UNIVERSIDAD DE LA FRONTERA

Facultad de Medicina
Dpto. de Ciencias Bsicas

GUIA DE LABORATORIO N5:

DIVERSIDAD CELULAR, PRIMERA PARTE
Asignatura: Ciencias Biolgicas y Qumicas (MBA 004)
Docentes:
Prof. Edoardo Tosti-Croce A.
OBJETIVOS
1) Identificar diferentes formas y estructuras celulares.
2) Determinar el tamao real de las clulas observadas a travs del microscopio.
3) Completar el diagnstico de las observaciones realizadas a travs del microscopio.
4) Aplicar mtodos y tcnicas de tincin que permiten obtener micropreparados de material
biolgico, para su observacin y anlisis microscpico.
5) Adquirir destreza en el manejo de los microscopios pticos.
MATERIALES QUE DEBER TRAER:

un trozo de pan (de zapallo, de tomate o de otro material) con mohos (se puede conseguir en
fruteras)

lpiz grafito, lpices de colores, goma de borrar

ACTIVIDADES
En el Laboratorio usted realizar algunas observaciones de diferentes materiales biolgicos,
utilizando microscopios pticos compuestos.
Cada vez que realice una observacin al microscopio, deber completar el DIAGNSTICO
DE LA OBSERVACIN, que consiste en sealar los siguientes aspectos:
1) Objetivo(s): Se refiere a la finalidad de la observacin. Se enuncia empleando un verbo en
infinitivo; ejemplos: observar, distinguir, diferenciar, determinar el tamao, comparar, etc.
2) Material: Corresponde a lo que fue colocado en el portaobjeto y que ser examinado a travs
del microscopio. Se debe indicar si el material es un corte (longitudinal, transversal,
tangencial, etc.), un trozo, un frotis o aplastado.
3) Mtodo: Se refiere al procedimiento empleado para obtener el micropreparado Deber
escoger entre mtodos inmediato y mediato y las posibilidades que estos mtodos presentan.
Si hubo tincin del material, sta debe indicarse.
4) Aumento: Corresponde al total de veces de aumento con que se hizo la observacin. No es
necesario indicar por separado el aumento dado por el ocular y por el objetivo empleados.
5) Dibujo: Es la representacin de lo observado. La imagen que se obtiene de una observacin
al microscopio, debe ser dibujada dentro del crculo, el cual representa al campo visual. El
dibujo debe ser preciso, en proporcin al tamao del campo visual y corresponder lo ms
exactamente posible a lo que se observa. Para dibujar emplee lpiz grafito y coloree segn
corresponda, utilizando lpices de colores (no de tinta, gel o cera), para poder hacer
correcciones.
6) Dimetro real del campo visual (D.C.V.): Corresponde a cunto es lo que mide realmente el
dimetro del campo visual, esto es, lo que se alcanza a ver, sin desplazar la muestra.
Depende del modelo de microscopio y del aumento utilizado. Permite determinar el
tamao real aproximado de lo que se visualiza a travs del microscopio.
ACTIVIDAD N1: Observacin de Bacterias
Haga un frotis con una pequea gota de yogur diluido y luego seque por flameo suave,
teniendo cuidado que la muestra quede desplazada hacia uno de los extremos del portaobjetos,
con el fin de facilitar el proceso de tincin y manipulacin. Una vez secada la muestra deje caer
sobre ella una o dos gotas de azul de metileno y djela en reposo por 2 a 3 minutos. Remueva el
exceso de azul de metileno con un chorro suave de agua destilada, sobre los fuentones de desage
y vuelva a secar de manera suave. Sin cubrir con cubrobjeto, lleve la preparacin al microscopio,
para dibujar con x1000 los microrganismo que se observen teidos y describir su forma.
1

DIAGNSTICO
Objetivos:
Determinar la forma de las clulas bacterianas
Determinar el modo de agruparse (si corresponde)
Calcular el tamao celular promedio
Material:

..

Mtodo:

...............................................

Aumento: 1.000 x
D.C.V.: ...................
Coloque el microscopio en posicin inicial y retire el micropreparado desde la platina.
ACTIVIDAD N 2: Observacin de Protozoos
Coloque sobre un portaobjeto una gota de agua de charco o estancada.
Ubique el micropreparado obtenido sobre un trozo de papel filtro. Coloque un cubreobjeto
sobre la gota de agua de charco. Doble el papel filtro por sobre el cubreobjeto, de manera que el
papel pueda absorber el exceso de lquido de los bordes del cubreobjeto.
Observe a travs del microscopio utilizando finalmente el tercer objetivo (40x o 450x).
Vea si en el agua estancanda hay protozoos similares a los que se presentan a continuacin.

Complete el diagnstico de su observacin al microscopio.

