Ao de la Diversificacin Productiva y del Fortalecimiento de la Educacin

UNIVERSIDAD NACIONAL SAN LUIS GONZAGA DE ICA

Facultad de Ingeniera Ambiental y Sanitara
PRACTICA N5

AISLAMIENTO DEL PATGENOS EN INFECCIN

URINARIA
Curso:
Microbiologa Ambiental
Docente:
Blgo. Ovidio Maravi Villantoy
Alumno:
MEDRANO DE LA CRUZ, Armando
Ciclo:
V

ICA PER
2015
MICROBIOLOGIA AMBIENTAL

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I. INTRODUCCION
Las infecciones urinarias suelen estar causados por bacterias, siendo uno de los motivos ms
frecuente de consulta, tanto a nivel de consultorios del sistema pblico como en el sistema
privado. A lo largo de la vida no es inusual que tanto hombres como mujeres presenten
infecciones urinarias. En la mayor parte de los casos, el tratamiento es sencillo y la enfermedad
transcurre sin complicaciones. Sin embargo, las mujeres son ms propensas a sufrir este tipo de
enfermedades debido a los cambios hormonales que padecen o cuestiones puramente
fisiolgicas.
La muestra de orina para urocultivo es la ms frecuentemente recibida y procesada en los
laboratorios de microbiologa. Aproximadamente 20 a 22% de los urocultivos tienen un resultado
positivo. La presencia de bacterias en la orina puede corresponder a varios sndromes clnicos
que poseen mecanismos patognicos propios y significado clnico, tratamiento y pronstico
diferentes, dependiendo del tipo de husped.
El propsito de esta prctica es hacer un anlisis microbiolgico de una muestra de orina,
determinar si existe una infeccin y, si existe, identificar el microorganismo que la produce. Para
determinar si existe infeccin debemos hacer un recuento del nmero de microorganismos que
hay por ml de orina (>10.000 ufc/ml si hay infeccin). Para determinar el microorganismo que
produce la infeccin hay que hacer una identificacin del microorganismo que previamente
hemos aislado.

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I.

OBJETIVOS
Conocer los patgenos causantes de infeccin urinaria.
Presenciar la tcnica que se utiliza para el urocultivo.
Interpretar dicha tcnica

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II.

MARCO TERICO
INFECCION DEL TRACTO URINARIO

Una infeccin bacteriana del tracto urinario (ITU) es el tipo de

infeccin ms comn que afecta al tracto urinario. La orina, es el
lquido que los riones filtran del torrente sanguneo. La orina
contiene sales y productos de desecho, pero normalmente no
contiene bacterias. La ITU se puede producir cuando las bacterias
entran a la vejiga o al rin y se multiplican en la orina.
La ITU puede ser alta o baja. La infeccin urinaria alta es la que compromete los riones suele ser
ms grave y requiere de un tratamiento ms intensivo. No suele presentarse en personas sanas.
La infeccin urinaria baja compromete la vejiga y la uretra. Es ms frecuente en mujeres que en
hombres. En pacientes con enfermedades crnicas, ancianos, o embarazadas puede ser seria y
hasta requerir internacin.
CAUSAS GENERALES DE LAS ITU
Las ITU usualmente son causadas por E. coli, las bacterias que se encuentran normalmente en
el tracto digestivo y en la piel alrededor de las reas del recto y de la vagina. Cuando las bacterias
entran a la uretra, pueden avanzar hacia la vejiga y causar una infeccin.

Las mujeres desarrollan infecciones del tracto urinario con mucha ms frecuencia que los
hombres, probablemente por las diferencias en la forma y la longitud de la uretra. Las muchachas
tienen uretras ms cortas que los muchachos y la abertura est ms cerca del recto y la vagina,
donde es ms probable que se encuentren bacterias. Algunas personas parecen tener ITU con
frecuencia, pero a menudo tienen otros problemas que las hace ms propensas a tener
infecciones, como una anormalidad en las estructuras o la funcin del tracto urinario. El problema
funcional ms comn del tracto urinario se llama reflujo vesicoureteral, una afeccin en la que un
poco de orina fluye de regreso, o refluye, de la vejiga a los urteres e incluso hasta los riones.

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Hay varias maneras en que las bacterias entran a la uretra.

