UNIVERSIDAD DE LA FRONTERA

Facultad de Medicina
Dpto. de Ciencias Bsicas

GUIA DE LABORATORIO N1:

USO Y MANEJO DEL MICROSCOPIO PTICO
Asignatura: Ciencias Biolgicas y Qumicas (MBA 004)
Docente:
Prof. Edoardo Tosti-Croce A.
Materiales que cada alumno debe traer al laboratorio:
Un calendario de bolsillo que contenga un paisaje en colores.
Una moneda.

OBJETIVOS:

Reconocer la ubicacin y la funcin de los diferentes componentes mecnicos, pticos y de

iluminacin de microscopios compuestos y mesoscopios (microscopios estereoscpicos).
Caracterizar el distinto poder de aumento, definicin, resolucin y de penetracin de ambos
tipos de microscopios pticos compuestos.
Utilizar adecuadamente microscopios pticos compuestos y mesoscopios, con sus distintos
niveles de aumento.

ACTIVIDADES
Actividad N 1: Transporte del microscopio ptico compuesto
El transporte del microscopio debe hacerse utilizando ambas manos. Con una mano debe
tomarlo del brazo y con la otra de la base. Nunca debe inclinarlo y debe evitar absolutamente
los movimientos bruscos y golpes.
El instrumento ptico debe ser colocado en una superficie plana y seca, orientando el tubo
con lo oculares hacia donde usted se ubicar.
Actividad N 2: Preparacin del microscopio ptico compuesto para su utilizacin
Enchufe el microscopio y pruebe si enciende la lmpara. Apguela y mantngala apagada
hasta que se le indique. Si no se est observando a travs del microscopio, la lmpara debe
mantenerse siempre apagada.
Desenrolle completamente el cable. Cuide que lo sobrante de ste quede en el centro del
mesn.
Verifique el estado de limpieza del instrumento. La limpieza del microscopio debe hacerse
humedeciendo un pao o algodn con uno de los solventes recomendados para tal fin,
generalmente se utiliza etanol, etanol-ter u otro. Nunca debe mojar con agua el microscopio.
Para limpiar los oculares y objetivos es preferible utilizar un papel para lentes o un pao suave
que no deje pelusas.
Actividad N 3: Posicin inicial (o de reposo) del microscopio
Para comenzar a utilizar el microscopio, ste debe estar en las condiciones que a continuacin
se indican. Revise y vaya corrigiendo si esto no se cumple. Siga la secuencia que se seala.
POSICIN INICIAL, DE REPOSO Y/O FINAL
1)

Lmpara apagada o potencimetro (si existe) debe estar indicando 0.

2)

Condensador (si es mvil) en su posicin ms alta.

3)

Platina en su posicin ms baja.

4)

Objetivo de menor aumento apuntando hacia la platina.

5)

Diafragma (si existe) abierto al mximo.

El microscopio debe estar en "posicin inicial" en las siguientes situaciones:

Antes de comenzar a trabajar con l.
Antes de guardarlo en el estante.

Actividad N 4: Clculo del aumento dado por el microscopio ptico compuesto

Observe el reborde externo del ocular(es), lea y anote en la siguiente tabla, lo referente al
aumento que otorga(n). Anote tambin, el aumento que se indica en cada uno de los objetivos.
Aumento dado por el ocular

