Etapas del Ciclo de Krebs

Reaccin 1: Citrato sintasa (De oxalacetato a citrato)

El sitio activo de la enzima, activa el acetil-CoA para hacerlo afn a un centro
carbonoso del oxalacetato. Como consecuencia de la unin entre las dos
molculas, el grupo tioster (CoA) se hidroliza, formando as la molcula de
citrato.
La reaccin es sumamente exoergnica (G'=-31.4 kJ/mol), motivo por el
cual este paso es irreversible. El citrato producido por la enzima, adems, es
capaz de inhibir competitivamente la actividad de la
enzima.
Incluso estando la reaccin muy favorecida (porque
es exoergnica), la citrato sintasa puede ser
perfectamente regulada. Este aspecto tiene una
notable importancia biolgica, puesto que permite una completa regulacin
del ciclo de Krebs completo, convirtiendo a la enzima en una especie de
marcapasos del ciclo.

Reaccin 2: Aconitasa (De citrato a isocitrato)

La aconitasa cataliza la isomerizacin del citrato a isocitrato, por la
formacin de cis-aconitato. La enzima cataliza tambin la reaccin inversa,
pero en el ciclo de Krebs tal reaccin es unidireccional a causa de la ley de
accin de masa: las concentraciones (en condiciones estndar) de citrato
(91%), del intermediario cis-aconitato (3%) y de isocitrato (6%), empujan
decididamente la reaccin hacia la produccin de isocitrato.
En el sitio activo de la enzima est presente un clster hierro-azufre que,
junto a algunos residuos de aminocidos polares, liga el sustrato. En concreto,
la unin al sustrato se asegura por la presencia de un resto de serina, de
arginina, de histidina y de aspartato, que permiten slo la unin
estereospecifica del citrato 1R,2S, rechazando la forma opuesta.

Reaccin 3: Isocitrato deshidrogenasa

(De isocitrato a oxoglutarato)
La isocitrato deshidrogenasa mitocondrial es una enzima dependiente de la
presencia de NAD+ y de Mn2+ o Mg2+. Inicialmente, la enzima cataliza la
oxidacin del isocitrato a oxalsuccinato, lo que genera una molcula de NADH
a partir de NAD+. Sucesivamente, la presencia de un in bivalente, que forma
un complejo con los oxgenos del grupo carboxilo en posicin alfa, aumenta la
electronegatividad de esa regin molecular. Esto genera una reorganizacin

de los electrones en la molcula, con la consiguiente rotura de la unin entre

el carbono en posicin gamma y el grupo carboxilo adyacente. De este modo
se tiene una descarboxilacin, es decir, la salida de una molcula de CO2, que
conduce a la formacin de -cetoglutarato, caracterizado por dos carboxilos
en las extremidades y una cetona en posicin alfa con respecto de uno de los
dos grupos carboxilo.

Reaccin 4: -cetoglutarato
deshidrogenasa (De oxoglutarato a
Succinil-CoA)
Despus de la conversin del isocitrato en -cetoglutarato se produce una
segunda reaccin de descarboxilacin oxidativa, que lleva a la formacin de
succinil CoA. La descarboxilacin oxidativa del -chetoglutarato es muy
parecida a la del piruvato, otro -cetocido.
Ambas reacciones incluyen la descarboxilacin de un -cetocido y la
consiguiente produccin de una unin tioster a alta energa con la coenzima
A. Los complejos que catalizan tales reacciones son parecidos entre ellos.
La -cetoglutarato deshidrogenasa (o, ms correctamente, oxoglutarato
deshidrogenasa), est compuesta de tres enzimas diferentes:
* Subunidad E1: las dos cetoglutarato deshidrogenasas.
* Subunidad E2: la transuccinilasa.
(La subunidad E1 y E2 presentan una gran homologa con las de la piruvato
deshidrogenasa.)
* Subunidad E3: la dihidrolipoamida deshidrogenasa, que es el mismo
polipptido presente en el otro complejo enzimtico.