DIAGNSTICO
Objetivos:
Determinar la forma de las clulas
Calcular el tamao aproximado de los protozoos (promedio)
Material:

Agua de charco que contiene protozoos

Mtodo :

.........................................

Aumento: .................
D.C.V.: .....................
Coloque el microscopio en posicin inicial y retire el micropreparado desde la platina.
Si la gota de agua de charco examinada contiene protozoos ciliados, siga el procedimiento
siguiente. En caso que le agua de charco no contenga protozoos ciliados, obtenga otro
micropreparado con agua de charco de otro frasco, antes de seguir el procedimiento que se indica.
Levante el cubreobjeto del micropreparado y deposite una gota de solucin de lugol. Mezcle
los lquidos con un alfiler y vuelva a colocar el cubreobjeto.
Ubique el micropreparado obtenido sobre un trozo de papel filtro. Doble el papel filtro por
sobre el cubreobjeto, de manera que el papel pueda absorber el exceso de lquido de los bordes
del cubreobjeto.
Observe al microscopio empleando finalmente el objetivo de inmersin.
procedimiento que debe realizar para observar con ese objetivo).

(Recuerde el

Complete el diagnstico de la observacin.

DIAGNSTICO
Objetivos:

Observar cilios

Material:

Agua de charco que contiene protozoos ciliados

Mtodo :

.........................................

Aumento: 1.000x
D.C.V.: .....................

Coloque el microscopio en posicin inicial y retire el micropreparado desde la platina.

ACTIVIDAD N 3: Observacin de hongos unicelulares.
Sobre un portaobjeto limpio y seco coloque una gota de suspensin de levaduras
(Saccharomyces cerevisae) y una gota de solucin de lugol. Mezcle los lquidos con un alfiler.
Ubique el portaobjeto sobre un trozo de papel filtro. Coloque un cubreobjeto sobre el material
del portaobjeto. Doble el papel filtro por sobre el cubreobjeto, de manera que el papel pueda
absorber el exceso de lquido de los bordes del cubreobjeto.
Observe a travs del microscopio empleando finalmente el objetivo mayor.
DIAGNSTICO
Objetivos:

Determinar la forma de las clulas

Identificar el ncleo celular
Observar clulas en gemacin
Calcular el tamao celular promedio

Material:

Suspensin de levaduras

Mtodo :

.................................................

Aumento: .................
D.C.V.: .....................
Coloque el microscopio en posicin inicial y retire el micropreparado desde la platina.
ACTIVIDAD N 4: Observacin de mohos
Coloque sobre una cpsula de Petri, un trocito de pan (u otro material) que contenga mohos.
Coloque la cpsula de Petri sobre la platina de un microscopio ptico de diseccin (lupa) y
observe.
Fije su atencin en las estructuras que asemejan alfileres y que sobresalen en la superficie del
material, dando un aspecto algodonoso. Estas estructuras corresponden a los esporangios. Las
esporas son de diversos colores. Algunos hongos, como Rhizopus nigricans y Aspergillus niger,
producen esporas negras. En otros, como Neurospora crassa, las esporas son rosadas y en
Penicillium (el hongo que produce la penicilina) son verde-azuladas. Algunos de los colores en
el pan tambin pueden ser el resultado del crecimiento bacteriano, que algunas veces se observa
en los alimentos. Por ejemplo, una bacteria llamada Serratia marcescens forma colonias rojizas.
Es posible diferenciar las colonias de bacterias de las de los mohos porque las primeras se ven
lisas y en los mohos presentan un aspecto algodonoso.

DIAGNSTICO
Objetivos:
Observar los esporangios
Identificar micelio
Diferenciar hifas areas y absortivas
Reconocer la tridimensionalidad de la imagen obtenida.
Material:
Trozo de pan con mohos
Mtodo :
.................................................

Aumento: ................
D.C.V.: .....................
Retire la placa de Petri y el micropreparado desde la platina.
Para finalizar:
Entregue portas, y cubreobjetos que utiliz.
Antes de guardar el microscopio, limpie las lentes del microscopio con etanol-ter.
Asegrese que el microscopio est en posicin inicial.
Guarde el microscopio en el estante y coloque sobre l, la cubierta protectora.
BIBLIOGRAFA

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Bacterias
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http://www.ugr.es/~eianez/Microbiologia/programa.htm
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Levadura.
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Moho
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Penicilina
http://es.wikipedia.org/wiki/Penicilina
Protozoos
http://recursos.cnice.mec.es/biosfera/alumno/2bachillerato/micro/contenidos7.htm#ciliado
Atlas de microbiologa (imgenes)
http://www.sochinf.cl/atlas.htm
Yogurt
http://es.wikipedia.org/wiki/Yogurt
http://www.textoscientificos.com/alimentos/yogur/bacterias
VdJR / ETC / 2009.06.09