. Un cultivo axnico se
obtiene artificialmente en el laboratorio.

La obtencin de un cultivo puro es un proceso de dos etapas. Primero, hay que esterilizar
todos los materiales para eliminar todos los microorganismos presentes en ellos. Segundo
hay que aislar y cultivar un solo microorganismo, para producir un clon de descendientes.

OBJETIVOS

A) a aislar bacterias por siembra en estras

B) a caracterizar bacterias por sus colonias
C) a definir experimentalmente un cultivo puro de bacterias

DESARROLLO EXPERIMENTAL

A) Estras Escocesas
1. El asa de platino se expone a la flama del mechero hasta quedar al rojo vivo.
2. Se coloca el asa de 10-15cm de la flama del mechero, es decir dentro del rea estril
esperando aproximadamente de 10 a 20 segundos para que se enfri
3. Se toma una caja con la cepa madre, tocar la colonia la cual ya se debi haber marcado.
4. Alzar a la altura de la llama del mechero una caja Petri de agar nutritivo, utilizando la
mano contraria con la que se tiene levantada el asa de platino y elegir un punto en el
cultivo, el cual le pondremos punto 1 y comenzamos a hacer una serie de estras.
5. Flamear el asa en la llama del mechero hasta el rojo vivo.
6. Se le da un pequeo giro a la caja de Petri de tal forma que la punta de la ltima estra
de la serie anterior, quede a modo para hacerse la siguiente serie de estras (punto 2).
Tocando el punto 1 solo dos veces al comenzar a estriar.
7. Se aplica el inciso 5 y se da de nuevo el pequeo giro, para comenzar a estriar en la
ltima estra del punto 2, igual solo se toca solo9 dos veces al comenzar a estras, el
punto3.
8. Se repite el inciso 5 y 6 solo que ahora es del punto 3 al punto 4 el cual tan solo es un
pequeo zigzag, que se realiza teniendo cuidado de no tocar las estras anteriores para
no cargar de nuevo carga microbiana, pues el objetivo es lograr colonias separadas.
9. Finalmente flamear el asa en la llama del mechero hasta el rojo vivo.

B) Estras por Agotamiento

1. El asa de platino se expone a la flama del mechero hasta quedar al rojo vivo.
2. Se coloca el asa de 10-15cm de la flama del mechero, es decir dentro del rea estril
esperando aproximadamente de 10 a 20 segundos para que se enfri
3. Se toma una caja con la cepa madre, tocar la colonia la cual ya se debi haber marcado.
4. Alzar a la altura de la llama del mechero una caja Petri de agar nutritivo, utilizando la
mano contraria con la que se tiene levantada el asa de platino se extiende sobre la
superficie segn se indica en la figura, de forma que al final de dicha siembra por
agotamiento, la cantidad de inculo se espera sea lo suficientemente bajo como para
que se depositen clulas aisladas y distanciadas en la superficie del agar a partir de las
cuales surjan, tras incubar, colonias aisladas.
5. Finalmente flamear el asa en la llama del mechero hasta el rojo vivo.
Estras Escocesas

Estras por Agotamiento

Morfologa colonial

Escoger una de las placas con cultico puro despus de un tiempo de incubacin de 24 h
en el cual existan colonias aisladas, para realizar las observaciones.

Para la observacin de las caractersticas macroscpicas se estudia el tipo de colonia

formada por la cepa. Observadas a simple vista se puede determinar la forma general de
la colonia y la del borde o margen mirando la colonia de abajo a arriba. El tipo de elevacin
de la colonia se puede apreciar vindola de lado, manteniendo la placa a la altura de los

ojos. La morfologa de la colonia puede variar intensamente segn el medio en que crezcan
las bacterias.

RESULTADOS

Estra de agotamiento: el asa de platino se lleva en incandescencia

cuando se enfri, cargar el microrganismo. Se pudo obtener el
resultado al aislar de esta manera

Estra escocesa: el asa se vuelve esterilizar, se toma y se estra

en un extremo, esterilizar de nuevo y girar la caja Petri, y que el
extremo tope.

CONCLUSION

Aprendimos a ver las diferencias de las estras y su uso en las

colonias bacterianas y en qu momentos podemos usarla. Y se pudo
reconocer en esta prctica las tcnicas de aislamiento y se obtuvo
el resultado que se pretenda obtener.

Bibliografa
Espaa 2 Reimpresin MASSON, S.A. 2000.
Aquiahualt, M.A., y Prez, M.L. Manual de Practicas
del Laboratorio de Microbiologa General. 1 Edicin
Universidad Autnoma Metropolitana. Mxico D.F.
2004.
Prescott, L.M., Harley, J.P. y Klein, D.A.
Microbiologa. Madrid Espaa: 5 Edicin McGrawwHill.
2004.
Diaz, R., Gamazo, C. y Lopez, I. Manual Prctico de Microbiologa.

Barcelona

Anexos