Simposio de Metrologa

25 al 27 de Octubre de 2006

ESTIMACIN DE INCERTIDUMBRE PARA MEDICIN DE Zn POR

ESPECTROFOTOMETRA DE ABSORCIN ATMICA-FLAMA.
Hilda Rivas. Pilar Fernndez.
Instituto de Geografa-UNAM
Circuito de la Investigacin Cientfica s/n
Tel.: 5 6 22 4336 Fax: 5 6 22 4352 hilda@igg.unam.mx

Resumen: Las mediciones analticas tienen una incertidumbre asociada que debe calcularse para darle
al resultado de la medicin un carcter de alta confiabilidad, debido a que este clculo implica el trabajar
con mtodos bien definidos en donde las fuentes han sido ya bien identificadas y se cuenta con una
cadena de trazabilidad generada a partir del uso de materiales certificados.

En el proceso de estimacin de incertidumbre

es importante:

1. INTRODUCCIN
El objetivo de este trabajo es presentar un
ejemplo de clculo de incertidumbre con base
en la Gua tcnica sobre trazabilidad e
incertidumbre en las mediciones analticas que
emplean las tcnicas de Espectrofotometra de
Absorcin Atmica (EAA) y de Emisin Atmica
con Plasma Acoplado Inductivamente [1].

En muchos casos de anlisis qumicos, el

mensurando puede ser la concentracin de un
analito, el cual se obtiene mediante una curva
de calibracin, que en EAA generalmente es
una lnea recta.

xi =

b0
b1

(1)

Para cuantificar la masa y calcular la

incertidumbre asociada se utilizaron las
ecuaciones descritas en la Gua tcnica [1],
mismas que se resumen a continuacin.
El clculo involucrado en la medicin de una
concentracin de masa de cualquier elemento
qumico esta dado por:

Donde:

absorbancia

b0 =

ordenada al origen de la curva de

calibracin
pendiente de la curva de calibracin
concentracin de masa (mg/L) de X,
resultado de la curva de calibracin

b1 =

xi =

Tener un mtodo validado apropiado para

el analito a determinar.
Identificar las posibles fuentes de
incertidumbre, para lo cual, el uso del
diagrama de causa y efecto, conocido
como
diagrama Ishikawa o diagrama
espina de pescado, es de mucha utilidad
(Fig. 1).
Cuantificar
los
componentes
de
incertidumbre asociados con cada fuente
potencial de incertidumbre identificada.
Calcular la incertidumbre combinada.

Xi = ( x B) fd1 fd2
Donde:
Xi =

El resultado de la medicin no es un valor

puntual aislado, es un valor que lleva implcito
una incertidumbre como resultado de todos los
pasos que se siguieron y de los materiales
usados a lo largo del mtodo, como por
ejemplo, la incertidumbre de los matraces y
pipetas utilizados, material de referencia,
balanzas, etc.

(x-B) =
fd1fd2=

El valor de incertidumbre no puede ser usado

para corregir la medicin de un valor. La
incertidumbre de un resultado de medicin
nunca
debe
ser
interpretada
como
representante del error mismo [2].

(2)

concentracin de masa del

mesurando obtenida a partir de la
aplicacin de un mtodo de
medicin
concentracin de masa del
mesurando obtenida a travs de
la curva de calibracin
factor de dilucin aplicado a la
muestra; puede haber tantas n
diluciones como sean necesarias

La incertidumbre estndar de la concentracin

de masa del elemento qumico a medir ,
mediante la respuesta del instrumento se
calcula como:

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u ( x ) =

Donde:
u(x) =
s=
b1 =
p=
n=

(X)i =

MRC =
sxx =

s
b1

25 al 27 de Octubre de 2006

2
1 1 ( ( x )i MRC )
+ +
p n
s xx

(3)