Aumento dado por el objetivo

Aumento total

Objetivo 1:
Objetivo 2:
Objetivo 3:
Objetivo 4:
Actividad N 5: Posicin del observador
El observador debe encontrarse de tal modo que la altura del asiento le permita mantenerse
erguido, con la cabeza inclinada ligeramente hacia los oculares del microscopio.
Durante la observacin debe, permanentemente, manejar con una mano el tornillo macromicromtrico y con la otra los tornillos del carro.
Actividad N 6: Enfoque con el primer objetivo (aumento menor)
El micropreparado que observar, corresponde a un corte de hgado. Siempre que va a
observar algn micropreparado a travs del microscopio, debe comenzar empleando el objetivo
de menor aumento (el primero) y siguiendo estas indicaciones:
PROCEDIMIENTO DE ENFOQUE CON EL OBJETIVO MENOR
1) Asegrese que el microscopio est en posicin inicial.
2) Revise que tanto el microscopio como el micropreparado que va a observar, estn limpios y
secos.
3) Coloque el micropreparado sobre la platina, cuidando que el cubreobjeto quede hacia
arriba. El micropreparado debe quedar totalmente horizontal y sujeto por la pinza lateral, la
que movida para dar cabida al preparado y luego acercada a ste suavemente.
4) Desplace el micropreparado utilizando los tornillos del carro, de modo que el material a
observar, quede ubicado sobre el centro del orificio de la platina.
5) Suba la platina al mximo con el macromtrico.
6) Encienda la lmpara.
7) Observe a travs de los oculares. Regule la posicin de los oculares a su propia distancia
interpupilar, hasta ver un solo crculo iluminado o campo visual.
8) Baje muy lentamente la platina con el tornillo macromtrico, hasta que aparezca la imagen
borrosa del objeto. La imagen ntida la obtendr girando el tornillo micromtrico.
9) Regule la cantidad de luz. Dependiendo del modelo de microscopio, puede regular la luz
con el potencimetro, con el condensador y/o con el diafragma.
Recorra el micropreparado. Para esto, una vez que haya obtenido la imagen ntida y sin dejar
de observar, desplace el carro del microscopio de izquierda a derecha y de hacia adelante hacia
atrs.
Relacione los movimientos del carro con los desplazamientos de la imagen que obtiene a
travs del microscopio.
Ubique al centro del campo visual, la zona del micropreparado que desea seguir observando
con mayor aumento.
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Para seguir observando con aumentos mayores, mantenga el microscopio en la posicin que
est, es decir no baje ni suba la platina, tampoco mueva el micropreparado y proceda como
sigue.
Actividad N 7: Enfoque con objetivos de mayor aumento (en seco).
Con la lmpara encendida, en posicin de enfoque con menor aumento y sin bajar la platina,
gire el revlver de tal manera que el segundo objetivo quede apuntando hacia la platina. La
posicin correcta del objetivo es indicada por el click del retn.
A partir de este momento no debe volver a usar el tornillo macromtrico, de tal manera que
para lograr la nitidez de la imagen debe girar slo el tornillo micromtrico, hasta obtener el
enfoque adecuado.
Desplazando el carro, recorra el micropreparado y ubique al centro del campo visual lo que
desea examinar con mayor aumento.
Sin bajar la platina, gire nuevamente el revlver y ubique el tercer objetivo en posicin de
enfoque. Observe y gire el tornillo micromtrico hasta lograr la nitidez de la imagen.
Nuevamente, ubique al centro del campo visual la zona del micropreparado que desea seguir
observando con mayor aumento.
Al ir cambiando los objetivos en un sentido ascendente, habr podido observar que la
distancia de trabajo se ha ido reduciendo, es decir la separacin entre el micropreparado y el
extremo del objetivo es cada vez menor.
Asimismo, es posible que al cambiar de objetivos tenga la necesidad de hacer ajustes en la
luminosidad, ya sea con el potencimetro, con el diafragma y/o con el condensador.
Mantenga encendido el microscopio en la posicin que est, sin bajar la platina, sin cambiar
de objetivo y sin mover el micropreparado, para pasar a la prxima actividad.
Actividad N 8: Enfoque con el objetivo de inmersin (objetivo mayor).
Sin apagar el microscopio ni bajar la platina, gire parcialmente el revlver, en direccin
al objetivo mayor (el de inmersin), dejando el revlver en una posicin intermedia, no en el
retn.
En la zona iluminada del micropreparado, coloque sobre el cubreobjeto una gota de aceite de
inmersin y termine de girar suavemente el revlver, hasta el "click" del retn.
La distancia de trabajo ahora es la mnima, entre 0,10 y 0,16mm, por lo que el enfoque fino
debe ser hecho con mucho cuidado con el tornillo micromtrico, teniendo precaucin de que no
llegue a tocar directamente el extremo del objetivo con el cubreobjeto del micropreparado y
quede entre ambos un menisco de aceite.
Con desplazamientos del carro, recorra el micropreparado.
Si es necesario, vuelva a regular la luminosidad. Para esto, dependiendo del modelo de
microscopio que est utilizando, suba o baje el condensador; abra o cierre el diafragma; desplace
la lente adicional del condensador o gire el potencimetro.
Dibuje lo observado en el crculo que representa el campo visual del microscopio. El dibujo
debe ser preciso, en proporcin al tamao del campo visual y corresponder exactamente a lo que
en realidad se observa. Se debe emplear lpiz grafito para poder hacer correcciones y colorear
segn corresponda, utilizando lpices de colores corrientes.
Calcule el aumento total con que realiz la observacin.