Durante las relaciones sexuales, las bacterias del rea de la
vagina pueden ser empujadas dentro de la uretra y con el
tiempo terminan en la vejiga, donde la orina crea un ambiente
propicio para el crecimiento de las bacterias. sta es la razn
por la que las mujeres que son sexualmente activas a menudo
sufren de ITU (las ITU no son contagiosas, de modo que otra
persona no te puede contagiar la infeccin del tracto urinario). Las bacterias tambin pueden ser
introducidas en la vejiga de una nia al limpiarse de atrs hacia adelante despus de tener una
evacuacin intestinal, esto puede contaminar la abertura de la uretra. El uso de espermicidas
(incluyendo condones tratados con espermicida) y diafragmas como anticonceptivos tambin
puede aumentar el riesgo de desarrollar una infeccin del tracto urinario.
Las enfermedades de transmisin sexual (ETS) pueden causar sntomas parecidos a los de las
ITU, como por ejemplo dolor al orinar. Esto se debe a la inflamacin e irritacin de la uretra o de la
vagina que a veces se asocia con Chlamydia y otras ETS. Si no se tratan, las ETS pueden causar
graves problemas de largo plazo, incluso enfermedad inflamatoria plvica e infertilidad. A diferencia
de la ITU, las ETS son contagiosas
SNTOMAS DE LAS ITU
Hay varios sntomas que se asocian con las ITU. Los sntomas de las infecciones de la vejiga
pueden incluir:

miccin frecuente

ardor o dolor al orinar

la sensacin de tener que orinar aun cuando en realidad no sale orina o slo sale un poquito

dolor en la parte inferior del abdomen

dolor por encima del hueso pbico (en las mujeres)

una sensacin de tener el recto lleno (en los hombres)

orina sanguinolenta o con mal olor

fiebre leve

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una sensacin general de temblor y fatiga

UROCULTIVO
EL urocultivo se utiliza para diagnosticar bacteriuria, la orina constituye un mtodo excelente para
cultivar la mayor parte de microorganismos que infectan el aparato urinario. La combinacin de
piuria con bacteriuria considerable sugiere la presencia de una infeccin urinaria.
Desde el punto de vista microbiolgico, cuando se detecta un crecimiento de 100.000 unidades
formadoras de colonia por mililitro (ufc/ml) en una muestra de orina bien recogida, puede existir
una infeccin urinaria. Cuando existen sntomas urinarios o piuria se considera ITU con valores
muchos menores (hasta 100 ufc/ml). Cuando el recuento de colonias es superior a 10.000 ufc/ml y
hay

ms

de

dos

especies

de

grmenes

indica

contaminacin

de

la

muestra.

Se

considera bacteriuria asintomtica cuando, en ausencia de sntomas, hay menos de 10.000 ufc/ml
de un microorganismo en cultivo puro en dos muestras diferentes.

III. MATERIALES
Muestra de orina

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Tubos con solucin salina fisiolgica estril (9 ml)

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Agar Plate Count

Pipetas de 1 ml estriles

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Agar Eosina Azul de Metileno (EMB)

Placas de Petri estriles

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Asa de Kolle

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Mechero de alcohol

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PROCEDIMIENTO

IV.

TOMA DE MUESTRA EN MUJERES

La muestra debe ser tomada preferentemente en el Laboratorio. Si ello no es
posible, seguir las mismas instrucciones en su casa.
Debe hacerse una antisepsia previa de la zona genital, por lo tanto debe tener a la
mano lo siguiente:

jabn desinfectante

agua hervida o agua estril

gasa estril o un pao acabado de lavar

el recipiente para tomar la muestra.

Proceda primero a lavarse las manos y luego sintese en el inodoro, lo ms

hacia atrs que pueda. Separe los labios genitales con una mano y mantenga
los pliegues separados y proceda a asearse toda la zona genital con el jabn
desinfectante. Enjuague con abundante agua estril y luego seque bien con gasa
estril o con un pao limpio.

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Proceda a recoger la orina, destapando previamente el frasco slo en el

momento de la miccin y sin tocar con los dedos su interior, coloque la tapa
con el lado plano hacia abajo. No toque el interior del recipiente o de la tapa.
Empiece a orinar y recoja en el frasco, slo la muestra del chorro del medio es
decir, no debe recoger ni la primera, ni la ltima parte del chorro de orina.

Tape muy bien el frasco y rotlelo con su nombre.

Trigalo al Laboratorio lo ms pronto posible, en un recipiente con hielo,
cuidando de que no se bote el contenido.