Reaccin 5: Succinil-CoA sintetasa (De

Succinil-CoA a succinato)
El succinil-CoA es un tioster a alta energa (su G
de hidrlisis est en unos -33.5 kJ mol-1, parecido al
del ATP que es de -30.5 kJ mol-1). La citrato sintasa se sirve de un
intermediario con tal unin a alta energa para llevar a cabo la fusin entre
una molcula con dos tomos de carbono (acetil-CoA) y una con cuatro
(oxalacetato). La enzima succinil-CoA sintetasa se sirve de tal energa para
fosforilar un nuclesido difosfato purinico como el GDP.
La energa procedente del tioster viene convertida en energa ligada a una
unin fosfato. El primer paso de la reaccin genera un nuevo intermediario a
alta energa, conocido como succinil fosfato. Sucesivamente, una histidina
presente en el sitio cataltico remueve el fosfato de la molcula glucdica,
generando el producto succinato y una molcula de fosfohistidina, que dona
velozmente el fosfato a un nuclesido difosfato, recargndolo a trifosfato. Se

trata del nico paso del ciclo de Krebs en el que se produce una fosforilacin
a nivel de sustrato.
El GTP est implicado principalmente en las rutas de transduccin de seales,
pero su papel en un proceso energtico como el ciclo de Krebs es, en cambio,
esencialmente trasladar grupos fosfato hacia el ATP, en una reaccin
catalizada por la enzima nuclesido difosfoquinasa.

Reaccin 6: Succinato deshidrogenasa

(De succinato a fumarato)
La parte final del ciclo consiste en la reorganizacin
de molculas a cuatro tomos de carbono hasta la
regeneracin del oxalacetato. Para que eso sea
posible, el grupo metilo presente en el succinato tiene que convertirse en un
carbonilo. Como ocurre en otras rutas, por ejemplo en la beta oxidacin de
los cidos grasos, tal conversin ocurre mediante tres pasos: una primera
oxidacin, una hidratacin y una segunda oxidacin. Estos tres pasos, adems
de regenerar oxalacetato, permiten la extraccin ulterior de energa
mediante la formacin de FADH2 y NADH.
La primera reaccin de oxidacin es catalizada por el complejo enzimtico de
la succinato deshidrogenasa, la nica enzima del ciclo que tiene como aceptor
de hidrgeno al FAD en vez de al NAD+. El FAD es enlazado de modo covalente
a la enzima por un residuo de histidina. La enzima se vale del FAD ya que la
energa asociada a la reaccin no es suficiente para reducir el NAD+.
El complejo enzimtico tambin es el nico del ciclo que pasa dentro de la
membrana mitocondrial. Tal posicin se debe a la implicacin de la enzima en
la cadena de transporte de los electrones. Los electrones pasados sobre el FAD
se introducen directamente en la cadena gracias a la unin estable entre la
enzima y el cofactor mismo.

Reaccin 7: Fumarasa (De fumarato a Lmalato)

La fumarasa cataliza la adicin en trans de un protn
y un grupo OH- procedentes de una molcula deagua.
La hidratacin del fumarato produce L-malato.

Reaccin 8: Malato deshidrogenasa (De

L-malato a oxalacetato)
La ltima reaccin del ciclo de Krebs consiste en la
oxidacin del malato a oxalacetato. La reaccin,
catalizada por la malato deshidrogenasa, utiliza otra
molcula de NAD+ como aceptor de hidrgeno,
produciendo NADH.
La energa libre de Gibbs asociada con esta ltima reaccin es decididamente
positiva, a diferencia de las otras del ciclo. La actividad de la enzima es
remolcada por el consumo de oxalacetato por parte de la citrato sintasa, y de
NADH por parte de la cadena de transporte de electrones.