Aumento total: x

Una vez finalizada la observacin y sin mover la platina, lleve el revlver al objetivo menor
y retire el micropreparado desde la platina.
Actividad N 9: Caractersticas de la imagen obtenida a travs del microscopio ptico
compuesto.
Coloque directamente sobre la platina del microscopio, un calendario de bolsillo, ubicando
sobre el orificio de la platina, una zona del calendario en que existan letras o nmeros.
Siguiendo las indicaciones del procedimiento de enfoque con el objetivo menor (Activ. N
6), proceda a enfocar alguna letra o nmero del calendario. Dibuje lo observado.

Aumento total: x
Lea una palabra o una cifra del calendario. En qu direccin debe desplazar el carro del
microscopio para poder leer? Caracterice la imagen obtenida.
Coloque el microscopio en posicin inicial (Activ. N 3) y retire el calendario desde la
platina.
Actividad N 10: Reconocimiento de una propiedad del microscopio.
Ubique el calendario de bolsillo en la platina del microscopio, para observar el paisaje.
Siga las indicaciones del procedimiento de enfoque con el objetivo menor (Activ. N 6).
Dibuje lo observado.

Aumento total: x.
Coloque el microscopio en posicin inicial (Actividad N 3) y retire el calendario desde la
platina.
Actividad N 11: Reconocimiento de una propiedad del microscopio.
Coloque una moneda sobre un portaobjeto. No es necesario que coloque un cubreobjeto.
Ubique la preparacin en la platina del microscopio, ubicando la moneda sobre el orificio de
la platina.
Siga las indicaciones del procedimiento de enfoque con el objetivo menor (Activ. N 6). No
encienda el microscopio.
Recorra la moneda y observe letras, nmeros y figuras que presenta. Describa la imagen
obtenida.
Coloque el microscopio en posicin inicial (Actividad N 3) y retire la moneda desde la
platina.

Actividad N 12: Trmino de la observacin de un micropreparado a travs del microscopio

ptico compuesto.
Verifique que el microscopio est en posicin inicial. Limpie las lentes del microscopio
utilizando el pao (o algodn) humedecido con solvente.
Desconecte el microscopio de la red elctrica. Enrolle el cable alrededor de la zona baja del
brazo del microscopio. Gurdelo en el estante y djelo tapado con la funda protectora.
Actividad N 13: Uso del mesoscopio o microscopio estereoscpico (lupa de diseccin).
Materiales que deber observar: un calendario de bolsillo y una moneda.
No es necesario que dibuje lo observado, slo caracterice las imgenes obtenidas.
Compare estas imgenes con las obtenidas con el microscopio ptico compuesto.
BIBLIOGRAFA

ALBERTS, B., BRAY, D., ROBERTS, K. & WATSON J. 1996 Biologa Molecular de la
Clula. 3 ed. Ediciones Omega S.A. Barcelona. Espaa.
CURTIS, H. & BARNES, N. S. 2000 Biologa. 6 ed. Edit. Mdica Panamericana S.A.
DE ROBERTIS, F. & DE ROBERTIS, E. M. F.2000 Biologa Celular y Molecular. 13 ed.
Edit. El Ateneo. Bs. Aires. Argentina.
DE ROBERTIS, E. M. F (H), HIB, J. & PONZIO, R. 2000 Biologa Celular y Molecular de
De Robertis. Edit. El Ateneo. Bs. Aires. Argentina.
DI FIORE, M. 2002 Atlas de Histologa Normal. 7 ed. Edit. El Ateneo. Bs. Aires. Argentina.
DYSON, R. 1997 Principios de Biologa Celular. Fondo Educativo Interamericano. S.A.
JUNQUEIRA, L. C. & CARNEIRO, J. 1998 Biologa Celular y Molecular. 6 ed. Edit.
McGraw - Hill. Interamericana.
MADIGAN, M.T., MARTINKO, J.P. & PARLER, J. 2003 Brock: Biologa de los
Microorganismos. 10 ed. Edit. Pearson Educacin.
PANIAGUA, R. NISTAL, M. et al. 2003 Biologa Celular. 2 ed. Edit. McGraw- Hill.
Interamericana. Espaa.
SOLOMON, E., BERG, P., MARTIN, L. & VILL, C. 1998 Biologa. 4 ed. Edit. McGrawHill. Interamericana.

VdJR / ETC 2009.04.22