Radiobiologa

La radiobiologa es la ciencia que estudia los fenmenos que se producen en los seres
vivos tras la absorcin de energa procedente de las radiaciones ionizantes.
Las dos grandes razones que han impulsado la investigacin de los efectos biolgicos de
las radiaciones ionizantes son:
1. Proteccin Radiolgica: Poder utilizar esas radiaciones de forma segura en todas
las aplicaciones mdicas o industriales que las requieran.
2. Radioterapia: Utilizacin de las radiaciones ionizantes principalmente en
neoplasias, preservando al mximo los rganos crticos (tejido humano sano).

Caractersticas de los efectos biolgicos de las

radiaciones ionizantes
1. Aleatoriedad: La interaccin de la radiacin con las clulas es una funcin de
probabilidad y tiene lugar al azar. Un fotn o partcula puede alcanzar a una
clula o a otra, daarla o no daarla y si la daa puede ser en el ncleo o en el
citoplasma.
2. Rpido depsito de energa: El depsito de energa a la clula ocurre en un
tiempo muy corto, en fracciones de millonsimas de segundo.
3. No selectividad: La radiacin no muestra predileccin por ninguna parte o
biomolcula, es decir, la interaccin no es selectiva.
4. Inespecificidad lesiva: Las lesiones de las radiaciones ionizantes es siempre
inespecfica o lo que es lo mismo esa lesin puede ser producida por otras
causas fsicas.
5. Latencia: Las alteraciones biolgicas en una clula que resultan por la radiacin
no son inmediatas, tardan tiempo en hacerse visibles a esto se le llama "tiempo
de latencia" y puede ser desde unos pocos minutos o muchos aos, dependiendo
de la dosis y tiempo de exposicin.

Tipos de efectos de la radiacin sobre los seres vivos

Los efectos de las radiaciones ionizantes sobre los seres vivos se pueden clasificar desde
distintos puntos de vista:

Segn el tiempo de aparicin

Precoces: Aparecen en minutos u horas despus de haberse expuesto a la

radiacin, por ejemplo eritema cutneo, nuseas.
Tardos: Aparecen meses u aos despus de la exposicin, por ejemplo cncer
radioinducido, radiodermitis crnica, mutaciones genticas.

Desde el punto de vista biolgico

Efectos somticos: Slo se manifiestan en el individuo que ha sido sometido a

la exposicin de radiaciones ionizantes por ejemplo el eritema.
Efecto hereditario: No se manifiestan en el individuo que ha sido expuesto a la
radiacin, sino en su descendencia, ya que lesionan las clulas germinales del
individuo expuesto, por ejemplo las mutaciones genticas.

Segn la dependencia de la dosis

Efecto estocstico: Son efectos absolutamente aleatorios, probabilsticos;

pudiendo aparecer tras la exposicin a pequeas dosis de radiacin ionizante. No
necesitan una dosis umbral determinada para producirse; si bien al aumentar la
dosis aumenta la probabilidad de aparicin de estos efectos, que suelen ser de
tipo tardo. Se cree que el nico efecto estocstico es el cncer radioinducido y
las mutaciones genticas.
Efecto no estocsticas: Se necesita una dosis umbral para producirlos, por
debajo de la cual, la probabilidad de aparicin de los mismos es muy baja.
Suelen ser efectos precoces, por ejemplo el eritema cutneo.

Etapas de la accin biolgica de la radiacin

Los efectos de las radiaciones ionizantes sobre la materia viva son el resultado final de
las interacciones fsicas (ionizacin) y (excitacin) de los fotones o partculas con los
tomos que la componen.
Los efectos de la radiacin sobre los seres vivos pasan por sucesivas etapas que se
ordenan aqu segn su escala de tiempo, de menor a mayor.

