Laboratorio de Qumica Orgnica

Grupo: 5381
Prctica 6 CROMATOGRAFA EN COLUMNA.
Integrantes:

Guerrero Hernnadez C. Noemi

Hernndez Plata Brianda

Carolina.
Lozano Estrada Felix Uriel.
Ruiz Miguel Hokabek.

Resultados
Tabla 1. Rf de los pigmentos de espinaca en fase estacionaria a luz
visible con AcET+Hexano como eluyente obtenidos en cromatografa
en columna.

Nmero de
muestra
1
2
3
4
5
6

Distancia de
migracin
del
pigmento.
(cm)
5.9
6
5
4.9
4.9
4.6

Distancia de
migracin
del
eluyente.
(cm)
6.3
6.2
5.4
5.4
6.2
5.6

Rf

0.936
0.967
0.925
0.907
0.790
0.821

Pigmento
probable.
Xantofila
Xantofila
Clorofila b
Clorofila b
Clorofila a
Clorofila a

Figura 2. Fracciones de la
CC.

Figura 1. Columna de extracto de espinaca.

Cuestionario.
1.Discuta la importancia de la polaridad y cmo interviene este factor durante
la
separacin
por
CC.
Como regla general: Lo similar disuelve lo similar aplicado a la cromatografa,
un disolvente de polaridad semejante a la muestra problema servir mucho
mejor en la separacin.
2.Discuta la importancia de completar con CCF el proceso de separacin por
columna.
Una vez realizada la CC obtenemos las fracciones deseadas, sin embargo con
la CCF es posible obtener las distancias de migracin relativas y as llegar a los
pigmentos posibles, adems de encontrar el disolvente ideal.
3.Defina los siguientes trminos:
-Eluyente: Fase mvil de la cromatografa.
-Fase mvil: Eluyente empleado en la cromatografa (disolvente) debe ser
similar a la muestra para poder separarla.
-Fase estacionaria: Soporte de la cromatografa, no debe reaccionar con la
muestra.
-Factor de separacin: Valor de distribucin, medida independiente del
tiempo.
-Resolucin: El grado de separacin o resolucin de dos bandas adyacentes
se define como la distancia entre los picos de las bandas (o centros) dividida
entre el ancho promedio de las bandas.

-Platos tericos en cromatografa: Volumen requerido por una molcula

para establecer un equilibrio entre ella, la matriz y la fase mvil en el sistema

Conclusiones.
*Las muestras 1, 2 y 3 son medianamente polares, ya que su Rf es ms
cercano a 1 que las muestras 4,5 y 6, es decir, son ms similares al eluyente.
*Todos los pigmentos de la espinaca se pueden apreciar a luz visible.
*Los compuestos presentes en la espinaca son mayormente no polares.
*La cromatografa en columna es un mtodo que nos permite separar los
pigmentos deseados, segn su polaridad.
*La muestra 1 es la menos polar, la muestra 6 es la ms polar.
Discusin.
Nuestro pigmento a separar fue el extracto de espinaca que por su oscura
tonalidad verde, por lo que fue muy fcil de identificar sus pigmentos
cloroflicos (figura 1), para esto fue muy importante el uso de su respectivo
eluyente, el cual nos mostr la gama de colores pertenecientes a la espinaca.
Por lo tanto el gel de slice y cido saliclico son de igual polaridad, ya que si
fueran de polaridad distinta, la disolucin no se habra llevado a cabo, porque
la fase mvil habra reaccionado y no se hubieran quedado de forma inerte
para realizar la separacin con el extracto.
Al ser un pigmento verde, los colores dados, fueron de la gama de verdes,
yendo desde el amarillo plido hasta el verde oscuro, por lo tanto, los
pigmentos fotosintticos fueron del tipo clorofila a y b, junto con xantofilas.
Por lo que la cromatografa en columna es muy efectiva, ya que para muestras
ms grandes, que las de cromatografa en capa fina, sirve no slo para conocer
el color de los pigmentos, sino que tambin, para separarlos en recipientes
distintos (Figura 2) y poder analizarlos ms profundamente, lo cual permite
obtener muestras distintas dependiendo del color en el que se ha separado. Sin
embargo para esta prctica fue necesario recurrir en segunda instancia a la
cromatografa en columna, para observar mejor sus respectivas fases de
coloracin de los pigmentos.

Referencias
Mondragn M. Csar (2010) Qumica, Santillana, Mxico.
http://rua.ua.es/dspace/bitstream/10045/8246/7/T2cromagraf.pdf