Incertidumbre del mesurando

obtenida por el instrumento calibrado
desviacin estndar residual del
clculo de regresin lineal
pendiente de la recta
nmero de rplicas de la muestra en
estudio
nmero de disoluciones (puntos)
empleados en la curva de calibracin
multiplicado por el nmero de
rplicas (lecturas) de cada disolucin
(punto), total de datos (ij)
concentracin de masa (mg/L) en
estudio
promedio de las concentraciones de
masa de las disoluciones empleadas
en la curva de calibracin
suma de cuadrados de los residuales
de las concentraciones obtenidas

2. PARTE EXPERIMENTAL

La desviacin estndar residual s y la suma de

cuadrados de los residuales de las
concentraciones obtenidas sxx se calculan a
partir de las siguientes ecuaciones:
n

( j )
s=

s xx =

3. RESULTADOS

j =1

j =1

( i )2

Los resultados se obtuvieron con un equipo de

Espectrofotometra de absorcin atmica-(EAA)
Varian, SpectrAA-10 plus. Las condiciones
utilizadas fueron:
Flama aire-acetileno,
Lmpara de ctodo hueco de Zn,
Longitud de onda de 213.9 nm
Ancho de ventana de 1.0 nm [3]
Se us un material de referencia certificado de
Zinc (CENAM DMR-61c) para elaborar la curva
de calibracin y un suelo de referencia
(Montana Soil. Moderately Elevated Trace
Element Concentrations. NIST Standard
Reference Material 2711) para obtener la
concentracin de masa (mg/Kg) de Zn. Se pes
0.5 g de suelo y se digiri en un horno de
microondas CEM MARSX siguiendo el mtodo
EPA 3051[4]. Por cada lote se incluy un
blanco de reactivos (HNO3 concentrado, Baker,
R.A.).

n2
Donde:
s = desviacin estndar residual del
clculo de regresin lineal
las
i lecturas observadas
j =
correspondientes a iMRC conocidas
con las que se calibr el instrumento
las
i lecturas ajustadas
=
correspondientes a iMRC conocidas
del instrumento en la curva de
calibracin
n = nmero total de datos (ij)
n

empleadas en la curva de calibracin

promedio de las concentraciones de
masa de las disoluciones de
referencias empleadas en cada uno
de los puntos de la curva de
calibracin

(4)

3.1 Diagrama de Ishikawa

Las principales fuentes de incertidumbre en la
determinacin de Zn por EAA se observan en
la figura 1.
Curva de
calibracin
Blanco

Repetibilidad
de muestras

Reproducibilidad
de muestras

MRC

Respuesta del
instrumento
Volumen
de la pipeta
Calibracin
pipeta
Diluciones
Fd (en muestras)

(5)

Calibracin
matraz

Concentracin de
Zn mg/Kg

Repetibilidad
de la pipeta
Repetibilidad
del matraz

Volumen
del
matraz

Fig. 1. Diagrama causa-efecto para la medicin

de Zn, empleando EAA[2].

Donde:
Sxx = suma de cuadrados de los residuales
de las concentraciones obtenidas por
la curva de calibracin
i = concentracin de masa de cada i
disolucin de referencia (MRC)

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3.2 Incertidumbre estndar debida al clculo

de la concentracin del analito a partir de
una curva de calibracin.
En la tabla 1 y figura 2 se muestran las
absorbancias obtenidas de una misma curva de
calibracin y el grfico obtenido con el
promedio de las absorbancias de la curva.
Cada uno de los puntos de la curva de
calibracin corresponden a un tipo de
distribucin normal [2] y a una evaluacin tipo
A, ya que se obtienen de una serie de
mediciones repetidas. El coeficiente de
determinacin es 0.999, sin embargo al analizar
la grfica de residuales de la curva, no se
observan los puntos distribuidos al azar (figura
3).
Tabla 1. Absorbancias de las disoluciones
utilizadas en la curva de calibracin de Zn.
Conc
(mg/L)
0.00

0.000

0.001

0.001

0.001

0.001

0.001

0.05

0.020

0.020

0.020

0.020

0.020

0.020

0.10

0.045

0.046

0.045

0.045

0.044

0.045

0.25

0.110

0.112

0.112

0.112

0.114

0.112

0.50

0.231

0.231

0.232

0.233

0.231

0.232

1.00

0.437

0.436

0.436

0.435

0.437

0.436

3.3 Incertidumbre estndar debida al

Material de Referencia Certificado CENAM
DMR- 61c.
Para el clculo de la incertidumbre estndar del
MRC utilizado para hacer la curva de
calibracin se utiliz la ecuacin 6, en donde se
consider la incertidumbre que se reporta en el
certificado del material de referencia por lo que
aqu se hizo una evaluacin tipo B, como el
certificado del material de referencia incluye el
factor de cobertura k se asume que se trata de
una distribucin normal [5].