Etapa Fsica
Es una respuesta inmediata que ocurre entre billonsimas y millonsimas de segundo.
En esta etapa se produce la interaccin de los electrones corticales con los fotones o
partculas que constituyen el haz de radiacin. Los electrones secundarios originados en
la interaccin, excitan e ionizan a otros tomos provocando una cascada de
ionizaciones. Se estima que un Gray de dosis absorbida produce 100000 ionizaciones en
un volumen de 10 micras cbicas.

La accin directa de la radiacin es consecuencia de ionizaciones que se

producen en los tomos que forman la molcula del ADN, fenmeno dominante
en radiaciones con alta transferencia lineal de energa (LET) como las partculas
alfa, beta y protones, que inciden directamente sobre los tomos de las
molculas.
La accin indirecta de la radiacin es la interaccin del haz de radiacin con
otros tomos y molculas de la clula como el agua, producindose radicales
libres que al difundir hasta la molcula de ADN, la daan de manera indirecta.

Etapa Qumica
Esta etapa es de un orden ligeramente mayor estando en una escala de entre una
millonsima de segundo y un segundo. Es el proceso de la interaccin de los radicales
libres resultantes de la radiolisis del agua, que originan una serie de reacciones qumicas
con molculas de solutos presentes en el medio irradiado y que producirn la induccin
de un cierto grado de lesin biolgica. Cuando las radiaciones interaccionan con la
materia viva se producen fenmenos fisicoqumicos, pues la ionizacin y excitacin
suponen un incremento de energa para las molculas, lo que compromete su
estabilidad; dependiendo de la importancia de la molcula afectada, la lesin biolgica
ser ms o menos importante.
Radilisis del agua
Los efectos biolgicos se deben en gran parte a la accin de las radiaciones sobre el
agua, esto se debe por un lado a la elevada presencia de las molculas de agua en los
seres vivos y por otro al hecho de que ejerce como disolvente de otras molculas y en el
que tienen lugar importantes reacciones qumicas. Aunque la accin de las radiaciones
sobre el agua o radiolisis del agua es una suma de procesos complejos, puede
simplificarse resumindose en dos casos:
La descomposicin molecular del agua y la formacin de radicales libres.
En primer lugar la radiacin incidente sobre ls molculas de agua puede ionizarlas de
tal manera que deja un ion H2O+ y un electrn libres. A este electrn se le llama electrn
acuoso pues es muy lento ya que casi toda la energa se ha invertido en arrancarlo de la
molcula. El ion H2O+ es muy inestable y rpidamente se descompone en un H+ y en un
radical OH. El electrn acuoso, puede reaccionar con otras molculas orgnicas o con
una segunda molcula de agua produciendo radicales H e iones hidroxilo OH-. Los
radicales H y OH son molculas neutras con gran reactividad qumica pues tienen un
electrn desparejado que con muy poco esfuerzo tender a crear enlaces y robar as
tomos a otras molculas que en el peor de los casos podran ser biomolculas
funcionales tales como protenas o nucletidos.

Los iones hidroxilo y los protones libres al ser partculas con cargas opuestas no son
peligrosos pues tendern a atraerse neutralizndose y formando de nuevo agua. Pero las
molculas radicales neutras s son peligrosas pues quedaran a la deriva por la clula
hasta afectar alguna molcula de importancia biolgica.
Existe tambin la posibilidad ms directa de formar los radicales libres con la sola
excitacin inducida a partir de la radiacin de una molcula de agua. Los fenmenos
que se producen al excitarse la molcula de agua, no son bien conocidos, pero
tericamente es posible la disociacin de esta en radicales H y OH. De una manera u
otra se forman radicales que no poseen electrones apareados, lo que los hace altamente
reactivos, bien como agentes oxidantes o reductores.

Los radicales se distribuyen de forma heterognea a lo largo de la trayectoria de

radiacin, dependiendo de la transferencia lineal de energa de radiacin. Una buena
parte de ellos se pierden en reacciones neutralizadoras combinndose de la siguiente
forma.

Pero otros se propagan pudiendo llegar en ltima instancia a atacar las cadenas de ADN
si estos han sido generados en el ncleo celular.