EXAMEN CUANTITATIVO
9 ml de solucin salina fisiolgica
1 ml

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1 ml

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1 ml

1 ml

MUESTRA DE
ORINA
1/100

1/1000

1/10
1/10000
-1

-2

-3

-4

De cada tubo agregar 1 ml de la muestra diluida:

Incontable

872 UFC

103 UFC

4 UFC

1) Se diluye 1:10 colocando 1ml de muestra de orina por medio de la pipeta y lo introducimos al
primer tubo de ensayo que contiene 9 ml. de suero fisiolgico estril

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Pre

paramos
diluciones
para

1:100

partir

de

la

dilucin 1:10

2) Preparamos la dilucin de 1:1000 a partir de la dilucin de 1:100

3)

Preparamos

la

dilucin

1:10000 a partir de
la mezcla que se
realiz en 1:100

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4) Despus de haber diluido cada una, con la pipeta colocamos 1ml en cada placa de Petri
esterilizada.

5) En un recipiente tendremos AGAR PLATE COUNT y lo echamos a la placa a ese cultivo se le

llamara siembra por incorporacin

6)

Despus de
colocarlo en cada
placa lo movemos de

manera delicada formando un ocho y lo dejamos reposar.

7) Terminado eso lo llevamos a la incubadora por 37C por 24 a 48 horas.
-

Para calcular el nmero de colonias elige placas que contengan entre 30 y 300 colonias.
Contadas stas, basta multiplicar su nmero por la dilucin respectiva para obtener la cuenta
total.

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Los resultados del estudio cuantitativo se informan mediante los criterios bacteriolgicos de
Kass:

Un solo cultivo urinario con ms de 100,000 ufc/ml de un nico microorganismo indica una
probabilidad de infeccin del 80%. Si dos cultivos presentan recuentos iguales o superiores
100,000 ufc/ml del mismo germen, la probabilidad de infeccin es de 96%, si son tres
urocultivos con recuentos iguales o mayores de esta cifra la probabilidad de infeccin es del
99%.

Los recuentos inferiores a 10,000 ufc/ml se consideran contaminaciones fisiolgicas, es decir

normales y negativas.

Los recuentos intermedios ms de 10,000 y menor de 100,000 son considerados como

sospechos de infeccin y obliga necesariamente a nuevas determinaciones.

Debe tenerse presente que la infeccin urinaria es monobacteriana por lo que los urocultivos
con dos o ms grmenes deben ser considerados como contaminados y no significativos,
aunque el recuento sea superior a 100,000 ufc/ml.

EXAMEN CUALITATIVO
8) El estudio cualitativo, que conduce a la identificacin del agente, se realiza mediante la siembra
de la muestra homogeneizada, en placas con agar eosina azul de metileno (EMB) o
MacConkey.

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V.

RESULTADOS
-

Elegimos placas en las que las UFC se encuentren en rango de 30-300.

Ejm:

103 UFC/ ml de orina

103UFC x 1000 / ml de orina = 103
000 UFC/ ml de orina.

Segn los criterios de Kass:

< 10 000 UFC/ ml de orina: ORINA NORMAL

10 000 a 99 000 UFC/ ml de orina: ORINA CONTAMINADA O EN PROCESO DE

INFEECION

100 000 UFC/ ml de orina: INFECCIN DEL TRACTO URINARIO (ITU)

Por lo tanto, en nuestra muestra se obtuvieron los siguientes resultados:

i) Contamos 62 ufc
ii)

62 UFC x 1000/ ml de orina = 62 000 ufc/ ml de orina

VI. CONCLUSIONES
En nuestro resultados obtuvimos 62 000 UFC/ ml de orina lo que quiere decir que se
encuentra en el rango de ORINA CONTAMINADA O EN PROCESO DE INFECCION por lo
tanto no se puede sacar una conclusin exacta, solo tendramos que realizar la
experiencia de nuevo asegurndonos de ejecutar correctamente el procedimiento.
De igual forma, la prctica nos sirvi de mucha experiencia para poder determinar
patgenos que causan infeccin de tracto urinario (UTC) mediante la tcnica del
urocultivo.