0.3
y = 0.439x + 0.002
R2 = 0.999

0
0

0.25

0.5

0.75

Concentracin (mg/L)

Figura 2. Curva de calibracin de Zn.

Analito
Zn

0.015

Conc.
(mg/L)
1001.2

U EXP

7.4

0.01
Residuos

absorbancia

0.4

0.1

3.02
0.0174

En este ejemplo (X)i es el valor obtenido del

MRC del suelo Montana Soil 2711, el valor es
mayor al intervalo de trabajo de la curva de
calibracin por que lleva implcito una dilucin,
sin multiplicar por el factor de dilucin el valor
es 0.83 mg/L.

0.5

0.2

Tabla 2. Resultados del clculo de

incertidumbre estndar de la concentracin de
masa del elemento qumico a medir xi.
0.439
b1 =
0.002
bo =
0.0085
s=
5
p=
25
n=
1.67 mg/L
(X)i =
MRC =
0.38 mg/L
Sxx =
u(xi) =

Abs
prom

Lecturas Abs

En la tabla 2 se muestran los resultados de: b1,

bo, (X)i calculados con la ecuacin (1); s se
calcul con la ecuacin (4); p, n y MRC se
usaron en la ecuacin (3) para el clculo de la
incertidumbre estndar de la concentracin de
masa del elemento qumico a medir .

uMRC =

0.005
0
-0.005 0

0.5

UEXP
k

uMRXC = 3.7 mg/L

-0.01
Variable X 1

Figura 3. Grfico de residuales de Zn.

(6)

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3.4 Incertidumbre estndar debida al valor

del blanco.

estndar del punto medio de la curva de

calibracin (fd2).

El clculo de la incertidumbre del blanco se

obtuvo con la ecuacin 7 a partir de los
resultados obtenidos de una serie de 10
mediciones de un slo blanco, en este caso se
hizo una evaluacin que tiene origen estadstico
(tipo A ) y una distribucin normal.

Tabla 3. Factores de dilucin de la curva de

calibracin

u B

sB
n
n
uB
3.5 Preparacin
trabajo.

s
= B
n

(7)

=0
= 10
= 3.16

10

mg/L

fd2

0.5

mg/L

V1

100

mL

V1

100

mL

V2

mL

V2

mL

C1 1001.2 mg/L

C1

10

mg/L

C2

C2

0.5

mg/L

10

mg/L

3.6 Incertidumbre estndar

material volumtrico

=0
de

fd1

los

estndares

de

En la tabla 3 se muestra cmo a partir del MRC

del CENAM, que reporta un valor de
concentracin de 1001.2 mg/L se prepar un
estndar de concentracin intermedia de 10
mg/L (fd1) y a partir de ste, se prepar el

debida

al

En la tabla 4 se presentan tanto los datos

obtenidos experimentalmente, como los datos
tomados de los certificados de calibracin de
las pipetas de 1 y 5 mL y de los matraces de
100 mL que se utilizaron en la elaboracin de la
curva de calibracin y cuantificacin del MRC
2711.

Tabla 4. Resumen de clculo de incertidumbre de la medicin de volumen en material volumtrico.