Efecto oxgeno
El oxgeno es un potente radiosensibilizante, es decir, aumenta el efecto de la
irradiacin. Cuando la TLE (LET en ingls) (Transferencia Lineal de Energa) es baja,
es necesario en ausencia de oxgeno (anoxia) multiplicar la dosis por un factor de 2,5 a
3 para obtener el mismo efecto que en presencia de oxgeno. Se llama OER (del ingls
Oxigen Enhancement Ratio) o razn de aumento de oxgeno, al nmero de dosis
necesaria para obtener el mismo efecto segn condiciones de anoxia o de oxigenacin
normal. El oxgeno, al combinarse con los radicales libres, produce un aumento de la
vida media de stos y la fijacin del dao radioinducido.
Molculas donadores de H
Las molculas donadores de H, como las que contienen grupo sulfhidrilo (-SH), pueden
neutralizar los radicales libres, teniendo un papel protector, ya que se ha demostrado
que el aumento o disminucin en los niveles intracelulares de grupos -SH, origina
cambios paralelos en la supervivencia celular.

Etapa biolgica
La etapa biolgica se inicia con la activacin de reacciones enzimticas para reparar el
dao producido por las radiaciones. Algunas de estas lesiones sern reparadas y no
influyen en la viabilidad celular y otras no sern reparadas con lo que se producir la
muerte celular en interfase, mitosis o incluso despus de varias divisiones celulares tras
la exposicin a la radiacin. Las consecuencias biolgicas de la irradiacin celular se
manifiestan mucho tiempo despus como:
1. La respuesta de los tumores a la radioterapia.
2. Los efectos secundarios agudos y tardos asociados a la radioterapia.
3. Desarrollo de neoplasias radioinducidas a largo plazo por mutaciones en clulas
somticas.
4. Desarrollo de malformaciones genticas en la descendencia por mutaciones en
clulas germinales.

Lesiones radioinducidas y radiosensibilidad

Las interacciones de las radiaciones ionizantes pueden traducirse en alteraciones en la
bioqumica celular, cadenas de hidratos de carbono, cambios estructurales en las
protenas, modificaciones en la actividad enzimtica, que a su vez repercuten en
alteraciones de la membrana celular, las mitocondrias y los dems orgnulos de la
clula. Pero en donde ms estudios se han realizado, es en las acciones de la radiacin
sobre los elementos del ncleo celular, sobre el ADN.

Tipo de lesiones radioinducidas

Lesin letal: Es irreversible e irreparable, que conduce necesariamente a la

muerte de la clula.
Lesin subletal: En circunstancias normales puede ser reparada en las horas
siguientes a la irradiacin, salvo que la induccin de nuevas lesiones subletales
por sucesivas fracciones de la dosis determine letalidad.
Lesin potencialmente letal: Es una lesin particular que est influida por las
condiciones ambientales del tejido irradiado durante y despus de la irradiacin.

El nmero de lesiones inducidas por radiacin es mucho mayor que el que

ocasionalmente provoca la muerte de las clulas. La dosis letal media (D0) es la dosis
de radiacin que origina aproximadamente una lesin letal por clula y que destruir al
63% de stas, siendo an viables el 37% restante. El valor de dosis letal media en
clulas epiteliales humanas bien oxigenadas es de aproximadamente 3 Gy. El nmero de
lesiones que se detectan en el ADN inmediatamente despus de irradiar a una dosis
"D0" ha sido estimado en:

Dao de bases: > 1000.

Roturas simples de cadena: Alrededor de 1000.
Roturas dobles de cadena: Alrededor de 40.

Lesiones radioinducidas en la molcula de ADN

El dao producido en el ADN por las radiaciones ionizantes es crtico para la muerte
celular radioinducida. Existen mltiples pruebas que demuestran esta hiptesis como
son:
1. La dosis requerida para producir muerte celular es mucho mayor para el
citoplasma que para el ncleo celular, donde se encuentra el ADN.
2. El I125 y el H3 incorporado al ADN produce muerte celular.
3. Las aberraciones cromosmicas radioinducidas son letales para las clulas.
4. Las bases nitrogenadas alteradas producen radiosensibilizacin, como el 5Fluoracilo.
5. Las clulas con ms cromosomas (aneuploides
(tumorales)>diploides>haploides), es decir con ms cantidad de ADN son ms
radioresistentes.

