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Enzimas

Enzimas
Catalizadores muy potentes y eficaces,

Qumicamente: proteinas,
RNAs

Velocidad de Reaccin

Clasificacin de Enzimas
1. xido-reductasas
( Reacciones de oxido-reduccin).

2. Transferasas
(Transferencia de grupos funcionales)
grupos aldehidos
gupos acilos
grupos glucosilos
grupos fosfatos (kinasas)

3. Hidrolasas
(Reacciones de hidrlisis)
Transforman polmeros en monmeros.
enlace ster
enlace glucosdico
enlace peptdico
enlace C-N

Clasificacin de Enzimas
4. Liasas
(Adicin a los dobles enlaces)
Entre C y C
Entre C y O
Entre C y N

5. Isomerasas
(Reacciones de isomerizacin)

6. Ligasas
(Formacin de enlaces, con aporte de ATP)
Entre C y O
Entre C y S
Entre C y N
Entre C y C
5

Factores que Influencian el


Crecimiento de los Microorganismos

Factores Ambientales
Temperatura
crecimiento
mnimo
mximo
ptimo

Figure 6.12

Prescott, Harley and Klein

Figure 6.13
Prescott, Harley and Klein

Solutos y Actividad de Agua


Solutos compatibles: Colina, betaina, prolina, glutamato
Iones: K+
http://www.arn.org/docs/glicksman/Osmotic%20Pressure.jpg

Efecto del NaCl en el crecimiento bacteriano

Actividad de agua:
aw = 1/100 de la humedad relativa de la solucin

Tambin equivalente a la presin de vapor de


la solucin:
aw =P sol/ P agua

Microorganismos con habilidad de crecer en


medios con baja aw son osmotolerantes

11

12

pH
Acidfilos y alcalfilos mantienen el pH interno cercano a
la neutralidad
Algunos usan intercambio de protones/ iones para mantener el
pH

Algunos sintetizan protenas protectoras


e.g., protenas de choque cido

Muchos microorganismos cambian el pH de su habitat


produciendo desechos cidos y bsicos
mayora medios de cultivo artificiales contienen soluciones
tampon

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pH
acidfilos
pH 0 y pH 5.5

neutrfilos
pH 5.5 y pH 7

alcalfilos
pH8.5 y pH 11.5

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15

Concentracin de oxgeno
need
oxygen

Prescott, Harley and Klein

prefer
oxygen

ignore
oxygen

oxygen is
toxic

< 2 10%
oxygen

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Sensibilidad al O2

Prescott, Harley and Klein

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Cmara de anaerobiosis

Prescott, Harley and Klein

Sistema GasPack

Prescott, Harley and Klein

Presin atmosfrica
microorganismos no
tolerantes
microorganismos
barotolerantes
microorganismos
baroflicos

http://www.800mainstreet.com/08/0008-003-atm.gif
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Radiacin

Prescott, Harley and Klein

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Daos inducidos por luz ultravioleta

Ambientes Naturales

Biopelculas (Biofilms)
Prescott, Harley and Klein

Formacin de biopelculas

Prescott, Harley and Klein

Quorum Sensing

Prescott, Harley and Klein

Prescott, Harley and Klein

Crecimiento

Crecimiento
Crecimiento celular

Divisin celular

Gemacin

Fragmentacin

Actinomyces streptomycini
http://reproduction.synthasite.com/advantages-and-disadvantages-of-asexual-and-sexual.php

Fisin binaria

Prescott, Harley and Klein

Ciclo celular
Masa, volumen crticos

Particin de los
cromosomas

Prescott, Harley and Klein

Etapas del Ciclo Celular


Replicacin del cromosoma
Segregacin del cromosoma
Divisin celular:
Formacin del septo
Degradacin y sntesis de pared
Sntesis de membrana

Cromosomas Bacterianos
Circular
Bacillus subtilis, Escherichia coli

Lineal
Borrelia burdorferi

nico
Bacillus subtilis, E. coli, etc

Mltiple
Rhodobacter sphaeroides, Vibrio cholerae

G1

Expulsin del
flagelo

G2
Divisin celular
Biognesis del
flagelo

Sntesis del
tallo
Inhibicin de la replicacin
Lucy Shapiro, Stanford University

Biognesis del
pili

Metilacin del DNA

Movimiento del DNA: migracin del origen

MreB (Actina)
Indispensable para el movimiento hacia los polos de
los orgenes de replicacin despus de que el DNA se
ha replicado.
Bacterias tratadas con un inhibidor de MreB, replican
cromosoma pero no se dividen.

Prescott, Harley and Klein

Origen de replicacin /MipZ

Migracin del origen/ParB/MipZ

Anillo Divisional
Mutantes filamentosas sensibles a la
temperatura
Protenas Fts
Productos de los genes ftsZ, ftsA, ftsQ, ftsL,
ftsI, ftsN, ftsK, ftsW y zipA.
Se expresan ordenadamente, siendo FtsZ la
primera protena detectada:

FtsZ [FtsA, ZapA, ZipA] (FtsE, FtsX) FtsK


FtsQ (FtsB, FtsL) FtsW FtsI FtsN
AmiC EnvC

Anillo Divisional

Prescott, Harley and Klein

Anillo Divisional

En 1991, se demostr que la protena FtsZ se ensambla en un anillo en el sitio de la


divisin celular

Coordinacin del ensamblaje del anillo FtsZ y la


replicacin de los cromosomas

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MipZ inhibe polimerizacin de FtsZ

Jerod L. Ptacin and Lucy Shapiro Cellular Microbiology (2013) 15(1), 4552.

Escherichia coli

E. Toro, L. Shapiro. Cold Spring Harb Perspect Biol 2010; 2:a000349.

Divisin celular
La pared celular es
extendida por
intercalacin de
peptidoglicano

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Crecimiento
Curva de crecimiento cultivo en lote
Prescott, Harley and Klein

Crecimiento bacteriano
Aumenta exponencialmente en funcin
del tiempo

Matemticas Curva de Crecimiento

Prescott, Harley and Klein

Tiempo de Duplicacin

Prescott, Harley and Klein

Conteo Directo

Cmara de Petroff-Hausser

Prescott, Harley and Klein

Mtodos para medir crecimiento

Prescott, Harley and Klein

Mtodos para medir crecimiento

Mtodo de las diluciones

Prescott, Harley and Klein

Conteo por filtracin

Prescott, Harley and Klein

Cultivo continuo

D=tasa de dilucin= f/V


D: velocidad a la que fluye el medio a travs del recipiente/volumen del recipiente

Cultivo Continuo

Requerimientos para el crecimiento


Qumicos
Medio de cultivo-fuente de nutrientes

Fisicoqumicos
pH, presin osmtica, P(O2), aw

Fsicos
Temperatura
Presin
Radiacin

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