V (mL)

1
5
100

Incertidumbre
Incertidumbre
V mL
expandida (U)de la
T de
s
estndar (u) de la
T de
debida a la
calibracin
Descrip. (Repetibilidad) calibracin de la
medicin C variac. de T
calibracin de la
mL
pipeta/matraz
C
pipeta/matraz, mL
C
mL

pipeta
pipeta
matraz

0.00008
0.00059
0.00388

0.0005
0.0005
0.0060

0.00025
0.00025
0.00300

En las tablas 5, 6 y 7 se muestra el resumen de

clculo de incertidumbre estndar y relativa
para la pipeta de 1 y 5 mL y matraces de 100
mL, respectivamente. En los tres casos el valor
de u se obtuvo de una serie de seis
repeticiones por lo que corresponden a
evaluaciones tipo A y distribucin normal.
Tabla 5. Resumen de clculo de incertidumbre
estndar y relativa para la pipeta de 1 mL.
Magnitud
Repetibilidad
Var V por T
Calibra*
Volumen**

v unidades
1
1
1
1

mL
mL
mL
mL

u/v

0.00008
0.00006
0.00025
0.00027

0.00008
0.00006
0.00025
0.00027

22.5
22.5
20.0

22
22
22

0.000061
0.000303
0.024249

Tabla 6. Resumen de clculo de incertidumbre

estndar y relativa para la pipeta de 5 mL.
Magnitud

unidades

u/v

Repetibilidad
Var V por T
Calibra
Volumen

5
5
5
5

mL
mL
mL
mL

0.000588
0.000303
0.00025
0.00071

0.000118
0.000061
0.00005
0.00014

Tabla 7. Resumen de clculo de incertidumbre

estndar y relativa para matraces volumtricos
de 100 mL.

*Calibra = Calibracin
**Var V por T = Variacin de volumen debida a la
temperatura

Magnitud

unidades

Repetibilidad
Var V por T
Calibra
Volumen

100
100
100
100

mL
mL
mL
mL

u/v

0.003883 0.000039
0.024249 0.000242
0.003
0.00003
0.024740 0.000247

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3.7 Incertidumbre estndar debida a la

disolucin del DMR-61c para elaborar las
soluciones de la curva de calibracin.
En las tablas 8 y 9 se resumen el clculo de
incertidumbre estndar y relativa para el primer
y segundo factor de dilucin, respectivamente.
Aqu se involucran las incertidumbres del
volumen de la pipeta para 1 mL, 5 mL y el
volumen del matraz de 100 mL en donde se
prepar el estndar. El tipo de distribucin del
factor de dilucin es normal y le corresponde
una evaluacin tipo A. En la tabla 10 se
presenta el resumen del clculo de
incertidumbre estndar y relativa para la
concentracin de masa en donde se presentan
tanto la incertidumbre experimental como la del
certificado.

unidades

u/v

V1
V 100
fd1

1
100
0.01

mL
mL
mL

0.000270
0.024740
0.000004

0.000270
0.000247
0.000367

unidades

u/v

V1
V 100
fd2

5
100
0.05

mL
mL
mL

0.000707
0.024740
0.000014

0.000141
0.000247
0.000285

respuesta
1.67
dil calibra punto medio 0.5006
blanco
0
concentracin de masa 1.67

unidades

mg/L
mg/L
mg/L
mg/L

0.017
0.002
0
0.017

Tabla 12. Combinacin de las u de la masa en

gramos utilizada del MRC Montana Soil 2711.
Magnitud

unidades

m1 balanza
m1 reproduci
m

0.5
0.50003
0.50003

g
g
g

0.000012
0.000030
0.000032

magnitud
(x -B)
m
Volumen
concentracin
de masa

Tabla 9. Clculo de incertidumbre estndar y

relativa para el segundo factor de dilucin.
Magnitud

Magnitud

Tabla 13. Clculo de incertidumbre estndar y

relativa de la concentracin de masa del
material de referencia certificado.