La lesin del ADN es de vital importancia en radioterapia para combatir las clulas
tumorales.
La radiacin produce distinto tipo de lesiones en el ADN entre las que destacan:

Rotura simple de cadena: Se produce en el enlace fosfodister, entre el fosfato

y la desoxirribosa, o ms frecuentemente entre la base nitrogenada y la pentosa.
Es la lesin ms abundante tras la radiacin, producindose entre 500 y 1000
roturas simples de cadena (rsc) por Gray (Gy). Ocurre de tres a cuatro veces ms
frecuente en las clulas humanas bien oxigenadas que en las hipxicas, y se
pueden originar en una sola hebra o en las dos del ADN. Tras la rotura del
enlace fosfodiester las dos cadenas de ADN se separan con penetracin de
molculas de agua en esa zona, rompindose los puentes de hidrgeno entre las
bases. A la rotura simple de cadena tambin se le llama lesin subletal, porque
no existe relacin alguna con la muerte celular.

Rotura doble de cadena: Es una lesin compleja que se produce como

consecuencia de la rotura de las dos hebras del ADN en sitios muy prximos tras
la interaccin nica o por combinacin de dos roturas simples de cadenas
complementarias, cuando una segunda partcula o fotn choca en la misma
regin del ADN antes de que la primera rotura simple haya tenido tiempo de ser
reparada. La rotura doble es homloga cuando ocurre al mismo nivel de pares de
bases y heterloga en caso contrario, siendo stas ms frecuentes. Cada Gy de
radiacin ocasiona unas 40 roturas dobles de cadena por clula, aunque puede
esperarse una gran variabilidad. A la rdc se le llama tambin lesin letal, porque
existe una estrecha relacin con la muerte celular.
Lesin en las bases nitrogenadas: Consiste en la prdida de una o ms bases, la
modificacin qumica de alguna de ellas y la ligadrua entre dos bases contiguas,
formando dmeros. La mayor parte de estos tipos de lesin, de frecuencia
elevada, entre 800 y 1000 por Gy, afectan a la timina. La radiosensibilidad, en
orden decreciente de las bases, vendra dada por la secuencia
Timina>Citosina>Adenina>Guanina. Son por otra parte lesiones susceptibles de
reparacin, proceso que cuando no transcurre correctamente puede provocar el
desarrollo de una mutacin puntual.
Entrecruzamiento del ADN y las protenas: Es una lesin frecuente en la
radiacin que se produce unas 150 veces en la clula por Gray. Se localiza sore
todo en regiones activas del ADN desde el punto de vista de la replicacin o
transcripcin.
Dao mltiple localizado: Se origina con la formacin de racimos de
ionizaciones de cierto tamao en la proximidad de la molcula del ADN.
Combina una o ms roturas dobles de cadena, con un nmero variable de roturas
simples de cadena, lesiones de bases y azcar, difciles de reparar y que conduce
a la muerte celular radioinducida.

Radiosensibilidad
La radiosensibilidad es la magnitud de respuesta de las estructuras biolgicas,
provocada por las radiaciones ionizantes. Un elemento biolgico es ms sensible cuanto
mayor es su respuesta a una dosis determinada de radiacin. El elemento biolgico es
ms radiosensible cuando necesita menos dosis de radiacin para alcanzar un efecto

determinado. El concepto opuesto a radiosensibilidad, es radioresistencia. No existe