As, los eventos que requieren esfuerzos explosivos, como puede ser
una carrera de 100 m lisos, van a depender de la creatina-fosfato y del ATP
producido anaerbicamente por las fibras musculares de contraccin rpida.
Por ello, las dietas de este grupo de atletas van encaminadas a apoyar la
hipertrofia muscular. En momentos de la temporada en los que se realizan
ciclos de sobrecarga, la dieta se hace ms rica en protenas. Una dieta de una
persona normal suele contener un promedio de unos 0,8 g de protena/kg peso.
Los atletas de velocidad pueden llegar a consumir en determinados momentos
de la temporada hasta 2 g/kg peso. La creatina puede igualmente consumirse
en forma de suplemento unos das antes con la idea de tener los depsitos al
mximo. La energa proporcionada por la creatina-fosfato es de utilizacin
instantnea y se termina con rapidez. En una persona normal, la creatina se
agotar a los 2 o 3 segundos de haber comenzado el ejercicio. Los atletas que
llegan a la final olmpica de 100 m lisos, tienen una alta capacidad de
almacenar los suplementos de creatina y realizan la carrera prcticamente
dependiendo de este sustrato metablico. En pruebas anaerbicas de ms
larga duracin, la creatina-fosfato no sirve y la energa producida pasa a
depender de la glucolisis anaerbica, que aunque permite una rpida
disponibilidad de ATP, conlleva como contrapartida la acidificacin de la fibra
muscular por la produccin de cido lctico, lo que implica que el esfuerzo slo
se
puede
mantener
durante
unos
cuantos
minutos.
En el extremo opuesto estn las carreras de tipo aerbico extensivo, como el
maratn o el ciclismo de ruta. En estas pruebas, el atleta debe de depender de
sistemas energticos duraderos, como las grasas. Los cidos grasos
movilizados del tejido adiposo entran en el ciclo de Krebs mitocondrial muscular
en forma de acetil-CoA. En estas condiciones el ciclo de Krebs est
funcionando al mximo y necesita para ello de la ayuda de los hidratos de
carbono provenientes del glucgeno. Cuando las reservas de glucgeno se
agotan, aunque existan suficientes cidos grasos, la velocidad del ciclo de
Krebs se reduce considerablemente y el atleta debe disminuir su velocidad. Es

la conocida "pjara" de los ciclistas y maratonianos. Para ello, una semana

antes de la carrera se llevan a cabo estrategias nutricionales de sobrecarga de
glucgeno, con la idea de llenar los depsitos al mximo. Estas estrategias
consisten en agotar las reservas de glucgeno muscular el 6 y 4 da antes de
la prueba, mediante entrenamientos muy intensos y con dietas pobres en
hidratos de carbono. Tres das antes de la prueba, se procede a consumir una
dieta rica en hidratos de carbono (70% de las Kcal totales, una dieta normal
contiene un 55%) conjuntamente con un reposo total. Ello permite incrementar
las reservas habituales de glucgeno hasta en un 40%. Hoy en da, esta
estrategia se ha refinado por el riesgo de lesin que entraa, realizndose
estrategias
de
afinamiento
nutricional.
Sin embargo, no todo se basa en la energa proporcionada por grasas e
hidratos de carbono. Otros deportes que aparentemente tienen un gesto
aerbico, como puede ser el alpinismo, cuyo gesto es bsicamente caminar, no
dependen enteramente de los depsitos de glucgeno, ni tan siquiera de los de
grasa. En las condiciones hipxicas que se dan en altitudes extremas, la
ausencia de oxgeno impide la oxidacin correcta de las grasas, pasando a
oxidar los hidratos de carbono a travs del metabolismo anaerbico. Sin
embargo, las reservas de glucgeno son limitadas y durante los esfuerzos
prolongados en altitud los alpinistas deben echar mano de la gluconeognesis
(sntesis de glucosa de novo) a partir de aminocidos provenientes de la
degradacin de las protenas musculares. Por ello, la dieta de los montaeros
debe incluir tambin un aporte extra de protenas y un trabajo de hipertrofia
muscular
durante
la
temporada.
En resumen, queda claro que la dieta de un tenista es diferente de la de un
futbolista, y que la dieta de un nadador no se parece en nada a la de un
jugador de baloncesto. La cosa se complica ms en disciplinas deportivas
donde los gestos tcnicos, la posicin en el campo o las circunstancias
ambientales aaden nuevas variables. Por ello, el nutricionista deportivo debe
tener en cuenta estos factores y lograr disear dietas personalizadas
adaptadas a la situacin particular de cada deportista.