Tabla 8. Clculo de incertidumbre estndar y

relativa para el primer factor de dilucin.
Magnitud

Tabla 11. Combinacin de las u de respuesta

del instrumento, el punto medio de la curva y el
blanco.

v
unidades
u
u/v
1.67
mg/L 0.017500 0.0105
0.0005
kg
0.000000 0.0001
0.100
L
0.000025 0.0002
333.98 mg/Kg

3.5

0.0105 k = 2

Incertidumbre experimental calculada usando

un factor de cobertura k = 2, para un nivel de
confianza de aproximadamente 95 %.
U=

Tabla 10. Resumen de clculo de incertidumbre

estndar y relativa para la concentracin de
masa.
unidades
u
u/v
Magnitud
v
1001.2 mg/L
3.7
0.0037
MRC
fd1
0.01
0.000004 0.0004
fd2
0.05
0.000014 0.0003
concentracin
de masa
0.5006 mg/L 0.001865 0.0037

Urel =

333.98 7
2

mg/Kg.

masa de la
muestra
Facto r de
diluci n (fd2)
Facto r de
diluci n (fd1)

3.8 Aplicacin de la regla 2 [1] Combinacin

de las u de respuesta del instrumento, el
punto medio de la curva, y blanco.
En la tabla 11 se muestra la respuesta del
instrumento para la lectura del MRC Montana
Soil 2711; en la tabla 12 se presenta la u de la
masa en gramos utilizada del MRC Montana
(evaluacin tipo A y distribucin normal).

u(xi)

0.0000 0.0050 0.0100 0.0150 0.0200

Contribucin ui(y)

Figura 4. Contribucin de incertidumbre en la

medicin de Zn utilizando EAA.
La estimacin de incertidumbre en la medicin
de

Zn por EAA-Flama se obtuvo del certificado

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del Material de Referencia utilizado para

preparar la curva de calibracin (DMR 61c), del
certificado de calibracin de la balanza
(sartorius R200D), del certificado de calibracin
del material volumtrico utilizado, del certificado
de calibracin de las pipetas automticas
utilizadas y de mediciones repetidas realizadas
en material volumtrico clase A.
4. DISCUSIN
Se cuantificaron las fuentes de incertidumbre
sealadas en el diagrama de Ishikawa y se
observ que las incertidumbres asociadas al
valor del blanco,
material de referencia
certificado CENAM DMR-61c y Montana Soil
2711, son despreciables (ver figura 4) .
Lo mismo aplica para la incertidumbre
reportada en el certificado de calibracin de la
balanza, las pipetas automticas, matraces
volumtricos y termmetros.
En la figura 4 se muestra que la mayor
aportacin a la incertidumbre es debida a u(xi),
probablemente por que los residuales de la
curva de calibracin no se distribuyen al azar lo
cual significa que los intervalos con los que se
esta trabajando no son del todo lineales.
5. CONCLUSIONES
La estimacin de la incertidumbre en las
mediciones analticas es un parmetro
necesario de obtener, para darle una mayor
confiabilidad a los resultados. As en este
ejemplo el resultado obtenido caracteriza la
dispersin del valor medido en el EAA-Flama
para el elemento qumico Zn.
El trabajar con material de referencia certificado
y pipetas, matraces, termmetro y balanzas
calibradas
contribuyen
a
una
menor
incertidumbre en los resultados.
REFERENCIAS
[1]

[2]
[3]

CENAM-ema, GUA TCNICA SOBRE

TRAZABILIDAD E INCERTIDUMBRE EN
LAS MEDICIONES ANALTICAS QUE
EMPLEAN
LAS
TCNICAS
DE
ESPECTROFOTOMETRA
DE
ABSORCIN ATMICA Y DE EMISIN
ATMICA CON PLASMA ACOPLADO
INDUCTIVAMENTE Mxico, Mayo. 2004,
73 Pg.
EURACHEM/CITAC Guide. Quantifying
Uncertainty in Analytical Measurement.
Second Edition. 2000, 4-27pp.
Varian. 1989. Flame Atomic Absorption
Spectrometry.
Analytical
Methods.

[4]

[5]

Varian, S.A. Mxico. Publication No. 85

100009-00. Varian Australia Pty Ltd. 146
Pg.
EPA 3051 Microwave Assisted Acid
Digestion of Sediments, Sludges, Soils,
and Oils Revision 0 September 1994 14
Pg.
CENAM Certificado de Material de
Referencia CNM-MR-620-0554/2004