clula ni tejido normal o patolgico radioresistente de forma absoluta; pues si se
aumenta ilimitadamente la dosis, siempre se puede alcanzar su destruccin.
Administrando dosis mnimas en rganos o tejidos, se observaran diferentes grados de
alteraciones morfolgicas o funcionales, segn las lneas celulares de que se trate.
Escala de radiosensibilidad
Las clulas presentan diferente grado de sensibilidad a la radiacin, segn la estirpe o
lnea celular. Tomando como punto de referencia, la muerte celular, pueden clasificarse
en cinco grupos de mayor a menor sensibilidad:
1. Muy radiosensibles: leucocitos, eritroblastos, espermatogonias.
2. Relativamente radiosensibles: mielocitos, clulas de las criptas intestinales,
clulas basales de la epidermis.
3. Sensibilidad intermedia: clulas endoteliales, clulas de las glndulas gstricas,
osteoblastos, condroblastos, espermatocitos, etc.
4. Relativamente radioresistentes: granulocitos, osteocitos, espermatozoides,
eritrocitos.
5. Muy radioresistentes: fibrocitos, condrocitos, clulas musculares y nerviosas.

Leyes de radiosensibilidad
La radiosensibilidad celular esta regida por una serie de determinantes que han sido
estudiados y aplicados a todas las clulas del organismo, enuncindose unas leyes
biolgicas, que conceden mucha importancia a la actividad mittica, siendo las ms
importantes:

Ley de Bergoni y Tribondeau: Esta basada en la observacin de irradiaciones

sobre clulas testiculares, y en funcin de la actividad mittica y diferenciacin
celular, se establecen los siguientes puntos:

1. Una clula es tanto ms radiosensible, cuanto mayor es su actividad

reproductiva.
2. Una clula es tanto ms radiosensible, cuanto ms largo sea su porvenir de
divisin, es decir, cuantas ms divisiones deba cumplir en el futuro.
3. Una clula es tanto ms radiosensible, cuanto menos diferenciadas estn
desarrolladas sus funciones.

Ley de Ancel y Vitemberg: La sensibilidad de toda clula que ha de

experimentar lesiones por radiacin es la misma, pero el tiempo que tardan en
aparecer las lesiones inducidas, vara segn los distintos tipos de clulas. Los
factores que influyen en el tiempo que tardan en aparecer las lesiones
radioinducidas son:

1. El estrs biolgico que acta sobre la clula. La actividad reproductiva

representa un estrs biolgico considerable.

2. Las condiciones en que se encuentra la clula en el periodo de pre y post

radiacin.
3. Ciclo celular: la situacin de la clula en el momento en que se produce la
irradiacin, es un factor biolgico que influye notablemente en la
radiosensibilidad, as las clulas durante la fase de mitosis son ms
radiosensibles que durante la fase de sntesis.
4. Radiosensibilidad hstica: aunque la radiosensibilidad de un tejido es similar a la
de las clulas que lo forman, no es una expresin directa de la misma, a lo que
contribuyen varios factores. Un tejido u rgano est formado por dos
componentes: el parnquina (compartimento que contiene las clulas
caractersticas del tejido en cuestin) y el formado por tejido conjuntivo y vasos
(mesnquima). Los dos tienen distinta radiosensibilidad. La complejidad del
funcionamiento de un tejido, implica que en todo momento, coexisten en l,
clulas en actividad mittica, en reproduccin y con buena o mala oxigenacin.

Procesos que determinan la radiosensibilidad

Tras irradiacin ocurren distintos procesos que pueden afectar a la viabilidad celular, a
su funcionalidad o a la aparicin de mutaciones que son: induccin del dao,
procesamiento y manifestacin del dao.
La radiosensibilidad es la forma en la que se manifiesta la accin biolgica producida
por la radiacin sobre una determinada poblacin celular o tejido. Datos experimentales
demuestran que :
1. El dao inicial sobre una clula por unidad de dosis es variable y
dependiente intrnsecamente de dicha clula.
2. Clulas de distintos tipos muestran diferente capacidad y eficacia en el
proceso de reparacin de las lesiones radioinducidas.
3. Distintas clulas pueden tolerar niveles desiguales de dao residual.
Induccin: Dao inicial
El dao inicial es el que se produce en la molcula de ADN inmediatamente despus de
la irradiacin y debe ser medido antes de que los sistemas de reparacin celulares
puedan actuar. Para poder cuantificar experimentalmente este dao, las clulas se
irradian a 4 grados centgrados, temperatura a la que los mecanismos de reparacin del
ADN estn inhibidos. El dao inicial se expresa como el nmero de lesiones producidas
por unidad de dosis. Los modificadores del dao inicial son:

El efecto oxgeno.
La presencia de molculas donadores de H.
Fase del ciclo celular.

