Antonio Domnguez

Curva
de
Hernndez
crecimiento
bacteriano
Microbiologia

ITVe r

Introduccion
El crecimiento se define como el aumento de todos los constituyentes
celulares. Este crecimiento lleva a un incremento del tamao y peso de las
clulas que en la mayora de los microrganismos conduce a su divisin, lo que
a su vez da como resultado el aumento en el nmero de las clulas; esto se
considera crecimiento poblacional que no se debe confundir con el crecimiento
individual que implica solamente el crecimiento en tamao del volumen y la
diferenciacin de un mismo individuo
En la mayora de las bacterias el crecimiento se lleva a cano por un porceso
que se denomina fision binaria
En este proceso se llevan a cabo mas de 2000 reacciones enzumaticas
El tiempo para que se formen dos clulas a partir de una se llama tiempo de
generacin u el tiempo que se requiere para que una poblacin se duplique se
denomina tiempo medio de generacin.
En cada tiempo de generacin se duplicara la poblacin
Si se construye una grafica de este crecimiento en funcin de tiempo se
obtendr lo que se conoce com o curva de crecimiento bacteriano:
Fase de adaptacin o fase lag, face exponencial, fase estacionaria y face de
muerte.
Con esta informacin podemos empezar a realizar la practica.

Objetivos:

Aprender las diferentes fases de la curva de crecimiento microbiano y las

tcnicas para medir dicho crecimiento.
Aprender a calcular los parmetros cinticos caractersticos de las
diferentes especies microbianas.

Metodologa:

Se preparan 0.3 mL de Caldo Saburon en un matraz de 300 mL

y se esterilizan.

Se homogeniza en el la cepa Pichia Kudriavzevii.

se toma una alcuota de 300 L de la cepa, se coloca en el

matraz con el medio de cultivo y se homogeniza.

Se toman 10 L de la mezcla y se depositan en la cmara de

Neubauer

Colocar el cubreobjetos

En el microscopio y con el objetivo de 10X se enfoca la

cuadricula de 25 cuadros

Con el objetivo de 40X, seleccionamos los 5 cuadros de 4X4 de

los cuales haremos el conteo

Enfocar cada cuadro y hacer el conteo.

Repitindose esto cada 2 horas, dejando incubar el matraz con

la levadura y el medio a 30C y a 150 rpm.

Se realiza la tabla siguiente con los datos obtenidos.

Resultados:

T
(hr)
0
2
4

Cuadr
o1
2
6
35

Cuad
ro 5
1
11
36

Cuad
ro 21
4
2
26

Cuad
ro 25
5
2
60

Cuad
ro 13
9
9
25

6
8

42
50

54
62

31
41

68
68

45
56

Promedio
21/5= 4.2
30/5=6
182/5=36.
4
240/5=48
277/5=55.
4
750/4=
150
cel.prome
dio.

Clulas totales.
(Pr *25)
(4.2)*25= 105
(6)*25= 150
(36.4)*25=910
(48)*25=1,200.
(55.4)*25=1,385
(150)*25=
3,750.

cantidad de clulas por unidad de volumen:

3,750 Clulas totales en 0.0001 mL.

3,750

0.0001 mL

X=?

1 mL.

3,750/0.0001 mL = 3.75x 107 clulas/mL.

No cel.
Prom
4.2
6
36.4
48
55.4

0
2
4
6
8

No cel
totales
105
150
910
1200
1385

No cel /ml
1x10^6
1.5x10^6
9.1x10^5
1.2x10^7
1.4x10^7

Ln(Ncel/m
L)
13.91
14.28
16.02
16.3
16.45

A continuacin se realiza la grafica :

Ncel/mL
17
16.5
16
15.5
15
14.5
14
13.5
13
12.5

Donde se consider que:

Fase
Lag.
(Adaptacin)
Fase
Exponencial
Fase
Estacionaria.

Observndose entonces que no existe una fase de muerte celular en

nuestro reporte, debido a que probablemente no se tomaron las
alcuotas en tiempos posteriores.
Posterior a esto, se realizaron los clculos pertinentes que se describen a
continuacin:

1.- Clculo de nmero de generaciones.

Formula:
n= 3.3 ln (y/x)
Donde: y= Nm. de clulas a t=t(en la fase exponencial)
x= Nm. de clulas a t=0 (tiempo donde inicia la fase
exponencial)

Entonces se tiene que:

Y= 910 clulas (4 hr)
X= 150 clulas (2 hr; fase exponencial en t=0)
n= 3.3 ln(910/150)= 5.95 generaciones.

2.- Tiempo de generacin.

Frmula:
G= t/n
Donde: t= Tiempo transcurrido en fase exponencial en minutos.
n= nmero de generaciones.

Entonces se tiene que:

G= 120 min. /5.95= 20.17 min.
3.- Velocidad especfica de crecimiento.
Frmula:
= ln 2/ G
Donde: Ln 2 = Se encuentra establecido con la constante 0.693.
G= Tiempo de generacin.

Entonces:
= 0.693/ 20.17 min= 0.0344 min-1