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CUESTIONARIO
1) Qu tipos de bacterias pueden causar infeccin urinaria? Descrbelos
Entre los microorganismos ms frecuentes son los bacilos Gram negativos como:
Escherichia coli: Provoca el 80% de las infecciones urinarias agudas en general.
Proteus y Klebsiella son las bacterias aisladas con ms frecuencia en personas con litiasis.
Enterobacter, Serratia y Pseudomonas.
Entre las bacterias Gram positivas encontramos:
Staphylococcus saprophyticus
Streptococcus agalactiae
Enterococcus: Indica infeccin mixta o patologa urinaria orgnica.
Staphylococcus aureus: Cuando est presente debe descartarse la contaminacin urinaria
por va hematgena si el paciente no es portador de sonda urinaria.
2) Qu puede suceder cuando una mujer tiene bacteria asintomtica?
-

La Bacteriuria asintomtica es la presencia de un nmero significativo de bacterias en la orina

que ocurre sin ninguno de los sntomas usuales como ardor al orinar o miccin frecuente. Se
presenta en un pequeo nmero de personas sanas y afecta ms a menudo a las mujeres que
a los hombres. La mayora de los pacientes con bacteriuria asintomtica no necesitan
tratamiento, dado que las bacterias no estn causando ningn dao.
Ciertas personas estn en mayor riesgo de infecciones renales si desarrollan esta afeccin. Los
siguientes factores aumentan el riesgo:

Diabetes
Clculos renales infectados
Trasplante de rin
Edad avanzada

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Embarazo: hasta un 40% de las mujeres embarazadas con bacteriuria

asintomtica sin tratamiento desarrollar una infeccin renal

Reflujo vesicoureteral en nios pequeos

Sin tratamiento, la bacteriuria asintomtica puede llevar a infeccin renal en individuos de alto
riesgo. En algunos casos, particularmente en aquellos que han tenido trasplantes de rin, tales
infecciones pueden llevar a una prdida de la funcin renal.
3) Por qu la mujer es ms propensa a la ITU?
La mujer es ms propensa de padecer infecciones urinarias debido a razones fisiolgicas, la
uretra de la mujer es ms corta que la del hombre y est ms cerca de la vagina y el ano, por
lo que es muy comn que las bacterias entren con mayor facilidad hasta la vejiga, sobre todo
despus de realizar el acto sexual.
Otros fatores de riesgo son el embarazo y la menopausia, donde ocurren cambios hormonales
muy fuertes. Estas hormonas protegen las zonas de los genitales, y al cambiar, el sistema
inmunolgico es ms vulnerable, por lo que las bacterias encontrarn ms fcil su
reproduccin y supervivencia.

4) Qu medida se debe seguir para evitar las ITU?

Realizar cambios en algunos hbitos cotidianos puede servir para evitar las infecciones
urinarias.
Tome muchos lquidos para eliminar las bacterias de su cuerpo. Tomar agua es lo mejor. Trate
de beber entre seis y ocho vasos al da.
Orine frecuentemente y en cuanto sienta la necesidad de hacerlo. Las bacterias pueden
crecer cuando la orina permanece en la vejiga urinaria demasiado tiempo.
Orine poco tiempo despus de tener relaciones sexuales. As se eliminarn las bacterias que
puedan haber entrado en la uretra durante el coito.
Despus de ir al bao, lmpiese siempre de adelante hacia atrs. Esto es de particular
importancia despus de una evacuacin intestinal.

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 Use ropa interior de algodn y prendas holgadas. stas permiten la entrada de aire y ayudan
a mantener el rea seca. Evite los pantalones de mezclilla apretados y la ropa interior de
nailon. stos atrapan la humedad y contribuyen al crecimiento de las bacterias.
En las mujeres, los diafragmas y los espermicidas pueden provocar infecciones urinarias
porque estimulan el crecimiento de las bacterias. Si padece infecciones urinarias, piense en la
posibilidad de cambiar de mtodo anticonceptivo. Los condones sin lubricante o los que
contienen espermicida provocan irritacin. Tambin contribuyen a que las bacterias provoquen
sntomas. Piense en la posibilidad de usar condones con lubricante y sin espermicida. O use
un lubricante que no contenga espermicida.

VII. BIBLIOGRAFA

http://kidshealth.org/teen/en_espanol/infecciones/uti_esp.html

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https://es.wikipedia.org/wiki/Infecci%C3%B3n_urinaria

http://www.medicinapreventiva.com.ve/laboratorio/urocultivo.htm

http://www.quimica.es/enciclopedia/Infecci%C3%B3n_urinaria.html

https://wwwqa.nlm.nih.gov/medlineplus/261/spanish/ency/article/000520.htm

http://nedik.com/salud/infecciones-urinarias-por-que-las-mujeres-las-sufren-masque-los-hombres/

http://www.geosalud.com/Urinario/uti.htm

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