Procesamiento: Reparacin del ADN

La reparacin del ADN es el mecanismo celular que restablece la secuencia del ADN a
su estado original previo a la induccin de lesiones provocadas por la radiacin. Las
clulas humanas poseen una importante capacidad para reparar el dao producido en su

ADN, que varan en velocidad, capacidad y fidelidad y por ello se explica las
diferencias de radiosensibilidad en las distintas poblaciones celulares.
Existen diferentes mecanismos en clulas humanas para la reparacin de las lesiones
radioinducidas en el ADN como son:

Reparacin de bases daadas: Se realiza a travs de la escisin de bases y

escisin de nucletidos.
1. Escisin de bases: Una vez que se reconoce la base nitrogenada daada,
una glicosidasa especfica, elimina la base daada, una endonucleasa
reconoce el hueco producido y con ayuda de una fosfodiesterasa corta el
enlace fosfodiester. Posteriormente la ADN polimerasa aade el
nucletido que falta y la ADN ligasa sella la rotura de la hlice.
1. Escisin de nucletidos: Se pone en marcha cuando la lesin
radioinducida rigina dmeros de pirimidina (T-T, C-T y C-C). Cuando se
reconoce el dmero, una glicosidasa corta la hebra de ADN daada a
ambos lados de la lesin, a continuacn una helicasa elimina un
fragmento con aproximadamente 12 nucletidos entre los que se
encuentran los que estn daados. Posteriormente, estos nucletidos son
nuevamente sintetizados por una polimerasa que utiliza la hebra
complementaria intacta de molde. Finalmente una ligasa sella la unin.

Reparacin de roturas simples de cadena: Utiliza el mecanismo de escisin

de bases. La reparacin de roturas simples de cadena es un proceso rpido, ya
que el 50% de las mismas se reparan en aproximadamente 15 minutos. Uno de
los genes implicados en este tipo de reparacin es el que codifica la enzima
nuclear PARP-1 que reconoce las roturas simples de cadena.
Reparacin de roturas dobles de cadena: En este caso no existe una cadena
intacta de ADN para ser utilizada de molde en el proceso de reparacin. Las
cadenas con rotura doble son reagrupadas entre 4 y 6 horas por la gran
complejidad del proceso que casi siempre conduce a errores o mutaciones que
conducen a la muerte celular, aunque existen clulas que soportan el dao, como
las tumorales. Existen dos mecanismos de reparacin que son:
1. Reparacin por recombinacin de cromosomas homlogos: Estn
implicados al menos 5 genes: Ku 70, ku 80, DNA-PCKcx, ligasa IV,
Xrcc4. Adems existen otras dos protenas como la ATM y la ATR que
se activan al unirse a los extremos rotos del ADN originados por roturas
dobles de cadena y comienzan la reparacin. Algunas de estas protenas
intervienen en la interrupcin del ciclo celular para que la clula tenga
tiempo de reparar la lesin o inducir la apoptosis. Tambin est
involucrada el gen BCRA1 y BCRA2.
2. Reparacin por unin de extremos no homlogos: Requiere un locus
recproco en la cromtida hermana o secuencias de ADN que posean
gran homologa con aquella que ha sido daada. Se activa cuando la
lesin originada conlleva prdida de material gentico. Es un mecanismo
de reparacin minoritario, dada la baja posibilidad de encontrar el locus
recproco dentro del genoma completo de la clula.